Jornadas 2011

JORNADAS
xviii Edicin
Acadmicas
2011
Congreso Cient co
Presentaciones Orales
Exposicin de Carteles
Conferencia Plenaria
Septiembre 19 al 23
JORNADAS
xviii Edicin
Acadmicas
Instituto de Neurobiologa
Dr. Ral Paredes Guerrero Direccin Lic. Andrea Trujillo Mendoza Asistente Ejecutivo Dra. Ma. Magdalena Giordano Noyola Secretara Acadmica Lic. Bertha Esquivel Quiroz Secretaria Auxiliar Ma. Teresa Palafox Domnguez Asistente Ejecutivo Dra. Anaid Antaramian Salas Secretara Tcnica Lic. Felipe P. Pedroza Montes de Oca Secretara Administrativa Dra. Teresa Morales Guzmn Coordinadora de la Maestra en Ciencias (Neurobiologa) Dra. Aurea Orozco Rivas Responsable de Doctorado en Ciencias Biomdicas Dr. Rogelio Arellano Ostoa Jefe de Departamento Neurobiologa Celular y Molecular Dr. Hugo Merchant Nancy Jefe de Departamento Neurobiologa Conductual y Cognitiva Dr. Jorge Larriva Sahd Jefe de Departamento Neurobiologa del Desarrollo y Neuro siologa
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Jornadas Acadmicas 2011. 18 Aniversario. Publicacin anual del Instituto de Neurobiologa. UNAM Campus Juriquilla. Imagen de la portada cortesa del Dr. Luis Concha Loyola, , Investigador Asociado en el Laboratorio de Imagen Funcional Cerebral, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM. Campus Juriquilla. Descripcin de la imagen: Tres porciones del cuerpo calloso humano, interconectando los hemisferios cerebrales a travs de la lnea media (barra roja), son visualizadas mediante tractografa a partir de imgenes del tensor de difusin por resonancia magntica. El grado de compactacin a nivel microscpico de los axones incluidos en el fascculo se representa a travs de la escala de colores. El contenido de los artculos es responsabilidad de sus autores. Diseo y edicin: Guadalupe Caldern. 2011
JORNADAS
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Acadmicas
Programa General
LUNES, SEPTIEMBRE 19
9:30 10:15 AM EVENTO INAUGURAL
Dr. Ral Paredes Guerrero
Septiembre 19 al 23, 2011
LUNES, SEPTIEMBRE 19
SESIN: EFECTOS BIOLGICOS Y REGULACIN DE HORMONAS Y PPTIDOS Coordinador: Mario Nava Villalba
10:30 11:50 AM
10:30 AM CARACTERIZACIN DE LA EXPRESIN, ESTRUCTURA Y FUNCIN DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO EN TEJIDOS EXTRAHIPOFISIARIOS Luna, M., Armburo, C. 10:50 AM EFECTOS TRFICOS EJERCIDOS POR FORMAS VARIANTES DE PROLACTINA (PRL) SECRETADAS POR ADENOHIPFISIS DE RATAS LACTANTES SOBRE SOMATOTROPOS Mena, F. 11:10 AM PAPEL DE LOS RECEPTORES MEMBRANALES DE ESTRGENOS EN EL EJE HIPOTLAMO-HIPFISISGNADAS Y EN EL EPITELIO MAMARIO Tamay de Dios, L., Martnez de la E., G. 11:30 AM BASES MOLECULARES Y CELULARES DEL EFECTO NEUROPROTECTOR DE LA PROLACTINA EN LA RETINA Thebault, S., Clapp, C.
Director, Instituto de Neurobiologa, UNAM Teatro Auditorio Centro Acadmico Cultural
eXpo
cartel
LUNES 19 a JUEVES 22, SEPTIEMBRE

5:00 7:30 PM
PRESENTACIN DE CARTELES
Patio Central del Instituto de Neurobiologa
JUEVES, SEPTIEMBRE 22
1:30 PM FOTOGRAFA CONMEMORATIVA
ESCALERAS FRENTE AL EDIFICIO "A" Explanada del Instituto de Neurobiologa
SESIN: INTERACCIONES MOLECULARES Y VAS DE SEALIZACIN Coordinador: Francisco Carmona Aldana
12:30 2:10 PM
VIERNES, SEPTIEMBRE 23
12:00 PM - 2:00 PM
12:00 PM
12:30 PM EL YODO COMO REGULADOR MOLECULAR. PARTICIPACION EN LA DIFERENCIACION, APOPTOSIS Y QUIMIOSENSIBILIDAD TUMORAL
CONFERENCIA PLENARIA
Dr. Andrew Schwartz
MotorLab, Department of Neurobiology University of Pittsburgh, USA Teatro Auditorio Centro Acadmico Cultural 1:50 PM
Aceves, C., Anguiano, B.
12:50 PM DETERMINACIN DE SECUENCIAS DE PRECURSORES DE TOXINAS DEL CARACOL MARINO CONUS SPURIUS DEL GOLFO DE MXICO Aguilar Ramrez, MB., Heimer, E. 1:10 PM ESTRUCTURA Y FUNCIN DEL RECEPTOR TIPO rho DEL CIDO GAMA AMINOBUTRICO (GABArho) Espino, E., Martnez, A. 1:30 PM BIOACTIVIDAD DE LA 3,5-T2. MECANISMOS DE ACCIN Y REGULACIN DE SU VA DE SEALIZACIN Orozco, A., Valverde, C. 1:50 PM SEALIZACIN PURINRGICA EN LAS CLULAS SOMTICAS DEL FOLCULO OVRICO Vzquez-Cuevas, FG., Arellano, R.
EVENTO DE CLAUSURA
ENTREGA DE PREMIOS A LOS CARTELES RECONOCIMIENTOS POR ANTIGEDAD 2:30 PM
Explanada del Instituto de Neurobiologa
COMIDA DE CLAUSURA
JORNADAS
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Acadmicas
MARTES, SEPTIEMBRE 20
10:30 11:50 AM / 12:30 - 1:50 PM
MIRCOLES, SEPTIEMBRE 21
PRESENTACIONES ORALES
SESIN: ALTERACIONES DE LA ESTRUCTURA Y LA FUNCIN DEL SISTEMA NERVIOSO Coordinador: Claudia Marcela Garca Pea
10:30 11:30 AM / 12:30 - 1:30 PM
SESIN: REGULACIN DE LA CONDUCTA Y PLASTICIDAD NEURONAL Coordinador: Jimena Sandoval Arroyo
10:30 11:50 AM
10:30 AM ACCESO RESTRINGIDO AL ALIMENTO COMO UNA HERRAMIENTA EXPERIMENTAL EN EL ESTUDIO DE LA RITMICIDAD CIRCADIANA Bez-Ruiz, A., Daz, M. 10:50 AM CAMBIOS EN LA PREFERENCIA GUSTATIVA, AS COMO EN LAS ESTRUCTURAS CEREBRALES Y SISTEMAS DE NEUROTRANSMISIN NECESARIOS DURANTE LA FORMACIN Y EVOCACIN DE LA MEMORIA APETITIVA, INDUCIDOS POR EL CONSUMO CRNICO DE SACAROSA Fregoso D., Miranda, MI. 11:10 AM LOS SENTIDOS Y LOS FOSFOLPIDOS, O CMO LA FUNCIN SENSORIAL DEL SISTEMA NERVIOSO DEPENDE DEL METABOLISMO DE FOSFOLPIDOS Gimate-Baos, IJ., Riesgo, J. 11:30 AM CUANTIFICACIN DE LA CAPACIDAD HUMANA DE PREDECIR EVENTOS SENSORIALES PERIDICOS De Lafuente, V.
10:30 11:30 AM
10:30 AM ALTERACIONES ANATOMO FUNCIONALES EN EL MODELO TRIPLE TRANSGNICO PARA LA ENFERMEDAD DEL ALZHEIMER (3XTg-AD) Aguilar-Vzquez, AR., Daz, S. 10:50 AM DETECCIN DE METSTASIS VERTEBRALES MEDIANTE SECUENCIA DE DIFUSIN OBTENIDA POR RESONANCIA MAGNTICA Barragn-Campos, HM. 11:10 AM EVALUACIN INTEGRAL DE LA EXPOSICIN CRNICA POR INHALACIN DE THINNER EN MODELOS DE RATA WISTAR Crabez, A.
SESIN: ALTERACIONES DE LA ESTRUCTURA Y LA FUNCIN DEL SISTEMA NERVIOSO Coordinador: Claudia Marcela Garca Pea
12:30 1:30 PM
12:30 PM UNIDAD DE INVESTIGACIN EN NEURODESARROLLO: AVANCES Y PERSPECTIVAS
SESIN: REGULACIN DE LA CONDUCTA Y PLASTICIDAD NEURONAL Coordinador: Jimena Sandoval Arroyo
Harmony, T.
12:30 1:50 PM
12:30 AM LA LACTANCIA PROTEGE AL CEREBRO DE LA MADRE CONTRA DAO POR EXCITOTOXICIDAD Morales, T. 12:50 PM MACHOS NO COPULADORES, UN MODELO NATURAL PARA ENTENDER LAS BASES NEURONALES DE LA CONDUCTA SEXUAL MASCULINA
12:50 PM DESARROLLO DE LA QUIMIORECEPCIN EN LA RATA DESNUTRIDA RECIN NACIDA Aguilar Ramrez, MB., Heimer, E. 1:10 PM AFFERENCES TO PRINCIPAL CELL OF THE PIRIFORM CORTEX Vargas, V., Larriva, J.
Portillo, W., Paredes, R.
1:10 PM LA TEORA DE LA CONSOLIDACON DE LA MEMORIA: EXCEPCIONES A LAS REGLAS Prado, R. 1:30 PM PARTICIPACIN DEL ESTRIADO EN LA MEMORIA Y SU POSIBLE REGULACINA TRAVS DE GLUCOCORTICOIDES Quirarte, GL.
2011
Congreso Cient co
Exposicin de Cartele
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JUEVES, SEPTIEMBRE 22
10:30 11:30 AM / 12:30 - 1:30 PM
SESIN: CIRCUITOS NEURONALES EN LA FISIOLOGA Y LA PATOLOGA Coordinador: Juan Carlos Mndez Nuez
10:30 11:30 AM
10:30 AM ESTMULOS MUSICALES PROVOCAN ACTIVACIONES PREFERENTES EN EL LBULO TEMPORAL: IDENTIFICACIN MEDIANTE RESONANCIA MAGNTICA FUNCIONAL Concha, L., Barrios, F. 10:50 AM MECANISMOS ENDGENOS DEL DOLOR Y DE LA ANALGESIA Conds-Lara, M. 11:10 AM LIBERACIN DE GABA in vivo Y CINTICA DE LA PTIDA DEL TRANSGN EN LA LNEA CELULAR M213-20 CLONA-4 TRANSFECTADA CON EL GEN D67 HUMANA Limn-Pacheco, JH., Giordano, M.
SESIN: CIRCUITOS NEURONALES EN LA FISIOLOGA Y LA PATOLOGA Coordinador: Juan Carlos Mndez Nuez
12:30 1:30 PM
12:30 PM PROCESAMIENTO DEL PASO DEL TIEMPO EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DEL PRIMATE
Merchant, H.
