P. 1
Pruebas.serologicas.I

Pruebas.serologicas.I

|Views: 28|Likes:

More info:

Published by: Luis Monjarrez Solis on Feb 02, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PPT, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

11/15/2012

pdf

text

original

PRUEBAS INMUNODIAGNOSTICAS

INMUNOLOGIA 2009 Dra. Virginia Bolaños de Corzo Departamento de Microbiología

FMVZ - USAC

 

Las respuestas inmunitarias contra la mayoría de los antigenos inducen la producción especifica de anticuerpos y linfocitos T efectores. Este reconocimiento entre el antigeno ± anticuerpo o linfocito sienta las bases del diagnostico inmunológico.

 El estudio de las inmunoreacciones se realiza mediante el empleo de técnicas inmunológicas basadas en la detección de y evaluación de la respuesta humoral ( anticuerpos y complemento) o de base celular (linfocitos T y fagocitos). .

Se realizan en 2 vías:  Utilización de anticuerpos específicos para detectar el antigeno. (diagnostico indirecto) .(diagnostico directo)  Utilización de antigenos específicos para detectar anticuerpos.SEROLOGIA La medición de las interacciones AntigenoAnticuerpo con fines diagnósticos.

  La reacción entre el Ag y el Ac es de naturaleza física y química. La fuerzas que los mantienen unidos. . son de tipo no covalente. los puentes de hidrógeno y las fuerzas de Van der Waals y la exclusión del agua. como la atracción electrostática.

Avidez: es la fuerza con la que el anticuerpo multivalente se une a un antígeno multivalente. .  Afinidad de un anticuerpo es la fuerza o intensidad de la unión. entre un sitio de unión del anticuerpo y un determinante antigénico.

.  Especificidad. cuando este y el antígeno que estimulo la producción del anticuerpo especifico comparten un epitopo idéntico o muy similar. Reactividad cruzada: el anticuerpo reacciona con otro antígeno. capacidad de los anticuerpos de distinguir y reaccionar con una estructura química entre muchas.

No usar anticoagulante. Almacenar el suero en congelación.  .REACTIVOS Muestra: suero. Transportar en refrigeración. Se debe obtener en forma aséptica. No refrigerar hasta que el coagulo se haya retraído. Dejar coagular la sangre en forma inclinada.

VOLUMEN RECOMENDADO La cantidad de sangre que se obtendrá depende de la especie animal: Bovinos 10 ml. . Pollos 1 ml. Ovinos y caprinos 5 ml. Equinos 10 ml. Gallinas 2 ml. Cerdos 5 ml. Perros y gatos 2 ± 3 ml.

REACTIVOS  ANTIGENOS. Antigenos crudos: presentan el inconveniente de dar reacciones heteroespecificas. Constituidos por el microorganismo o parásito. . 3. 2. Antigenos altamente purificados: Anticuerpos monoclonales. Antigenos puros. Gérmenes recombinantes. 1.

Los sueros deben estar en buenas condiciones no hemolisados. pues los anticuerpos sedimentan.BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO       Se debe leer con detenimiento los instructivos de la pruebas. Monitorear la temperatura del laboratorio (18 ± 26 grados centigrados) . El suero debe agitarse suavemente. Los antigenos deberán conservarse en refrigeración. Realizar controles de calidad a los antigenos. periódicamente.

BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO      El tiempo de incubación debe controlarse con precisión. No se debe hacer modificaciones al protocolo de la prueba recomendado. Manejar los materiales que se usaron como si fueran infecciosos. . No se debe mantener los reactivos a temperatura ambiente mas de lo necesario. Utilizar controles positivos y negativos.

Sensibles y especificas. Reproducible. Estandarizada y validada.(Ínter laboratorios) Antigenos inactivados. . Sencilla. Equipo y reactivos accesibles. económicos.CARACTERISTICAS DESEABLES EN LAS PRUEBAS DE INMUNODIAGNOSTICO        Utilizar pequeñas cantidades de reactivos.

.CATEGORIAS DE LAS PRUEBAS INMUNODIAGNOSTICAS 1. utilizando radioisótopos. Radioinmunoanalisis (RIA) ELISA Inmunofluorescencia. colorantes fluorescentes o enzimas. Miden la cantidad de inmunocomplejos (unión antigeno-anticuerpo).    Pruebas de unión primaria.

  Los anticuerpos o antígenos marcados reciben el nombre de conjugado. o ac) añadido al ensayo a concentración limitada. y el elemento a investigar. (ag. Se les llama sistemas competitivos. Los anticuerpos conjugados suelen ser monoclonales o antinmunoglobulinas especificas. Se establece competencia por los sitos de unión disponibles entre el reactivo conocido. .

proporción entre ambos. Son reacciones no reversibles.Pruebas de union secundaria   Los complejos se agregan y originan fenómenos perceptibles visualmente. de la temperatura. tipo de inmunoglobulina presente. Dependen en gran medida del estado físico del antigeno. de los electrolitos presentes en la reacción. . de la afinidad y avidez en la interacción antigenoanticuerpo.

CATEGORIAS DE PRUEBAS INMUNODIAGNOSTICAS 2. Si el antigeno es soluble la reacción que se da es de precipitación. . Si el antigeno es particulado (suspensión) la reacción es de aglutinación. Pruebas de unión secundaria: La reacción antigeno ± anticuerpo va seguida de una segunda reaccion.

. Son de menor sensibilidad que las primarias. pero mas clásicas.

Precipitación: Inmunodifusion en agar. Neutralización y Seroneutralizacion realizadas in vitro. inmunoelectroforesis Hemoaglutinación. Fijación de complemento. . Inhibición de la hemoaglutinación.PRUEBAS DE UNION SECUNDARIA       Aglutinación: en placa. en tubo.

Evalúan la capacidad de los anticuerpos de neutralizar la capacidad biológica de un antigeno ( virus. Pruebas de protección (anticuerpos) . toxinas). Identificación de virus Medir la actividad de un anticuerpo para neutralizar a un microorganismo. Identificación de toxinas.CATEGORIAS DE PRUEBAS INMUNODIAGNOSTICAS  Pruebas de unión terciaria.

. Se basan en la medición de las manifestaciones biológicas que el sistema inmune desarrolla frente a un antígeno en el animal. incluyendo la evaluación del efecto protector real de los anticuerpos o su capacidad de neutralizar la acción biológica del antígeno.

. Programación de calendarios de vacunación. Evaluación del sistema inmune del individuo o de una población. Evaluación de programas o campañas de vacunación. Determinación de la distribución de una enfermedad. Medición de la inmunidad materna.OBJETIVOS DE LA SEROLOGIA        Identificación de problemas de salud. Determinación de la incidencia y prevalencia de una enfermedad.

You're Reading a Free Preview

Descarga
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->