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8760308-BACILOSCOPIA[1]

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BACILOSCOPIA

La tuberculosis es una enfermedad infectocontagiosa producida por agentes del grupo Mycobacterium tuberculosis complex, especialmente por el Mycobacterium tuberculosis o bacilo de Koch (BK). Es la infección crónica más importante del mundo en cuanto a morbilidad y mortalidad. La localización más frecuente es en el aparato respiratorio, seguida a gran distancia por la afectación de cualquier otro lugar. Anatomopatológicamente se caracteriza por la formación de granulomas.

M. tuberculosis es un patógeno intracelular capaz de producir infecciones de por vida. No se conoce aún la compleja existencia intracelular de esta bacteria, pero se está aclarando con lentitud. En el período de exposición, M. tuberculosis ingresa en las vías respiratorias y las diminutas partículas infecciosas alcanzan los alvéolos, y son digeridas por los macrófagos alveolares. A diferencia de la mayor parte de las bacterias fagocitadas, M. tuberculosis impide la fusión del fagosoma con los lisosomas (al inhibir la molécula de unión específica, el antígeno endosomal específico 1 [EEA1]). No obstante, el fagosoma es capaz de fusionarse a otras vesículas intracelulares para facilitar el acceso del patógeno a nutrientes y su proceso de replicación intravacuolar. Las bacterias fagocitadas también pueden eludir la destrucción mediada por los macrófagos con la formación de intermediarios reactivos del nitrógeno creados entre el óxido nítrico y los aniones superóxido al catabolizar catalíticamente los oxidantes generados. Fisiología y estructura: Bacilo aerobio, grampositivo débil y fuertemente acidorresistente Pared celular rica en lípidos, lo que hace al microorganismo resistente a desinfectantes, detergentes, antibióticos antibacterianos frecuentes y tinciones tradicionales Virulencia:

8 millones de casos cada año y 2 millones de muertes la enfermedad es más frecuente en el sudeste asiático. los alcohólicos y los adictos a drogas. van a ser capaces de llegar al alveolo y ser fagocitados por los macrófagos alveolares. la linfangitis . rifampicina durante 4 meses. en 2003 la población con mayor riesgo de padecer la enfermedad son Los pacientes inmunodeprimidos (fundamentalmente los infectados por VIH). o rifampicina y piracinamida durante 2 meses. tienen la facultad de resistir los mecanismos defensivos celulares y provocar una primoinfección tuberculosa. Se constituye el llamado complejo primario. tuberculosis multirresistente Se hace profilaxis con BCG en los países endémicos El control de la enfermedad se hace con vigilancia activa. los Vagabundos y aquellos que están expuestos a otros individuos infectados El hombre es el único reservorio natural la transmisión de una persona a otra ocurre a través de aerosoles infectados Tratamiento.Capaz de crecimiento intracelular en los macrófagos alveolares Inactivados ta enfermedad depende fundamentalmente de la respuesta del anfitrión frente a la infección Epidemiología: Universal. formado por el chancro de inoculación o nódulo de Gohn. ta piracinamida y el etambutol o el levofloxacino se utilizan durante 12 meses después de estar expuesto a M. con mayor capacidad agresiva. etambutol. y b) las condiciones inmunológicas propias del huésped. Patogenia Solamente las partículas inhaladas más pequeñas. un tercio de la población mundial está infectada por este microorganismo Hay 8. prevención y control: Se necesitan pautas con múltiples fármacos y cursos de tratamiento prolongados para prevenir la aparición de cepas resistentes a fármacos Isoniacida (INH). África subsahariana y el este de Europa Hubo alrededor de 15. piracinamida y rifampicina durante 2 meses seguidos de 4 a 6 meses de INH y rifampicina u otras combinaciones alternativas de antimicrobianos ta profilaxis de la exposición a la tuberculosis puede incluir INH durante 9 meses. como la tuberculosis miliar o la meningitis tuberculosa. Unos bacilos son destruidos y otros.UU. Existen dos factores que determinan esta evolución: a) la facilidad de exposición a un adulto enfermo.Los niños menores de un año son los que tienen mas probabilidades de desarrollar formas graves de enfermedad. No todos los casos desarrollaran la enfermedad. las que contienen entre 1-3 bacilos.000 nuevos casos en EE. medidas profilácticas y terapéuticas y un control exhaustivo de cada caso Mecanismo de contagio En más del 98% de los casos. la infección es causada por la inhalación de las secreciones respiratorias mitidas por un adulto con enfermedad tuberculosa pulmonar con esputo positivo a BK.