12:50 PM FISIOPATOLOGA DE CIRCUITOS NEURONALES Pea-Ortega, F. 1:10 PM REDES NEURONALES PLSTICAS Ramrez-Amaya, V.
JORNADAS
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Acadmicas
SESIN: EFECTOS BIOLGICOS Y REGULACIN DE HORMONAS Y PPTIDOS Coordinador: Mario Nava Villalba Septiembre 19, 2011 SESIN: INTERACCIONES MOLECULARES Y VAS DE SEALIZACIN Coordinador: Francisco Carmona Aldana Septiembre 19, 2011 SESIN: REGULACIN DE LA CONDUCTA Y PLASTICIDAD NEURONAL Coordinador: Jimena Sandoval Arroyo Septiembre 20, 2011 SESIN: ALTERACIONES DE LA ESTRUCTURA Y LA FUNCIN DEL SISTEMA NERVIOSO Coordinador: Claudia Marcela Garca Pea Septiembre 21, 2011 SESIN: CIRCUITOS NEURONALES EN LA FISIOLOGA Y LA PATOLOGA Coordinador: Juan Carlos Mndez Nuez Septiembre 22, 2011
Los resmenes incluidos en esta Memoria son responsabilidad de sus autores.
Jornadas Acadmicas, 2011
Lunes 19 de Septiembre
SESIN: EFECTOS BIOLGICOS Y REGULACIN DE HORMONAS Y PPTIDOS Septiembre 19, 2011
1. CARACTERIZACIN DE LA EXPRESIN, ESTRUCTURA Y FUNCIN DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO EN TEJIDOS EXTRAHIPOFISIARIOS Luna M, Carranza M, vila J, Rodrguez AJ, Ahumada M, Alba C, Crdoba C, Martnez C, Luna JL, y Armburo C. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, Campus Juriquilla, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Quertaro, Qro., 76230. Se sabe que la hipfisis es la fuente principal de hormona de crecimiento (GH), constituida por una familia de variantes que manifiestan una amplia heterogeneidad molecular y funcional en los vertebrados, capaces de exhibir una gama de bioactividades mediante mecanismos de accin tpicamente endcrinos. Recientemente, sin embargo, hemos acumulado evidencia de que este mensajero peptdico puede ser expresado en diversos tejidos extrahipofisiarios, en donde acta como un factor local en procesos de diferenciacin, proliferacin y supervivencia celular, a travs de mecanismos parcrinos, autcrinos y/o intrcrinos, mediados por su receptor especfico (GHR), que se encuentra distribuido en prcticamente todos los tejidos de la economa. Hemos generado informacin original que demuestra la expresin inequvoca del ARNm de GH y de la(s) protena(s) que este codifica, as como de algunas funciones en las que estn involucradas, en diversas localizaciones extrahipofisiarias en el pollo, tales como: el sistema inmune (bursa de Fabricio, timo, bazo); el sistema reproductor (masculino y femenino); y el sistema nervioso central (cerebelo, hipotlamo, pallium, hipocampo). Estos hallazgos han ampliado los conceptos existentes sobre la fisiologa general de la GH y su participacin en la regulacin de una plyade de funciones en los vertebrados. La GH extrahipofisiaria muestra una importante heterogeneidad molecular, aunque con un patrn diferente al observado en la hipfisis, siendo las isoformas submonomricas las ms abundantes. En los tejidos estudiados se encontr la expresin de un solo ARNm, que codifica para una protena muy similar a la hipofisiaria. La expresin de GH local se encuentra desde etapas embrionarias tempranas, an antes de que estn funcionales los somatotropos, hasta la etapa adulta. A lo largo del desarrollo se dan cambios importantes en su concentracin, que no necesariamente coinciden con los que ocurren en la hipfisis o en el plasma. Se presentarn resultados sobre: a) las estirpes celulares que expresan GH en cada tejido; b) la distribucin intracelular de GH y GHR; c) los efectos de la GH local sobre proliferacin, diferenciacin y supervivencia celular; como modulador de la apoptosis; sobre la expresin de enzimas reguladoras especficas; y como factor neuroprotector ante agresiones como la isquemia. Apoyado por DGAPA-PAPIIT y CONACYT.
2. EFECTOS TRFICOS EJERCIDOS POR FORMAS VARIANTES DE PROLACTINA (PRL) SECRETADAS POR ADENOHIPFISIS DE RATAS LACTANTES SOBRE SOMATOTROPOS Y LACTOTROPOS DE RATAS LACTANTES Y DE RATAS MACHO Mena F, Navarro N y Castilla A. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Campus UNAM-UAQ, Juriquilla; Quertaro En estudios previos, hemos determinado que la hormona prolactina (PRL) est constituida por una serie de formas variantes de diferente peso molecular, vgr., de 7 a 93 kDa, las cuales son secretadas por la adenohipfisis (AH) de ratas lactantes y ejercen efectos in vitro, tanto autcrinos como parcrinos de regulacin sobre la secrecin de formas variantes de la propia hormona por los lactotropos de ratas lactantes y ratas macho; y esta regulacin hipotalmica de la secrecin de la PRL es ejercida por dichas variantes de la hormona. Los objetivos del presente estudio y los mtodos empleados, fueron orientados para determinar si las formas variantes de PRL secretadas in vitro por lactotropos de las regiones central y lateral de AH de ratas lactantes, ejerceran un efecto trfico sobre lactotropos de AH de ratas lactantes y de ratas macho, el cual se manifestara por cambios funcionales, i.e., determinando tanto metabolismo como viabilidad celular, mediante el empleo de la sal de tetrazolium (MTT), as como por la proporcin de lactotropos y somatotropos expuestas al medio condicionado (MC) de AH de lactantes succionadas y no succionadas, determinada por inmunofluorescencia. Los resultados obtenidos mostraron inicialmente que el porcentaje de lactotropos, pero no de somatotropos de ambas regiones central y lateral de la AH de ratas macho, aument de manera significativa el contenido intracelular de PRL, pero no de GH, despus de la incubacin con MC de AH de ratas lactantes. Asimismo, con respecto al efecto del MC de lactantes sobre el metabolismo y viabilidad celular, se encontr que ambos indicadores aumentaron tanto en AHs de ratas lactantes como en ratas macho, lo cual concuerda con los resultados previos de los efectos autcrinos y parcrinos sobre la secrecin de la PRL por AHs de ratas lactantes y de ratas macho. En conclusin, los resultados obtenidos sugieren que los efectos autcrinos y parcrinos ejercidos por las formas variantes de la PRL, secretadas por la AH de ratas lactantes se correlacionan con efectos trficos, vgr., aumento en el metabolismo y viabilidad celular, y en el aumento del nmero de lactotropos. Agradecemos la ayuda tcnica del MVZ. Martn Garca Servn y Biol. Mara Eugenia Ramos Aguilar. Este trabajo fue apoyado por donativos de CONACYT (No. 128037) y de PAPIIT (No. IN206711-3).
3. PAPEL DE LOS RECEPTORES MEMBRANALES DE ESTRGENOS EN EL EJE HIPOTLAMO-HIPFISIS-GNADAS Y EN EL EPITELIO MAMARIO Tamay de Dios L, Hernndez C, Caballero-Hernndez D, Reyes P, Jeziorski MC, Nava G, Clapp C, Martnez de la Escalera G. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, 76230 Quertaro, Mxico Los estrgenos desempean una funcin crucial en la fisiologa reproductiva, incluyendo su participacin en el crecimiento y desarrollo de la glndula mamaria. Tambin promueven la proliferacin y la progresin del cncer de mama. En ambos casos los estrgenos ejercen su accin por medio de la activacin de receptores nucleares (principalmente ER), los cuales
son antagonizados por los llamados Moduladores Selectivos de Receptores de Estrgenos (SERMs). El descubrimiento reciente del receptor de membrana para estrgenos GPR30, y del sistema KISS1/KISS1R hizo mas complejo el panorama en la medida en que han ido apareciendo reportes que demuestran que el GPR30 est implicado en la progresin y agresividad tumoral, y que en contraste con los receptores a estrgenos nucleares, el GPR30 es activado por algunos SERMs como el tamoxifeno. Por su parte, el sistema KISS1/KISS1R que fue descubierto como un inhibidor de la metstasis en melanoma, ha sido involucrado en la activacin del eje reproductivo de los mamferos. Se ha demostrado que en el sistema nervioso, los estrgenos regulan la expresin de KISS1 en el hipotlamo de forma nucleo-dependiente: de manera positiva en el AVPV y negativa en el aqueado. Se desconoce si esta accin reguladora se presenta en otros tejidos, particularmente en la glndula mamaria cuya responsividad a estrgenos es un factor esencial para el pronstico en cncer de mama. En el laboratorio estamos evaluando si el sistema KISS1/KISS1R es blanco de los estrgenos en el tejido epitelial mamario, y si este efecto es mediado por el receptor membranal GPR30, utilizando como modelo a las clulas MCF-7 de cncer de mama humano. Mediante PCR en tiempo real, estamos determinando el efecto del 17estradiol, del anlogo impermeable 17-estradiol-BSA, del G-1 (agonista selectivo del GPR30) y del tamoxifeno, sobre la expresin de los genes KISS1 y KISS1R. Tambin determinamos las acciones de estos compuestos sobre la tasa de proliferacin celular. Los resultados obtenidos muestran que KISS1 es modulado de forma negativa por el estradiol, y que este efecto es mimetizado por estradiol-BSA. Un resultado semejante se observ con el agonista selectivo para el GPR30. El tamoxifeno tambin reduce la expresin del gen KISS1. En contraste con los cambios de expresin del gen KISS1, la expresin del gen KISS1R no parece ser modificada por la accin de los agentes estrognicos. En el caso de la proliferacin, el agonista del receptor GPR30 no mimetiz la accin del estradiol. En su conjunto, estos resultados sugieren que la accin estrognica reguladora de la expresin del gen KISS1, pero no de la proliferacin celular en el epitelio mamario transformado podra involucrar al receptor membranal GPR30. (Trabajo auspiciado por CONACyT 100359).
4. BASES MOLECULARES Y CELULARES DEL EFECTO NEUROPROTECTOR DE LA PROLACTINA EN LA RETINA Thebault S.,1, Arnold E.,1 Conds-Lara M.,1 Quintanar-Stephano A.,2 Rojas-Piloni G.,1 Baeza G.,1 y Clapp C.,1. 1 Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico; 2 Centro de Ciencias Bsicas, Autnoma de Aguascalientes, Aguascalientes, Mxico La hormona prolactina (PRL) acta como un factor de sobrevivencia en varios tipos celulares. Su receptor se expresa en los fotorreceptores retinianos y en el presente estudio nos avocamos a investigar los mecanismos moleculares por los cuales un incremento en los niveles circulantes de PRL protege los fotorreceptores de un dao luminoso. Para ello, indujimos hiperprolactinemia implantando dos adenohipfisis bajo la cpsula renal de ratas macho, las cuales fueron sometidas a una exposicin a la luz blanca continua durante 48 horas despus del implante. La hiperprolactinemia previene la apoptosis de los fotorreceptores, la reduccin de la amplitud de la onda alpha del electroretinograma (ERG) y la sobreactivacin de la va de la fototransduccin inducidos por el dao luminoso. Adems, altos niveles de PRL circulante previenen la reduccin de la amplitud de la onda beta del ERG, la cual representa la actividad de las neuronas bipolares y de la glia de
Mller. Notablemente, la expresin del receptor de PRL aumenta tras la exposicin a la luz continua en las clulas gliales de Mller as como la expresin de factores neuroprotectores como la PRL misma, el factor de crecimiento neuronal, el derivado del epitelio pigmentario y el neurotrfico ciliar. Tambin la hiperprolactinemia promueve la expresin de la acuaporina 1 y 4 en la retina, las cuales participan en proteger en contra del edema retiniano. En conclusin, la hiperprolactinemia a niveles comparables a los de la lactancia protege la retina de la fotodegeneracin inducida por una exposicin a luz continua, lo cual consolida el papel neuroprotector de la PRL y brinda informacin sobre su uso potencial tanto en condiciones de degeneracin normal de los fotorreceptores asociada a la edad avanzada como en condiciones patolgicas como es el edema macular asociado con la edad y la retinitis pigmentosa. Agradecemos la asistencia tcnica de Fernnd Lpez-Barrera, Daniel Mondragn, Antonio Prado, Gabriel Nava y Martn Garca. Trabajo auspiciado por CONACYT 81150.
