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Herpesvirus Canino

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06/07/2015

Formacion practica

Lo que debe saber sobre el herpesvirus canine
Dr. Alain Fontbonne
Diplomado por la Escuela Nacional de Veterinaria en Nantes en 1985. El Dr.Alain Fontbonne prosigue su forrnacion mediante un internado en medicina interna de los carnivoros domesticos en la Escuela Nacional de Veterinaria de Alfort (Paris). En 1993, le nombraron Maestro de Conferencias en la Escuela Nacional Veterinaria de Lyon en la que desarrollo una unidad de desarrollo clinico en reproduccion y crianza de carnivoros domesticos, En 2000, regreso ala Escuela Nacional de Alfort, en la que desarrolla una posicion de jefe del servicio de ginecologia y obstetricia animal, y responsable del CERCA (Centro de Estudios en Reproduccion de Carnivoros), estructura especializada en la asistencia ala reproduccion de los animales de compafiia. El Dr. Alain Fontbonne es diplomado por el Colegio Europeo de Reproduccion Animal y anterior presidente de la Sociedad Veterinaria Europea para la Reproduccion de los Pequetios Animales (EVSSAR). Es autor de varias publicaciones dirigidas a veterinarios y de un informe oficial sobre "la crianza de los perros y gatos en Francia", entregado al Ministerio frances de agricultura en el2000. lntreducclen

El herpesvirus canino (HVC) es una enfermedad infecciosa y contagiosa producida por un alphaherpesvirus que conlleva problemas de reproduccion, principalmente perdidas de cachorros antes de las 3 semanas, pero tambien infertilidad, abortos y/o la muerte. Este virus tambien puede estar implicado en el sindrome de la "tos de las perreras". El herpesvirus canino se ha detectado en casi todos los paises del mundo y representa por ello una

preocupacion

real para los veterinarios y criadores.

La principal caracteristica del herpesvirus es su capacidad para causar una infeccion latente, seguida de una posible reactivacion en cualquier momento, aprovechando una si tuaci o n de estres. Durante estos ultimos afios, se han realizado numerosos trabajos sobre esta enfermedad. Este articulo pretende elaborar una sintesis practica.

Evolucion hlsterlca
El primer caso de HVC fue descrito en Estados Unidos en 1964 por Carmichael, que en un primer momenta penso en una afeccion producida por micoplasmas en una cam ada de cachorros recien nacidos. Ese mismo afio, el virus fue aislado por otros investigadores. En 1967 en Francia, de Ratuld y Werner aislaron el mismo virus en un perro Beagle importado de Inglaterra y aquejado de rinitis y de bronconeumonia; otro investigador 10 aisle en un perro aquejado de traqueobronquitis. Por 10 que desde hace afios los investigadores han evidenciado asi la doble afinidad del virus con los aparatos genital y respiratorio. Desde los afios 90, esta patologia se conoce cada vez mejor y se ha identificado en la mayoria de los paises del mundo.

Editorial: El herpesvirus canino junto con el parvovirus son las enfermedades mas importantes y problematicas en la crianza canina. Sin embargo, el herpesvirus canino es una enfermedad latente y por ello su diagnostico y prevencion es mas dificil. EI Dr. Fontbonne es el maximo especialista europeo de esta enfermedad que puede llegar a afectar a1 75% de los perros.

Formacion practica

Etiologia

Patogenia

El herpesvirus es especifico de los canidos, el perro principalmente. Pertenece a la subfamilia de los alphaherpesvirinae, genero Varicellovirus. Se han aislado 16 cepas de herpesvirus en el mundo, pero nunca ha sido posible identificar varios herpesvirus caninos diferentes (excepto en un caso sospechoso durante el aborto de una perra: Poste 1971). Parece que este virus es monotipico, como indica la comparacion antigenic a de las diferentes cepas aisladas [6]. El HVC se denomina en ocasiones HVC-l, pero en realidad el HVC-2 nunca ha sido identificado. La cepa de referencia se denomina cepa F 205. Este virus esta emparentado con los herpesvirus del gato (FHV-l) y de la foca, pero no existe infeccion cruzada. El HVC no presenta ningun peligro para el hombre. El HVC es poco resistente en el medio exterior, por sus revestimientos glicoproteicos y lipidicos que 10 vuelven muy sensible a los agentes fisicos (calor, V.V.) y quimicos (desinfectantes). Es especialmente sensible a los disolventes de los lipidos. Ademas, este virus solo se multiplica en limites de temperatura bien definidos. Su capacidad infecciosa se reduce de manera importante a temperatura elevada: la incubacion del HVC a 37°C durante 5 horas reduce 10.000 veces su poder infeccioso. (Foto-L)

