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Tipos de tinciones

Existen mltiples mtodos de tincin histolgica, unos generales y otros especficos, que permiten poner de manifiesto tanto la topografa tisular, como tipos celulares concretos, determinados orgnulos o estructuras intracelulares. Las tinciones histolgicas propiamente dichas utilizan colorantes, la mayor parte de ellos derivados de la industria textil, que se eligen en funcin de su capacidad de interaccionar con los diferentes constituyentes de los tejidos. Tcnicas de tincin ms complejas como las histoenzimticas o inmunocitoqumicas se basan en el empleo de sustratos, lectinas, anticuerpos, etc. Que es un colorante? Un colorante es una molcula que tiene la capacidad de absorber radiaciones electromagnticas dentro de la regin del espectro visible es decier entre 400 y 650 nm. Los colorantes que absorben todas las radiaciones entre estos mrgenes, no transmiten ningn tipo de luz y se ven por lo tanto de color negro. Aquellos colorantes que absorben una franja ms estrecha, transmiten un color determinado. Por ejemplo el cido pcrico absorbe predominantemente la luz azul-violeta del final del espectro visible, dando como resultado una luz transmitida de color amarillo. Cundo se habla de un buen mtodo de tincin? Un buen m todo de tincin es aquel que cuando se reproduce da un alto porcentaje de xito con resultados equiparables. Todos lo m todos de tincin requieren siempre una adapatacin o modificacin para ser utilizados correctamente. Para reproducir un mtodo de tincin hay que utilizar siempre reactivos, colorantes y agua destilada de calidad y preparar las soluciones colorantes en material de vidrio extremadamente limpio. Conviene tener presente que la tcnica de tincin en s misma no es una t cnica aislada sino que forma parte integral de todo el proceso histolgico. Los protocolos de tincin deben escribirse de forma concisa, anotando de forma muy precisa indicando claramente todos los pasos necesarios para preparar todas las soluciones empleadas, tiempos de actuacin, temperatura, condiciones, etc... Puede la fijacin interaccionar con la tcnica de tincin?

Los diferentes fijadores interactan de forma diferente sobre las molculas que componen los tejidos produciendo modificaciones. En un mismo tejido, los colorantes se comportan de forma diferente en funci n del grado de fijacin y de la naturaleza del fijador utilizado. Por ejemplo, se conoce que tanto la formalina como el tetrxido de smio inducen basofilia en los tejidos, mientras que las soluciones colorantes a base de dicromato inducen acidofilia. En comparacin con la formalina, el fijador de Carnoy incrementa la avidez del tejido por los colorantes, mientras que el fijador de Zenker disminuye el grado de coloracin. Que es una tincin progresiva y una tincin regresiva? Una tincin progresiva es aquella en las que los cortes histolgicos se sumergen en la solucin colorante durante el tiempo necesario hasta que adquieren el grado de tincin deseada. Cuanto ms tiempo estn los cortes en la solucin colorante, ms fuerte es la tincin. Una tincin regresiva es aquella en la que los cortes se "sobretien" dejndolos en la solucin colorante durante un tiempo excesivo y posteriormente se procede a retirar el exceso de colorante (proceso que se llama "diferenciacin") mediante tratamiento con una solucin cida o alcohlica. En este caso se ajusta el tiempo de diferenciacin. Qu diferencia hay entre una tincin fsica y una tincin qumica? En una tincin fsica, el colorante se disuelve en el sustrato. Por ejemplo el Sudn III se disuelve en las grasas, y es empleado para demostrar gotas lipdicas. En una tincin qumica, el colorante interacciona qumicamente con el sustrato a travs de fuerzas de van der Waals, puentes de hidrgeno, enlaces covalentes o enlaces electrostticos. Qu es una tincin directa y una indirecta? En una tincin directa el colorante interacciona directamente con el sustrato. En una tincin indirecta se hace interaccionar en primer lugar a una sustancia qumica denominada "mordiente" con el sustrato la cual permite la posterior interaccin del colorante. Usualmente los mordientes son sales, hidrxidos o alumbres de metales bivalentes o trivalentes. Qu es una tincin tricrmica? Las tinciones pueden ser simples cuando se utiliza un solo colorante, o mltiples cuando se usan dos o ms colorantes. En una tincin