SESIN: INTERACCIONES MOLECULARES Y VAS DE SEALIZACIN Septiembre 19, 2011
5. EL YODO COMO REGULADOR MOLECULAR. PARTICIPACION EN LA DIFERENCIACION, APOPTOSIS Y QUIMIOSENSIBILIDAD TUMORAL Aceves C y Anguiano B. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa. UNAM Campus Juriquilla. Quertaro, Mxico El yodo es un micronutriente esencial para la elaboracin de las hormonas tiroideas en todos los vertebrados y un activo promotor de la metamorfosis en diversos invertebrados. Datos recientes han revelado que el yodo es un potente antioxidante, y que la baja incidencia de patologias mamarios y prostticas en sujetos asiticos est asociado con la elevada ingestin de yodo en dichas poblaciones (5280 ug/da) cuando se compara con el occidente (209 ug/da). Usando modelos tanto in vivo como in vivo diversos grupos hemos descrito que el yodo molecular (I2) ejerce efectos antineoplsicos en rganos captadores de yodo como glndula mamaria, prstata, ovario, neuroblastoma y pncreas, y que estos efectos estn asociados a procesos de re-diferenciacin, disminucin en la proliferacin celular y activacin de apoptosis dependiente e independiente de caspasas. En la bsqueda de los mecanismos celulares involucrados en el efecto antineoplsico del I2, nuestro grupo describi que el yodolpido conocido como 6-yodolactona (6-IL) ejerce un poderoso efecto apopttico en clulas mamarias y prostticas normales y tumorales, y que esta 6-IL se presenta hasta 12 veces ms abundante en tumores mamarios inducidos con el cancergeno metil-nitrosourea, en comparacin con glndulas normales de ratas suplementadas con I2. Adems mostramos que la 6-IL es un ligando especifico y un promotor de la expresin de los receptores activados por proliferadores de peroxisomas tipo gamma (PPARg). Estos receptores estn estrechamente relacionados a procesos antiproliferativos, apoptticos y de quimiosensibilidad en una gran variedad de canceres humanos. Dado que la suplementacin de I2 no genera ningn efecto secundario en la fisiologa tiroidea o de salud en general, nuestro grupo tiene actualmente 3 protocolos clnicos fase 1 con el Sector Salud del Estado de Quertaro donde hemos explorado los efectos de la suplementacin de yodo slo o en co-adyuvancia con frmacos en mujeres diagnosticadas con cncer mamario temprano y avanzado as como en hombres con hiperplasia prosttica benigna. Los resultados muestran un comportamiento antiproliferativo, apopttico y de re-diferenciacin celular evitando la adquisicin de quimiorresistencia, adems de un efecto antioxidante cardioprotector. Parcialmente apoyado por donativos: CONACYT 78955 y 87196, PAPIIT IN201210
6. DETERMINACIN DE SECUENCIAS DE PRECURSORES DE TOXINAS DEL CARACOL MARINO CONUS SPURIUS DEL GOLFO DE MXICO Aguilar Ramrez MB 1, Zamora Bustillos R 1,2, Rivera Reyes R 1, Falcn Alcntara A 1 y Heimer de la Cotera E 1. 1 Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Juriquilla, Quertaro, Mxico; 2 Laboratorio de Gentica Molecular, Instituto Tecnolgico de Conkal, Conkal, Yuc., Mxico. Los caracoles marinos del gnero Conus capturan a sus presas mediante la inyeccin de un veneno que contiene toxinas peptdicas llamadas conotoxinas. La mayora de las conotoxinas actan sobre canales inicos activados por ligando. Las conotoxinas son
sintetizadas en forma de precursores que, en general, contienen tres regiones: pptido seal, regin pro y toxina madura. Las conotoxinas se agrupan en superfamilias genticas de acuerdo a la secuencia del pptido seal, la cual se encuentra muy conservada entre los miembros de cada superfamilia. Adems, los genes de las conotoxinas contienen secuencias conservadas en las regiones no traducidas 5 y 3. El objetivo de este trabajo fue determinar secuencias de precursores de conotoxinas de diversas superfamilias en Conus spurius, habitante del Golfo de Mxico. Las secuencias de los precursores fueron deducidas a partir de las secuencias de productos de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) clonados. Para obtener stos, se emple c. desoxirribonucleico total (obtenido mediante transcripcin inversa a partir de c. ribonucleico mensajero total aislado del conducto venenoso) y PCR con oligonucletidos especficos. Los oligonucletidos fueron diseados con base en secuencias conservadas entre precursores de varias superfamilias de otras especies y secuencias de N-terminales de pptidos purificados a partir del veneno. En el caso de la superfamilia T fueron identificados 8 precursores que contienen 5 toxinas maduras; de la superfamilia I, 10 precursores con 3 toxinas; de la superfamilia O, 1 precursor con 1 toxina; de las conorfamidas, 3 precursores con 2 toxinas. Aparentemente, los genes de las conotoxinas T contienen un exn que codifica el ltimo residuo del pptido seal y los primeros 14 residuos de la regin pro. Los precursores de la superfamilia I pertenecen a la subfamilia 2, y algunos contienen una regin pro. Los precursores de las conorfamidas contienen una o dos conorfamidas, como los precursores de otros miembros de la familia de los pptidos parecidos a la FMRFamida. Financiado por CONACyT 79929, PAPIIT-DGAPA-UNAM IN-204403, y el presupuesto del Lab. de Neurofarmacologa Marina del INB-UNAM. Se agradece el apoyo de la Unidad de Proteogenmica-INB-UNAM (Dra. Anaid Antaramian Salas y M. en C. Adriana Gonzlez Gallardo).
7. ESTRUCTURA Y FUNCIN DEL RECEPTOR TIPO rho DEL CIDO GAMA AMINOBUTRICO (GABArho) Edith Espino, Argel Estrada Mondragn, Alejandra Gonzlez, Arturo Machuca Parra, Atalfo Martnez Torres, Ricardo Miledi, Lenin Ochoa de la Paz, Adriana Ptriz, Daniel Reyes Haro, Abraham Rosas Arellano., Laboratorio de Neurobiologa Molecular y Celular. INB-UNAM. En nuestro laboratorio manipulamos artificialmente las molculas de la vida para entender cmo funcionan los sistemas biolgicos. Los problemas principales incluyen cmo los receptores a nueurotransmisores regulan la actividad neuronal y cules son las bases moleculares y estructurales que definen su funcin. Para ello los objetivos de nuestras investigaciones se han centrado en: 1) Clonacin molecular y expresin funcional de receptores GABArho en sistemas heterlogos, 2) Generacin de modelos estructurales del receptor, 3) Distribucin y caracterizacin funcional de estos receptores en neuronas y gla y 4) Mecanismos de la regulacin de la expresin gnica del receptor GABA-A. Los resultados obtenidos en nuestras investigaciones se enumeran en base a los objetivos planteados: 1) Se aislaron los cDNAs que codifican para las subunidades GABArho de la retina y del cerebelo y se caracterizaron electrofisiolgica y farmacolgicamente. Tambin se clonaron formas alternativas generadas por remocin diferencial de intrones. 2) Se produjo el receptor GABArho1 en sistemas recombinantes incluyendo E. coli, Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae y se obtuvieron imgenes por microscopa electrnica, tambin se deriv un modelo
estructural del receptor in silico; tambin se clonaron de bacterias genes homlogos al receptor 3) Se encontr la expresin de receptores GABArho en diversas reas del cerebro incluyendo el estriado y cerebelo, 4) Se han aislado segmentos del promotor transcripcional del gen GABArho1 que se estn caracterizando funcionalmente. Las perspectivas que tienen cada una de la lneas descritas son: 1) Bsqueda de nuevas molculas que modulen al receptor GABArho, 2) Aplicar el modelo estructural que se gener en estudios que permitan descifrar cules son los mdulos funcionales del receptor GABArho, 3) Definir la distribucin celular y funcin del receptor en el cerebelo, y 4) identificar las seales en el DNA que dirigen la expresin de GABArho1 en retina y en otras reas del sistema nervioso.Agradecimientos. A la Administracin, Unidades de Servicio y colaboradores del INB-UNAM. Laboratorio de R. Miledi en UCI, PAPIIT DGAPA, CONACyT, Fondo Shedid, E. Ruiz y exestudiantes.
8. BIOACTIVIDAD DE LA 3,5-T2. MECANISMOS DE ACCIN Y REGULACIN DE SU VA DE SEALIZACIN Orozco A, Valverde-R C, Mendoza Cisneros A, Navarrete-Ramrez P, Hernndez-Puga G, Villalobos P. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. En los ltimos 5 aos hemos estudiado los factores y mecanismos involucrados en la bioactividad de la 3,5-T2 (T2). Encontramos que en telesteos esta yodotironina, que hasta hace poco se consideraba una hormona inactiva, tiene efectos genmicos mediados por una isoforma distinta del receptor de hormonas tiroideas beta 1 (TR1). De hecho, en peces, hemos caracterizado dos mRNAs que codifican para el TR1 y que presentan diferencias singulares al compararlas con el TR1 humano: i) la regin N-terminal de ambas isoformas es ms corta (76 aa menos); y ii) una de ellas contiene nueve amino cidos insertados al inicio del dominio de unin al ligando. Tambin hemos mostrado que el TR1 que contiene con el inserto de 9 amino cidos (largo) es activo en presencia de T2, mientras que el receptor sin inserto (corto) se activa por T3. Adems, estudios de estructura-funcin, nos han mostrado que el dominio N-terminal de los TR1 es importante para la transactivacin mediada por T2 pero no por T3. Por otra parte, nuestros estudios in vivo evaluando el crecimiento somato-ponderal en peces, sugieren que las dos yodotironinas participan en el proceso, pero lo hacen a travs de vas de sealizacin distintas: T3 activa el TR1 corto, mientras que T2 activa al TR1 largo. La caracterizacin funcional de nuevas isoformas de TRs permitir, potencialmente, disear y desarrollar anlogos de T3 cuya interaccin diferencial con su receptor ejercera efectos tiromimticos selectivos, lo que sera de gran utilidad en el tratamiento de patologas asociadas a la funcin tiroidea.