Síntomas La fase primaria de la enfermedad normalmente no tiene síntomas. Cuando los síntomas en verdad ocurren. radiológicos y bacteriológicos. La pared celular rica en lípidos y ácidos carboxílicos (ácido micólico) que tienen la propiedad . Otros síntomas que pueden ocurrir con esta enfermedad: Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistente o BAAR. después de la tinción con colorantes básicos. Sólo la prueba de tuberculina es positiva. el ácido mi cólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido. viraje tuberculínico o infección tuberculosa). enfermedad tuberculosa o primoinfección patente. especialmente en la noche Fatiga Fiebre Pérdida involuntaria de peso Dificultad respiratoria Dolor torácico Sibilancias LA TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica. La enfermedad. pueden abarcar: • • • • • • • • • Tos (algunas veces con flema) Expectoración con sangre Sudoración excesiva. bacteriológicas e inmunológicas. Presenta manifestaciones clínicas. secundaria o de tipo adulto.regional y la adenopatía satélite. y aquella que se desarrolla más tarde se denomina tuberculosis posprimaria. radiológicas. — Enfermedad tuberculosa. que se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo. La repercusión sobre el pulmón se traduce en dos situaciones patológicas distintas: — Primo infección tuberculosa subclínica (primo infección latente. Se caracteriza por la ausencia de síntomas y signos clínicos. que se manifiesta antes de los 5 años que siguen al contagio se cataloga como tuberculosis primaria.

La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. La tinción fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes. un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 a 1894). marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. ya que las paredes retienen el colorante en forma "resistente". Las mico bacterias como M. Una vez que se forma este complejo colorante-pared. Franz Ziehl (1859 to 1926). tuberculosis y M. un patólogo.de unirse excepcionalmente fuerte al colorante primario (fuscina de Ziehl) cuando se usa el calor como mordiente. MATERIALES Y METODOS . ni siquiera la acción conjunta del ácido y del alcohol puede deshacerlo.

circulares. entre el pulgar y el índice. limpiadas con alcohol y secadas al aire. Un soporte para sostener láminas portaobjetos durante la preparación de extendidos. dispersándolas de forma homogénea en el centro de la lámina. y se obtuvieron puntas ásperas. • Tomar una parte del aplicador con la mano izquierda y la otra con la derecha. Aceite de inmersión. y con los extremos irregulares seleccionar la partícula más densa o purulenta de la muestra de esputo. Enrollarla en una de los dos partes del aplicador con la ayuda de la otra. carbolfucsina al 1% acido-alcohol al 1% azul de metileno al 0.(a) • Se Dejó el extendido en un soporte ubicado al costado de la mesada para que se seque a temperatura ambiente. Un hisopo. Láminas portaobjetos nuevas. preferentemente de gas aunque puede utilizarse uno de alcohol. • Luego se Desecha el aplicador y guantes. Varillas de vidrio u otro soporte inoxidable. Un mechero. • La lámina se deja secar al aire. Una pinza. .2% PREPARACIÓN Y FIJACIÓN DEL EXTENDIDO: • se Destapó con cuidado el envase. Envases para recolección de muestras. de dimensiones adecuadas para sostener láminas portaobjetos durante la tinción. Aplicadores. • Se Partió un aplicador en dos. • Se colocaron las partículas seleccionadas sobre el portaobjetos y se extendieron con el aplicador con movimientos suaves.MATERIALES: • • • • • • • • • • • • • • Microscopio con objetivo de inmersión. Etanol al 70% o xilol.

B A TINCIÓN DE ÁCIDOALCOHOL RESISTENCIA (ZIEHLNEELSEN) Coloración • se Cubrió totalmente la superficie del extendido con fucsina básica fenicada. y se pasa rápidamente sobre la llama de un mechero tres o cuatro veces cuidando que no se caliente demasiado. esto fue suficiente para que la fucsina penetre adecuadamente en el bacilo y se fijara a sus lípidos. hasta que observe que se desprenden los primeros vapores blancos. Y . • En el término de aproximadamente cinco minutos se calentó tres veces hasta emisión de vapores.(2) • Con una pinza. Se tuvo cuidado de no hervir la fucsina porque la pared de los bacilos puede destruirse y colorearse mal. Se Enjuagó con abundante agua a baja presión. con movimientos de vaivén. con un frasco o un grifo. No calentar con mechero. Y se dispersó el colorante con suavidad a lo largo de todo el extendido (1) • Con la llama de un hisopo embebido en alcohol calentar suavemente por debajo de los extendidos. se levantó cuidadosamente la lámina portaobjetos desde el extremo más cercano.• Se Toma el extendido con una pinza manteniendo la cara que contiene la muestra hacia arriba. (b) • Se Colocó la lamina en el soporte destinado para la coloración.