Los modos de transrnision del HVC son diversos: - Por via transplacentaria (el feto puede infectarse en el utero, principalmente durante una primoinfeccion de la perra gestante). - Por via aerea, - Por via oronasal. Las materias contaminantes son: - Los excrementos de los cachorros enfermos. - Las secreciones oronasales 0 faringeas (que son virulentas hasta 15 was tras la infeccion), - Las secreciones genitales fisiologicas (esperrna) y patologicas (perdidas vulvares durante el periodo de celo, posteriores a un aborto 0 un parto), - Los fetos abortados 0 recubrimientos fetales durante el aborto 0 el parto en una madre infectada. De este modo, un cachorro recien nacido puede infectarse desde su nacimiento durante el paso por la cavidad pelvica, si su madre acaba de ser infectada (prirnoinfeccion) 0 si el virus, que se encontraba en estado latente en su organismo, se ha reactivado y ha sido excretado en la cavidad vaginal en el momenta del nacimiento. El apareamiento es un acto de riesgo si uno de los miembros de la pareja esta infectado y esta en fase de excrecion viral, 10 que suele estar acornpafiado de lesiones genitales. Por ello,la infeccion por HVC se incluye en la lista de enfermedades de transmision sexual en el perro.

como los nodudos linfaticos, el bazo 0 los rifiones. El virus se localiza luego en estos organos asi como en el sistema nervioso central. El animal sufre una seroconversion y se convierte en seropositivo. Luego, si las defensas inmunitarias del perro infectado son suficientes para controlar la infeccion, el virus se integra en el ADN celular. Entra en "latencia" en diferentes organos: sistema nervioso (ganglios lumbosacros y trigernino sobre todo), amigdalas, nudo submaxilar e higado. Por 10 que puede reactivarse en cualquier momenta aprovechando una situacion de "estres" 0 una inmunodepresion (proestro, parto, infecciones, tratamientos inmunodepresores y/o corticosteroides, inmunodepresion vinculada a otra enfermedad viral o bacteriana ...). Por ello, la infeccion por HVC debe considerarse una infeccion de por vida. Este virus se inc1uye totalmente en las enfermedades "de colectividades" ya que seran las condiciones del entorno las que explicaran la aparicion de un resurgimiento herpetico 0 no, el momenta en que se producira esta reaparicion y la gravedad de las manifestaciones c1inicas.

en el momenta de su nacimiento tiene una temperatura corporal interna de unos 35,5oC). Esta mala termorregulacion se agrava por una madurez insuficiente del sistema inmunitario. Las respuestas inflamatorias y de la inmunidad celular se reducen. Los anticuerpos maternos transmitidos por el calostro pueden asegurar una proteccion eficaz, aunque por supuesto no impiden la infeccion de los cachorros. Sin embargo, para producir suficientes anticuerpos protectores, 0 bien la perra debe haber sufrido una reinfeccion 0 una reactivacion del virus en su organismo antes del parto, 0 bien debe haber sido vacunada (vease mas abajo),

En las perras gestantes
La infeccion por el HVC de una perra gestante, que nunca antes ha estado en contacto con este virus, crea un riesgo suplementario. El virus puede pasar a los anexos fetales y al feto, y provocar, segun la fase de la gestion, reabsorciones embrionarias, reabsorciones fetales, abortos, partos prematuros 0 el nacimiento de cachorros muertos (Foto 2).

En el cachorro

recien nacido
Foto 2

Foto 1

En el perro adulto
El virus se desarrolla primero en las mucosas locales (nariz, faringe (amigdalas), aparato genital ... ), luego se propaga al resto del organismo por via hernatogena (viremia) a todos los organos objetivo

Imagen del herpesvirus

canino

En cambio, en el caso del cachorro recien nacido, el contagio tiene lugar ya sea en el utero justa antes del parto, durante el parto 0 justa despues por contacto con las secreciones vaginales. Tambien se ha sospechado la transmision por contacto con personas (criadores, veterinarios) que han tocado a otro cachorro infectado. En el caso del pequefio animal, la infeccion se propaga muy rapidamente, mas rapido que en el caso de los adultos. Por ello, en el caso de los cachorros, este virus se excreta rapidamente por todas las vias: saliva, secreciones oculares y nasales, orina y heces. Se infectan todos los cachorros de una misma camada y muchos mueren. Sin embargo, al pasar las 2 0 3 semanas, la respuesta inmunitaria de los recien nacidos es mejor y la sensibilidad de los cachorros al HVC se hace menor. Algunos autores piensan que la gran sensibilidad de los recien nacidos al HVC esta vinculada a su mala termorregulacion y a su temperatura corporal demasiado baja (el cachorro

Cuando se observan. a Laecografia. resorciones embrionarias en una perra gestante. podemos sospechar, entre otros, que padece un HVC.

