PRACTICA DE LABORATORIO N 1B: Medicin Microscpica Fabrizio Meneses Gonzlez Cristian Delgado Alsina Departamento de Medicina Veterinaria, Facultad

d de Ciencias Pecuarias, Universidad de Nario, Ciudad Universitaria Torobajo, Pasto, Nario, Colombia Autor para contacto: Fabrizio Meneses Gonzlez, e-mail: jekyllmanson@gmail.com RESUMEN: En ste laboratorio se llevo a cabo el clculo del aumento total de un microscopio, tomando como base el aumento del lente ocular del microscopio y el aumento del lente objetivo del mismo. Tambin se procedi a calcular el dimetro del campo visual de los diferentes lentes objetivos con la frmula previamente consultada y con el uso del papel milimetrado. Lo anterior se realiz con el fin de conocer que lente objetivo tiene mayor rea de campo y cul de ellos tiene mayor aumento, para tener as una seleccin adecuada de lentes para un mejor anlisis de la muestra a revisar. En ste laboratorio tambin se procedi a la revisin de la epidermis de la cebolla con el fin de calcular la longitud de cada clula de cebolla y el rea del campo visual. Vale la pena destacar que en la medicin microscpica la unidad de longitud ms frecuentemente utilizada es la micra. PALABRAS CLAVE: Aumento, rea de campo, campo visual, medicin microscpica, micra, dimetro. INTRODUCCIN: La capacidad del ojo humano es limitada a la hora de estudiar lo pequeo ya que ste no permite ver a simple vista cosas que midan menos de una dcima de milmetro. Hay una inmensa cantidad de clulas y microorganismos que influyen significativamente en la vida del hombre y que, por ello exigen ser estudiadas en favor de un mayor conocimiento y mejora en la calidad de vida. Gracias a los avances y el progreso en el campo de la microscopa, el hombre ha sido capaz de ver organismos y estructuras que a simple vista seran invisibles y, con ello, efectuar descubrimientos decisivos en el campo de la biologa celular. Al realizar el proceso de observacin se necesita un sistema mtrico decimal para indicar el tamao de las clulas y de sus estructuras. Este hace posible realizar conversiones y reducir las cifras de cantidades que sean muy grandes a cifras muy pequeas se toma como referencia la tabla de conversiones de la unidades del sistema mtrico decimal y se estimara el tamao de los objetos microscpicos y el campo visual del mismo se tiene como base los objetivos de menor y mayor tamao. Para hacer observaciones cuantitativas de estas caractersticas es necesario utilizar un aparato

llamado micrmetro. La micra es la unidad de medida ms comnmente utilizada en la microscopa y equivale a una milsima de milmetro. Los trminos aumento y resolucin deben ser bien conocidos por todo usuario del microscopio. El mecanismo mediante el cual se produce este fenmeno ha sido estudiado por siglos y se explica mediante leyes de la fsica. Considerar nicamente el aumento no es suficiente para sacar el mejor partido del microscopio, pues otro factor, la resolucin, determina lo que se ver. ste laboratorio tiene como principal objetivo estimar las dimensiones del microscopio de menor y mayor aumento; conocer las unidades de medida en la microscopa y realizar los diferentes clculos y conversiones con el fin de conocer las dimensiones de las muestras a observar; establecer la diferencia entre aumento y poder de resolucin y saber el significado de cada una de estas. Lo anterior har imprescindible discutir con objetividad y el mayor respaldo bibliogrfico posible, las observaciones hechas, y resultados logrados.

MATERIALES Y METODOS: En el laboratorio se procedi al clculo del aumento total para cada lente objetivo, esto se realiza mediante la siguiente formula:

Conociendo el valor del lente ocular y el valor del lente objetivo fue fcil determinar el aumento total de cada lente. Se realiz el clculo de dimetro del campo visual terico para cada lente mediante la siguiente formula.

sta frmula se utiliz para los lente objetivos de 3,2x y 4x. El clculo del dimetro se realiz mediante el recorte de un pequeo pedazo de papel milimetrado (1cm) el cual fue sometido a un montaje hmedo y posteriormente colocado sobre la platina del microscopio para su observacin; procurando que la lnea central del cuadro que se observa coincida con el dimetro del objetivo; se estim el nmero de milmetros observados. ste procedimiento se realiz con los lentes objetivos de 4x y 10x. Para el clculo del dimetro del campo visual del objetivo de 40x se utiliz la siguiente frmula:

Donde:

= Dimetro del campo visual en 10x (dato en micras) = Objetivo de aumento de bajo poder = Objetivo de aumento de alto poder = Dimetro del campo visual del objetivo de alto poder Con una cuchilla y unas pinzas, se aisl una parte de la epidermis de la cebolla correspondiente a la zona cncava de la tercera escama de la cebolla la cual se coloc en el porta objetos y se le aadi una diminuta cantidad de Lugol, el cual se utiliza para observar sta estructura ya que es un fijador y a la vez un colorante de tejidos vegetales; se cubri con el portaobjetos y se pas a la observacin en el microscopio para el clculo del tamao promedio de las clulas de cebolla. ste anlisis se realiz con los lentes objetivos de 10x y 40x. RESULTADOS Y DISCUSIONES: Al hacer el clculo del aumento total de cada uno de los objetivos, obtuvimos los siguientes resultados.
OBJETIVO De exploracin De bajo poder De alto poder De inmersin LENTE OCUAR 10x 10x 10x LENTE OBJETIVO 3.2x 10x 40x AUMENTO TOTAL 32x 100x 400x

10x

100x

1000x

El poder de aumento se refiere a la capacidad de los lentes para aumentar el tamao de los objetos que se observa. Cada sistema de lentes aumenta el tamao del objeto el mismo nmero de veces en cada dimensin que el nmero grabado en la lente. Cada sistema de lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, as que 10x significa que la imagen est aumentada 10 veces. Mediante la frmula para el clculo de dimetro se logr obtener los siguientes resultados: Para el objetivo de exploracin se obtuvo un dimetro terico de 5mm 500 Para el objetivo de bajo poder se obtuvo un dimetro terico de 1,6mm 1600 Al realizar el montaje con el papel milimetrado en 10x y calcular el dimetro del campo visual se logr estimar un valor de 1.8mm de longitud. Longitud que no coincidi con el valor terico (1.6mm) debido a que es una medida indirecta; una aproximacin calculada al ojo humano con ayuda de un sistema de medida no muy preciso como lo es el micrmetro. Mediante la frmula para calcular el dimetro del campo visual del objetivo de alto poder, se logr determinar que el aumento de los lentes objetivos es inversamente proporcional; tal como se demuestra en los clculos que se plantean en el numeral 3 de la hoja de reporte.

Tras la observacin y el anlisis de la clula de cebolla se logr calcular el tamao promedio aproximado de una de estas clulas, como se indica en el numeral 6 de la hoja de reporte. Calculando el rea del campo visual del objetivo de 10x y 40x (numeral 7 de la hoja de reporte) y conociendo el rea de cada clula se logro el clculo de cuantas clulas de cebolla se logran observar en cada lente objetivo (numeral 8 de la hoja de reporte). En el corte de cebolla con el objetivo de 10x se logro diferenciar las clulas vegetales en forma de celdas en cada una de ellas, se lograron notar de forma sencilla el ncleo, la pared celular, la membrana nuclear y el citoplasma celular. (Fig 1) Con el aumento de 40x las diferencias antes descritas se hicieron ms notables, pero an no se lograban diferenciar las vacuolas, la membrana citoplasmtica o los nuclolos. (Fig 2) Como grupo pudimos concluir que, respecto a los resultados obtenidos, la mayora de las observaciones y detalles concordaron con el respaldo escrito en recursos bibliogrficos de ciencia biolgica y celular. Las ideas poco claras acerca de algunas observaciones, fueron finalmente comprendidas sin mayores dilemas. Se logr concluir que el poder de resolucin permite observar estructuras ms definidas y con mayor nitidez y que el aumento slo logra amplificar la imagen pero no se logran apreciar detalles necesarios. Las mediciones microscpicas permiten cuantificar de alguna manera las mnimas dimensiones que tienen los microorganismos y los cuerpos inobservables. Tambin se concluye que el lente objetivo es directamente proporcional al aumento total del microscopio. Se puede saber cuntas clulas caben en determinado objetivo partiendo de conocer el dimetro del campo visual. Los poderes del microscopio permiten separar ntidamente las imgenes de dos puntos prximos y obtener una excelente nitidez en sus contornos; son indispensables para estudiar los objetos microscpicos. Como grupo pudimos concluir que, respecto a los resultados obtenidos, la mayora de las observaciones y detalles concordaron con el respaldo escrito en recursos bibliogrficos de teora microscpica y ciencia biolgica y celular. Las ideas poco claras acerca de algunas observaciones, fueron finalmente comprendidas sin mayores dilemas. Por lo anterior, como grupo, hemos logrado lo propuesto en los objetivos principales, y despejado nuestras principales interrogantes planteadas inicialmente. BIBLIOGRAFA: Teora de la microscopa 2000 Leica Microsystems Inc., Buffalo NY USA ISO 9001 Printed in USA 9/00 EDU-1024S Rev. A BERNIS MATEU, J.: Atlas de la microscopa, Ediciones Jover, S.A., Barcelona, 1978.

 Hernandez, M. manual de laboratorio, citologa e histologa. UAAAN Mxico, Editorial Chapingo,1990. Moellring,F.K., la microscopia desde el principio (folleto tecnico),Carl Zeis Obertkochen/ wurtt, 1971.