9. SEALIZACIN PURINRGICA EN LAS CLULAS SOMTICAS DEL FOLCULO OVRICO Vzquez-Cuevas FG, Garay E, y Arellano RO. Laboratorio de Neurofisiologa Celular y Molecular, Departamento de Neurobiologa, INB-UNAM. El ATP como transmisor intercelular participa en una amplia gama de procesos fisiolgicos importantes tales como la regulacin de la proliferacin, la diferenciacin y la muerte celular programada. Numerosas evidencias sealan que este transmisor funciona como
una seal paracrina que sincroniza el tono de varios segundos mensajeros intracelulares (principalmente Ca2+ y AMPc) en poblaciones celulares. El sistema de sealizacin a travs de ATP llamado purinrgico, funciona a travs de la liberacin basal y/o estimulada de ATP y la consecuente activacin de receptores de membrana tipo P2X y/o P2Y localizados en las clulas vecinas o en la misma clula liberadora. Ha sido mostrado que estos dos elementos esenciales del sistema se expresan en una gran cantidad de tipos celulares. En el laboratorio de Neurofisiologa celular, hemos mostrado la expresin de los elementos necesarios (e.g., expresin de receptores especficos, mecanismos de liberacin de ATP, molculas efectoras, etc) para la funcin de un sistema purinrgico de sealizacin intercelular, que se establece entre las diferentes clulas somticas del ovario y los gametos; en los ltimos aos hemos estudiado las caractersticas de ste y su papel fisiolgico durante la foliculognesis. Una de las lneas de estudio recientes se enfoca en comprender las implicaciones celulares de la expresin del receptor P2X7 en el epitelio ovrico superficial (OSE) de mamfero. Hemos demostrado que: 1) el OSE de ratn expresa especficamente P2X7 , 2) su nivel de expresin es modulado durante el ciclo estral, y 3) su activacin es capaz de inducir apoptosis. Paralelamente, dada la relevancia del OSE y la funcin de P2X7 en carcinognesis, estamos estudiando la expresin y la funcin del receptor en lneas celulares derivadas de adenocarcinomas, los resultados en conjunto sugieren que el receptor P2X7 se expresa y es funcional en el OSE en condiciones fisiolgicas y patolgicas y que el ATP es un modulador intraovrico. Donativos: PAPIIT IN214409 para ROA e IN208209 para FGV-C y CONACyT 82340 para ROA.
Martes 20 de Septiembre
SESIN: REGULACIN DE LA CONDUCTA Y PLASTICIDAD NEURONAL Septiembre 20, 2011
10. ACCESO RESTRINGIDO AL ALIMENTO COMO UNA HERRAMIENTA EXPERIMENTAL EN EL ESTUDIO DE LA RITMICIDAD CIRCADIANA Bez-Ruiz A. y Daz-Muoz M. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El sistema de medicin temporal en los organismos es indispensable para una adecuada adaptacin a eventos medioambientales cclicos, adems de ser un proceso fisiolgico bien conservado a lo largo de la escala filogentica. Se constituye por un conjunto de osciladores biolgicos que sincronizan las funciones de los organismos a estmulos de naturaleza variable, que de manera amplia pueden clasificarse como fticos y no fticos. En nuestro laboratorio han sido exploradas en los ltimos aos las adaptaciones metablicas y fisiolgicas que se expresan cuando al organismo se le somete a un horario de alimentacin restringida (HAR), o sincronizador no ftico. La maniobra experimental para implementar nuestro modelo de estudio se basa en ofrecer alimento por slo 2 h al da durante un lapso de 3 semanas. Los mtodos con que abordamos dicha problemtica comprenden el uso de cuantificacin de actividad enzimtica por espectrofotometra, ensayos de ELISA, diferentes tcnicas histolgicas, deteccin y semi-cuantificacin de protenas por inmunoblot, as cmo ensayos de acoplamiento con radioligandos, entre otra ms. Dentro de los principales hallazgos que hemos encontrado se enumeran cambios en la regulacin metablica (carga energtica, estado redox y actividad mitocondrial) y el manejo bioqumico de nutrientes (boxidacin peroxisomal, gluconeognesis y ciclo de la urea) en el hgado, modificaciones en la ritmicidad de varias hormonas (IGF-1, ghrelina, hormona de crecimiento y corticosterona), y adaptaciones en elementos de sealizacin (dinmica del calcio intracelular, receptores activadores de la proliferacin peroxisomal y transduccin de receptores a coricosterona). Este conjunto de modificaciones que hemos caracterizado nos hace postular la existencia de una forma alternativa de medicin del tiempo circadiano cuando la disponibilidad de alimento acta como el principal sincronizador diurno. El modelo experimental abre oportunidades para proponer estudios interdisciplinarios en el rea de la fisiologa de la alimentacin, de la ritmicidad circadiana y del metabolismo intermediario y energtico. Trabajo auspiciado por CONACYT 129-511 y PAPIIT IN201209.
11. CAMBIOS EN LA PREFERENCIA GUSTATIVA, AS COMO EN LAS ESTRUCTURAS CEREBRALES Y SISTEMAS DE NEUROTRANSMISIN NECESARIOS DURANTE LA FORMACIN Y EVOCACIN DE LA MEMORIA APETITIVA, INDUCIDOS POR EL CONSUMO CRNICO DE SACAROSA Fregoso D. y Miranda M.I. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La capacidad de identificar y aprender sobre un sabor determina la frecuencia, la preferencia y la aversin para diferentes alimentos, as como otros aspectos de alimentacin y apetito. Es indiscutible que el consumo de alimentos es influenciado por una compleja variedad de factores, donde sin duda los procesos de aprendizaje tienen una importancia notable. A lo largo de la evolucin, los alimentos con sabores dulces se han asociado como alimentos
nutritivos y seguros, que generan una conducta de preferencia y de ingesta continua, adecuada para los requerimientos diarios de energa. La preferencia por sabores dulces, por lo tanto, se regula a travs de la asociacin del sabor con el aporte de energa, la saciedad y los efectos placenteros, positivamente hednicos, posteriores a la ingestin. Sin embargo, actualmente uno de los grandes problemas en nuestra sociedad es la falta de regulacin en el consumo, que se refleja en la ingesta excesiva de azcares, la cual est alcanzando ndices alarmantes a nivel mundial. En este sentido, los sabores altamente apetitosos activan los circuitos de recompensa del cerebro, a travs de la rpida entrada de seales sensoriales y lentas consecuencias, por lo que la asociacin de los sabores y sus consecuencias requiere de los sustratos cerebrales que evalan los reforzadores y aquellos que permiten actuar en consecuencia; estos substratos, tanto anatmicos como neuroqumicos, estn ligados ntimamente con procesos de aprendizaje y memoria. De tal forma, a travs de esta investigacin se estudian algunos aspectos sobre la adquisicin y la evocacin de sabores apetitivos, para conocer los efectos inducidos por el consumo crnico de un sabor dulce sobre la preferencia gustativa y la posibilidad de formar nuevos aprendizajes asociados al mismo sabor. A travs de un modelo de consumo crnico de sacarosa, se evalan los efectos de la habituacin a largo plazo sobre la posibilidad de reaprender nuevas asociaciones, del mismo sabor, as como adquirir nuevos aprendizajes. Los resultados demuestran cambios significativos en la forma de re-aprender asociaciones diferentes con el mismo estmulo, y permite plantear algunos hiptesis de los cambios en los mecanismos cerebrales, necesarios para distinguir y acrecentar la conducta de ingesta de estmulos gustativos apetitosos. Agradecemos la asistencia tcnica de Angela Gabriela Vera Rivera, Alejandro Rangel Hernndez, Martn Garca Servin. Trabajo auspiciado por DEGAPA IN209911-3.
12. LOS SENTIDOS Y LOS FOSFOLPIDOS, O CMO LA FUNCIN SENSORIAL DEL SISTEMA NERVIOSO DEPENDE DEL METABOLISMO DE FOSFOLPIDOS Gimate-Baos, I. J., Pea-Rangel, M. T., Riesgo-Escovar, J.R., Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM. Los sentidos son las entradas de informacin del sistema nervioso central, crticas para la supervivencia de los animales. Su estudio puede abordarse desde distintas perspectivas; particularmente atractivos son los estudios de forward genetics (gentica hacia delante), que slo asumen que genes requeridos para una funcin pueden ser evidenciados cuando mutaciones en los mismos evitan que esta funcin se realice, sin prejuicio de la identidad molecular o funcin de los mismos. En el caso particular del sistema nervioso, la neurogentica es la escuela de pensamiento que usando este principio, basado en tamizajes de forward genetics, ha aislado mutaciones en genes que se requieren para todos los aspectos del sistema nervioso que se han estudiado en organismos modelo genticos. En nuestro laboratorio, a partir de estos principios hemos aislado mutaciones en dos loci de la mosca de la fruta, Drosophila melanogaster, que se requieren para la funcin sensorial, en particular para el olfato y la visin. Los genes nanahuatzin (nana) y tecuzitecatl (tecu), respectivamente, codifican para una aciltransferasa de fosfolpidos y una fosfolipasa A2. Ambos se expresan de manera restringida en el sistema nervioso, y mutaciones en ambos resultan en moscas viables y frtiles, pero con defectos en la olfaccin y visin. Hemos encontrado que mutantes de estos dos loci presentan defectos en paradigmas conductuales tanto en larvas como en adultos que utilizan como estmulo sensorial la luz u olores. Tambin, en el caso de nana, hemos encontrado que la comunicacin neural
entre los fotorreceptores y las primeras interneuronas del lbulo ptico est comprometida. Este fenotipo se puede rescatar con la expresin de un transgen de nana en el ojo, por lo que el defecto es presinptico. Para ambos loci, expresin generalizada del transgen correspondiente en los mutantes es capaz de rescatar los fenotipos mutantes en pruebas conductuales. Hemos sintetizado in vitro ambas protenas, y demostrado que tienen las actividades enzimticas predichas. Adems, en el caso de tecu hemos encontrado que la mayora de la expresin cerebral est en los cuerpos setferos, una estructura clave internuncial de procesamiento de informacin sensorial, lo que sugiere que el defecto en tecu puede ser central.