(7) • Luego se Dejaron secar las láminas a temperatura ambiente. Decoloración • Se Cubrió la totalidad del extendido con solución decolorante y se dejó actuar aproximadamente 3 minutos (4) • Inmediatamente se Enjuagó el extendido con abundante agua a baja presión. .posteriormente se Lavó muy suave la superficie eliminando totalmente la solución de fucsina.(8) Lectura de extendidos coloreados por Ziehl Neelsen • Se Depositó una gota de aceite de inmersión en un extremo del frotis. apoyándolas en posición vertical en un soporte.(5) • Verificar que el extendido se ha decolorado • Se inclino el portaobjetos para eliminar el exceso de agua. Dejando actuar durante un minuto. Coloración de fondo 6 • se Cubre todo el extendido con solución de azul de metileno. Se Giró el extendido y se lavó con cuidado la parte posterior.(6) • se Enjuagaron las láminas en ambas caras con agua a baja presión. sin tocar el preparado con el gotero.(3) • Se Inclinó el portaobjetos para eliminar el exceso de agua para evitar la dilución de los reactivos que se utilizados en el resto de la tinción.

• Se Enfocó el extendido donde ha colocado la gota de aceite. moviendo permanentemente el tornillo micrométrico. • Luego se Siguió un recorrido en líneas rectas. de izquierda a derecha. • Se Contaron el número de campos y el número de BAAR que han identificado. antes de desplazarse al campo contiguo. con la lente 100x de inmersión. • Se Observó cada campo microscópico en superficie y profundidad. . sistemático para recorrer el extendido evitando repetir la lectura de algunos campos.

Resultado de bacilos copia en caso de prueba positiva (presencia de BAARs ).ANALISIS DE RESULTADOS Al realizar la tinción de Ziehl Neelsen se observo una coloración azulada del fondo del extendido pero sin la presencia de microorganismos de coloración fucsiarojiza. la metacromasia es la capacidad de los colorantes que al reaccionar con un poli anión producen un viraje en la coloración por esta razón se usa como medio de contraste ya que reacciona con todos las sustancias que se encuentren en el extendido menos con los bacilos que han sido teñidos fucsina dando una coloración azulada (figura 1). Mycobacterium tuberculosis (bacilosacido alcohol resistente) Figura 2. Esta coloración se debe a que el azul de metileno es un colorante básico metacromatico. Coloración azul del medio debida al azul de metileno Figura 1. .

de esta manera retienen el colorante y al observarlo microscopio se pueden observar solo los microorganismos que tengan esta propiedad como son los bacilos del genero de las mycobacterias.La coloración fucsia-rojiza de algunos microorganismos en esta prueba se debe a la fucsina un colorante básico que penetra todas las células dándoles una coloración fucsia-rojiza por esta razón la nuestra es sometida a decoloración dado que si el extendido en estas condiciones se coloca al microscopio todo se observaría de esta coloración por esta razón se usa el acido-alcohol dado a que esta sustancia remueve la coloración de todas las células menos los bacilos acido alcohol resistentes dado a que estos presentan ácidos grasos (por ejemplo. el ácido mi cólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con este alcohol-ácido. el esputo observado es Estos resultados se deben a que el paciente del cual se extrajo la muestra de esputo no presenta tuberculosis pulmonar dado a que si el presentara al enfermedad eliminaría por el esputo los microorganismos y al hacer el extendido se observaría estos bacilos en cantidades variables dependiendo del grado de enfermedad. Resultado obtenido luego de la observación de 100 campos al microscopio. .

