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GUIA DE LABORATORIO N.

13 MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA UROANALISIS


PARCIAL DE ORINA El examen de orina fue introducido como parte del examen medico rutinario, por Richard Bright 1827 en humanos y hoy en da es una herramienta valiosa en el campo veterinario para el diagnostico de afecciones renales. La orina es el producto de la actividad del rin por medio del cual se excretan los materiales de desecho, este liquido es formado en los tubulos renales por ultrafiltracion sangunea. El anlisis de orina debe realizarse para el diagnostico y seguimiento de enfermedades renales, metablicas o sistmicas. Este anlisis consta de tres fases: Anlisis fsico Anlisis qumico Anlisis microscpico MUESTRA DE ORINA La muestra mas significativa para el anlisis de orina es la tomada del chorro medio de la miccin; previo bao de los genitales externos para evitar la contaminacin. La muestra se recoge directamente, por medio de sonda o funcionando la vejiga con aguja y jeringa (cistocentesis). Es necesario en cualquier sistema de obtencin de la muestra tomar las medidas necesarias para evitar las contaminaciones que causan errores en los resultados y proteger los animales de infecciones ascendentes y rupturas de tejidos por procedimientos mal empleados. La muestra deber ser analizada en el menor tiempo posible para evitar alteraciones que puedan variar los resultados; si no es posible analizar la muestra fresca o refrigerada, adicionar un preservativo para conservarla. Si se desea conservar el sedimento urinario y la estructura propia de las clulas y cilindros agregar una gota de formol al 40% para cada onza de orina. ANALISIS FISICO COLOR El color de la orina normal puede variar de un amarillo plido a un mbar oscuro segn la concentracin de los pigmentos urocrmicos y en menor medida a pequeas cantidades de urobilina y uroeritrina. Amarillo: es el color natural, se debe al urocromo y a su concentracin.

Rojo: lo da la presencia de hemoglobina, glbulos rojos, porfirinas, fenotiazinas, fenolsulfotaleina (rojo fenol). Caf, caf oscuro: sangre vieja, hemosiderina, mioglobina, metahemoglobina, y en el caballo pirocatequinas. Amarillo verdoso o verde caf: bilirrubina. Amarillo oscuro: deshidratacin, fiebre, diarrea, vmito, oliguria en caso de nefritis aguda difusa. Sin color: orinas muy diluidas por causa de: nefritis intersticial crnica, diabetes mellitas, diabetes inspida, piometra (perra), intoxicaciones acuosa. ASPECTO La orina siempre es transparente o clara, excepto en el caballo que es opaca-turbia debido al contenido de moco y carbonato de calcio. Orinas turbias en otros animales son anormales y se debe a clulas, cristales y bacterias. En el perro y el gato, por exceso de sales de sodio y potasio, puede haber descamacin celular y turbidez. OLOR La orina recin emitida tiene un olor caracterstico subgneros de cada especie. Quizs el ms fcil de detectar es el olor a cuerpos cetnicos, olor aromtico presente en el estado de quetosis. ANALISIS QUIMICO El anlisis qumico de rutina se hace con tiras reactivas. INSTRUCCIONES DE MANEJO De ser posible debe emplearse orina recin emitida, bien mezclada y no centrifugada. Sumergir la tira en la orina, de tal forma que todas las zonas de prueba queden humedecidas. Retirar la tira y evitar tocar las reas reactiva. Despus de 30 segundos a dos minutos comparar la tira con la escala cromtica de la etiqueta. Cambios de color que solo aparecen en el borde de las zonas de prueba o despus de transcurridos ms de dos minutos, carecen de importancia diagnstica.

RECOMENDACIONES Extraer solamente la tira reactiva que va hacer usada de inmediato y tapar de nuevo el frasco. No sacar el desecador que posee el frasco, sin que se hayan usado todas las tiras pues estas son muy sensibles a la accin prolongada de la humedad del aire. El envase debe conservarse a una temperatura inferior de 30 grados centgrados en sitios secos pero no refrigerados. ANALTICOS QUE SE DETECTAN EN EL EXMEN QUMICO DE LA ORINA Protena La orina normalmente no debe contener protena ya que la pequea cantidad que pasa a los glomrulos es reabsorbida en lo tbulos. La presencia en la orina es siempre patolgica excepto durante el parto, en los primeros das de vida y durante el estro. Fundamento: el papel reactivo para la determinacin de protena contiene una mezcla de tapn e indicador, que a un pH constante en presencia de protenas muestra un viraje de color. El indicador varia segn la casa comercial que distribuye las tiras reactivas. Glucosa En animales normales, el nivel sanguneo de la glucosa antes de presentar glicosuria es de 160 a 180mg / 100 ml de sangre. En el perro hay ocasionalmente glicosuria por un bajo umbral renal, lo cual es difcil de determinar. Fundamento: se basa en la reaccin enzimatica especifica de: Glucosa Glucosa oxidasa-glucosa + O2 cido gluconico + H2O2 Oxidasa Peroxidasa H2O2 + cromgeno Peroxidasa oxidado + H2O

