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Facultad de Bioanálisis, Veracruz

Manual de Prácticas de Hematología

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

SERIE BLANCA
ELABORÓ:

Q.C. MARIA ESTHER DESCHAMPS LAGO

Serie Blanca

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Facultad de Bioanálisis, Veracruz

Manual de Prácticas de Hematología

SERIE BLANCA: PRACTICA NO.1 OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE
1. INTRODUCCIÓN Obtención De Sangre Capilar Es el método empleado cuando se necesita tan solo una pequeña cantidad de sangre, ya que los estudios a realizar así lo requieren. El sitio más apropiado para obtener sangre capilar es la yema del dedo. En los niños más pequeños, es más conveniente obtenerla del talón ó del dedo pulgar del pie. Los detalles relativos a los recipientes y portaobjetos que se utilizan, se indican a continuación. VENTAJAS. • con que puede obtenerse • ente útil en pacientes geriátricos y en niños, en particular, recién nacidos. Facilidad Especialm

DESVENTAJAS. • Sólo logra obtenerse una pequeña cantidad de sangre que puede ser insuficiente. • Es un método por lo general tardado y que tiende a provocar hemólisis de la muestra • En pacientes inmunocomprometidos puede provocar infecciones, excepto cuando se realiza la punción después de 8 a 10 min. de contacto con la piel con un buen antiséptico. Obtención De Sangre Venosa . Es el principal método de extracción de sangre en el laboratorio de análisis clínicos, ya que es relativamente fácil de realizar. VENTAJAS. • Nos permite hacer múltiples exámenes y en repetidas veces si se desea, con la misma muestra. • Las alícuotas de plasma y suero pueden congelarse para futura referencia. DESVENTAJAS • Puede provocar la coagulación de la sangre si el procedimiento lleva mucho tiempo. • Algunos componentes no son estables en sangre anticoagulada. • Puede dificultarse en niños, pacientes obesos ó en estado de shock.

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• Puede ocasionarse hemólisis de las muestras afectando ciertas determinaciones, por las siguientes causas: • Por forzar el paso de la sangre al tubo • Por agitar el tubo enérgicamente • Por extraer sangre de un hematoma Anticoagulantes Empleados. Estas sustancias impiden la formación de coágulos. El mecanismo por el que se evita la coagulación, varía según el anticoagulante; por ejemplo, EDTA, citrato y oxalato se unen con el calcio, mientras que la heparina impide la conversión de protrombina en trombina. Ejemplos de anticoagulantes son EDTA, citrato de sodio, y heparina en forma de sal de litio ,Los tubos deben invertirse varias veces para asegurar la mezcla adecuada después e la recolección, de acuerdo con las instrucciones del fabricante. 2. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . El sitio más práctico para obtener sangre venosa es la flexura anterior del brazo, de preferencia justo por arriba de alguna de las ramas venosas que allí se encuentran. Las venas superficiales de la cara anterior del antebrazo son las más comúnes para la venopunción. Las tres venas principales que se utilizan son: 1) vena cefálica, ubicada en la parte superior del antebrazo y del lado del pulgar de la mano; 2) vena basílica, ubicada en la parte inferior del antebrazo y del lado del dedo meñique de la mano; y 3) vena cubital mediana, que conecta las venas basílica y cefálica en la fosa antecubital ( flexión del codo) y es la vena de elección.Si el paciente aprieta el puño después de aplicar el torniquete, la vena se tornará más prominente. El torniquete facilita la obtención. En los niños pequeños se pueden utilizar otros sitios; si es así, es mejor que la sangre la obtenga alguna persona con experiencia. Usar una aguja puntiaguda, nunca menor de calibre 21 y una jeringa de 5 ml ó de 10 ml. Tanto la aguja como la jeringa deberán estar limpias, secas y estériles. Con práctica se puede obtener sangre usando sólo una aguja con un tubo de goma por el que se deja correr la sangre hasta los tubos en los que se recoge la muestra. Para esta técnica se utilizan agujas de calibre 19. 3. LISTA DE REQUERIMIENTOS 3.1 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 2 1 1 1 1 1 1 DESCRIPCIÓN Tubos de recogida de muestras con EDTA Aguja de Vacutainer Contenedor de Vacutainer Jeringa Lanceta Torundas de algodón con alcohol isopropílico Ligadura

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4. PROCEDIMIENTO. 4.1 Punción Capilar 4.1.1 Indicaciones. En lactantes, se realiza en la superficie plantar interna ó externa del talón.En niños de más de un año, en la superficie palmar de la última falange del segundo, tercero ó cuarto dedo de la mano.La punción no deberá realizarse en una parte edematosa ó congestionada, ó donde la piel se encuentra fría y cianótica. 4.1.2 Identificación del Paciente

 Asegurarse de que el paciente llegue en condiciones óptimas y tranquilizarlo.  Colocar al paciente adecuadamente.  Checar el material para la extracción: 4.1.3 Técnica. 4.1.3.1 Limpiar cuidadosamente la piel en el sitio de punción y a su alrededor con algodón mojado en algún desinfectante , como alcohol de 70%. 4.1.3.2 Secar el área con gasa estéril seca. 4.1.3.3 Puncionar con una lanceta estéril ó aguja desechable. El movimiento debe ser rápido y la punción suficientemente profunda para asegurar que la sangre fluya libremente.La salida de la sangre puede facilitarse ejerciendo una suave presión en la cara lateral del dedo. A corta distancia del sitio de punción.

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Desinfectar nuevamente el sitio de punción. O directamente introducir el tubo del sistema de vacío.3.Facultad de Bioanálisis. tobillo y mano. Presionar ligeramente la gasa sobre el sitio de punción durante algunos momentos y después pedir al paciente que continúe aplicando la presión durante unos minutos. 2. Jalar lentamente el émbolo y obtener 2 a 3 ml de sangre. y secar la piel con algodón ó gasa limpios. suficientemente apretado para que restrinja el flujo de la sangre venosa. la cefálica. Asegurarse de que el émbolo de la jeringa esté hasta el fondo .1 Indicaciones.3. se emplea el mismo procedimiento y cantidad de anticoagulante. Obtener el volumen de sangre deseado jalando el émbolo muy despacio. Si se ejerce demasiada presión. 10. Preparar la jeringa y la aguja. las venas de la muñeca. prefiriéndose la cubital mediana. apoyando bien el brazo en posición horizontal.4 Manual de Prácticas de Hematología La sangre deberá fluir libremente. Cuando la sangre se obtiene empleando sólo una aguja sin jeringa.6 Obtener la cantidad requerida de muestra. Veracruz 4. retirando después la aguja con un solo movimiento. lo que la puede hacer inapropiada para estudio. 11. 4.2.2 Punción Venosa 4. limpiándola con una gasa seca y dejar el sitio de punción limpio y seco. 5. secos y estériles. Desinfectar la piel en el sitio de punción con algodón mojado en un desinfectante apropiado como alcohol de 70%. ya que resultan fáciles de palpar. 6. que puede ser sentado ó recostado. Soltar el torniquete y colocar una gasa seca sobre el sitio de la punción. aspirando la sangre con pipeta ó colocándola en un portaobjetos. Debe indicarse al paciente la posición correcta. se diluirá con los líquidos tisulares. 4.5 Descartar siempre la primera gota de sangre. 3. es decir. 4. 8. Aplicar un torniquete en el brazo ( por arriba del sitio de punción). 4. 4. Elegir la vena adecuada.1. la vena basílica. 7. Serie Blanca 5 .2 Técnica 1.1. Deben usarse tubos graduados para obtener la proporción adecuada de anticoagulante y sangre.3. cuidando que la técnica sea aséptica. ó en su defecto la aguja con el contenedor en el caso del sistema de tubos al vacío.1.2. Retirar la jeringa de la aguja y sustituirla por otra jeringa que contenga la solución anticoagulante de citrato de sodio. Insertar la aguja de la jeringa en una vena con un movimiento preciso. que la jeringa no contenga aire. 9.

-Realizar esquemas de punción venosa y de las principales venas empleadas. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Actividades: . -Realizar esquemas de punción capilar . Serie Blanca 6 .Practicar la toma de sangre capilar. .Practicar la toma de sangre venosa.Facultad de Bioanálisis.

de acuerdo con el anticoagulante empleado . sistema vacutainer y sus partes. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología -Realizar esquema de los diferentes sistemas de extracción: jeringa y sus partes. tipos de tubos y colores de tapones empleados en el sistema vacutainer. Serie Blanca 7 .Facultad de Bioanálisis.

Los frotis de sangre son esenciales para el estudio morfológico y cuantitativo de las células sanguíneas. 2 “EXTENDIDOSDE SANGRE” 1. Un frotis no deberá ser ni grueso ni delgado. se podrán distinguir en él tres áreas importantes: la cabeza ó zona de inicio.En ellos se pueden estudiar los eritrocitos. el cuerpo ó zona media y la cola ó área final del mismo. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . En un frotis bien realizado.Reporte de resultados. tales como la de Giemsa. Leishman ó May-Grünwald. INTRODUCCIÓN. ó bien de manera aislada . aunque puede variar la tinción de un lote a otro de colorante. 2. Los frotis de sangre deben confeccionarse con láminas portaobjetos de vidrio que previamente se hayan lavado y secado de manera conveniente.Facultad de Bioanálisis.LISTA DE REQUERIMIENTOS 3.____________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. la tinción será de mejor calidad.1 Materiales de Laboratorio Serie Blanca 8 . pero otras también lo son. los leucocitos y las plaquetas. Cuando un frotis se encuentra bien realizado. Los extendidos de sangre se realizan dentro del estudio del hemograma completo. y por lo tanto. y el propósito de ello es determinar las características morfológicas de cada tipo celular y evaluar la frecuencia relativa de los distintos tipos de leucocitos. las cuales son igualmente satisfactorias. con la finalidad de eliminar cualquier resto de grasa que pudiera quedar en ellos y evitar así una mala calidad en la tinción. Se deben teñir con una de las tinciones de Romanowsky las cuales varían en sus propiedades de tinción. La coloración de Wright es muy confiable y sencilla. es importante seleccionar una y familiarizarse con ella. pues en ninguno de ellos se podrán apreciar bien las áreas antes mencionadas. 3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología .

Si se emplea sangre venosa mezclada con anticoagulante. 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. 3. dejar secar y teñir.Facultad de Bioanálisis. NÚMERO 2 1 1 1 1 1 1 DESCRIPCIÓN Tubos de recogida de muestras Aguja de Vacutainer Contenedor de Vacutainer Jeringa Torundas de algodón con alcohol isopropílico Ligadura Caja de portaobjetos limpios ACTIVIDADES: -Realizar 10 frotis correctamente confeccionados. Colocar a una distancia de 1. 4. Técnica de los dos Portaobjetos. el frotis deberá realizarse lo más pronto posible. del lóbulo de la oreja ó por extracción venosa. 5. una pequeña gota desangre ( del tamaño de 3 cabezas de alfiler) obtenida por punción capilar del talón. dejando que hagan contacto y que por capilaridad éste se extienda a lo largo del borde. PROCEDIMIENTO. -Realizar esquema muestra que las partes de un frotis . Serie Blanca 9 . para lograr una película delgada de sangre. Se desliza el portaobjetos extensor hacia el extremo contrario. Aproximar el portaobjetos extensor a la gora. debido a que el contacto prolongado con éste altera la morfología celular.5-1. 1.9 cm del extremo derecho de un portaobjetos.

Facultad de Bioanálisis. Serie Blanca 10 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología -Realizar esquema de tres frotis: demasiado grueso. demasiado delgado y correctamente realizado.

