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Informe Final de l Puc - Diciembre

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  • 1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
  • 2. JUSTIFICACIÓN
  • 3. OBJETIVO GENERAL
  • 4. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
  • 5. MARCO TEÓRICO
  • 7. RESULTADOS
  • 9. DIVULGACIÓN
  • 10. BIBLIOGRAFÍA
  • 11. ANEXOS
  • 12. DISEÑO METODOLÓGICO
  • 13:46 hrs 02:04

PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR POR MICROORGANISMOS A PARTIR DE SUSTRATOS ORGÁNICOS

TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA

SENA CBI (CENTRO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL) MATERIALES Y HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL PALMIRA – VALLE 2011

PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR POR MICROORGANISMOS A PARTIR DE SUSTRATOS ORGÁNICOS

TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA

INFORME TÉCNICO FINAL

FLOR MARÍA MIDEROS, INSTRUCTORA DE COMUNICACIONES, PEDRO DE JESÚS MIRANDA VILLAMIZAR, GESTOR DE PROYECTO, ERNESTO JOSÚE MENDOZA PEREZ, INGENIERO QUÍMICO, OSCAR ALEXANDER BERNAL, INGENIERO QUÍMICO, YURIA DISNEY MARTINEZ BECERRA, INGENIERA DE PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA Y DINA MARCELA OSPINA PARRA, INGENIERA EN PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA

SENA CBI (CENTRO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL) MATERIALES Y HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL PALMIRA – VALLE 2011

INTRODUCCIÓN En el proceso de formación se logró dominar las herramientas necesarias que permitieron avanzar en el desarrollo de actividades sobre valorar y controlar el sistema de producción de Proteína Unicelular (PUC) desde la inoculación hasta la obtención del producto de dicha fermentación.

Con estas actividades, se adquirieron habilidades y destrezas en el uso de técnicas de análisis fisicoquímico y microbiológico para el control de los procesos biotecnológicos y obtener productos de alta calidad para alimentación animal.

Comprende los métodos de muestreo, normas de bioseguridad e higiene industrial y dominio de las normas técnicas colombianas en el análisis de productos industriales e implica la adquisición de cualidades físicas y motoras, y la adopción de procedimientos para el trabajo seguro, según el Sistema General de Riesgos Profesionales en las industrias nacionales e internacionales.

El desarrollo de las actividades en el primer proyecto de formación para la Producción biotecnológica de Proteína Unicelular (PUC) generó el desarrollo de un segundo proyecto denominado, Sistema de Tratamiento Biológico de los vertimientos producidos en las fermentaciones industriales, al asumir la disposición de los residuos sólidos y líquidos de planta y laboratorio, para darles un tratamiento o aprovechamiento final. En este nuevo proyecto se desarrollan competencias específicas que obedecen al área técnica y a las competencias de política institucional, tales como, diseño y ejecución de planta piloto para disposición de residuo sólido en el proceso de compostaje (Bioinsumos), y planta piloto para tratamiento primario de aguas residuales (PTAR Lodos Activos) Se requirió integrar saberes relacionados con una bioética de mínimos universales, en consideración con el ambiente y el entorno, convocando además aprendices de diferentes especialidades para la ejecución de estos proyectos de forma interdisciplinar. Adoptar un lenguaje acorde con el conocimiento técnico claro y profundo, permitió la transferencia tecnológica entre los aprendices del TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA, y los demás aprendices del CENTRO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL. Ambos proyectos se divulgaron con el ánimo de orientar, dirigir y estimular ideas de negocio , en la obtención de proteína unicelular a partir de sustratos orgánicos como suplemento alimenticio para animales, aumentando la masa muscular en caso de bovinos, equinos, ovinos y demás, ó estableciendo la producción de Bioinsumos como abono orgánico o enmienda agraria que permita el mejor rendimiento del suelo u obtener certificación en el tratamiento de aguas residuales según normatividad ambiental para mitigar mayores afectaciones e impactos.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La presencia de subproductos orgánicos tanto agrícolas como industriales. la producción excesiva de biomasa celular y la falta de desarrollo a nivel nacional de productos o suplementos nutricionales sin afectar la seguridad alimentaria. . generando alternativas de desarrollo económico sustentable y ambiental sostenible la producción biotecnológica de proteína unicelular a partir de cultivos microbianos.1.

lo cual es una de las razones más importantes para su interés en la producción industrial. la atención se volcó hacia la utilización de recursos renovables como residuos agrícolas y subproductos industriales. ambiental y productiva. equinos. por ejemplo en bovinos. JUSTIFICACIÓN La producción biotecnológica de proteína unicelular (PUC) empleando cultivos microbianos de bacterias. en lo referente a los que tienen alta producción de biomasa celular. son empleados para la alimentación animal y humana. en el caso del micelio fúngico. algas y hongos filamentosos. caprinos y ovinos. Los microorganismos crecen rápidamente. mejorando las condiciones del sector pecuario disminuyendo los costos de compuestos químicos aplicados a los semovientes y. En cuanto al sustrato. alternativa económica de generación de empleo y sostenibilidad social. principalmente por su alto contenido proteico. . levaduras. bagazo y bagacillo. En algunos casos los sustratos requirieron un pre tratamiento físico-químico previo a la fermentación como la hidrólisis ácida. como alternativa a nivel industrial.2. sin desestimular el interés hacia la producción de suplementos proteicos en la alimentación animal al proveer un nutriente generador de energía y masa muscular.

 Validar los ensayos y técnicas analíticas químicas y físicas del Control de Procesos Biotecnológicos aplicados.  Realizar la evaluación de la fermentación estipulada en la investigación aplicada. OBJETIVOS ESPECÍFICOS  Manejar las técnicas analíticas para controlar el proceso de producción. equipos de laboratorio a utilizar en la producción biotecnológica de proteína unicelular.  Analizar fisicoquímicamente el medio de cultivo que se va utilizar en la fermentación en la producción biotecnológica de proteína unicelular.  Operar los Biorreactores para la producción biotecnológica según plan de trabajo.  Caracterizar el producto y subproductos del proceso para su correcta disposición final.  Determinar las condiciones operativas del proceso de fermentación en los Biorreactores.  Valorar el producto esperado .  Caracterizar por análisis bromatológico el producto y subproductos del proceso para su manejo.  Cualificar los ensayos químicos analíticos en alimentos la concentración de Nitrógeno y Proteínas.  Seleccionar las materias primas.  Realizar la evaluación de las materias primas a utilizar a escala de laboratorio en la Producción biotecnológica de proteína unicelular. materiales.  Caracterizar las materias primas a utilizar en la Producción biotecnológica de proteína unicelular.  Realizar la cinética de fermentación en las condiciones planteadas por la Empresa.  Analizar fisicoquímicamente el medio de cultivo que se va utilizar en la fermentación. 4.  Operar los Biorreactores para la producción biotecnológica según plan de trabajo.3.  Realizar una curva de fermentación en las condiciones planteadas por la Empresa y establecer el tiempo de fermentación.  Realizar la fermentación teniendo en cuenta los parámetros establecidos del proceso. OBJETIVO GENERAL Producir mediante procesos biotecnológicos Proteína Unicelular por sistemas de cultivos microbianos a partir de subproductos orgánicos agrícolas e industriales. tanto el líquido como el sólido.  Determinar las condiciones operativas del proceso de fermentación en Planta Piloto del sustrato y microorganismo seleccionado.  Realizar la fermentación teniendo en cuenta los parámetros establecidos del proceso en la producción biotecnológica de proteína unicelular. asumiendo los resultantes o co-productos de la fermentación en planta piloto. tratamiento y disposición final en la producción biotecnológica de proteína unicelular.

Dentro del proceso de formación la materias primas utilizadas fueron estudiadas y analizadas para tener conocimiento de su composición y las variables de estos que pueden aportar a nuestro proceso. en el tecnólogo usamos cuatro diferentes sustratos: Grupo 01 Obtención de Proteína Unicelular a partir de bagazo y bagacillo. Lo primero es conocer la caracterización de las materias primas como sustratos. Actualmente Rusia es una de las productoras más importantes de proteína unicelular y esto se debe a la escasez de carne y algunas otras fuentes de proteínas. Este problema no involucra solo a seres humanos. Los sustratos para producción biotecnológica varía dependiendo de los ensayos. contando con que estos son totalmente orgánicos. La atención se vuelca hacia la utilización de recursos renovables como residuos agrícolas y subproductos industriales. algo que es muy determinante en la producción de estos. El constante crecimiento de la población. En la Producción Biotecnológica usamos como microorganismos las levaduras Saccharomyces cerevisiae y Candida utilis para probar su rendimiento y comportamiento ante las variables del proceso. La adecuada alimentación de los animales es de muy elevado costo. MARCO TEÓRICO La primera conferencia sobre proteína unicelular se llevo a cabo en 1967 en el instituto tecnológico de Massachusetts. En muchos casos las materias primas deben ser sometidas a un pre tratamiento físico. A continuación se muestran las materias primas y su composición por literatura. La solución al problema de la alimentación humana en primer lugar implica la solución de las fuentes de proteínas en la alimentación animal. Nos encontramos ante una demanda en constante incremento de fuentes de proteínas de un alto valor nutritivo. en especialmente las naciones en vías de desarrollo es increíble se espera que para a primera década del siglo XXI la población mundial llegue de 5 a 6 millones de personas.5. Grupo 04 Obtención de Proteína Unicelular a partir de residuos de la Maltería. La ganadería y agricultura convencional es muy probable que no sean capaces de cumplir con la demanda proteica de esta población. la cual empieza a ser escasa. se cree que el planeta necesitara producir una cantidad enorme de productos agrícolas. Grupo 02 Obtención de Proteína Unicelular a partir de porcinaza. . Grupo 03 Obtención de Proteína Unicelular a partir de micelio fúngico. sino en especial a sus animales. El alimento de los animales puede presentar una escasez en el futuro debido a que se necesitará más ganado para cumplir con la exigente demanda. Químico y enzimático para mejorar su rendimiento.

CARACTERIZACION DE MATERIAS PRIMAS MELAZA DE CAÑA Figura 3. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. . Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira COMPOSICIÓN Foto 1. Miel B.

CEPA O BIOCATALIZADOR UTILIZADO EN EL PROYECTO Saccharomyces cerevisiae .BAGACILLO Figura 5 Bagacillo de caña.Representacion grafica de la composición del bagacillo de caña de azúcar. Carbohidratos contenidos en el bagacillo de caña. Imagen 3. Tomada en el laboratorio de biotecnología industrial Imagen 2.

vino y etanol donada por la Universidad Francisco de Paula Santander subcultivado por repiques en agar PDA. Saccharomyces cerevisiae. . Metabolismo Aeróbico o Respiratorio: Cuando el oxígeno es suficiente y el sustrato se mantiene bajo. incubado a temperatura optima y refrigerado a +/-4°C . METODOLOGIA ANALISIS Y PLANEACION FASE DE PROYECTO 1 . los azúcares son usados para producir energía y nuevas células. .Hongo de tipo levadura utilizado industrialmente en la fabricación de pan. ‘Anaeróbico’: No requiere de oxígeno. Medio de cultivo de micelio y vinaza. Figura 8. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial. generándose muy poco alcohol y más biomasa. ‘Aeróbico’: Requiere de oxígeno. Esta levadura es un microorganismo ‘Anaerobio Facultativo’ ya que es esencialmente Aerobio pero puede prosperar en un ambiente Anaeróbico. cerveza.

Caracterización de melaza.Figura 2. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira FASE DE PROYECTO 2 PRODUCCION IN VITRO PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO .

Foto 1. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira, en la preparación de medios de cultivo para propagación y producción de biomasa. Los medios de cultivo deben tener componentes necesarios para el optimo crecimiento de las levaduras.  Macro nutrientes Micronutrientes Elementos traza Clasificación según la composición •Sencillos: Monosacáridos, Disacáridos, Aminoácidos, Péptidos, Ácidos grasos •Complejos: Polímeros, Almidón, Quitina, Celulosa, Proteínas o complejos proteicos, Subproductos agroindustriales. PRODUCCION IN VITRO Medio de cultivo Composición Melaza Bagacillo Nitrógeno Fosforo % 25 p/v 10 v/v 2 p/v Cantidad necesaria para amortiguar el pH Características pH G.E °Brix Picnómetro ATR’S 4,50 1,050 gr/ml 20 gr/ml 1.010 gr/ ml 3-5%

PRETRATAMIENTOS El bagacillo como se sabe es un polisacárido, por eso es necesario hidrolizarlo para liberar los monosacáridos o azucares sencillos contenidos en él, al micelio fúngico se le realizan una hidrólisis básica con hidróxido de sodio (soda caustica) al 40% esto con el fin de extraer la quitina contenida en el, por cada 6,25 gr de micelio se añaden 100 ml de de NaOH al 40% y se autoclavan 2 veces.

La hidrolisis es el desdoblamiento de las moléculas de ciertos compuestos orgánicos por la acción del agua, en este caso por la reacción de ácidos y bases en concentraciones bajas. En el pretratamiento el bagacillo de caña es sometido a un proceso de hidrolisis acida y básica evaluando el rendimiento para cada uno. La concentración del ácido sulfúrico, la relación liquido/sólido, el tiempo de reacción usadas y la temperatura a la que fue sometido; fueron 10 gr de bagacillo aforado a 100 ml con ácido sulfúrico al 40% v/v, 4 horas, 65 - 70°C para cada litro de medio de cultivo. La concentración de hidróxido de sodio, la relación liquido/solido, el tiempo de reacción usadas y la temperatura a la que fue sometida; fueron 10 gr de bagacillo aforado a 100 ml con hidróxido de sodio al 17.5 % v/v, 4 horas, 60 - 65°C para cada litro de medio de cultivo. Los hidrolizados se dejan enfriar a temperatura ambiente y se vierten al medio de cultivo.

Foto 1. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira, durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.

PRETRATAMIENTOS

CRECIMIENTO, PROPAGACION Y MADURACION PREPARACION DE LA LEVADURA, CRECIMIENTO EN 100 ml Para la preparación de la levadura se realizaron varios ensayos que se encuentran plasmados en la siguiente tabla. Nota: Los tiempos de activación se tomaron sin contar con el tiempo que tarda la levadura en crecer en medio semisólido (agar).

Imagen 15. Propagación inoculo 100 ml. Tomada en el Laboratorio de Biotecnología Industrial

*Trabajo en cabina *Tinción de Gram.( 10 minutos). *28 a 30 °C en incubadora. . 1ml de caldo papa activado en 9 ml de medio de cultivo (24hr). Re suspensión celular: Se agregan 3 ml de de agua destilada estéril a 1 tubo con siembra inclinada. *15 ml de cepa activada en 85ml de medio de cultivo. * 10ml de cepa activada en 90 ml de medio de cultivo.METODO CONDICIONES MONITOREO RESULTADOS OBSERAVACIONES *Fermentación por ausencia de oxigeno. *Frecuentes contaminaciones por Bacillos.0x108 final. *Baja población. 5 minutos.5x106 – 2. *Recuento en cámara de neubauer inicial y 3.8x107 .9x107 – 1. * 10ml de cepa activada en 90 ml de medio de cultivo. *48 hrs de activación. *45°C en baño maría. *Medios estériles Cepa fresca. *24 hrs de activación.1. (24hr). * Se cambio el volumen del solvente a 5ml de agua estéril por tubo. (1 tubo). *Trabajo en cabina. *Recuento en cámara de neubauer inicial y 1. *Producción excesiva de CO2. *Agua destilada autoclavada. *Tinción de Gram. *Tinción de Gram. * 10 minutos de activación. Pre adaptación 2: Asada de cepa en 10ml de medio de cultivo.3x106 final. (1tubo). *Mejor y más población celular. *Recuento en cámara de 1. *28 a 30 °C en incubadora. *Medios estériles Cepa fresca.0x108 neubauer inicial y final. Pre adaptación 1: Asada en 10ml de caldo papa (24hr). *Trabajo en cabina.

