1.

CINTICA ENZIMTICA

1.1 Importancia biomdica Sin enzimas, no sera posible la vida que conocemos. Igual que la biocatlisis que regula la velocidad a la cual tienen lugar los procesos fisiolgicos, las enzimas llevan a cabo funciones definitivas relacionadas con salud y la enfermedad. En tanto que, en la salud todos los procesos fisiolgicos ocurren de una manera ordenada y se conserva la homeostasis, durante los estados patolgicos, esta ltima puede ser perturbada de manera profunda. Por ejemplo, el dao tisular grave que caracteriza a la cirrosis heptica pueden deteriorar de manera notable la propiedad de las clulas para producir enzimas que catalizan procesos metablicos claves como la sntesis de urea. La incapacidad celular para convertir el amoniaco txico a urea no txica es seguida por intoxicacin con amoniaco y por ultimo coma heptico. Un conjunto de enfermedades genticas raras, pero con frecuencia debilitantes y a menudo mortales, proporciona otros ejemplos dramticos de las drsticas consecuencias fisiolgicas que pueden seguir al deterioro de la actividad enzimtica, inclusive de una sola enzima. Despus del dao tisular grave (por ejemplo, infarto del miocardio o pulmonar, trituracin de un miembro) o siguiendo a multiplicacin celular descontrolada (por ejemplo, carcinoma prosttico), las enzimas propias de tejidos especficos pasan a la sangre. Por lo tanto, la determinacin de estas enzimas intracelulares en el suero sanguneo proporciona a los mdicos informacin valiosa para el diagnostico y el pronstico. 1.2 Principios Generales: definicin La cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones qumicas que son catalizadas por las enzimas. El estudio de la cintica de una enzima permite explicar los detalles de su mecanismo cataltico, su papel en el metabolismo, cmo es controlada su actividad en la clula y cmo puede ser inhibida su actividad por frmacos o venenos o potenciada por otro tipo de molculas. Las enzimas son protenas con la capacidad de manipular otras molculas llamadas sustratos, que son capaces de unirse al centro cataltico de la enzima que lo reconozca y transformarse en un producto a lo largo de una serie de pasos denominados mecanismo enzimtico.

Algunas enzimas pueden unir varios sustratos diferentes y/o liberar diversos productos. En otros casos se produce la unin simultnea de dos sustratos. Estos mecanismos suelen presentar una etapa limitante que determina la velocidad final de toda la reaccin. Esta etapa limitante puede consistir en una reaccin qumica o en un cambio conformacional de la enzima o del sustrato. La velocidad de la reaccin va aumentando a medida que aumenta la concentracin de sustrato hasta que la enzima se satura. La reaccin catalizada por una enzima utiliza la misma cantidad de sustrato y genera la misma cantidad de producto que una reaccin no catalizada. Las enzimas no alteran en absoluto el equilibrio de la reaccin entre sustrato y producto. Las dos propiedades cinticas ms importantes de una enzima son: el tiempo que tarda en saturarse con un sustrato en particular y la mxima velocidad de reaccin que pueda alcanzar. 1.3 Complejo enzima-sustrato El complejo Enzima- sustrato posee menor energa de activacin que las especies en estado de transicin que la correspondiente reaccin no catalizada. E+S 1.4 Cintica Michaelis-Menten La ecuacin de Michaelis-Menten describe como la velocidad de la reaccin depende del equilibrio entre la [S] y la constante K2. Si K2 es mucho menor que K1 se puede deducir la siguiente ecuacin: v= Vmax[S] Km+[S] Esta famosa ecuacin es la base de la mayora de las cinticas enzimticas de sustrato nico. La constante de Michaelis Km se define como la concentracin a la que la velocidad de la reaccin enzimtica es la mitad de la Vmax. La constante de Michaelis ser aproximadamente la constante de disociacin del complejo ES. La situacin ms comn, donde k2 > k1, es denominada cintica de BriggsHaldane. ES E+P

Durante el periodo inicial, la velocidad de la reaccin es ms o menos constante, indicando que la [ES] tambin se mantendr constante. 11.4 Cintica no Michaeliana Algunas reacciones enzimticas dan lugar a curvas sigmoideas, lo que suele indicar una unin cooperativa del sustrato al centro cataltico de la enzima. La unin de una molcula de sustrato influye en la unin de las molculas de sustrato posteriores. La unin de una molcula de sustrato a una de las zonas de interaccin altera significativamente la afinidad por el sustrato de las dems zonas de interaccin. Las enzimas con este comportamiento son alostricas. La cooperatividad positiva tiene lugar cuando la primera molcula de sustrato unida incrementa la afinidad del resto de zonas de interaccin y hace que la enzima sea mucho ms sensible a la concentracin del sustrato. La cooperatividad negativa tiene lugar cuando la primera molcula de sustrato unida reduce la afinidad de la enzima por nuevas molculas de sustrato y hace que la enzima sea insensible a pequeos cambios en la concentracin del sustrato. El coeficiente Hill (n) indica cuntas de las zonas de unin de sustrato de una enzima afectan a la afinidad de la unin de sustrato en el resto de las zonas de unin. n<1: indica cooperatividad negativa. n>1: indica cooperatividad positiva. 1.5 Reaccin con un sustrato Las enzimas que slo se unen a un sustrato como la triosafosfato isomerasa, pretenden medir la afinidad con la que se une el sustrato y la velocidad con la que lo transforma en producto. 1.6 Reacciones multisustrato Una enzima que une varios sustratos como la hidrofolato reductasa, puede mostrar el orden en el que se unen los sustratos y el orden en el que los productos son liberados. El anlisis ms sencillo es cuando la concentracin del sustrato A se mantiene constante y la del sustrato B vara.

1.7 Inhibicin enzimtica: Inhibicin competitiva, acompetitiva, irreversible. Inhibicin reversible Pueden ser inhibidores competitivos, los que se unen a la enzima ingresando en el sitio activo, impidiendo as su enlace con el sustrato. Los inhibidores no competitivos se unen a la enzima en un lugar diferente al sitio activo cambiando la forma de la protena y por lo tanto la forma del sitio activo. Sus efectos son reversibles. Inhibicin irreversible Hay inhibidores que se unen covalentemente al sitio activo de una enzima, esta unin es permanente e inactiva a la enzima destruyendo su capacidad de unirse al sustrato. 2. CARBOHIDRATOS IMPORTANTES DESDE EL PUNTO DE VISTA FISIOLFICO

2.1 Importancia Biomdica