Formacion practica

Figura 1. Epidemiologia
Parece que el HVC infecta mayoritariamente al perro. Sin embargo, se han detectado anticuerpos en el zorro rojo europeo en AIemania y en Australia yen nutrias en EEUU [6].Se ha aislado un virus muy cercano en coyotes americanos. En el perro, la infeccion por HVC se ha expandido mundialmente, con un caracter enzootico. Parece que desde hace 20 afios, el Indice de infeccion entre los perros ha aumentado considerablemente, y los indices de incidencia de seropositividad publicados en el afio 2000 son considerablemente mas elevados que los observados a principios de los afios '90. Segun los estudios y los pafses, la incidencia actual parece variar entre el60 y el80% [18],10 cual indica que la gran mayoria de los perros han estado en contacto algun dia con el herpesvirus canino. Por ejemplo, un estudio reciente realizado en los criaderos caninos espafioles ha reve1ado una seropositividad del 74,8% (Guigal, comunicacion personal). En Francia, un estudio realizado en 84 criaderos de tamafio variable (de 5 a 75 perros) en el afio 2000 habia indicado una incidencia de la seropositividad inferior al 30,6% [8]. Uno de los estudios mas recientes indica, en Finlandia, una seropositividad en el 65% de los perros de criadero sin problemas de reproduccion [5]. Sin embargo, es dificil conocer la incidencia exacta del HVe a partir de los indices de seropositividad. De hecho, cuando un perro esta infectado pero el virus entra en latencia en su organismo, el animal se vuelve seronegativo y ya no se detecta, aunque es portador del virus y por 10 tanto potencialmente transmisor de este. Esto indica que la incidencia del virus es en realidad muy superior a las cifras de seropositividad publicadas. La incidencia de la seropositividad puede alcanzar inc1uso el100% en los criaderos infectados con problemas de reproduccion [5]. De hecho, varios estudios indican que este virus se reactiva mas en las colectividades caninas de gran tamaiio, en las que observamos mayor Indice de perros seropositivos [8] (veaseFig. 1). De hecho, si se infecta
Tamaiio
Todas Las muestras

del criadero
negativas •

vs Porcentaje
positivas

de seropositividad
• >50
% muestraspositivas

< 50 % muestras

100%

n-43

n-27

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90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
<10 10-20 >20

contagio. De este modo, incluso los perros que no vienen de un criadero estan mayoritariamente contagiados. Se han observado indices elevados de serologias positivas en perros que viven en familia en Gran Bretafia (88% en una muestra de 325 perros) como en Francia (41% en una muestra de 250 perros),

En los cachorros de mas de 2 0 3 semanas en el momenta del contagio, la infeccion por HVC suele ser asintomatico, aunque se han descrito signos nerviosos centrales, sobre todo sorderas 0 cegueras[6].
Fete 4

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Sintomas
Tamaiio del criadero (nOde ani males)

En el cachorro

recien nacido

un perro que vive solo en una familia, el virus en su organismo tiene menos posibilidades de salir de su latencia por las mejores condiciones de vida y el menor estres que sufre. Todas las reagrupaciones de perros son potencialmente favorables a la excrecion viral, sobre todo los criaderos caninos 0 las exposiciones caninas. Ronsse et al. (2004) han destacado el efecto del manejo en los criaderos, de su tamafio, el estres y la higiene cotidiana en la circulacion del virus (Foto 3).
Fete 3

Se trata de la forma clinica mas grave. Mecta a los cachorros de hasta 3 semanas. Sin embargo, las consecuencias de la infeccion por el HVC son muy variables segun la edad y el estado fisiologico del cachorro afectado. En realidad, la gravedad de los sintomas es inversamente proporcional al indice de anticuerpos transmitido por la madre en el calostro. Tras el contagio, el periodo de incubacion dura de 4 a 6 dias. Los recien nacidos se vuelven anorexicos y son incapaces de mamar. Suelen manifestarse rapidamente alteraciones digestivas (modificacion de las heces, poco abundantes, nauseas, dolor abdominal y vomitos). Los cachorros afectados se ponen a gritar 0 a gemir sin razon aparente. Le sigue una falta de coordinacion de los movimientos que se traduce en una encefalomielitis. Los cachorros pueden temblar, cojear, 0 en los casos graves presentar rigidez, una hiperextension de los miembros y del raquis (opistotonos), 0 por el contrario un pedaleo. AI final de la evolucion, los cachorros se vuelven muy hipotermicos (34oC), y por eso su madre los rechaza (Foto 4). Por Ultimo, podemos -raramente- observar petequias en la piel del abdomen 0 en las mucosas de la boca 0 de la faringe. El cachorro pierde peso y la evolucion hacia la muerte sin tratamiento no suele superar los 4 a 5 dias. Los pocos cachorros que se escapan suelen presentar secuelas graves (ataxia, amaurosis, deficits del aparato cerebro-vestibular) y de todos modos seguiran siendo portadores del virus.