 Se inoculan los 15 ml de cepa re suspendida en 85 ml de medio de cultivo auto clavado a 121°C.  Los frascos utilizados para la preparación del inoculo son de vidrio y de color ámbar para evitar el contacto de las levaduras con la luz. 15 libras de presión. Al inoculo se le toma muestra inicial con una pipeta estéril de 1 ml y se almacena en viales de vidrio ámbar de 10 ml estéril. evaluando con el recuento de cámara de neubauer el crecimiento celular. La levadura se siembra en agar PDA inclinado utilizando tubos de ensayo y tapones de gasa estéril. Nota:  El anterior proceso se realizó en la cabina de flujo laminar previamente esterilizada para evitar contaminaciones en el inoculo por exposición al ambiente. que luego son activados en baño maría a 35-37°C. se incuban a 28°C. 15 minutos.  Se realiza re suspensión celular a 3 tubos con siembra. enfriado a temperatura ambiente. para realizar recuento en cámara de neubauer. . Se deja en agitación constante 12 hr en el shaker (50 rpm).  Pasadas las 12 hr se toma muestra final con una pipeta de 1 ml en viales de vidrio ámbar de 10 ml estéril. 3 días y se refrigeran a 4°C en la nevera. agregando 5 ml de agua destilada estéril a cada tubo para un total de 15 ml.

salida de CO2 y toma de muestras regulado por un venoclip.PROPAGACION EN 1000 ml  Teniendo en cuenta los recuentos en cámara de neubauer realizados al inoculo de 100 ml este es agregado o inoculado en 900 ml de medio de cultivo fresco estéril.R . Foto 1. Se toma muestra inicial del medio inoculado con una pipeta de 1 ml estéril y se contiene en un vial de vidrio ámbar de 10 ml estéril. para un total de 1000 ml contenidos en un Biorreactor con capacidad de 3500 ml. y adaptaciones para aireación con filtro de aire. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.  La propagación es monitoreada así: Cada 2 horas 10 ml de muestra + Recuento en cámara de neubauer + Picnómetria + pH + T° ambiente + T° muestra + °Brix Cada 6 horas 150 ml de muestra + Acidez volátil + % A. para hacer recuento en cámara de neubauer.

durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. se alimenta la propagación con 2. se toma muestra inicial con una pipeta de 1 ml estéril y se conserva en un vial de vidrio ámbar de 10 ml para hacer el recuento en cámara de neubauer inicial.150 ml de medio de cultivo fresco estéril.Foto 1.  La propagación es monitoreada así: Cada 2 horas 10 ml de muestra con dos mecheros al lado + Recuento en cámara de neubauer + Picnómetro + pH + T° ambiente + T° muestra + °Brix Cada 6 horas 150 ml de muestra + Acidez volátil + % A. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.R . PROPAGACION EN 3000 ml  Teniendo en cuenta los datos de los monitoreos y de la tinción de gram.

Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.Foto 1. EVALUACION FASE DE PROYECTO 3 TABLAS DE RESULTADO .

RESULTADOS .

Medio 1 (10°Brizx) .

7x10e8 hrs 18:45 1 2 3 4 5 1.C 3 4.5 24 1 2 3 4 5 1.C C.C C.C 2 4.3x10e8 hrs 14:45 2.9x10e8 hrs 07:00 am 3.C C.C C.C C.7.5 24 ENSAYO pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.3x10e8 hrs 02:15 am 2.C C. RESULTADOS MEDIO # 01 ENSAYO pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.1x10e8 hrs 11:00 am 1.C C.7x10e8 hrs 10:45 am 2.C C.2x10e8 hrs 01:45 am 9x10e7 hrs 06:45 am 2.5x10e8 hrs 15:00 2.8x10e8 hrs 19:00 .

C C.8x10e8 hrs 06:04 3.C C.45 33 ENSAYO 3 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.0x10e8 hrs 09:46 1.6x108 hrs 12:30pm 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) lnx MEDIO # 03 ENSAYO 1 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C ENSAYO 2 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C C.C C.C 1 2 3 4 5 se monto hrs 22:04 4.7x10e8 hrs 05:46 4.9x10e8 hrs 13:40 3x10e8 hrs 09:46 3.5x10e8 hrs 02:04 2.1x10e8 hrs 22:04 2.C C.3x10e8 hrs 01:46 3.C 6 7 8 9 3.C C.C.C 1 2 3 4 5 se monto hrs 21:46 4.C C.1x10e8 hrs 1 21:40 2 2.2x10e8 hrs 23:00 6x10e8 hrs 04:28 am 1.C C.C C.C 6 7 8 9 7.C C.9x10e8 7.7x10e8 hrs 3 05:40 4.C C.C C.8x10e8 hrs 22:04 1.5x10e8 hrs 08:30am 1.9x10e8 hrs 13:46 1.C C.3x10e8 hrs 02:04 ~ 23 ~ .C C.45 33 se monto hrs 21:40 4.7x10e8 5.210e8 hrs 01:40 3.3x10e8 hrs 4 09:40 5 2.C C.C C.C C.45 33 1.5x10e8 hrs 23:45 hrs 04:25 am 08:26 am 12:25 pm C.2x10e8 5.C C.

 Gracias a los residuos industriales.  Por medio de la reutilización de los desechos industriales ayudamos a preservar el medio ambiente y bajar el índice de contaminación.C C.  La producción biotecnológica de proteína unicelular para consumo animal presenta mayor factibilidad utilizando subproductos agroindustriales como medios alternativos.C C.3x10e8 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) c.135 cell/h. al buen uso de los microorganismos y sus características se puede crear una nueva fuente de proteínas para consumo animal. los cuales son: El Micelio fúngico debido a su tiempo de duplicación máxima 2.c (g/l) 8.C C.  De acuerdo a los estudios realizados este proyecto es viable y rentable.C C.C C.78 h y la velocidad máxima de de crecimiento 1. permitiendo un rápido crecimiento de nuestro microorganismo Cándida Utilis utilizando como sustrato alternativo de este medio. ~ 24 ~ .C 6 7 8 9 1.C C.C.C 1. OBSERVACIONES  Al realizar los estudios hablados anteriormente nos hemos dado cuenta de que se puede producir un producto novedoso y necesario que pueda cubrir una gran demanda industrial y ganadera a partir de residuos industriales.8x10e8 hrs 6 17:48 7 8 9 C.C C.C 6 7x10e8 hrs 17:40 7 8 9 C.C C.C C.

Dirección Nacional. Ya lo que respecta al área técnica todo fue cambiando. colegios aledaños y demás… Santa En el desarrollo de esta parte de nuestro proyecto de formación primero recibimos gran cantidad de material educativo. ~ 25 ~ . el día de la ciencia. procedimientos patrones de operación. Cali.comparando los medios alternativos. siendo estos tiempos de duplicación muy elevados para los ensayos productivos de biomasa celular.38 h y la Porcinaza presenta un tiempo de duplicación 5. hago referencia a las charlas y/o clases dictadas por los diferentes instructores del área de biotecnología encabezadas por el Ingeniero Biotecnológico Pedro de Jesús Miranda Villamizar.. 9. desde crear esa sensibilidad que algunos necesitaban para hacerles entender que nuestro proyecto de formación era y es diferente a muchos de los cuales el SENA venía manejando. Bogotá. se realizaban foros donde poníamos a prueba los conocimientos adquiridos y dando nuestros primeros pasos en este nuevo mundo para nosotros. hasta conocer las condiciones óptimas para su crecimiento. todo con el fin de garantizar el correcto uso tanto de materiales y reactivos de nuestro laboratorio como también un casi perfecto desarrollo de nuestro proceso. convocatoria de divulgación de proyectos y campaña masiva de materia orgánica (Se adjuntan los videos de sustentación como anexo) Se recibieron también visitas de otros centros de formación SENA de Cartagena. Martha. muchos mas lentos con la Saccharomyce cerevisiae. El Bagacillo presenta su tiempo de duplicación máxima 3. Iniciamos empleando los conocimientos adquiridos. que parámetros tendríamos en cuenta y como sería su óptimo crecimiento. los agentes contaminantes que la llegasen a afectar en un proceso de producción. Pasto. Realizamos listas de chequeo. DIVULGACIÓN En el proceso de divulgación los aprendices del TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA. etc. cual utilizaríamos. posteriormente enfatizábamos sobre problemas existentes.  Las características como densidades de estos medios son factores que afectan éstas. en la medida de lo posible claro está. desde el reconocimiento de una levadura. esa consciencia que tanto requeríamos fue llegando y con esta los resultados que todos anhelaban.71 h. las medidas que se deben tomar en caso de contaminación. los niveles de estrés que esta podría tolerar. tales como. poco a poco. participaron activamente en los eventos de promoción del programa. Inicialmente debimos realizar una caracterización de nuestra levadura. posteriormente se logró lo que se quería.

tubos de ensayo hasta azas microbiológicas. Después de pasadas las 48 horas se extraen las cajas de petri de la incubadora y se pasa a realizar un conteo de colonias y posteriormente realizar una tinción de gram donde nos aseguraremos que nuestra cepa esté libre de contaminantes. previamente se realizaron montajes a escala 3000ml para determinar cuál sería el medio con mayor rendimiento es decir. brix. Previamente se ha realizado una esterilización en la zona estéril que es donde se realizará la purificación de la cepa. se dejan secar y posteriormente se envuelven con papel kraft. como siempre promoviendo la asepsia del lugar de trabajo. ya que se debe controlar el proceso de fermentación de principio a fin pues siempre ~ 26 ~ . beaker. Plate count o el que se requiriera en su momento. donde utilizamos las diferentes materias primas que hemos escogido para de esta manera determinar con cuál de estos subproductos iniciaremos la fermentación. Una vez se lleva a cabo la purificación de la cepa y se ha sembrado en la caja de petri por agotamiento. donde existen unas lámparas de rayos ultravioleta.En lo que respecta a la cepa. todo esto se realiza con los mecheros correspondientes. alcohol al 70% y demás cuidados que se deben tener para un correcto desenvolvimiento. Se realizan diferentes análisis fisicoquímicos como acidez. Una vez tenemos nuestra cepa podemos iniciar con nuestro proyecto como tal. ya sea PDA. con esto se busca mejorar la materia prima para que en nuestro proceso de fermentación los resultados sean mucho mas óptimos. Posteriormente se preparan los medios de cultivo y/o trabajo implementando dichas materias primas a diferentes concentraciones. ésta varia en los diferentes equipos de trabajos que existen en el laboratorio de biotecnología industrial. micelio fúngico. hicimos aislamiento de la cepa. Para lograr este proceso de purificación. cajas de petri. vinaza. Erlenmeyer. debimos aprender a distinguir cada uno de los materiales existentes en el laboratorio. Para determinar ello. tubos de ensayo. Se debe previamente enjuagar con agua destilada todos los materiales a utilizar (en este caso de purificación. etc. bagazo.. nos basamos en una serie de análisis que se realizan en el laboratorio. Previamente se ha realizado una caracterización de dicha materia prima. donde esta luz promueve la desaparición de las bacterias que puedan estar presentes en dicha zona. ATR. porcinaza. probetas y Erlenmeyer). bagacillo. con el fin de purificarla y de esta manera garantizar unos niveles de asepsia bastante altos en nuestro proceso de fermentación. el medio con mayor crecimiento celular. miel b. etc. pipetas. desde cajas de petri. hidrólisis acida o básica. utilizamos la levadura Saccharomyces cerevisiae. luego de esto se llevan a un horno de esterilización donde estarán 3 horas a 120ºC. teniendo claro los conceptos adquiridos sobre aislamiento y purificación de cepas dictados por los instructores en su debido momento sin olvidar los balances de materia que se debían emplear para la correcta formulación del medio de cultivo. entre las cuales encontramos. ésta a su vez se lleva hacia un horno de incubación donde la dejaremos de 24 a 48 horas dependiendo de su crecimiento (la caja de petri debe estar sellada con emboplast. esto nos asegura que su contenido este aislado del ambiente).

entre otros. minimizar y/o mitigar el impacto ambiental que se pueda generar. conteo celular. ~ 27 ~ . queriendo de esta manera llevarla a una escala mayor para de esta forma tratar las aguas del centro y por qué no. Dichos parámetros se controlan cada 2 horas con el ánimo de obtener los suficientes datos para al final tener un resultado más aproximado a la realidad. para mitigar dichos impactos. pH. re circular esas aguas ya utilizadas para los oficios varios y de esta manera contribuir el ahorro de dineros que bien pudieren ser invertidos en otras obras que nos beneficien. Los controles de contaminación que se hacen en el laboratorio de biotecnología industrial son periódicos. de esta forma también podemos dar una solución viable a los problemas que hoy por hoy están dando las industrias. donde buscamos dar una solución viable a los residuos que por lo pronto generamos durante nuestro proceso de fermentación. que por querer ser más productivos se están convirtiendo en un gran problema para el medio ambiente.buscamos que la asepsia durante nuestro proceso sea total. por medio de estos procesos se quiere regular. brix. en el Centro De Biotecnología Industrial. Los análisis que se realizan durante el proceso de fermentación son. acidez volátil. para esto tenemos un plan de contingencia y este plan es: BIORREMEDIACIÓN (SISTEMA DE TRATAMIENTO BIOLÓGICO DE LOS VERTIMIENTOS EN LAS FERMENTACIONES INDUSTRIALES) Este es nuestro segundo proyecto de aprendizaje. gran parte de los residuos líquidos han sido enviados a la PTAR de lodos activados y otra pequeña para compostaje. es por esto que estamos nosotros. ATR. y donde los residuos sólidos si van directamente a compost. estaríamos haciendo lo contrario que sería aumentar el impacto para las descargas que se realizan. se realizaron dos jornadas de saneamiento básico con el fin de determinar si el centro estaba cumpliendo o no con las exigencias de la norma que dictamina un límite permisible de descargas hacia el alcantarillado. de no serlo estaríamos expuestos a sanciones por parte de las entidades pertinentes. es por esto que también se montó una PTAR a escala piloto de lodos activados donde se quería encontrar un optimo desempeño de la misma. donde se realizan pruebas al ambiente como pruebas en superficie para tener una idea de la contaminación existente en dicho ambiente de aprendizaje y de esta manera determinar si se debe ya sea mejorar la limpieza del laboratorio o recurrir a otros métodos de limpieza y desinfección de ambiente y superficie. Cabe denotar que durante nuestro proceso de fermentación se generan tanto residuos líquidos y sólidos que son perjudiciales para el medio ambiente y estaríamos en vez de minimizar dicha problemática. no se debe dejar nada a la deriva pues esto implicaría una contaminación que más adelante desencadenaría una pérdida total o parcial en nuestro y proceso y esto conllevaría a perdida de dinero por los reactivos utilizados en el acondicionamiento del medio como también del tiempo dispensado en dicha labor. AR.

una vez obtenido ese conocimiento se buscó tener un plan de manejo óptimo en cuanto a la producción de proteína unicelular como la Biorremediación de los residuos producidos. se debieron tener en cuenta parámetros para dicho proceso. sector industrial.En la PTAR el diseño estuvo a cargo del instructor Pedro Miranda y de algunos aprendices del área. pero no son imposibles de realizar si se tienen en cuenta todas las normas de bioseguridad pertinentes y manejando un ambiente en la medida de lo posible estéril o lo más aséptico posible para de esta manera no alterar los resultados de los análisis que se realicen en un proceso determinado.. acidez. se realizaron campañas de recolección de materia orgánica con el fin de obtener la suficiente cantidad para poder dar inicio a nuestro proceso de compostaje. como la relación carbono nitrógeno. control de pH. etc. Para finalizar podemos inferir que estos proyectos ya que son nuevos para nosotros tienen algo de dificultad. IMPACTO SOCIAL: Mejorar la calidad de vida. ECONÓMICO: Optimización de las materias primas. sólidos totales. ALCANCE Beneficiarios del proyecto Ingenieros. en el área de compostaje se llevo a cabo el tratamiento de residuos sólidos producidos en el laboratorio de biotecnología industrial como también los desechos producidos por la cafetería del centro como de las casas de algunos aprendices. DBO5. Dichos parámetros fueron controlados constantemente con la finalidad de minimizar el impacto a la comunidad circundante como también evitar la aparición de vectores que son indeseables en nuestro proceso. sector pecuario. Supervisores de Plantas de Fermentación. donde se busco la realización de la misma y dejarla a punto para que todo el grupo de alumnos pudieran tener una idea más cercana a la realidad de lo que es una planta como estas y realizar obviamente los análisis pertinentes en dicha labor. Previamente en laboratorio se realizaron pruebas de siembra del hongo trichoderma buscando la aceleración en el proceso de compostaje y optimizar obviamente su rendimiento como tal. sólidos Sedimentables. entre los cuales se encuentran. la cepa a inocular y las variables de proceso previamente establecidas. aprendices y comunidad SENA. Sector agrícola. Por otra parte. dureza. alcalinidad. equipos e insumos para la producción. ~ 28 ~ . de temperatura y de humedad.

AMBIENTAL: Disminución de las emisiones contaminantes. ANEXOS ~ 29 ~ . manejo sostenible de los subproductos. 10. BIBLIOGRAFÍA 11. TECNOLÓGICO: Transferencia tecnológica de los procesos y Bioprocesos en la producción biotecnológica para las empresas. tratamientos biológicos para el tratamiento de los residuos sólidos y líquidos.