El cromgeno varia con la casa comercial. Cuerpos ce tnicos Los cuerpos cetnicos son: acetona, cido acetoacetico y cido betahidroxibutirico. Se forman normalmente en el hgado como resultado del desdoblamiento de lpidos y acumulacin de acetilcoenzima A, que no se utiliza para la lipogenesis o en el cliclo del cido ctrico. Si se produce en exceso por un aumento en el metabolismo graso, se acumulan en la sangre y pasan a la orina. Fundamento: la mayora de las pruebas detectan cido diacetico. Los reactivos varan segn las casas comerciales. El cido acetoacetico y la acetona reaccionan con el reactivo (nitroprusiato de sodio o nitroferricianuro sodico o glicina) el medio alcalino para producir un complejo coloreado. Sangre La presencia de glbulos rojos enteros, (hematuria) en la orina, esta asociada con afecciones del sistema urogenital. La hemoglobinuria es el resultado de la liberacin de la hemoglobina en el plasma sanguneo por hemlisis de los eritrocitos circulantes; cuando la hemoglobina libre llega a un determinado nivel en el plasma, se excreta en la orina. Fundamento: la prueba se basa en un cambio de pka de ciertos polielectrolitos en relacin con la concentracin inica. Este procedimiento mide en realidad la concentracin inica de la orina, la cual esta relacionada con la densidad. Ph De la concentracin de iones de hidrogeno en la orina depende normalmente del tipo de dieta. La orina cida, es propia de los carnvoros y de aquellos animales que asumen vegetales de alto valor proteico; los herbvoros generalmente emiten la orina alcalina. Las variaciones anormales en el ph comnmente indican condiciones sistmicas. Fundamento: el papel reactivo del ph contiene una combinacin de los indicadores rojos de metileno y azul de bromotimol, dando un espectro de color que varia de metilo y azul pasando por el verde de acuerdo al ph. Como se indic anteriormente el pH de la orina depende de la alimentacin pero en trminos generales se encuentra como sigue: Bovinos alcalino pH 7.4 - 7.8 Ovinos y Caprinos alcalino Equinos alcalino pH 8

Porcinos cido o alcalino Canino cido pH 6 - 7 Felinos cido pH 6 - 7 Bilirrubina Fundamento: se basa en la reaccin de acoplamiento de una sal de diazonio con la bilirrubina en un medio cido. Las diferentes tiras comerciales difieren en la sal de diazonio y el indicador de color. Urobilinogeno Fundamento: las diferentes marcas de las tiras reactivas incluyen reacciones diferentes para la determinacin de urobilinogeno. En general, una sal de diazonio (p-metoxibenceno diazoniofluoranto, 4-metoxibenceno doazonio tetrafluorborato, p-dimetilamoniobenzaldehido) origina con el urobilinogeno un medio cido un cambio cromtico que difiere segn el reactivo usado. ANALISIS MICROSCOPICO DEL SEDIMENTO URINARIO La orina del organismo normal, contiene un pequeo numero del clulas y otros elementos procedentes del tracto genitourinario; por ejemplo son fibras mucosas, espermatozoides y clulas epiteliales de le vejiga, uretra, pelvis renal y urteres a dems aparecen un escaso numero de leucocitos y rara vez eritrocitos en la orina, como resultado del proceso de diapdesis a travs de cualquier parte del tracto urinario. La orina del perro, gato y otros carnvoros usualmente contienen cristales de fosfato; la orina del caballo se caracteriza por la presencia de cristales de carbonado de calcio y fibras mucosas. Tcnica Mezclar bien la orina y colocar aproximadamente 10 ml en tubo de centrifuga. Centrifugar a 2000 r.p.m. durante diez minutos. Eliminar el lquido sobrenadante Resuspender el sedimento del sobrenadante (Dar golpes en la parte inferior del tubo para mezclar el sedimento) Colocar una gota del sedimento en un portaobjeto limpio y cubrir con un cubreobjeto. Dejar en reposo por un minuto y observar en el microscopio con objetivos de 10x y 40x.