UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN ALIMENTOS CARRERA DE INGENIERIA BIOQUIMICA Laboratorio de: Bioseparaciones Profesor: Ing.

Fernanda Ramos Ayudante: Egda. Vernica Martnez Semestre: Septimo Semestre Prctica: # 1 Tema: APLICACIN DE LAS TCNICAS BASICAS DE BIOSEPARACIN 1. INTRODUCCIN Un producto biolgico o biofrmaco es aquel que ha sido elaborado con materiales de partida de origen biolgico, tales como microorganismos, rganos y tejidos de origen vegetal o animal, clulas o fluidos de origen humano o animal y diseos celulares (sustratos celulares, sean o no recombinantes - incluidas las clulas primarias) as como otros de origen biotecnolgico que se obtienen a partir de una protena o cido nucleico por tecnologa de ADN recombinante. (McCabe W., 1988) Los productos biolgicos son extremadamente ms complejos que la mayora de los medicamentos convencionales (que tienen principios activos con molculas pequeas (1,2) (Vega y Valle 1998) En comparacin con estas pequeas molculas que constituyen el principio activo principal de los medicamentos sintetizados qumicamente, los productos biolgicos tienen un peso molecular mucho ms alto y una complejidad mayor; pueden ser mezclas de muchas especies moleculares que tienen perfiles de impureza nicos, los cuales invariablemente dependen del proceso de manufactura. Por otro lado, la respuesta de los productos biolgicos depende de los materiales con los que se haya comenzado su produccin; stos estn hechos a partir de sistemas vivos que inherentemente son variables. Cualquier cambio en el proceso de manufactura por menor que sea, conlleva a cambios en el producto que no necesariamente son detectables por la tecnologa actual, pero pueden tener impacto potencial en la calidad, seguridad, y/o eficacia del producto. . (Geankoplis, 2006) Para asegurar la consistencia en las caractersticas de los productos finales as como en los perfiles de seguridad y eficacia, tanto la fuente del material como los procesos de manufactura, la formulacin y las condiciones de almacenaje deben ser cuidadosamente seguidos y controlados de acuerdo a las especificaciones que se necesitan para su aprobacin regulatoria (Geankoplis, 2006) 2. OBJETIVOS General Aplicar tcnicas bsicas de bioseparaciones a nivel del laboratorio Especfico Establecer la importancia de las bioseparaciones en la industria Desarrollar habilidades prcticas en el manejo de equipo y variables de operacin en los procesos de separacin ms comunes.

3. MATERIALES Y REACTIVOS Materiales Vasos de Precipitacin Erlenmeyers de 50 ml Embudo de vidrio Reactivos Alcanfor, glicerina, azcar y arena NaOH 4. METODOLOGA a) Separacin de mezclas por destilacin

Varilla de agitacin Papel filtro Frasco lavador Equipo de destilacin Cloroformo Naftaleno, azufre, y cloruro de sodio

10g de clavo de olor

armar equipo destilador

acidificacin

recoger 300 ml del destilado

destilado + ml del H2SO4

T de ebullicin: 98C

3 extraciones con porrciones de 20 ml de cloroformo que se desechan

destilado basificado con 50 ml de NaOH al 50%

union de las porciones orgnicas

3 extraciones con porrciones de 20 ml de cloroformo que se desecha

secado con CaCl2 y se evapora el cloroformo

b) Separacin de mezclas por cromatografa en papel

violeta de genciana y verde malaquita

diluido con etanol al 5% sobre papel filtro cortado aprox: 11 x 3 cm

a 1 cm del borde inferior

aplicar la muestra con un capilar delgado y de vidrio

colocar tiras en un frasco

evitando al mximo que esta toque las paredes del recipeinte

c) Separacin de mezclas por solubilizacin selectiva

Mezcla naftaleno, azufre, cloruro de sodio

Mezcla de alcanfor, glicerina, azucar y arena

agua

eter de petroleo

eter de petrleo

etanol frio

agua

d) Separacin partcula-partcula en medio lquido

mezcla arena y sal con agua
filtrar

arena del papel se desecha sol. de NaCl se concentra

por evaporacin

luego se cristaliza

e) Separacin lquido-lquido

mezcle agua con aceite

mezcla homenogenea

separacion de liquidos inmicibles a distina densidad

mezcla enviada a un embudo de decantacin

5. RESULTADOS Separacin de mezclas por destilacin Grfico #1.- montaje del equipo de destilacin

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grafico #2.- destilado final

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grafico #3.- producto final de la destilacin

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Separacin de mezclas por cromatografa en papel Grfico #4.- medicin del recorrido de la solucin a travs del papel gracias al disolvente

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grfico #5.- cromatografa azul y rojo de metilo

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grfico #6.- cromatografa malakita y violeta

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones

Separacin de mezclas por solubilizacin selectiva Grfico #7.- muestra de alkanfor vista desde arriba

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grfico #8.- muestra de alcanfor

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grfico #9.- muestra de naftaleno visto desde arriba

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones

Grfico #10.- muestra de naftaleno

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Separacin partcula-partcula en medio lquido Grfico #11.- filtracin

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Separacin lquido-lquido Grfico #12.- formacin de la mezcla homogenea

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones Grfico #13.- separacin final

Fuente: Laboratorio de Bioseparaciones

6. CONCLUSIONES El laboratorio de bioseparaciones es un complemento importante para la mejor compresin de las asignaturas tericas de bioseparaciones mecnicas, bioseparaciones fluido-fluido y bioseparaciones slido-fluido; en esta prctica se realizaron ejemplificaciones de destilacin, cromatografa, filtracin y extracciones Una de las actividades ms importantes en la industria est enfocada a los procesos ya sean qumicos, fsicos o biolgicos, estos procesos poseen una serie de etapas u operaciones que son comunes entre si y a las cuales se les ha denominado procesos de separacin. El conocimiento prctico de los procesos de separacin abre el panorama de la utilidad y aplicacin de conocimientos adquiridos en cursos anteriores y la aplicacin en el campo de la industria ya sea ambiental, alimenticia, biotecnolgica o farmacutica. Se familiarizo con el conocimiento de los procesos de separacin, y al mismo tiempo se desarroll habilidades prcticas en el manejo de equipo y variables de operacin en los procesos de separacin ms comunes en la industria. Durante el transcurso de la prctica se analizaron los procesos de separacin mecnica como la filtracin. Por otro lado dentro de los procesos gobernados por el equilibrio se propone llevar a la prctica procesos de evaporacin, destilacin, extraccin lquido-lquido, mientras que para las operaciones concernientes a los proceso de acabado se realizaran sesiones prcticas de secado y cristalizacin 7. BIBLIOGRAFA 1. Foust A., Wenzel, L.A., Clump A.W., Maus L., Andersen L.b. (2004). Principios de Operaciones Unitarias, 9 reimpresin, CECSA, Mxico. 2. Geankoplis C.(2006). Procesos de Transporte y Operaciones Unitarias, CECSA, 4 impresin, Mxico. Limpieza del equipo 12 3. McCabe W.. (1988) Operaciones Bsicas de Ingeniera Qumica, McGraw Hill, 4 ed. 4. Rosabal Vega J.; Valle Matos M. (1998). Hidrodinmica y Separaciones Mecnicas, tomo II, IPN, Mxico.