La baja temperatura interna de los cachorros recien nacidos favorece el desarrollo de una infecci6n por el HVC,

En el adulto
En el adulto,la mayoria de las infecciones por HVC pasan desapercibidas desde el punto de vista clinico. El virus circula en silencio en un canino y persiste en estado latente en todos los animales infectados. Por eso, es raro visualizar sintomas, - Lesiones locales: El HVC puede infectar las mucosas genitales extemas y provocar, en el macho y en la hembra, la aparicion de vesiculas que evolucionan en 1 a 2 semanas a ulceraciones y a la curacion en las mucosas genitales (prepucio 0 vestfbulo de la vagina). Las mucosas sufren una inflamacion erimatosa, a veces acompafiada de una reaccion linfo-folicular local, que se puede visualizar en el examen directo de las mucosas 0 durante un examen vaginoscopico en la perra (Foto 5). Esta afeccion localizada es mas frecuente en los perros infectados en fase inicial [6].A veces estas vesiculas pueden reaparecer posteriormente aprovechando un "estres" 0 un episodio de tos

Las exposiciones caninas de las agrupaciones de perros son lugares de riesgo elevado de herpesvirosis canine.

Segun el balance, este virus esta probablemente muy extendido, ya que su incidencia sigue siendo elevada en la poblacion canina en general, y no solo en los criaderos. Esto se debe seguramente a una difusion facil del virus por via respiratoria, que constituye por 10 tanto -tal vez- la principal via de

Formacion practica

Foto 5

Tanto las lesiones foliculares como una ligera congestion vaginal pueden ocasionalmente ser puestas en evidencia en las perras primo-infectadas [aqui, una vista durante un examen endoscopico de la vagina.)

Parece que en caso de tos de las perreras, la infeccion por HVC se manifiesta mas tarde que otras infecciones virales. Estaria asociada a afecciones respiratorias mas graves[6]. n cambio, E el virus suele expandirse tras un episodio de "Tos de las perreras" en el seno de una colectividad canina y aparecen alteraciones (por ejemplo problemas en la reproduccion). Por 10 que es esencial vacunar a los perros de criaderos contra la tos de las perreras. En definitiva, 10que es poco realista para los perros de exposiciones 0 de concurso, es que estos deberian tener el minimo contacto posible con congeneres de otras procedencias. - Afeccion de la perra gestante: Ya hemos dicho que este virus puede implicar problemas en todas las fases de la gestacion. Debido a que la detencion de la gestacion en la perra suele pasar desapercibida clinicamente hasta los 45 a 50 was de gestacion en la especie canina, esto explica por que el HVe debe buscarse sistematicamente en las perras que sufren infertilidad. Ronsse et al. (2005) declaran que en condiciones de terreno en Belgica, el 46% de las hembras infectadas recientemente sufren infertilidad, reabsorcion fetal y/o momificacion fetal en el utero (Fot07).
Foto 7

En general, tras uno 0 dos episodios clinicos, la aparicion de anticuerpos poco protectores en la hembra interrumpe este tipo de problema, a no ser que factores de cria muy negativos reduzcan su indice de inmunidad. Pero cuidado, como sucede en todas las restantes infecciones virales, no por haber sufrido una perra problemas de reproduccion vinculados al HVC, estara luego inmunizada. Es mejor vacunarla para asegurar su proteccion en gestaciones posteriores (vease
a continuacion: profilaxis),

detectar inclusiones virales mediante histologia. Advertimos que los productos del aborto en buen estado de conservacion pueden presentar lesiones identicas a los cachorros afectados de la forma neo-natal 0, por el contrario, no mostrar ninguna lesion de origen viral, cuando solo se ha infectado la placenta.