2. Estos colorantes tiñen por lo general algunos elementos del núcleo. Son aquellos constituídos por sales cuya base es incolora y cuyo ácido es coloreado. Estas soluciones se usan para la coloración citoplasmática ó coloración de fondo. ha sido la base de las coloraciones panópticas utilizadas en la actualidad ya que ha tenido un gran éxito en la tinción diferencial de la Serie Blanca 11 . los más empleados en hematología. los eosinatos de azul y azur de metileno . 3) Neutros.Facultad de Bioanálisis. que como químico clínico tiene la obligación de conocer y dominar. INTRODUCCIÓN La finalidad de la tinción de Wright es lograr que el alumno se sienta capacitado para preparar adecuadamente algunos de los reactivos y colorantes más comúnmente empleados en las áreas de hematología y microbiología. 2) Basicos. Son aquellas sales de ácido incoloro y base coloreada como el clorhidrato de azul de metileno. Son aquellas sales con el ácido y la base coloreados. que emplea estos colorantes. A este grupo pertenecen las eosinas. A los colorantes de les puede clasificar en tres grupos: 1) Acidos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología .____________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ SERIE BLANCA: PRACTICA NO. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .Reporte de resultados. COLORANTES. El método de Romanowsky. por ejemplo. 3 “TINCIÓN DE WRIGHT Y REACTIVOS COMUNMENTE EMPLEADOS EN HEMATOLOGIA “ 1.

pues más tarde pueden desarrollarse alteraciones de las células sanguíneas como formas dentadas de los hematíes. es todavía mejor. no. La heparina neutraliza la trombina y otras fases de la activación de los factores de coagulación. La mayor parte de estos colorantes policromos derivados del método de Romanowsky. Los más conocidos de todos ellos. es muy útil el citrato trisódico. el EDTA y la heparina. buen menisco de colorante durante la tinción. citrato trisódico. combinando así. aunque para extensiones sanguíneas puede usarse tan sólo en los primeros minutos. sequestrene ( EDTA ). Los 4 anticoagulantes más usados son: mezcla de oxalato amónico y de potasio ( ó simplemente oxalato amónico ). artefactos en los núcleos de los linfocitos y monocitos. fagocitosis de los cristales de oxalato. se disuelven en alcohol metílico. por ser tóxica. aún después de un buen tiempo de estar hecha la mezcla. son los de Giemsa y de Wright. etc. pueden emplearse para impedir la coagulación de la sangre destinada a transfusiones. sin embargo. Se le compara con el oxalato para el estudio del hematocrito y hemoglobina. pero no de óptimos resultados en las extensiones sanguíneas. El EDTA ó sequestrene es tal vez el anticoagulante más usado para el recuento de células sanguíneas. vacuolización en el citoplasma de los granulocitos. El citrato trisódico. si la sangre se refrigera ( 2 horas a 24 horas ).Además no deben emplearse para determinaciones químicas de nitrógeno y potasio. hematocrito y recuentos globulares. pero para estudios morfológicos. Los 3 primeros impiden la coagulación sustrayendo el calcio del plasma sanguíneo por precipitación ó fijación en forma no ionizada. Para investigaciones de coagulación.Facultad de Bioanálisis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología mayoría de las estructuras normales y anormales de la sangre. ya que produce un fondo azul en aquéllas que son teñidas con el colorante de Wright. no se forman alteraciones ni artefactos en las células sanguíneas. y heparina. Serie Blanca 12 . La heparina también puede usarse para determinaciones como hematocrito y hemoglobina. la mezcla de oxalatos. la fijación con la tinción. Precipitación de colorante ANTICOAGULANTES. Los oxalatos pueden usarse para determinaciones como hemoglobina. Tipo de Error Tinción demasiado azul Causas Tiempo excesivo de tinción Lavado deficiente Ph muy alcalino Como se Corrige Disminuir el tiempo de tinción Lavar adecuadamente Acidificar el pH Tinción demasiado rosa Tiempo insuficiente de tinción Aumentar el tiempo de tinción Lavado excesivo Lavar adecuadamente pH muy ácido Elevar el pH Colorante no filtrado Filtrado de colorante Secado de la laminilla durante la Procurar que siempre haya un tinción. pues con él.

5L 3.1Colorante de Wright: Serie Blanca 13 . LISTA DE REQUERIMIENTOS 3.2 Equipo de Laboratorio Balanza Granataria Balanza Analítica 3.4 Preparación de los reactivos 3.4. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3. NUM.1 Reactivos.56 g 6.1 g 60 ml 2.8g 1.66 g 3g 0.3 Materiales de Laboratorio NUM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 CANTIDAD 1 2 1 4 1 3 1 1 10 DESCRIPCIÓN Mortero Probetas de 100 ml Matraz Volumétrico de 100 ml Varillas de vidrio Frasco de vidrio color ámbar de 1L de capacidad Frascos de vidrio color ámbar de 150 ml de capacidad Jeringa ó sistema vacutainer para toma de muestra Ligadura Portaobjetos 3. 1 2 3 4 5 6 7 NOMBRE DEL REACTIVO Colorante de Wright Metanol Na2HPO4 KH2PO4 EDTA Oxalato de amonio Agua destilada CANTIDAD 0.Facultad de Bioanálisis.

1. hasta completar disolución. se utiliza 1 gota de solución por ml de sangre. 4. que tenga la orilla relativamente lisa.4.Facultad de Bioanálisis. e ir agregando poco a poco más agua. Serie Blanca 14 . 3. hasta aforar a 1 L. Esta operación debe durar 30 min. EDTA Agua destilada 3g 100 ml Mezclar el EDTA poco a poco con el agua destilada. Se deja reposar dos días y se filtra.PROCEDIMIENTO. Seleccionar un portaobjetos nuevo de 25 X 75 mm para hacer extendidos.4. 3.66 g 1L Mezclar las sales con poca cantidad de agua destilada.4.1 g 60 ml Se tritura el colorante con el alcohol en un mortero. 3.1. 4. 4.3. Guardar en un frasco ámbar de 1 L. En ambos. Veracruz Colorante de Wright: Metanol: Manual de Prácticas de Hematología 0. Oxalato de amonio Agua destilada 0.8 g 80 ml Mezclar poco a poco el oxalato de amonio con el agua destilada.56 g 6.Amortiguador ó Buffer de fosfatos Na2HPO4 KH2PO4 Agua destilada para aforar a 2. ésto se hace poco a poco.2 .4 -Solución de Oxalato de amonio.1 Técnica: Tinción de Wright.EDTA.

1. Esta debe extenderse rápidamente a lo largo de la orilla del portaobjetos para hacer los extendidos. variando el tamaño de la gota de sangre.3Colocar una pequeña gota de sangre a 2 ó 3 mm de la orilla de un portaobjetos limpio y seco. con tres frotis más deberá ensayar: 2 minutos de colorante y 4 de amortiguador. se escribe con lápiz el nombre del paciente en una orilla del portaobjetos. El alumno deberá ensayar tiempos hasta ajustar aquellos que más convengan para una óptima coloración. Gránulos neutrófilos del citoplasma.2 Obtener una pequeña cantidad de muestra de sangre periférica. Soplar ligeramente para mezclar uniformemente. Una vez seco.1.5 Fijar el extendido de sangre en alcohol metílico absoluto durante 2 a 3 minutos. lila ó violeta Gránulos eosinófilos. Plaquetas. al principio con chorro delgado y suavemente y después con el chorro fuerte para eliminar todo exceso de colorante. 4. 4. Así. cubrir el portaobjetos con un cubreobjetos rectangular y fijarlo con una gota de líquido de montaje. azul claro. Gránulos basófilos. con la cromatina y paracromatina netamente diferenciadas. color lila oscuro. Los resultados esperados en la tinción serán los siguientes: Hematíes en color rosa.7 Después de 5 minutos enjuagar cuidadosamente con agua de la llave ó amortiguador de fosfatos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. Limpiar el reverso del portaobjetos en posición erecta. 4. 4. Se puede usar sólo aceite de inmersión en una preparación temporal. Esta fijación es recomendable aunque el colorante que se vaya a emplear se encuentre diluído en alcohol metílico absoluto. Citoplasma de los linfocitos. 4.2 Resultados Esperados.Facultad de Bioanálisis. 6 minutos de colorante y 6 minutos de amortiguador.1. Núcleos de los leucocitos de azul púrpura. El extendido de sangre debe medir aproximadamente 30 mm de largo . Citoplasma de los monocitos.1.4 El extendido de sangre se seca con el aire. rojo tirando a naranja. El portaobjetos de extensión no se despegará hasta haber extendido toda la sangre.6 Cubrir el portaobjetos completamente con el colorante. El color del extendido de sangre cambiará de rojo a café claro. Colocar el portaobjetos para hacer extendido en un ángulo de 30 a 45 grados con respecto al portaobjetos que tiene la muestra y hacer contacto cn la gota.1. Cuando se haya secado. 6 minutos de colorante y 11 minutos de amortiguador. ligero azul. Aparecerá un brillo metálico verde. Deslizar el portaobjetos de extensión sobre la superficie dispersando la muestra de sangre. Después de 3 minutos añadir un volumen igual de amortiguador. la presión ó la velocidad de extensión. púrpura tirando a azul oscuro. Serie Blanca 15 .1. 4. El grueso del extendido de sangre puede regularse modificando el ángulo del portaobjetos de extensión.

éste puede ser evaluado en búsqueda de anormalidades. Serie Blanca 16 . puede considerarse significativa. Incluso. en la forma. en otros. Cada examen debería incluir análisis con bajo poder ( 10X ).Reporte de resultados . errores encontrados en la tinción. -Corregir de acuerdo al recuadro .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.Ciertos problemas de la muestra y anormalidades morfológicas significativas pueden pasarse por alto a menos que todos los objetivos sean empleados. Una vez que se ha hecho y teñido un frotis satisfactorio. La presencia de eritrocitos anormales en el frotis de sangre periférica a menudo brinda importantes claves en el diagnóstico diferencial de las anemias. e inmersión ( 100X ). 4 “EVALUACIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA” 1. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Actividades: -Practicar la tinción de Wright con frotis de sangre periférica.Un error común consiste en comenzar el examen con el objetivo de inmersión. la presencia de solo una única célula con ciertos cambios. .Facultad de Bioanálisis. con alto poder ( 40 ó 45 X). y puede ser también de ayuda en el diagnóstico de otras enfermedades. la anormalidad se considera importante sólo si un número significativo de células se ven afectadas. La morfología de los eritrocitos puede verse alterada con cambios en el tamaño.INTRODUCCIÓN. en las propiedades tintoriales de células individuales ó por la presencia de ciertos materiales dentro de ellas.

y la morfología puede ser difícil de evaluar. En enfermedades inflamatorias.Se puede hacer un recuento indirecto de las mismas cuando así se requiera. 3+. La intensidad de la formación de "rouleaux" depende de la concentración de las proteínas plasmáticas. aún cuando los nuevos contadores electrónicos den un resultado anticipado del mismo. Todas estas determinaciones pueden diferir de observador a observador. etc. muchos laboratorios usan un método semicuantitativo de evaluación. En el área gruesa del frotis. especialmente el fibrinógeno. los niveles de fibrinógeno pueden aumentar. 2. células en "diana ". los márgenes individuales de las células son difíciles de distinguir y dan una imagen como de pilas de monedas que han sido empujadas y tiradas. consistente en los términos: leve. Serie Blanca 17 . es aquella que contiene aproximadamente 200-250 células por campo a seco fuerte. O bien un sistema " por cruces" :1+. así como la presencia de células que normalmente no se ven en sangre periférica. etc. Algunas anormalidades pueden requerir que se indique le severidad del cambio. las células pueden interpretarse como microcíticas en forma equivocada. 2+. se buscarán anormalidades en las células blancas y éstas se reportarán. Tan importante como el que haya consistencia entre los observadores.Facultad de Bioanálisis. en el área "aplumada" ó terminal del frotis. Por ello. es importante realizar el recuento diferencial. es importante también la selección de una área apropiada del frotis para la evaluación. conduciendo a una variación considerable en el análisis del mismo frotis de sangre. las células más pequeñas de sangre periférica. 2. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . p. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Asimismo. macrocitosis. y buscar anormalidades en su forma y en su tamaño. También tenderán a formar apilamientos ( rouleaux ) en esta área. También la elevación de gama globulinas. Los laboratorios actualmente tratan de controlar estas inconsistencias desarrollando criterios para estandarizar la evaluación de la morfología. En un frotis en " cuña ". provoca formación de "rouleaux". como se observa en el Mieloma múltiple. En el verdadero Roleaux. sino únicamente en médula ósea. Lo mismo aplica para las plaquetas. aunque ahí exista menor cantidad de células. Así. en la serie blanca.e. Del mismo modo. esferocitosis.1 Análisis con bajo poder. demuestran cambios que pueden considerarse patológicos. el área ideal para examinar un frotis. Esto corresponde a una área en donde los eritrocitos se tocan pero no se enciman. ya que sólo puede confirmarse éste por medio de dicha lectura. a menos que exista alguna patología presente. moderado ó severo. imagen que persiste aún en las áreas más delgadas del frotis.

