P. 1
IMPLANTACIÓN DE MICROORGANISMOS RUMINALES DE GANADO Bos indicus (BRAHMAN), EN TERNEROS Bos taurus (HOLSTEIN), DE 10 DÍAS A 6 MESES DE EDAD

IMPLANTACIÓN DE MICROORGANISMOS RUMINALES DE GANADO Bos indicus (BRAHMAN), EN TERNEROS Bos taurus (HOLSTEIN), DE 10 DÍAS A 6 MESES DE EDAD

|Views: 298|Likes:
Publicado porGalo Martinez
Investigacion realizada en Santo Domingo - Ecuador, por el Dr. Galo Ernesto Martinez Cepeda
Investigacion realizada en Santo Domingo - Ecuador, por el Dr. Galo Ernesto Martinez Cepeda

More info:

Published by: Galo Martinez on Jan 28, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

03/03/2015

pdf

text

original

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

PRESENTADA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:

MÉDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

TEMA

IMPLANTACIÓN DE MICROORGANISMOS RUMINALES DE GANADO Bos indicus (BRAHMAN), EN TERNEROS Bos taurus (HOLSTEIN), DE 10 DÍAS A 6 MESES DE EDAD.

AUTOR
GALO ERNESTO MARTÍNEZ CEPEDA

DIRECTOR DE TESIS:
Dr. OSCAR MACIAS PEÑA

GUAYAQUIL – ECUADOR 2011

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

La responsabilidad por las ideas, investigaciones, resultados y conclusiones sustentadas en ésta tesis corresponden exclusivamente al autor.

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

PRESENTADA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:

MÉDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

TEMA

IMPLANTACIÓN DE MICROORGANISMOS RUMINALES DE GANADO Bos indicus (BRAHMAN), EN TERNEROS Bos taurus (HOLSTEIN), DE 10 DÍAS A 6 MESES DE EDAD.

AUTOR
GALO ERNESTO MARTÍNEZ CEPEDA

DIRECTOR DE TESIS:
Dr. OSCAR MACIAS PEÑA

GUAYAQUIL – ECUADOR 2011

i

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

DEDICATORIA

Dedico el esfuerzo gastado en este proyecto a mis padres Galo Martínez y Gladys Cepeda, los cuales me han apoyado incondicionalmente durante todo este proceso. A mis hermanos Geovanna, Verónica y Bryan Martínez; a Miguel Altamirano (+) ya que con sus sabios consejos, me inculcaron a seguir siempre adelante con mis estudios a pesar de estar lejos de mis seres queridos.

A todos ellos les agradezco con infinito amor y les dedico cada uno de mis logros.

Galo Ernesto Martínez Cepeda

ii

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

AGRADECIMIENTO

Agradezco en primer lugar a Dios por ser mi guía, llenarme de bendiciones y sabiduría día a día, a mis queridos padres pilares fundamentales en mi vida, gracias a su sacrificio, paciencia, comprensión y amor, hermanos, familiares y amigos por su infinito apoyo en el transcurso de la vida universitaria fueron incondicionales para culminar mi carrera.

Mi profundo agradecimiento al Instituto Nacional de Higiene “Leopoldo Izquieta Pérez”; sede Santo Domingo de los Tsáchilas por haberme colaborado con talento humano y equipos de Laboratorio, al Dr. Oscar Macías Director de Tesis, agradezco su guía tiempo y dedicación que brindo al proyecto de forma ética y profesional. Al Biólogo Antonio Freire y Dra. María de Lourdes Salazar por su gran colaboración en la revisión y solución de problemas durante el trayecto del mismo.

Mi más grande gratitud a todos quienes sin dudar confiaron en mí y brindaron sus conocimientos, consejos, amistad dentro y fuera de aulas.

Galo Ernesto Martínez Cepeda

iii

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

CERTIFICACIÓN

Certifico que el presente Proyecto “Implantación de microorganismos ruminales de ganado bos indicus (Brahman), en terneros bos taurus (Holstein), de 10 días a 6 meses de edad”, fue realizado en su totalidad por el Sr. Galo Ernesto Martínez Cepeda, como requerimiento parcial para la obtención del título de Médico Veterinario y Zootecnista.

Guayaquil, Julio 2011

_______________________________ Dr. Oscar Macías Director de Tesis

_______________________________ Dr. Alfredo Mite Vivar Examinador Principal

_______________________________ Dr. Julio Decker Examinador Principal

_______________________________ Dr. Mauro Loor Macías Examinador Suplente

iv

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ÍNDICE

Capítulos

Páginas INTRODUCCIÓN………………………………………………………..1

I.

OBJETIVOS……..…………………………………………………….…5 A. Objetivo General ……………………………………….…….5 B. Objetivos Específicos …………………………….………….5

II. III.

HIPÓTESIS ………………………………………………………………6 MARCO TEÓRICO…………..………………………………………….7 A. Microorganismos ruminales de los bovinos……………………7 B. Factores que influyen en la microbiota ruminal………………13 C. Fisiología Digestiva del Adulto…………………………….…21 D. Digestión Ruminal………………………………………….....33

IV.

MATERIALES Y MÉTODOS ………………...……………………….49 A. Localización del ensayo ...……….………………...……………49 B. Materiales utilizados en el ensayo ………………..…………… 50 C. Metodología del Trabajo …...……….…………………………54 a. Del esparcimiento ...…...………………………54 b. Población o Muestra ……..……………………..54 c. Desarrollo Experimental …..…..………………..55 d. Formas de recopilar datos ...…………………… 57

v

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

e. Recolección de Datos …….....……………….… 58 f. Diseño Experimental ..…..……...………………59 V. RESULTADOS EXPERIMENTALES …….………...………..……….61 A. EVALUACIÓN DEL AUMENTO DE LA CONVERSIÓN

ALIMENTICIA Y GANANCIA DE PESO………...………………61 B. AMINORACIÓN DE LA INCIDENCIA DE DIARREAS

CAUSADAS POR PATÓGENOS DE LA ZONA DE SANTO DOMINGO DE LOS TSÁCHILAS…………..……………………69 C. ANÁLISIS DE LA PRODUCCIÓN DE LEUCOCITOS DE LOS BOVINOS, MEJORANDO LAS DEFENSAS DEL SISTEMA INMUNITARIO……………………………………………………72 D. IDENTIFICACIÓN DE LA EDAD IDÓNEA PARA LA

IMPLANTACIÓN DE FLORA

RUMINAL EN TERNEROS DE

RAZAS LECHERAS DE LA ZONA DE SANTO DOMINGO DE LOS TSÁCHILAS…………………………………………………..75 E. ANÁLISIS DEL TIEMPO MÁXIMO DE PREVALENCIA DE UN CULTIVO DE MICROORGANISMOS RUMINALES,

ELABORADO DE FORMA ARTESANAL…………..………..…..83 VI. CONCLUCIONES Y DISCUSIÓN……………...……………………..84 A. CONCLUCIONES……………………………………………..……84 B. DISCUSIÓN………………………………………………………..86 VII. VIII. RECOMENDACIONES .….……………………………………………88 RESÚMEN……………………………………. ……………………….89

vi

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

IX. X.

BIBLIOGRAFÍA ………………………………...………………..……91 ANEXOS………………………………………………………………..95

vii

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

INTRODUCCIÓN

En la actualidad en el mundo todos los productores de ganado bovino buscan el máximo desempeño de sus animales en producción, ya sean estos destinados para la producción de leche o de carne.

La magnificación de la producción en las haciendas ganaderas por lo general va de la mano de la cantidad de animales y del espacio físico que la misma tenga. Pero en sí, ¿Que hace que un animal produzca más? ¿Es la alimentación?, claro que sí, todo animal bien alimentado y con una dieta de alta producción, sumándole su buena genética, elevara su índice de producción al máximo de su capacidad.

¿Pero que hace que esa alimentación sea aprovechada al máximo?, por lo general son desapercibidos, pero no por eso, dejan de ser importantes. Las bacterias, protozoarios y hongos que se encuentran en la fauna ruminal de los bovinos son sumamente importantes ya que ellas son las encargadas de desdoblar los carbohidratos, lactato, grasas, proteínas, metano y urea.

El ganado bovino al ser un rumiante necesita estrictamente la ayuda de microorganismos para la digestión del alimento que estos ingieran; los bovinos al nacer, no poseen la capacidad de un rumiante adulto, ya que la misma es obtenida a través del tiempo en su etapa de crecimiento, específicamente desde la tercera a sexta semana de edad, que empiezan a comer pequeñas cantidades de pasto, en el cual también de forma involuntaria empiezan a ingerir las bacterias, protozoarios y hongos que a futuro conformarán su flora ruminal.

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Los animales jóvenes representan uno de los mayores problemas en las explotaciones ganaderas, pues en este momento es cuando se deben sentar las bases para su correcto crecimiento, porque es la etapa más delicada de su desarrollo.

A los problemas que tiene este periodo de crecimiento en los bovinos, específicamente en los terneros, se añade el desarrollo de las porciones anteriores y posteriores del aparato digestivo, hasta lograr las dimensiones y proporciones que tendrán en su vida adulta. Esto produce un gran número de cambios anatómicos y fisiológicos de todos los divertículos gástricos.

Así la capacidad del rumen (Divertículo Ruminal) frente al abomaso (Divertículo Ruminal) aumenta, más de veinte veces desde el nacimiento hasta la sexta semana de vida. Sin embargo, el desarrollo anatómico que sucede con la edad tiene poco efecto sobre el desarrollo de las papilas Ruminales y por lo tanto, la función principal del retículo rumen, que es la encargada de la absorción de nutrientes, principalmente de AGV’s (Ácidos Grasos Volátiles) que aportan el mayor porcentaje energético para los animales.

El ganado de la zona del trópico es por lo general Bos indicus ya que son más rústicos, resistentes a las inclemencias del clima y a la escases de alimento, son animales que con el pasar de los años se han adaptado a sacar el máximo de provecho de los alimentos que estos ingieren, hablando prácticamente el ganado de raza Brahman, son los animales que mejor se han adaptado a la zona del litoral ecuatoriano; partiendo de esta idea, el presente trabajo está enfocado en el estudio de la flora ruminal de los rumiantes del litoral específicamente de la zona de Daule, para

2

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ser aplicada en bovinos Bos taurus de la raza Holstein de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas, los cuales son animales que por lo general no tienen carestía de alimento, ya que la zona provee del mismo durante todo el año gracias a su buen clima y características geográficas.

Los microorganismos ruminales vivos, al ser introducidos en el tracto digestivo mejoran las condiciones y la eficiencia de la microflora. En el caso particular de los rumiantes, las bacterias del rumen descomponen los alimentos y extraen de ellos los nutrientes necesarios para desarrollar los procesos fisiológicos.

Los rumiantes se caracterizan por poseer la capacidad para alimentarse de los pastos y forrajes, esta característica se basa en la posibilidad de poder degradar los hidratos de Carbono estructurales del forraje, como celulosa, hemicelulosa y pectina, muy poco digestible.

La digestión del alimento se realiza mayoritariamente por digestión fermentativa y no por acción de enzimas digestivas. Los procesos fermentativos son realizados por diferentes tipos de microorganismos, a los que los rumiantes alojan en sus divertículos estomacales. Por esta razón debemos de tener presente que al alimentar a los rumiantes, primero estamos alimentando a los microorganismos Ruminales, y para su buen desarrollo, tiene que haber un medio Ruminal favorable para ellos; de esta forma hay una simbiosis entre bacterias y el animal.

Es posible mejorar la alimentación de los rumiantes mediante la utilización de pastos y forrajes, además del uso de residuos de cosecha como arroz (Alta

3

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

producción en la zona de Daule), yuca, maíz, que son desperdiciados en las fincas; igualmente forrajes como caña de azúcar, guandul y otras leguminosas que son alimentos ricos en nutrientes.

Una vez que se haya cumplido con el requisito de “llenar” al animal, es decir cuando este ha comido el alimento más voluminoso, que también es el menos nutritivo, se podrá mejorar la calidad, usando pequeñas cantidades de subproductos de origen vegetal como salvado de arroz o semilla de algodón, que van a ayudar a los animales a aumentar la producción de leche y carne, y mantener o ganar peso vivo y mejorar la reproducción, aun en las épocas críticas, a un costo que mejore las utilidades al productor.

4

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

I. OBJETIVOS

1.1

OBJETIVO GENERAL:

1.1.1. Comprobar que los microorganismos de la flora ruminal del ganado de la zona de Daule, tienen mejor capacidad desdobladora y sintetizadora de los alimentos, que los microorganismos de los bovinos de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas.

1.2.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

1.2.1. Evaluar el aumento de la conversión alimenticia y ganancia de peso. 1.2.2. Aminorar la incidencia de diarreas causadas por patógenos de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas. 1.2.3. Favorecer la producción de leucocitos de los bovinos, mejorando las defensas del sistema inmunitario. OTROS OBJETIVOS OBTENIDOS: 1.2.4. Identificar la edad idónea para la implantación de Flora Ruminal en Terneros de Razas Lecheras de la Zona de Santo Domingo de los Tsáchilas. 1.2.5. Establecer el tiempo máximo de prevalencia de un Cultivo de Microorganismos Ruminales, elaborado de forma Artesanal.

5

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

II.

HIPÓTESIS

2.1. HI: Si se logra comprobar que los microorganismos ruminales de la zona de Daule, son mucho más eficientes que los microorganismos ruminales de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas, podremos promover la utilización de los mismos, a ganaderos, para mejorar la capacidad productiva de los bovinos de la zona.

2.2. HO: Si no logramos comprobar que los microorganismos ruminales de la zona de Daule son mucho más eficientes que los microorganismos de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas, quedará acentuado en el mejor de los casos, que la flora ruminal de diversas regiones no altera los índices de productividad de los bovinos.

6

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

III.