MARCO TEORICA PARA OBTENCIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR A PARTIR DE PORCINAZA Y MIEL Introducción a la producción biotecnológica de proteína unicelular 1) Caracterización de materias primas 2) Cepa o biocatalizador usado en el proyecto 2.1) caracterización de la levadura cándida utilis 3) Esquema de la producción biotecnológica de proteína unicelular 4) Formulación de mosto 5) Resultados de producción de proteína unicelular a partir de porcinaza y miel b ~ 30 ~ .

INTRODUCCIÓN A LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR Durante el programa de formación tecnológica en proceso biotecnológicos aplicados a la industria Sena Palmira se desarrollo un proyecto de producción biotecnológica y fermentativa de los subproductos agrícolas e industriales de la región Es así que el grupo dos de los tecnólogos en procesos biotecnológicos aplicados a la industria utilizamos inicialmente como sustratos de producción biotecnológica la crema de levadura como materia prima para la PUC y como biocatalizador la levadura Candida utilis durante el proceso fermentativo Este subproductos es obtenido en la empresa productoras de cerveza del valle del cauca la cual contiene una alto contenido proteico y de especie microbianas pero al final de cabo no fue utilizada como materia prima porque dicha subproducto fue muy difícil su adquisición para la producción proteína unicelular por lo cual se propuso finalmente utilizar como materia prima porcinaza y miel b para producción de proteína unicelular las cuales esta caracterizada de la siguiente forma para la producción biotecnológica ~ 31 ~ .

al igual que la miel. Información Nutricional de la miel B  Tiene cantidades importantes de vitaminas y minerales.2) CARACTERIZACIÓN DE MATERIAS PRIMAS Y BIOCATALIZADOR Porcinaza La porcinaza es subproducto de la empresa porcicola del corregimiento de barrancas Palmira valle de cauca la cual se utilizada como materia prima subproductos nos proporcionas la siguientes característica física y química MIEL B La melaza o "miel B" de caña se obtiene de la caña de azúcar mediante su molienda utilizando unos rodillos o mazas que la comprimen fuertemente obteniendo un jugo que luego se cocina a fuego directo para evaporar el agua y lograr que se concentre. La melaza también se utiliza como endulzante de tés. infusiones o jugos Y nuestro cas la miel B se utilizando como fuente de carbono y de energía para la producción de proteína unicelular. El producto final tiene una textura parecida a la miel de abeja y de sabor muy agradable. Hay que tener en cuenta que. su sabor es intenso y hay que poner poquita para que no predomine más su sabor que el del jugo o infusión. ~ 32 ~ .

L. Así. es capaz de asimilar pentosas. Además resulta ser más afín por hexosas que Saccharomyces cerevisiae (Postma y col. vitaminas B. ha sido una de las especies más utilizadas en la producción de SCP (Single Ceil Protein). licor residual de sulfito de la industria papelera y residuos de fruto como granos de café. Wilson en 1966 (en Lichfield. Contiene abundantes minerales. término acuñado por C. Desde la Segunda Guerra Mundial esta levadura se ha utilizado como fuente y complemento de proteínas en la alimentación humana y animal (Boze y col. cobre y magnesio ha sido siempre muy recomendada para las personas anémicas. los requerimientos respecto las vitaminas del grupo B son escasos. 1979). tras el parto o cualquier convalecencia. melaza. vinaza.. con pequeñas cantidades de otros nutrientes y factores de crecimiento (Lichfield. Es un alimento muy rico en las vitaminas del grupo B (a excepción de B1)  Al contener hierro. ~ 33 ~ . 2) CEPA O BIOCATALIZADOR USADO EN EL PROYECTO Cándida utilis Hongo de tipo levadura que crece rápidamente y puede cultivarse sobre una gran diversidad de materiales o sustratos como licor de prensa. Candida utilis resulta ser un organismo productor de biomasa más favorable que Saccharomyces Cerevisiae por las siguientes características: No necesita el suplemento de ningún aminoácido en los medios de producción. 1979). como la xilosa. manzanas etc. 1992). y si se irradia aporta también vitamina D. Los cuales son descriptos en la siguiente grafica. 1989a). obtenido de la fabricación de la pulpa de citrus desecada. y puede crecer en medios con una fuente de carbono y amonio como fuente de nitrógeno. asténicas..

los azúcares son usados para producir energía y nuevas células. . ‘Anaeróbico’: No requiere de oxígeno. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. generándose muy poco alcohol y más biomasa. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro.Fue donada por la Universidad Francisco de Paula Santander subcultivado por repiques en agar PDA. Foto 1. ~ 34 ~ . Esta levadura es un microorganismo ‘Anaerobio Facultativo’ ya que es esencialmente Aerobio pero puede prosperar en un ambiente Anaeróbico. ‘Aeróbico’: Requiere de oxígeno. . Metabolismo Aeróbico o Respiratorio: Cuando el oxígeno es suficiente y el sustrato se mantiene bajo. incubado a temperatura optima y refrigerado a 4°C.

80 2.0 80.0 90.0 EM 3.0 89.0 PB 50.00 73.0 99.6 EE 6.00 0.40 P 1.4 Ca 0.5 ELN 34.5 Cen.0 ELN 90.2.0 FB 0.21 2.30 Levadura tórula Levadura tórula ANIMALES BOVINOS OVINOS DIGESTIBILIDAD (%) PB FB EE 90.0 78.49 4.50 1.82 49.00 3.03 ~ 35 ~ .1) Característica de la levadura Cándida utilis Composición nutricional unidad Cantidad Material seca NDT Energía digestible Energía metabolizable Proteína (TCO) Calcio (TCO) Grasa (TCO) Ceniza (TCO) Fibra (TCO) Fósforo total (TCO) Mcal/kg Mcal/kg % % % % % % % % 93.60 COMO % DE MATERIA SECA Levadura tórula MS 93.30 1.0 95. 8.60 7.

3000 ml ( propagación) Medio en planta 14000 ml ( producción) 4) FORMULACION DE MOSTO El medio de propagación: 20 Grados Brix 30 % de miel B 0.05 p/v de (NH4)2SO4 2% de porcinaza hidrolizada al 40 % H2SO4 El medio de producción contiene: ~ 36 ~ .3) ESQUEMA DE PRODUCION BIOTECNOLOGICA DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE PORCINAZA Y MIEL MEDIO 20 ml en resuspencion Medios de propagación a 100 ml. 500 ml.

miel B y agua a un beaker de 25 ml hasta reboce y se pesó en la balanza no sin antes tener el peso del recipiente vacío. Nota: el medio de cultivo se debe manejar una densidad de 1 gr/cm3 Se desarrollaron varios ensayos en pro de la obtención de un medio de producción con una densidad similar a la expresada anteriormente compuesto por melaza. el radio es la mitad del diámetro. Porcinaza y agua.05 gr/cm3 Agua 190 ml El ensayo se efectuó de la siguiente manera: Se agregó una cantidad de la mezcla de Porcinaza. La fórmula aplicada para la obtención de la densidad del medio a partir de éste método es: d= m/v d= (M2 (muestra)-(M (beaker vacío))/v (beaker) Para calcular el volumen del beaker: V= π * r2 *h V= (3.81/35.5)2(5) V= 35. Se obtuvieron los siguientes datos: Porcinaza 22 gr Miel B 2 gr Densidad = 1.05 gr/cm3 Teniendo la densidad deseada.343 d=1. se procede a la preparación del medio de producción de 14 litros con las siguientes concentraciones de sustrato: 12% de Porcinaza 2% de Melaza ~ 37 ~ . entonces: d= 58.1416) (1.10% de Porcinaza 2% de melaza El porcentaje restante viene dado por el agua.98-29.343 cm3 y.

3 gr de melaza Se toma una muestra de 100 ml del medio de producción antes de ser llevado al biorreactor # 1 de la planta piloto de fermentaciones industriales. 14000 ml (22 gr/190 ml) =1621. se efectuaron los siguientes cálculos basados en los datos arrojados por el ensayo en el que se buscaba una densidad próxima a 1 cm3./ml Densidad por picnometría d = peso del picnómetro con muestra-peso del picnómetro vacío/volumen ~ 38 ~ .57*10E7 cel. Acidez volátil Conteo celular inicial y final RESULTADOS DE PRODUCION DE PROTEINA UNICELLULAR A PARTIR DE PORCINAZA Y MIEL B Producción de proteína unicelular del Septiembre 29 de 2011 Inoculación Escalado de 1000 a 4000 ml Hora 1:00 pm Análisis Iniciales: Densidad por picnometría : 1. A los 100 ml de muestra se le toman los análisis mencionados a continuación Grados Brix pH Densidad ATR Amino nitrógeno libre sólo cuando el medio esté en el biorreactor.05 (12%) (2%) 14000 ml (2 gr/190 ml) = 147.38 Conteo Inicial: 6. antes no.14 litros de agua Para saber la cantidad de cada sustrato que compone al medio de producción.2 gr/cm3 Grados Brix: 21 pH : 4.

2 gr/cm3 Análisis final de los 4000 ml de medio Hora: 9:00 pm pH : 4.38 Grados Brix: 18 Conteo final: 1./ml Hora 12:30 pm Densidad: 1.0 gr/cm3 Grados Brix:3 pH:5./ml Análisis (planta piloto de fermentaciones-reactor #1) Hora 8:30 am Densidad: 1016.d = 29.25 Grados Brix: 1 Densidad del medio: 1.15 Conteo celular: 2.11 conteo celular: 1./ml ~ 39 ~ .19 Conteo celular : 1.54/10.71-17.189 d = 1.7*10E8 cel.00 g/l Grados Brix: 3 pH: 5./ml Inoculación del Biorreactor de 4000 ml al reactor #1 de la planta piloto de fermentaciones Hora 9:20 pm pH : 5./ml Hora 10:30 am Densidad: 1.8*10E8 cel.2*10E8 cel.2 gr/cm3 Conteo inicial : 8*10E6 cel.95*10E6 cel.017 gr/cm3 Grados Brix:3 pH: 5.

5 TIEMPO 10 12.00E+08 5.00E+08 4.Hora 3:00 pm Grados Brix: 4 pH: 5 Conteo celular: 1.00E+08 2.00E+08 0.65*10E8 CRECIMIENTO EXPONENCIAL DE LA PRODUCION DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE SUSTRACTOS ORGANICOS POR MICROORGANISMO CRECIMIENTO EXPONENCIAL 7.5 15 Resultado de Producción proteína unicelular a partir de porcinaza y miel B a escala de100 ml ~ 40 ~ .00E+08 1.00E+08 6.5 5 7.00E+08 3.00E+00 0 2.

Resultados de la producción de proteína unicelular a partir de porcinaza y miel B a 1000 ml ~ 41 ~ .

~ 42 ~ .

micelio fúngico húmedo resultante de la producción de acido cítrico por la empresa Sucromiles. obtenido de la fabricación de la pulpa de citrus ~ 43 ~ . S.A CEPA O BIOCATALIZADOR UTILIZADO EN EL PROYECTO Cándida utilis Hongo de tipo levadura que crece rápidamente y puede cultivarse sobre una gran diversidad de materiales o sustratos como licor de prensa. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.MICELIO FUNGICO Foto 1.

Esta levadura es un microorganismo ‘Anaerobio Facultativo’ ya que es esencialmente Aerobio pero puede prosperar en un ambiente Anaeróbico. con pequeñas cantidades de otros nutrientes y factores de crecimiento (Lichfield. 1979). Candida utilis resulta ser un organismo productor de biomasa más favorable que Saccharomyces Cerevisiae por las siguientes características: No necesita el suplemento de ningún aminoácido en los medios de producción. vinaza. Foto 1. incubado a temperatura optima y refrigerado a 4°C. Fue donada por la Universidad Francisco de Paula Santander subcultivado por repiques en agar PDA. licor residual de sulfito de la industria papelera y residuos de fruto como granos de café. 1989a). durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. 1992). . es capaz de asimilar pentosas.desecada.. ‘Anaeróbico’: No requiere de oxígeno. . L. Así. Metabolismo Aeróbico o Respiratorio: Cuando el oxígeno es suficiente y el sustrato se mantiene bajo. Wilson en 1966 (en Lichfield. vitaminas B. Contiene abundantes minerales. y puede crecer en medios con una fuente de carbono y amonio como fuente de nitrógeno. 1979). término acuñado por C. como la xilosa. ha sido una de las especies más utilizadas en la producción de SCP (Single Ceil Protein). Desde la Segunda Guerra Mundial esta levadura se ha utilizado como fuente y complemento de proteínas en la alimentación humana y animal (Boze y col. melaza. los requerimientos respecto las vitaminas del grupo B son escasos.. Además resulta ser más afín por hexosas que Saccharomyces cerevisiae (Postma y col. CARACTERIZACION DE LA LEVADURA TORULA (CANDIDA UTILIS) ~ 44 ~ . generándose muy poco alcohol y más biomasa. los azúcares son usados para producir energía y nuevas células. manzanas etc. y si se irradia aporta también vitamina D. ‘Aeróbico’: Requiere de oxígeno.

03 VINAZA Composición Las vinazas. además de una lto contenido de materia orgánica.80 2. También contienen una gran cantidad de potasio.30 DIGESTIBILIDAD (%) Animal Levadura tórula Levadura tórula Bovinos Ovinos PB 90.0 FB 0.60 7.49 4.0 PB 50.00 3.0 EE 80. como nitrógeno. azufre y fósforo. Entre los compuestos orgánicos más importantes. están los alcoholes.0 78. poseen nutrientes.00 73.50 1. Son ácidas (pH entre 3 y 4). Además.Composición nutricional Materia seca NDT Energía digestible Energía metabolizable Proteína (TCO) Calcio (TCO) Fósforo total (TCO) Grasa (TCO) Ceniza (TCO) Fibra (TCO) Unidad % % Mcal/kg Mcal/kg % % % % % % COMO % DE MATERIA SECA Cantidad 93.82 49.0 FB 90. también contiene compuestos fenólicos recalcitrantes. ácidos orgánicos y aldehídos.4 Ca 0.0 95.6 EE 6.0 99.40 P 1.00 0. ~ 45 ~ . 8.5 ELN 34.21 2. en general.0 ELN 90.60 1. como las melanoidinas.30 MS Levadura tórula 93.0 EM 3.0 89.5 Cen.

32 Fósforo (como P2O5) Kg/m3 0.3 ~ 4.59 pH Densidad Adim Kg/m3 4.5 % m/m 0.8 Calcio (como CaO) Kg/m3 7 % m/m 0.CARACTERÍSTICAS: Liquido café oscuro.51 Magnesio (como MgO) Sulfatos (como SO4=) Kg/m3 9 % m/m 0.5 1300 COMO ALIMENTO PARA ANIMALES UNIDADES VALOR ~ 46 ~ . con olor a miel. ESPECIFICACIONES: Como fertilizante: ANÁLISIS Sólidos totales Materia orgánica Nitrógeno (como N) UNIDADES % m/m Kg/m3 Kg/m3 VALOR 55 621 4.4 % m/m 4. denso y viscoso PRESENTACIÓN: Líquido a granel en carrotanques.04 Potasio (como K2O) Kg/m3 62.67 Kg/m3 35 % m/m 2.3 UNIDADES % m/m % m/m % m/m VALOR 55 45 0.

potasio.Fuente de potasio para fertilización de cultivos  .9 0 Fibra Calcio (como Ca) % m/m bs % m/m bs 0 0.Aporta materia orgánica.Humedad Proteína Cenizas Grasas % m/m % m/m bs % m/m bs % m/m bs 45 5.Sus componentes son totalmente solubles en agua  Como corrector de suelos salinos y salino-sódicos intercambia Sodio y Magnesio por Calcio en la matriz del suelo ~ 47 ~ . azufre y calcio para acondicionamiento de los suelos  .25 Fosforo (como P) Densidad a granel % m/m bs Kg/m3 0. fósforo y micronutrientes  .21 11.Sirve de vehículo para la aplicación de nitrógeno.Proporciona un sustrato para el desarrollo de la micro flora del suelo  .078 1300 USOS Uso Agrícola: Como fertilizante potásico líquido para suelos:  .

5) y su contacto con la piel no es peligroso. Materia prima para Compostaje  Aporta potasio a las formulaciones de compostacion y sirve simultáneamente de humectante Uso como Alimento para Animales:  -Es una fuente económica de energía para los rumiantes  -Contiene aminoácidos provenientes de la levadura  Como tenso activó  Reduce la viscosidad de pastas de piedra caliza en la industria cementera  Ayuda a la humectación en el fraguado de cemento  Como fuente de energía  El poder calorífico del material permite quemarlo y generar energía térmica dejando una ceniza rica en potasio Licencias  ICA 4053  Ecocert 1877CO 040 n1e Origen  Producto resultante de la destilación de la melaza fermentada durante la producción de etanol. En caso de contacto directo con la mucosa de los ojos debe lavarse con ~ 48 ~ . Se concentra hasta obtener un líquido denso.  Instrucciones de Seguridad Industrial  El pH del material es ligeramente ácido (4 a 4.