se acumularán más en estas áreas. Es importante incluir las células de los márgenes.500 ( 2 a 2. ya que esta evidencia de coagulación podría interferir con muchas pruebas hematológicas. Los extremos laterales y aplumado deben evaluarse en búsqueda de un número desproporcionado de leucocitos.El segundo problema por resolver con este objetivo. para lograr esto.2 Análisis con alto poder. Esta debe ser donde los eritrocitos se tocan pero no se sobreponen.Las células blancas deberían verse fácilmente con este aumento. 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Este objetivo debe utilizarse para evaluar la calidad de la tinción. puede ser necesario incluir áreas fuera del área ideal con el fín de encontrar suficientes células blancas. En primer lugar. donde los eritrocitos se tocan pero no se Serie Blanca 18 . Con este objetivo. el frotis deberá descartarse y prepararse uno nuevo. las cuales están fuera del área ideal de observación. será estimar la cuenta total de leucocitos. eritrocitos y plaquetas ) deben observarse en búsqueda de anormalidades morfológicas. y puede ser un área en donde se encuentren 200 eritrocitos por campo.. Si la cuenta de leucocitos es muy baja. multiplicado por un factor de corrección que a menudo está entre 2000 y 2. el frotis debe ser nuevamente teñido.Facultad de Bioanálisis.Las células más grandes ( por ejemplo los neutrófilos y los monocitos. indicando esto que debe realizarse una nueva toma. tienden a acumularse más en estos lugares y si el frotis está mal hecho. La cuenta diferencial consiste en identificar cuando menos 100 leucocitos consecutivos. Con este objetivo existen dos problemas por resolver. es decir. debe seguirse el patrón de observación de la imagen siguiente: El número de plaquetas también puede ser estimado con este objetivo. se debe seleccionar el área apropiada para iniciar la cuenta diferencial. también debe poder estimarse y los tres tipos de células ( leucocitos . la cuenta de plaquetas. 2.Si la mayoría de las células se encuentran en el borde aplumado. así como las del cuerpo del frotis. Empleando la misma área que para la cuenta diferencial.El borde aplumado debe ser examinado para buscar cúmulos de plaquetas ó filamentos de fibrina. y reportar estos valores como un porcentaje.5 en miles) representará la cuenta total del leucocitos.3 Análisis con objetivo de inmersión. contar el número de células blancas observadas en cinco a diez campos y determinar el promedio. El promedio.Si no es asi. la cuenta diferencial de leucocitos debe estimarse. Estando en el área ideal. Así.

1. Este número será convertido en no. 4.Facultad de Bioanálisis. 3.1Seleccionar el área apropiada para iniciar la cuenta diferencial. deben contarse las plaquetas en al menos diez campos.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con colorante de Wright 4. LISTA DE REQUERIMIENTOS.2 Análisis con alto poder.1.000/ μl en el primer caso. 4. cada plaqueta.1 Análisis con bajo poder. de plaquetas/μl de sangre.2. Si se llegaron a observar un promedio de 12 plaquetas por campo. La última actividad a realizar con este objetivo. ó 240. ó demasiado gruesas. Cualquier anormalidad ó inclusión en células rojas y blancas.3Evaluar extremos laterales y aplumado en búsqueda de leucocitos desproporcionados. Las plaquetas también deberán evaluarse en su tamaño y forma. Serie Blanca 19 .000 / μl en el segundo caso. También es importante evaluar la forma y el tamaño de los eritrocitos en esta misma área. Microscopio de Luz 3.3Estimar la cuenta total de leucocitos. 4. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología sobreponen. 4. en cada cinco campos deberán ser reportadas .000 plaquetas ó 20. Las células suelen distorsionarse en áreas muy delgadas. y dicho número se multiplicará por un factor determinado por el propio laboratorio en base a la combinación de los objetivos y oculares empleados en sus microscopios. 4. observada representa 15.2. 4.000 / μl. Por ejemplo.2Examen en el borde aplumado del frotis en búsqueda de cúmulos de plaquetas ó filamentos de fibrina. 3. la cuenta total de plaquetas sería de 180. como se hizo con la cuenta de leucocitos.1 Equipo de laboratorio. sería evaluar la morfología celular.1. entonces. 4.1Evaluar la calidad de la tinción. Esto puede irse haciendo a medida que se va realizando la cuenta diferencial. deberá reportarse. Deberá calcularse el número promedio de plaquetas por campo. PROCEDIMIENTO. Más de una forma inusualmente grande de plaquetas.

1.1 Seleccionar el área apropiada para iniciar la cuenta diferencial. Análisis con bajo poder.1Realizar el recuento diferencial.2 Examen del borde aplumado del frotis ___________________________________ __________________________________________________________________ 1.________________ ___________________________________________________________________ 2.3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4.Reporte de resultados 1. y diferenciando la línea celular a la que pertenecen. 4.3._____________________________________ ______________________________________________________________________ 3.3. ACTIVIDADES: .3Análisis con objetivo de inmersión.3Buscar anormalidades morfológicas tanto de los leucocitos como de los eritrocitos y de las plaquetas.Facultad de Bioanálisis. Análisis con objetivo de inmersión.1 Recuento diferencial Serie Blanca 20 .____________________ _____________________________________________________________________ 2.3 Examen de los extremos laterales y aplumado del frotis. 2. 3. 4. contando cien células en total.2Realizar el recuento indirecto de plaquetas.1 Calidad de la tinción:_________________________________________________ __________________________________________________________________ 1. Análisis con alto poder. 4.2 Estimar la cuenta total de leucocitos.

5 “FORMULA LEUCOCITARIA Ó RECUENTO DIFERENCIAL” 1. TIPO CELULAR Metamielocitos Bandas Segmentados Linfocitos Monocitos PORCENTAJE ( % ) 0-2 0-11 40-74 12-46 1-13 LÍMITES ABSOLUTOS <10-500 100-800 2000-6000 1000-4200 100-800 Serie Blanca 21 . podremos calcular los valores absolutos de cada línea celular en sangre periférica.INTRODUCCIÓN. La fórmula leucocitaria nos da información sobre el porcentaje de leucocitos de cada tipo.Facultad de Bioanálisis.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .Se anexan también.7 ) -VALORES NORMALES. y se comparará contra los siguientes valores normales . 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Metamielocitos Bandas Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos _____ _____ _____ _____ _____ _____ _____ 100 3. que indican el número de cada estirpe celular expresado por microlitro . A partir de estos valores y de la cuenta total de glóbulos blancos obtenidos en microlitros. de acuerdo como se indica en el procedimiento. Se realizará el recuento diferencial. y así compararlos con los valores normales de cada una de ellas. ver práctica no. los valores normales absolutos. en base a su morfología y características tintoriales. además de los valores normales en %. ( para obtenerlos.2 Busqueda de anormalidades morfológicas de: leucocitos ___________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.

El recorrido debe hacerse de manera vertical. REPORTE DE RESULTADOS: TIPO CELULAR Metamielocitos Bandas Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos PORCENTAJE ( % ) VALORES ABSOLUTOS Serie Blanca 22 .1 Equipo de Laboratorio 1. para no omitir células de los márgenes y para no salirse del área ideal para el recuento. y reportar estos valores en por ciento. Veracruz Eosinófilos Basófilos 0-7 0-3 Manual de Prácticas de Hematología <100-200 <10-20 3. LISTA DE REQUERIMIENTOS 3. PROCEDIMIENTO. con valores por arriba y por debajo de lo normal. ACTIVIDADES.Facultad de Bioanálisis.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con colorante de Wright 4. identificar cuando menos 100 leucocitos consecutivos en un frotis teñido con Wright. Con el objetivo de inmersión. donde las células se tocan pero no se sobreponen. Microscopio de Luz 3. Investigar en qué casos pueden encontrarse cada una de las líneas celulares reportadas en la cuenta diferencial.Se aconseja identificar el área ideal para la observación: el área del cuerpo del frotis.

Un aumento de los glóbulos blancos por encima de 10. lo que podría deberse en realidad a una hemoconcentración. 6 “RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS” 1. lo cual indica una dilución distinta. que con frecuencia es acompañada por incremento de los granulocitos neutrófilos. La medición del número total de leucocitos sirve en ocasiones de guía para evaluar la severidad de una enfermedad. siempre que se le asocie a la clínica que ésta presenta.Facultad de Bioanálisis. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . aunque no es la única causa. la grabación 0. se conoce como leucopenia.INTRODUCCIÓN. se llama leucocitosis. y en la inferior. Una disminución en el recuento de glóbulos blancos por debajo de los valores normales establecidos. Es menos frecuente que aumenten todas las líneas celulares. son similares a las que se usan para el recuento de glóbulos rojos. que es en Serie Blanca 23 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.5. la grabación 11. La evaluación de los glóbulos blancos considera el conteo total de leucocitos y la cuenta diferencial de cada uno de ellos. pero presentan en su capilar superior.000 /μl. Las pipetas empleadas para el recuento manual de glóbulos blancos.

2 Equipo de Laboratorio Serie Blanca 24 .1 Reactivos NUM 1 NOMBRE DEL REACTIVO Acido Acético CONCENTRACIÓN 2% CANTIDAD 50 ML 3.Facultad de Bioanálisis. Los cuadrados de las cuatro esquinas están subdivididos en 16 cuadrados. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología este caso de 1:20.LISTA DE REQUERIMIENTOS. de 1 mm² cada uno. en 25. 3. nada más que el conteo y los cálculos se realizan de diferente manera. Se emplea la misma cámara cuentaglóbulos llamada cámara de Neubauer. y el cuadrado central. Cuadrículas ( L ) para recuento de glóbulos blancos 3. La cámara cuentaglóbulos presenta un retículo con una superfcie total de 9mm².

Estos se encuentran divididos en 16 cuadros cada uno.1 Técnica.5 Dejar reposar 4.1 Pipetear sangre hasta la marca de 0.3 Material de Laboratorio CANTIDAD 1 1 1 1 DESCRIPCIÓN Cámara de Neubauer Pipeta para recuento de glóbulos blancos Tubo de ensaye de 13 X 100 Boquilla 4.1.1.6 Contar los leucocitos contenidos en los cuatro retículos de las esquinas. 4.1.2. Veracruz 1. 4. Microscopio de Luz Manual de Prácticas de Hematología 3.2 Preparación del reactivo 4.7 Realizar cálculos como indica la fórmula: N______x______20______x______10 = 4 En donde: N X 50 Serie Blanca 25 .3 Mezclar en el agitador por 2 minutos. 4.1.Facultad de Bioanálisis.1.2 Limpiar cuidadosamente con una gasa o papel suave el extremo de la pipeta y completar con el líquido de dilución hasta la marca de 11.1.Agregar 1 gota de azul de metileno líquido 5 PROCEDIMIENTO. 5.1Líquido de Turk ó hemolizante: -solución de ácido acético al 2% .5 4. 4.4 Cargar la cámara con la dilución bien homogeneizada 4.1.

750 No.15. Realizar un esquema de la pipeta empleada para el conteo de Glóbulos Blancos.000 .3. 4. Real de leucocitos= 11. De leucocitos= 15. De leucocitos contados – Y Ejemplo: No.000 .15.3.3.2 4.000 / mm³ Recién nacidos: 10.3. Real de leucocitos= 15.7 4.000 – 3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología N = suma de los leucocitos encontrados en los 4 retículos 20 = Título de la dilución 10 = Corrección de la cámara para llevar a 1 mm³ 4 = número de retículos. Para evitar dicho error. 35 + _ 35 x 15.1 4. Si se practica la punción venosa.4 4.3.000 % de eritroblastos= 35 Y= 100 No. Pipetas mal calibradas Dilución agitada insuficientemente Carga de la cámara con la primera gota de la pipeta Distribución desigual de la cámara Incorrecto ajuste del cubreobjetos Cuenta defectuosa de los elementos celulares Confundir a los eritroblastos con leucocitos.3.2 Valores Normales: Adultos: 5.6 4.000 / mm³ Niños hasta 5 años: 6.000 Serie Blanca 26 .10.000 .3.000/ mm³ 4.8 Recolección de la sangre en condiciones de cianosis. se debe realizar una corrección con la siguiente fórmula: Y = %_eritroblastos_contados X No.Facultad de Bioanálisis.3 Causas de error 4.5 4.3 4. De leucocitos contados 100 + % de eritroblastos contados Numero real de leucocitos= No. evitar la compresión exagerada y prolongada.250 ACTIVIDADES.3.

Facultad de Bioanálisis. Serie Blanca 27 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Enlistar causas de leucocitosis así como de leucopenia.