MARCO TEÓRICO

3.1. MICROORGANISMOS RUMINALES DE LOS BOVINOS

BACTERIAS

Las bacterias son microorganismos unicelulares (procariotas) sin núcleo definido y pared celular formada por peptidoglicanos. Las bacterias son los microorganismos más abundantes en el complejo retículo-rumen. Existen alrededor de 10 billones de células bacterianas por gramo de contenido ruminal y alrededor de 200 especies que son responsables de la mayor degradación de las nutrientes de los alimentos. En el complejo retículo-rumen las bacterias se clasifican por su forma o afinidad por el sustrato.5

Las bacterias son responsables de hidrolizar o degradar las macromoléculas que componen los sustratos presentes en los alimentos, como celulosa, hemicelulosa, almidón, grasas / aceites, y pectina. El producto final de la fermentación de los carbohidratos lo son mayormente ácidos grasos volátiles (AGV’S, acético, propiónico y butírico) los cuales representan la principal fuente de energía para el rumiante. Después de su producción en el rumen los AGV’S son absorbidos a través de la pared ruminal y transportados al hígado, órgano donde se metabolizan o son distribuidos a los diferentes tejidos del cuerpo (tejido adiposo, tejido muscular,

7

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

glándula mamaria). De la degradación de proteínas y otros compuestos nitrogenados las bacterias ruminales producen amoníaco que es utilizado por los mismos microorganismos para producir proteína microbiana. El exceso de amoníaco es absorbido a través de las paredes del rumen y convertido en urea en el hígado. Parte de la urea se recicla a través de la saliva, mientras que el exceso de la misma se transporta al riñón y es eliminado por la orina.17 Durante la degradación de proteínas y carbohidratos en el retículo-rumen las bacterias también producen como resultado de su metabolismo calor y gases (CO2, CH4) que representan una pérdida energética para el animal. La degradación de lípidos (grasas y aceites) en el complejo retículorumen incluye la lipólisis (hidrólisis de la molécula formada por glicerol y ácidos grasos) y el proceso de biohidrogenación o biosaturación, en que los ácidos grasos no saturados (presentes en grasas blandas) se transforman en saturados (presente en grasas duras), lo que explica la dureza de la grasa corporal del rumiante.6

8

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

PROTOZOARIOS Los protozoarios son microorganismos unicelulares (eucariotas), pertenecientes al reino Protista, que tienen cilios como medio de locomoción. Como parte de la microflora ruminal están los protozoarios, microorganismos simples, microscópicos (15 a 250 μm de largo y 10 a 200 μm de ancho), predominantemente unicelulares y con núcleo diferenciado. En el complejo retículorumen se pueden encontrar hasta un millón de protozoarios suspendidos por mililitro de líquido ruminal, lo cual puede representar hasta un 50 % de la biomasa ruminal. Los protozoarios participan en el proceso de fermentación en el complejo retículorumen utilizando mayormente sus cilios como medio de locomoción y el mecanismo de adhesión para la degradación de sustratos. La clasificación de los protozoarios ruminales también se basa en su morfología y su afinidad al sustrato que degradan (localización de cilios, celulolíticos, amilolíticos, proteolíticos).2

9

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Del mismo modo que las bacterias, los protozoarios participan activamente en la degradación de celulosa y sus derivados, hemicelulosa, almidón y proteínas. La actividad amilolítica es de gran importancia para estos organismos. Los protozoarios digieren el almidón y como producto final del metabolismo producen ácidos grasos volátiles, lactato, formato, H2 y CO2. Por otro lado tienden a tener una actividad indirecta sobre la celulosa, ya que degradan con mayor facilidad los derivados de ésta. Además, utilizan la proteína suspendida en el líquido ruminal para producir amoníaco, que las bacterias degradadoras de celulosa utilizan como fuente de nitrógeno para su crecimiento. La presencia de los protozoarios (microfauna) en el retículo rumen se asocia tanto con ventajas como desventajas para el ecosistema microbial, en comparación con una situación de bacterias (microflora) únicamente.10

HONGOS Los hongos son microorganismos eucariotas, heterótrofos que poseen paredes celulares engrosadas con quitina. La microflora ruminal cuenta también con hongos microscópicos que ayudan en la digestión de los alimentos. Se clasifican dentro del Fylum Chytridomicota del reino Fungae. Los hongos fueron el último tipo de microorganismo ruminal en ser

10

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

descubierto por lo que su modo de acción para hidrolizar las partículas de alimento no está bien documentado.20 Los hongos ruminales constituyen alrededor del 8% de la biomasa microbiana y se estima que la población de zoosporas tiene una densidad de 10.000 - 1.000.000 de células por mililitro. Se han identificado 6 géneros en el retículo rumen. En su fase móvil (zoospora) estos microorganismos se reconocen por la presencia de un flagelo (Figura A) que los ayuda a desplazarse en el líquido ruminal hasta llegar a una partícula de alimento. Una vez en contacto con el alimento los hongos se enquistan (Figura B) formando un rizoide ramificado (Figura C) que penetran y debilitan la pared celular de la partícula de forraje. A partir de este momento comienza la formación de su fase vegetativa no móvil (esporangio), que produce nuevos zoosporas (Figura D). 3

11

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

IMPORTANCIA DE LOS HONGOS DEL RUMEN

A pesar que las bacterias y los protozoarios están presentes en mayor cantidad y son responsables de la mayor parte de la degradación de los alimentos, los hongos tienen importancia en la digestión de los alimentos fibrosos durante las primeras 5 horas después de consumidos. Los hongos del rumen producen un complejo enzimático capaz de degradar la fibra al igual o mejor que las principales bacterias celulolíticas, incluso siendo capaz de disolver parte de la lignina. Según los científicos, la función principal de los hongos es debilitar las estructuras de algunos tejidos de la planta incrementando la superficie disponible para la digestión bacteriana, mejorando así la efectividad de la rumia y degradabilidad de la fibra.

En términos prácticos, ciertos cultivos de levaduras (forma de hongos) se utilizan como aditivos comerciales para mejorar la fermentación ruminal. Estos se designan “Direct Fed Microbes” o “microorganismos alimentados directamente” y se les asocia con capacidad fibrolítica o degradativa de paredes celulares (e.i. celulosa, hemicelulosa), siendo Saccharomyce cerevisiae y Aspergillus niger las levaduras más utilizadas para este propósito. 9

12

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

3.2. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL EQUILIBRIO DE LA MICROBIOTA RUMINAL.14

13

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FISIOLOGÍA RUMINAL DE UN TERNERO

El ternero nace con su aparato digestivo adaptado a una dieta láctea, y por lo tanto, propia de un no-rumiante. Por esta razón los DE, no funcionales, son pequeños al nacimiento y el cierre de la gotera esofágica desvía la leche directamente al abomaso. La gotera esofágica es una estructura anatómica que conecta el esófago con el abomaso. Bajo condiciones normales de alimentación los DE se van desarrollando mientras se hacen funcionales (Tabla 1).1

Tabla 1 - Capacidades relativas de las divisiones del estómago del ternero en función de la edad, expresadas como porcentaje de la capacidad gástrica total.

El desarrollo de los DE suele dividirse en tres períodos: 1- Entre el nacimiento y las tres semanas de vida. El animal es “lactante”, posee sólo capacidad de digerir leche y depende de la absorción intestinal de glucosa para mantener un valor de glucemia, que es semejante al de un no rumiante (alrededor de 1 gr/l). 2- Entre las tres y las ocho semanas de vida. Es un “período de transición” durante el cual el animal comienza a ingerir pequeñas cantidades de alimento sólido y se van desarrollando gradualmente los DE. Los valores de glucemia comienzan a disminuir

14

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

mientras aumenta la concentración plasmática de ácidos grasos volátiles (AGV), especialmente acetato (C2), propionato (C3) y butirato (C4).

3- A partir de las ocho semanas de vida. Los DE están bien desarrollados y permiten una digestión fermentativa propia del “rumiante adulto”. I - Fisiología digestiva del lactante

Como se menciono anteriormente el ternero nace con la capacidad de digerir leche y sólo por métodos enzimáticos y no fermentativos. Por esta razón los DE no son funcionales durante esta etapa. La leche pasa directamente desde el esófago al abomaso gracias al cierre de la gotera esofágica.13

APORTE DE LA LECHE PARA NUTRIR AL LACTANTE

La leche posee una cantidad relativamente constante de lactosa (alrededor del 4,5 %), y concentraciones más variables de proteínas (entre 3 y 4,5 %) y grasa (entre 3 y 5 %), que varían principalmente por diferencias entre razas o por el momento de la lactancia. El agua y los electrolitos completan su composición. La lactosa es un disacárido formado por glucosa y galactosa. Las proteínas de la leche incluyen a las caseínas en un 80 %, mientras que el resto son alfa y beta albuminas, betaglobulinas. Los ácidos grasos representan el principal componente de la grasa, y son liberados principalmente como triglicéridos y secundariamente como fosfolípidos y ácidos grasos libres.

El cierre de la gotera esofágica es responsable del comportamiento digestivo del neonato.

La gotera esofágica es una invaginación, a manera de canal, que atraviesa la pared del retículo, extendiéndose desde la desembocadura del esófago hasta el

15

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

orificio retículo-omasal. Al ser estimulada, los músculos de sus labios se cierran creando un canal casi perfecto que conecta el cardias con el canal omasal, y de este modo el calostro o la leche no caen al retículo-rumen donde causarían fermentaciones indeseadas, sino que llegan directamente al abomaso donde se inicia su digestión.

El cierre de la gotera esofágica responde a un arco reflejo que se origina en respuesta a estímulos centrales y periféricos. El acto de succionar la mama o la mamadera, o aún el observar la mamadera o la preparación del alimento, inician este reflejo. Por otro lado existen receptores en la faringe que responden a los componentes químicos de la leche, como lactosa, proteínas y minerales, y a su temperatura. Dichos estímulos son transmitidos al centro bulbar especialmente por el nervio trigémino.

Las fibras eferentes son vagales y actúan estimulando los labios de la gotera e inhibiendo la motilidad de los divertículos. Recientemente se ha demostrado que durante el mamado se libera polipéptido intestinal vasoactivo (PIV) que relaja el esfínter retículo-omasal. La distensión abomasal inhibe el reflejo de contracción de la gotera esofágica. La adrenalina, que actúa relajando la musculatura de la gotera, también inhibe el reflejo de cierre. Estos factores deben tenerse en cuenta en la alimentación artificial de los terneros, a fin de evitar el suministro de una cantidad excesiva de leche, o de hacerlo bajo condiciones estresantes, que provoquen el pasaje de leche al retículo-rumen.

El reflejo de cierre de la gotera esofágica, propio del lactante, se va perdiendo con el desarrollo del rumiante. Sin embargo ciertos factores pueden estimularlo en el adulto. Uno de ellos es la hormona antidiurética (ADH), liberada desde la

16

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

neurohipófisis en respuesta a la deshidratación o al aumento de la osmolaridad del plasma. Esto se debería a que, ante la necesidad de incorporar agua rápidamente al organismo, la ADH estimula el reflejo para que el agua llegue directamente al duodeno donde será absorbida. Estimulan también este reflejo en animales adultos las soluciones salinas de sodio en bovinos o de sulfato de cobre en ovinos.

A nivel abomasal la leche se coagula, reteniendo caseína y triglicéridos.

El ternero obtiene la leche por succión de la mama. Este acto asegura un adecuado cierre reflejo de la gotera esofágica. En cada toma de leche consume alrededor de 200 ml y lo repite 10 a 15 veces por día. En el abomaso la leche se coagula en pocos minutos por acción de la enzima renina, fermento lab o cuajo. La renina genera el coágulo al convertir la caseína soluble en una red de paracaseinato de calcio, que a su vez retiene los glóbulos grasos. Este coágulo se retrae en pocos minutos y segrega una serie de componentes que representan el "suero de la leche". Este suero vehiculiza la lactosa y las proteínas solubles hacia el intestino. La lactosa es degradada en glucosa y galactosa por una lactasa ubicada en los enterocitos y luego absorbida. El enterocito posee también peptidasas que degradan las proteínas menores que ingresan con el suero de leche y algunas de menor peso molecular son absorbidas sin degradación previa. Esto demuestra la existencia de una buena actividad digestiva intestinal de mucosa, que se contrapone a la baja capacidad secretoria del páncreas y del hígado, lo cual reduce la capacidad proteolítica y lipolítica en el lumen intestinal. Esta situación remarca la importancia de la coagulación y retención de la caseína y los triglicéridos en el abomaso, ya que si ambos componentes de la leche pasaran al intestino no sólo no serían bien digeridos sino que además, y en consecuencia, generarían un arrastre osmótico de agua.

El coagulo retenido sufre la acción proteolítica de la renina que lentamente va liberando péptidos que pasan al abomaso y siguen la citada digestión de mucosa. La

17

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

actividad lipolítica recae en la lipasa salival que libera principalmente monoglicéridos y ácidos grasos libres que serán absorbidos por los enterocitos. Cada coágulo tarda alrededor de 12 hs en ser completamente degradado, por lo cual en abomaso coexisten coágulos de diferente tamaño.

El calostro posee componentes no nutricionales que complementan la composición de la leche al momento del parto

El calostro es la primera secreción láctea de la madre. Posee componentes nutricionales semejantes a la leche, aunque más concentrados, pero agrega otros no nutricionales de vital importancia. Se destacan las inmunoglobulinas que representan la principal fuente de transferencia pasiva de inmunidad desde la madre, ya que la vía placentaria es de menor importancia en el rumiante. La capacidad del intestino de absorber las inmunoglobulinas se pierde gradualmente durante el primer día de vida, por lo cual resulta vital el consumo de calostro apenas nace el ternero (Tabla 2).

Tabla 2: Variación de porcentual de inmunoglobulinas (Ig) en plasma en función del tiempo que tarda el ternero en tomar calostro por primera vez.

FISIOLOGÍA DIGESTIVA DURANTE EL PERÍODO DE TRANSICIÓN DE LACTANTE A RUMIANTE

La transición de lactante a rumiante implica para el ternero una serie de pasos adaptativos. Estos incluyen cambios en la morfología y funcionalidad del aparato

18

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

digestivo, el desarrollo de la flora microbiana normal y también cambios metabólicos.

El desarrollo del aparato digestivo es variable y depende del tipo de dieta. Los valores de la (Tabla 1) corresponden a terneros con acceso a alimento sólido, sin embargo si el animal se mantiene con una dieta exclusivamente líquida llega a las 13 semanas de vida, o aun más, con sus DE aún rudimentarios, de modo que el abomaso representa aún el 30 % de la capacidad gástrica total. Esto remarca la importancia que posee la estructura física del alimento como estímulo para el desarrollo de la capacidad relativa del retículo-rumen y de su pared muscular. A modo de ejemplo, la capacidad de un bovino de 13 semanas alimentado con forraje es de 42 litros, mientras que uno de la misma edad alimentado con concentrado es de 30 litros solamente. El desarrollo de las papilas ruminales depende en cambio de la concentración de AGV, como mecanismo adaptativo para aumentar la superficie para su absorción (Figura 1) 16

El ternero nace con una flora bacteriana que se desarrolla junto con la funcionalidad de los DE. Durante la primera semana pueden encontrase en los DE

19

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

primitivos bacterias celulolíticas, y durante las tres primeras semanas aumenta la flora productora de lactato, y recién hacia la sexta semana están presentes todas las especies propias del adulto. La flora intestinal también cambia pero dependiendo del calostrado, ya que predominan antes especies como E. coli, Streptococos y Clostridium welchii, mientras que luego del calostrado predominan los lactobacilos. El desarrollo inicial de flora lactogénica en el rumen se debe al escape esporádico de leche desde la gotera esofágica, que propicia temporales descensos de pH en un rumen totalmente involucionado. Esto retrasa el establecimiento de los protozoos que son muy sensibles al pH ácido. Por esta razón los protozoos tardan semanas en establecerse, y a diferencia de las bacterias necesitan del "contagio" desde otro adulto, situación que se genera especialmente por el consumo de agua o alimento contaminado. Si este contagio no ocurre, los rumiantes pueden vivir años sin desarrollar su fauna ruminal.

La capacidad de rumiar también aumenta, desde 3 períodos diarios de 15 minutos cada uno a las dos semanas de vida asciende a 12 por día de 23 minutos a las 5 semanas y adquiere la capacidad total recién a los tres meses. La masticación se hace a su vez más efectiva, disminuyendo el tamaño de cada bolo pero aumentando el número de bolos masticados, de menor tamaño y con mayor fuerza de masticación.