 Instrucciones de Manejo  La Vinaza60 es un material rico en materia orgánica. ESPECIFICACIONES TÉCNICAS Origen Fertilizante potásico líquido para suelos. Como fertilizante líquido Análisis Químico Sólidos Totales Materia orgánica Nitrógeno (como N) Fósforo (como P2O5) Potasio (como K2O) Calcio (como CaO) Unidades % m/m Kg/m3 Kg/m3 Kg/m3 Kg/m3 Kg/m3 Valor 60 621 4.3 0. bagazo o aserrín y disponerlo en un terreno donde pueda incorporarse al suelo.  En todos los casos en que se manipule se recomienda el uso de guantes y gafas de protección de ojos contra las salpicaduras.  En caso de un reguero menor puede absorberse el material en tierra. Es por esto que debe evitarse su derrame sobre corrientes de agua a las cuales puede causar contaminación muy seria.  En todos los casos en que se maneje se deberán tomar las precauciones de tener tanques de contención secundaria (diques) que eviten un derrame accidental del producto a cuerpos de agua superficiales o subterráneos. resultante de la destilación de la melaza fermentada durante la producción de etanol.  Las dosis que se apliquen en el terreno a los cultivos deben ser manejadas según las recomendaciones de un Ingeniero Agrónomo.abundante agua estéril.5 41 7 ~ 49 ~ .  Las dosis que se utilicen como alimento para animales deberán seguir las recomendaciones de un Zootecnista o un Médico Veterinario. Su DQO puede estar entre 150 000 y 250 000 mgDQO/litro.

5 1300 Fuente de potasio para fertilización de cultivos Aporta materia orgánica para acondicionamiento de los suelos Proporciona un sustrato para el desarrollo de la microflora del suelo Sirve de vehículo para la aplicación de micronutrientes Sus componentes son totalmente solubles en agua Presentación Líquido en tambores de 60 litros o a granel en carro tanque.3 ~ 4.9 0 0 ~ 50 ~ .h.h. resultante de la destilación de la melaza fermentada durante la producción de etanol.Magnesio (como MgO) Sulfatos (como SO4=) pH Densidad Características Kg/m3 Kg/m3 adim Kg/m3 9 35 4.h.) Valor 40 5. Origen Alimento para ganado.) % m/m (b.h.) % m/m (b.68 12.) % m/m (b. Como alimento animal Análisis Químico Humedad Proteína Cenizas Grasas Fibra Unidades % m/m % m/m (b.

27 0.95 1. aumentar la palatabilidad y digestibilidad de la materia seca y las proteínas. Los componentes del micelio tienen efectos benéficos sobre los rumiantes al bajar el pH el incrementar el número de microorganismos del rumen.h. Por último. Por tratarse de un producto de transformación biológica natural.085 0. la torta de micelio presenta características que hacen de ella un material útil en la nutrición animal.h. incrementar la retención del nitrógeno suministrado en las dietas e incrementar la utilización de elementos traza.Calcio (como Ca) Fosforo (como P) Energía Neta Densidad a granel Características % m/m (b.) Mcal/kg Kg/m3 0. Se obtiene durante la etapa de purificación.12 33-20 330 260 760 ~ 51 ~ . en especial de bovinos. En la tabla se presenta la caracterización química del producto. CARACTERÍSTICA Humedad Proteína Ceniza Grasas Fibra Estrato libre de nitrógeno Sodio Potasio Calcio UNIDAD %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m Mg/kg Mg/kg Mg/kg CANTIDAD 10 12.88 1300 Sustituye parte de la Melaza en dietas de rumiantes En mezclas con Melaza reduce la viscosidad de esta Actúa como aglomerante en la fabricación de bloques multinutricionales Aporta vitaminas del complejo B Presentación Liquido en tambores de 60 litros o a granel en carro tanque.28 0. el consumo de micelio mejora la calificación organoléptica y la calidad de la carne y no deja residuos tóxicos.01 44.) % m/m (b. MICELIO FUNGICO Es la biomasa resultante del desarrollo vegetativo del hongo aspergillus Níger utilizado para la fermentación del azúcar en el proceso de fabricación de acido cítrico anhidro.

1 1.4-2.9 7.5 4.6 6.7 6.8 ~ 52 ~ .3 FICHA TECNICA MICELIO SECO ANALISIS QUIMICO GARANTIZADO Proximal Y Cornell efectuados por Corpoica-febrero 2006 NUTRIENTES PORCENTAJES EN BASE SECA Materia Seca 89 Digestibilidad M.6 4.8 1.8 9.4 12 5 2.S. (in vitro) 98.5 10.S. (in situ) Digestibilidad M.8 4.4 5.1 5.1 4.Magnesio Hierro Fosforo total Boro Nitrógeno Alanina Arginina Leucina Metionina Fenilalanina Acido aspartico Acido glutámico Glicina Histidina Isoleucina Lisina Prolina Serina Treonina Triptófano Valina Mg/kg Mg/kg Mg/kg Mg/kg %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m %m/m 50 50 200 30 2.3 95.

6 % de PC 14.7 % de P Soluble 12.2 % PC 47.4 20.7 % PC 27.08 90.6 71. soluble) PA (NNP. no digestible) Fibra Bruta Fibra Detergente Neutro FDN Fibra Detergente Acido FDA Hemicelulosa 13.06 1.34 2.3 % de P Soluble 30.5 52. soluble) PB2(medianamente soluble) PB3( insoluble) PC(insoluble.9 3.1 4.1 ~ 53 ~ .5 % de PC 69.92 45.26 4.Energia Bruta EB (Mcal/kg) Energía Digestible ED (Mcal/kg) NDT Energía Metabol EM (Mcal/kg) Energía Neta Lactancia ENL (Mcal/kg) calculada por fórmulas NRC Energía Neta de Lactancia ENL (Mcal/kg) calculada por gases Proteína Cruda Proteina soluble en buffer PB1 (verdadera.

11 0.04 0.28 0.04 0.Lignina Celulosa Crabohidratos No Estructurales Contenido Celular Grasa Cenizas Extracto No Nitrogenado MINERALES Calcio Fósforo Sodio Magnesio Potasio Hierro Boro AMINOACIDOS Alanina Arginina Cisteina Fenil Alanina Glicina Histidina 8.5 0.10 0.37 0.5 43.03 0.3 28.003 0.17 0.3 42.11 ~ 54 ~ .72 0.46 0.6 0.95 28.005 0.43 0.

En sucromiles el micelio producto se ha utilizado principalmente en la alimentación de bovinos en estado fresco.70 2.23 0.2 Las dosis de micelio varían entre 10 y 15 kg por cabeza como complemento de una reacción.38 0. El mayor potencial de uso es como parte de raciones para la alimentación de ganado.52 0.Isoleucina Leucina Lisina Metionina Prolina Serina Tirosina Treonina Triptófano Valina Ac Aspártico Ac Glutámico Inmunoestimulante (ácido cítrico) Enzimas Presentes 0.30 0.30 0. Podría complementarse con otros productos como la melaza.65 0. ~ 55 ~ .30 0.15 0.0 Fitasa-Fosfatasa –Proteinasas-LipasasCelulasas pH 4.47 0.49 0.10 0. los lodos de levadura previo tratamiento y otras fuentes externas de nutrientes como la urea. Su uso como a uno solo se recomienda en caso de extremos puesto que su proceso de descomposición es lento.

en crecimiento en tubo y dilución del microorganismo. levadura torula (cándida utilis). luego de tener la aprobación de las materias primas. luego se prepara en agua la vinaza con el micelio se mescla y luego se suplementa con fuentes de carbono y nitrógeno. El segundo paso es ya la ejecución en donde uno de nuestros integrantes se dirige al lugar designado por la empresa en la gestión para recibir la materia prima y traerlo al laboratorio para su almacenamiento. PREPARACION MEDIO DE CULTIVO La preparación del MEDIO DE CULTIVO se inicia con la molienda del micelio fúngico. INOCULACION La inoculación comienza con el aislamiento y purificación del microorganismo del medio de conservación. PROPAGACION CELULAR. Todo esto se realiza en la cabina de flujo laminar. de la materia prima con las empresas. luego de esto también se gestiona con el coordinador académico para que le facilite el trasporte a uno SUCROMILES de nuestros integrantes del grupo de trabajo para que valla por la materia prima al sitio acordado con la empresa.DIAGRAMA DE PRODUCCION El trasporte de la materia prima se realizara en 2 pasos que son: El Primer paso es la gestión. vinaza. CLAYUCA MATERIA PRIMAS: Micelio fúngico. Se realizan los siguientes análisis:      pH Brix Azucares fermentables Ceniza Húmedad ALMACENAMIENTO El almacenamiento de las materias primas se realizara en un refrigerador a 5 °c en donde la levadura se almacenara por medio de crecimiento lento en tubos en el refrigerador. ~ 56 ~ .

birreactor. PROCESO DE SEPARACION. se hace tomando el 10% del inoculo y se agrega al MEDIO ALTERNATIVO que es el micelio con la vinaza y los sustratos.     Concentración celular. Luego se analiza tanto el sobrenadante y la biomasa para saber con qué porcentaje de proteínas salió y si cumple con los parámetros establecidos para su debido uso o vertimiento en el caso del sobrenadante. Brix BIORREACTOR Son los mismos procesos anteriores solo que a escala en el biorreactor. Se le miden los siguientes parámetros.Aumento de la concentración celular o medios líquidos. TABLA DE PROCESO 1 TRANSPORTE 1 ALMACENAMIENTO 7 OPERACIÓN / INSPECCION PLAN DE TRABAJO ~ 57 ~ . En este proceso se utiliza la centrifuga y los tubos de ensayo para realizar la separación. pH Azucares reductores. esto se realiza en el mini.

BRIX. Ph. LOS 10ml ADICIONARLOS A 90ml DE 1/2. LOS 100ml ADICIONARLOS A 900ml DE 1/2 DESDE h0 cada 4h POR TURNOS DE TRABAJO REALIZAR CURVA SEGÚN DATOS OBTENIDOS CONTEO. X ESCALADO A 100ml TOMA DE MUESTRA CINÉTICA DE CRECIMIENTO VARIABLES DE PROCESO ESCALADO A 1000ml TOMA DE MUESTRA CINÉTICA DE CRECIMIENTO VARIABLES DE PROCESO ESCALADO A 3000ml TOMA DE MUESTRA CINÉTICA DE CRECIMIENTO X X X X X X X X X X X X X X X X X X ~ 58 ~ . T. IDENTIFICACIÓN. Ph. IDENTIFICACIÓN. T. T. TOMAR DATOS INICIAL (h0) Y FINAL (24h) REALIZAR CURVA SEGÚN DATOS OBTENIDOS CONTEO. VINAZA Y MICELIO SIEMBRA MÉTODO FRANCÉS LEVADURA EN CALDO PAPA 01ml de CALDO en 09ml de MEDIO.S CAJA PQ Ingtes: MELAZA. BRIX. BRIX. IDENTIFICACIÓN.ACTIVIDADES SIEMBRA MASIVA PREPARACIÓN DEL MEDIO AGOTAMIENTO ACTIVACIÓN DE CEPA PREADAPTACIÓN VARIABLES DE PROCESO FEB FEB FEB FEB FEB FEB FEB FEB FEB EN (17 (18 (19 (20 (21 (22 (23 (24 (25 E ) ) ) ) ) ) ) ) ) X X X X X X X X OBSERVACIONES SE RESERVA CANDIDA EN A. Ph. CONTEO. LOS 1000ml ADICIONARLOS A 3000ml DE 1/2 DESDE h0 cada 4h POR TURNOS DE TRABAJO GRAFICA LOGARITMICA DE CRECIMIENTO.

inicial y final luego cada 4 hrs realizar recuento celular PREPARACION DE MEDIOS PROBLEMAS 3000ml 20% p/v 10% p/v pH BRIX 4. MEDIO N° 1 MEDIO N° 2 MICELIO 10 % MICELIO 10 % MIEL B 10 % MIEL B 20 % VINAZA 80 % VINAZA 70 % MEDIO N°3 MICELIO 10 % MIEL B 30 % VINAZA 60 % MEDIO N° 1 BRIX° 21 PH 3.91 NOTA: El pH de los medios se encontraba en 12 y se bajo con ayuda de acido ortofosfórico.FORMULACIÓN DEL MEDIO MATERIAS PRIMAS MICELI FUNGICO. ~ 59 ~ .5 24 3000ml 30% p/v 10% p/v MEDIO 2 Nuestros medios problemas se trabajan con la levadura candida utilis. pH. MIEL B Y VINAZA MEDIO 1 BASE DE CÁLCULO VINAZA MIEL B MICELIO H2SO4 1ml Buffer pH Planeación Preparar 2 medios y de cada medio hacer 3 ensayos tomar Brix.74 MEDIO N° 2 BRIX ° 19 PH 3.61 MEDIO N°3 BRIX ° 21 PH 3.

17 Brix° 23° 23° 23° 23° 23.Al micelio se le realiza una hidrólisis con NaOH.4° Curvas de crecimiento.62*10e7 2.62*10e9 1. ~ 60 ~ . CONTEO 12 HORAS DE MEDIOS: Los medios problemas se hacen por duplicado. Procedimiento Después de haber hecho esto se le agrega el 5 % del medio en aceite mineral para conservar. MEDIO N° 1 MEDIO N° 2 MEDIO N°3 6. hora conteo 21:13 00:13 03:13 06:13 09:13 12:13 conteo medio 1000ml 1.1*10e8 1. luego se filtra y se utiliza el residuo filtrado.2° 25.24 4.5*10e7 1. se lleva por 10 min a la autoclave dos veces.25*10e7 9.27 4.66*10e9 2.24 4.61*10e9 1.57*10e10 Final 1. se prepara 1000ml del medio y se inocula con el medio que tenemos en conservación y se realiza conteo cada 3 horas para evaluar el crecimiento.15*10e8 1.21 4.27 4. Los medios problemas tienen un volumen de 50 ml.92*10e9 pH 4.21*10e8 Tomamos el medio problema con mayor crecimiento en este caso medio n°3 para pasar a 1000 ml.15*10e8 4.

5E+10 2E+10 1.5 25 24.5E+10 c.5 23 22.c vs t 1E+10 5E+09 0 -5E+09 0 1 110000000 1610000000 1920000000 1660000000 4 5 6 7 25700000000 162000000 2 3 Brix vs t 26 25.4 24 23.c.c vs t 3E+10 2.5 0 1 2 3 4 5 6 7 23 23 23 23 23.5 25.2 Brix vs t ~ 61 ~ .

27 4.26 4.17 4.28 4.21 pH vs t 4.24 4.pH vs t 4.22 4.27 4.16 0 1 2 3 4 5 6 7 ~ 62 ~ .24 4.18 4.2 4.24 4.

2 4.37559102 21.90310689 Ln biomasa NOTA: La muestra se tomo cada 3 horas Se comprueba que el Medio con mayor rendimiento y producción es el Medio tres.51599092 23.28 Ln biomasa 30 25 20 15 10 5 0 -1E+10 1E+10 3E+10 21.24 1660000000 1610000000 4.c 1E+10 5E+09 0 -5E+09 4. Medio de cultivo Características.PH vs c.19950002 21.18 4. de éste realizamos nuestras producciones finales. ~ 63 ~ .c 3E+10 2.16 1920000000 4.22 4.23008344 18.5E+10 PH vs c.26 25700000000 162000000 110000000 4.96975683 18.5E+10 2E+10 1.

al tiempo que abarata los costes de alimentación. pero d a la hora de realizar la caracterización de la materia prima y las gestión adecuada nos dimos cuenta de que esta empresa no nos facilitaría este producto porque ellos tenían unos proveedores que se los compraban. aporte de microfibras y el ahorro ~ 64 ~ .233% Al inicio de nuestro programa de formación nuestro proyecto se enfoco en trabajar con el subproducto obtenido durante el proceso de la cerveza que es los residuos de la malteria.91 21 gr/ml 0. En la primera etapa de este proyecto estudiará la introducción del pienso fermentado a partir de datos obtenidos de los animales.Composición Micelio Vinaza Miel B Fosforo % 10p/v 60v/v 30p/v Cantidad necesaria para amortiguar el pH pH °Brix Picnómetro ATR’S 3. MATERIA PRIMA RESIDUOS DE LA MALTERIA (CERVEZA) ESTUDIAN ALIMENTAR GANADO CON RESIDUOS DE HARINA Y CERVEZA El departamento autonómico señaló hoy en un comunicado que esta iniciativa pretende dar salida a subproductos agroindustriales y su traslado a vertederos.256 gr/ ml 0. así como su valor nutritivo.