Aunque más frecuentemente se debe a un aumento en los neutrófilos ( neutrofilia ). el aumento en la cuenta total de blancos y la aparición de formas neutrofílicas jóvenes. En general.P.Reporte de resultados .INTRODUCCIÓN. no siempre es así: puede estar elevada a causa de un incremento en los linfocitos ( linfocitosis). El hallazgo de un número aumentado de Serie Blanca 28 . por lo que algunos autores se refieren a la primera circunstancia como un " cambio regenerativo hacia la izquierda ". el número aproximado de leucocitos en una muestra que previamente haya sido analizada y de la cual se haya reportado leucocitosis y desviación a la izquierda. se conoce como “leucocitosis”. CON LEUCOCITOSIS Y DESVIACIÓN A LA IZQUIERDA” 1. de hecho sí es debido a algún otro proceso patológico y debe ser distinguido de leucemia. 7 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Un cambio en sangre periférica que no está asociado con ningún cambio morfológico celular pero que está asociado con enfermedad.Facultad de Bioanálisis. Ocasionalmente. y casi siempre se debe a alguna alteración . es un incremento en las bandas.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. con cuenta normal ó baja de leucocitos.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . una cuenta de glóbulos blancos elevada. y a la segunda . como un " cambio degenerativo hacia la izquierda ". en los eosinófilos ( eosinofilia ). ésto puede indicar un peor pronóstico para el paciente. Este exceso de salida de estas formas a la circulación. Normalmente la cuenta de neutrófilos también se encuentra aumentada. que pareciera la sangre periférica que se analiza en pacientes con leucemia mielocítica crónica. El término " Reacción Leucemoide " es el indicado en esta situación. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología . ya que si no es así. particularmente si formas aún más jóvenes son encontradas en la circulación. Se deberán buscar tanto en el frotis sanguíneo como por medio del recuento de glóbulos blancos en el contador electrónico ó por el método manual. es tan marcada. Esto puede ser referido como una " desviación hacia la izquierda ". 2.

Facultad de Bioanálisis. ACTIVIDADES. 4.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 29 .Reporte de resultados . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología banda y leucocitos y el de formas jóvenes que incluyan principalmente formas en metamielocitos. confirmarán dicho diagnóstico .PROCEDIMIENTO. . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.

sin embargo. y ésto se determinará en base al cálculo de los valores absolutos. se podría decir que puede haber eosinofilia. Sin embargo. y ciertas parasitosis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de eosinofilia. Aun cuando la cuenta de glóbulos blancos no estuviera elevada. puede haber un incremento en los eosinófilos que lleven a una leucocitosis.P. no son las únicas. 3. se podría decir que hay “eosinofilia”.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.Facultad de Bioanálisis. 8 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con colorante de Wright 4. PROCEDIMIENTO. Como ya se ha mencionado. 3. 2.INTRODUCCIÓN. Son dos las causas más comunes de esta condición: las enfermedades y reacciones alérgicas. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. la elevación de los glóbulos blancos a partir de neutrófilos. Serie Blanca 30 .LISTA DE REQUERIMIENTOS.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . es la más común. haciéndose el recuento diferencial así como la determinación de los valores absolutos de los eosinófilos. CON EOSINOFILIA” 1. Si los valores absolutos de los eosinófilos se encuentran por arriba de lo normal.

Reporte de resultados . Realizar una lista de enfermedades en las que se encuentren elevados los eosinófilos.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 31 .Facultad de Bioanálisis. . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología ACTIVIDADES.

tendrán un núcleo obscuro y redondo sin evidencia de estructura nuclear. En una muestra fresca. Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de picnosis y microorganismos intracelulares. • Organismos intracelulares. 3.Facultad de Bioanálisis. sin embargo. también pueden aparecer en pacientes que reciben quimioterapia.LISTA DE REQUERIMIENTOS.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Estas células también pueden ser identificadas como necrobióticas. Los lóbulos pueden estar separados ó puede haber un único y redondo núcleo en degeneración. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ _______________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. y puede observarse intra ó extracelularmente. ó bien una levadura. • Picnosis.INTRODUCCIÓN. pero pueden distinguirse la paracromatina y la cromatina. estas células son evidencia de que el organismo está " perdiendo la batalla " en un paciente con infección. ya que una sola célula que presente un microorganismo es significativo.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN Serie Blanca 32 . de mal pronóstico aunque podría ser un artificio originado por la toma de la muestra a través de algún catéter contaminado. CON PICNOSIS Y MICROORGANISMOS INTRACELULARES” 1. e indica una septicemia abrumadora.Las células muertas ó las que están a punto de morir. 3.P. El núcleo del neutrófilo normalmente es algo picnótico. Estos cambios también pueden encontrarse como resultado de una prolongada exposición al EDTA. Esta es un tipo de inclusión muy rara de encontrar e indica la presencia del organismo infectante. Puede ser o bien una bacteria. 2. Las células pueden distinguirse como neutrófilas porque el citoplasma retiene el tiente rosa habitual. 9 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.

ACTIVIDADES. .Facultad de Bioanálisis.Reporte de resultados .PROCEDIMIENTO. Veracruz 1 Manual de Prácticas de Hematología Frotis de sangre periférica teñido con Wright 4. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 33 .

A veces pueden ser la única evidencia de un proceso Serie Blanca 34 . y además aquellas que en verdad presenten granulaciones tóxicas. artritis reumatoide. Ya que la principal función de los neutrófilos es la fagocitosis. como por ejemplo. aunque no siempre. 10 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Este cambio representa la presencia de gránulos primarios no específicos.Facultad de Bioanálisis. ataque al corazón. Estas son identificadas morfológicamente como " hoyos " dentro del citoplasma.INTRODUCCIÓN. lo harán en variedad de grados. pueden haber numerosas vacuolas dentro del citoplasma como una evidencia de ésto. Si estos gránulos fueran realmente debidos a un proceso patológico. si todas las células se ven afectadas en el mismo grado. gota. si existe actividad fagocítica aumentada. CON CAMBIOS MORFOLÓGICO-BENIGNOS: GRANULACIONES TÓXICAS. así como en respuesta a una neoplasia. ésto debe considerarse como un artificio del frotis. • Cuerpos de Döhle. • Granulaciones Tóxicas. Pueden deberse al menor número de mitosis realizadas durante la maduración celular. Algunas células pueden contener sólo unos pocos gránulos. los cuales se tiñen de color azul-púrpura con la tinción de Wright como sucede con los del promielocito. Al igual que en las granulaciones tóxicas. no serían vistos en todas las células. debe sospecharse un artificio del frotis. CUERPOS DE DOHLE Y AGRANULACIÓN CITOPLÁSMICA” 1. Sin embargo. Una granulación aumentada también puede ser vista cuando el frotis es teñido por mucho tiempo. VACUOLIZACIONES. insuficiencia renal. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. También es frecuente observarlas junto con las granulaciones tóxicas. pueden contener muchos. en infección bacteriana. Estas inclusiones son a menudo encontradas junto con las granulaciones tóxicas y/ó vacuolización.P. otras. • Vacuolización. Las granulaciones tóxicas pueden ser vistas en una variedad de desórdenes inflamatorios ó tóxicos. especialmente con las bacterias piógenas . ésto también puede ser el resultado de una exposición prolongada al EDTA. Si todas las células se ven afectadas y en el mismo grado de intensidad. La vacuolización puede encontrarse frecuentemente cuando el paciente tiene una infección bacteriana.

______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 35 . pueden ser muy prominentes.Facultad de Bioanálisis. Estas células también se distinguen por un borde citoplásmico irregular en contraste con el borde redondo usual del neutrófilo.LISTA DE REQUERIMIENTOS. . Se analizarán muestras con alteraciones en las que exista el hallazgo de varios cambios morfológico-benignos. aunque no siempre. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . que indica la formación de un pseudópodo. Tienen el característico color azul tenue del RNA y se les encuentra frecuentemente cerca de la membrana citoplasmática de la célula. la vacuolización. aunque cada uno de ellos puede verse individualmente. PROCEDIMIENTO.Reporte de resultados . • Agranulación citoplásmica. Los cuerpos de Döhle son pedazos de RNA residual ( retículo endoplásmico rugoso ) en el citoplasma. ACTIVIDADES. y a menudo estos cambios se asocian con aumento en las formas en banda y cuenta elevada de leucocitos. y los cuerpos de Döhle.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frois de sangre periférica teñido con Wright 4. 3. 3. En ocasiones. y en otras. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología tóxico ó reactivo en un paciente.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. En ocasiones pueden observarse los tres tipos de cambios tóxicos en la misma célula. y pueden pasarse por alto si el observador no tiene suficiente cuidado en la observación. la única evidencia de neutrófilos activados es una área clara agranular en la periferia de la célula. pequeños y muy tenues. También ésto puede ser visto junto con las granulaciones tóxicas. 2. En algunas células.

A veces. En cambio. Algunos rasgos útiles para distinguirlos es que los monocitos son células que empujan a otras y tienden a indentarlas cuando están muy próximas a ellas. Son grandes.Facultad de Bioanálisis. el hallazgo es considerado clínicamente significativo y debe ser reportado. y el patrón cromatínico es más delicado y fino. El núcleo del monocito. que tienden a irradiar del núcleo ó a concentrarse en la periferia de la célula. Estas células. indentado ó lobulado y tiene una apariencia más abierta y color más tenue que lo usual.INTRODUCCIÓN. El núcleo puede ser redondo. el virus Epstein-Barr-la causa de mononucleosis infecciosa. y contiene áreas de un azul más intenso. 3+ " ó " leve. las células tienden a ser muy similares morfológicamente. No presenta nucleolos. comparando con el usual color azul cielo del linfocito normal. el citoplasma es predominantemente azul cielo. Puede aplicarse el término " linfocitos variantes " ya que no todos los cambios son " reactivos " ó asociados con infección viral. por ejemplo. Debe recordarse entonces que en casos de leucemia. especialmente con el grupo herpes virus ( por ejemplo. 11 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. hay quien puede confundir estas células con formas malignas ó blastos. como puede verse. Debido a que varias formas son el resultado de infección viral. con citoplasma abundante y a menudo vacuolado. sífilis ó tuberculosis. los linfocitos más fácilmente sufren esa indentación . CON LINFOCITOS ATÍPICOS” 1. dando una apariencia monótona. 2+. el término " reactivo" y el más específico de " virocito " han sido asociados con esta respuesta. En un momento dado. Debido a que ocasionalmente puede encontrarse algún linfocito atípico y considerarse normal. marcado ó severo ".P. La mayoría de las formas variantes están asociadas con infecciones virales. el cual puede ser más gris. la célula que se sospecha más seguramente es un linfocito también. para indicar su frecuencia relativa. puede seguirse una regla general que menciona que si hay muchos linfocitos en el frotis. respectivamente. si se está en duda. Otros pueden usar un método semicuantitativo. algunos laboratorios los reportan como un porcentaje separado de leucocitos. doblado. citomegalovirus ó herpes simplex tipos 1 y 2 ). un porcentaje de linfocitos normales y un porcentaje de formas variantes. Por otro lado. especialmente en donde hace contacto con las células que la rodean. También pueden encontrarse en casos de toxoplasmosis. y virus de hepatitis B y C. ha sido utilizado para describir cualquier forma que varíe del criterio morfológico empleado para un linfocito normal. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. El término " atípico ". Siempre que más del 10% sean clasificados como variantes. típicamente es más doblado ó lobulado. Otra de las formas se asemejan muy a menudo a un monocito. A esta característica se le conoce como basofilia radial ó basofilia periférica. homogénea. como " 1+. pueden ser especialmente difíciles de distinguir de los monocitos. especialmente al Serie Blanca 36 .

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observarse con pocos aumentos.En contraste, las enfermedades asociadas con variantes, demostrarán una apariencia muy heterogénea. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de linfocitos atípicos. 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright

4. PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. ACTIVIDADES. - Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________

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SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 12 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.P. CON LINFOCITOS PLASMOCITOIDES”
1.INTRODUCCIÓN. Una de las formas en que se presenta el linfocito atípico, comparte rasgos con la célula plasmática, la cual no es encontrada normalmente en sangre periférica. Ambas tienen un citoplasma azul muy intenso y pueden medir de 15-20 µ .Los dos pueden distinguirse por su patrón de cromatina nuclear. En el linfocito " plasmacitoide ", el núcleo tiene una apariencia abierta y laxa y tiene un color rojo-púrpura más tenue. Pueden verse también nucleolos. Esto es en contraste con la apariencia amontonada, abultada del núcleo de la célula plasmática y su localización excéntrica dentro de la célula. No hay una área clara perinuclear en el linfocito plasmacitoide como la hay en la célula plasmática. Los linfocitos plasmocitoides son comúnes de encontrar en ciertas enfermedades virales como el dengue y las enfermedades exantemáticas de la infancia.