Desde el punto de vista metabólico la principal fuente energética que se absorbe pasa de ser la glucosa a los AGV, lo cual genera cambios metabólicos que incluyen una activa gluconeogénesis y la alternativa de emplear acetato directamente como fuente energética o cetogénica.
15

20

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

3.3. FISIOLOGÍA DIGESTIVA DEL ADULTO

ACCION MECANICA DEL ESTOMAGO DE LOS RUMIANTES Para poder mantener la homeostasis del medio ruminal los divertículos estomacales requieren de una delicada regulación de su motilidad.7

La digestión fermentativa depende del normal desarrollo de los microorganismos que la realizan. Por esta razón, el rumiante crea y mantiene a nivel retículo-ruminal las condiciones ideales para su crecimiento y multiplicación, convirtiéndose en un “gigantesco medio de cultivo líquido”. Las condiciones retículo-ruminales para el desarrollo de los microorganismos incluyen: aporte de nutrientes, anaerobiosis, pH, presión osmótica, temperatura, fácil acceso de los microorganismos al alimento y eliminación de los productos de desecho de este sistema.8

Aporte de nutrientes. Debe tenerse en cuenta que la nutrición del rumiante depende de la nutrición de su micropoblación ruminal. Esta degrada parcial o totalmente los componentes de la dieta, por lo cual puede aceptarse que en realidad se está alimentando al rumen para que luego éste alimente al rumiante.

Anaerobiosis. El metabolismo anaerobio de los microorganismos ruminales es el factor responsable de la simbiosis con el rumiante. Al no utilizar oxígeno los microorganismos ruminales dependen de la vía glucolítica para la obtención de energía. Para comprender este punto puede ser necesario repasar las vías metabólicas que le permiten a una célula aerobia obtener energía del alimento. Por la vía glucolítica a partir de glucosa (686 Kcal/mol) se obtienen 2 ATP (14.6 Kcal/mol),
+

NADH + H (que originará 3 ATP en cadena respiratoria) y piruvato (que aún

21

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

conserva el 93 % de la energía de la glucosa). El piruvato es convertido en acetilCoA, que ingresa al ciclo de Krebs para producir energía, generando como productos finales de la cadena respiratoria CO y agua, los cuales ya no poseen energía que
2

aportar. Vale decir que si los microorganismos ruminales tuvieran un metabolismo aerobio consumirían toda la energía que posee esa glucosa. Al no poder utilizar el oxígeno, obtienen energía sólo de la producción de ATP durante la vía glucolítica,
+

dejando como productos finales de su metabolismo NADH + H , que al no existir cadena respiratoria no puede aportar energía, y piruvato, que debido a las diferencias en las vías metabólicas microbianas, es convertido en otros ácidos de cadena corta, como el acetato, el propionato y el butirato. Estos AGV, que como ocurre con el piruvato conservan gran parte de la energía de la glucosa, si bien son productos de desecho para los microorganismos representan la principal fuente energética para el rumiante.

pH. Cada microorganismo posee un rango de pH óptimo para desarrollarse. La flora normal del rumen desarrolla en un rango de pH de 5,5 a 6,9. Fuera de éste, el pH extremo favorece el desarrollo de otros microorganismos que alteran el patrón
+

metabólico del rumen y enferman al rumiante. La cantidad de H producido va a depender del tipo de dieta y el tipo de microorganismo que fermente dicho nutriente. Lo cual determinara también la “eficiencia” de ese alimento debido a la producción de metano y tipo de AGV. Esto se explicar con más detalle en la parte de regulación del pH.

Presión osmótica. El contenido ruminal mantiene una presión osmótica semejante a la tisular (alrededor de 300 miliosmoles/litro), para evitar pérdidas desmedidas de agua desde el líquido intersticial hacia el rumen o viceversa.

22

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Usualmente la presión osmótica se mantiene en 280 mOsm/l incrementándose en el período post-prandial por la mayor producción de AGV.

Temperatura. Es otro de los factores que condicionan el desarrollo bacteriano. Producto de las reacciones químicas dentro del rumen y de la regulación homeotérmica del rumiante, la temperatura ruminal se mantiene entre 38 y 42 °C.

Fácil acceso del microorganismo al alimento. El sustrato estará disponible para el microorganismo cuando se incorpore al medio líquido, lo que explica porqué los componentes solubles del alimento son los primeros en estar disponibles y ser atacados por los microorganismos. Los componentes insolubles deberán ser triturados hasta tener un tamaño lo suficientemente pequeño como para humectarse e incorporarse al medio líquido ruminal, permitiendo que los microorganismos de la fase líquida del contenido ruminal tengan acceso a estos sustratos.

Eliminación de los productos de desecho del metabolismo ruminal (AGV,
+

gases y alimento no digerido). Los AGV e H deben ser retirados del rumen, de otro modo su acumulación excesiva aumentaría la presión osmótica y disminuiría el pH a valores nocivos. Los AGV son retirados por absorción a través de las paredes del
+

rumen. Y el H es eliminado tras la formación de metano. Un bovino produce diariamente cientos de litros de gas, especialmente CO y metano, que deben ser
2

eliminados por eructación. La fracción de la dieta que no pudo ser digerida debe continuar su tránsito por el aparato digestivo. La tasa de pasaje del contenido ruminal varía dependiendo de la dieta. El tiempo medio de retención en el retículo-rumen varía de 10 a 24 horas para el agua y los elementos solubles (en esta categoría se incluyen los microorganismos), mientras que aquellos insolubles de alta o baja

23

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

digestibilidad poseen una vida media aproximada en el rumen de 30 y 50 hs respectivamente. Aunque, si el material posee alto contenido de lignina, la cual no es degradable por las bacterias, el pasaje se acelera. De esa forma se vacía el rumen, teniendo posibilidad del ingreso de nuevos alimentos. El flujo de microorganismos, junto al alimento no digerido hacia el abomaso, evita la sobrepoblación ruminal.

Para poder cumplir las funciones mencionadas, de las cuales depende la actividad fermentativa y en consecuencia la propia nutrición del rumiante, los DE poseen una actividad motora controlada. Este control lo realiza un centro nervioso ubicado en el núcleo vagal, en dorsal del tallo cerebral (bulbo raquídeo). Este centro recibe información de receptores ubicados en los DE, encargados de controlar los parámetros ruminales más importantes. Estos incluyen:

a) Receptores de estiramiento: Informan sobre el tamaño o grado de distensión del rumen. Consisten en terminaciones nerviosas ramificadas en la pared retículoruminal que se estimulan al distenderse y ocasionan un aumento de las contracciones ruminales y de la rumia. Esta respuesta tiene como fin estimular el mezclado, la disgregación del contenido y especialmente la progresión de éste hacia el abomaso. Sin embargo cuando el grado de distensión es excesivo, como ocurre durante el timpanismo (distensión del retículo-rumen por incapacidad para evacuar los gases por eructación), se detiene la actividad ruminal (atonía).

b) Receptores de tensión: Ubicados especialmente en los pilares, captan la resistencia para introducirse en el estrato sólido del contenido ruminal e informan sobre su consistencia. Esta depende de la dieta, de modo que cuando el rumiante consume principalmente material fibroso, como pasto seco por ejemplo, se forma un grueso estrato sólido y de alta resistencia al mezclado, que estimula estos receptores ocasionando un aumento de la motilidad retículo-ruminal y de la rumia.

24

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

c) Receptores de pH: La continua producción de AGV hace que el pH ruminal sea normalmente ácido. Dentro del rango fisiológico (5,5 a 6,9) a medida que el pH desciende se incrementa la motilidad ruminal, lo cual favorece el mezclado y por lo tanto la absorción de los AGV, que al abandonar el retículo-rumen permiten que el pH vuelva a elevarse. Sin embargo, cuando el pH abandona el rango normal la depresión motora es grave, con atonía ruminal a pH superior a 7 e inferior a 5.

d) Receptores de presión osmótica: Aunque con menor sensibilidad que para el pH los DE responden a cambios en la presión osmótica. Los aumentos moderados estimulan la motilidad, sin embargo cuando el aumento es excesivo el retículo-rumen responde con una disminución en la motilidad y finalmente atonía.

Si bien los DE poseen plexos nerviosos intrínsecos bien desarrollados, requieren de la inervación vagal para realizar una actividad motora coordinada. Cuando se cortan los nervios Vago se observa una disminución en la motilidad de la musculatura ruminal, que regresa en unos cuantos días. Sin embargo debido a que la motilidad que se presenta luego de la vagotomía presenta características erráticas y poco coordinadas que son incapaces de hacer progresar el contenido, los rumiantes vagotomizados no sobreviven. 4

El peso específico del contenido retículo-ruminal determina su estratificación.

Para comprender el efecto del movimiento de mezcla y propulsión es importante conocer la disposición del contenido retículo-ruminal. Este se encuentra estratificado en función de su peso específico, por lo cual, de dorsal a ventral, se distinguen 4 zonas o estratos: una cúpula de gas, una zona sólida, una fangosa o semilíquida y finalmente una zona líquida (Figura 2).

25

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

En la cúpula se acumulan los gases de la fermentación, especialmente metano (CH ) y CO (Tabla 3). En la zona sólida se ubica el forraje grosero, recientemente
4 2

consumido y fragmentado sólo por la masticación ingestiva. Presenta fibras grandes, desde 1 a 2 cm de largo, sobre las cuales han comenzado los procesos fermentativos y la producción de gas, que se mezcla con los trozos de forraje formando esta capa de bajo peso específico. En la zona fangosa, desde la cual se toma contenido para ser rumiado (zona de eyección), el forraje posee un tamaño menor lo que posibilita que se humecte mejor y adquiera mayor peso específico. En la zona líquida el contenido se encuentra finamente triturado y bien humectado, ocupa la parte inferior del rumen y desde este estrato será seleccionado el contenido ruminal que progresará hacia el omaso desde la llamada zona de escape. En esta zona el tamaño de la partículas de alimento es de 1 a 3 mm en ovinos y hasta 4 mm en bovinos, considerablemente más pequeñas que el diámetro del esfinter retículo-omasal, de alrededor de 2 cm en el adulto. Esto demuestra que es la citada estratificación, y no el tamaño, la responsable de seleccionar el material que abandona el rumen.

26

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

La motilidad retículo-ruminal permite la mezcla y progresión de su contenido, la eructación y la rumia.

En el retículo-rumen se repiten patrones de actividad motora con el fin de cumplir con cuatro funciones esenciales: la mezcla del contenido, que facilita el contacto entre el alimento y los microorganismos, promueve la absorción de AGV y ayuda a la fragmentación del alimento; la progresión del contenido hacia el omaso, seleccionando sólo la fracción del alimento que ha permanecido el tiempo necesario dentro del rumen; la expulsión de gases a través de la eructación; y la rumia, seleccionando para rumiar alimento del estrato fangoso.

En la actividad retículo-ruminal se identifican dos complejos motores denominados contracción primaria o ciclo A y contracción secundaria, eructativa o ciclo B. La contracción primaria produce a la vez la mezcla y la progresión del contenido y comienza con la contracción bifásica del retículo. Esta consiste en dos contracciones de la red, una parcial que reduce su luz a la mitad y una contracción total. La contracción parcial coincide con el cierre del esfínter retículo-omasal y sirve para volcar el estrato superior más grosero hacia el rumen por encima de la escotadura retículo-ruminal. Inmediatamente se produce la contracción total y el esfínter retículo-omasal se abre, permitiendo el pasaje del contenido de mayor peso específico hacia el omaso. La onda de contracción de la red se propaga por el rumen de craneal a caudal, tanto por el saco dorsal como por el ventral, pero en éste es más lenta y se refleja volviendo hacia craneal.

Con esta secuencia de contracciones el contenido ruminal se mezcla siguiendo un patrón de movimientos por el cual el contenido del saco dorsal del rumen gira y se mezcla en sentido antihorario, mientras que el contenido del saco ventral lo hace en

27

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

sentido horario. De este modo, el alimento que ya ha permanecido el tiempo suficiente en el rumen y que se encuentra en la fase líquida ingresa a la red por encima del pilar craneal, y será el contenido que progresará hacia el omaso en la siguiente contracción. (Figura 3)

Las contracciones secundarias o eructativas se presentan siempre a continuación de las primarias, aunque su aparición depende de la cantidad de gas que contenga el rumen. La acumulación de estos gases (meteorismo) pueden distender tanto el rumen que el animal muere por asfixia, debida a la compresión del diafragma. Esto demuestra la importancia del mecanismo de eructación. La eructación es un reflejo vago-vagal regulado por los centros gástricos del bulbo y que se inicia por estimulación de receptores que detectan la distensión del saco dorsal del rumen y la zona cardial así como la presencia de gas libre en el saco ciego caudo-ventral del rumen, en el cual queda retenido gas después de una contracción primaria. La contracción eructativa comienza en éste saco ciego, luego asciende al saco ciego caudo-dorsal y de allí se propaga hacia craneal por el saco dorsal del rumen, empujando de esta forma la burbuja de gas hacia el cardias. La eructación se completa con un ligero esfuerzo inspiratorio a glotis cerrada, que disminuye la

28

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

presión intraesofágica para facilitar el pasaje del gas hacia el esófago, que lo conduce hacia las fauces mediante una onda antiperistáltica. Parte del gas es aspirado hacia los pulmones y en parte absorbido, lo cual explica como algunas sustancias volátiles derivadas de la fermentación ruminal de cebollas o puerros alcanzan la glándula mamaria confiriéndole sabor desagradable a la leche.

El número de contracciones ruminales es un parámetro importante dentro de la revisación clínica de un bovino. Se registra por inspección o palpación en la fosa del ijar izquierdo, que se eleva al pasar una onda contráctil por el saco dorsal. Debido a que los movimientos no son regulares se recomienda tomar la frecuencia durante 5 minutos, con un rango fisiológico de 5 a 12 contracciones. Esta frecuencia está en relación directa a la actividad metabólica del rumen.

La rumia tiene por objeto reducir el tamaño del alimento y favorecer el ataque microbiano, mediante la remasticación del contenido ruminal grosero.

La rumia comienza con una contracción “extra” del retículo que precede a la contracción bifásica. A continuación se relaja el cardias y el animal hace una inspiración a glotis cerrada que reduce la presión intraesofágica (-20 a - 40 mm Hg), con la consiguiente distensión de su pared y el ingreso de alimento desde la zona de eyección. Una vez dentro del esófago, el bolo produce contracciones antiperistálticas que lo llevan hacia la boca donde es comprimido entre la lengua y el paladar para escurrir el líquido que es deglutido, mientras que el material sólido (forraje grosero) permanece en la boca para su remasticación e insalivación. La remasticación se realiza mediante movimientos laterales lentos, completos y enérgicos del maxilar inferior contra el superior. El tiempo de remasticación depende del tipo de dieta,

29

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

siendo como promedio de 40 a 60 segundos por bolo. Finalmente el bolo remasticado es deglutido y sus componentes se integran al contenido ruminal.

La rumia es un reflejo de tipo vago-vagal gobernado por centros gástricos del bulbo y por las áreas hipotalámicas anterior y ventral. Los estímulos que desencadenan la rumia nacen en zonas reflexógenas ubicadas en el retículo-rumen, especialmente en el esfínter esofágico inferior, pliegue retículo-ruminal y en el complejo formado por el pilar craneal y caudal del rumen. Estas zonas captan la textura del alimento por el roce de éste contra las zonas reflexógenas, su consistencia y el grado de distención del retículo-rumen.

El principal estimulante de la rumia es la propia estructura física del forraje, la cual depende del contenido de fibra de la dieta (elementos estructurales del vegetal, que necesitan ser triturados para posibilitar el ataque microbiano). Otro factor que favorece la rumia es el reposo psicosensorial. Los períodos de descanso y oscuridad, así como el hecho de que animal esté acostado, la somnolencia o los períodos de amamantamiento favorecen la rumia.18

EL OMASO COMPLETA LA ACTIVIDAD RUMINAL.

