Protocolo de extraccin de RNA de O. antrctica mediante el mtodo de Chomczynsk.

1. Pulverizar el tejido vegetal en mortero con la ayuda de nitrgeno lquido. 2. Homogenizar el tejido en 1 mi de Chomczynski (fenol y tiocianato de guanidina). Incubar las muestras homogeneizadas por 5 minutos a TA. 3. Remover el material nsoluble del homogenizado por centrifugacin a 12000 g por 10 minutos a 4 C, transferir la fase acuosa a un tubo eppendorf nuevo. 4. Agregar 200 \\\e cloroformo. Tapar bien y agitar vigorosamente por 15 segundos. Incubar durante 3 minutos a 4 C y centrifugar a 12000 g por 15 minutos a 4 C. 5. Transferir la fase acuosa a un tubo nuevo, precipitar el RNA con 500 jJ de sopropanol, incubar las muestras a 4 C por 10 minutos; centrifugar a 12000 g por 10 minutos a 4 C. 6. Remover el sobrenadante, lavar el pellet con 1 m! de etanol 75% (DEPC) y centrifugar a 7500 g por 5 minutos a 4 C. 7. Secar el pellet a T.A. y disolver el RNA en 50 pJ agua con DEPC.

DEPC: Diethylpyrocarbonato