2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Se analizarán muestras que tengan el hallazgo de linfocitos plasmocitoides. 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright

4. PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. ACTIVIDADES.

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- Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________

SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 13 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.P. CON HIPERSEGMENTACIÓN NUCLEAR EN NEUTRÓFILOS”
1.INTRODUCCIÓN. Los núcleos de los neutrófilos normalmente tienen de dos a cinco lóbulos nucleares.La mayoría tendrán dos ó tres. Si existe un aumento en las células con cuatro ó cinco lóbulos, el observador debería buscar cuidadosamente células con más de cinco lóbulos.La presencia de una sola célula con seis distintos lóbulos nucleares, puede tener significancia clínica. Por otro lado, si más del 5% de los neutrófilos tienen cinco lóbulos ó si la mayoría tienen cuatro, ésto también puede ser un hallazgo importante. Los neutrófilos hipersegmentados son la indicación más temprana en sangre periférica de anemia megaloblástica ( por deficiencia de vitamina B12 ó de folatos ), y es importante que se reporten. Cuando menos deben identificarse seis lóbulos distintos para que la célula sea identificada como hipersegmentada.En casos severos, pueden encontrarse células con nueve lóbulos ó aún más. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Se analizarán muestras que tengan el hallazgo de hipersegmentación nuclear en neutrófilos 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Frotis de sangre periférica teñido con Wright 4. PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.

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ACTIVIDADES. - Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________

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a pesar de éstos ser mínimos. de los hallazgos en sangre periférica y de la información que se requiere en algunos casos específicos. El estudio medular es un procedimiento especializado de gran utilidad clínica. Fiebre de origen desconocido. como en las anemias y leucemias. En términos generales se plantean cuatro posibilidades: Compromiso de precursores hematopoyéticos con alteraciones citológicas. depende de la sospecha clínica. en donde se debe solicitar un estudio de aspirado y biopsia. 14 “ESTUDIO DE MÉDULA ÓSEA” 1. Puede ser realizado tanto por aspirado (mielograma) como por biopsia percutánea según las características clínicas del paciente y el diagnóstico presuntivo. Debido a que el aspirado de médula ósea está virtualmente libre de riesgo (excepto si se hace en el esternón) y que la biopsia medular es un procedimiento invasivo mínimo. biopsia o ambos). está mejor indicado el aspirado medular o mielograma. El estudio medular permite identificar las diferentes series hematopoyéticas. se debe solicitar estudio de cultivos de material medular obtenido por aspirado. La decisión de solicitar un estudio de médula ósea debe basarse en la hipótesis de que los hallazgos que se esperan del estudio justifiquen someter al paciente al riesgo y la molestia. el estudio se recomienda en todos los casos en donde se pueda justificar un probable beneficio con la información obtenida. En estos casos. En estos casos está mejor indicada la biopsia medular. micológicos. o que haya disminución del tejido hematopoyético y se requiera determinar con certeza la celularidad. Los hallazgos medulares esperados (o inesperados) en parte dependen del cuadro clínico. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.Facultad de Bioanálisis. metástasis o granulomas. de citometría de flujo y genéticos entre otros. Sospecha clínica o se desee estudiar una enfermedad infecciosa por bacterias. estudiar el estroma medular y obtener material para estudios bacteriológicos. En estos casos. Serie Blanca 41 . En la actualidad el estudio medular hace parte integral del estudio sistematizado de un importante número de enfermedades hematológicas. micobacterias y hongos. infiltrativas y neoplásicas que están bien protocolizadas. El tipo de procedimiento utilizado para el estudio de la médula ósea (aspirado. como en la anemia aplástica. Compromiso de las estructuras de soporte del tejido hematopoyético o del mismo hueso como en la mielofibrosis. Estudio medular .INTRODUCCIÓN.

no se debe hacer de rutina. hasta donde sea posible. La punción esternal. Se observa aumento en la relación mielo-eritroide. de acuerdo con los resultados obtenidos el hematólogo apoyado en los hallazgos de sangre periférica y en el examen físico. puede recurrir que tipo de procedimientos especiales están indicados para confirmar el diagnóstico. 2. linfoide. debido al riesgo de lesión cardiovascular. Como la médula ósea es un tejido blando. megacariocítica. Procedimientos especiales en el material medular Las muestras de médula ósea son coloreadas con Wright cuando son obtenidas por aspiración y con hematoxilina-eosina. Se establece la relación del número de las células blancas frente al número de células rojas nucleadas. normocelular e hipercelular. la cresta ilíaca y las apófisis espinosas de las vértebras. Inicialmente son observados macroscópicamente para determinar la presencia de partículas. En forma simultánea se realiza una valoración cuidadosa de la morfología de las diferentes líneas celulares: serie eritroide. Los extendidos de médula ósea se colorean con Wright siguiendo la técnica usual. las espinas ilíacas superiores anterior o posterior. granulocítica. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Algunos pacientes con coagulopatía (especialmente los hemofílicos) requieren terapias de reemplazo para hacer el procedimiento cuando está indicado hacer el estudio. En niños menores de un año se puede tomar material medular por aspirado en el tubérculo tibial.1 Principio. 2. Esta proporción se denomina “relación mielo eritroide” (M:E). monocítica. Los sitios donde se puede obtener médula ósea en los adultos y niños mayores de un años son: el esternón. Después de la observación en 10X el extendido se examina con objetivo de 100X localizando los campos donde se hallan las partículas y se procede al análisis de las células sanguíneas que habitan en la médula ósea. Serie Blanca 42 . Una disminución en la relación mielo-eritroide se presenta cuando se disminuyen los precursores mieloides como en la anemia aplástica o cuando aumentan los precursores eritroides como en las anemias hemolíticas y megaloblásticas. se pueden obtener muestras introduciendo una aguja adecuada en la médula y aspirando con jeringa.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .Facultad de Bioanálisis. Luego el extendido es examinado en bajo poder (10X) para apreciar la relativa cantidad de grasa y de contenido celular hematopoyético de acuerdo al cual la médula se puede clasificar como: hipocelular. leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la insuficiencia renal crónica. cuando es por biopsia. cuando se aumentan los precursores mieloides como sucede en los procesos inflamatorios agudos. Para estimar esta relación es necesario la identificación y tabulación de 300 500 células nucleadas. A partir del primer año de vida se toma similar a la del adulto. células plasmáticas y otras células.

2. -Megacariocitos: hipo ó hipersegmentación nuclear. megacariocitos de tamaño muy pequeño.2 Características Morfológicas: -Aumento de Mieloblastos -Aumento de Linfocitos ó células plasmáticas -Basofilia. alteraciones de la madurez citoplásmica. comprende los siguientes aspectos: 2.2. Serie Blanca 43 . Serie linfoide. • Celuraridad Hematopoyética -Normal -Aumentada: hiperceluraridad -Disminuída: hipoceluraridad ó aplasia. Monocítica y Megacariocítica: 60%. aumento de células Cebadas ó de Macrófagos. -Presencia de células no hematopoyéticas: células metastásicas. Eosinofilia. 2.2. 20%. 2. -Serie Eritoide con cambios Megaloblásticos ó diseritropoyesis. Ausencia ó Aumento del No.2 Metodología Estudio de Médula Osea El estudio de médula ósea.1 Recuento Global: Serie Granulocítica con predominio:mielocitos y metamielocitos : Serie Eritrocítica: Predominio: Policromatófilos y Ortocromáticos. 2.2.2.2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2. De Células grasas y/ó megacariocitos.Facultad de Bioanálisis.1 Seco Débil ó 10X.2 Examen a Gran Aumento ó 100X. • Celularidad Global. 20%.

4-4.2-1. LÍMITES DE NORMALIDAD (%) Serie Blanca Mieloblastos Promielocitos Mielocitos Metamielocitos Bandas + segmentados Serie Roja Proeritroblastos Eritroblastos Basófilos Eritroblastos Policromáticos Eritroblastos Ortocromáticos Linfocitos Basófilos y Células Cebadas Megacariocitos Monocitos + macrófagos Plasmocitos Relación Mieloide-Eritroide 3.1-23.5-3.1 Equipo de Laboratorio 1 Microscopio de Luz 50.3 Serie Blanca 44 .2-1.5-2.8 0.1-4.2 0.4-70.3 Reporte del Mielograma y Valores Normales.9-29.LISTA DE REQUERIMIENTOS.9 1.Facultad de Bioanálisis.0 10.3 0.7 -31 0.1 0-0.0.1 8.3 0.4-17.6 11.5 2.4-3.4 0-0. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2.2 0-0.8 15.4 17.2.26. 3.

-Reportar un mielograma normal. Serie Blanca 45 . -Observación de laminillas y/ó diapositivas con imágenes de aspirados de médula ósea normal . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3.Facultad de Bioanálisis. ACTIVIDADES.2 Material de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Laminillas y/ó diapositivas con muestra de aspirado de médula ósea 4. Observar las laminillas ó diapositivas y reportar el mielograma de acuerdo con el formato que aparece en el reporte de resultados.PROCEDIMIENTO.

Facultad de Bioanálisis. Serie Blanca 46 . 15 “ INTRODUCCIÓN A LAS LEUCEMIAS Y EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Veracruz R E P O RT E Serie Blanca Mieloblastos Promielocitos Mielocitos Metamielocitos Bandas + segmentados Serie Roja Proeritroblastos Eritroblastos Basófilos Eritroblastos Policromáticos Eritroblastos Ortocromáticos Linfocitos Basófilos y Células Cebadas Megacariocitos Monocitos + macrófagos Plasmocitos Relación Mieloide-Eritroide DE Manual de Prácticas de Hematología MIELOGRAMA SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. Las leucemias mieloides son neoplasias malignas del Sistema Hematopoyético.INTRODUCCIÓN. CON LEUCEMIA GRANULOCÍTICA CRÓNICA” 1.P.

factores de transcripción . que madura terminalmente hacia todas las líneas celulares. Esta autonomía en la reproducción celular se debe a mutaciones en los genes que codifican para: . LEUCEMIA GRANULOCÍTICA CRÓNICA La mutación original se produce en una CTH. y frecuentemente hacia la megacariocítica.factores de crecimiento . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Como las neoplasias en general. pero lo hace de predominantemente hacia la línea granulocítica.factores inhibidores de la apoptosis . como la CTH ó las CFC: Las leucemias pueden ser agudas ó crónicas LEUCEMIAS CRÓNICAS • En las Leucemias Crónicas.Facultad de Bioanálisis. 2. las células leucémicas: • • • Proliferan de manera independiente de sus factores de crecimiento ( producidos por las células estromales de su microambiente) Tampoco responden a factores que las inhiben pues están protegidas de la apoptosis.factores inhibidores del ciclo celular El término LEUCEMIA significa “ aumento de leucocitos neoplásicos en la sangre”.1 Datos Característicos en el Diagnóstico: Serie Blanca CTH CFC GEMM CTH 47 . 2. las células neoplásicas maduran terminalmente • No producen la muerte en las etapas iniciales • El número de células maduras es normal ó aumentado Según el predominio de la línea celular hacia la cual maduran pueden distinguirse: • • • • • Leucemia Granulocítica Crónica Leucemia Mielomonocítica Crónica Policitemia Vera Trombocitemia esencial Mielofibrosis crónica idiopática con metaplasia mieloide.proteínas fosforiladoras( que meten a la célula en ciclo celular) . por lo cual es un término inapropiado. Las LEUCEMIAS son neoplasias clonales que provienen de una sola célula maligna original la cual tiene una gran capacidad proliferativa.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

LISTA DE REQUERIMIENTOS. ( aumento de tirosina kinasa intracelular) • Presencia de translocación con formación del gen híbrido BCR/abl 3. • Eosinofilia y sobre todo basofilia absolutas • Presencia de eritroblastos • Anemia moderada ó ausencia de ésta • Plaquetas normales ó aumentadas • Fosfatasa alcalina en leucocitos disminuída.000. y en más del 70% de los casos. 3.2 Datos Definitivos Para El Diagnóstico Datos Citogenéticos : • Presencia del Cromosoma Philadelphia: translocación recíproca entre los cromosomas 9 y 22. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología • Leucocitosis generalmente por arriba de 50.Facultad de Bioanálisis. por arriba de 100.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. 2.000leucocitos totales. • Médula Óea con Hiperplasia de células granulocíticas en todas las etapas de maduración y con abundantes megacariocitos.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 48 . • Presencia de granulocitos en todas las etapas de maduración.