13. CUANTIFICACIN DE LA CAPACIDAD HUMANA DE PREDECIR EVENTOS SENSORIALES PERIDICOS De Lafuente V., Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Predecir eventos sensoriales que se repiten a intervalos regulares de tiempo es una funcin bsica del sistema nervioso que permite al individuo preparar respuestas conductuales con anticipacin. Sin embargo, los mecanismos neuronales que posibilitan esta importante funcin cognitiva no se comprenden todava. En este trabajo cuantificamos la habilidad de sujetos humanos para sincronizarse y predecir la ocurrencia de eventos sensoriales peridicos. Los participantes observaron un estmulo visual que apareca alternadamente en la izquierda y derecha de su campo visual. Despus de este periodo de observacin, que llamamos de sincronizacin, el estmulo visual desapareca y la tarea de los sujetos era mantener en la memoria de trabajo el ritmo al que el estmulo cambiada de posicin. Al final del periodo de memoria, los sujetos deban responder si el estmulo, que ya no era visible, se encontrara en la izquierda o en la derecha. La probabilidad de responder correctamente se cuantific en funcin de tres variables: la frecuencia a la que el estmulo alternaba, el tiempo de sincronizacin y el tiempo de memoria. Los resultados muestran la probabilidad de contestar correctamente depende principalmente del tiempo de memoria, de tal manera que intervalos largos de memoria resultan en una disminucin progresiva de la probabilidad de contestar correctamente. De manera importante, los datos muestran que an en respuestas incorrectas, los sujetos no contestan azarosamente, sino que sus errores se desvan de manera sistemtica de la respuesta correcta: cuando la frecuencia del estmulo es rpida los sujetos tienen retrasarse, y cuando la frecuencia del estmulo es lenta las respuestas conductuales muestran que el ritmo de los sujetos tenda a adelantarse. Estos resultados son congruentes con la existencia de un marcapasos interno que oscila a una frecuencia intermedia, la cual los sujetos aceleran o incrementan con el objeto de sincronizarse con la frecuencia a la que cambia de posicin el estmulo visual. Debido a que la sincronizacin del ritmo interno con el estmulo no es perfecta, los errores se acumulan con el tiempo, reduciendo gradualmente la probabilidad de calcular correctamente la posicin del estmulo. Trabajo auspiciado por el Instituto de Neurobiologa y por DGAPA IACOD I1201011.
14. LA LACTANCIA PROTEGE AL CEREBRO DE LA MADRE CONTRA DAO POR EXCITOTOXICIDAD Morales T., Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La experiencia reproductiva ocasiona una serie de cambios conductuales, fisiolgicos y emocionales en la madre que la preparan para satisfacer las demandas del embarazo y de la lactancia. Un ejemplo de estas adaptaciones es la reduccin de la sensibilidad a agonistas glutamatrgicos en varias regiones cerebrales de la madre. Estudios recientes de nuestro grupo han mostrado que la lactancia disminuye el dao celular inducido por cido kanico (KA) en el hipocampo dorsal de la madre, en comparacin con ratas vrgenes en la fase de diestro. Esta proteccin dada por la lactancia contra el dao causado por excitotoxicidad se presenta en las reas CA1, CA3 y giro dentado del hipocampo, en las distintas fases del perodo de lactancia, es independiente del tiempo de exposicin (24, 48, 72 h) y de la va de administracin del KA (intraperitoneal o intracerebral), y persiste an despus de 48 h post-destete. Adems, la lactancia reduce la magnitud de la respuesta astroctica tpica de la lesin por KA, y atena las manifestaciones conductuales tnico-clnicas (tipo epilepsia) causada por el agonista glutamatrgico. Durante la lactancia se presenta la elevacin de los niveles circulantes de prolactina, oxitocina, progesterona, y corticosterona que son caractersticos de esta fase y consideramos la posibilidad de que esta fluctuacin hormonal sea importante en los efectos protectores que hemos reportado. La administracin crnica de prolactina a ratas ovarectomizadas disminuye de manera significativa los efectos nocivos del KA en el hipocampo y reduce la progresin de las crisis convulsivas. As, proponemos que la lactancia es un modelo natural de neuroproteccin y neuroplasticidad y que la prolactina tiene un papel importante en este fenmeno. Apoyado por CONACyT 51044 y UNAM (PAPIIT-DGAPA IN204709).
15. MACHOS NO COPULADORES, UN MODELO NATURAL PARA ENTENDER LAS BASES NEURONALES DE LA CONDUCTA SEXUAL MASCULINA Antonio E, Arzate D, Camacho F, Corona R, Portillo W, Unda N, Paredes RG. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Laboratorio de Conducta sexual y plasticidad neuronal. Instituto de Neurobiologa, UNAM La ejecucin de la conducta sexual es muy importante en todas las especie de mamferos, por lo que casi todos los machos son capaces de copular cuando una hembra receptiva est disponible. Sin embargo, en varias especies como hmster, jerbo, conejo de indias, ratn y rata, algunos machos aparentemente normales no copulan a pesar de ser probados en repetidas ocasiones con hembras sexualmente receptivas. Estos animales se han denominado no copuladores (NC) y representan un modelo natural para evaluar los factores involucrados en el control de la conducta sexual masculina. Nuestro grupo de investigacin ha estudiado a las ratas macho NC a nivel conductual, neuronal y hormonal. A nivel conductual, hemos demostrado que mientras los machos copuladores (C) muestran una clara preferencia por las hembras sexualmente receptivas y por sus olores (feromonas), los NC no tienen preferencia por un individuo de su mismo sexo ni del sexo contrario. Probablemente debido a que a nivel neuronal, el procesamiento de las claves olfatorias sexualmente relevantes es deficiente en los machos NC. En cuanto a las hormonas, hemos demostrado que los machos NC tienen sus niveles circulantes normales de estradiol y
testosterona. Sin embargo, a nivel del sistema nervioso central describimos que en la regin ms importante para el control de la sexual masculina, el rea preptica media (APM), los animales NC tienen alteraciones en el nmero de receptores a andrgenos y estrgenos tipo a Adems, reportamos que su actividad de la enzima aromatasa (enzima que metaboliza la testosterona a estradiol) en el APM es menor con respecto a los machos C. De esta manera, los implantes de estradiol, pero no los de testosterona, en el APM de machos NC recuperan la conducta sexual en estos animales. Estos datos en conjunto sugieren que los machos NC tienen una alteracin funcional a nivel del APM. El estudio de los factores involucrados en la ausencia de la conducta sexual en los machos NC nos permitir elucidar los factores ms importantes involucrados en el control de la conducta sexual masculina en roedores.
16. LA TEORA DE LA CONSOLIDACON DE LA MEMORIA: EXCEPCIONES A LAS REGLAS Prado-Alcal R.A., Medina A.C., Garca Torres J., Gonzlez-Salinas S., MuozSnchez S., Jurez, Y., Torres-Garca M. E., Hernndez-Gutirrez M. I. y Quirarte, G.L. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La teora universalmente aceptada acerca de la formacin de la memoria de largo plazo (MLP) tiene dos postulados generales que descansan en resultados experimentales muy slidos. El primer postulado indica que el paso de informacin del almacn de memoria de corto plazo al almacn de MLP est mediado por el proceso de consolidacin, que dura poco tiempo; ste es un proceso muy frgil, que fcilmente puede interrumpirse y, por lo tanto, si esto ocurre, fcilmente puede impedirse la formacin de la MLP. As, la administracin de tratamientos que interfieren con la actividad cerebral durante el periodo de consolidacin (e.g., choques electroconvulsivos, bloqueadores de receptores a neurtransmisores, lesiones electrolticas, etc.) producen amnesia, es decir, no permiten la formacin de la MLP. El segundo postulado indica que la formacin de la MLP depende de la sntesis de protenas en regiones particulares del cerebro. Este postulado se basa en el hecho de que la administracin de inhibidores de la sntesis de protenas (ISPs) durante el proceso de consolidacin tambin impide que se forme el almacn de largo plazo. El trabajo de nuestro laboratorio ha demostrado que cuando los sujetos de experimentacin son sometidos a un aprendizaje incrementado, la administracin de tratamientos durante la fase de consolidacin, que tpicamente producen amnesia, as como aplicacin de ISPs se tornan inocuas, es decir, la formacin de la MLP es normal. Estos datos indican claramente que la teora de la consolidacin de la memoria no puede generalizarse a la formacin de la MLP de todos los tipos de aprendizaje, en particular del aprendizaje incrementado. Agradecemos el apoyo tcnico de ngel Mndez, Norma Serafn, Luis A. Prado, Omar Gonzlez y Martn Garca. Trabajo apoyado por CONACYT (128259) y PAPIIT (IN208110). Becas de CONACYT a T.G. M. E. (372289) y a J. Y. (372289).
17. PARTICIPACIN DEL ESTRIADO EN LA MEMORIA Y SU POSIBLE REGULACIN A TRAVS DE GLUCOCORTICOIDES Quirarte, G.L., Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, Campus UNAM Juriquilla, Quertaro, Mxico Existen evidencias que confirman el papel regulador de los glucocorticoides en la consolidacin de la memoria, por ejemplo inyecciones sistmicas de corticosterona o dexametasona mejoran la memoria cuando la administracin se realiza inmediatamente despus de que el sujeto aprendi. Asimismo se sabe que algunas estructuras tales como la amgdala, el hipocampo y la corteza prefrontal participan en la formacin de la memoria a travs de los glucocorticoides. Sin embargo no se ha estudiado la participacin de los glucocorticoides en otras estructuras cerebrales involucradas en la memoria. Nuestro trabajo tiene como propsito el investigar las influencias que tienen los glucocorticoides sobre el estriado, un ganglio basal del cerebro que es parte de un sistema de memoria y cuya principal funcin cognitiva se ha planteado es la formacin de la memoria de hbitos y habilidades, es decir la memoria de procedimiento. Mediante herramientas conductuales y farmacolgicas en nuestro laboratorio demostramos que la activacin de los receptores a glucocorticoides del estriado es importante para la consolidacin de la memoria, especficamente para la memoria de aprendizajes de procedimiento (evitacin inhibitoria, laberinto acutico con plataforma visible) pero no as para la memoria especfica del contexto o de su componente aversivo (evitacin inhibitoria modificada y laberinto acutico plataforma oculta). Asimismo hemos encontrado que la activacin de los receptores a glucocorticoides del estriado depende de la activacin del sistema noradrenrgico de la amgdala. Estas evidencias nos permiten concluir que el estriado es una estructura que regula la formacin de la memoria no solo a travs de sistemas de neurotransmisin como ampliamente se ha descrito sino tambin a travs de hormonas como los glucocorticoides y apoyan la idea de que es parte de un sistema de memoria ya que su funcin al igual que el hipocampo y la corteza prefrontal depende de la activacin de la amgdala. Agradecemos el apoyo tcnico de Norma Serafin, Angel Mendez, Martin Garca, Leonor Casanova, Lourdes Lara, Ramn Martnez y Soledad Medina. Apoyo de ConacyT 130524 y PAPIIT-UNAM IN214111.
