Kléver Quishpe

Histotecnología

Universidad Central del Ecuador

Facultad de Ciencias Médicas

Escuela de Tecnología Médica

Área: Laboratorio Clínico

Cátedra: Histotecnología

Ciclo : Noviembre –Diciembre

Nombre: Quishpe Quishpe Kléver Rolando

Fecha: 24 de noviembre de 2011

Tema: Montaje de Placas

Laboratorio Clínico

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Cuando se hace en microscopios extremadamente críticos en tres dimensiones (deconvolucion o microscopio confocal) el grosor del cubreobjetos debería ser medido con un micrómetro y estandarizado excatamente a 0. El cubreobjetos está pegado alobjeto con un cemento soluble en agua.13-0.17 mm. Merkoglas. sin embargo debido a la refringencia del plástico.17". No permitir que los discos se sequen antes de añadir el medio de montaje o los cortes se dañarán irreversiblemente.19 mm 0. Procedimiento Mantener los portaobjetos en xileno mientras le toca el turno de ser procesado. etc. teniendo un índice de refracción próximo al de este cristal (1. o xileno.16-0. El grosor del cubreobjetos están estampados sobre los objetivos bien como "17" o "0.17 mm o #1½. 20x40 mm. 20x30 mm. Los cubreobjetos vienen en una serie de grosores designados como los siguientes: Designación Grosor #1 0. Hay un gran número de adhesivos de montaje comerciales incluyendo Permount. si el medio de montaje está demasiado espeso. Bálsamo de Canadá.-Quitar el portaobjetos y con un Kimwipe limpiar suavemente alrededor de los bordes para quitar el exceso de xileno.Añadir 1-3 gotas de medio de montaje.17-0.. alcohol. Los tamaños estándar son 22x22 mm. diluir en el solvente apropiado (xileno.generalmente 0. agua).515).de modo que hay que asegurarse esto.17 mm 0. la técnica óptica de DIC no trabajará. Debes guardar los portaobjetos en contenedores con muecas para un manejo fácil. Los cubreobjetos de plástico pueden ser comprados y usados. Elegir un tamaño que solo cubra la sección. 1. El cemento debe estar bastante líquido pero no acuoso.25 mm #1½ #2 La mayoría de los objetivos de los microscopios están corregidos ópticamente para el cubreobjetos para un grosor único. Laboratorio Clínico 2 . 2. y otros. alcohol.Kléver Quishpe Montaje de Placas Introduccion Histotecnología El cubreobjetos es casi lo que más se necesita en una muestra para microscopio para proteger la delicada sección y suministrar un camino óptico claro.

Consiste en dibutilfeniltalato (10 ml) + poliestireno (25 g) + xileno (70 ml). 6. El objetivo es permitir al adhesivo que fluya sobre los cortes sin formar burbujas. y (si es posible) sus usos apropiados. Puede volverse amarillo después de décadas de almacenamiento. Usado para aplicaciones en fluorescencia. 4. Endurece y amarillea con los años. y otros Históricamente importante pero raramente usado debido a su coste y mejor reemplazo. Reemplazo para el Bálsamo de Canadá. Las burbujas son extremadamente difíciles de eliminar. T DPX NA X. Medios de montaje para cubreobjetos La siguiente tabla es una lista corta de medios de montaje habituales.Poner el portaobjetos en una placa calefactora a 42ºC o en un horno y dejar que se seque como mucho overnight. entonces detenerse otra vez para permitir que las gotas se mezclen en una. Usar una toalla de papel para quitar el exceso de pegamento sobre el portaobjetos en la bandeja calefactora. Sigma Fisher. sus sinónimos.Cuidadosamente poner el borde del cubreobjetos (margen corto) sobre el portaobjetos y con un puntero o un forceps bajar lentamente hasta que toque la parte superior del adhesivo. Buen medio para propósitos generales. T Laboratorio Clínico 3 . T Permout X. Tener en cuenta que.Continuar bajando el cubreobjetos hasta que todas las gotas de adhesivo toquen el cubreobjetos. T DEPEX EMS X.Kléver Quishpe Histotecnología 3. 5.. hasta cierto punto. Preferido para portaobjetos teñidos in situ co NBT. EMS X. la elección del medio de montaje es una preferencia personal basada en historia y corte. Buen medio para propósitos generales.. X.. dejar que el cubreobjetos se acomode en su lugar en la parte superior del portaobjetos. EMS. T Merkoglass (EM Glass) Merck. Muestra alguna retracción. Medio de montaje Compañía* Solubilidad** Comentario Bálsamo de Canadá Fisher.Una vez el adhesivo ha formado una capa continua. Parar un momento para permitir que se quiten las burbujas de aire. Endurece en una hora a temperatura ambiente..