INTRODUCCIÓN.P. Serie Blanca 49 .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. ACTIVIDADES.Facultad de Bioanálisis. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.PROCEDIMIENTO. .Reporte de resultados . Y M. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. 16 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.O. CON POLICITEMIA VERA Y MIELOFIBROSIS IDIOPÁTICA CON METAPLASIA MIELOIDE” 1.

Fístulas arteriovenosas ó cardiopatías congénitas.Sin embargo la Biometría Hemática no es definitiva. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología En las leucemias mieloides crónicas. Serie Blanca 50 .1 Criterios para el Diagnóstico de Policitemia Vera: • Proliferación de la CTH hacia todas las lineas con predominio hacia la línea eritrocítica:plaquetas . 1. pero predominantemente hacia los megacariocitos los cuales mueren en la etapa de megacariocitos maduros. eosinofilia. 1. se tendrá:Policitemia vera. Tumores productores de eritropoyetina. síndrome de Pickwick.eritroblastos . 2. Si la maduración predomina hacia la línea de los eritrocitos. Hemoglobinas anormales que producen hipoxi tisular. la CTH tienen todavía más capacidad de dividirse que una CTH normal.( elevación del número de granulocitos inmaduros y muchos eritroblastos 2. pero éstos se mueren en la etapa de megacariocito maduro.Facultad de Bioanálisis. Al ocuparse el tejido medular por el tejido fibroso.basofilia . Cuando la proliferación es predominantemente hacia la línea de los megacariocitos. granulocitosis con células no más inmaduras que los mielocitos. a esta neoplasia se le llama Mielofibrosis con Metaplasia Mieloide. lo cual lleva a la mielofibrosis. En sangre periférica usualmente hay un cuadro leucoeritroblástico. se origina la hematopoyesis extramedular. liberando los factores de crecimiento fibroblásticos.2 MIELOFIBROSIS CRÓNICA IDIOPÁTICA CON METAPLASIA MIELOIDE Se origina también en una CTH que madura hacia todas las líneas mieloides pero predominantemente hacia los megacariocitos En la Médula Ósea existe aumento de todas las líneas.1 POLICITEMIA VERA Policitemia ( elevación de los glóbulos rojos ó masa eritrocítica total) de orígen primario en la que hay que descartar otras causas de policitemia secundaria como son: • • • • Enfermedades con dificultad en la oxigenación sanguínea: tabaquismo crónico.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

que se demuestra con gruesas fibras de colágena en médula ósea y sustitución de la celuraridad normal por tejido fibroso.LISTA DE REQUERIMIENTOS. cuadro leucoeritroblástico ( granulocitos inmaduros y muchos eritroblastos . Veracruz • • • • • Manual de Prácticas de Hematología Trombocitosis > 400. con aumento de todas las líneas celulares. aumento de todas las líneas.2 Criterios para el Diagnóstico de Mielofibrosis Idiopática Crónica con Metaplasia Mieloide. En sangre periférica puede haber elevación o disminución de plaquetas y granulocitos . • • • 3. principalmente eritroblastos y megacariocitos. Mielofibrosis desde el principio en algunos pacientes. Aumento de vitamina B12 sérica ó transcobalamina Cromosoma Philadelphia negativo. Realizar diagnóstico diferencial con otras enfermedades que causan mielofibrosis.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.( los demás sindromes mieloproliferativos crónicos ).000/ μl sin fiebre ó infección Aumento de fosfatasa alcalina leucocitaria sin fiebre ó infección.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 51 . anemia y poiquilocitos ( sobre todo dacriocitos ).000/ μl Leucocitosis > 12. • • En médula ósea. • Células Grasas disminuídas ó ausentes. 3. Estudio de Cortes Histológicos de Médula Ósea en Policitemia Vera • Hiperplasia notable.Facultad de Bioanálisis. aunque no en todos. En sangre periférica. 2. ocasionada por liberación de factores de crecimiento fibroblástico por los megacariocitos malignos. pero predominantemente hacia los megacariocitos. • El 30% de pacientes desarrollan mielofibrosis con metaplasia mieloide.

INTRODUCCIÓN. Y M. 17 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.Facultad de Bioanálisis. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. .Reporte de resultados . Serie Blanca 52 . Veracruz 1 Manual de Prácticas de Hematología Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. CON LEUCEMIA MIELOMONOCÍTICA CRÓNICA Y TROMBOCITEMIA ESENCIAL” 1.PROCEDIMIENTO. ACTIVIDADES.P.O.

Cuando la maduración predomina hacia las plaquetas. es la CTH. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . 1.2 Criterios para el Diagnóstico de Trombocitemia Esencial • Cuenta de Plaquetas por arriba de 600. pero con un incremento en la maduración hacia la línea de los monocitos . la leucemia se llama Leucemia Mielomonocítica Crónica. pero con predominio hacia la línea de megacariocitos-plaquetas. 2.000/μl • Hemoglobina < 13 g/dl • Ausencia de Cromosoma Philadelphia ó del gen híbrido BCT/abl • Fibrosis medular ausente ó menos de 1/3 de la biopsia • Ausencia de otra causa de trombocitosis ( trombocitosis secundaria ) • Médula Ósea con hiperplasia moderada de las líneas eritroblástica y granulocítica y aumento marcado de megacariocitos. Anemia leve. Procesos inflamatorios ó infecciosos crónicos.2 TROMBOCITEMIA ESENCIAL ( Primaria ó Hemorrágica ) La célula que sufre la mutación neoplásica.1 Criterios para el Diagnóstico de Leucemia Mielomonocítica Crónica.Facultad de Bioanálisis. Menos del 15% de los granulocitos son inmaduros. 2. 1. que madura hacia todas las líneas. núcleos de neutrófilos muy largos ) Más de 1000 monocitos /μl ( ó más del 3% ). Serie Blanca 53 . En médula ósea los mieloblastos son <20%. ó células híbridas entre mielocitos y monocitos. • Descartar otras causas de Trombocitosis Secundaria.( apéndices nucleares .Hemorragias crónicas. Cambios displásicos +++. • • • • • • Monocitos displásicos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Cuando la maduración de la CTH es predominantemente hacia los neutrófilos y monocitos. Neoplasias malignas no hamatopoyéticas.1LEUCEMIA MIELOMONOCÍTICA CRÓNICA Leucemia Mielomonocítica Crónica ó Mielodisplasia Tipo IV. Cuadro parecido al de la LGC. como:Deficiencia de Hierro. se trata de Trombocitemia esencial. Pacientes esplenectomizados.

PROCEDIMIENTO. las células neoplásicas no maduran teminalmente.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. generalmente maduran hasta la etapa de blasto ó un poco más allá.INTRODUCCIÓN. LEUCEMIAS AGUDAS • En las leucemias agudas. ACTIVIDADES.O. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3. .Facultad de Bioanálisis. Serie Blanca 54 . 18 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M0 ” 1.P. 3. Y M.Reporte de resultados . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.

Demostrar la ausencia de esterasas específicas. 2. CD19. Ó Demostrar la presencia de proteínas de membrana CD13 ó CD33 con anticuerpos monoclonales . Las células blásticas inhiben la proliferación de las clonas normales. CD5. y TDT. Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Aguda M0  Demostrar con anticuerpos anti-mieloperoxidasa.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. Veracruz • • • • Manual de Prácticas de Hematología Para que se consideren agudas deben tener > 20% de blastos en M. 3. granulocitopenia. por la plaquetopenia e infecciones.  3.Facultad de Bioanálisis.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Y de Precursores T: CD2.  Demostrar la ausencia de marcadores megacariocíticos como CD41 ó CD61. CD7 y TDT. Por lo tanto: 0-3% de los blastos son positivos para tinción citoquímica de MIELOPEROXIDASA.O. es una leucemia aguda cuya cuenta típica de Médula Osea es la siguiente: 96% de Mieloblastos ( 1a) 4% de eritroblastos ( eritroblastos y granulocitos en maduración: muy disminuídos ). La muerte sobreviene por hemorragias.LISTA DE REQUERIMIENTOS.  Demostrar la ausencia de marcadores de linfocitos que descartan leucemia linfoblástica: de Precursores B: CD10. La Leucemia M0. plaquetopenia. CD3. que son propias de la serie monocítica.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y /ó diapositivas Aspirad de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 55 . la presencia de esta enzima ( MPO) en el Retículo Endoplásmico Rugoso ó en el Aparato de Golgi. que descartan Leucemia M7 ó Megacarioblástica. Ó Demostrar la ausencia del marcador monocítico CD14 y que descartan la Leucemia M5a ó monoblástica . Los pacientes tienen anemia.

19 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Y M.Reporte de resultados .PROCEDIMIENTO.P.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. La cuenta típica de la leucemia aguda M1 es: Mieloblastos: 83% Promielocitos: 3% Serie Blanca 56 .O. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M1 ” 1.Facultad de Bioanálisis.INTRODUCCIÓN. ACTIVIDADES.

son: • >3% y < 10% de células tienen gránulos MPO positivos ó bastones de Auer observables con la tinción citoquímica para MPO ó son células con un poco más de maduración .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 57 . ACTIVIDADES. promielocitos . • 90% de células son mieloblastos sin gránulos ( mieloblastos 1ª =negativos para mieloperoxidasa ) • Hay anemia.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . 3.Reporte de resultados . ( que pueden ser: mieloblastos 1b ( mieloperoxidasa + ) . trombocitopenia 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas 1 Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.Facultad de Bioanálisis. mieloblastos 2. granulocitopenia. Veracruz Mielocitos: 2% Eritroblastos: 12% 2. mielocitos. .1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.PROCEDIMIENTO. Manual de Prácticas de Hematología Los criterios para el diagnóstico de la leucemia aguda M1.

La Leucemia mieloide aguda M2. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M2 ” 1. Y M. 20 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.INTRODUCCIÓN.P.Facultad de Bioanálisis.O. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. presenta la siguiente cuenta típica de Médula Osea: Mieloblastos: Promielocitos: 52% 33% Serie Blanca 58 .

Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Aguda M2: 7% 3% 5% Manual de Prácticas de Hematología Entre 30 y 89% de células de médula ósea ( excluyendo eritroblastos ) son mieloblastos y > 10% de células son promielocitos ó granulocitos más maduros. 3. de Basófilos y de Células cebadas.Facultad de Bioanálisis. ACTIVIDADES. son similares a la M2.PROCEDIMIENTO. hasta 80% de blastos con 20% de promielocitos ó células más maduras Las llamadas Leucemias Agudas de Eosinófilos.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 59 .PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.Reporte de resultados . aunque con diferenciación a cada línea respectiva 3. ) El rango puede ser: desde 20% de blastos con 80% de promielocitos ó células más maduras . Veracruz Mielocitos: Granulocitos más maduros: Eritroblastos: 2.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de Médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. .

P. . 21 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. en la cual. Y M. Serie Blanca 60 . La leucemia M3 es una leucemia aguda. Su complicación principal y la causa de su gravedad es la CIVD. que favorece la diferenciación de las celulas malignas. la cual se evita con el Acido Transretinoico. Y en donde el 90% de las células de médula ósea maduran hasta la etapa de promielocitos.O.Facultad de Bioanálisis. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M3 ” 1.INTRODUCCIÓN. la célula neoplásica original es la CFC GEMM y no la CTH. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.

generalmente en cantidad múltiple. por lo cual debe realizarse para su diagnóstico. algunas células pueden madurar hasta neutrófilos segmentados y las células que maduran más pueden presentar anomalía de Pseudo-Pelger. en el 90% de las células ) 2) La Variedad Microgranular. en la que los gránulos pueden no verse claramente. los cuales son observables.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. Criterios para el diagnóstico de la leucemia aguda M3.Facultad de Bioanálisis. 3. y cristalizan formando bastones de Auer. de aspecto monocitoide.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 61 . por lo que puede ser confundida con una leucemia M5b ( monoblástica ). llamados faggots. 90% de células de Médula Osea maduran hasta la etapa de PROMIELOCITOS . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2.LISTA DE REQUERIMIENTOS. los cuales son anormales. tinciones de Mieloperoxidasa Y esterasas dobles: MPO M3 M5b +++ + +++ Esterasas 3. Pueden ser de dos variedades: 1) Variedad de gránulos grandes. teniendo estos casos el núcleo plegado. y en mayor cantidad que los promielocitos normales.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

22 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.O. . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M4 ” 1.Facultad de Bioanálisis. Y M. ACTIVIDADES.P.Reporte de resultados .INTRODUCCIÓN. por lo que la morfología es compatible tanto con una M2 como con una M5.PROCEDIMIENTO.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. Cuenta típica en Médula Osea: Serie Blanca 62 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. En la leucemia M4. la maduración de la clona neoplásica se dirige hacia dos líneas de manera simultánea: la de los granulocitos y la de los monocitos.