Mircoles 21 de Septiembre
SESIN: ALTERACIONES DE LA ESTRUCTURA Y LA FUNCIN DEL SISTEMA NERVIOSO Septiembre 21, 2011
18. ALTERACIONES ANATOMO FUNCIONALES EN EL MODELO TRIPLE TRANSGNICO PARA LA ENFERMEDAD DEL ALZHEIMER (3XTg-AD) Aguilar-Vzquez AR, Coronas Smano G, Portillo Martnez W1, Ontiveros Torres MA2, Luna J2, Mares Orozco M, Martnez-Coria H3, Daz-Miranda S. Depto. Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, 1Depto de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Campus UNAM-Juriquilla Qro; 2Departamento de Biologa Celular y Fisiologa Biofsica y Neurociencias, Centro de Investigacin de Estudios Avanzados del I.P.N, Mxico DF. 3Universidad de California, Campus Irvine, EUA En la neurodegeneracin provocada por la enfermedad de Alzheimer (EA), existe prdida de la memoria por el depsito en el cerebro de placas neurticas, cuyo componente monomrico es el pptido b-amiloide, y de Maraas Neurofibrilares, cuyo componente principal es la protena Tau procesada patologicamente. Entre los modelos animales que intentan replicar esta patologa, est el ratn triple transgnico (3xTg-AD, PS1M146V APPSwe y Tau P301L), el cual expresa la patologa en reas del cerebro asociadas a la memoria, como son el hipocampo, la corteza prefrontal, y la amgdala. Nuestro objetivo es determinar, en el modelo la formacin temprana de placas b amiloides y Tau hiperfosforilada durante el desarrollo de la EA asociadas a la pruebas de reconocimiento de objetos (RO) y de la capacidad olfativa (discriminacin de olores voltiles; preferencia y motivacin sexual) debido a que se ha propuesto que su deficiencia es un sntoma temprano que adems conlleva a producir prdida del apetito, de peso y un pobre estado nutricional. Los resultados obtenidos demuestran que los depsitos de b amiloide y Tau hiperfosforilada aparecen de manera diferencial en el hipocampo, corteza y amigdala, desde los 3 meses de edad en hipocampo. Sin embargo la deficiencia olfativa se presenta en hembras de 10-11 meses, aunque no para la discriminacin sexual que se altera tardamente, al igual que el RO ambos se asocian con la aparicin de placas de b amiloide, en el bulbo olfatorio y en el hipocampo. Adicionalmente, en el hipocampo, no hemos encontrado la truncacin patolgica del extremo carboxilo de la protena Tau en un tratamiento con Etanol. Sin embargo existen neuronas con formas parecidas a filamentos a edad avanzada en este modelo. Agradecemos la ayuda tcnica del MVZ Martn Garca Servn, Elsa Nydia Hernndez Ros Rodrguez, Lourdes Palma Tirado, Jorge A. Servn de la Cruz, Ana Laura Pinedo Vargas. Trabajo auspiciado por DGAPA-UNAM No. IN-202809 y CONACYT No. 102278 (RM).
19. DETECCIN DE METSTASIS VERTEBRALES MEDIANTE SECUENCIA DE DIFUSIN OBTENIDA POR RESONANCIA MAGNTICA Lugo-Aguilar S1, Zavala Gonzlez MA1, Barrios Alvarez FA2, Barragn-Campos HM1., 1Unidad de Resonancia Magntica. Instituto de Neurobiologa. UNAM Campus Juriquilla; 2Laboratorio de Imagen Funcional por Resonancia Magntica. ANTECEDENTES: El cncer constituye la tercera causa de muerte a nivel mundial. El 70% de los pacientes con cncer tienen metstasis al momento de su muerte. Las metstasis vertebrales (MVs) representan 40% de las metstasis en pacientes con cncer. El examen de referencia en el paciente oncolgico es la PET-CT; sin embargo tambin se ha demostrado
la utilidad de la imagen de difusin por resonancia magntica (DWI) en la deteccin de metstasis seas. OBJETIVO: Estandarizacin de la (DWI) de cuerpo entero por resonancia magntica (RM) en el diagnstico de metstasis vertebrales. MATERIAL Y METODOS: Se incluyeron 25 pacientes, 15 fueron mujeres (60%). Doce pacientes estudiados fueron incluidos con diagnstico de benignidad (48%), y 13 con diagnstico de malignidad (52%). La MVs se defini como positiva cunado 2 de las 3 secuencias propuestas fueron positivas; esto es, a) lesin en el hueso trabecular o cortical con imagen de contraste positivo en DWI o STIR, b) lesin en hueso trabecular o cortical con imagen de contraste negativo en T1 (SE). Las estudio se obtuvieron en Magneto 1.0T Intera, Philips y Magneto 3.0T Discovery MR 750 GE. Se calcul del valor de ADC de la lesin y del tejido sano. El anlisis estadstico incluy estadstica descriptiva. RESULTADOS: En las secuencias T1 y STIR, se observaron MVs en 12 pacientes (48%) y ausencia de MVs en 13 (52%); mientras que en DWI, 15 pacientes tuvieron MVs (60%) y 10 pacientes MVs (40%). La media del valor de ADC (ADC avg) de las lesiones metstasicas fue de 0.000370501 mm2/s (D.E. 0.0005544741) y la media del valor ADC avg de la vertebra sin evidencia de metstasis fue de 0.000118154 mm2/s (D.E. 0.0001768751. CONCLUSIONES: La RM permite detectar MVs en las secuencias estructurales T1 y STIR; as como en la secuencia DWI. La evaluacin cuantitativa del ADC avg demuestra aumento de la difusividad de la lesin hasta 2 veces en comparacin con tejido sano. Cuando una lesin en DWI tiene restriccin cualitativa, existe la posibilidad de MVS, sin embargo en la deteccin de la lesin metastsica es necesario evaluar el efecto de brillo T2 (T2-shinethrough-effect), que puede observase en otro tipo de lesiones.
20. EVALUACIN INTEGRAL DE LA EXPOSICIN CRNICA POR INHALACIN DE THINNER EN MODELOS DE RATA WISTAR Alfonso Crabez T*., Francisca Sandoval Z*., Ma. Lourdes Palma T**., *Derpartamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa y **Unidad de Microscopa electrnica. Un gran nmero de personas se encuentran expuestas al thinner principalmente en dos formas. En la industria las personas estn expuestas al menos durante 8 horas a dosis de 100ppm a 2000 ppm. En Mxico, la inhalacin voluntaria de thinner es un problema de salud pblica. La facilidad de adquisicin y su economa lo hacen disponible a menores de edad que son los principales usuarios del thinner como droga de abuso. Las dosis de exposicin al thinner en forma voluntaria oscilan entre 5,000 a 15000 ppm en periodos cortos de tiempo (de 5 a 15 minutos). Estas dos formas de exposicin son totalmente diferentes, la forma de inhalacin voluntaria reviste principalmente efectos neurotxicos importantes. La forma de exposicin involuntaria a dosis menores en tiempos ms largos est vinculada a causas de muerte por enfermedades cardiacas, respiratorias y cncer. Charles LE, Burchfiel CM, Fekedulegn D, Gu JK, Petrovitch H, Sanderson WT, MasakiK, Rodriguez BL, Andrew ME, Ross GW. Occupational exposure to pesticides, metals, and solvents: the impact on mortality rates in the Honolulu Heart Program. Work. 2010 Jan 1;37(2):205-15. Las propiedades neurotxicas del thinner han sido ampliamente estudiadas hasta el momento. La exposicin crnica de thinner causa encefalopata crnica, caracterizada por prdida de mielina y macrfagos en la materia blanca con inclusin de material birefrigente. Alteraciones en la conducta y en el movimiento se han reportado en estas personas por inhalacin crnica de thinner. Sin embargo no se tiene claro otros aspectos toxicolgicos
del thinner como mezcla. La farmacodependencia humana consiste en la exposicin a 2000 a 5000 ppm durante largos perodos y con estados repetitivos de intoxicacin por tiempos no mayores a 15 minutos, la mayor inhalacin de solvente ocurre al inicio de la sesin, en el que es necesario alcanzar el estado de intoxicacin. La dosis de sostn en el estado intoxicado es por perodos como ya se mencion no mayores a 15 minutos a lo largo del da. Nuestros estudios han aportado datos sobre los efectos histopatolgicos, bioqumicos, fisiolgicos y genticos de la exposicin crnica de thinner. Nuestro modelo experimenta murino, consiste en la exposicin diaria a dos perodos de 20 minutos a 4000 ppm de tner, en dos sesiones con una separacin temporal de 8 horas entre cada sesin, en cmara cerrada por 16 semanas. Adems de las alteraciones generales como es la prdida de peso y cambios conductuales, en el SNC se presenta cambios patolgicos como son las alteraciones en la microvasculatura cerebral, en la que se observa dao estructural en las uniones hermticas, alteraciones en la mielina definida como leucoencefalomalacia, Una de las reas del sistema nervioso central en la cual hemos enfocado nuestros estudios es el cerebelo. Los resultados nos indican que las neuronas de Purkinje son el blanco principal de el tner ya que se presenta prdida de estas neuronas en reas mayores a las 300 a 500 m, desarreglo de la monocapa y proliferacin de las cisternas sub-membranales as como la presencia de argirofilia intensa, que se traduce en la presencia de numerosas neuronas negras. Junto al dao a las neuronas de Purkinje el tner tiene efctos importantes en la gla, especialmente la gla astrocitaria que muestra alteraciones importantes sobre todo en los procesos que acompaan a las dendritas en su trayecto en la capa molecular del cerebelo. La relevancia de estos estudios se presentarn en esta sesin, asi como se discutirn los probables mecanismos de patologa que conllevan. El thinner est compuesto principalmente por tolueno, acetona, etanol, etilbenzeno, trimetil benzeno y xileno. A partir de 2005 la NOM estableci que la mezcla de solventes llamada tner no contuviera benceno. 21. UNIDAD DE INVESTIGACIN EN NEURODESARROLLO: AVANCES Y PERSPECTIVAS Harmony, T. y colaboradores de la Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM. En esta presentacin queremos dar una visin actualizada de la Unidad. Prcticamente todos los integrantes del Instituto conocen que nuestro objetivo es el desarrollo y puesta en marcha de nuevos mtodos de diagnstico y tratamiento temprano del dao cerebral producido por factores prenatales y perinatales y su abordaje multidisciplinario. Congruente con estos objetivos se realizaron una serie de proyectos de tesis de maestra y doctorado que involucran diversas tcnicas: electroencefalografa, potenciales evocados visuales y auditivos de tallo cerebral, potenciales cognoscitivos, imgenes por RM, neurorretroalimentacin y neurohabilitacin. En cuanto a nuestras perspectivas de proyectos de investigacin se han ampliado considerablemente con el nuevo equipamiento obtenido a travs de proyectos de CONACYT: ya se instal el equipo de mapeo cerebral por espectroscopa prxima a infrarrojos (NIRS) y se iniciaron las adquisiciones de datos en recin nacidos sanos y con asfixia. Otros proyectos que se iniciaron fueron los de tractografa por tensores de difusin: evaluacin de diferentes tractos nerviosos en nios que presentaron una lesin cerebral perinatal, que recibieron tratamiento neurohabilitatorio y cuya evolucin en algunos casos fue satisfactoria, mientras
que en otros no. Otro proyecto que esperamos iniciar el ao prximo es el de seguimiento de lactantes en los cuales se hayan realizado diagnsticos prenatales y en los cuales la evolucin haya sido normal y en otro grupo en el cual se hayan presentado factores de riesgo como el de restriccin del crecimiento con disminucin del flujo de las arterias cerebrales a diferentes edades de gestacin. De todo lo mencionado vamos a mostrar resultados y dar ejemplos de lo que se ha iniciado. Deseamos sealar tambin que la participacin de investigadores de otras instituciones como el CIMAT, el Centro de Neurociencias de Cuba, la Facultad de Medicina de la Universidad Autnoma del Estado de Mxico y el Hospital de Especialidades del Nio y la Mujer ha sido fundamental en el desarrollo de todos estos proyectos. 22. DESARROLLO DE LA QUIMIORECEPCIN EN LA RATA DESNUTRIDA RECIN NACIDA Salas M, Torrero C, Regalado M, Rubio-Navarro L, Carren M, Fernndez R, Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, Campus UNAM Juriquilla, Quertaro, Mxico En las especies altriciales la ingesta de alimento depende de acciones concertadas del gusto y del olfato, moduladas por seales visuales, auditivas y somatosensoriales que confluyen en los circuitos para la quimiorecepcin. El ayuno perinatal crnico es una influencia epigentica nociva y relevante que interfiere con el desarrollo de la organizacin estructural y la funcin quimiosensorial, alterando las relaciones madre/cras, y la supervivencia del neonato en el ambiente ecolgico del nido. En esta lnea de investigacin utilizando el modelo de la rata desnutrida a diferentes edades del desarrollo, hemos obtenido evidencias de dao estructural desde los receptores como a lo largo de algunos relevos de las vas del gusto y del olfato. As, utilizando tcnicas de morfometra neuronal de impregnacin metlica y de inmunohistoqumica, son notorias las alteraciones en la organizacin de las papilas y los botones gustativos, de los glomrulos olfativos, y de la hipoplasia neuronal a lo largo de ncleos de relevo de las vas del gusto y del olfato. Estas alteraciones limitan procesos funcionales como la recepcin, transduccin e integracin de los patrones de mensajes sensoriales ascendentes modulados por descargas neuronales centrfugas del cerebro anterior, de los cuales dependen las sensaciones y los procesos cognitivos de los recin nacidos. Estos hallazgos adquieren relevancia, ya que de ellos depende la adquisicin neonatal de experiencia sensorial temprana que fortalece la expresin de la respuesta maternal, la supervivencia del neonato y el desarrollo de su conducta sensorial en el largo plazo. Tambin, en paralelo con los hallazgos de morfometra neuronal obtenidos en ambas vas sensoriales, en el presente, evaluamos el grado de afectacin que tiene tanto la discriminacin gustativa como la olfativa en ratas adolescentes que sufrieron desnutricin perinatal. Con apoyo parcial de DGAPA/UNAM. IN207310-22.
