Universidad Privada Antenor Orrego

Escuela Profesional de Medicina Veterinaria y Zootecnia Curso de Inmunologa Veterinaria

P.C.R.
(Reaccin en Cadena de la Polimerasa)

Edgard Marn Snchez

Bilogo, Ms.C.

REQUERIMIENTOS PARA LA P.C.R.

TEMPLATE o MOLDE NUCLEOTIDOS LIBRES DNApolimerasa (Taq) PRIMERS Mg+ Termociclador otros

REQUERIMIENTOS DE LA PCR
EN PROCARIOTAS DNA Helicasa. Protenas SSB (Single-Strand binding). Topoisomerasas I y II RNA primasa. DNA Polimerasas (DNA Pol) I, II y III Pirofosfatasa. DNA Ligasa DNA molde o template Cebadores Los 4 desoxirribonucletidos trifosfato: (dATP, dCTP, dGTP, dTTP) Mg++ Abrazadera EN EUCARIOTAS DNA Helicasa. Protenas SSB (Single- Strand binding). Topoisomerasas I y II RNA primasa. DNA Polimerasas (DNA Pol) ,, , , Pirofosfatasa. DNA Ligasa DNA molde o template Cebadores Los 4 desoxirribonucletidos trifosfato: (dATP, dCTP, dGTP, dTTP) Mg++ PCNA (Proliferating cell nuclear antigen) ORC (origin recognition complex) Nucleasa reparadora

ETAPAS DE LA P.C.R.
DENATURACION : 95 - 100 C.

ALINEAMIENTO : 40 55 C. EXTENSION : 72 C. Tiempo cada Ciclo : 30 seg 3 min Una reaccin de PCR : 30 40 ciclos. Copias Nuevas : 1 000 000 aprox.

Molcula parental de DNA

Nucletidos

Cadenas parentales Sirven como molde

Dos molculas de DNA hijas idnticas

Identical base sequences

Diagnstico parasitolgico molecular mediante P.C.R.

Identificacin de DNA de Leishmania sp.
Aislamiento de DNA genmico o Kinetoplastidial Reacin en cadena de la polimerasa

Gel de agarosa Transferencia alcalina Hibridacin.

GRACIAS POR SU ATENCION

EDGARD H. MARN SNCHEZ Bilogo, Ms.C. Universidad Privada Antenor Orrego (UPAO)

Trujillo, Per.
email: edmarin.upao@hotmail.com