5-10 7.0 8.0 RENTABILIDAD DE LA PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS UNICELULARES Los principales factores económicos son productividad.0-7.de forraje.0-6.5-3. El grano sobrante.0-12 BACTERIAS 11.5 6.5-50 1.0-8 LEVADURAS 7. determinando la evolución de la cantidad y calidad de la leche y su incidencia en los quesos que se elaboren.5-8.5 2. tiene cerca de un 26%.0 3. tanto en el ámbito nutricional como en el coste de producción. El grano también es rico en proteínas.0 5. Por eso las grandes fábricas tienen prensas que extraen la humedad de la mezcla que hace que el sobrante se pueda conservar más tiempo y se pueda transportar con más facilidad.0-16. PORCENTAJE PROMEDIO DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA PROXIMAL DE LA PROTEÍNA UNICELULAR EN BASE A SU PESO SECO.0-10 3. rendimiento y precio de venta y como el costo del sustrato representa una gran proporción del costo de fabricación de la mayoría de los ~ 65 ~ . después de elaborar la cerveza deberá utilizarse antes de 10-15 días ya que pasado este tiempo se estropea. COMPUESTOS ORGÁNICOS (%) Proteína Lípidos Cenizas Ácidos nucleicos HONGOS FILAMENTOSOS 5-8 2-8 9-14 7 ALGAS 7.0-9. En una última fase del estudio se examinará la producción lechera.0-20 8.

la velocidad de crecimiento. el PH y la temperatura. morfología del crecimiento en el fermentador.C para el alimento a la ganadería a partir de residuos de la malteria:  levadura cándida utilis. ausencia de productos tóxicos. ELECCIÓN DEL MICROORGANISMO. Se deben tener en cuenta criterios como el sustrato necesario y los posibles suplementos del mismo.U. la aireación. facilidad de recuperación de las proteínas de organismos unicelulares. es esencial que el rendimiento celular ( peso de células producido por unidad de peso de sustrato ) sea elevado y la formación de subproductos sea mínima. Tipo de levadura a utilizar en el P. ~ 66 ~ . seguridad y no patogenicidad. productividad y rendimiento del sustrato.productos de proteínas de organismos unicelulares.

almacén bavaria Entrega de residuos Inspección de la materia a trabajar Almacenamiento Inspección de la materia Transporte almacén bavaria.Sena Palmira Propagación-in vitro Inoculación Fermentación Filtración o secado Venta y distribución Envase Análisis del producto ~ 67 ~ .FLUJO DE PRODUCCION Puc residuos de la malteria Transporte camioneta Sena Palmira.

01gr de cloruro de amonio. BITACORA DE CONTROL FECHA DE INICIO:20 DE SEPTIEMBRE DE 2011 PREINOCULO CONCETRACION CELULAR:1.Debido al proyecto planteado anteriormente y teniendo en cuenta las dificultades que se nos presentaron decidimos junto con el equipo de trabajo y gestor del proyecto cambiar nuestra materia prima residuos de la malteria por bagacillo y miel B. Para su conservación agregamos 12ml de glicerina en 50ml de medio. Brix: 17. MIEL B con (CANDIDA UTILIS) Medio de cultivo seleccionado: 5ml de miel B. 5ml de vinaza.0X10E8 pH: 4. pH: 4. 1ml de acido clorhídrico. Luego procedimos a preparar el medio de 1000ml teniendo en cuenta las cantidades de sustancias agregadas al medio de 50ml (sin contar la glicerina.1ml de acido fosfórico. pues solo fue aplicada para conservación).0x10e8 Se escogió entre 3 medios caracterizados por su mayor crecimiento y adaptación de la cepa. 0. PROTEINA UNICELULAR APARTIR DE BAGACILLO. 40ml de H2OD. 5gr de gelatina.5 BRIX:17 ~ 68 ~ . utilizando como microorganismo Candida utilis. 0.5 Cámara de neubauer: 1.

2 3.7 PH 4 4.3 17.1X10E8 4.6 18.5X10E7 1.5X10E7 6.5 19.87X10E7 pH:4.7X10E6 DENSIDAD 1.2X10E8 7.1 17.1 g/l LN 18.3 3 GRUPO 4 4 4 4 4 4 4 ln Vs T 25 20 15 ln Vs T 10 5 0 00:00 02:24 04:48 07:12 09:36 12:00 14:24 16:48 BITACORA DE CONTROL FECHA DE INICIO: PREINOCULO CONTEO: Nº2 VOLUMEN HORA CONCENTRACION CELULAR GRAVEDAD LN PH GRUPO CONCETRACION CELULAR: 2.3 15.CONTEO: Nº 1 VOLUMEN 1000 ml HORA 02:00 04:00 06:00 08:00 10:00 12:00 14:00 CONCENTRACION CELULAR 8X10E7 4.2 4.8 20.5 BRIX:19 ~ 69 ~ .5 3 3.1X10E8 3.

1000 ml

02:00 04:00 06.00 08:00 10:00 12:00 14:00

2,87X10E7 7,6X10E7 7,9X10E7 5,7X10E7 5,9X10E7 5,0X10E7 1,3X10E8

1,090 g/l

17,1 18,1 18,1 17,8 17,8 17,7 18,6 4,3 4,4 4,1 3,8 4 4,2

4 4 4 4 4 4 4

18,8 18,6 18,4 18,2 18 ln Vs T 17,8 17,6 17,4 17,2 17 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Series2

BITACORA DE CONTROL

~ 70 ~

FECHA DE INICIO:8 DE NOVIEMBRE DE 2010 HORA: 10:00 A.M PREINOCULO CONTEO: N° 3 VOLUMEN 1000 ml HORA 02:00 04:00 06:00 08:00 10:00 12:00 VELOCIDAD DE CRECIMIENTO MAXIMA MINIMA 0,81 0,15 CONCENTRACION CELULAR 3,6X10E7 2,4X10E7 2,3X10E7 3,2X10E7 2,0X10E7 7,4X10E7 GRAVEDAD 1,090 g/ l LN 17,3 16,9 16,9 17,2 16,8 18,1 PH 4,4 4,1 3,9 3,6 4 4,2 GRUPO 4 4 4 4 4 4 CONCETRACION CELULAR:6X10E6 PH:4,5 BRIX:19

ln Vs T
18,2 18 17,8 17,6 17,4 ln Vs T 17,2 17 16,8 16,6 00:00 02:24 04:48 07:12 09:36 12:00 14:24

~ 71 ~

FACTORES QUE AFECTAN LA EFICIENCIA DEL PROCESO Factores que afectan la velocidad de formación de Biomasa Tipos de sustrato Tipos de cepa Ambiente Sencillos Procariota Temperatura Complejos Eucariotas pH Viscosidad Arqueo bacterias Aireación Efecto positivo Efecto negativo Efecto No significativo Mayor velocidad: Mayor Biomasa Menor velocidad: Menor Biomasa No velocidad: No hay crecimiento

o

o

o

PERDIDAS DE AZUCAR: Hidrolisis térmica (termólisis) de la sacarosa (Reacción de Millard). Generación de azucares infermentables durante el proceso, aumento en azucares residuales INFECCIONES BACTERIANAS: Por microorganismos como Leuconostoc, Mesenteroides (dextranas), Bacterias acido lácticas (acidez láctica) y acido acéticas principalmente, que compiten por los nutrientes y los productos que liberan inhiben el crecimiento y la actividad de la levadura, además la estresan. La formación total de ácidos de estas bacterias se determina mediante acidez volátil. ACIDOS ORGANICOS: Vía ciclo de Krebs: málico, fumarico, oxálico, cítrico o por bacterias / levadura salvaje: láctico, acético y butírico.

Factores de estrés para Saccharomyces cerevisiae y Cándida utilis La relación de los factores ambientales en el desarrollo de la levadura está ligada a una buena producción de biomasa:

~ 72 ~

Tinción de Gram Candida Utilis tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.Foto 1. Tomada en el laboratorio. ~ 73 ~ . Las bacterias se duplican 8 – 9 veces más rápido que la levadura Imagen 26.

metanol. acido Succínico. aumenta la turbiedad y espuma (CO2).00E+06 6. 1. oleo fusel.20E+07 1. Tomada en el Laboratorio de Biotecnología Industrial Imagen 24.00E+06 0. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira.00E+06 4. durante la primera jornada de saneamiento ambiental realizada al centro. producen glicerol.00E+06 2.00E+07 8.00E+00 0 2 4 6 8 Poblacion Celular Tiempo Tabla 16.40E+07 1. Curva de crecimiento contaminación por levadura Salvaje montaje 1000ml. FACTORES QUE AFECTAN LA EFICIENCIA DEL PROCESO LEVADURA SALVAJE: La mayoría compite tanto aeróbica como anaeróbicamente por el azúcar y los nutrientes del medio de cultivo. levadura Salvaje contaminación en montaje 1000ml. acido acético. acido láctico. Tomada en el Laboratorio de Biotecnología Industrial ~ 74 ~ .“El rapido crecimiento de las bacterias afecta la salud de las levaduras” Foto 1.

pero su uso excesivo es de preocupación mundial porque puede crear cepas resistentes a los antibióticos Esterilización del Medio de Cultivo: Se recomienda autoclavar 30 minutos a 121° C. Permitir visitas técnicas para desarrollar por observación las competencias. 4. controlan la contaminación. desde el sector productivo.FORMAS DE CONTROL PARA MINIMIZAR O EVITAR LA INFECCION • Diseño y Limpieza: Lavado y esterilización adecuado del material de vidrio a utilizar en el proceso Adición de Acido Sulfúrico: El anhidro Sulfuroso moléculas (SO2) es el principal microbicida utilizado en las industrias que anula la levadura salvaje Adición de Biocida o Antibióticos: Costos elevados en el proceso de producción . Evaluación de las conclusiones y aporte de recomendaciones hacia el Programa de Formación. Incluir Materias Primas y cepas Industriales en el marco de la evaluación de los Bioprocesos. 2. 15 libras de presión • • • 12. 3. Transferencia y acompañamiento hacia el proyecto objeto de la Investigación Aplicada. DISEÑO METODOLÓGICO 1. FASES DEL PROYECTO Y SUS ACTIVIDADES ~ 75 ~ .

9.Lodos Activados 200 L Planta Piloto de Compostaje.PROPOSITO/ PRINCIPIO Determinar los azúcares reductores totales y libres usando el método Fehling. INSUMOS. QUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA VALORANDO LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR A PARTIR DE DIFERENTES SUSTRATOS A ESCALA DE LABORATORIO SELECCIONAR LAS MATERIAS PRIMAS. QUÌMICA Y MICROBIOLÒGICA VALORANDO LA PRODUCCIÒN BIOTECNOLÒGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR Y SUS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÒLIDOS . ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÒN FÌSICA.5 Ejecución EJECUTAR LA OPERACIÓN.FASES DEL PROYECTO Análisis y Planeaciòn ACTIVIDADES DEL PROYECTO: Cronograma ( En Meses) IDENTIFICAR NECESIDADES DE ALTERNATIVAS NUTRICIONALES PARA LA ALIMENTACIÒN ANIMAL POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS Y ACCIÓN MICROBIANA. ~ 76 ~ .5 Evaluación VALIDAR LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR DE ACUERDO A LAS MATERIAS PRIMAS SELECCIONADAS Y CONDICIONES OPERATIVAS DE FERMENTACIÓN REPORTADAS POR EL LABORATORIO Y LA PLANTA PILOTO. 2 AMBIENTES DE FORMACIÓN REQUERIDOS o o o o Laboratorio de Biotecnología Industrial Planta Piloto de Fermentaciones 20 L Planta Piloto de Tratamiento de Agua Residual. VALORAR LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR COMO SUPLEMENTO ALIMENTICIO ANIMAL Y REMEDIAR POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS LOS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÓLIDOS PROVENIENTES DEL BIOPROCESO. A este proyecto se le realizaron los siguientes análisis: Determinación de azúcares reductores totales y libres (Método de Fehling) A. TANTO A NIVEL DE LABORATORIO Y PLANTA PILOTO. EQUIPOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL Y SEGUIMIENTO DE PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN SEGÚN INSTRUCCIONES A NIVEL DE LABORATORIO EN LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR. CUMPLIENDO CON EL ESCALADO DE LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA. 2. ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÓN FÍSICA.

CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Utilice bata de laboratorio de tela anti fluidos para evitar posibles derrames perjudiciales para su integridad personal. Use el gorro para evitar la contaminación del medio donde se encuentra trabajando. E.B.EQUIPAMIENTO Baño María Balanza de Precisión Pilas y adaptador de corriente MODELO (YCW-010E) GEMMY INDUSTRIA CORP (CQT-5000) A A ADAM F.I. C.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el aprendiz de laboratorio El responsable de supervisar esta actividad es el instructor del laboratorio D. En el momento de manipular los reactivos y materiales de laboratorio es pertinente que utilice guantes quirúrgicos para evitar la contaminación de estos y proteger su integridad.APLICABLE A: Procedimientos en el laboratorio de C. Utilice el tapabocas para evitar el posible inhalamiento de vapores y/o gases tóxicos. Compruebe que las pilas y la carga de corriente sean óptimas para un mejor desarrollo de su actividad de pesaje.B. Inspeccione el área de trabajo para así determinar que no exista exceso de humedad ya que esto puede interferir en el desarrollo de su actividad.MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Un balón aforado de 250 ml ~ 77 ~ .

5H2O ( 34.Reactivo de Fehling – Soxhlet: CuSO4.639 g en 500 ml de agua) NaOH Tartrato de sodio y de potasio ( sal de Rochela) ( 173 g de la sal de rochela y 50g de NaOH en un volumen de 500ml) ~ 78 ~ .Un balón aforado de 100 ml Un vaso de precipitados de 500ml Un vaso de precipitados de 250ml Un erlenmeyer de 500ml Una placa de calentamiento Cinco tubos de ensayo Dos pipetas graduadas de 5ml Un embudo de vidrio Un agitador de vidrio Una probeta de 100ml Una probeta de 50ml Una pipeta aforada de 25ml Una pipeta aforada de 10ml Un vidrio de reloj Una pro pipeta Dos aros con nuez (uno pequeño) Una gradilla REACTIVOS .

G. Coloque en la estufa a 120 ºC por 15 minutos 14. 9. Cubra el vaso con un vidrio de reloj 7. 6. Caliente hasta el punto de ebullición por unos 4 a 5 minutos. 4 y 5 ml de la muestra azucarada antes preparada. si observa partículas sólidas déjelas decantar. Preparación de la muestra. 13. mezclando volúmenes iguales de la solución de sulfato de cobre y de la solución alcalina del tartrato de sodio y de potasio. Luego con tres porciones de 10 ml cada una de alcohol al 70% 12. Caliente en un baño con agua hirviendo por unos tres minutos. 4. añada a cada tubo 5 ml de la solución de FehlingSoxhelt. Deje enfriar en el desecador y pese. 3. 2. Deje sedimentar el óxido cuproso y observe el color del líquido en cada tubo y note cual tiene el tinte de color azul más ligero.0 g de la muestra y disuélvala en un matraz aforado de 250ml con agua destilada.PREPARACIÓN DE REACTIVO FEHLING 1. de mide 20 veces el volumen de la solución No 1 con la que se obtuvo el color azul más ligero. 8. Calculo de ATRs Método ICUMSA: % de Azucares Totales = 100 T*FF*FD T= Volumen de la Titulación FF= Factor Fehling FD= Factor de Dilución= peso de la muestra *25*100 ~ 79 ~ .Solución No 1: Pese 20. H-PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN 1. Finalmente con dos porciones de 20ml cada una de eter etílico. y se coloca en un matraz aforado de 100ml y se completa a volumen con agua destilada (preparación de solución No 2) 5. utilizando la mitad del peso de la muestra anterior. Ensayo Previo: En cinco tubos de ensayo agregue sucesivamente a. debe volver a preparar la solución No 1. Análisis gravimétrico: En un vaso de precipitados de 250ml adicione 50ml del reactivo de Fehling-Soxhlet y 50ml de la solución No 2 azucarada. Lave el precipitado con una tres porciones de 20ml cada una de agua caliente 11. Si no se observa en ninguno de los tubos una coloración azul. Preparación del reactivo de Fheling-Sohelt: Prepare la cantidad adecuada de este reactivo. 2. 3. Para continuar con el análisis. Retire de la llama y agregar inmediatamente 100cm de agua destilada fría. Luego filtre sobre un papel de filtro previamente pesado 10.

glucosa.APLICABLE A: Este método es aplicable para el agua de proceso en el CBI. Si el glúcido que se investiga es reductor.200*250 Nota: La titulación debe completarse en 3min contados a partir del momento en que empiece la ebullición. se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre. 5. 3. B.PROCEDIMIENTO 1. Proceda a adicionar de dos a tres gotas de fehling A y B a cada tubo de ensayo. Si la reacción adquiere un color azul verdoso nuestra reacción será negativa. de color azul. Si la reacción se muestra de un color rojo ladrillo la reacción será positiva. ~ 80 ~ .PROPOSITO/ PRINCIPIO Las partículas suspendidas presentes en el agua. almidón. a óxido de cobre. de color rojo-anaranjado. 4. I. El reactivo Fehling se basa en el carácter reductor de los monosacáridos. 2. Estos son determinados y restados de los sólidos totales. Los sólidos remanentes después del secado son los sólidos disueltos. sacarosa. maltosa. La diferencia da el resultado de los sólidos suspendidos totales. son removidas por filtración y el agua filtrada es secada en un horno. Agite vigorosamente para posteriormente llevarlo al baño maría. Coloque en 5 tubos de ensayo los siguientes glúcidos: Lactosa. SOLIDOS TOTALES DISUELTOS Y SOLIDOS SUSPENDIDOS A.

RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el tecnólogo en procesos biotecnológicos aplicados ala industria.C. Chequear que las máquinas o materiales se encuentren limpios y en buen estado. El responsable de supervisar esta actividad es en instructor Ernesto Mendoza.EQUIPAMIENTO EQUIPOS Material de vidrio: Caja petri Pipeta de 50ml o disponible Desecador Instrumentos: Balanza con al menos 0. Filtre la muestra de agua (150-200ml) a través de un papel de filtro whatman numero 1 o equivalente.PROCEDIMIENTO 1. E. en el proyecto de biorremediacion. Cuando utilice los equipos o materiales asegúrese que: La cristalería que se va a utilizar debe estar limpia. ~ 81 ~ . D.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Usar bata.1mg de precisión Horno de baño caliente/baño de vapor F-MATERIALES Papel de filtro whatman G. seca y sin etiquetas.

Evapore la muestra de agua en el horno a aproximadamente 90ªc 5. Enfríelo en el desecador y péselo inmediatamente (B) 6. en miligramos. ~ 82 ~ .2. Refiérase a las notas de sólidos totales en agua CÁLCULOS Calcule los sólidos totales disueltos así: Sólidos totales disueltos. Reporte el resultado como: el agua contiene ----mg/litro de sólidos totales (secados a ----.ºc) Calcule los sólidos suspendidos totales así: Sólidos suspendidos totales = sólidos totales – sólidos totales disueltos Reporte el resultado como: El agua contiene ---.PROPOSITO/ PRINCIPIO Determinar la concentración de nitrógeno en una sustancia. 4. Pese una caja o plato de evaporación vacio y seco (A) 3. mg/litro =(B-A)X1000 / volumen de muestra tomada Donde : A: peso del plato vacio en miligramos B: peso del palto + el residuo seco. Determinación de Nitrógeno por Método kjeldahl A. Coloque en el plato de evaporación una cantidad adecuada y determinada de agua filtrada. Cuando el agua se haya evaporado completamente seque el residuo remanente a 100ºc o 105ºc hasta peso constante.mg/litros de sólidos totales suspedidos.

guantes.MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Bureta de 10ml Frascos goteros Pipetas de 1. 10 y 15 ml Papel de pesada de desprovisto de nitrógeno Micro balones de kjeldahl de 100ml MODELO CQT-5000 Reactivos Hidróxido de sodio Acido Bórico Acido clorhídrico ~ 83 ~ .B. Hornilla eléctrica.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Usar uniforme verde Utilizar careta.EQUIPAMIENTO EQUIPOS Balanza analítica. E.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el aprendiz del área. gafas. Aparato de destilación. Campana de extracción de gases F.APLICABLE A: Sustancias nitrogenadas C. El responsable de supervisar esta actividad es el instructor del programa D.5.

2.PROPOSITO/ PRINCIPIO Establecer el procedimiento para determinación de materia seca en los procesos fermentativos efectuados en el laboratorio de CBI.PROCEDIMIENTO Para la destilación se toma 10ml de la muestra digerida Determinación de materia seca gravimétrica. A.8ml HCl concentrada para 1L de solución). Solución de hidróxido de sodio al 50%.APLICABLE A: Muestras de sustancias sometidas a desecación para obtener el análisis de materia seca. Solución de acido Bórico.02N de HCl (1. Solución de HCl: Prepare y estandarice una solución de 0. Disuelva 20gr de H3BO3 en agua y diluya hasta 500ml. 3. azul de metileno. H. 4.3mg/cc exactamente al objeto de chequear y controlar el método. 5. Indicador rojo de metilo. ~ 84 ~ .2%. B. IPREPARACION DE SOLUCIONES 1. enfriando posteriormente diluya hasta obtener un volumen total de 500ml.2% y una parte de solución alcohólica de azul de metileno al 0.Disuelva 250gr de NaOH en agua lentamente.Acido sulfúrico Sulfato de sodio anhidro Sulfato de amonio químicamente puro Selenio metálico oxicloruro de selenio Rojo de metilo Azul de metileno. mezcle dos partes de solución alcohólica de rojo de metilo al 0. Solución patrón de referencia de (NH4)2SO4: Pese con exactitud una determinada cantidad de (NH4)2SO4 100 a 200 mg y dilúyalo en forma tal que resulte una solución que contiene 2000 +ó.

El responsable de supervisar esta actividad es el instructor del programa D. autoclaves. Siga adecuadamente todas las instrucciones de seguridad del laboratorio. pinza. o expuesta directamente a rayos de sol.MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Crisol de porcelana. H. Pipeta de 10 ml Bomba de aire Tubo de ensayo.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Usar uniforme verde Revisar que el desecador se encuentre en óptimas condiciones para iniciar el proceso. Espátula.PROCEDIMIENTO Se toma 10ml muestra del reactor en un Breaker de 100ml y con la ayuda de una bomba de aire y la pipeta de 10ml se extrae 10ml exacto la muestra y se lleva a los tubos de ensayo plástico. MODELO Gemmy Lesco CQT-5000 F.EQUIPAMIENTO EQUIPOS Centrifuga Mufla eléctrica Balanza analítica. ~ 85 ~ . Desecador con silica gel. Mantener los equipos de retirado de fuentes de alta temperatura o vapor. Considerar todas las situaciones que favorezcan el funcionamiento de los equipos.C. radiadores.RESPONSABILIDAD El responsable de ejecutar esta actividad es el aprendiz del área. E. IIPREPARACION DE SOLUCIONES No procede.

anotar su número y su peso (T= Tara) Colocar rápidamente más o menos 3 a 5 gramos de materia húmeda en el crisol con una espátula y anotar el peso (T+MF= Tara + Materia Fresca) Colocar los crisoles a 105°C durante 24 Hrs. Ejemplo: % peso húmedo o fresco muestra (gr)= [(Peso crisol vacio +MF)-peso crisol vacio] %peso seco muestra (gr)= [(peso crisol vacio + MS)-Peso crisol vacio] ~ 86 ~ . este para se realiza dos veces. En el periodo que se está centrifugando la muestra. Pesar el crisol. Se centrifuga hasta obtener la separación de la materia húmeda y la vinaza. (T+MS= Tara + Materia Seca) Calcular el porcentaje de Materia Seca. a la biomasa precipitada se le añade 10ml de agua y se vuelve a centrifugar el mismo tiempo y rpm. Colocarlos en un desecador durante 10 minutos. Sacar los crisoles con una pinza de la estufa colocarlos en un desecador y esperar 10 minutos. Después de la centrifugación se elimina el sobrenadante. se toma 3 crisoles y se introduce en una estufa con una temperatura de 105°C durante 30 minutos. Abrir el desecador.Después se monta los tubos de ensayo a la centrifuga y le da un tiempo de 600rpm durante 10min. pesar rápidamente los crisoles y anotar el peso.

el estudiante o personal que labora en el laboratorio. Normas Preliminares para entrar al Laboratorio: Contar con autorización y la mejor disposición al ingresar al Laboratorio. accidentes e incidentes. constituyen reglas básicas de comportamiento que debe adoptar el personal que está en contacto o manipula algún tipo de reactivo. trabajando bajo estos parámetros. por esta razón se hace indispensable tenerlas en cuenta en cada procedimiento para ayudar a prevenir dichas enfermedades o en su defecto cualquier accidente dentro del laboratorio ocasionado por falta de información. Estas Serán las normas que adoptará de forma responsable todo el personal que tenga acceso al laboratorio de BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL. es decir. orientación o desconocimiento de las normas. microorganismo o sustancia que pueda ser nociva para la salud de los presentes en el laboratorio de Biotecnología Industrial del CBI. ~ 87 ~ . infecciosa o contaminante. reconocerá que su salud y la de las personas que trabajan con él son lo más importante. Entender que toda muestra que va a ser manipulada en el laboratorio del CBI debe ser considerada altamente tóxica. a disminuir el potencial riesgo ocupacional. Adoptar las normas de bioseguridad. Contar con reglamento de bioseguridad y designar un responsable para velar por su cumplimiento. ya que. Incurrir en el incumplimiento de estas normas conlleva a la aparición de enfermedades. Usar elementos de protección personal como dotación o bata verde para visitante.%Húmedo de la muestra = (Peso húmedo muestra – peso seco muestra) x 100 Peso húmedo muestra TRABAJO EN PLANTA DIDÁCTICA DE FERMENTACIONES Y LABORATORIO NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD Bioseguridad es el conjunto de normas o actitudes que tienen como objetivo prevenir los accidentes en el área de trabajo.

~ 88 ~ . por derramamiento o salpicadura. Asegurarse de no presentar laceraciones. Disponer de los procedimientos y recursos necesarios para garantizar la adecuada descontaminación y eliminación del material desechable y de todos los residuales líquidos y sólidos potencialmente infecciosos o contaminantes DOTACIÓN DEL PERSONAL QUE ACCEDE AL LABORATORIO Usar bata de manga larga dentro de laboratorio. Usar tapabocas y gorro para los procedimientos realizados en el laboratorio. la cual debe estar completamente cerrada y se pondrá antes de entrar y deberá ser quitada inmediatamente al salir del laboratorio. Deberán usarse zapatos cerrados dentro del laboratorio para evitar el contacto de la piel con material contaminado o cualquier producto químico peligroso. Emplee delantales impermeables cuando haya posibilidad de salpicaduras o contacto con fluidos de precaución universal. heridas abiertas u otras lesiones en la piel y en caso de que así sea cubrir la herida de manera conveniente. Las manos se deben lavar antes de ponerse los guantes y una vez se quiten.Garantizar los medios de protección necesarios para preservar tanto el personal de laboratorio y a los usuarios como a las muestras biológicas y se controlará el uso adecuado de los mismos. Cuando el personal del laboratorio manipule sustancias de tipo. Es preferible el uso de uso de pantalones largos ya que pueden impedir que sufra lesiones con materiales corto punzantes y con sustancias químicas o contaminación con materiales biológicos. para evitar cualquier tipo de accidente. Usar guantes de látex de buena calidad y de la talla adecuada para todo manejo de material biológico y/o químico. deberá de forma obligatoria utilizar GAFAS de protección en los ojos. tóxico. corrosivo.

No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes puestos

NORMAS DE TRABAJO Al ingresar al Laboratorio se debe apagar todo tipo de alarmas, celulares, beepers u otros equipos que puedan interrumpir la práctica. Realice limpieza y desinfección a las superficies, elementos y equipos de trabajo al final de cada procedimiento y al finalizar la jornada de trabajo. Bajo ninguna circunstancia se permitirá comer, beber, fumar y/o almacenar comida, así como cualquier otro ítem personal (maquillaje, cigarrillos, etc.) dentro del área de trabajo. Mantenga el cabello corto o recogido. Evitar tapar, enfundar, doblar o quebrar agujas, láminas de bisturí u otros elementos corto punzante, una vez utilizados. Estos elementos deben ser directamente colocados en el guardián. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas. Bajo ninguna circunstancia se pipeteará sustancia alguna con la boca, paralelo se utilizaran peras plásticas o pro pipetas automáticas. Los tubos que se introduzcan en la centrífuga deben ir tapados, además no se debe detener manualmente la centrifuga, ni destaparla antes de que empiece a girar. Evite el contacto con agujas y elementos corto punzantes.

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No devolver reactivos a los frascos originales, así no hayan sido usados. No permitir la entrada de personas ajenas al laboratorio y/o que no tengan sus implementos de bioseguridad adecuados. Al finalizar la práctica o procedimiento, el laboratorio debe quedar ordenado, el material ubicado de forma ordenada y los desechos generados correctamente clasificados. Cualquier accidente por pequeño que sea, debe comunicarse al instructor responsable de la práctica de laboratorio o en su defecto a la persona que esté a cargo del mismo. Todos los desechos biológicos, ya sean líquidos o sólidos, tienen que ser descontaminados antes de su eliminación. Emplear en todo momento las medidas de bioseguridad aquí expuestas.

MANTENIMIENTO DE LABORATORIO En el laboratorio no debe haber ninguna clase de plagas como cucarachas, roedores, hormigas entre otros. El laboratorio debe ser fumigado mínimo cada seis meses para evitar cualquier tipo de plagas. Se deben inspeccionar todos los equipos antes de su utilización y una vez finalizada la práctica. El suelo del laboratorio debe estar siempre seco, limpiando inmediatamente cualquier salpicadura de sustancia sea química o agua. Los pisos del laboratorio no deben barrerse ni encerarse solo se trapean con solución de hipoclorito de Sodio (0.5 al 1.0%). Descontaminar la superficie de los mesones con hipoclorito de Sodio (0.51%). Material de vidrio reutilizable debe ser lavado en el laboratorio. Los reactivos deben quedar bien cerrados y almacenados. El laboratorio debe quedar en perfectas condiciones: o Llaves de agua y gas cerradas. o Luces apagadas. Equipos desconectados, vertederos libres de muestras o manchas de reactivos o con material por lavar, mesones limpios y descontaminados.

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Pisos libres de basura.

ASEPCIA Y DESINFECCION DEL LABORATORIO PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA Y DESINFECCION A) PROPÓSITO / PRINCIPIO Este procedimiento tiene como objetivo establecer la metodología para la limpieza de las áreas del laboratorio del Centro de Biotecnología Industrial. B) APLICABLE A: Áreas generales del Laboratorio de Biotecnología Industrial, como: mesones, equipos, pisos y otros. C) RESPONSABILIDAD Es responsabilidad del monitor de limpieza cumplir con lo especificado en el procedimiento, Jefe de los aprendices del área y Responsable de Calidad, que supervisará la correcta realización del mismo. D) CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD Realice la limpieza utilizando la bata sanitaria, guantes, gorro y tapabocas. Tener cuidado de no humedecer equipos o partes de ellos que tengan alimentación eléctrica (computadoras, lámparas, toma corrientes y equipos de laboratorio). E) EQUIPAMIENTO No procede F) MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES Guantes de goma Paño de tela Esponja Escoba Recogedor Trapeador Frazada Bolsas de nylon Botas de gomas Brillador

~ 91 ~

estos son: Se comenzará la limpieza por los mesones de transición adicionándole extran para la limpieza para dejar lisa la membrana de las bacterias dejándolo durante 5 minutos. descrito en tres procedimientos básicos para el control de agentes biológicos. lo dejamos actuar durante 3 minutos. V2 2. procedemos a aplicarle alcohol al 70% hasta evaporar. 571 ml de hipoclorito de sodio al 5.V1 = C2. Tomada En El Laboratorio De Biotecnología Industrial Sena Palmira DESCARTE Se debe minimizar. luego procedemos aplicarle el hipoclorito de sodio al 3% para poder hacer lisis a los microorganismos presentes.ALCOHOL INDUSTRIAL Mida en un balón aforado de1L 707 ml de alcohol industrial y afore a 1L con agua destilada. la limpieza y desinfección de locales y equipos. V1 = C2. ya que hay bacterias acido resistentes que podrían sobrevivir a éste primer procedimiento. Agítelo suavemente de forma manual. separar y preparar la cantidad de residuos que se generen en el laboratorio para su recolección de acuerdo con los procedimientos especificados por el laboratorio. C1.25% y afore a 1L con agua destilada Agítelo suavemente de forma manual.HIPOCLORITO DE SODIO Mida en un balón aforado de 1L. Foto. C1. Frecuencia de limpieza: Mesones y equipos: diario 2 veces al día Pisos: tres veces por semana. V2 H) PROCEDIMIENTO El laboratorio cuenta con un programa de higiene que describe los procedimientos para el mantenimiento del orden. ~ 92 ~ .G) PREPARACIÓN DE SOLUCIONES 1.