23. AFFERENCES TO PRINCIPAL CELL OF THE PIRIFORM CORTEX Vargas, V. and Larriva, J. Department of Developmental Neurobiology, INB-UNAM Although the fiber inputs to the piriform or primary olfactory cortex are relatively well- known, the distribution of synaptic inputs on the pyramidal cell and its processes remains to be defined. To identify the possible site(s) of termination of extrinsic (i.e., from the olfactory
bulb) and intrinsic (interneuron) synapses in the pyramidal cell of the piriform cortex (PPC) a three step experiment was performed in each adult rat (n=5). The procedure consisted of a lesion of the bulbar afferent to the piriform cortex, followed by immunocytochemistry to the enzyme glutamic acid decarboxylase prior to epon embedment for electron microscopic observation. Lastly, and in order to define axonal afferents to initial segment, serial sections of the pyramidal cell axon were obtained to realize tridimensional rebuilding with a soft-ware (Reconstruct). So far, our study has disclosed that fibers from the main olfactory bulb terminate in distal processes of the pyramidal cell, whereas GAD-immunoreactive boutons distribute in the soma and proximal processes. Preliminary observations suggest that chandelier-like axon terminals terminate in initial segment of the PPCs axon. All together our observations puts forth that distribution of afferences to PPCs is dictated by their source and is highly predictable Acknowledgements. With the technical assistance of Gema Martnez. Supported by a grant from DGPA.
Jueves 22 de Septiembre
SESIN: CIRCUITOS NEURONALES EN LA FISIOLOGA Y LA PATOLOGA Septiembre 22, 2011
24. ESTMULOS MUSICALES PROVOCAN ACTIVACIONES PREFERENTES EN EL LBULO TEMPORAL: IDENTIFICACIN MEDIANTE RESONANCIA MAGNTICA FUNCIONAL Concha L.1, Angulo-Perkins A.1, Aub W.2, Peretz I.2, Armony J.2, Barrios F.A1. 1 Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. 2 International Laboratory for Brain, Music and Sound Research (BRAMS), Montreal, Qubec, Canad. La msica y la voz humana son estmulos acsticos de particular importancia dada su complejidad y por el tipo de informacin que conllevan, por lo que varias regiones cerebrales son reclutadas para su anlisis. Si bien una gran parte de la infraestructura neural necesaria para el procesamiento de estos estmulos puede ser comn a ambos, es posible que otras regiones especficas se vean activadas preferencialmente ante uno u otro. Ms an, la actividad de tales regiones puede verse modificada secundariamente a la experiencia previa de los sujetos. En este estudio se incluyeron 53 sujetos, 28 de los cuales contaban con educacin musical formal. Se realiz un estudio de resonancia magntica funcional de alta resolucin (223 mm3) en un resonador de 3T utilizando un paradigma de bloques en los que se presentaban estmulos auditivos dentro de varias categoras: msica (piano y violn), voces humanas en varios idiomas, vocalizaciones no lingsticas, sonidos ambientales y vocalizaciones de monos. Los datos fueron analizados mediante un modelo lineal general (p<0.05 corregido), mediante el cual se localizaron regiones que mostraron un incremento en su actividad ante categoras especficas de estmulos. Encontramos una regin bilateral localizada en la porcin anterior del surco temporal superior que responde preferencialmente ante estmulos musicales, en comparacin con vocalizaciones o frases. Ligeramente posterior a esta region, sobre el giro temporal superior derecho, se encontr que esta diferencia en actividad se encuentra acentuada an ms en los msicos, en comparacin con la poblacin general. Nuestros datos muestran que existe una regin que se activa preferencialmente ante estmulos musicales, la cual probablemente detecta caractersticas acsticas que son especficas de la msica. Asmismo, los msicos reclutan una regin ms extensa que la poblacin general en el lbulo temporal, que sobrelapa con el rea del reconocimiento de la voz, mientras escuchan pasajes musicales, demostrando una sobre-especializacin de estas regiones. Agradecemos al M. en C. Leopoldo Gonzlez Santos y al personal de la Unidad de Resonancia Magntica, particularmente al M. en C. Erick Pasaye y el M. en C. Juan Ortiz Retana, por su apoyo durante la adquisicin de datos y su anlisis. Trabajo auspiciado por Conacyt IE252-120295.
25. MECANISMOS ENDGENOS DEL DOLOR Y DE LA ANALGESIA Conds-Lara M. Rojas-Piloni G. y Martnez-Lorenzana G. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Son varios los sistemas que se han descrito que participan en la codificacin, transmisin e integracin de la informacin dolorosa y nociceptiva. En el momento que se activan los sistemas neuronales de alarma que sealan la presencia de un estmulo nociceptivo, tambin se activan estructuras en el sistema nervioso central que se relacionan con la supresin de la activacin nociva. Estos sistemas endgenos que tienen como funcin la supresin de la informacin nociceptiva se relacionan con la analgesia endgena. En este contexto se han estudiado las interacciones tlamo corticales, la activacin elctrica del ncleo paraventricular del hipotlamo (PVN), del ncleo rafe Magnus (RMg), del locus coeruleus (LC) y la accin cortical sobre la actividad de neuronas de la mdula espinal que codifican y transmiten la informacin nociceptiva. Proponemos que todas las estructuras sealadas, forman un sistema endgeno que tiene la finalidad de producir una analgesia que lleva al organismo, que ha recibido una estimulacin nociceptiva, a un estado de homeostasis en el cual la sensacin de dolor disminuye. Para poder integrar esta idea hemos recurrido a experimentos electrofisiolgicos, neuroanatmicos, inmunohistoqumicos y conductuales que nos permiten establecer una relacin entre estructuras y funciones. Nuestros resultados muestran que la estimulacin del PVN, RMg, LC y de la Corteza Cerebral modulan la informacin nociceptiva a nivel del asta dorsal. De la misma manera estas estructuras interactan mostrando fenmenos de sumacin al estimularlas simultneamente. Adicionalmente realizamos la identificacin de diferentes neurotransmisores como responsables de la supresin selectiva de la actividad de fibras aferentes del tipo A-delta y C que son las encargadas de transmitir la informacin nociceptiva. Nuestros experimentos electrofisiolgicos se corroboran con experimentos farmacolgicos y conductuales en los que se observa una disminucin de las respuestas a estmulos nociceptivos en animales en libre movimiento. Nuestros resultados nos pueden conducir a la prctica experimental en el hombre que sufre de dolor crnico incontrolable desprovisto de recursos quirrgicos y farmacolgicos para utilizar nuevas teraputicas que le brinden una mejor calidad de vida. Este proyecto fue parcialmente financiado mediante el proyecto PAPIIT 202610 para GRP. 26. LIBERACIN DE GABA IN VIVO Y CINTICA DE LA PRDIDA DEL TRANSGN EN LA LNEA CELULAR M213-20 CLONA-4 TRANSFECTADA CON EL GEN DE LA GAD67 HUMANA Limn-Pacheco JH1, Meja-Toiber JA1, Gonzlez-Gallardo A2, Giordano M1. 1Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, 2Unidad de Proteogenmica, Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Blvd. Juriquilla 3001, Juriquilla, Quertaro. La lnea celular M231-2O Cl-4 expresa la enzima glutamato descarboxilasa humana (GAD67h) gracias a un plsmido basado en el virus de Epstein-Barr. Esta lnea celular libera GABA en respuesta a un estmulo despolarizante in vitro, y al ser trasplantada en el cerebro reduce las crisis tipo epilptico en animales. No est claro si los efectos funcionales de estos trasplantes se pueden atribuir a la liberacin de GABA por parte de
estos trasplantes y si esta liberacin est relacionada con la cintica del transgn en los trasplantes de largo plazo. Para resolver estos puntos, se hicieron dos experimentos. El primero evalu la liberacin de GABA en el trasplante a travs de microdilisis seguida de anlisis cromatogrfico. Se encontr que la cantidad de GABA liberada y la actividad de la GAD era mayor los trasplantes de la clona con el transgn a las 8 semanas, pero que esta diferencia desaparece a las 12 semanas. El segundo experimento evalu el nmero de copias del plsmido que contiene a la GAD67h por PCR de tiempo real en trasplantes en el hipocampo a los mismos tiempos. Se observ una prdida del plsmido relacionada con el tiempo de trasplante. Se explor el mecanismo por el cual se pierde el plsmido a lo largo del tiempo in vitro. Primero se evalu la ausencia de presin de seleccin y despus la metilacin del DNA. Los resultados sugieren que la prdida de la funcin del transgn en los trasplantes de largo plazo puede deberse a la metilacin de regiones del plsmido que estn involucradas en su retencin nuclear. Con base en estos datos proponemos que los efectos funcionales de los trasplantes de la lnea M213-2O Cl-4 que se han reportado no se pueden atribuir de manera exclusiva al incremento en la liberacin de GABA en el rea del trasplante y que una accin tipo paracrino del GABA puede llevar a la remodelacin de circuitos neuronales en el husped. Agradecemos apoyo tcnico a Biol. Soledad Mendoza Trejo y a IBQ Marcela Snchez. Trabajo auspiciado por CONACYT (103907), DGAPA-UNAM PAPIIT (211709) y a la beca postdoctoral de DGAPA otorgada a JHLP.