- Otros sintomas Algunos autores han descrito formas oculares (conjuntivitis, keratitis, retinitis, etc.), 0 digestivas puras (diarreas).
Foto 8

de las perreras. Por 10 que su reaparicion parece estar asociada a una reactivacion del virus latente (Foto 6).
Foto 6

Lesiones
La autopsia es un examen determinante para el diagnostico (Foto 8). En el cachorro recien nacido muerto por herpesvirus, el diagnostico casi siempre depende del examen necropsico: presencia frecuente de una decoloracion de los principales organos (higado, bazo, pulmones, rifiones) y sobre todo presencia de varios focos de necrosis y numerosas hemorragias multifocales en cabeza de alfi1er, bien visibles en numerosos organos (bazo, higado, pulmones, intestinos, timo, cerebro, estornago, miocardio, pancreas, suprarrenales ... ) y sobre todo los rifiones (Foto 9). Tambien podemos detectar una hemorragia en las cavidades pulmonares y abdominales, asi como en los organos Iinfaticos. En un examen histolog ico, observamos numerosos focos de necrosis en los tejidos, a veces con presencia en la periferia de estos focos de cuerpos de inclusion virales intranucleares 0 mas raramente intracitoplasrnicos. Durante el aborto, la placenta suele sufrir una degeneracion y focos de necrosis. Podemos

En una mortalidad

neonatal, la autopsia es primordial.

Foto 9

En algunos casos, las lesiones vesiculares pueden desarrollarse en la base del pene del perro adulto.

- Meccion respiratoria: En el adulto joven 0 inmunodeprimido, el HVC puede dar lugar a una rinitis, una faringitis y/o una conjuntivitis, sin hipertermia, de una duracion de 4 a 8 dias y que puede complicarse debido a una afeccion bacteriana secundaria. EI HVe puede ser un agente secundario del sindrome "Tos de las perreras", aunque no es el virus aislado con mas frecuencia en este caso.

El herpes virus canino puede, raramente, llevar a abortos al final de la qestacion, 0 a una rnornificacion fetal in utero.

Imagen de un rifion de cachorro recien nacido cubierto de petequias. Tales lesiones son muy evocadoras de herpesvirosis.

Formacion practica

Diagnostico En la decision diagnostics es importante que el profesional veterinario seleccione e interprete las posibles opciones. • Diaqnostico epidemiolcqico

inmunogeno, y que los anticuerpos inducidos por la infeccion se pueden detectar durante poco tiempo, unos cien dias[18]. Por ello, cuando el virus entra en latencia en un organismo, los anticuerpos no duran mucho tiempo. La presencia de perros portadores del virus pero seronegativos es, por 10 tanto, probablemente muy frecuente. En otras palabras, un animal infectado desde hace mucho tiempo puede perfectamente tener el virus y ser seronagativo. Una serologia positiva indica una infeccion reciente 0 una reactivacion de un virus latente. Asimismo, el examen sero16gico individual presenta poco Interes para detectar el HVC. En cambio, la serologia presenta un interes indudable para juzgar la circulacion del virus en un efectivo canino. Frente a un criadero canino que sufre problemas de reproduccion y/o de mortalidad neonatal, la interpretacion de una deteccion serologies siempre es delicada. Ronsse et al. en el 2004 revelaron asi, que no parecen existir diferencias significativas en el estatus serologico entre criaderos que sufren 0 no problemas de la reproduccion, aunque parece existir una ligera correlacion entre el indice de abortos y la seropositividad. En otras palabras, el virus circula en los criaderos pero son factores de "estres" propios de la cria en si los que explicaran el desarrollo 0 no de problemas patologicos, SegUn estos autores, la higiene del criadero seria un factor totalmente determinante. Por ejemplo, conocimos un criadero de 24 perros labradores sin ningun problema reproductor ni mortalidad neonatal mientras que ell00% de los perros eran seropositivos. El criadero era una propiedad irreprochable (Fontbonne, observaciones personales). Por el contrario, una serologia negativa, como hemos indicado anteriormente, no significa gran cosa, salvo que tal vez el animal no es excretor de virus, por 10 que no contagia, en el momenta del examen. Un estudio recoge el caso de una perra que ha