Foto. Rotular con: Compuestos de cultivos. Planta piloto de fermentaciones. ~ 93 ~ . medios de cultivo. caneca verde y caneca gris. Clase de residuo contenido básico color etiqueta Rotular con: Toda clase de vidrio. Riesgo Biológico Rotular con: Riesgo Químico PLANTA DE FERMENTACIONES La Planta Piloto de Fermentación tiene como finalidad principal el desarrollo a escala semiindustrial de productos obtenidos a partir del cultivo de células y microorganismos. mezclas de Peligrosos infecciosos microorganismos. Caneca roja. Tomada en el laboratorio de Biotecnología Industrial Sena Palmira. bolsas de No peligrosos reciclable plástico. residuo contaminado por estos.El laboratorio debe tener al menos tres canecas de basura. tela papel plastificado. químicos Rojo agentes infecciosos o cualquier cito tóxicos. hongos o levaduras. embases de plástico sin Gris Plástico . en las cuales se clasificaran de forma correcta los desechos generados por el mismo. Biosanitarios. Verde No peligrosos ordinario o inertes. Peligrosos Químicos infecciosos Restos de sustancias químicas y sus empaques o cualquier otro residuo Rojo contaminado con estos. ya sean bacterias. vidrio contaminar. Reciclable Rotular con: No peligrosos ordinario Empaques de e inerte barrido.

entre otros). En el laboratorio siempre existe la posibilidad de derrame de productos químicos lo cual requiere de una acción inmediata para corregir o minimizar el efecto de este peligro potencial. Almacenar los químicos de acuerdo con la peligrosidad. Usar las ventilaciones existentes. Tener seguridad que el recipiente que contiene estos productos esté debidamente tapado y rotulado con la fecha de preparación y que contenga las notificaciones sobre peligro. entre otros. utilizar dispositivos propios para la colecta de ese material. Vestirse apropiadamente (guantes. ~ 94 ~ . flamabilidad. manteniéndose a mano en caso de requerirse.. Leer las especificaciones cuidadosamente. entre otros. explosividad.1 SEGURIDAD GENERAL DE LA PLANTA Todas las personas que trabajan en la planta deben tener la responsabilidad de mantener el área libre de derramamiento de líquidos y aceites. El peligro se origina en el momento en que los aprendices no tienen la precaución de manejo adecuado con estos materiales. Cuando se recojan las muestras. Algunas reglas de seguridad son las siguientes: Usar agentes químicos siempre conociendo los principios básicos. Conocer los antídotos para los agentes químicos venenosos. etc. - Seguridad con la salud Prevención contra caídas. en áreas adecuadas para esto. no leen los rótulos y no siguen las reglas y procedimientos de laboratorio. conociendo sus propiedades y saber como usarlos. bata y gafas.Cuando tenga puesto los elementos de bioseguridad tenga en cuenta las siguientes CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD: 5. Seguridad en el laboratorio y manejo de productos químicos Seguridad en el laboratorio El manejo de las aguas residuales y de productos químicos crea un potencial de peligro para la salud y la seguridad del personal de laboratorio.

Usar los equipos apropiados. LIMPIEZA CON BACTERICIDA PARA LOS BIORREACTORES         Enjuagar el propagador con agua. Esta temperatura se deja por 30 minutos y se activa el contador. Luego de vaporizada la soda se pasa para otro reactor. Otras Recomendaciones Usar la lógica cuando se requiera mover o levantar objetos pesados. Use el tapabocas y las gafas. Luego de vaporizada el bactericida se pasa para otro reactor. Se abre la válvula de vapor de la chaqueta. escaleras y mangueras. El biorreactor queda listo para preparar los medios de cultivo. Tome un baño y cámbiese de ropa antes de ir a casa. Prevención contra infecciones en general. Adicionarle 30% de soda. Lave bien las manos. Recoja todos los objetos perdidos (herramientas. Use guantes cuando esté recolectando muestras. Subir la temperatura de 190 a 200. No corra. Se sube la temperatura a 190 a 200.Mantenga todas las áreas bien iluminadas y limpias. Abrir la válvula de vapor en la chaqueta. ~ 95 ~ . El biorreactor queda listo y esterilizado. LIMPIEZA CON SODA DE LOS BIORREACTORES PARA INICIAR UNA PROPAGACIÓN        Enjuagar el propagador con agua. Esta temperatura se deja por 50 minutos y se activa el contador. entre otros) Limpie cualquier derrame de aceite y de grasas. Luego se enjuaga con agua y el enjuagué se baja a la canal. Se le adiciona el bactericida según lo convenido.

 Cuando el agua salga limpia se procede a mirar que el tanque este limpio esto demora más o menos una hora.  Verter agua por la parte superior para enjuagarlo por la tubería y el intercambiador de calor.  Hacerlo por una hora hasta que el fermentador tenga nivel con soda para recircularlo por el intercambiador de calor y la tubería.  Medir con el equipo de gases que no tenga CO2. SISTEMA DE TRATAMIENTO BIOLÓGICO EN LOS VERTIMIENTOS DE LAS FERMENTACIONES INDUSTRIALES PLANTA DIDÁCTICA PTAR DE LODOS ACTIVOS ANÁLISIS FÍSICO QUÍMICO DEL AGUA En nuestro planeta. el agua (H2O) es la única sustancia que coexiste abundantemente en los tres estados físicos posibles. los mostradores.  Lavar las partes muertas del fermentador que son el agitador. y comunicaciones. estando siempre presente en todas partes de la atmósfera suspendido en forma de partículas de hielo o sobre la superficie terrestre en diversos tipos de nieve y hielo.LIMPIEZA EN LOS FERMENTADORES  Liquidar todo el fermentador.  La soda que no pasa que queda en el fondo se abre a la canal para neutralizarla y enviar a la PTAR.  Luego se le abre la válvula de agua que está pegada la tubería para realizar lavado al intercambiador de calor y tubería de recirculación.  Pasar la soda nueva mente al tanque de soda para recupérala.  Abrir la válvula del drenaje hacia la canal para liquidarlo lo del fondo y se lleva a la PTAR.  Luego con el tanque de soda que está en un 5% de concentración se le mete soda por la parte superior del tanque.  Bajar el bactericida a la canal y se avisa a la PTAR y queda listo.  Verter agua a presión por la parte superior del tanque para realizar el lavado por todas las paredes y el fondo. Es nuestro único líquido común y el sólido pura mas ampliamente distribuido.  Verter agua al fermentador hasta que tape las paredes y aplicarle el bactericida y recircular por 30 minutos con vapor. SOLIDOS TOTALES ~ 96 ~ .

aguas de río etc. ALCALINIDAD Es una medida de la cantidad total de sustancias alcalinas (OH-) presentes en el agua y se expresan como partes por millón de CaCO3 equivalente. Para determinarlos se toma una cantidad conocida de muestra de agua y se seca completamente en un horno a 100 ° C. al menos. equivalentes al CaCO3 que se reporte. expresados como partes por millón de carbonato de calcio equivalente. PRINCIPIO: Originalmente la dureza del agua fue definida como la capacidad del agua para precipitar el jabón. También se hace así porque puede desconocerse cuáles son los álcalis presentes. SOLIDOS TOTALES DISUELTOS Y SOLIDOS SUSPENDIDOS Este método es aplicable para el agua de proceso y para el agua de enfriamiento. Los sólidos remanentes son pesados y determinados como sólidos totales en el agua. son removidas por filtración y el agua filtrada es secada en un horno. PRINCIPIO: Las partículas suspendidas presentes en el agua. Este método es aplicado para el agua de proceso usada en la destilería. Los iones de Calcio y Magnesio o sus sales principalmente precipitan el jabón. Acidez Ph La acidez de un agua es una medida de la cantidad total de substancias ácidas (H+) presentes en esa agua. DUREZA DEL AGUA Este método puede ser aplicado para todo tipo de agua de proceso. aguas subterráneas.PRINCIPIO Los sólidos totales en el agua incluyen los sólidos suspendidos y los sólidos disueltos. La diferencia da los sólidos suspendidos totales. Se ha demostrado que un equivalente de un ácido (H+) es igual al equivalente de una base (OH-). ~ 97 ~ . Estos son determinados y restados de los sólidos totales. Los sólidos remanentes después del secado son los sólidos disueltos. pero éstos son.

al producirse sales insolubles. sulfatos y ocasionalmente nitratos de calcio y magnesio . en la PTAR va sujeta a la normatividad internacional sobre el manejo de laboratorio y buenas prácticas de manipulación con la ayuda de equipos de última tecnología y capacitación de sus analistas garantizando la confiabilidad de los mismos. tales como el lavado doméstico e industrial. A continuación se procede a nombrar los equipos y reactivos que se trabajan: EQUIPOS SOLUCIONES Y REACTIVOS Plancha de agitación Soluciones para análisis de alcalinidad (HCL) 0.2% Estufa para calentar muestras PH metro Oximetro buretas AGV (NAOH) 0.05% ~ 98 ~ . la dureza es indeseable en algunos procesos. provocando que se consuma más jabón. cloruros.DUREZA La DUREZA es una característica química del agua que esta determinada por el contenido de carbonatos. bicarbonatos. PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES DE LODOS ACTIVOS POLITICAS DE ANALISIS DEL LABORATORIO La política de los análisis implementados.

1 Algunos equipos del laboratorio de la PTAR ~ 99 ~ .Pipetas probetas Conos himmoff peras Balones volumétricos Agitador de madera Fig .

~ 100 ~ .

RUTA DE EVACUACIÓN Y RED CONTRA INCENDIO. y SOFKLAN. con los dispositivos de seguridad que se deberán usar. que es fácilmente combustible. Fig 2. DUCHA DE EMERGENCIA. debido principalmente a la producción de biogás. También se tiene el rombo de seguridad extintores tipo ABC. Extintores y ducha de emergencia ~ 101 ~ . El operador de la planta debe estar bien familiarizado con los problemas de esta área.ASPECTOS DE SEGURIDAD Cuidados básicos La planta de tratamiento anaerobia es potencialmente el área de mayor peligrosidad en el tratamiento de aguas residuales. rico en gas metano. con las debidas precauciones y con algunas reglas generales de seguridad industrial.

homgos DISEÑO DE PLANTA ~ 102 ~ . hipoclorito de Na. audiometría. Riesgos fisicoquímicos y biológicos a los que están expuestos los operarios de la PTAR. y chequeos medico generales.Elementos básicos de protección personal de los operarios Los operadores deben usar gafas de protección y máscaras para no inhalar los vapores de los componentes químicos Guantes de látex para manipulación de reactivos Guantes antiácidos Botas antideslizantes Traje de dos piezas antiácidos Jabón desinfectante y alcohol Además se cuentan con extintores de tipo ABC y sofkaflan También los operarios cuentan con un control anual de exámenes generales que les realiza la empresa como: aspirometria. optometría. úrea. ácido fosfórico. RIESGOS QUIMICOS Manipulación de soda caustica. Calor ambiental Motores en movimiento RIESGOS BILOGICOS Manipulación de lodos aerobios y anaerobios y vapores. RIESGOS FISICOS Manipulación de herramientas. reactivos.

80 metros Tanques de alimentación: la planta consta de dos tanques de éste tipo y tienen la función de acumular las aguas residuales provenientes del centro de Biotecnología Industrial. tanque de recibo: éste tanque es el receptor del agua tratada. De acuerdo a los tipos de microorganismos que tienen lugar en el tratamiento del agua residual así mismo se establecen y se identifican varias clases de plantas con reactores que mantienen las condiciones que permiten la propagación de los mismos (reactores aerobios y anaerobios). tanque de lodos activados: posee una bomba de aire que satura el agua residual de oxígeno y de ésta forma.   Altura: 2 metros Ancho:1.      ~ 103 ~ . se llevan a cabo análisis continuos del proceso que permiten llevar un control del funcionamiento y trabajo tanto de la planta como de los agentes biológicos que participan en el tratamiento aplicado al agua residual originada en el SENA. El rendimiento o la capacidad de la planta para descontaminar el agua están estimados en un 85-95%. tanque de sedimentación: tiene como función principal sedimentar las sustancias que tienen una densidad mayor que la del agua. de lugar a un filtro microbiano de descontaminación biológica y como resultado final del tratamiento se obtiene lodos activados sedimentados. Para lograr la adecuada aplicación de las técnicas de Biorremediación.

~ 104 ~ .T. por tal motivo muestra uno de sus nuevos proyectos la planta de tratamientos de aguas residuales automatizada con una capacidad de 200 Lts de trabajo.R del centro de Biotecnología Industrial como componente innovador de de nuevos procesos sistematizados a escalas pilotos de los tratamientos biológicos y biotecnológicos.La P.A. Sistema de tratamientos biológicos para residuos sólidos COMPOSTAJE Es un proceso controlado y acelerado de descomposición de las partes orgánicas de los residuos totalmente aerobio. Prototipo de planta piloto automatizada 200 Lts. dando lugar a un producto estable llamado “compost”.

Imagen de apoyo de procesos de compostaje 6. 7. 8. desde el sector productivo. 6. Evaluación de las conclusiones y aporte de recomendaciones hacia el Programa de Formación. Transferencia y acompañamiento hacia el proyecto objeto de la Investigación Aplicada. Permitir visitas técnicas para desarrollar por observación las competencias. DISEÑO METODOLÓGICO 5. FASES DEL PROYECTO Y SUS ACTIVIDADES ~ 105 ~ . Incluir Materias Primas y cepas Industriales en el marco de la evaluación de los Bioprocesos.

C C. ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÓN FÍSICA.C C. 2 AMBIENTES DE FORMACIÓN REQUERIDOS o o o o Laboratorio de Biotecnología Industrial Planta Piloto de Fermentaciones 20 L Planta Piloto de Tratamiento de Agua Residual.Lodos Activados 200 L Planta Piloto de Compostaje.5 24 ENSAYO pH inicil BRIX inicial pH final Brix final C. INSUMOS. RESULTADOS MEDIO # 01 ENSAYO pH inicil BRIX inicial pH final Brix final C.C C. TANTO A NIVEL DE LABORATORIO Y PLANTA PILOTO.C 3 4. 2.9x10e8 hrs 07:00 am 3.5 24 1 2 3 4 1.3x10e8 hrs 02:15 am 2. VALORAR LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA UNICELULAR COMO SUPLEMENTO ALIMENTICIO ANIMAL Y REMEDIAR POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS LOS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÓLIDOS PROVENIENTES DEL BIOPROCESO.5 Evaluación VALIDAR LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR DE ACUERDO A LAS MATERIAS PRIMAS SELECCIONADAS Y CONDICIONES OPERATIVAS DE FERMENTACIÓN REPORTADAS POR EL LABORATORIO Y LA PLANTA PILOTO.5 Ejecución EJECUTAR LA OPERACIÓN.5x10e8 hrs 15:00 ~ 106 ~ . 7. ANALIZAR LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÒN FÌSICA.C 2 4.7x10e8 hrs 10:45 am 2. QUÌMICA Y MICROBIOLÒGICA VALORANDO LA PRODUCCIÒN BIOTECNOLÒGICA DE PROTEÌNA UNICELULAR Y SUS VERTIMIENTOS Y SUBPRODUCTOS SÒLIDOS . CUMPLIENDO CON EL ESCALADO DE LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA. EQUIPOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL Y SEGUIMIENTO DE PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN SEGÚN INSTRUCCIONES A NIVEL DE LABORATORIO EN LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR.1x10e8 hrs 11:00 am 1.3x10e8 hrs 14:45 1 2 3 4 1.C C.C C. QUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA VALORANDO LA PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA DE PROTEÍNA UNICELULAR A PARTIR DE DIFERENTES SUSTRATOS A ESCALA DE LABORATORIO SELECCIONAR LAS MATERIAS PRIMAS.FASES DEL PROYECTO Análisis y Planeaciòn ACTIVIDADES DEL PROYECTO: Cronograma ( En Meses) IDENTIFICAR NECESIDADES DE ALTERNATIVAS NUTRICIONALES PARA LA ALIMENTACIÒN ANIMAL POR PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS Y ACCIÓN MICROBIANA.2x10e8 hrs 01:45 am 9x10e7 hrs 06:45 am 2.C C. 9.

7x10e8 5.3x10e8 4 09:40 5 2.8x10e8 hrs 06:04 3.C C.45 33 ENSAYO 3 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.7x10e8 3 05:40 4.C C.6x108 hrs 12:30pm 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) lnx MEDIO # 03 ENSAYO 1 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C C.7x10e8 3.C C.210e8 3.C C.C.3x10e8 ~ 107 ~ .9x10e8 7.9x10e8 hrs 01:40 hrs 3x10e8 hrs 09:46 3.C C.1x10e8 hrs 22:04 2.C 1 2 3 4 5 se monto hrs 22:04 4.3x10e8 hrs 01:46 3.C C.C C.2x10e8 5.C 5 6 7 8 9 2.C C.C C.C 4 5 1 2 3 se monto hrs 21:46 4.C C.C hrs hrs 13:40 C.2x10e8 hrs 23:00 6x10e8 hrs 04:28 am 1.C C.C C.8x10e8 hrs 22:04 1.C C.C ENSAYO 2 pH inicial BRIX inicial pH final Brix final C.C C.C C.C C.8x10e8 hrs 19:00 7.1x10e8 hrs 1 21:40 2 2.C C.5x10e8 hrs 08:30am 1.5x10e8 hrs 18:45 hrs 23:45 hrs 04:25 am 08:26 am 12:25 pm C.9x10e8 hrs 1.0x10e8 hrs 09:46 1.C C.5x10e8 hrs 02:04 2.45 33 1.C 5 6 7 8 9 2.7x10e8 hrs 05:46 4.45 33 se monto hrs 21:40 4.