Usado para inmunolocalización. Se presenta en dos viscosidades. PolyGlass P X. por ejemplo material fresco o cortes en plástico.593 hasta 1. la tinción o la matriz no toleran el xileno. disponible en varios indices de refracción desde 1. Euparal CBS Agua Laboratorio Clínico 4 . T Poly-Mount Pro-Tex P S/P X. T Meltmount (Gargille) EMS X.Kléver Quishpe Histotecnología Buen medio de montaje para propósitos generales.704. Cubreobjetos líquido. T Coverbond (Piccolyte") S/P X. T X. Puede reemplazar al cubreobjetos. Puede sustituir al cubreobjetos. "60" baja y "280" alta. T Cytoseal 280 X. T Buen medio de montaje para propósitos generales. T Bueno para portaobjetos teñidos con inmunogold/silver. Cytoseal 60 VWR. T Buen medio de montaje para propósitos generales. Puede ser eliminado mediante calentamiento del portaobjetos. T BioMount EMS X. "60" baja y "280" alta. Es propietaria de la fórmula original de Gilson. Medio de montaje para propósitos generales. Eukitt EMS X. S/P Accu-Mount 60 S/P Accu-Mount 280 X. "Piccolyte" es el nombre genérico usado para -pinene. Buen medio de montaje para propósitos generales. Bueno cuando el tejido. Se presenta en dos viscosidades. Medio de montaje para propósitos generales. T Medio de montaje para fines generales.

Gel/Mount (Biomeda) EMS. la tinción o la matriz no toleran el xileno. Usado para inmunolocalización.Kléver Quishpe Histotecnología Bueno cuando el tejido. Poner una gota o dos de Alcohol. Usado para inmunolocalización. Agua Fisher Utilizado para inmunolocalización fluorescente o criosección en fresco. No es para ser usado con cubreobjetos. la tinción o la matriz no toleran el xileno. y endurecer bajo luz UV. agua medio sobre los cortes. Laboratorio Clínico 5 . Agua Fisher Usado en inmunolocalización fluorescente o en criosección en fresco. Usar con un cubreobjetos y rodear con laca de uñas. aunque se le puede añadir un cubreobjetos usando Permount espués de haber solidificado el Cristal/Mount. Diseñado para inmunolocalización HRP y AP. especialmente bueno para detección de ficobiliproteínas ya que no contiene glicerina. por ejemplo material fresco o cortes en plástico. por ejemplo material fresco o cortes en plástico. Plastic UV Mount P Medio de montaje EMS UV Agua Bueno cuando el tejido. Cristal/Mount (Biomeda) EMS. Endurece bajo luz UV. Tiene el mismo índice de refracción que el metacrilato JB-4 Fluoromount-G EMS Agua Usado en inmunolocalización fluorescente o en criosección en fresco. añadir el cubreobjetos. Una lámpara portátil de UV de longitud de onda larga (UVL21) funciona bien.

Aqua-poly/Mount P Agua Agua destilada---------100 ml Glicerina----------------100 g Gelatina------------------17 g Fenol----------------------1 g Gelatina de glicerina NA Agua Mantener a 4ºC y ablandar sólo pequeñas porciones. Agua destilada----40% Glicerol-----------20% Goma Arábiga----40% Azida-----------0. Laboratorio Clínico 6 .02% Mantener a 4ºC.Kléver Quishpe Histotecnología Usado para inmunolocalización fluorescente o criosección en fresco. Excepto por la azida.02% Medio de Goma Arábiga NA Agua Mantener a 4ºC. aplicar a material fresco sobre portaobjetos. Usado para montar secciones acuosas. Los tejidos deben ser transferidos directamente a Goma Arábiga. esta es la fórmula original de Farrants Glicerol----90% TBS-------10% Glicerol/TBS NA Agua Azida----0. Bueno para hacer preparaciones semipermanentes de material fresco. El cubreobjetos puede ser eliminado sumergiendo el portaobjetos en agua caliente. Usada para montar cortes tratados para inmunocitoquímica. Calentar a 37ºC.

Conocer que materiales necesitamos.monografias.org/wiki/Abies_balsamea 11.umich. http://edafologia.Debemos tener conocimiento de la manera adecuada de hacer un montaje..qfb.ugr.com/TecnologiaPermount.htm 5. 4. www.sugelabor.html .mx/patologIa_pract/practica_6. es. html.mx/. Usada para sellar bordes de cubreobjetos para "spodograms" y otros especímenes relativamente secos.27k 2..marienfeld. Bibliografia 1.elergonomista. 2. 3.46k 6./biologia/area_sustantiva_profesional/laboratoriodehistologiavegetal 4.28k – 8. www.rincondelvago.ub.com/biologia/11se02.es/micgraf/preparac. http://www. Parafina/Permount NA NA Vaspar NA NA Fingernail polish NA NA RECOMENDACIONES 1.htm Laboratorio Clínico 7 .Kléver Quishpe Histotecnología Mezclar 1:1. Usado para sellar los márgenes de cubreobjetos para preparaciones en fresco. http://dieumsnh.com/2007/espanol/cubreobjetos.. www. www. www. Usado especialmente para preparaciones en inmunolocalización. Usada para sellar los bordes de cubreobjetos para preparaciones en fresco.htm 9.29k 7./biologia/area_sustantiva_profesional/laboratoriodehistologiavegetal 3.wikipedia.htm 10.ujat.mx/.shtml .com/textil_coloracion-hematoxilina-eosina. Mezclar vaselina y parafina fundida 1:1.. Colocar la cantidad necesaria del medio de montaje.superior. Evitar la formación de burbujas.ujat.htm . www.com/trabajos11/intecnic/intecnic. .htm .es/biocel/wbc/tecnicas/page.