Las contracciones omasales son lentas y prolongadas comparadas con las del retículo. En el caso del bovino el omaso se contrae en forma bastante irregular e independiente. Sin embargo, en ovinos y caprinos las contracciones omasales están coordinadas con las reticulares y aparecen alrededor de 15 a 30 segundos después de la contracción bifásica reticular, finalizando cuando se inicia una nueva contracción del retículo.

30

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

El esfínter retículo-omasal posee también una acción coordinada, relajándose durante la contracción total de la red, permitiendo el ingreso de alimento al canal omasal. Tras la contracción reticular el esfínter retículo-omasal se cierra y el canal omasal se contrae, impulsando el contenido entre las hojas del omaso que se encuentra relajado. Posteriormente, tanto las hojas como la pared omasal se contraen triturando y propulsando el alimento hacia el abomaso.

MOTILIDAD DEL ABOMASO Y DEL DUODENO.

El abomaso, porción glandular del estómago de los rumiantes, tiene la peculiaridad de recibir alimento en forma continua desde los DE.

La porción proximal del abomaso posee escasa motilidad, sólo mantiene el tono muscular a la vez que se distiende por la llegada de alimento. Esta “relajación receptiva” permite a su vez que el líquido pase sobre el contenido sólido (percolación) y llegue rápidamente al duodeno. Por este mecanismo, igual a como ocurría en los DE, la velocidad de pasaje de los líquidos es mayor que para los sólidos, los cuales quedan en el abomaso para ser mezclados con el jugo gástrico. La motilidad del abomaso se reduce entonces a ondas peristálticas que se dirigen al píloro. Las más suaves comprenden al cuerpo y fondo del abomaso y se encargan de mezclar y acumular contenido gástrico en el antro pilórico. Una vez que el antro se ha llenado, el origen de las contracciones peristálticas se acerca al píloro y las contracciones sincronizadas del antro y del esfínter pilórico actúan como una bomba (bomba pilórica), que hace pasar parte del quimo al duodeno (acción de progresión), mientras que el resto regresa al fondo colaborando con su mezcla (acción de mezclado). Estas ondas de progresión no se presentan en forman continua, sino que son interrumpidas por cortos períodos de quietud, de 5 a 10 minutos, que se repiten 15 a 18 veces por día. El número de contracciones del antro no varía

31

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

significativamente de modo que las variaciones de flujo hacia el duodeno dependen esencialmente del volumen de quimo transportado en cada contracción. Una vez que el bulbo duodenal se ha llenado se inicia una contracción peristáltica que lleva el contenido hacia el yeyuno. La unión antroduodenal (antro y esfínter pilórico y bulbo duodenal) se comportan así como una unidad, sobre la que actúan mecanismos de regulación. Entre los que estimulan el vaciado gástrico se citan los neurotransmisores colinérgicos que aumentan el peristaltismo del antro y el péptido intestinal vasoactivo (VIP) que induce la relajación del esfínter pilórico. Por otro lado, la acidificación y la distensión duodenal moderada, así como la serotonina, la somatostatina y la bombesina, producen estimulación duodenal e inhibición de la actividad motora del antro, retardando el vaciamiento gástrico. Hay hormonas secretadas por el tracto gastrointestinal que disminuyen la motilidad del abomaso e intestino, retardando así el vaciamiento de los mismos. 17

32

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

3.4. DIGESTIÓN RUMINAL OBTENCIÓN DEL ALIMENTO Los bovinos pueden obtener su alimento de 2 formas ya sea por el pastoreo o por la suministración de alimento en los corrales por parte de los trabajadores de la Hcda. Por lo general las el mayor consumo de alimento se lo hace durante las horas de las mañanas y en las últimas horas de la tarde, con un lapso de 20 a 35 minutos durante las cuales descansan y se dedican a rumiar. 4 RUMIA La rumia es la regurgitación de la ingesta seguida de una remasticación, reensalivación y una nueva deglución. Esto logra disminuir el tamaño de partícula del alimento y aumentar la superficie para la fermentación microbiana. La rumia ocurre principalmente cuando el animal descansa y no come.

La gráfica anterior muestra el tiempo utilizado para pastorear y para rumiar. Se puede observar que los animales pastorean principalmente durante la mañana y rumian en la noche.

33

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

SALIVA Los rumiantes producen grandes cantidades de saliva en vacas adultas entre 100150 litros/día y 8.5-12.5 litros/día en los ovinos; además de sus cualidades conocidas, la saliva del rumiante posee funciones importantes: ♦ Mantiene un pH constante. Debido a que es rica en fosfatos y bicarbonatos tiene la facultad de actuar como amortiguador, controlando el efecto de los ácidos que se producen durante la fermentación. ♦ Es una fuente de nitrógeno no proteico (NNP). La urea sintetizada en el hígado es secretada en la saliva para nutrir a la microbiota ruminal.

DIGESTIÓN DE CARBOHIDRATOS Gracias a la microbiota ruminal los carbohidratos fibrosos como la celulosa y hemicelulosa pueden representar la fuente más importante de energía para los rumiantes. Las raciones carentes de fibra pueden conducir a desórdenes de la digestión.21 Estos carbohidratos fibrosos además son necesarios para: ♦ ♦ ♦ Estimular la rumia (la cual mejora la fermentación). Aumentar el flujo de saliva hacia el rumen. Estimular las contracciones ruminales.

34

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Cuando los carbohidratos de la dieta entran al rumen son hidrolizados por enzimas extracelulares de origen microbiano. En el caso de los carbohidratos fibrosos, el ataque requiere de una unión física de las bacterias a la superficie de la partícula vegetal, la acción de las enzimas bacterianas libera principalmente glucosa y oligosacáridos hacia el líquido ruminal por fuera de los cuerpos celulares microbianos. Estos productos no son aprovechados por el rumiante, en su lugar, son rápidamente metabolizados por la microbiota ruminal. La glucosa y otros azúcares son absorbidos por los microorganismos y una vez en el citosol se incorporan a la vía de la glucólisis. Este proceso enzimático da lugar a la formación de NADH+H (reducido), ATP y piruvato. La energía potencial representada por el ATP en este momento no es directamente accesible para el hospedero, pero representa la principal fuente de energía para el mantenimiento y crecimiento de los microbios.

35

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Si la digestión fermentativa ocurriera bajo condiciones aeróbicas, lo cual no sucede, el piruvato sería transformado en la mitocondria para generar CO2 , H2O y ATP a través del ciclo de Krebs, cadena respiratoria y ATPAasa, proceso que en su conjunto involucra la restauración de NAD (oxidado). Pero la digestión fermentativa no es un sistema aeróbico; por el contrario es un sistema altamente anaeróbico y reductor, por lo que se debe proveer de un mecanismo diferente para la restauración de NAD. Si no existiera este mecanismo, todos factores oxidados presentes podrían rápidamente reducirse y entonces el metabolismo bacteriano se detendría. Debido a que en el rumen no se encuentra oxígeno a la mano, otro compuesto es el que debe servir como el resumidero de electrones para la oxidación de los cofactores enzimáticos. 10 En la digestión fermentativa, el piruvato puede funcionar como el captador de electrones, sufriendo una reducción todavía mayor con el fin de proveer el material necesario para la regeneración del NAD y el retiro general del NADH+H, con una producción adicional de ATP. Además, el CO2 puede reducirse para formar metano aceptando electrones para la regeneración del NAD y de FAD. Este proceso transformador del piruvato da lugar a los productos terminales de la digestión fermentativa de los carbohidratos, los llamados ácidos grasos volátiles (AGV); Acético (CH3-COOH), Propiónico (CH3-CH2-COOH) y Butírico (CH3-CH2-CH2COOH).

36

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

37

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Los AGV sintetizados en respuesta a un estricto control metabólico por parte de los microorganismos ruminales, son utilizados por éstos para la formación de aminoácidos y ácidos grasos que serán posteriormente incorporados al metabolismo bacteriano. Sin embargo, la mayor parte de los AGV es enviada hacia el líquido ruminal, en donde se difunden a través del epitelio del rumen y retículo, el resto se absorben en omaso, para posteriormente incorporarse a la circulación general pasando por la vena porta.22 ABSORCIÓN Y UTILIZACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS VOLÁTILES Los AGV son de suma importancia ya que representan más del 70% del suministro de energía al rumiante. Virtualmente todo ácido acético, propiónico y el ácido butírico son absorbidos por el epitelio del rumen y transportados vía porta al hígado. La absorción de AGV no sólo es importante para mantener su distribución en las células animales, sino para prevenir cantidades excesivas que puedan alterar el pH ruminal. El epitelio estratificado del rumen generalmente no se caracteriza por una eficaz absorción. No obstante es capaz de absorber eficientemente AGV, ácido láctico, electrólitos y agua. La superficie del epitelio es muy extendida debido a la formación de papilas bien vascularizadas. 12

38

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

El tamaño y longitud de las papilas del rumen se modifican, dependiendo las concentraciones de los AGV en el rumen. Los animales con una buena alimentación y producción de AGV, presentan papilas largas y robustas para promover la absorción. En contraste, los animales con una deficiente alimentación, tienen papilas pequeñas y requieren de un largo tiempo de recuperación para restaurar el tamaño de sus papilas y su capacidad de absorción. La absorción de los AGV es a través de un mecanismo de difusión a favor del gradiente de concentración. La velocidad de absorción aumenta a medida que desciende el pH del líquido ruminal. Cuando atraviesan el epitelio, los AGV sufren diferentes grados de transformación. El acetato y propionato son absorbidos casi sin alterarse, pero la mayor parte del ácido butírico se transforma en ácido ßhidroxibutírico el cual es un cuerpo cetónico. Los AGV absorbidos tienen diferentes destinos metabólicos: ♦ El ácido acético se oxida en los diferentes tejidos para generar ATP. También funciona como la principal fuente acetil-CoA para la síntesis de lípidos. ♦ El propionato sirve principalmente como sustrato gluconeogénico, es de suma importancia para el rumiante debido a que en el intestino delgado casi no se absorbe glucosa. ♦ El ácido butírico absorbido en forma de ácido ß-hidroxibutírico, es oxidado en muchos tejidos para la producción de energía. Los cambios en la dieta pueden modificar el patrón de fermentación. Cuando la dieta del animal está basada en forrajes, la proporción molar en que se encuentran los AGV es:

39

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Mientras que si la dieta es alta en granos o concentrados la proporción será de:

En el hígado el propionato y el acetato son incorporados al metabolismo energético, el ácido propiónico es el único de los AGV que el hepatocito puede transformar en glucosa, en la vía de la gluconeogénesis.23 Las moléculas de glucosa sintetizadas en este proceso, serán exportadas hacia los tejidos extrahepáticos,

40

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

quienes serán los encargados de utilizarla como la primera fuente de energía altamente disponible para sostener las necesidades fisiológicas de mantenimiento y reproducción. Los disacáridos y los almidones que escapan a la fermentación ruminal pasan al intestino delgado donde son digeridos por enzimas pancreáticas e intestinales, en la misma forma que en los animales monogástricos.

DIGESTIÓN DE PROTEÍNAS

La proteína es particularmente vulnerable a la fermentación ruminal, debido a que está formada por carbonos, los cuales se pueden reducir todavía más que los carbohidratos para proveer energía a los microorganismos. Los microorganismos del rumen son capaces de sintetizar todos los aminoácidos, incluyendo los esenciales para el hospedero. Por lo tanto los rumiantes son casi totalmente independientes de la calidad de las proteínas ingeridas. Además los microorganismos pueden utilizar fuentes de nitrógeno no proteico (NNP) como sustrato para la síntesis de aminoácidos. A medida que las proteínas y el NNP entran al rumen son atacados por enzimas microbianas extracelulares, la mayor parte de estas enzimas son endopeptidasas parecidas a la tripsina y forman péptidos de cadena corta como sustratos terminales. Estos péptidos se originan extracelularmente y son absorbidos hacia el interior de los microorganismos. En el citosol los péptidos son degradados a aminoácidos y éstos son utilizados para la formación de proteína microbiana o son degradados todavía más para la producción de energía a través de la vía de los AGV. Para que los

41

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

aminoácidos entren a esta vía, primero son desaminados para dar lugar a amoniaco y a un esqueleto carbonado.

El amoniaco es el principal compuesto nitrogenado que utilizan los microorganismos para la síntesis de aminoácidos y proteínas, hay que considerar que para esto se requiere suficiente energía o carbohidratos; El amoniaco se utiliza además para la formación de diversos componentes nitrogenados de la pared celular y ácidos nucleícos. El amoniaco liberado en el rumen es absorbido a la sangre, conducido al hígado en donde se forma urea, la cual se puede reciclar en la saliva o eliminarse a través de la orina.24

El esqueleto carbonado de muchos de estos aminoácidos se puede acomodar directamente en varios de los pasos de la vía de los AGV, dando lugar a la

42

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

producción de los tres principales (acético, propiónico y butírico) y de AGV de cadena ramificada o isoácidos conocidos como ácido isobutírico, ácido isovalérico y ácido 2-metilbutirato; solo los tres aminoácidos de cadena corta ramificada (valina, leucina e isoleucina), permiten la producción de estos isoácidos. Los AGV de cadena ramificada son utilizados por las bacterias como factores de crecimiento. 16

En el rumen, cierta cantidad de proteína dietaria puede escapar a la digestión ruminal y pasar al intestino sin modificarse en el rumen, a ésta se le denomina proteína sobrepasante. La proteína microbiana representada por los cuerpos celulares de los microorganismos, pasa con las proteínas de la ración que no fueron modificadas por la microbiota ruminal a través del omaso, abomaso, hasta el intestino en donde son digeridas por acción de las enzimas pepsina, tripsina, quimiotripsina, carboxipeptidasa y aminopeptidasa en forma similar a la digestión proteica en los monogástricos.

43

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

El crecimiento microbiano depende del aporte de nutrientes y de la velocidad a la cual los microorganismos del rumen se eliminan. Las proteínas o el nitrógeno no proteico (NNP) y los carbohidratos son utilizados para la producción ruminal de microbios, AGV, amoniaco, metano y bióxido de carbono de acuerdo a la siguiente ecuación: carbohidratos + proteínas = microbiota + AGV + NH3 + CH4 + CO2

El equilibrio en los productos de la ecuación depende de la concentración y balance de los sustratos. 9

CONCENTRACIÓN Y BALANCE DE SUSTRATOS EN EL METABOLISMO RUMINAL

44

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

En estas condiciones se favorece la producción proteica y por lo tanto el crecimiento microbiano. La fermentación de la glucosa con la consecuente producción AGV se incrementa con el fin de llenar las fuertes demandas energéticas ligadas a un rápido crecimiento de la microbiota. La producción de amoniaco es baja, porque la mayor parte del nitrógeno se encuentra incorporada a la proteína microbiana.10

Bajo este perfil existe una gran cantidad de energía pero insuficiente nitrógeno para sostener una adecuada síntesis proteica, por lo tanto el crecimiento microbiano no es el óptimo. La energía se vuelve ineficiente a medida que se utiliza para mantener a células que no se están replicando, en lugar de utilizare para los procesos sintéticos de las células en crecimiento. La actividad de los microorganismos todavía da lugar a cierta fermentación de la glucosa con una formación moderada de AGV, pero el crecimiento microbiano y la producción de amoniaco se limita debido a la carencia de nitrógeno.