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Mieloblastos y promielocitos: Mielocitos: Monoblastos y promonocitos: Eritroblastos: 2. sería una M5 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. monoblastos 1 y 2 y promonocitos ( ó más de 5.000 células de estirpe monolítica ).______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 63 . promonocitos y granulocitos más maduros. 3.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .( Los granulocitos y células de estirpe monolítica se encuentran en proporciones muy similares. ACTIVIDADES.Reporte de resultados . 45% 8% 43% 4% Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Aguda M4 • • • 20% de las células son blastos.Facultad de Bioanálisis.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. que inluyen: mieloblastos 1 y 2. .2 Materiales de Laboratorio CANIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. Más del 20% y < 80% de células son blastos. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. Si > 80% de células fueran de estirpe monocítica.PROCEDIMIENTO.

P. 23 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M5 ” 1. Cuenta típica de la leucemia M5a: Serie Blanca 64 .O.O.INTRODUCCIÓN. Y M. Se distinguen dos tipos de leucemias Monoblásticas: la M5a ó poco diferenciada.Facultad de Bioanálisis. > 80% de células de estirpe monocítica: monoblastos. y la M5b ó bien diferenciada. promonocitos y monocitos en una cuenta sin eritroblastos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. El diagnóstico se realiza al encontrar en M.

>80% de células de estirpe monocítica <20% de células de estirpe monocítica son son monoblastos monoblastos Serie Blanca 65 . M5a M5b > 80% de células son de estirpe > 80% de células son de estirpe monocítica: monocítica: monoblastos. promonocitos y monocitos en monocitos en una cuenta sin eritroblastos. Veracruz Monoblastos: Promonocitos y monocitos: Eritroblastos: Cuenta típica de la leucemia M5b: Monoblastos: Promonocitos: Monocitos: Eritroblastos: 6% 85% 7% 2% 90% 6% 4% Manual de Prácticas de Hematología 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA. promonocitos y monoblastos. una cuenta sin eritroblastos.Facultad de Bioanálisis. Criterios para el diagnóstico de la Leucemia M5.

> 80% de las células de estirpe monocítica son promonocitos y monocitos. CD36 y CD68. se forma de Puede confundirse son la monoblastos 1b y 2 y ---es positiva para microgranular esterasas no específicas. 3. ó la ausencia de MPO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. Serie Blanca 66 . M3 variedad 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. pero ocasionalmente positiva. -es positiva para anticuerpos monoclonales anti CD14. -MPO negativa. éstos se distinguen por sus gránulos azurófilos con Wright La M5a bien diferenciada. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología La M5a poco diferenciada ( equivalente a la M0) se forma de monoblastos 1ª y constituye el 15% de los casos de M5a.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas 1 Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.Facultad de Bioanálisis.Debe distinguirse de la M0 ó de la L2: -usando anticuerpos monoclonales para CD14 -Demostrando la presencia de esterasas no específicas en el RER con el microscopio electrónico.PROCEDIMIENTO.LISTA DE REQUERIMIENTOS.

P.O. 24 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Serie Blanca 67 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología ACTIVIDADES.CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M6 ” 1.Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. .INTRODUCCIÓN. Y M.Facultad de Bioanálisis.

también llamada eritroleucemia. • Al menos 50% de células de Médula osea deben ser eritroblastos que frecuentemente. • 30% -49% de células medulares sean eritroblastos con alteraciones morfológicas notables Y que al menos 30% de células de Médula Osea sean mieloblastos ó promielocitos • O bien los siguientes criterios reunidos:  Cuadro de leucemia aguda  Severa anemia  Otras citopenias  La mayoría de las células de la Médula Osea sean eritroblastos muy anormales en distintas etapas de maduración ó con predominio de eritroblastos.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . 2.LISTA DE REQUERIMIENTOS. que por lo general evoluciona hacia una M6 típica con > 30% de mieloblastos. pero no siempre. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. 3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología En esta leucemia.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCION Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 68 . a lo que antes se llamaba MIELOSIS ERITRÉMICA. tienen anormalidades morfológicas Y al menos 30% de células de la médula ósea deben ser mieloblastos ó promielocitos que pueden tener bastones de Auer. la CTH maligna madura de manera simultánea hacia las líneas eritroblástica y granulocítica. Criterios para el diagnóstico de la leucemia M6.  Frecuentemente no más de 5% de mieloblastos.Facultad de Bioanálisis.

Reporte de resultados . Y M. Las células proliferantes en las M7 maduran hasta megacarioblastos y en ocasiones hasta promegacariocitos y megacariocitos.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. y diagnosticables principalmente a través de técnicas inmunocitoquímica.A este tipo de neoplasias .P.PROCEDIMIENTO. Serie Blanca 69 . . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4.INTRODUCCIÓN. 25 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. se les llama “leucemias” megacarioblásticas ó M7. formadas casi exclusivamente por células de aspecto blástico sin diferenciación morfológica.Facultad de Bioanálisis. ACTIVIDADES.O.CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M7 ” 1.

PROCEDIMIENTO. • >30% de blastos en Médula osea. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. de los cuales: >50% deben pertenecer a la línea de los megacariocitos. En ambas se observa también proliferación de otras líneas celulares.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. • Las células son positivas para los anticuerpos anti CD41 y CD61.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. que ponen en evidencia las glicoproteínas plaquetarias. . Criterios para el Diagnóstico de la leucemia M7.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 70 . Pudiendo presentar plaquetas normales y aumentadas ó morfológicamente anormales ( gigantes y sin gránulos.LISTA DE REQUERIMIENTOS. Con frecuencia presentan fibrosis medular. 3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2. ACTIVIDADES. 3.Facultad de Bioanálisis.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . especialmente de eritroblastos.Reporte de resultados . • M7b: La clona proliferante madura hasta promegacariocitos e incluso megacariocitos. ( técnicas inmunocitoquímicas ) • Mieloperoxidasa negativa en los blastos ( megacarioblastos ) • Esterasas no específicas positivas focalmente en el aparato de Golgi. • De acuerdo con la etapa hasta la cual llegan a madurar las células se consideran: • M7a: La clona proliferante madura hasta la etapa de megacarioblasto.

Se presenta con crecimiento ganglionar Serie Blanca 71 . En ella. CON LEUCEMIA LINFOCÍTICA CRÓNICA Y LEUCEMIA DE CÉLULAS PELUDAS ” 1.P.Facultad de Bioanálisis. 26 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.INTRODUCCIÓN. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. el resto de la hematopoyesis se conserva normal.Cursa con linfocitosis notable. Leucemia Linfocítica Crónica B Esta es la más común de las leucemias linfoides.

cromatina gruesa. Inmunofenotípicamente son positivas para CD19 y CD20. pero no segmentada. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología bilateral. La médula ósea es difícil de aspirar. tiene fibrosis. Leucemia de Células Peludas Las tricoleucemias o leucemia de células peludas se presenta generalmente con esplenomegalia. sin otra causa de linfocitosis. “segmentada”. • En su evolución pueden aparecer prolinfocitos acompañados por citopenias variables.2 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Linfocítica Crónica T CD8+ ó de Linfocitos Grandes Granulares. Células con gránulos azurófilos citoplásmicos y cromatina gruesa. • El cuadro leucémico se acompaña de neutropenia ó pancitopenia. • Linfocitos con capacidad de inhibir la proliferación de células hematopoyéticas. como es típico.3 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia de Células Peludas. Las células tienen característicamente gránulos con fosfatasa ácida resistente al ácido tartárico.Los linfocitos tienen pocas inmunoglobulinas de superficie. 2. • Hallazgo de linfocitosis y linfadenomegalias en pacientes de más de 50 años de edad. • Inmunofenotípicamente. CD3 y CD8 2. • Rasgos Morfológicos: numerosos linfocitos pequeños con escaso citolasma. 2. sin linfadenomegalias y con anemia ó citopenias. • • • Serie Blanca 72 . CD20 y a CD5. • Rasgos morfológicos característicos de ayuda al diagnóstico por bases morfológicas:  Células pequeñas  Citoplasma muy pálido y con muchas microvellosidades filiformes  Núcleos pequeños como los de los linfocitos.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .El Linfoma de Linfocitos bien diferenciados es la manifestación tisular (ganglionar ) de la misma enfermedad. • Inmunofenotípicamente son células positivas a CD2.Las células proliferantes tienen una morfología característica que ayuda a su diagnóstico. pero cromatina no tan densa. 2.1Criterios para el diagnóstico de la leucemia Linfocítica Crónica B. CD11 y CD25. éste último los caracteriza por tener la capacidad de formar autoanticuerpos. • • Linfocitosis menos notable.Facultad de Bioanálisis. los linfocitos son positivos a CD19. como rebanadas de pastel. ya que.

Reporte de resultados .1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. ACTIVIDADES.INTRODUCCIÓN.LISTA DE REQUERIMIENTOS.Facultad de Bioanálisis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3.P. independientemente de su inmunofenotipo. Serie Blanca 73 .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 27 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. CON LEUCEMIA LINFOBLÁSTICA ” 1. La clasificación FAB señala 3 tipos fundamentales: L1. L2. . 3.PROCEDIMIENTO. y L3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.

Casi todos los casos corresponden a células B.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . y las más pequeñas. las de tamaño intermedio. con citoplasma basófilo repleto de vacuolas claras.  Células muy variables en tamaño  Las células más grandes tienen cromatina fina y nucleolos bien demarcados. tienen cromatina más gruesa.  Los linfoblastos ocasionalmente adquieren forma de “raqueta de mano”.Tienen mal pronóstico 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Leucemia L1.Facultad de Bioanálisis. como los de los mieloblastos.  la cromatina es fina. en donde el núcleo ocupa la mayor parte de la superficie y por lo tanto hay muy escaso citoplasma. el cual carece de vacuolas ó presenta muy escasas. Serie Blanca 74 .Tienen un peor pronóstico que las L1 Leucemia L3.  Citoplasma más abundante que en las L1. si se acompañan de gránulos positivos a la fosfatasa ácida y a α-naftil acetato esterasa.  hay homogeneidad en cuanto al tamaño celular y densidad cromatínica. corresponden a leucemias T y tienen un mal pronóstico).  Las células son morfológica e inmunofenotípicamente indistinguibles de las que proliferan en el linfoma de Burkitt. 2. que contienen lípidos neutros. la cromatina es gruesa y pueden confundirse con linfocitos pequeños. los núcleos tienen múltiples indentaciones “cerebriformes” ( en cuyo caso. Corresponden al tipo más común de leucemia aguda infantil y es la que tiene el mejor pronóstico de las 3.  Con frecuencia. tienen cromatina condensada.3 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia L3  Células muy características.2 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia L2. positivas con rojo oleoso y PAS negativas  Núcleos con cromatina fina granular y enormes nucleolos.1Criterios para el diagnóstico de la Leucemia L1. 2.  blastos muy pequeños. aunque no tanto como la de los mieloblastos Ocasionalmente. 2. Leucemia L2. generalmente sin gránulos y con pocas ó ninguna vacuola.

2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3. 28 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. ACTIVIDADES. Y M.LISTA DE REQUERIMIENTOS.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. que han madurado independientemente de una estimulación antigénica.INTRODUCCIÓN.O.PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. en la que proliferan células plasmáticas.P. 3. Neoplasia hematopoyética. .Reporte de resultados .Cuando llegan a salir las células Serie Blanca 75 .CON MIELOMA MÚLTIPLE ” 1.Facultad de Bioanálisis.

