Kléver Quishpe

Histotecnología

Universidad Central del Ecuador

Facultad de Ciencias Médicas

Escuela de Tecnología Médica

Área: Laboratorio Clínico

Cátedra: Histotecnología

Ciclo : Noviembre –Diciembre

Nombre: Quishpe Quishpe Kléver Rolando

Fecha: 24 de noviembre de 2011

Tema: Montaje de Placas

Laboratorio Clínico

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Kléver Quishpe Montaje de Placas Introduccion Histotecnología El cubreobjetos es casi lo que más se necesita en una muestra para microscopio para proteger la delicada sección y suministrar un camino óptico claro.17". alcohol.generalmente 0.17 mm.13-0. 1.515).16-0. diluir en el solvente apropiado (xileno.17 mm o #1½. Laboratorio Clínico 2 . Los cubreobjetos vienen en una serie de grosores designados como los siguientes: Designación Grosor #1 0.25 mm #1½ #2 La mayoría de los objetivos de los microscopios están corregidos ópticamente para el cubreobjetos para un grosor único. si el medio de montaje está demasiado espeso.de modo que hay que asegurarse esto. Procedimiento Mantener los portaobjetos en xileno mientras le toca el turno de ser procesado. la técnica óptica de DIC no trabajará. Los cubreobjetos de plástico pueden ser comprados y usados. Elegir un tamaño que solo cubra la sección.17 mm 0. Hay un gran número de adhesivos de montaje comerciales incluyendo Permount. teniendo un índice de refracción próximo al de este cristal (1. agua).19 mm 0. El cemento debe estar bastante líquido pero no acuoso. Bálsamo de Canadá. alcohol. o xileno. 2.Añadir 1-3 gotas de medio de montaje. El grosor del cubreobjetos están estampados sobre los objetivos bien como "17" o "0. Merkoglas. Cuando se hace en microscopios extremadamente críticos en tres dimensiones (deconvolucion o microscopio confocal) el grosor del cubreobjetos debería ser medido con un micrómetro y estandarizado excatamente a 0.-Quitar el portaobjetos y con un Kimwipe limpiar suavemente alrededor de los bordes para quitar el exceso de xileno. etc. 20x30 mm. Debes guardar los portaobjetos en contenedores con muecas para un manejo fácil.17-0. 20x40 mm. No permitir que los discos se sequen antes de añadir el medio de montaje o los cortes se dañarán irreversiblemente. sin embargo debido a la refringencia del plástico.. Los tamaños estándar son 22x22 mm. y otros. El cubreobjetos está pegado alobjeto con un cemento soluble en agua.

Parar un momento para permitir que se quiten las burbujas de aire.. Puede volverse amarillo después de décadas de almacenamiento. Medios de montaje para cubreobjetos La siguiente tabla es una lista corta de medios de montaje habituales. hasta cierto punto. Las burbujas son extremadamente difíciles de eliminar. T DPX NA X. Muestra alguna retracción. Buen medio para propósitos generales. T DEPEX EMS X.Una vez el adhesivo ha formado una capa continua. T Merkoglass (EM Glass) Merck. Medio de montaje Compañía* Solubilidad** Comentario Bálsamo de Canadá Fisher. EMS. El objetivo es permitir al adhesivo que fluya sobre los cortes sin formar burbujas. 5. Preferido para portaobjetos teñidos in situ co NBT. Tener en cuenta que. Consiste en dibutilfeniltalato (10 ml) + poliestireno (25 g) + xileno (70 ml).Continuar bajando el cubreobjetos hasta que todas las gotas de adhesivo toquen el cubreobjetos. X. Sigma Fisher. T Laboratorio Clínico 3 . y (si es posible) sus usos apropiados. entonces detenerse otra vez para permitir que las gotas se mezclen en una. Usado para aplicaciones en fluorescencia.Poner el portaobjetos en una placa calefactora a 42ºC o en un horno y dejar que se seque como mucho overnight... EMS X. Endurece en una hora a temperatura ambiente. la elección del medio de montaje es una preferencia personal basada en historia y corte. y otros Históricamente importante pero raramente usado debido a su coste y mejor reemplazo. T Permout X. Reemplazo para el Bálsamo de Canadá. Buen medio para propósitos generales. Endurece y amarillea con los años. dejar que el cubreobjetos se acomode en su lugar en la parte superior del portaobjetos.Cuidadosamente poner el borde del cubreobjetos (margen corto) sobre el portaobjetos y con un puntero o un forceps bajar lentamente hasta que toque la parte superior del adhesivo.. 6. 4. Usar una toalla de papel para quitar el exceso de pegamento sobre el portaobjetos en la bandeja calefactora.Kléver Quishpe Histotecnología 3. sus sinónimos.

