Prof.

Aurico Sousa Fonseca Ctedra de Microbiologa e Inmunologa Departamento de Patologa Veterinaria FCV-UCV

BACTERIAS ANAEROBIAS NO ESPORULADAS

ANAEROBIOS

ESPORULADOS

NO ESPORULADOS

GRAMPOSITIVOS

GRAMPOSITIVOS

GRAMNEGATIVOS

BACILOS

CLOSTRIDIUM

COCOS

BACILOS

BACILOS

PEPTOSTREPTOCOCCUS INDOLICUS

ACTINOMYCES SPP EUBACTERIUM SPP PROPIONIBACTERIUM SPP

DICHELOBACTER (BACTEROIDES) FUSOBACTERIUM

BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS ANAERBICAS PATGENAS NO FORMADORAS DE ESPORAS

Muchas causan infecciones oportunistas mixtos, a menudo en asociacin con anaerobios facultativos.
Las interacciones sinrgicas son comunes.

Especies de Fusobacterium y especies de bacterias antes conocidas como Bacteroides conforman ms del 50% de los microorganismos anaerobios aislados.
Cambios taxonmicos a los miembros del gnero Bacteroides

CONSIDERACIONES, TAXONOMIA Y ANTECEDENTES HISTORICOS DEL GNERO Fusobacterium

Actualidad, Familia Fusobacteriaceae:

Gnero Fusobacterium con 13 especies.

Knorr, 1923. Propuso Gnero. Las especies de este gnero estn presentes como microflora normal oral, gastrointestinal y genitourinaria del hombre y de los animales. Se hallan en infecciones purulentas, necrticas y ulcerativas junto a otras bacterias anaerobias, microaerfilas o aerobias.
Ej: F. necrophorum, Dichelobacter nodosus, Arcanobacterium pyogenes

ESPECIES PATGENAS DEL GNERO Fusobacterium

ESPECIE HUESPED
Bovinos

F. necrophorum

Ovinos Cerdos Conejos

ENFERMEDAD Difteria ternero (focos necrtico en laringe, trquea y cavidad bucal) Abscesos hepticos, Metritis, Celulitis y Mastitis Abscesos podales Dermatitis interdigital contagiosa Enteritis necrtica Abscesos en hgado Necrobacilosis de labios y boca

F. nucleatum Algunas especies Infecciones en heridas y en el T resp.

animales y hombre superior y en cav. pleural.

F. russii

Gatos y hombre

Infecciones supurativas en tejido blando (gato) y abscesos perianales en el hombre.

HBITAT NATURAL
Encontradas a menudo en las membranas mucosas de las vas digestivas de los animales y el hombre. Se excretan en las heces Pueden sobrevivir por perodos cortos en el medio ambiente. Dichelobacter nodosus, sobrevive menos de 4 das en el barro
Patgeno primario de los tejidos epidrmicos de la regin de la pezua de los rumiantes.

PROCEDIMIENTOS DIAGNSTICOS
Muestras deben ser obtenidas por muestreo directo de descargas o lesiones, y por puncin. Las muestras deben ser procesadas inmediatamente despus de su recoleccin. Se pueden emplear kits y medios de transporte comerciales disponibles para los especmenes ante sospechas de infecciones anaerbicas. En el ncleo de una muestra de tejido de
ms de 2 cm3, generalmente se mantiene un microambiente anaerbico. Son adecuadas para el cultivo anaerbico las muestras lquidas en una jeringa, si el aire se expulsa de la misma y la aguja se mantiene conectada.

INCUBACIN Y CULTIVO
Se utilizan para la incubacin de cultivos Jarras anaerbicas El Agar sangre para el aislamiento de anaerobios debe ser complementado con:
5 a 10% de eritrocitos de rumiantes Extracto de levadura Vitamina K Hemina. Atmsfera libre de oxgeno, con hidrgeno y 10% de C02, a 37 C hasta 7 das.

Medios selectivos pueden ser preparados adicionando agentes antimicrobianos apropiados.

INCUBACIN Y CULTIVO
Los medios de cultivo deben ser previamente reducidos
Almacenamiento en ambiente anaerobio durante al menos 6 horas pre-inoculacin.

Los medios lquidos son tiles para los sub-cultivos, pero no son adecuados para el aislamiento primario
Caldo de carne cocida o el medio tioglicolato suplementado con vitamina K y hemina,.

INCUBACIN Y CULTIVO
Se requieren medios selectivos especiales para el aislamiento de Dichelobacler nodosus
Pezua podrida en rumiantes (Skerman, 1989).

En algunas formulaciones de medios se agrega polvo de pezua ovina para promover un mayor crecimiento.

DIFERENCIACIN DE LAS BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS ANAERBICAS PATGENAS NO FORMADORAS DE ESPORAS

Se diferencian sobre la base de:

Morfologa de las bacterias Aspecto colonial Pruebas de sensibilidad antibitica Produccin de cidos grasos.