3.La proliferación se restringe a la médula ósea. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. y que se manifiestan clínicamente por dolor ósea y fracturas patológicas y por hipercalcemia.Facultad de Bioanálisis.  Células plasmáticas con cristales múltiples intracelulares.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 76 .2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.Reporte de resultados . Dichas células forman inmunoglobulinas homogéneas. . ACTIVIDADES.  En el aspirado de médula ósea:  Aumento notable de células plásmáticas ( lo normal es <3%)  Algunas células presentan núcleos irregulares y multilobulados. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología plasmáticas a la circulación. que se reconocen por electroforesis de proteínas.1 Criterios para el diagnóstico del Mieloma Múltiple. monoclonales.PROCEDIMIENTO.  Células plasmáticas con bordes citoplásmicos irregulares y de color rojo ( células en flama). el diagnóstico que se establece en el de “ Leucemia de células plasmáticas”. ocasionando zonas de osteólisis reconocidas por radiografías. constituídos por inmunoglobulinas ó cristales azurófilos alargados. 2. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .

Serie Blanca 77 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA: PRACTICA NO. 29 “TINCIÓN CITOQUÍMICA PARA MIELOPEROXIDASA “ 1.INTRODUCCIÓN La citoquímica constituye en la práctica hematológica un complemento indispensable de la morfología óptica convencional.Facultad de Bioanálisis.

monoblástica aguda (M5A) y la leucemia megacarioblástica aguda (M7) utilizando solamente extensiones con las coloraciones de MayGrünwald-Giemsa.Facultad de Bioanálisis. preparaciones de nódulos linfáticos u otros tejidos. incubación y contraste. extensiones de medula ósea. bencidina. Recientemente se ha propuesto estudiar las leucemias agudas basándose en tres niveles secuenciales de investigación que son: los métodos citoquímicos en primer lugar. en presencia de peróxido de hidrógeno. basófilos y las formas eritroides no se tiñen. 3. Dicha enzima se combina in vivo con peróxido de hidrógeno transformándose en un potente agente bactericida.LISTA DE REQUERIMIENTOS 3. Desde el punto de vista técnico todas las reacciones citoquímicas tienen en común 3 etapas fundamentales: fijación. La tinción citoquímica de mieloperoxidasa es fundamental en el diagnóstico diferencial de las leucemias agudas (positiva en las mieloblásticas y negativa en las linfoblásticas).PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .1 Reactivos. puede establecerse un diagnóstico preciso en la mayoría de los casos. Estas tinciones pueden realizarse sobre sangre periférica. Los eosinófilos muestran una actividad intensa. viricida y fungicida. apareciendo un precipitado amarillo ocre en el lugar del citoplasma en donde se ha producido la reacción. Así. muestra actividad en todos los estadios del desarrollo de los neutrófilos y se halla en los gránulos azurófilos. La mieloperoxidasa se sintetiza en el retículo endoplasmático rugoso. Cuando se utilizan las reacciones citoquímicas adecuadas junto con el aspecto morfológico de las extensiones con tinción de Wright-Giemsa. A menudo resulta difícil diferenciar los blastos leucémicos de la leucemia linfoblástica aguda de los de la leucemia mieloblastica (M1). de donde pasa a las cisternas del aparato de Golgi quedando localizada fundamentalmente en la granulación prim aria o azurófila. La demostración citoquímica de esta enzima se basa en la acción oxidante de la peroxidasa sobre el substrato. 2. NUM NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIÓN CANTIDAD Serie Blanca 78 . y en casos raros de deficiencia congénita de mieloperoxidasa. Los linfocitos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Su finalidad es estudiar la presencia de ciertos componentes químicos (enzimas o sustancias diversas) en el interior de las células sanguíneas tanto hematopoyéticas como circulantes en sangre periférica. Diversos procedimientos de tinción citoquímica contribuyen a llevar a cabo esta distinción. el inmunofenotipo intracelular en segundo lugar y por último el inmunofenotipo de membrana. La actividad peroxidasa puede faltar en algunos neutrófilos tóxicos de pacientes con infección y leucemia aguda.

Veracruz 1 2 3 4 5 6 7 8 Formol Etanol absoluto Dihidrocloruro de bencidina ZnSO4.8% Acetato de sodio 3H2O 100 ml 0.2g 3.3 Material de Laboratorio CANTIDAD 2 2 1 2 1 2 10 DESCRIPCIÓN Vasos de precipitados de 100 ml Matraces aforados de 100 ml Pipeta graduada de 10 ml Pipetas graduadas de 5 ml Pipeta graduada de 1 ml Frascos de 250 ml Frotis de sangre periférica 3.7H2O Acetato de sodio3H20 H202 NaOH Safranina Manual de Prácticas de Hematología 37% 10ml 90ml 0.8% 3% 1.2 Solución Colorante Modo de Preparación: Etanol al 30% ( v/v en agua ) Dihidrocloruro de bencidina ZnSO4.7ml 1.5ml 0.4.2 Equipo de Laboratorio Balanza granataria Balanza analítica 3.7H2O al 3.3g 1ml 1g 0.0N 3.1 Solución Fijadora Formol al 37% Etanol absoluto 3.3 g 1 ml 1 g 10 ml 90 ml Serie Blanca 79 .Facultad de Bioanálisis.4 Preparación de los Reactivos 3.4.

2 4.4 4.5 ml 0. 30 “ALFA NAFTIL ACETATO ESTERASA EN LEUCOCITOS “ 1.1. Al añadir el sulfato de zinc se forma un precipitado que se disuelve al añadir los demás reactivos.1. INTRODUCCIÓN.6 4.Reporte de resultados . 4.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA: PRACTICA NO.1 Técnica: 4.1.1. Serie Blanca 80 .05.2 g Manual de Prácticas de Hematología Los reactivos se mezclan en el orden indicado. puede usarse de manera repetida por meses.1.9 Los frotis se fijan por un minuto con la solución formol etanol Lavar con agua de la llave Secar al aire PERFECTAMENTE Sumergir en la solución colorante por 30 segundos.5 4. 4. La solución se filtra y se guarda a temperatura ambiente.1.2 Resultados Esperados.1.1. El pH de la solución debe ajustarse a 6.7 4.PROCEDIMIENTO. Veracruz H2O2 al 3% NaOH 1.1.3 4.1. .0 N Safranina 0. La bencidina a veces contiene un material insoluble. 4.Facultad de Bioanálisis.7 ml 1.00 + 0. Lavar con agua de la llave Contrateñir por 30 segundos con solución acuosa de safranina al 1% Lavar con agua de la llave Secar al aire Sellar con resina sintética y cubrir con cubreobjetos del #1 Actividades: -Practicar la tinción citoquímica para Mieloperoxidasa con frotis de sangre periférica.8 4. 4.

1 Reactivos. si bien su aparición es más tardía que la de la mieloperoxidasa aunque iguala a ésta en especificidad.Facultad de Bioanálisis. naftol-AS-D-acetato. Utilizando como substrato el naftol-AS-C-cloroacetato (CAE) se detecta una esterasa que es específica de la granulopoyesis neutrófila en la que es positiva a partir del mieloblasto y se expresa en forma de un precipitado rojo anaranjado muy brillante. Dada su positividad más restrictiva es preferente usar el substrato αnaftil-acetato o α-naftil-butirato para marcar la serie monocítica y sus precursores.2 Equipo de Laboratorio Balanza granataria Balanza analítica Serie Blanca 81 .LISTA DE REQUERIMIENTOS.25 ml 50 mg 2. 37% CANTIDAD 20 mg 100mg 25 ml 45 ml 2. 3. Su utilidad diagnóstica se centra básicamente en el reconocimiento de células blásticas mieloides. se obtiene una intensa positividad en la serie monocítica que. los cuales al ser hidrolizados en presencia de una sal diazoica dan un precipitado insoluble en el lugar de la reacción. Se utilizan 4 substratos: naftol-AS-C-cloroacetato. NUM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 NOMBRE DEL REACTIVO Na2HPO4 KH2PO4 Formaldehido Acetona Na2HPO4 KH2PO4 Cloruro de Pararosanilina HCl Alfa Naphthyl acetato Etilén glicol monometil Eter Nitrito de sodio CONC. α -naftil-butirato. es fluoruro sensible. 3. Existen diferentes variedades según el substrato empleado.267 g 250 mg 1.5 ml Concentrado 4% 3.5 ml 1. 2.366 2. cuya positividad es intensa y se manifiesta en forma de un precipitado difuso por todo el citoplasma. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . a diferencia de las restantes células hematopoyéticas. α -naftil-acetato. Utilizando como substrato el naftol-AS-D-acetato. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Las esterasas son un grupo de enzimas capaces de hidrolizar ésteres en sus componentes ácidos y alcoholes.

6 Formaldehído al 37% Acetona Solución A ( #1 ) ( Esta solución se guarda a 4°C ) 25 ml 45 ml 30 ml 20 mg 100 mg 30 ml 3.3 Amortiguador de fosfatos 1/15 M pH 7.366 g 250 ml 2.1 Solución A Na2HPO4 KH2PO4 Agua destilada 3.4.4.267 g 250 ml Serie Blanca 82 .3 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 2 2 2 2 1 1 3 4 2 2 2 10 Manual de Prácticas de Hematología DESCRIPCIÓN Vasos de precipitados de 100 ml Vasos de precipitados de 500 ml Probetas de 100 ml Probetas de 500 ml Matraz volumétrico de 50 ml Tubo de 13X100 ml Pipetas de 10 ml Pipetas de 5 ml Goteros de 10 ml Goteros de 100 ml Frascos de 500 ml Frotis de sangre periférica 3.6 a) Na2HPO4 H2O destilada b) KH2PO4 H2O destilada 2.4 Preparación de Reactivos Soluciones de Fijación 3.Facultad de Bioanálisis.4. Veracruz 3.2 Solución de fijación pH 6.

5 ml ( Esta solución se prepara fresca .5 ml 1. 3.4 Solución de Pararosanilina Cloruro de Pararosanilina Agua destilada HCl concentrado Manual de Prácticas de Hematología 42. 3.25 ml Disolver calentando suavemente y agitando.4. Buffer de Fosfatos 1/15 M. en cada ) 45 ml 3 ml 2. Veracruz Preparación del amortiguador: Solucion a) Solución b) Soluciones de Tinción 3. pH 7.6 Solución de Pararosanilina hexazotizada Solución de Naphthyl acetato Ajustar el pH a 6.1+ 0.4.5 ml 4.5 ml 7.4.5 ml ( Esta solución se prepara fresca. Dejar enfriar la solución y filtrar ( Esta solución se conserva a temperatura ambiente ) 3.Facultad de Bioanálisis. en cada ocasión ). Serie Blanca 83 .PROCEDIMIENTO. en cada ocasión ).3 con NaOH 1N y filtrar ( Esta solución se prepara fresca .7 Mezcla de incubación.5 ml 250 mg 5 ml 1.6 Solución de Pararosanilina hexazotizada Solución de Pararosanilina Nitrito de sodio al 4% recién preparado 1.4.5 Solución de Alfa Naphthyl acetato Alfa Naphthyl acetato Etilén glicol monometil Eter 50 mg 2.

9 Sellar con resina sintética y cubrir con cubreobjetos del #1 Actividades: -Practicar la tinción citoquímica para Esterasas con frotis de sangre periférica.4 Colocar los fotis en la mezcla de incubación a temperatura ambiente por 45 minutos en la oscuridad 4. Fijar los frotis a 4°C por 30 segundos 4. Peripheral Smear Evaluation.1.1.8 Secar a temperatura ambiente 4.5 Lavar con agua de la llave 4.3 Dejar secar a temperatura ambiente 4.7 Lavar con agua de la llave 4.1.1.1. Manual 1.1.Lynn Maedel and Sandra Sommer. Serie Blanca 84 .6 Contrateñir con hematoxilina de Gill por 10 minutos 4.1.BLOOD CELL MORPHOLOGY.Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ _____________________________________________________________ BIBLIOGRAFÍA 1 .2 Lavar los frotis con agua de la llave 4.Facultad de Bioanálisis.1.1.Chicago. .American Society of Clinical Pathologysts.1.1 Técnica: Manual de Prácticas de Hematología 4. Veracruz 4.

Citoquímica.El Atlas de Hematología. Lynn Maedel and Sandra Sommer.Manual de Técnicas de Laboratorio en Hematología.BLOOD CELL MORPHOLOGY. 5.htm Serie Blanca 85 . Benign or Reactive Changes in WBCs and Plateletes. 3.Joan Lluis Vives. http://web.Facultad de Bioanálisis.Segunda edición. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2.Josep Lluis Aguilar.Instituto de Hematopatología AVL Society.American Society of Clinical Pathologysts.Dr.udl.Manual de Técnicas Básicas para el Laboratorio de Hematopatología.Chicago.Masson.Manual 3. 6.es/dept/medicina/citoweb/libro/pass/paginas/contenido/libro/citoquim. Joaquín Carrillo Farga 4.

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