704. Medio de montaje para propósitos generales. Cytoseal 60 VWR. Cubreobjetos líquido. Buen medio de montaje para propósitos generales. la tinción o la matriz no toleran el xileno. Se presenta en dos viscosidades. T Meltmount (Gargille) EMS X.Kléver Quishpe Histotecnología Buen medio de montaje para propósitos generales. "60" baja y "280" alta. disponible en varios indices de refracción desde 1. Euparal CBS Agua Laboratorio Clínico 4 . T Coverbond (Piccolyte") S/P X. T Buen medio de montaje para propósitos generales. Medio de montaje para propósitos generales. T X. PolyGlass P X. T Cytoseal 280 X. Bueno cuando el tejido. Se presenta en dos viscosidades. T Poly-Mount Pro-Tex P S/P X. "Piccolyte" es el nombre genérico usado para -pinene.593 hasta 1. Usado para inmunolocalización. Puede ser eliminado mediante calentamiento del portaobjetos. por ejemplo material fresco o cortes en plástico. "60" baja y "280" alta. T BioMount EMS X. Puede reemplazar al cubreobjetos. Eukitt EMS X. T Buen medio de montaje para propósitos generales. Es propietaria de la fórmula original de Gilson. S/P Accu-Mount 60 S/P Accu-Mount 280 X. Puede sustituir al cubreobjetos. T Medio de montaje para fines generales. T Bueno para portaobjetos teñidos con inmunogold/silver.

No es para ser usado con cubreobjetos. Agua Fisher Usado en inmunolocalización fluorescente o en criosección en fresco. la tinción o la matriz no toleran el xileno. especialmente bueno para detección de ficobiliproteínas ya que no contiene glicerina. añadir el cubreobjetos. la tinción o la matriz no toleran el xileno. Cristal/Mount (Biomeda) EMS.Kléver Quishpe Histotecnología Bueno cuando el tejido. por ejemplo material fresco o cortes en plástico. Una lámpara portátil de UV de longitud de onda larga (UVL21) funciona bien. Usado para inmunolocalización. Gel/Mount (Biomeda) EMS. Usado para inmunolocalización. por ejemplo material fresco o cortes en plástico. Usar con un cubreobjetos y rodear con laca de uñas. Plastic UV Mount P Medio de montaje EMS UV Agua Bueno cuando el tejido. Diseñado para inmunolocalización HRP y AP. Laboratorio Clínico 5 . Endurece bajo luz UV. aunque se le puede añadir un cubreobjetos usando Permount espués de haber solidificado el Cristal/Mount. y endurecer bajo luz UV. Poner una gota o dos de Alcohol. Tiene el mismo índice de refracción que el metacrilato JB-4 Fluoromount-G EMS Agua Usado en inmunolocalización fluorescente o en criosección en fresco. Agua Fisher Utilizado para inmunolocalización fluorescente o criosección en fresco. agua medio sobre los cortes.

esta es la fórmula original de Farrants Glicerol----90% TBS-------10% Glicerol/TBS NA Agua Azida----0. Aqua-poly/Mount P Agua Agua destilada---------100 ml Glicerina----------------100 g Gelatina------------------17 g Fenol----------------------1 g Gelatina de glicerina NA Agua Mantener a 4ºC y ablandar sólo pequeñas porciones. Laboratorio Clínico 6 . El cubreobjetos puede ser eliminado sumergiendo el portaobjetos en agua caliente. aplicar a material fresco sobre portaobjetos.02% Medio de Goma Arábiga NA Agua Mantener a 4ºC. Usado para montar secciones acuosas. Agua destilada----40% Glicerol-----------20% Goma Arábiga----40% Azida-----------0. Usada para montar cortes tratados para inmunocitoquímica. Bueno para hacer preparaciones semipermanentes de material fresco. Calentar a 37ºC. Los tejidos deben ser transferidos directamente a Goma Arábiga.02% Mantener a 4ºC.Kléver Quishpe Histotecnología Usado para inmunolocalización fluorescente o criosección en fresco. Excepto por la azida.

superior.Debemos tener conocimiento de la manera adecuada de hacer un montaje.shtml .com/2007/espanol/cubreobjetos. www.mx/.es/biocel/wbc/tecnicas/page.. http://www. http://edafologia.ub. html. Usada para sellar los bordes de cubreobjetos para preparaciones en fresco.wikipedia. Usado especialmente para preparaciones en inmunolocalización.rincondelvago.. .html . www.htm 10. www.29k 7.htm Laboratorio Clínico 7 .htm .com/trabajos11/intecnic/intecnic.mx/patologIa_pract/practica_6.com/textil_coloracion-hematoxilina-eosina.qfb. Colocar la cantidad necesaria del medio de montaje.org/wiki/Abies_balsamea 11.27k 2. Bibliografia 1.elergonomista. 3.mx/. Conocer que materiales necesitamos.htm .Kléver Quishpe Histotecnología Mezclar 1:1.ujat.. 4.umich.sugelabor. www.htm 9. es.46k 6.es/micgraf/preparac. Usada para sellar bordes de cubreobjetos para "spodograms" y otros especímenes relativamente secos. 2../biologia/area_sustantiva_profesional/laboratoriodehistologiavegetal 4.monografias.ugr.28k – 8./biologia/area_sustantiva_profesional/laboratoriodehistologiavegetal 3. www. www.ujat. Parafina/Permount NA NA Vaspar NA NA Fingernail polish NA NA RECOMENDACIONES 1.htm 5. Evitar la formación de burbujas. Usado para sellar los márgenes de cubreobjetos para preparaciones en fresco.marienfeld.com/TecnologiaPermount. Mezclar vaselina y parafina fundida 1:1. http://dieumsnh.com/biologia/11se02.

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