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Alejandro Lpez Alvarez LTFyR C Tipos de Muestreo. Agentes Biolgicos.

Mtodos de muestreo Muchos de los instrumentos utilizados en la captacin de agentes biolgicos son modificaciones de los utilizados en higiene industrial para la medicin de compuestos qumicos. La caracterstica que los diferencia es el propio agente contaminante y el soporte de captacin. Cuando se trata de agentes biolgicos vivos y cultivables, por ejemplo, bacterias y hongos, el soporte de retencin debe ser tal que asegure su viabilidad, es decir, debe ser un soporte que no destruya el organismo y que lo mantenga con vida hasta el anlisis. El soporte de retencin ms adecuado para la captacin de agentes biolgicos vivos son los medios de cultivo gelatinosos con sustancias nutrientes. La captacin de sustancias, fragmentos o esporas se puede realizar utilizando otro tipo de soportes, por ejemplo, los filtros. Los mtodos de toma de muestra de agentes biolgicos se pueden clasificaren tres grupos principales dependiendo del medio que se ha de muestrear. Muestreo del aire Sedimentacin: el sistema ms simple consiste en utilizar placas de Petri abiertas con agar nutritivo en las que las partculas con los agentes biolgicos asociados se depositarn por efecto de la gravedad. Este mtodo es til cuando el tamao de partcula es grande y el aire est en calma; de este modo las partculas pueden sedimentar, aunque como inconveniente, las partculas ms pequeas no son captadas, ya que permanecen suspendidas en el aire. La informacin que proporcionan es nicamente cualitativa, ya que no es posible estimar el volumen de aire que ha pasado sobre la placa. Recolectores inerciales: estos equipos se basan en su capacidad de retirar del aire las partculas y de atraparlas sobre el soporte de retencin. Los principios de captacin son: por impactacin en medio slido (muestreador Andersen, SAS), impactacin en medio lquido (frascos borboteadores Impingers) o por centrifugacin (RCS). Algunos de estos equipos permiten la separacin por tamao de partculas. Todos ellos estn calibrados a un caudal determinado de aspiracin de aire y disponen de un programador de tiempo, lo que permite decidir el volumen de aire que se ha de muestrear. Este es un factor clave de la medicin ya que, seleccionar el volumen de muestreo adecuado en cada situacin, va a permitir la obtencin de muestras tiles. Volmenes de aire bajos en ambientes muy limpios pueden conducir a resultados tipo No detectado aunque en el ambiente s haya presencia de agentes biolgicos. De igual forma volmenes de aire excesivos en ambientes sucios

suelen dar como resultado Incontables. Ambos tipos de resultados deberan ser desechados y el muestreo repetido para poder obtener informacin precisa. El resultado se expresa en unidades formadoras de colonias por metro cbico de aire muestreado (ufc/m3) Muestreo de superficies Esta tcnica tiene un inters especial puesto que permite determinar la posible contaminacin por agentes biolgicos de las materias primas, de los productos o de las propias personas. Dicha contaminacin puede tener su origen en los instrumentos de trabajo, las ropas, las manos, el mobiliario o los elementos de construccin que por sus caractersticas o por una deficiente desinfeccin pueden convertirse en reservorios de agentes biolgicos. Frotis: este mtodo consiste en la recogida del material depositado en las superficies con torundas estriles de algodn. Tras el muestreo se puede proceder a la siembra del material recogido aplicando directamente la torunda sobre el medio de cultivo o se puede lavar la torunda con un diluyente estril y sembrar despus el lquido obtenido. En general, este mtodo no permite realizar estimaciones cuantitativas precisas de la contaminacin y, bsicamente, se utiliza para comprobar la presencia de un microorganismo concreto. Muestreo con placas de cultivo por contacto: es el mtodo ms utilizado y consiste en la aplicacin de placas RODAC, con medio de cultivo ligeramente en exceso, sobre la superficie que se desea muestrear. El resultado del recuento de las colonias que han crecido se expresa en ufc/cm2 (unidades formadoras de colonias por unidad de superficie). Muestreo de lquidos En este caso, el objetivo es poner de manifiesto la presencia de agentes biolgicos en diversos tipos de fluidos, por ejemplo, el agua de un humidificador, de las torres de refrigeracin de un sistema de climatizacin del aire, entre otros. En la mayor parte de los casos, el mtodo ms sencillo de recogida de fluidos consiste en tomar una muestra del lquido en un recipiente estril. Cuando el volumen de lquido que se ha de muestrear es grande y la contaminacin escasa, es de utilidad realizar un filtrado del lquido. En otros casos, como por ejemplo las conducciones de agua u otros lquidos, se pueden instalar dispositivos que permitan la recogida peridica de muestras. Los resultados del recuento de colonias se expresan en ufc/ ml (unidades formadoras de colonias por unidad de volumen de lquido).

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