45

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

En esta situación existe mucho nitrógeno para sostener el crecimiento, pero se limita debido al insuficiente aporte de energía. Esto obliga a los microorganismos a utilizar aminoácidos para llenar sus requerimientos de energía, en vez de utilizarlos para la síntesis de proteínas. La velocidad de crecimiento de los microbios es baja y la producción de AGV es moderada. Gran cantidad de los AGV proviene de las cadenas carbonadas de los aminoácidos, mientas que los grupos amino son derivados hacia la producción de amoniaco. La relación que existe entre la disponibilidad de carbohidratos y la de proteínas (o nitrógeno) ejerce un fuerte impacto sobre la producción de células microbianas y por lo tanto sobre la nutrición del huésped. La mayoría de los microorganismos ruminales pueden sintetizar proteína a partir de amoniaco proveniente de fuentes no proteicas tales como la urea. Desde un punto de vista nutricional y económico, esto se ha explotado utilizando fuentes nitrogenadas de bajo costo en lugar de proteínas costosas en las dietas de los rumiantes, permitiendo la síntesis microbiana de proteína para satisfacer las necesidades del hospedero.

46

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

DIGESTIÓN DE LÍPIDOS Cuando la dieta del rumiante consiste principalmente de forrajes, los lípidos que se encuentran en mayor proporción son los galactoglicéridos, pero si el nivel de granos o concentrados es elevado, los triacilglicéridos son más abundantes. Se ha observado que la mayoría de los ácidos grasos presentes en la dieta de los rumiantes son insaturados. En el rumen tanto los galactoglicéridos como los trigliacilglicéridos y fosfolípidos son hidrolizados por las bacterias, el resultado son ácidos grasos libres y glicerol. El glicerol derivado de la hidrólisis de los trigliacilglicéridos es fermentado hasta propionato y posteriormente absorbido junto con los otros AGV. Por otro lado se sabe que los lípidos que se encuentran en el tejido adiposo del animal y en la leche de las especies rumiantes son saturados sufriendo poca modificación, por cambios en el aporte de lípidos insaturados de la dieta. Este fenómeno se debe a que el medio ambiente reductor del rumen produce la hidrogenación de una gran cantidad de ácidos grasos insaturados previamente hidrolizados. Posteriormente los lípidos microbianos son digeridos y adsorbidos en el intestino delgado. Al igual que las proteínas, algunos lípidos pueden escapar a la digestión microbiana ruminal y llegar intactos al intestino (donde son digeridos). A estos lípidos se les denominan de sobrepaso.

47

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Las ventajas que presenta la hidrogenación de ácidos grasos son: ♦ Aumenta el crecimiento bacteriano, ya que los ácidos grasos insaturados provocan cambios en la permeabilidad de las membranas microbianas (inhibiendo su desarrollo). ♦ ♦ Se reduce la producción de metano al haber menor cantidad de hidrógeno. Aumenta la energía disponible, ya que los ácidos grasos saturados liberan más energía al oxidarse que los ácidos grasos insaturados. 11

48

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

IV.

MATERIALES Y MÉTODOS

4.1.

LOCALIZACIÓN DEL ENSAYO

Por motivos del tema de Tesis planteado, el desarrollo de la tesis, tomó dos ubicaciones geográficas que son las siguientes:

El Camal de Daule, propiedad del muy Ilustre Municipio de Daule, que se encuentra ubicado en el cantón Daule, provincia del Guayas, país Ecuador, continente Sudamericano. El Camal de Daule se encuentra ubicado aproximadamente en las coordenadas 1°52 ′ S, 79°59 ′ W . La altura media de la zona oscila en los 22 m.snm, posee un clima Tropical de sabana con una media anual de precipitaciones pluviales de 1500mm/año. Presenta un suelo fértil apto para la agricultura y una temperatura media de la zona de 24°C. La Finca “La Martina”, propiedad del Sr. Galo Martínez Salazar. Se encuentra ubicada en el Recinto Libertad del Toachi, Parroquia Santa María del Toachi, cantón Santo Domingo de los Tsáchilas, provincia Santo Domingo de los Tsáchilas, país Ecuador, continente

Sudamericano. La Finca “La Martina” se encuentra ubicada aproximadamente en las coordenadas Longitud: -79.05555725097656 Latitud: -

0.2612677102758038. La altura media de la zona oscila 650 msnm, posee un clima Tropical Húmedo con una media anual de precipitaciones pluviales de 3000 a 4000 mm/año. Presenta un suelo de tipo limoso y la temperatura mínima oscila entre los 18°C y la máxima de 31°C.

49

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

4.2. MATERIALES

4.2.1. Materiales de Laboratorio                        

Balanza gramera Balanza de Colgar Vaso de precipitación Probeta Matraz Fiola Mechero de Alcohol Agitador de Cristal Frascos de 500ml Placas Porta objetos Placas Cubre Objetos Capilares de micro hematocrito Micropipeta Puntas descartables para Micropipeta Porta Placas Tubos de Biometría Tubera (2x6) Plastilina Gasas Algodón Papel Filtro Marcador Graso Cinta de Papel Marcador Permanente

50

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

4.2.2. Materiales de Campo             

Báscula Polea Piola de algodón Plástico de embalaje Cinta de embalaje Bandejas Tachos de 20 litros Galón Sogas Jeringas de 20 ml Hamaca Palas Carretilla

4.2.3. Sustancias          

Líquido ruminal de bovinos Brahman de la zona de Daule. Melaza Leche “la Vaquita” Reactivos pata tinción de Righ Reactivos para tinción de Gram Lugol concentrado Solución de Turk Aceite de Cedro Agua Destilada Solución de Cloruro de Sodio al 0.9%

51

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

   

Alcohol Yodo Violeta de Genciana Cipermetrina al 20%

4.2.4. Equipos            

Microscopio Olympus CX21 Incubadora Cámara de sembrado Baño María Contador de células Cámara de Neubauer Refrigeradora de 12 pies Esterilizador Autoclave Centrífuga Microcentrífuga Agitador

4.2.5 Materiales de Oficina    

Laptop Toshiba A205 SP5820 Cámara Digital Marca Benq Impresora Multifunción Epson TX110 Papelería (Hojas de Papel Formato A4, lápiz, esferográficos, reglas, etc.)

52

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

 

Cds Pen Drive de 4gb

4.2.6 Talento humano   

Doctor en Bioquímica y Farmacia Médico Veterinario y Zootecnista Vaqueros

4.2.7 Varios     Pasajes de Bus Interprovincial Santo Domingo – Guayaquil, Guayaquil – Santo Domingo. Gasolina para movilización dentro de Santo Domingo Internet Bebidas y refrigerios

53

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

4.3. MÉTODOS

4.3.1. Área de Esparcimiento

El área en que se trabajó, son dos; la primera fué la zona de Daule, específicamente el camal Municipal, ya que aquí llega un gran porcentaje de ganado brahman de la zona, como es ganado que llega al faenamiento, facilitó la extracción del líquido ruminal, si no hubiese sido así , tocaba sondear o fistular a los animales para extraer el líquido ruminal, pero esto es algo estresante para los bóvidos, por lo tanto, teniendo en cuenta la facilidad de extraer el líquido ruminal de los bovinos faenados, opté por esta opción.

La

segunda

zona

fué

Santo

Domingo

de

los

Tsáchilas,

específicamente la Finca “La Martina”, donde se encuentran los animales estudiados, y a los cuales se les aplicó los microorganismos cultivados artesanalmente, para ver los beneficios o las desventajas de aplicar a los terneros en desarrollo, microorganismos ruminales que no son propios de la zona.

4.3.2. La Población o la muestra que se utilizó

La población de bovinos que se utilizó son 12 que tenían edades de 1 a 6 meses, los cuales se dividieron en 2 grupos el Grupo Experimental y el Grupo Testigo. Para mejor estudio y obtención de resultados, cada ternero Experimental tiene su Testigo de la misma edad e incluso son hijos del mismo toro, lo que ayudó a que no haya grandes variantes genotípicas y que no altere la toma de resultados.

54

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

Edad (Meses) 1 mes 2 meses 3 meses 4 meses 5 meses 6 meses

Grupo Experimental (Unidad/Ternero) 1 1 1 1 1 1

Grupo Testigo (Unidad/Ternero) 1 1 1 1 1 1

4.3.3. Desarrollo Experimental

Visité el Camal Municipal de Daule para la obtención de líquido ruminal de bovinos adultos de la raza Brahman, ya que esta es la raza mejor adaptada a la zona de Daule. Con la ayuda de un colador y un recipiente grande, tomé el contenido ruminal de los bovinos faenados y lo exprimí para obtener el líquido ruminal. Posterior a esto lo envase en un galón, para su posterior transporte a la zona de Santo Domingo, donde se encuentran los Laboratorios del Instituto Nacional de Higiene y Medicina Tropical “Leopoldo Izquieta Pérez” sede Santo Domingo, para su posterior contaje de bacterias y cultivo. VER ANEXOS N°21.

Procedimiento: 1. En vasos de Precipitación de 500 ml se colocó: 200 ml de melaza, 200 ml de leche la Vaquita y 100 ml de líquido

55

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ruminal. Posterior a esto se homogenizó la mezcla con la ayuda de un agitador o pipeta de vidrio.

2.

La mezcla ya homogenizada se cubrió con plástico de embalaje, piola de algodón amarrada a la orilla para afirmar el cierre y, encima de esta, cinta adhesiva para garantizar un cierre hermético.

3.

Después de realizar este procedimiento se procedió a meter los frascos del Preparado a la incubadora por el lapso de 17 días.

4.

Durante el tiempo de incubación se llevo un contaje cada 5 días, para ver cómo iba la proliferación de las bacterias

5.

Pasado el tiempo de incubación se procedió a tomar una pequeña muestra para observar bajo el microscopio si las bacterias, protozoos y hongos habían proliferado de la manera esperada.

6.

Como siguiente paso a seguir se realizó un conteo aproximado de los microorganismos, para saber el número aproximado de microorganismos a suministrar a los terneros de experimento o estudio.

7.

Antes de iniciar la suministración de la bebida probiótica a los terneros, estos fueron areteados para su debido control mediante las tablas de recopilación de datos.

56

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

8.

A los terneros se les suministraba esta bebida a diario por los primeros 10 días en dosis de:

Peso (kg) 30 a 60 kg 60 a 100 kg 100 a 200 kg 200kg o mas

Dosis de Microorganismos (ml) 3 ml 5 ml 7 ml 9 a 10 ml

9.

Después de los 10 días se procedió a suministrar la bebida cada 30 días, hasta cumplir los 4 meses de Experimentación. VER ANEXO N°22.

4.3.4. Formas o técnicas de Recopilar Datos

La recopilación de datos se la llevó a cabo desde el inicio del experimento; los datos o información que se tomaron en cuenta son los siguientes:    Peso del animal Salud Mortalidad

57

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

La obtención de los datos se tomó de manera cuantitativa, por medio del pesaje a los animales cada 15 días, para ver si los microorganismos que se les suministró han ayudado a la conversión alimenticia, y así comprobamos la hipótesis planteada. El pesaje de los animales se realizó en la misma finca, con la ayuda de una báscula, polea y sogas. Se procedió a derribar y maniatar a los animales para subirlos con la ayuda de una polea hacia la báscula o balanza, se tomaba el peso marcado y se procedió a bajarlos y soltarlos para que se reintegren a su grupo.

4.3.5. En qué periodo fue la recolección de datos

La recolección de datos con respecto al peso de los animales, se la realizó cada 15 días, hasta que los terneros del grupo experimental y el grupo testigo cumplieron cuatro meses de tratamiento, con la bebida probiótica. Con respecto a la tabla de salud, los terneros del grupo experimental y grupo testigo fueron evaluados cada siete dias, durante los 4 meses, para ver si presentaban mejoría en su salud o resistencia a cierto tipo de enfermedades de la zona o incluso mayor resistencia a ectoparásitos de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas. Como último punto a evaluar la tabla de mortalidad no fue utilizada ya que ninguno de los terneros, ya sea del grupo testigo o experimental se enfermaron, accidentaron.

58

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

4.3.6. Diseño Experimental

La prueba estadística t de Student para muestras dependientes es una extensión de la utilizada para muestras independientes. De esta manera, los requisitos que deben satisfacerse son los mismos, excepto la independencia de las muestras; es decir, en esta prueba estadística se exige dependencia entre ambas, en las que hay dos momentos uno antes y otro después. Con ello se da a entender que en el primer período, las observaciones servirán de control o testigo, para conocer los cambios que se susciten después de aplicar una variable experimental.

Con la prueba “t” de Student se comparó las medias y las desviaciones estándar de grupo de datos y se determinó si entre esos parámetros las diferencias fueron estadísticamente significativas o si sólo son diferencias aleatorias.

Para calcular los datos a través de ésta prueba se utilizó la fórmula matemática: ̃ √ ̃

Para conocer la desviación estándar combinada usamos la siguiente fórmula:

√ (

)

59

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

En donde: x1 = Es la media muestral del grupo 1. x2 = Es la media muestral del grupo 2. S12 = Es la varianza 1 o la desviación estándar del primer grupo elevada al cuadrado. S22 = Es la varianza 2 o la desviación estándar del segundo grupo elevada al cuadrado. n1 = Número de datos de la muestra del grupo 1. n2 = Número de datos de la muestra del grupo 2. -2 = Porque son dos muestras. Sc = Desviación estándar combinada.

La hipótesis de investigación propone que los grupos difieren significativamente entre sí y la hipótesis nula propone que los grupos no difieren significativamente.

La comparación se realizó sobre una variable. Si hay diferentes variables, se efectuarán varias pruebas de “t” dependiendo del tamaño de los grupos que se comparen.

60

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES EVALUAR EL AUMENTO DE LA CONVERSIÓN ALIMENTICIA Y GANANCIA DE PESO. 5.1. CUADRO N° 1. INCREMENTO DEL PESO TOTAL DURANTE TODO EL EXPERIMENTO
PARAMETROS n ̅ S C.V S̅ GRUPO EXPERIMENTAL 6 40,62 11,61 28,58 4,75 GRUPO TESTIGO 6 35,42 7,66 21,62 3,13

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°1 podemos observar los diferentes parámetro evaluados, siendo el grupo experimental el que mejor ganancia tuvo; la evaluación mediante la prueba de “t” de Student determinó que si hay mejor conversión alimenticia, gracias a la Flora Ruminal de Daule, implantada en los animales de Santo Domingo de los Tsáchilas. VER ANEXO N°1 Y FIGURA N°1. 5.1.1. FIGURA N°1. INCREMENTO DE PESO TOTAL DE 90 DÍAS E INICIAL. INCREMENTO DE PESO TOTAL DE 90 DÍAS E INICIAL
250 240 230 220 210 200 190 GRUPOS

PROMEDIO DE PESOS EN KG

EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

61

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.2. CUADRO N° 2. EVALUACIÓN DEL PESO INICIAL (0 DÍAS)

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 123.49 25.82 20.90 10.58

GRUPO TESTIGO 6 126.82 30.22 23.82 12.38

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°2 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Testigo tiene mayor cantidad de peso frente al Grupo Experimental que tiene la menor cantidad de peso. VER ANEXO N°2 Y FIGURA N°2.