78 h y la velocidad máxima de de crecimiento 1.C 6 7 8 9 1.3x10e8 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 t (h) c. OBSERVACIONES  Al realizar los estudios hablados anteriormente nos hemos dado cuenta de que se puede producir un producto novedoso y necesario que pueda cubrir una gran demanda industrial y ganadera a partir de residuos industriales.8x10e8 hrs 6 17:48 7 8 9 hrs 02:04 C.C C.C 6 7x10e8 hrs 17:40 7 8 9 C.C 13:46 1.  De acuerdo a los estudios realizados este proyecto es viable y rentable.C C.  Gracias a los residuos industriales.C C.C C.c (g/l) 8. al buen uso de los microorganismos y sus características se puede crear una nueva fuente de proteínas para consumo animal.135 cell/h.C C.C C.C C.C C. los cuales son: El Micelio fúngico debido a su tiempo de duplicación máxima 2.  La producción biotecnológica de proteína unicelular para consumo animal presenta mayor factibilidad utilizando subproductos agroindustriales como medios alternativos. permitiendo un rápido crecimiento de nuestro ~ 108 ~ .C C.C.  Por medio de la reutilización de los desechos industriales ayudamos a preservar el medio ambiente y bajar el índice de contaminación.

9. las medidas que se deben tomar en caso de contaminación. Inicialmente debimos realizar una caracterización de nuestra levadura. el día de la ciencia. desde crear esa sensibilidad que algunos necesitaban para hacerles entender que nuestro proyecto de formación era y es diferente a muchos de los cuales el SENA venía manejando. poco a poco. Iniciamos empleando los conocimientos adquiridos.microorganismo Cándida Utilis utilizando como sustrato alternito de este medio. Cali.  Las características como densidades de estos medios son factores que afectan éstas. posteriormente enfatizábamos sobre problemas existentes. tales como.38 h y la Porcinaza presenta un tiempo de duplicación 5. hasta conocer las condiciones óptimas para su crecimiento. El Bagacillo presenta su tiempo de duplicación máxima 3. Bogotá. cual utilizaríamos. comparando los medios alternativos. los niveles de estrés que esta podría tolerar.71 h. se realizaban foros donde poníamos a prueba los conocimientos adquiridos y dando nuestros primeros pasos en este nuevo mundo para nosotros. muchos mas lentos con la Saccharomyce cerevisiae. ~ 109 ~ . Martha. Dirección Nacional. hago referencia a las charlas y/o clases dictadas por los diferentes instructores del área de biotecnología encabezadas por el Ingeniero Biotecnológico Pedro de Jesús Miranda Villamizar.. participaron activamente en los eventos de promoción del programa. los agentes contaminantes que la llegasen a afectar en un proceso de producción. Pasto. que parámetros tendríamos en cuenta y como sería su óptimo crecimiento. esa consciencia que tanto requeríamos fue llegando y con esta los resultados que todos anhelaban. Ya lo que respecta al área técnica todo fue cambiando. convocatoria de divulgación de proyectos y campaña masiva de materia orgánica (Se adjuntan los videos de sustentación como anexo) Se recibieron también visitas de otros centros de formación SENA de Cartagena. desde el reconocimiento de una levadura. colegios aledaños y demás… Santa En el desarrollo de esta parte de nuestro proyecto de formación primero recibimos gran cantidad de material educativo. siendo estos tiempos de duplicación muy elevados para los ensayos productivos de biomasa celular. posteriormente se logró lo que se quería. DIVULGACIÓN En el proceso de divulgación los aprendices del TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA. etc.

luego de esto se llevan a un horno de esterilización donde estarán 3 horas a 120ºC. En lo que respecta a la cepa. con esto se busca mejorar la materia prima para que en nuestro proceso de fermentación los resultados sean mucho mas óptimos. ATR. Plate count o el que se requiriera en su momento. ésta a su vez se lleva hacia un horno de incubación donde la dejaremos de 24 a 48 horas dependiendo de su crecimiento (la caja de petriq debe estar sellada con emboplast. en la medida de lo posible claro está. cajas de petri. alcohol al 70% y demás cuidados que se deben tener para un correcto desenvolvimiento. micelio fúngico. esto nos asegura que su contenido este aislado del ambiente). vinaza. bagazo. Para lograr este proceso de purificación.. Posteriormente se preparan los medios de cultivo y/o trabajo implementando dichas materias primas a diferentes concentraciones. entre las cuales encontramos. teniendo claro los conceptos adquiridos sobre aislamiento y purificación de cepas dictados por los instructores en su debido momento sin olvidar los balances de materia que se debían emplear para la correcta formulación del medio de cultivo. hidrólisis acida o básica. se dejan secar y posteriormente se envuelven con papel kraft. tubos de ensayo. ésta varia en los diferentes equipos de trabajos que existen en el laboratorio de biotecnología industrial.Realizamos listas de chequeo. ya sea PDA. todo esto se realiza con los mecheros correspondientes. utilizamos la levadura Saccharomyces cerevisiae. Una vez se lleva a cabo la purificación de la cepa y se ha sembrado en la caja de petra por agotamiento. tubos de ensayo hasta azas microbiológicas. Una vez tenemos nuestra cepa podemos iniciar con nuestro proyecto como tal. todo con el fin de garantizar el correcto uso tanto de materiales y reactivos de nuestro laboratorio como también un casi perfecto desarrollo de nuestro proceso. Se debe previamente enjuagar con agua destilada todos los materiales a utilizar (en este caso de purificación. previamente se realizaron montajes a escala 3000ml para ~ 110 ~ . etc. brix. Erlenmeyer. Previamente se ha realizado una caracterización de dicha materia prima. bagacillo. Previamente se ha realizado una esterilización en la zona estéril que es donde se realizará la purificación de la cepa. como siempre promoviendo la asepsia del lugar de trabajo. donde existen unas lámparas de rayos ultravioleta. procedimientos patrones de operación. miel b. debimos aprender a distinguir cada uno de los materiales existentes en el laboratorio. Se realizan diferentes análisis fisicoquímicos como acidez. pipetas. donde esta luz promueve la desaparición de las bacterias que puedan estar presentes en dicha zona. desde cajas de petri. beaker. etc. porcinaza. Después de pasadas las 48 horas se extraen las cajas de petriq de la incubadora y se pasa a realizar un conteo de colonias y posteriormente realizar una tinción de gram donde nos aseguraremos que nuestra cepa esté libre de contaminantes. con el fin de purificarla y de esta manera garantizar unos niveles de asepsia bastante altos en nuestro proceso de fermentación. probetas y Erlenmeyer). hicimos aislamiento de la cepa. donde utilizamos las diferentes materias primas que hemos escogido para de esta manera determinar con cuál de estos subproductos iniciaremos la fermentación.

para mitigar dichos impactos. acidez volátil. de esta forma también podemos dar una solución viable a los problemas que hoy por hoy están dando las industrias.determinar cuál sería el medio con mayor rendimiento es decir. es por esto que también se montó una PTAR a escala piloto de lodos activados donde se quería encontrar un optimo desempeño de la misma. gran parte de los residuos líquidos han sido enviados a la PTAR de lodos activados y otra pequeña para compostaje. se realizaron dos jornadas de saneamiento básico con el fin de determinar si el centro estaba cumpliendo o no con las exigencias de la norma que dictamina un límite permisible de descargas hacia el alcantarillado. en el Centro De Biotecnología Industrial. minimizar y/o mitigar el impacto ambiental que se pueda generar. entre otros. estaríamos haciendo lo contrario que sería aumentar el impacto para las descargas que se realizan. no se debe dejar nada a la deriva pues esto implicaría una contaminación que más adelante desencadenaría una pérdida total o parcial en nuestro y proceso y esto conllevaría a perdida de dinero por los reactivos utilizados en el acondicionamiento del medio como también del tiempo dispensado en dicha labor. brix. para esto tenemos un plan de contingencia y este plan es: BIORREMEDIACIÓN (SISTEMA DE TRATAMIENTO BIOLÓGICO DE LOS VERTIMIENTOS EN LAS FERMENTACIONES INDUSTRIALES) Este es nuestro segundo proyecto de aprendizaje. Cabe denotar que durante nuestro proceso de fermentación se generan tanto residuos líquidos y sólidos que son perjudiciales para el medio ambiente y estaríamos en vez de minimizar dicha problemática. y donde los residuos sólidos si van directamente a compost. re circular esas aguas ya utilizadas para los oficios varios y de esta ~ 111 ~ . pH. por medio de estos procesos se quiere regular. donde buscamos dar una solución viable a los residuos que por lo pronto generamos durante nuestro proceso de fermentación. queriendo de esta manera llevarla a una escala mayor para de esta forma tratar las aguas del centro y por qué no. que por querer ser más productivos se están convirtiendo en un gran problema para el medio ambiente. conteo celular. ya que se debe controlar el proceso de fermentación de principio a fin pues siempre buscamos que la asepsia durante nuestro proceso sea total. AR. nos basamos en una serie de análisis que se realizan en el laboratorio. de no serlo estaríamos expuestos a sanciones por parte de las entidades pertinentes. Para determinar ello. Los análisis que se realizan durante el proceso de fermentación son. es por esto que estamos nosotros. Los controles de contaminación que se hacen en el laboratorio de biotecnología industrial son periódicos. ATR. donde se realizan pruebas al ambiente como pruebas en superficie para tener una idea de la contaminación existente en dicho ambiente de aprendizaje y de esta manera determinar si se debe ya sea mejorar la limpieza del laboratorio o recurrir a otros métodos de limpieza y desinfección de ambiente y superficie. Dichos parámetros se controlan cada 2 horas con el ánimo de obtener los suficientes datos para al final tener un resultado más aproximado a la realidad. el medio con mayor crecimiento celular.

manera contribuir el ahorro de dineros que bien pudieren ser invertidos en otras obras que nos beneficien. una vez obtenido ese conocimiento se buscó tener un plan de manejo óptimo en cuanto a la producción de proteína unicelular como la Biorremediación de los residuos producidos. se realizaron campañas de recolección de materia orgánica con el fin de obtener la suficiente cantidad para poder dar inicio a nuestro proceso de compostaje. control de pH. Previamente en laboratorio se realizaron pruebas de siembra del hongo trichoderma buscando la aceleración en el proceso de compostaje y optimizar obviamente su rendimiento como tal. DBO5. Supervisores de Plantas de Fermentación. etc. IMPACTO SOCIAL: Mejorar la calidad de vida. sólidos Sedimentables. donde se busco la realización de la misma y dejarla a punto para que todo el grupo de alumnos pudieran tener una idea más cercana a la realidad de lo que es una planta como estas y realizar obviamente los análisis pertinentes en dicha labor. la cepa a inocular y las variables de proceso previamente establecidas. alcalinidad. Sector agrícola.. de temperatura y de humedad. como la relación carbono nitrógeno. sólidos totales. Por otra parte. dureza. sector industrial. En la PTAR el diseño estuvo a cargo del instructor Pedro Miranda y de algunos aprendices del área. en el área de compostaje se llevo a cabo el tratamiento de residuos sólidos producidos en el laboratorio de biotecnología industrial como también los desechos producidos por la cafetería del centro como de las casas de algunos aprendices. aprendices y comunidad SENA. Para finalizar podemos inferir que estos proyectos ya que son nuevos para nosotros tienen algo de dificultad. sector pecuario. Dichos parámetros fueron controlados constantemente con la finalidad de minimizar el impacto a la comunidad circundante como también evitar la aparición de vectores que son indeseables en nuestro proceso. entre los cuales se encuentran. acidez. ALCANCE Beneficiarios del proyecto Ingenieros. ~ 112 ~ . se debieron tener en cuenta parámetros para dicho proceso. pero no son imposibles de realizar si se tienen en cuenta todas las normas de bioseguridad pertinentes y manejando un ambiente en la medida de lo posible estéril o lo más aséptico posible para de esta manera no alterar los resultados de los análisis que se realicen en un proceso determinado.

AMBIENTAL: Disminución de las emisiones contaminantes. manejo sostenible de los subproductos. equipos e insumos para la producción.ECONÓMICO: Optimización de las materias primas. TECNOLÓGICO: Transferencia tecnológica de los procesos y Bioprocesos en la producción biotecnológica para las empresas. ~ 113 ~ . tratamientos biológicos para el tratamiento de los residuos sólidos y líquidos.

Miel B y bagacillo esto con el propósito de complementar los resultados del proyecto de formación: producción de proteína unicelular para el consumo animal. febrero 28 del 2011 Ingeniera Mayagüez S. ANEXOS CARTA SOLICITUD DE MATERIA PRIMACARTA SOLICITUD DE MATERIA PRIMA REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira. Información de contacto: Ingeniero Ernesto Mendoza Instructor Área de biotecnología Teléfono: 3156779455 ~ 114 ~ . solicito comedidamente su colaboración con el aporte de las siguientes materias primas: Vinaza concentrada. proyecto que adelanta que hace parte del proceso de formación de estos destacados aprendices.A Candelaria Asunto: Solicitud de materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con numero de ficha de caracterización 87051.10.

Agradezco la atención prestada. Agosto 2 del 2011 Ingeniera Elizabeth Castillo Ventas División Coproductos ecastillo@sucromiles.co Sucromiles 4310744 Recta Cali – Palmira Km 18 Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051. ~ 115 ~ . solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 1 kilo de micelio fúngico 5 galones de vinaza Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos.com. Cordialmente. Ernesto Josué Mendoza REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira.

co Agradezco la atención prestada.D.Información de contacto: Ing.com Ingenio Providencia E.edu. Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena. REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira. Agosto 2 del 2011 Ingeniero Julián Parra Jefe Destilería Providencia japarra@ingprovidencia. Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: ~ 116 ~ .S.

Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 5 galones de melaza 5 galones de Miel B 10 Kg de bagacillo 5 Kg de Lodos orgánicos del Decanter Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos.co Agradezco la atención prestada.edu. Información de contacto: Ing. REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira.Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051. febrero 28 del 2011 ~ 117 ~ .

Agosto 2 del 2011 ~ 118 ~ . proyecto que adelanta que hace parte del proceso de formación de estos destacados aprendices. Información de contacto: Ingeniero Ernesto Mendoza Instructor Área de biotecnología Teléfono: 3156779455 Agradezco la atención prestada.A Candelaria Asunto: Solicitud de materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con numero de ficha de caracterización 87051. Cordialmente. Miel B y bagacillo esto con el propósito de complementar los resultados del proyecto de formación: producción de proteína unicelular para el consumo animal.Ingeniera Mayagüez S. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de las siguientes materias primas: Vinaza concentrada. Ernesto Josué Mendoza REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD Palmira.

edu.com.co Sucromiles 4310744 Recta Cali – Palmira Km 18 Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051. Información de contacto: Ing. Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena.co Agradezco la atención prestada. REGIONAL VALLE SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD ~ 119 ~ . solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 1 kilo de micelio fúngico 5 galones de vinaza Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos.Ingeniera Elizabeth Castillo Ventas División Coproductos ecastillo@sucromiles.

Agosto 2 del 2011 Ingeniero Julián Parra Jefe Destilería Providencia japarra@ingprovidencia. Pedro Miranda Villamizar Instructor Área de Biotecnología Teléfono: 3106796599 pjmiranda@misena. solicito comedidamente su colaboración con el aporte de la siguiente materia prima: 5 galones de melaza 5 galones de Miel B 10 Kg de bagacillo 5 Kg de Lodos orgánicos del Decanter Esto con el propósito de complementar los resultados del Proyecto de Formación: Producción de Proteína Unicelular con el objetivo de suplemento proteico el consumo animal por procesos biotecnológicos. ~ 120 ~ . Asunto: Solicitud de Materia prima Cordial Saludo: Con el fin de desarrollar óptimamente los resultados de aprendizaje del programa de Formación titulada Procesos Biotecnológicos Aplicados a la Industria con Número de ficha de caracterización 87051.com Ingenio Providencia E.Palmira.edu.co Agradezco la atención prestada. Información de contacto: Ing.D.S.

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