mg/dl DIAGNOSTICO……………………………………………………… ... Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril ……………………..mg/dl Acido cítrico……………….. BIOQUIMICA Fructosa……………………….UI/ml Zinc……….ESPERMATOGRAMA INFORME DE ANALISIS DE LÍQUIDO SEMINAL Nombre: Edad: CONDICIONES DEL EXAMEN Hora de eyaculación: 1:45 pm Método de obtención: masturbacion Hora de examen: 3:40 Abstinencia sexual ………………….... Aglutinación……………………………… Células……………………………. Cristalización…………………………….………………...... Leucocitos por campo…………………….. EXAMEN MACROSCOPICO Volumen: 1 ml Color: blanquesino Olor: característico Viscosidad: normal Aspecto: sui generis Licuación: positiva Filancia: positiva Ph……………………….... NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML: MOVILIDAD Inmóviles: 40% Movilidad total: 60 % Activa 40% Pasiva: 20 % VITALIDAD Espermatozoos teñidos: 40% Índice de vitalidad: 60% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales: 90% Espermatozoos anormales: 20% Alteraciones de cabeza: 20% Macros: 50% Micros: 50% Alteraciones de Seg. Espermiofagia……………………..………………. Otras células…………………………. Leucocitos……………………………. EXAMEN MICROSCOPICO PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos…………………….mg/dl Fosfatasa acida……………………….……. Int: 20% Alteraciones de cola: 40% Alteraciones mixtaa: 0% Células de espermiogenesis …………..

Leucocitos por campo……………………...mg/dl DIAGNOSTICO……………………………………………………… .. Int: 03% Alteraciones de cola: 02% Alteraciones mixtaa: 0% Células de espermiogenesis ………….. Espermiofagia……………………. EXAMEN MICROSCOPICO PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos……………………. Aglutinación……………………………… Células…………………………….mg/dl Acido cítrico……………….……....UI/ml Zinc………. BIOQUIMICA Fructosa………………………... EXAMEN MACROSCOPICO Volumen: 4 ml Color: blanquesino Olor: característico Viscosidad: normal Aspecto: sui generis Licuación: positiva Filancia: positiva Ph………………………....……………….. Otras células…………………………. NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML: MOVILIDAD Inmóviles: 11% Movilidad total: 89 % Activa 67% Pasiva: 23 % VITALIDAD Espermatozoos teñidos: 20% Índice de vitalidad: 80% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales: 80% Espermatozoos anormales: 20% Alteraciones de cabeza: 15% Macros: 60% Micros:40% Alteraciones de Seg..mg/dl Fosfatasa acida……………………….. Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril …………………….Nombre: Paul A. Veas Najar Edad: 23 años CONDICIONES DEL EXAMEN Hora de eyaculación: 2:00 pm Método de obtención: masturbacion Hora de examen: 3:40 Abstinencia sexual …………………. Cristalización……………………………. Leucocitos…………………………….………………....

Espermiofagia……………………... NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML: MOVILIDAD Inmóviles: 23% Movilidad total: 77 % Activa 52% Pasiva:48 % VITALIDAD Espermatozoos teñidos: 30% Índice de vitalidad: 70% ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales: 70% Espermatozoos anormales: 30% Alteraciones de cabeza: 21% Macros: 70% Micros: 30% Alteraciones de Seg. BIOQUIMICA Fructosa………………………. Cristalización…………………………….......UI/ml Zinc………. Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril …………………….. Int: 05% Alteraciones de cola: 04% Alteraciones mixtaa: 0% Células de espermiogenesis ………….………………......mg/dl DIAGNOSTICO……………………………………………………… . Leucocitos por campo……………………. Otras células…………………………... Salcedo Ramos Edad: años CONDICIONES DEL EXAMEN Hora de eyaculación: 2:15 pm Método de obtención: masturbacion Hora de examen: 3:40 Abstinencia sexual …………………. EXAMEN MICROSCOPICO PREPARADO DE ORIENTACION Espermatozoos……………………...Nombre: Brando D.mg/dl Fosfatasa acida………………………. Leucocitos…………………………….………………. Aglutinación……………………………… Células……………………………. EXAMEN MACROSCOPICO Volumen: 3 ml Color: blanquesino Olor: característico Viscosidad: normal Aspecto: sui generis Licuación: positiva Filancia: positiva Ph……………………….…….mg/dl Acido cítrico……………….

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA BACTERIOLOGIA Docente: LIC. DAVID MATOS INFORME DE PRACTICAS BACILOSCOPIA Y ESPERMATOGRAMA Alumno: Paul Anthony veas najar Código: 2008230437 . TM.

CUSCO .2011 .

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