5.1.2.1. FIGURA N°2. PESO INICIAL TOTAL.

PESOS INICIALES DE LOS GRUPOS
PROMEDIO DE PESOS EN KG 765 760 755 750 745 740 735 730 GRUPOS EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

62

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.3. CUADRO N°3 EVALUACIÓN DEL PESO A LOS 15 DÍAS

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 128.94 29.09 22.56 11.92

GRUPO TESTIGO 6 133.63 32.97 24.67 13.51

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°3 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental sigue por debajo del Grupo Testigo. VER ANEXO N°3 Y FIGURA N°3.

5.1.3.1. FIGURA N°3. PESO A LOS 15 DÍAS

PESO DE LOS GRUPOS A LOS 15 DÍAS
805 800 795 790 785 780 775 770 765 760 755 GRUPOS Martínez, G. 2011. Tesis de Grado PESO PROMEDIO EN KG

EXPERIMENTAL TESTIGO

63

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.4. CUADRO N°4 EVALUACIÓN DEL PESO A LOS 30 DÍAS

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 133.78 28.57 21.35 11.70

GRUPO TESTIGO 6 136.96 31.37 23.19 13.02

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°4 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental sigue por debajo del Grupo Testigo. VER ANEXO N°4 Y FIGURA N°4.

5.1.4.1. FIGURA N°4. PESO A LOS 30 DÍAS

PESO DE LOS GRUPOS A LOS 30 DÍAS
825 820 815 810 805 800 795 790 GRUPOS Martínez, G. 2011. Tesis de Grado EXPERIMENTAL TESTIGO

PESO PROMEDIO EN KG

64

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.5. CUADRO N°5 EVALUACIÓN DEL PESO A LOS 45 DÍAS

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 141.51 28.61 20.21 11.56

GRUPO TESTIGO 6 142.57 33.79 23.70 13.84

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°5 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental sigue por debajo del Grupo Testigo. VER ANEXO N°5 Y FIGURA N°5.

5.1.5.1. FIGURA N°5. PESO A LOS 45 DÍAS PESO DE LOS GRUPOS A LOS 45 DÍAS
856 PESO PROMEDIO EN KG 854 852 850 848 846 844 GRUPOS Martínez, G. 2011. Tesis de Grado EXPERIMENTAL TESTIGO

65

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.6. CUADRO N°6 EVALUACIÓN DEL PESO A LOS 60 DÍAS

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 151.66 30.59 20.17 12.53

GRUPO TESTIGO 6 151.58 32.99 21.76 13.52

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°6 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental alcanzó y sobrepasó al Grupo Testigo por una mínima diferencia. VER ANEXO N°6 Y FIGURA N°6.

5.1.6.1. FIGURA N°6. PESO A LOS 60 DÍAS

PESO DE LOS GRUPOS A LOS 60 DÍAS

910,1 910 909,9 909,8 909,7 909,6 909,5 909,4 909,3 909,2 GRUPOS

PESO PROMEDIO EN KG

EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

66

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.7. CUADRO N°7 EVALUACIÓN DEL PESO A LOS 75 DÍAS

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 157.57 33.24 21.09 13.62

GRUPO TESTIGO 6 156.44 34.18 21.84 14.00

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°7 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental sobrepasa al Grupo Testigo por una mínima diferencia, la cual estadísticamente no es tan significativa. VER ANEXO N°7 Y FIGURA N°7.

5.1.7.1. FIGURA N°7. PESO A LOS 75 DÍAS PESO DE LOS GRUPOS A LOS 75 DÍAS
946 PESO PROMEDIO EN KG 944 942 940 938 936 934 GRUPOS Martínez, G. 2011. Tesis de Grado EXPERIMENTAL TESTIGO

67

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.1.8. CUADRO N°8 EVALUACIÓN DEL PESO A LOS 90 DÍAS

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 164.12 35.43 21.58 14.52

GRUPO TESTIGO 6 162.23 35.91 22.13 14.71

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°8 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental sobrepasa al Grupo Testigo por una mínima diferencia, la cual estadísticamente no es tan significativa de forma individual. VER ANEXO N°8 Y FIGURA N°8.

5.1.8.1. FIGURA N°8. PESO A LOS 90 DÍAS PESO DE LOS GRUPOS A LOS 90 DÍAS
990 PESO PROMEDIO EN KG 985 980 975 970 965 GRUPOS Martínez, G. 2011. Tesis de Grado EXPERIMENTAL TESTIGO

68

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.2. AMINORAR LA INCIDENCIA DE DIARREAS CAUSADAS POR PATÓGENOS DE LA ZONA DE SANTO DOMINGO DE LOS TSÁCHILAS. 5.2.1. CUADRO N°9 EVALUACIÓN DE LA INCIDENCIA DE DIARREAS A LOS 30 DÍAS.
INCIDENCIA DE DIARREAS DEL 19/03/2011 AL 16/04/2011 # ANIMAL INCIDENCIA DE (GRUPO DIARREAS EXPERIMENTAL) 1 2 3 4 5 6 0 0 0 0 0 0 # ANIMAL (GRUPO TESTIGO) 1 2 3 4 5 6 INCIDENCIA DE DIARREAS 0 0 0 0 0 0

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°9 se puede apreciar que durante los primeros 30 días de estudio no se presentó ningún tipo de Patología Gastrointestinal ya sea en el Grupo Experimental como en el Grupo Testigo. VER FIGURA N°9. 5.2.1.1. FIGURA N°9 INCIDENCIA DE DIARREAS DURANTE LOS PRIMEROS 30 DÍAS
GRÁFICA DE INCIDENCIA DE DIARREAS DURANTE LOS PRIMEROS 30 DÍAS

30
TIEMPO (DÍAS)

EXPERIMENTAL TESTIGO 0 GRUPOS

(% DE DIARREAS)

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

69

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.2.2. CUADRO N°10 EVALUACIÓN DE LA INCIDENCIA DE DIARREAS A LOS 60 DÍAS.
INCIDENCIA DE DIARREAS DEL 17/04/2011 AL 14/05/2011 # ANIMAL INCIDENCIA DE (GRUPO DIARREAS EXPERIMENTAL) 1 2 3 4 5 6 0 0 0 0 0 0 # ANIMAL (GRUPO TESTIGO) 1 2 3 4 5 6 INCIDENCIA DE DIARREAS 0 0 0 0 0 0

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°10 se puede apreciar que durante los 31 a 60 días de estudio no se presentó ningún tipo de Patología Gastrointestinal ya sea en el Grupo Experimental como en el Grupo Testigo. VER FIGURA N°10. 5.2.2.1. FIGURA N°10 INCIDENCIA DE DIARREAS DE 31 A 60 DÍAS
GRÁFICA DE INCIDENCIA DE DIARREAS DE 31 A 60 DÍAS

60
TIEMPO (DÍAS) EXPERIMENTAL TESTIGO

31

0 GRUPOS

(% DE DIARREAS)

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

70

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.2.3. CUADRO N°11 EVALUACIÓN DE LA INCIDENCIA DE DIARREAS A LOS 90 DÍAS.
INCIDENCIA DE DIARREAS DEL 15/05/2011 AL 11/06/2011 # ANIMAL INCIDENCIA DE (GRUPO DIARREAS EXPERIMENTAL) 1 2 3 4 5 6 0 0 0 0 0 0 # ANIMAL (GRUPO TESTIGO) 1 2 3 4 5 6 INCIDENCIA DE DIARREAS 0 0 0 0 0 0

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°11 se puede apreciar que durante los 61 a 90 días de estudio no se presentó ningún tipo de Patología Gastrointestinal ya sea en el Grupo Experimental como en el Grupo Testigo. VER FIGURA N°11. 5.2.3.1. FIGURA N°11 INCIDENCIA DE DIARREAS DE 61 A 90 DÍAS
GRÁFICA DE INCIDENCIA DE DIARREAS DE LOS 61 A 90 DÍAS

90
TIEMPO (DÍAS) EXPERIMENTAL TESTIGO

61

0 GRUPOS

(% DE DIARREAS)

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

71

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.3. FAVORECER LA PRODUCCIÓN DE LEUCOCITOS DE LOS BOVINOS, MEJORANDO LAS DEFENSAS DEL SISTEMA INMUNITARIO. 5.3.1. CUADRO N°12 CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS DE LOS DOS GRUPOS AL INICIO Y FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.
CONTEO TOTAL DE GLÓBULOS BLANCOS AL INICIO Y AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN. VALOR REFERENCIAL DE 4000 A 12000 GRUPO EXPERIMENTAL GRUPO TESTIGO # ANIMAL FINAL INICIO DIFERENCIA FINAL INICIO DIFERENCIA 1 13150 12700 450 20200 11500 8700 2 13750 18500 -4750 15050 13500 1550 3 14500 10350 4150 11500 11200 300 4 21400 11950 9450 14100 10250 3850 5 16700 12100 4600 15350 13150 2200 6 19100 12500 6600 21350 14200 7150 TOTAL 98600 78100 20500 97550 73800 23750
Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°12 se observa la evolución de los Glóbulos Blancos en el Grupo Experimental y el Grupo Testigo, durante la investigación. VER ANEXO N° 9 Y FIGURA N°12. 5.3.1.1. FIGURA N°12 CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS
 DE GLÓBULOS BLANCOS 24000 23000 22000 21000 20000 19000 18000 GRUPOS (% DE G.B.) EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

72

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.3.2. CUADRO N°13 CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS DE LOS GRUPOS EXPERIMENTAL Y TESTIGO AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 13016.66 2811.52 21.60 1152.26

GRUPO TESTIGO 6 12400 1697.35 13.68 695.63

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°13 podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Experimental sobrepasa al Grupo Testigo. VER ANEXO N°10 Y FIGURA N°13.

5.3.2.1. FIGURA N°13. CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN
PROMEDIO DE G.B. X UNIDAD 78000 77500 77000 76500 76000 75500 75000 74500 74000 73500 73000 GRUPOS (% DE G.B.)

EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

73

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.3.3. CUADRO N°14 CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS DE LOS GRUPOS EXPERIMENTAL Y TESTIGO AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

PARAMETROS n ̅ S C.V S̅

GRUPO EXPERIMENTAL 6 16433.33 3273.17 19.91 1341.46

GRUPO TESTIGO 6 16258.33 3769.53 23.18 1544.88

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°14, podemos observar los diferentes parámetros evaluados en los cuales se nota claramente que el Grupo Testigo aumentó considerablemente sus Glóbulos Blancos, con respecto al Grupo Experimental. VER ANEXO N°11 Y FIGURA N°14.

4.3.3.1. FIGURA N°14. CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN
PROMEDIO DE G.B. X UNIDAD 99000 98500 98000 97500 97000 GRUPOS (% DE G.B.) EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

74

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

OTROS RESULTADOS OBTENIDOS

5.4. CUADRO N°15

5.4.1. IDENTIFICAR LA EDAD IDÓNEA PARA LA IMPLANTACIÓN DE FLORA RUMINAL EN TERNEROS DE RAZAS LECHERAS DE LA ZONA DE SANTO DOMINGO DE LOS TSÁCHILAS.

EDAD DE TERNEROS 1 MES 2 MESES 3 MESES 4 MESES 5 MESES 6 MESES TOTAL

GRUPO EXPERIMENTAL
PESO. 90 DÍAS 106,03 151,38 156,24 174,89 186,78 209,40 984,72 PESO INICIAL 85,45 104,54 118,18 133,63 145,45 153,73 740,98 DIFERENCIA 20,58 46,84 38,06 41,26 41,33 55,67 243,74

GRUPO TESTIGO
PESO. 90 DÍAS 130,40 145,23 150,54 144,44 172,90 229,91 973,42 PESO INICIAL 95,45 113,63 120,00 118,18 129,54 184,09 760,89 DIFERENCIA 34,95 31,60 30,54 26,26 43,36 45,82 212,53

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

En el Cuadro N°15 podemos observar a los animales de estudio con sus respectivas parejas testigo, de la misma edad y peso relacionado al iniciar la investigación. Se puede apreciar también la diferencia de pesos al término de la misma. VER FIGURA N° 15, 16, 17, 18, 19, 20, Y 21.

75

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.1. FIGURA N°15. GANANCIA DE PESO DEL GRUPO TESTIGO EXPERIMENTAL VS GRUPO

GANANCIA DE PESO DEL GRUPO EXPERIMENTAL VS GRUPO TESTIGO
1200 1000 PESO PROMEDIO EN KG 800 600 GRUPO EXPERIMENTAL 400 200 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS GRUPO TESTIGO

TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En la Figura N°15 se puede observar la ganancia de peso del Grupo Experimental vs el Grupo Testigo. Cabe señalar que el Grupo Testigo al inicio de la investigación tenía mayor cantidad de peso, frente al peso del Grupo Experimental. Y al término de la investigación el Grupo Experimental acaba igualando y superando al Grupo Testigo. VER ANEXO N°1 Y N°13.

76

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.2. FIGURA N°16 GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (1 MES) VS TERNERO TESTIGO (1 MES).

GANANCIA DE PESOS DE LOS TERNEROS DE 1 MES
140 120 PESO PROMEDIO EN KG 100 80 60 40 20 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS EXPERIMENTAL TESTIGO

TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES:

En la Figura N°16 se puede observar que el ternero Experimental tenia menor peso al inicio de la investigación, y al finalizar la misma la brecha de peso frente a su testigo sigue igual, incluso esta brecha de diferencia a tendido al aumento. VER ANEXO N°14.

77

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.3. FIGURA N°17 GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (2 MESES) VS TERNERO TESTIGO (2 MESES).

GANANCIA DE PESOS DE LOS TERNEROS DE 2 MESES
160 140 120 100 80 60 40 20 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN

PESO PROMEDIO EN KG

EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En la Figura N°17 se puede apreciar que el Ternero Experimental al haber iniciado por debajo del peso de Ternero Testigo, logra sobrepasarlo y marcar una elevada diferencia en la Ganancia de Peso durante la Investigación, Dándonos la seguridad de que esta es la mejor edad para realizar la Implantación de Flora Ruminal en Terneros de Razas Lecheras. VER ANEXO N°15.

78

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.4. FIGURA N°18 GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (3 MESES) VS TERNERO TESTIGO (3 MESES).

GANANCIA DE PESOS DE LOS TERNEROS DE 3 MESES
180 160 140 PESO PROMEDIO EN KG 120 100 80 60 40 20 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En la Figura N°18 se puede observar que la edad de tres meses es una edad muy buena para la Implantación de Microorganismos Ruminales, en Terneros de razas lecheras, el Ternero Experimental inicio con un peso inferior y durante el transcurso de la investigación igualo y sobre paso al Ternero Testigo de su misma Raza y edad. VER ANEXO N°16.

79

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.5. FIGURA N°19 GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (4 MESES) VS TERNERO TESTIGO (4 MESES).

GANANCIA DE PESOS DE LOS TERNEROS DE 4 MESES
200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS PESO PROMEDIO EN KG

EXPERIMENTAL TESTIGO

TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En la Figura N°19 el Ternero Experimental inicio la investigación con una

diferencia mayor en peso con respecto de su pareja Testigo, en sí, esta diferencia no altera los datos de referencia, ya que van a ser evaluados por su ganancia de peso, por lo tanto, notamos que en esta edad la Implantación de Flora Ruminal no tiene mayor efecto ya que los animales tenían una Flora Ruminal muy bien implantada. VER ANEXO N°17.