MORFOLOGA MICROSCOPICA
Dichelobacter nodosus
Bacilos gruesos, rectos o ligeramente curvos, hasta a 6 m de largo y abultado en uno o ambos extremos.

Fusobacterium necrophorum
Forma filamentosas largas, de irregular tincin, sin ramificaciones

Azul de metileno

Gram

CARACTERSTICAS DE CULTIVO
Las colonias de bacterias Gram-negativos anaerobios no esporuladas suelen tener un olor ftido o podrido
Debido a la produccin de cidos grasos voltiles

ASPECTO COLONIAL
Dichelobacter nodosus
Aspecto colonial variable (Stewart et al., 1986).
Las colonias de cepas virulentas de las lesiones de pezua podrida ovina tienen una zona central oscura, una zona plida medio granular y una irregular propagacin de la periferia con una apariencia de vidrio.

Fusobacterium necrophorum
Las colonias son de color gris, redondas y brillantes. Algunas cepas son hemolticas.

PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE ESPECIES

Se utilizan de manera ms precisa para la identificacin de las especies:

Las pruebas de sensibilidad antibitica Pruebas bioqumicas Cromatografa de gas lquido
Ac. actico, Ac. propinico, Ac. isobutrico, ac. butrico, Ac. isovalerinico.

Pruebas bioqumicas Fusobacterium

ESQUEMA DE CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS ANAEROBIAS ESTRICTAS DE IMPORTANCIA EN MEDICINA VETERINARIA, BASADA EN LA PRODUCCION DE ACIDOS GRASOS VOLATILES O NO.
BACILOS GRAMNEGATIVOS Dichelobacter Fusobacterium Bacteroides (A), (P), (IB), (B), (IV), (L), (S) B, (P), (A), (V), (L), (S) (A), (S), (P), (IB), (B), (IV), (L)

A: cido actico, P:cido propinico; IB: cido isobutrico; B: cido butrico; IV: cido isovalrico; V: cido valrico, L: cido lctico; S: cido succnico; ( ): puede estar presente.

 Mtodos para la deteccin de cepas virulentas de D. nodusus, revisado por Liu y Yong (1997), incluyen:
Zimograma Electrofortico para determinar los patrones de isoenzimas proteoltica ELISA utilizando anticuerpos monoclonales. PCR: Tcnicas de Reaccin en Cadena de Polimerasa

FACTORES DE VIRULENCIA Fusobacterium Endotoxina - fraccin txica Lpido A (Accin necrotica). Exotoxina con accin leucocitoltica (Leucotoxina) y sinrgica con otras bacterias Enzimas: Lipasa, Desoxirribonucleasa Hemolisina

PATOGNESIS Y LA PATOGENICIDAD
Suelen ejercer efectos patgenos cuando las barreras anatmicas fallan lo que permite invasin de los tejidos subyacentes. Se replican slo ante potenciales de reduccin bajos o negativos. La mayora producen superxido dismutasa
Les permite sobrevivir en los tejidos oxigenados hasta que el potencial de reduccin (Eh) alcanza niveles que favorecen su crecimiento.

PATOGNESIS Y LA PATOGENICIDAD
El tejido traumatizado y necrtico seguido de la multiplicacin de bacterias anaerobias facultativas pueden reducir los niveles de Eh a un rango adecuado para la proliferacin de organismos anaerobios no formadora de esporas. La mayora de las infecciones que involucran a estos microorganismos son mixtas. Dos o ms especies de bacterias, que interactan de manera sinrgica pueden producir lesiones que los organismos individuales no podran.

PATOGNESIS Y LA PATOGENICIDAD
Relacin Sinrgica entre Arcanobacterium y Fusobacterium:
Arcanobacterium pyogenes produce un factor termo lbil que estimula la replicacin de F. necrophorum (Smith et al., 1989). F. necrophorum produce un leucotoxina que se correlaciona con la virulencia de la cepa y ayuda a la supervivencia de A. pyogenes (Emery et al., 1984).

Relacin sinrgica entre Fusobacterium y Dichelobacter en la patognesis de las lesiones podales en rumiantes.
En este caso, F. necrophorum facilita la invasin tisular por D. nodosus y es en s mismo estimulada por un factor de crecimiento elaborada por D. nodosus.

Interaccin sinrgica de Fusobacteriun necrophorum con Arcanobacterium pyogenes y con Dichelobacter nodosus en el desarrollo y progresin de lesiones podales en rumiantes
Fusobacterium necrophorum
Leucotoxina Facilita supervivencia De A. pyogenes Factor de Crecimiento Factor de Crecimiento Tejidos daados facilitan invasion por D. nodosus

Arcanobacterium pyogenes

Dichelobacter nodosus

BIOTIPOS DE F. necrophorum
Se reconocen tres biotipos de F. necrophorum
Biotipo A:
Designado F. necrophorum subespecies necrophorum Tiene mayor actividad hemoltica y es ms virulento que el biotipo B,

Biotipo B:
F. necrophorum subespecies funduliforme.

Biotipo C:
Reclasificadas como F. pseudonecrophorum Parece ser no patgenas.