tricrmica se emplean tres colorantes, cada uno de ellos con unas particularidades, de tal manera que se consigue teir con colores diferentes, estructuras diferentes, permitiendo as su rpida identificacin en el microscopio. Qu es una tincin supravital? Es aquella que se realiza sobre clulas frescas, recin obtenidas, con objeto de realizar una observacin de las estructuras teidas con las clulas vivas. Por ejemplo, se puede teir las mitocondrias de clulas vivas con el colorante Verde Jano y observarlas con el microscopio mientras las clulas permanecen vivas. Qu es una tincin vital? Es aquel procedimiento por el cual un colorante no-txico, como el Carmn de litio o el Azul Tripn, se inyecta en un organismo vivo para estudiar procesos vitales de clulas capaces de acumularlo por pinocitosis o fagocitosis. En qu consiste una tincin negativa? Esta forma de tincin se basa en que el colorante no-tie la estructura que se desea estudiar, de tal forma que la morfologa externa o los contornos de esa estructura quedan delimitados por el propio colorante que se encuentra a su alrededor. Qu es una tincin de cortes "en flotacin"? Usualmente los cortes histolgicos se montan sobre portaobjetos antes de ser teidos lo cual facilita su manipulacin. Sin embargo en ocasiones, sobre todo cuando se utilizan cortes gruesos de 30-50 micras, obtenidos con un criostato o con un vibratomo, conviene realizar determinado tipo de tinciones "en flotacin". Para ello los cortes de tejido se mantienen sumergidos (en flotacin) en el interior de la solucin colorante lo cual permite la accesibilidad del colorante por ambas superficies. Este tipo de tcnica es poco comn cuando se utilizan colorantes pero es habitual cuando se realizan tcnicas de tincin histoenzimticas o inmunocitoqumicas. Qu es una tincin en placa?

Es aquella que se realiza utilizando placas de cultivo celulares. Es decir, la tincin se realiza sobre clulas que se han mantenido vivas en condiciones in vitro. En qu consiste una tincin "en bloque"? En ocasiones, en algunos tipos de impregnaciones metlicas, tcnicas de Golgi, etc... conviene realizar la tincin no sobre cortes histolgicos sino sobre la pieza o bloque de tejido. Para ello el bloque de tejido se sumerge en la solucin colorante durante un tiempo determinado. Los resultados finales no se pueden valorar, sin embargo, hasta que no se han confeccionado los cortes y se realiza la observacin microscpica. Qu es una tincin para microscopa electrnica? Para la observacin de los cortes ultrafinos con el microscopio electrnico de transmisin, es preciso "contrastar" los cortes con objeto de incrementar las diferencias de densidad electrnica de las diferentes partes de la muestra. Para ello se recurre al emleo de sales de metales pesados como uranio, wolframio o plomo. Qu es una tincin histoenzimtica? El objetivo de una tincin histoenzimtica es detectar la presencia de un enzima. Para ello se recurre a una serie de reacciones qumicas que demuestran la presencia del producto de la actividade enzimtica. Qu es una tincin inmunocitoqumica? Las tinciones inmunocitoqumicas o inmunohistoqumica pretenden detectar la presencia de una molcula con caractersticas antignicas. Para ello se recurre al empleo de anticuerpos que interaccionan directamente con los antgenos. Estos anticuerpos pueden estar marcados con una sustancia fluorescente y en este caso se trata de una tincin de inmunofluorescencia.

http://www.monografias.com/trabajos15/tinciones/tinciones.shtml http://html.rincondelvago.com/microscopia_2.html http://www.doschivos.com/trabajos/biologia/51.htm http://es.wikipedia.org/wiki/May_Gr%C3%BCnwald_Giemsa

http://www.ciencia-mx.com/temas/index.php?topic=1110.msg1139;topicseen http://html.rincondelvago.com/micologia_2.html http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/5-tincion.php