80

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.6. FIGURA N°20 GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (5 MESES) VS TERNERO TESTIGO (5 MESES).

GANANCIA DE PESOS DE LOS TERNEROS DE 5 MESES
200 180 160 PESO PROMEDIO EN KG 140 120 100 80 60 40 20 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 70 DÍAS 90 DÍAS TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN EXPERIMENTAL TESTIGO

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En la Figura N°20 podemos observar que el Ternero Experimental así como en el caso anterior, tiene una diferencia de peso a favor con respecto de su pareja Testigo, así mismo cabe señalar que esto no influye en la toma de datos, por lo tanto, procedo a indicar que en esta edad la Implantación de Flora Ruminal no aporta ganancia de peso extra en el Ternero Experimental. VER ANEXO N°18.

81

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.4.1.7. FIGURA N°21 GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (6 MESES) VS TERNERO TESTIGO (6 MESES).

GANANCIA DE PESOS DE LOS TERNEROS DE 6 MESES
250 PESO PROMEDIO EN KG 200 150 100 50 0 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DIAS 60 DIAS 75 DÍAS 90 DÍAS EXPERIMENTAL TESTIGO

TIEMPO DE LA INVESTIGACIÓN

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En Figura N°21 podemos observar que el Ternero Experimental presenta un aumento considerable de su peso frente a la ganancia de peso de su pareja Testigo; pero cabe señalar que esta ganancia de peso se la atribuimos más al desarrollo mismo del animal, ya que está en su temporada de crecimiento. VER ANEXO N°19.

82

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

5.5. FIGURA N°22

5.5.1. ESTABLECER EL TIEMPO MÁXIMO DE PREVALENCIA DE UN CULTIVO DE MICROORGANISMOS RUMINALES, ELABORADO DE FORMA ARTESANAL.
NÚMERO DE MICROORGANISMOS RUMINALES EN EL CULTIVO MICROORGANISMOS RUMINALES BACTERIAS LACTOBACILLUS STREPTOCOCCUS BOVIS PROTOZOOS SPP HONGOS SPP 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS DÍAS 60% 63% 65% 44% 44% 42% 40% 40% 15% 30% 33% 35% 40% 25% 17% 8% 1% 1% 8% 0% 1% 5% 0% 1% 9% 0% 0% 0% 0% 0% 0% 0%

15% 30% 40% 50% 60% 85% 0% 1% 0% 1% 0% 1% 0% 1% 0% 0% 0% 0%

Martínez, G. 2011. Tesis de Grado

DETALLES: En la Figura N°22 se puede observar en porcentajes como se van desarrollando las bacterias, hongos y protozoos dentro del cultivo artesanal. Por lo tanto cabe indicar que el Cultivo de Microorganismos de Forma Artesanal tiene un Límite de Duración de 59 días aproximadamente; pero esto no quiere indicar que el cultivo sea viable hasta ese tiempo, como se ve en la tabla la fecha idónea para la aplicación del Cultivo a los Bovinos, sería la de 28 días, ya que en esta fecha se encuentra la mayor prevalencia de Lactobacillus y la menor cantidad de Streptococcus bovis. VER ANEXO N°20.

83

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

VI. CONCLUCIONES Y DISCUSIÓN

Del presente trabajo de investigación se concluye lo siguiente:

6.1. CONCLUCIONES.

6.1.1. El análisis estadístico de la “t” de Student determinó mayor ganancia de Peso en el Grupo Experimental al cual se les suministró por 10 días seguidos el Cultivo Artesanal de Microorganismos Ruminales de Bovinos Brahman, de la zona de Daule, vs. el Grupo Testigo a los cuales no se les suministró ningún tipo de Probiótico y fueron alimentados de la misma manera forma y cantidad que el Grupo Experimental. Con respecto a la ganancia de peso la “t” de Student indica una ganancia de peso de (p 0.05) y (p 0.01). 6.1.2. Con respecto a la disminución de Diarreas en los Terneros del Grupo Experimental vs. El Grupo Testigo, no se produjo durante el tiempo de la investigación ningún tipo de patología gastrointestinal en todos los animales de estudio. Pero cabe señalar que la única diferencia que se vió en los terneros del Grupo Experimental, es que realizaban deposiciones más consistentes frente a las deposiciones del Grupo Testigo. 6.1.3. La producción de Leucocitos en los Animales mediante el Método Estadístico demostró, que no se cumple dicho mejoramiento de las defensas del sistema inmunitario. Cabe indicar que tres días antes de la segunda toma de muestras a los animales se los vacunó contra la Fiebre Aftosa; por lo tanto, este puede ser el punto referencial del cual nos guiamos para indicar la marcada leucocitosis y linfocitosis en ciertos animales del Grupo Experimental y Testigo.

84

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

6.1.4. Como otro resultado de la investigación se obtuvo las edades idóneas para implantar los Microorganismos Ruminales, siendo estas la edad de 2 meses como edad óptima para la Implantación de Microorganismos y la edad de 3 meses como edad muy buena para la Implantación de Microorganismos; se llegó a esta conclusión ya que los animales experimentales de dichas edades son los que mayor ganancia de peso (32.53% más que su pareja Testigo) tuvieron frente a su pareja Testigo. 6.1.5. Por último punto a evaluar tenemos el tiempo de prevalencia de un Cultivo de Microorganismos Ruminales cultivados de manera artesanal, llegando a la conclusión que la edad óptima parta ser suministrado, es al tiempo de 28 días y llega a tener un tiempo de prevalencia de 70 días, posterior a este tiempo todos los microorganismos del cultivo mueren por un proceso de Oxidación por los mismos desechos de ellos; que tienden a acidificar el medio llegando a un pH de 5.8.

85

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

6.2. DISCUSIÓN

6.2.1. La presente investigación arrojo distintos tipos de datos, tomando como principal dato la ganancia de peso de los Terneros del Grupo Testigo el cual en el mejor de los casos refiriéndonos a los ternero de 2 a 3 meses fue de un 32.53% más de ganancia de peso frente a sus parejas testigo. 6.2.2. Como punto importante a destacar es que la presente investigación es inédita hasta la presente fecha y no habido ningún otro investigador el cual ha evaluado el uso de microorganismos de diversas regiones como probiótico en sí, en bovinos; por lo tanto, la siguiente comparación que se hace con la investigación “Producción de Microorganismos Probióticos como aditivo para alimentos concentrados para ganado Vacuno” del Dr. Edgar Mauricio Vargas es para comparar los datos obtenidos con respecto al cultivo artesanal y la ganancia de peso en bovinos.

TABLA DE COMPARACIÓN DE CULTIVO DE PROBIÓTICOS MATERIALES TESIS TESIS COLOMBIANA MELAZA 40% 40% LECHE 40% 0% PEPTONA CASEÍNA 0% 40% MICROORGANISMOS RUMINALES TOTAL 20% 100% 20% 100%

6.2.3. Como último punto a comparar queda la ganancia de peso en los Bovinos Experimentales, en la tesis del Dr.Vargas los animales de estudio tuvieron una ganancia de peso de un 20% más frente a sus parejas testigo. En la Tesis

86

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

de mi autoría la ganancia de peso de forma grupal fué de un 12.80% más que las parejas testigo, pero si tomamos en cuenta solo el índice de ganancia de los bovinos de 2 y 3 meses, la ganancia de estos fué de 32.53% más que las parejas testigo, por lo tanto, si tomamos un grupo de bovinos de la edad óptima para implantación de Flora Ruminal seria muchísimo mejor que aplicarlo a bovinos con una Flora Ruminal ya implantada y funcionando.

87

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

VII. RECOMENDACIONES

7.1. El uso de Microorganismos Ruminales de la Zona de Daule junto con un buen proceso de cultivo de forma artesanal y sin realizar gastos tan onerosos, demostraron que se traducen a una mejor conversión alimenticia y ganancia de peso en Terneros de Razas Lecheras de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas.

7.2. Como edad idónea para la Implantación de Flora Ruminal en Terneros de Razas Lecheras en la Zona del Sub Trópico Ecuatoriano se recomienda la edad de 2 a 3 meses, ya que esta fué la edad en la cual hubo el mejor índice de ganancia de peso llegando a un 32.53 % más, frente a las otras edades que se estudiaron.

7.3. Como último punto a recomendar es el tiempo de prevalencia de un cultivo artesanal, este es apto desde los 14 a 28 días de forma óptima, pasado este tiempo el cultivo no tiene la misma eficacia incluso tiende a ser patógeno, ya que el Streptococcus bovis se exacerba en el medio y puede producir una acidosis ruminal en el bovino e incluso llevarlo a la muerte por dicha patología.

88

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

VIII. RESÚMEN

Este trabajo tuvo como objetivo principal determinar la ganancia de peso en terneros Holstein (Bos taurus) de la zona de Santo Domingo de los Tsáchilas luego de la suministración consecutiva por 10 días de un Cultivo de Microorganismos obtenidos de bovinos Brahman (Bos indicus) de la zona de Daule.

Para este fin se utilizaron 12 terneros de la raza Holstein y Cruces del mismo, divididos en dos Grupos de 6 individuos cada uno, según la estadística nos plantea que la ganancia de peso es significativa, lo que nos da a entender que el uso de Microorganismos Ruminales de la Zona de Daule tienen mejor capacidad desdobladora y sintetizadora de los alimentos.

Por lo tanto se recomienda aplicar microorganismos de la zona de Daule a Terneros de 2 a 3 meses de manera preferencial, de la Zona de Santo Domingo de los Tsáchilas o de otras latitudes del Sub Trópico Ecuatoriano.

89

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

VIII. SUMMARY

This paper's main objective was to determine the weight gain in Holstein calves (Bos taurus) in the area of Santo Domingo de los Tsáchilas includes the administration after 10 days in a row by a microbial culture derived from Brahman cattle (Bos indicus) of Daule area.

To this end we used 12 calves of Holstein and crosses the same, divided into two groups of 6 subjects each, according to statistics presents us with the weight gain is significant, which makes us understand that the use of microorganisms Ruminal Daule Zone are better able unfolded synthesizing food.

It is therefore recommended to apply microorganisms Daule area to calves from 2 to 3 months on a preferential basis, the Zone of Santo Domingo de los Tsáchilas or other parts of the Sub Tropical Ecuador.

90

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

IX.

BIBLIOGRAFÍA

1. Bonavet. 2011. Fisiología del rumen. http://www.bonavet.com. Caracas. Venezuela. Pg 1. 19-12-2010. http://www.bonavet.com/digestivo.html.

2. Cobos, P.2010. Técnica in vitro para el estudio de protozoos ruminales. Programa de ganadería de Texcoco - México. Texcoco. México. Pg 2. 09-01-2011. http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:fgr2Q_0uzcQJ: ammveb.net/XXVII%2520CNB/memorias/Nutricion/Oral/Trabajo_55_ Tencnica_in_vitro_para.doc+medios+de+cultivo+para+protozoos&cd= 9&hl=es&ct=clnk&gl=ec.

3. Donoso, A. 2010. Medios de Cultivo para hongos. Danival. Caracas. Venezuela. Pg 1. 09-01-2011.

http://danival.org/fungi/fungi_medios.html.

4. Gómez, A. 2009. Nutrición y alimentación bovina. Nutrición Bovina. Cali. Colombia. Pg 1. 05-01-2011. http://adappecuarias.blogspot.com/.

5. González. G. 1999. Bacterias del rumen en terneros. Calfnotes. Texas. Estados Unidos de América. Pg 3. 09-01-2011.

http://www.calfnotes.com/pdffiles/CN005e.pdf.

6. Innovar. 2010. Probióticos para bovinos. http://www.portaldemisterios.com. México DF. México. Pg 3. 05-012011. http://www.portaldemisterios.com/videos/yt-hL9F-PrGl9I.

91

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

7. Kamade, G. 2006. Digestion Ruminal y Nutrición. Producción Animal. Cordova. Argentina. Pg 1. 09-01-2011. http://www.produccionanimal.com.ar/informacion_tecnica/manejo_del_alimento/96digestion_ruminal.pdf.

8. Lier, E. 2009. Ecosistema Ruminal. Departamento de producción animal y pasturas. Caracas Venezuela. Pg 16 – 19. 09-01-2011.

http://cursoafa2009.webs.com/Ecosistema-Reticulo-Ruminal-2009.pdf.

9. Loerch, S. 1998. Ionóforos, antibióticos, probióticos y supresores del celo. Producción bovina de carne. Cordova. Argentina. Pg 1. http://www.produccionanimal.com.ar/informacion_tecnica/invernada_promotores_crecimiento/ 10-ionoforos_antibioticos_probioticos_supresores_celo.htm. 05-01-2011.

10. Montalbetti, A. 2011. Microbiología del rumen. Monografías. Santiago de Chile. Chile. Pg 2. 09-01-2011.

http://www.monografias.com/trabajos7/rumen/rumen.shtml. 11. Nava, C. 2001. Microorganismos Ruminales. Facultad de Medicina Veterinaria de la UNAM. México Df. México. Pg 5. 09-01-2011. http://www.fmvz.unam.mx/fmvz/enlinea/Ruminal/microorganismos.htm.

12. Relling y Mattioli. 2003. Fisiología digestiva y metabólica de los rumiantes. http://www.fcv.unlp.edu.ar. La Plata. Argentina. Pg 1. 0501-2011. catedras/41/material/fisio.pdf. http://www.fcv.unlp.edu.ar/sitios-

92

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

13. Rivera, B. 2010. Aspectos generales sobre el rumen y su fisiología. Virbac. Guadalajara. México. Pg 1. 09-01-2011.

http://www.virbac.com.mx/bovinos/publicaciones/rumen.asp.

14. Rodríguez, A. 2008. Microbiología ruminal. Estación experimental agrícola. San Juan. Puerto Rico. Pg 1. 09-01-2011.

http://www.uprm.edu/ciag/inpe/ruminantia/ruminantia3-1-2008.pdf.

15. Romero, C. 2010. Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estudio de bacterias. Scribd. Guadalajara. México. Pg 4. 0901-2011. http://www.scribd.com/doc/14173131/5-Técnicas-Básicas-

Para-El-Cultivo-de-Microorganismos.

16. Rosario, M. 1999. Adhesión Microbiana del Rumen. Universidad Agraria de Cali. Cali. Colombia. Pg 2 . 09-01-2011.

http://www.agrarias.unlz.edu.ar/files/anatomia/adhesion%20en%20rum en.htm.

17. Rosario, M. 1999. Bacterias Ruminales. Universidad Agraria de Cali. Cali. Colombia. Pg 1. 09-01-2011.

http://www.agrarias.unlz.edu.ar/files/anatomia/bacterias%20ruminales.h tm.

18. Universidad de Chile Facultad de Medicina Veterinaria y Pecuaria. 1982. Aspectos generales de la microbiología del rumen. Monografias de Medicina Veterinaria. Santiago de Chile. Chile. Pg 1. 09-01-2011. http://www.monografiasveterinaria.uchile.cl/CDA/mon_vet_simple/0,14

93

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

20,SCID%253D7700%2526ISID%253D411%2526PRT%253D7669,00. html.

19. Wikipedia. 2010. Cultivo (microbiología). Wikipedia. La Plata. Argentina. Pg 2. 09-01-2011.

http://es.wikipedia.org/wiki/Cultivo_%28microbiolog%C3%ADa%29.