Dichelobacter nodosus
Caractersticas de D. nodosus que se correlacionan con su capacidad de daar tejidos incluyen:
Produccin de proteasas termoestables y elastasa Presencia de actividad agaroltica sobre agar basado en medios que contienen pezua en polvo.

Enfermedades de los animales de granja, sin incluir afecciones de las patas, en el que juega un papel principal Fusobacterium necrophorum
Especies Bovinos Ovinos Enfermedad Difteria de los terneros Metritis post-parto Abscesos hepticos Puntos negros de los pezones Equinos Pododermatitis Necrobacilosis de las extremidades inferiores Suinos Nariz de Toro Factores predisponentes Alimentar a la mucosa rugosa produciendo dao Distocia Cambio repentino dieta principal a la acidosis y rumenitis Trauma a la regin adyacente a esfnter del pezn La falta de higiene y vivienda hmeda condiciones La falta de higiene Trauma en la mucosa nasal

INFECCIONES BACTERIANAS MIXTAS

Frecuentemente implicadas en las lesiones de las patas en rumiantes y cerdos. Tambin presentes en la neumona por aspiracin y en la reticuloperitonitis y pericarditis bovina traumtica. Enfermedades inflamatorias en los carnvoros domsticos son causadas por infecciones anaerbicas mixtas no especficas.

Condiciones de la pata en animales de granja asociados con infecciones mixtas que incluyen bacteria anaerbicas no formadoras de esporas
Especies
Ovinos

Enfermedad
Dermatitis interdigital Absceso del taln y supuracin lamelar Pata podrida

Factores predisponentes
Fusobacterium necrophorum Dichelobacter nodosus (cepa benigna) Mezcla de flora anaerbica incluyendo Arcanobacterium pyogenes, F. necroporum y otros. Dichelobacter nodosus, Fusobacterium necrophorum, Arcanobacterium pyogenes y espiroquetas no identificadas

Bovinos

Necrobacilosis interdigital Dermatitis interdigital

Fusobacterium necrophorum Porphyromonas levii

Suinos

Abscesos en las patas en Mezcla de anaerobios cerdos jovenes y pata de arbusto (supuracion lamelar) en animales viejos

DIFTERIA DEL TERNERO

Faringitis o laringitis necrtica en terneros menores de 3 meses de edad. F. necrophorum penetra a travs de abrasiones en la mucosa de la faringe o la laringe
Por ingestin de alimentos gruesos.

Los signos clnicos incluyen:

Fiebre, depresin, anorexia, salivacin excesiva, dificultad respiratoria y mal olor de la boca. Terneros no tratados desarrollan neumona necrotizante fatal.

Suele ser eficaz el tratamiento con sulfamidas o tetraciclinas potenciadas al principio del curso de la enfermedad.

ABSCESO HEPTICO BOVINA

Formacin de abscesos hepticos secundarios a ruminitis Mayor frecuencia en animales de engorde. Alimentacin con raciones ricas en carbohidratos y la consiguiente fermentacin intraruminal rpida puede conducir al desarrollo de las lceras. Fusobacterium necrophorum, junto con otros anaerobios y Arcanobacterium pyogenes invaden el tejidos, y las embolia ocasionales que llegan al hgado a travs de la vena porta inician la formacin de abscesos. El Ganado afectado rara vez muestran signos clnicos y las lesiones suelen ser detectados en la lnea de matanza. Tcnicas de manejo en corrales para reducir la incidencia de rumenitis. Clortetraciclina en alimentacin durante el acabado reduce prevalencia de absceso heptico.

LA RINITIS NECRTICA DE LOS CERDOS

Condicin espordica, que afecta principalmente a los cerdos jvenes Supuracin y necrosis del hocico como resultado de la infeccin por F. necrophorum, a menudo en asociacin con otros anaerobios. Penetracin a travs de abrasiones en la mucosa nasal. Los sntomas incluyen hinchazn de la cara, estornudos y nariz con descarga mal oliente. Infecciones crnicas puede resultar en deformacin permanente de los huesos de la cara y de las fosas nasales ("Nariz de toro). Sulfonamidas potenciadas administradas tempranamente en el curso de la infeccin puede ser beneficiosas.

PODODERMATITIS EQUINA O PUDRICIN DEL PIE

Necrosis de los cascos del caballo Falta de higiene, condiciones de humedad y la falta de limpieza regular de los cascos. La infeccin por F. necrophorum, (secundaria al dao del casco), resulta de una respuesta inflamatoria localizada. Secrecin con mal olor en el surco cerca de la ranilla. Tratamiento:
Regeneracin de la ranilla, proporcionando establos limpios y secos, atencin regular de los cascos y ejercicio.

PUNTO NEGRO DE LOS PEZONES DE LA ESPECIE BOVINA

Punto negro o viruela negra del orificio del pezn y el esfnter de las vacas lecheras rea localizada de necrosis con la formacin de costras negro debido a la invasin por Fusobacterium necrophorum. Contribuye a la estenosis del esfnter y predispone a la mastitis.