La coexistencia en un criadero de una mortalidad importante en los cachorros de menos de 3 semanas, problemas en la reproduccion (abortos, infertilidad...) y sintomas respiratorios, evoca un contexto herpetico, Esta sospecha se magnifica si se yen vesiculas genitales en algunos animales, 10 que suele ser, sin embargo, poco habitual actualmente, ya que las primoinfecciones son menos frecuentes. • Diagnostico de laboratorio En la decision diagnostica es importante que el profesional veterinario seleccione e interprete las posibles opciones - Histologia: Los tejidos deberan estar en perfecto estado de conservacion para ser examinados. Por ello se recomienda realizar la autopsia rapida de los cachorros 0 fetos abortados y la fijacion rapida en formol de varios fragmentos de placenta u organos. Como ya hemos dicho, las lesiones son tan tipicas que debe sospecharse de una infeccion por el HVC, y dicha sospecha se confirmara con un analisis PCR (vease a continuacion). -Serologia: La tecnica de referencia era la seroneutralizacion, pero se ha sustituido progresivamente en la p r a c t i c a con t e c n i c a ELISA 0 de inmunofluorescencia indirecta (IFI). La deteccion serologica supone un problema real. Conviene saber que el HVC es poco

mostrado una gran cantidad en anticuerpos durante el estro, tal vez por una reaccion 0 un contagio recientes, y cuyo indice serologico descendio al principio de la gestion (en diestro). Esta perra sufrio una reabsorcion embrionaria parcial, visualizada mediante ecografla[14](Foto 2). Podemos pensar que este descenso del in dice de anticuerpos neutralizantes al comienzo de la gestion ya no perrnitio proteger su organismo. Este efecto podria vincularse al efecto benefice que genera la vacunacion sobre los parametres de reproduccion, fertilidad y fecundidad (vease mas adelante: profilaxis medica). Evidentemente, no podemos basarnos en esta constatacion para detectar a las perras con "riesgo potencial", pero parece que el indice de anticuerpos en el diestro tiende a ser menor en las perras que sufren problemas reproductores [14].

La serologia carece de todo interes en el cachorro, que no suele tener tiempo de desarrollar sus propios anticuerpos antes de morirse. Ronsse et al. (2005) han demostrado que ningun cachorro es seropositivo antes de los 6 meses. Tambien es totalmente imitil evaluar el indice de anticuerpos en los recien nacidos. Un diagnosrico de "criadero", efectuado en varios animales durante el periodo de riesgo, es sin duda mas esclarecedor sobre el estatus de la comunidad canina. En resumen, el diagnostico sero16gico es al final relativamente insatisfactorio en materia de HVC, sobre todo actualmente, cuando el virus esta muy extendido en la poblacion canina, y cuando una seropositividad no es muy significativa.

Figura 1. Indices medios de anticuerpos ± SEM en funcion de la aparicion 0 no de alteraciones en la reproduccion. Aunque la diferencia no sea significativa, advertimos una tendencia a la baja del fndice de anticuerpos en el diestro [Ronsse et al. 2005].

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Formacion practica

- Puesta en evidencia del virus: El aislamiento viral constituye el metodo elegido y de certitud, pero es una tecnica delicada ala hora de implementarla (fragilidad del virus) y complicada (intentamos reproducir el efecto citopatogeno en celulas de rifton de cachorros). Los cultivos virales se efecnian a partir de organos conservados al frio pero no congelados, o de hisopos nasales 0 faringeos. El cultivo es optimo a 34 0 350 C, y disminuye en gran medida por encima de los 360 C. - Puesta en evidencia del ADN viral: Recientemente, las tecnicas de biologia molecular han permitido desarrollar pruebas de diagnostico (por PCR) que consisten en detectar y amplificar el ADN viral, aunque este integrado en el genoma del perro, por 10 tanto, aunque el virus este latente. Cuando este diagnostico es positivo, es muy escasa la presencia de ADN del herpesvirus en el organismo. Sin embargo, no se establece la correlacion exacta con el hecho de que el virus siempre este activo en el organismo. De este modo, un cachorro nacido de madre vacunada y que muere de otra patologia diversa al herpesvirus canino tendra muchas posibilidades de tener el virus herpes en sus organos aunque no haya muerto de herpesvirus. Por eso es esencial efectuar este analisis en el momenta oportuno, cuando existe una sospecha clinica fundada y sobre todo necropsica. Puede ser util para respaldar una sospecha de infeccion herpetica, analizar un hisopo vaginal extraido de la madre adernas de los organos de los cachorros muertos. Si han muerto varios cachorros, y deseamos analizar varios organos diferentes, tendremos cuidado de pedir al laboratorio que retina las muestras extraidas para hacer 10 que se denomina una PCR "de mezcla" que evita analisis demasiado caros (en este caso, ellaboratorio solo factura un analisis PCR). Para detectar reproductores, puede proponerse poner en evidencia el virus en los puntos en que este se multiplica tras su entrada en el organismo (amigdalas, celulas conjuntivales, vagina, prepucio) 0 en el esperma, incluso en animales