20. Zaluzzi, L. 2011. Habilidad degradativa diferencial de bacterias y hongos ruminales. Facultad de Agronomía de la Pampa. Pampa. Argentina. Pg 8. 09-01-2011. http://www.aapa.org.ar/congresos/2002/NaPdf/na48.pdf.

21. Zhau, A. 2011. Conceptos Básicos sobre la Digestión de los Rumiantes. Echotech. México DF. México. Pg 1. 13-06-2011.

http://www.midiatecavipec.com/alibal/alibal100108.htm.

22. Zion, D. 2011. El Aparato Digestivo de los Rumiantes. Facultad de Ciencias Naturales de la Universidad del Cauca. Cauca. Colombia. Pg 3. 13-06-2011. http://www.slideshare.net/mjurado14/aparato-digestivo-delos-rumiantes-365816. 23. Zornoza, J. 2011. Sistema Digestivo de Rumiantes y Aves. Universidad Nacional Agraria La Molina. Lima. Perú. Pg 1. 13-06-2011. http://www.monografias.com/trabajos10/ruav/ruav.shtml. 24. Zumaya, H. 2011. Digestión de la Vaca Lechera. InfoAgro. Buenos Aires. Argentina. Pg 2. 13-06-2011.

http://www.infocarne.com/bovino/digestion_vaca.asp.

94

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

X. ANEXOS

ANEXO N°1. EVALUACIÓN FINAL DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT.

GRUPO EXPERIMENTAL GRUPO TESTIGO # ANIMAL PESO. 90 PESO PESO. 90 PESO DÍAS INICIAL DIFERENCIA DÍAS INICIAL DIFERENCIA 1 106,03 85,45 20,58 130,40 95,45 34,95 2 151,38 104,54 46,84 145,23 113,63 31,60 3 156,24 118,18 38,06 150,54 120,00 30,54 4 174,89 133,63 41,26 144,44 118,18 26,26 5 186,78 145,45 41,33 172,90 129,54 43,36 6 209,40 153,73 55,67 229,91 184,09 45,82 TOTAL 984,72 740,98 243,74 973,42 760,89 212,53

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 243,74 40,62 11,61 28,58 4,75

n= ∑x = ̅= S= C.V= S. ̅ =

6 212,53 34,42 7,66 21,62 3,13

EXPERIMENTAL:

TESTIGO:

̅

̅

95

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

̅

̅

̅ ̅ ̅

̅ ̅ ̅

“t” DE STUDENT FINAL DE 90 DÍAS E INICIAL.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

√ √

√ √

te

= 2.04 *

g.l. =

10 0.05) 0.01)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

96

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°2. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 0 DÍAS.
0 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 85,45 104,54 118,18 133,63 145,45 153,73 740,98

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 95,45 113,63 120 118,18 129,54 184,09 760,89

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 740.98 123.49 25.82 20.90 10.58

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 760.89 126.82 30.22 23.82 12.38 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

97

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 0 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

√ √ ( )( )

√ √

te

= -0.45 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

98

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°3. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 15 DÍAS.
15 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 85,45 112.72 120 136.36 153.63 165.45 773.61

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 100 118.18 125.90 121.81 140.45 195.45 801.79

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 773.61 128.94 29.09 22.56 11.92

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 801.79 133.63 32.97 24.67 13.51 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

99

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 15 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= -0.58 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

100

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°4. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 30 DÍAS.
30 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 88.18 122.72 122.72 144.54 159.09 165.45 802.7

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 105.45 121.81 130.90 122.72 144.54 196.36 821.78

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 802.7 133.78 28.57 21.35 11.70

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 821.78 136.96 31.77 23.19 13.02 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

101

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 30 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= -0.41 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

102

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°5. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 45 DÍAS.
45 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 95.45 130 132.72 150.90 165 175 849.07

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 109.09 130 132.72 129.09 147.72 206.81 855.43

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 849.07 141.51 28.61 20.21 11.56

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 855.43 142.57 33.79 23.70 13.84 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

103

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 45 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= -0.13 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

104

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°6. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 60 DÍAS.
60 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 101.81 138.18 144.54 165.45 170.90 189.09 909.97

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 125 136.36 143.18 134.54 154.54 215.90 909.52

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 909.97 151.66 30.59 20.17 12.53

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 909.52 151.58 32.99 21.76 13.52 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

105

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 60 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= 0.0097 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

106

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°7. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 75 DÍAS.
75 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 103.18 144.54 150 170 178.18 199.54 945.44

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 126.9 140.9 146.36 139.09 163.63 221.81 938.69

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 945.44 157.17 33.24 21.09 13.62

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 938.69 156.44 34.18 21.84 14.00 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

107

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 75 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= 0.12 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

108

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°8. EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT A LOS 90 DÍAS.
90 DÍAS GRUPO EXPERIMENTAL 106.03 151.38 156.24 174.89 186.78 209.40 984.72

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6 TOTAL

GRUPO TESTIGO 130.40 145.23 150.54 144.44 172.90 229.91 973.42

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 984.72 164.12 35.43 21.58 14.52

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 973.42 162.23 35.91 22.13 14.71 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

109

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT A LOS 90 DÍAS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= 0.20 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

110

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N° 9.

EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT DEL CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS AL INICIO Y AL FINAL LA INVESTIGACIÓN.

CONTEO TOTAL DE GLÓBULOS BLANCOS AL INICIO Y AL FINAL DE LA INVERSTIGACIÓN. VALOR REFERENCIAL DE 4000 A 12000 GRUPO EXPERIMENTAL GRUPO TESTIGO # ANIMAL FINAL INICIO DIFERENCIA FINAL INICIO DIFERENCIA 1 13150 12700 450 20200 11500 8700 2 13750 18500 -4750 15050 13500 1550 3 14500 10350 4150 11500 11200 300 4 21400 11950 9450 14100 10250 3850 5 16700 12100 4600 15350 13150 2200 6 19100 12500 6600 21350 14200 7150 TOTAL 20500 23750

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 20500 3416.66 4979.32 145.73 2040.70

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 23700 3958.33 3315.33 83.75 1358.90

EXPERIMENTAL:
̅

TESTIGO:
̅

111

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

̅
̅ ̅ ̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

“t” DE STUDENT DEL CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS

̃ √

̃
√ ( ( ( ) ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= -0.49 (N.S)

g.l. =

10 0.05) (N.S) 0.01) (N.S)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

112

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N° 10 EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT DEL CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.
CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS REFERENCIA: 4000 A 12000 GRUPO EXPERIMENTAL GRUPO TESTIGO 12700 11500 18500 13500 10350 11200 11950 10250 12100 13150 12500 14800

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 78100 13016.66 2811.52 21.60 1152.26

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 73800 12400 1697.35 13.68 695.63 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

113

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN CON RESPECTO AL CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= 32.38 ***

g.l. =

10 0.05) 0.01)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

114

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N° 11 EVALUACIÓN DE LA PRUEBA “t” DE STUDENT DEL CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.
CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS REFERENCIA: 4000 A 12000 GRUPO EXPERIMENTAL GRUPO TESTIGO 13150 20200 13750 15050 14500 11500 21400 14100 16700 15350 19100 21350

# ANIMAL 1 2 3 4 5 6

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ = EXPERIMENTAL:
̅

6 98600 16433.33 3273.17 19.91 1341.46

n= ∑x = ̅= S= C.V= S.̅ =

6 97550 16258.33 3769.53 23.18 1544.88 TESTIGO:
̅

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

̅ ̅ ̅ ̅

√ √

115

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

“t” DE STUDENT AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN CON RESPECTO AL CONTEO DE GLÓBULOS BLANCOS.

̃ √

̃
√ ( ( √ ) ( ) ) ( )

(

) √

( ( (

) √ ) √ )( )

√ √

te

= 6.04 **

g.l. =

10 0.05) 0.01)

tt = (0.05) 1.812 (p tt = (0.01) 2.764 (p

116

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°12

EXÁMEN DE LABORATORIO #1 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #1 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

117

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #2 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #1 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

118

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #3 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #2 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

119

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #4 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #2 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

120

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #5 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #3 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

121

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #6 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #3 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

122

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #7 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTA #4 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

123

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #8 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #4 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

124

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #9 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #5 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

125

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #10 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #5 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

126

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #11 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #6 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

127

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #12 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #6 AL INICIO DE LA INVESTIGACIÓN.

128

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #13 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #1 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

129

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #14 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #1 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

130

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #15 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #2 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

131

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #16 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #2 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

132

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #17 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #3 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

133

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #18 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #3 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

134

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #19 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #4 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

135

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #20 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #4 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

136

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #21 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #5 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

137

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #22 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #5 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

138

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #23 BIOMETRÍA DEL TERNERO EXPERIMENTAL #6 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

139

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

EXÁMEN DE LABORATORIO #24 BIOMETRÍA DEL TERNERO TESTIGO #6 AL FINAL DE LA INVESTIGACIÓN.

140

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N° 13

GANANCIA DE PESO DEL GRUPO EXPERIMENTAL VS EL GRUPO TESTIGO

GANANCIA DE PESO DEL GRUPO EXPERIMENTAL VS EL GRUPO TESTIGO GRUPOS GRUPO EXPERIMENTAL GRUPO TESTIGO 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 910 75 DÍAS 90 DÍAS

740,9 773,63 802,72 849,09

945,44 984,72

760,9 801,81 821,81 855,45 909,54 938,69 973,42

ANEXO N°14

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (1 MES) VS TERNERO TESTIGO (1 MES).

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (1 MES) VS TERNERO TESTIGO (1 MES).
TERNEROS EXPERIMENTAL TESTIGO 0 DÍAS 15 DÍAS 85,45 95,45 85,45 100 30 DÍAS 88,18 105,45 45 DÍAS 95,45 109,09 60 DÍAS 101,81 125 75 DÍAS 103,18 126,9 90 DÍAS 106,03 130,4

141

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°15

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (2MESES) VS TERNERO TESTIGO (2 MESES).

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (2 MESES) VS TERNERO TESTIGO (2 MESES).
TERNEROS EXPERIMENTAL TESTIGO 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS 104,54 113,63 112,72 118,18 122,72 121,81 130 130 138,18 136,36 144,54 140,9 151,38 145,23

ANEXO N°16

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (3 MESES) VS TERNERO TESTIGO (3 MESES).

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (3 MESES) VS TERNERO TESTIGO (3 MESES).
TERNEROS EXPERIMENTAL TESTIGO 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS 118,18 120 120 125,9 122,72 130,9 132,72 132,72 144,54 143,18 150 146,36 156,24 150,54

142

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°17

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (4 MESES) VS TERNERO TESTIGO (4 MESES).

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (4 MESES) VS TERNERO TESTIGO (4 MESES).
TERNEROS EXPERIMENTAL TESTIGO 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 75 DÍAS 90 DÍAS 133.63 118.18 136.36 121.81 144.54 122.72 150.9 129.09 165.45 134.54 170 139.09 174.89 144.44

ANEXO N°18

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (5 MESES) VS TERNERO TESTIGO (5 MESES).

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (5 MESES) VS TERNERO TESTIGO (5 MESES).
TERNEROS EXPERIMENTAL TESTIGO 0 DÍAS 15 DÍAS 30 DÍAS 45 DÍAS 60 DÍAS 70 DÍAS 145.45 129.54 153.63 140.45 159.09 144.54 163.63 147.72 170.9 154.54 178.18 163.63 90 DÍAS 186.78 172.9

143

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°19

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (6 MESES) VS TERNERO TESTIGO (6 MESES).

GANANCIA DE PESOS DEL TERNERO EXPERIMENTAL (6 MESES) VS TERNERO TESTIGO (6 MESES).
TERNEROS EXPERIMENTAL TESTIGO 0 DÍAS 153.63 184.09 15 DÍAS 165.45 195.45 30 DÍAS 165.45 196.36 45 DÍAS 175 206.81 60 DÍAS 189.09 215.9 75 DÍAS 199.54 221.81 90 DÍAS 209.4 229.91

144

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°20

FOTO N°1

DETALLES: En la Foto N°1 podemos observar una placa teñida con la Técnica de Tinción de Gram, donde se encuentran los Microorganismos Ruminales (Lactobacillus) cultivados de Forma Artesanal.

145

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

ANEXO N°21 FOTO N°2

DETALLES: En la Foto N°2 podemos observar la Fachada Anterior de el Camal Municipal de Daule.

146

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°3

DETALLES: En la Foto N°3 se puede observar al Ganado Brahman en el corral de Descanso Previo al Sacrificio.

147

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°4

DETALLES: En la Foto N°4 podemos observar el Líquido Ruminal de los Bovinos Brahman Faenados, previo a ser colado con la ayuda de una tela previamente colocada en la parte superior de un balde, para obtener el líquido Ruminal sin Restos Vegetales.

148

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°5

DETALLES: En la Foto N°5 podemos observar cómo se realizaba el conteo de las bacterias con la ayuda de la cámara de Neubauer.

149

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°6

DETALLES: En la Foto N°6 podemos observar uno de los 64 cuadrantes que tiene la Cámara de Neubauer, cargada con contenido Ruminal diluido en Agua Destilada con una relación de 1:20 para facilitarme el conteo de microorganismos, para posterior registro.

150

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°7

DETALLES: En la Foto N°7 podemos observar una secuencia de un Video del Líquido Ruminal visto bajo el microscopio a 40x. En la secuencia se observa a las bacterias, protozoos y restos vegetales de los cuales se alimentas dichos microorganismos.

151

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

VER ANEXO N°22

FOTO N°8

DETALLES: En la Foto N°8 podemos observar el Material de Cristal como Fiola, Matraz y Frascos de Cultivo previos al Autoclavado para su total de desinfección y posterior envase del Cultivo Preparado.

152

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°9

DETALLES: En la Foto N°9 podemos observar cómo se preparó la leche “la vaquita” y se repartió en los envases de cristal para su posterior mezclado con los demás ingredientes del Cultivo.

153

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°10

DETALLES: En la Foto N°10 podemos observar como después de agregar la leche se procedió a agregar la melaza, para finalmente añadir el líquido Ruminal a cultivarse.

154

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°11

DETALLES:

En la Foto N°11 se puede observar como después de la aplicación del líquido ruminal como último ingrediente para el cultivo, éste se mezcla de manera homogénea con la leche; y la melaza por su mayor densidad se desplaza hacia el fondo del preparado. También podemos indicar que los cultivos permanecieron durante todo el cultivo en la incubadora a una temperatura de 37°C.

155

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°12

DETALLES:

En la Foto N°12 podemos observar que el cultivo después de 28 días manifiesta procesos fermentativos propios de los microorganismos con la liberación de AGV`s (Ácidos Grasos Volátiles), principalmente de Metano. Nótese la hinchazón de las tapas.

156

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°13

DETALLES: En la Foto N°13 se estaba procediendo a suministrar el Cultivo de Microorganismos o Bebida Probiótica a los Terneros del Grupo Experimental.

157

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°14

DETALLES: En la Foto N°14 se puede observar cómo se suministraba la bebida Probiótica a los Terneros del Grupo experimental.

158

Autor: Galo Ernesto Martínez Cepeda

FOTO N°15

DETALLES: En la Foto N°15 se puede observar que posterior a la suministración de la Bebida Probiótica o Cultivo, se procedía a enviarlos a los dos Grupos al Potrero a que sigan con su normal pastoreo.

159

You're Reading a Free Preview

Descarga
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->