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anticuerpos antiplaquetario

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DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA CLINICA Y BANCO DE SANGRE Servicio de Hematología MANUAL DE TECNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALITICOS TEST CODIGO MUESTRA : : : ANTICUERPOS

ANTIPLAQUETARIOS 202.20.035 SUERO

MATERIALES : - Baño María - Tubos de Vidrio 12 x 75 - Gradillas - Micro pipeta de 200 uL y de 100 uL - Cloruro de Calcio 0,025 M - Calculadora científica - Cronómetro PROCEDIMIENTO : 1: Separar el suero del paciente y llevarlo a congelación hasta el momento de realizar el análisis. Junto con la muestra del paciente, se deben seleccionar un pool de sueros normales los que también serán guardados en las mismas condiciones que la(s) muestra(s) problema 2: El día del procedimiento analítico obtener una muestra de plasma rico en plaquetas y una muestra de plasma pobre en plaquetas, identificándolas en forma correspondiente Plasma rico en Plaquetas (PRP) : Plasma pobre en Plaquetas(PPP) : 3: Colocar a Baño María (37 grados C ) el Cloruro de Calcio

4: Colocar en una gradilla una cantidad de tubos equivalente al total de muestras del pool de controles normales, así como las muestras problema 5: Adicionar a cada tubo 100 uL de PRP ( tubos PRP)

5: Colocar en otra gradilla (gradilla B) una cantidad de tubos equivalente al total de muestras del pool de controles normales (mínimo 05, recomendable 8 a 10, ideal 20), así como las muestras problema 6: Adicionar a cada tubo 100 uL de PPP ( tubos PPP)

7: Adicionar a cada tubo que contiene PRP ,100 uL de cada suero control o problema

se considera positivo Nota 01: Para mantener una secuencia ordenada del procesamiento de todos los tubos. Seguidamente coger 100 uL de cada uno de estos tubos y adicionarlo a cada tubo que contiene PPP ( tubos PPP). 9: Cálculos: Se determina el rango de normalidad a partir de los resultados del pool de controles. ( Ver nota 01) . luego adicionar 200 uL de Cloruro de Calcio. seguidamente llevar estos tubos a Baño Maria ( 37 ºC) cronometrando 30 segundos. Si el resultado del problema esta por debajo de el rango normal. esperar 45 segundos para comenzar a detectar visualmente la formación de coágulo. descrito en el paso 7 . es necesario esperar un tiempo fijo( mínimo de 5 minutos) entre el inicio del procedimiento de cada tubo. Registrar el tiempo requerido para la formación del coagulo.2 desviaciones Standard. Considerando Rango Normal a la media +/. en forma correspondiente para cada tubo problema y control.8: Incubar cada uno de estos tubos por 10 minutos a 37ºC.

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