seronegativos (Foto 10). Sin embargo, parece util con la finalidad de aislar el herpesvirus en un organismo, multiplicar las extracciones en un mismo animal que se desea diagnosticar: de este modo hisoparemos - con hisopos diferentes -la garganta, senos conjuntivales, vagina ... (pida tambien en este caso una PCR "de mezcla" para reducir los costes de diagnostico), De este modo, en un estudio se detectaron 58 reproductores (42 de ellos perras) procedentes de 17 criaderos. El 50% de los animales eran portadores de herpesvirus en al menos una de las muestras analizadas, con menos frecuencia en todas. Cinco perros seronegativos se han revel ado portadores en PCR. En las perras positivas, cinco perras solo eran positivas en una de las dos extracciones, vaginal u orofaringea. Esto subraya perfectamente el interes de realizar varias extracciones en un mismo animal para aumentar la fiabilidad del resultado. Ademas, parece que conviene dar prioridad, para realizar las extracciones, a la utilizacion de citocepillos en vez de escobillas esteriles clasicas con un extremo de algodon, Ver Tabla 1.
Foto 10

Tabla 1. Modalidades de qestion de las extracciones para detectar el HVC a traves de la tecnica PCR [Sanelis - Documento tecnico informativo]. Indicaciones
Deteccion de

Circunstancias del analisis Perra: durante durante el celo, la
0

Hisopado oro-fa ri ngeo (amfgdalas)

Hisopado conjuntival

Hisopado vaginal

Esperma (min 1 mLl

Organos (no en forrnoll

reproductores

tras un aborto tras el parto
Deteccion de

qestacion,

[indispensable)

X

X X

!indispensable)

X

reproductores

Perro macho

[indispensable)

X X

[indispensable)

linseminacion artificial)

X

infeccion en el cachorro recien nacido Diaqnostico de infeccion en el cachorro recien nacido

Diaqnostico de

Problemas nerviosos u oculorespiratorios Post-mortem

[indispensable)

X X

[pulmones, higado, rifion, bazo, ganglios .. .J

- ~Serologia

0

peR?:

En la practica, el veterinario confrontado a una sospecha de infeccion por HVC tendra que elegir del mejor modo posible las extracciones a efectuar y el tipo de analisis solicitado. La tabla siguiente propone un enfoque practice.
Tabla 2. Tabla recapitulativa de los medios de diaqnostico del herpesvirus canino en la practice veterinaria cotidiana [Legault 2007]. Sujeto Cachorro recien nacido Perro macho Post-mortem Antes de un apareamiento Perfodo Extraccion Rifiones, bazo, hfgado, pulmones Esperma Sangre Perra Antes de un apareamiento Sangre Hisopo oro-farfngeo y va gin a l* * [a poder ser al final del celol Perra Tras una detencion de la qestacion constatada mediante ecografia lreabsorcion] 0 aborto Tras la perdida de una camada Sangre Placenta Sangre Hisopo vaginal
indica que el per~o contagia. La s~rologia positiva indica que el perro es portador del virus, pero nada indica que sea excretor en el momenta de realizacion de la extraccion. "Perra en celo: el virus que puede salir de la latencia en el momento del celo lperlodo de riesgol. es preferible esperar al menos una semana para poder encontrarlo eventualmente en las vias genitales a amfgdalas. al final del celo
0

Metodo de diaqnostico PCR PCR Serologfa Serologfa PCR Dos serologfas a 3 semanas de intervalo PCR Dos serologfas a 3 semanas de intervalo PCR

varios laboratorios, inc1uso, realizan una PCR denominada "cuantitativa", que permite evaluar la carga viral. De este modo, en los organos de los cachorros fallecidos, se puede decir si han muerto de la enfermedad 0 si simplemente eran portadores sanos, por ejemplo, cuando su madre estaba vacunada. Debemos destacar que las cargas virales mas elevadas siempre se observan en cachorros con lesiones caracteristicas en la autopsia (petequias en todos los organos).
'Perro

* *

Perra

macho: s6lo la peR positiva en el esperma

Formacion practica

Fete 11 Pronostko

y tratamiento

Profilaxis ProfiLaxis sanitaria

En ausencia de vacunacion, el pronostico de la afeccion es malo en el cachorro recien nacido, y bueno una vez que el cachorro ha superado las 3 semanas.
• Tratamiento medico

La erradicacion del HVC en las comunidades caninas se ha vuelto imposible, debido a la amplia difusion del virus. Por 10 que hay que aprender a "vivir con" el herpesvirus canino. Conviene: -Desinfectar bien los locales: el virus es fragil y los locales limpios evitan las proliferaciones bacterianas que pueden inmunodeprimir a 13l. los perros y favorecer el desarrollo del HVC[ El virus es sensible a los rayos ultravioletas vinculados al sol (0 a las lamparas de neon ultravioletas), a los disolventes de los lipidos (cloroformo, eter... ) ya numerosos desinfectantes (amonios cuaternarios, formol, derivados fenolicos ... ). Esta sensibilidad facilita la desinfeccion de los locales y del material del criadero canino (Foto 13). - Proteger a los animales aislando a las hembras en las semanas previas al parto y a las semanas siguientes (penodo de reexcreccionviral maxima) y, tal vez, evitar el apareamiento natural (Foto 14). El interes de la inseminacion artificial para sustituir el apareamiento natural no esta confirmado, porque la via aerea parece ser la principal via de transmision del virus. Sin embargo, puede contribuir a minimizar los riesgos de contagio. La practica de una cesarea sistematica ya no se recomienda actualmente porque se ha evidenciado la posibilidad de un contagio en el utero. En un pequefio criadero canino donde todos los perros son seronegativos, habria que evitar introducir un nuevo perro sospechoso de estar enfermo y utilizarlo demasiado rapidamente para la reproduccion. En cualquier caso, de entrada, este perro no debe ponerse en contacto con hembras gestantes y solo debe utilizarse en los primeres meses- en la reproduccion por

En este sentido es aconsejable que consulte a su veterinario.
• Tratamiento "fisko"
Mantener caLientes a Losrecien nacidos puede inactivar eLdesarroLLo deLvirus y a veces permite saLvar a una camada si se oLvid6vacunar a La madre.

El tratamiento mas eficaz del herpesvirus neonatal consiste en calentar a los cachorros (normalmente bajo una l arn p ar a de infrarrojos)(Foto 11). Una incubadora pediatrica representa la mejor so lucio n (Foto 12) manteniendo su temperatura interna por encima de los 380C para limitar la multiplicacion viral que es maxima entre los 35 y los 360C de temperatura intern a de los recien nacidos. Para prevenir los riesgos de aparicion de un herpesvirus c1inico en otros cachorros de la camada, la temperatura de la maternidad se 0 mantendra a 33 C durante la primera semana de vida de los cachorros, puede ser reducida progresivamente a 230C al cabo de la segunda semana. Hay que tener mucho cuidado en mantener la higrometria de los locales para que no se deshidraten los cachorros por este aumento de temperatura. Sin embargo, no se puede excluir que los cachorros que sobreviven a traves de este metodo puedan presentar lesiones n euro log icas irreversibles a continuacionl-l. Por 10 que no es e1 mejor metodo a e1egir, y es mejor en un entorno de riesgo pensar en una vacunacion profilactica,

Fete 12

Una incubadora, cuando se dispone de una, es una herramienta ideaL para mantener caLientes a Los cachorros en riesgo.

i n s e m i n ac io n artificial y controlando regularmente mediante PCR que el HVC no esta presente ni en el esperma, ni en su prepucio (gracias a un hisopado practicado en el recubrimiento)(Foto15).

La inseminaci6n artificiaL frente a Los apareamientos naturaLes puede ser interesante para Limitar eL contagio por herpesvirus, a condici6n que eL esperma deL macho haya side testado por peR en Los dias anteriores.

Formacion practica

En el mismo sentido, Ronsse et al. (2004) han mostrado que el porcentaje de perros seropositivos - por 10 tanto la circulaci6n del virus - aumentaba cuando las perras de los criadores eran montadas por machos ajenos al criadero. • ProfiLaxis medica Existe en Europa una vacuna de Merial destinada a proteger a los recien nacidos de la afecci6n Conclusion

neonatal. Sin embargo, no se puede vacunar a los recien nacidos. Debe administrarse a la perra gestante, para aumentar de manera importante e1 indice de anticuerpos neutralizantes en el calostro. Para obtener mayor informacion sobre las ventajas de esta vacuna en la prevencion de la mortalidad en el aumento de la fertilidad y del peso del cachorro at nacimiento debe ponerse en contacto con su veterinario.

EI herpesvirus canino es una enfermedad muy extendida en los perros en el mundo entero, ya sea en criadero como en casas particulares. Su poder patogeno esta reconocido. Sin embargo, todavia es muy desconocida para los veterinarios europeos, mientras que su diagnostico ahora es mas facil y puede prevenirse simplemente gracias a medidas de higiene de sentido comun y gracias a la vacunacion de las perras gestantes. Para detectar reproductores, puede proponerse poner en evidencia el virus en los puntos en que este se multi plica tras su entrada en el organismo.

Bibliografia 2

de apoyo para su veterinario

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