27. PROCESAMIENTO DEL PASO DEL TIEMPO EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DEL PRIMATE Hugo Merchant, Wilbert Zarco, Ramn Bartolo, Oswaldo Prez, Juan Carlos Mndez, Germn Mendoza y Luis Prado. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. En este trabajo se presenta una visin general del programa de investigacin que llevamos a cabo en el laboratorio de Neurofisiologa de Sistemas en Primates del INB. Nuestras investigaciones se centran en entender cmo el sistema nervioso de los primates, humanos y no humanos, representa el paso del tiempo en la escala de los cientos de los milisegundos. Escogimos esta escala temporal por su papel crucial en conductas de alto orden como el lenguaje, la msica y la danza. Utilizando tcnicas de psicofsica en diversos paradigmas de percepcin de la duracin de intervalos, as como en tareas de ejecucin rtmica de patrones temporales, encontramos evidencia indirecta de la existencia de un mecanismo de cuantificacin temporal parcialmente distribuido. Esto implica que el reloj endgeno depende tanto de un circuito temporal maestro involucrado en el procesamiento del tiempo en una amplia gama de contextos, como de una serie de estructuras que se integran a la red dependiendo de la tarea temporal que realiza el sujeto. De hecho, estudios de imagen funcional han sugerido que circuito corteza-ganglios-basales-tlamo es el circuito temporal maestro. Con el fin de probar esta hiptesis se realizaron registros electrofisiolgicos en diversas reas corticales en monos realizando tareas de produccin de intervalos. Los resultados ms importantes son los siguientes: (1) Una poblacin de neuronas en las reas premotoras mediales (APM) representan el tiempo transcurrido o el tiempo que resta para realizar un movimiento temporalizado. Estas poblaciones interaccionan de manera cclica cuando el animal ejecuta patrones rtmicos de movimiento guiados por estmulos externos o internamente generados. (2) Otra poblacin neuronal en estas estructuras se sintoniza a la duracin y al orden secuencial de los intervalos producidos por el mono.
Este hallazgo sugiere que las APM codifican la estructura temporal y ordinal de patrones rtmicos de movimiento en tareas estrechamente relacionadas con la ejecucin musical. (3) Las neuronas sintonizadas a la duracin responden de manera similar durante tareas de produccin de intervalos mltiples o nicos, guiados por estmulos visuales o auditivos. Estas respuestas bimodales e independientes del contexto de ejecucin temporal sugieren que las APM son parte fundamental del circuito temporal maestro. Agradecemos la asistencia tcnica de Juan Ortz y Ral Pauln. Trabajo financiado por PAPITT: IN200511-22 y CONACYT 053944.
28. FISIOPATOLOGA DE CIRCUITOS NEURONALES Pea-Ortega F., Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa. La investigacin que se desarrolla en el laboratorio C-01 se propone determinar las bases celulares involucradas en la generacin de la actividad coordinada de grupos de neuronas. Dicha actividad poblacional representa la base operacional de muchos circuitos neuronales que se traduce en la generacin de conductas en condiciones normales o que puede relacionarse con las alteraciones observadas en varios desordenes neurolgicos. Por ello, estudiamos a los circuitos neuronales tanto en condiciones normales como sus alteraciones en condiciones patolgicas. Esto, con el uso de un abordaje experimental integral que permite correlacionar hallazgos obtenidos de experimentos conductuales, con evidencias obtenidas de registros de la actividad de poblaciones neuronales, de neuronas individuales e incluso de canales inicos especficos. El objetivo general de este tipo de investigacin es el de identificar los mecanismos intrnsecos y sinpticos que participan en la actividad integrada de ciertos circuitos neuronales (lo que subyace conductas especficas), as como identificar las alteraciones en estos mecanismos que determinan las disfuncin de estos circuitos en condiciones patolgicas (lo que subyace sntomas neurolgicos especficos). Esto permite, por una parte, establecer el correlato celular de los sntomas de algunas patologas nerviosas y, por otra parte, identifica blancos teraputicos para tratarlos. Para estos estudios utilizamos tcnicas bioqumicas, electrofisiolgicas y de fluorescencia en modelos animales tanto in vitro como in vivo. En concreto, actualmente estudiamos el papel de los distintos tipos neuronales (neuronas piramidales e interneuronas), as como sus interacciones sinpticas, en la generacin de actividad poblacional en circuitos del cerebro anterior, as como las alteraciones que produce la protena beta amiloide sobre los componentes de estos circuitos. Por otra parte, estudiamos al generador del ritmo respiratorio, alojado en el Complejo preBtzinger, con el uso del mismo abordaje experimental y con el fin de caracterizar los eventos celulares involucrados en el proceso de reconfiguracin que sufre este circuito durante la transicin a condiciones de hipoxia tanto in vitro como in vivo. Este proceso de reconfiguracin es relevante para la generacin de un tipo particular de respiracin, llamada boqueo, que es fundamental para la autoresuscitacin despus de condiciones de hipoxia. En ambos proyectos, nos interesa determinar las propiedades intrnsecas y sinpticas involucradas en la funcin de estos circuitos, as como de sus alteraciones en condiciones patolgicas controladas. Apoyos: DGAPA IA201511; CONACyT 59187,151261; Alzheimers Association NIRG-11205443.
29. REDES NEURONALES PLSTICAS Dr. Vctor Ramrez-Amaya Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El concepto de cdigo poblacional implica que las neuronas que son parte de los circuitos que procesan y almacenan la informacin que se adquiere de la experiencia, llevan a cabo modificaciones en la resistencia de la transmisin, especficamente en las sinapsis que componen el circuito. A pesar de que esta nocin hoy permea en las neurociencias cognoscitivas con mucha claridad, actualmente desconocemos quines y cuntas son las unidades neuronales que llevan a cabo modificaciones en su conectividad, y quines son las responsables de reproducir los patrones de actividad durante la recuperacin de informacin o lo que llamamos recuerdo. Tampoco sabemos cules son los circuitos indispensables para que la recuperacin de informacin d lugar a una conducta eficiente. Por tanto, el inters principal del laboratorio es identificar con precisin los circuitos neuronales responsables de almacenar la informacin. Para ello recurrimos a tcnicas de imaginologa con microscopa confocal y semi-confocal, con las que visualizamos, en preparaciones histolgicas, la expresin de genes tempranos que nos ayudan a monitorear la actividad neuronal (en diferentes tipos de neuronas) y la expresin o actividad de diversas protenas involucradas en plasticidad sinptica; tambin tenemos estrategias para visualizar las modificaciones estructurales en las clulas que responden con actividad neuronal a la conducta y estamos desarrollando mtodos para hacerlo en el animal vivo con microscopa confocal multifotnica (MCM) mediante el uso de un ratn transgnico que expresa GFP horas despus de la actividad neuronal. En colaboracin con el lab del Dr. Haruki Bito & Hiroyuki Okuno de la Univ. de Tokio, estamos desarrollando dos ratones transgnicos, el primero es una herramienta que nos permitir identificar histolgicamente (con lo que se construirn mapas) e in vivo (con microscopa confocal multifotnica) las neuronas que se activaron por un estimulo que ocurre en una ventana temporal de ~20min, delimitada por la administracin de 2 frmacos, las cuales se mantendrn marcadas constitutivamente por el resto de la vida del animal, lo que nos permitir comparar la identidad de las neuronas que adquirieron la informacin con aquellas que se activan durante el recuerdo. El segundo ratn esta diseado para destruir las neuronas que se activan por la conducta con la incidencia de luz directamente en el animal vivo, con lo que evaluaremos si estos circuitos son necesarios para la ejecucin de la conducta.
JORNADAS
xviii Edicin
Acadmicas
eXpo
cartel
Septiembre 19 al 22, 2011 5:00 a 7:30 PM
SESIN: Lunes 19 de Septiembre Carteles Exhibidos: Nmero 1 al 24 SESIN: Martes 20 de Septiembre Carteles Exhibidos: Nmero 25 al 48 SESIN: Mircoles 21 de Septiembre Carteles Exhibidos: Nmero 49 al 72 SESIN: Jueves 22 de Septiembre Carteles Exhibidos: Nmero 73 al 94
Los resmenes incluidos en esta Memoria son responsabilidad de sus autores.
Lunes 19 de Septiembre, Cartel 1 al 24
Septiembre 19, 2011
1. IDENTIDAD MOLECULAR DE ELEMENTOS QUE PARTICIPAN EN LA SEALIZACIN PURINRGICA EN EL FOLCULO OVRICO DE Xenopus Acosta -Marroqun M.A., Garca-Villegas R., Garay E., Vzquez-Cuevas F.G., and Arellano R.O. , Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM. El ATP y la Adenosina (Ado) son los transmisores principales del sistema purinrgico de sealizacin, y su estimulacin genera respuestas celulares importantes en la fisiologa del ovario. Especficamente, es conocido que la respuesta elctrica a ATP en el folculo de Xenopus incluye la apertura de canales de Cl- dependientes de calcio (Ca2+) (ICl(Ca)) localizados en la membrana de las clulas foliculares. Su apertura genera la respuesta denominada corriente FCl, la cual presenta cinticas rpidas de activacin e inactivacin. Esta es generada por la estimulacin de receptores tipo P2Y que activan a la fosfolipasa C (PLC) a travs de una protena G. Hasta el momento no es conocida la identidad molecular del receptor tipo P2Y que genera la corriente FCl ni tampoco han sido caracterizados farmacolgicamente los canales de cloro dependientes de Ca2+ que participan. En el presente trabajo se busca determinar: 1) si el receptor tipo P2Y8, cuyo mARN se expresa en las clulas foliculares participa o no en la generacin de FCl, y 2) si el perfil farmacolgico de FCl es similar al observado en otros modelos, donde los canales parecen ser formados por la protena TMEM16A utilizando frmacos con funcin bloqueadora para canales de cloro dependientes de calcio como cido niflmico, el cido niflmico (Ac. Nif.), el cido 9antraceno carboxlico (A9C) y, el 5-nitro-2-(3-fenilpropilamino)-benzoato (NPPB). Para lograr el objetivo 1, nos encontramos estandarizados mtodos de transfeccin en los folculos de Xenopus, y la subsecuente utilizacin de secuencias antisentido especficas contra P2Y8 con la finalidad de reducir su expresin, y evaluar su efecto sobre la generacin de FCl. Mientras que resultados abordando el segundo objetivo muestran que farmacolgicamente los canales de cloro dependientes de Ca2+ foliculares se comportan de manera similar a los observados en otros modelos, incluidos los canales expresados en el ovocito de Xenopus. Beca CONACYT a MAAM (366315). Trabajo auspiciado por CONACYT-Mxico, 53379. M
2. LA PROLACTINA PREVIENE LA APOPTOSIS DE LOS CONDROCITOS INDUCIDA POR CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS TANTO IN VIVO COMO IN VITRO Adn N.,1 Ledesma-Colunga M.G.,1 Guzmn-Morales J.,1 Quintanar-Stephano A.,2 Lpez-Barrera F.,1 Martnez de la Escalera G.,1 y Clapp C.1 1Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa, UNAM. Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. 2Centro de Ciencias Bsicas, Universidad Autnoma de Aguascalientes, Aguascalientes, Mxico. La apoptosis de los condrocitos participa en la destruccin del cartlago durante la osificacin endocondral, el envejecimiento y las artropatas inflamatorias. La prolactina (PRL), est presente en el lquido sinovial y protege a los condrocitos contra la apoptosis inducida por bajo suero en el medio de cultivo. En este trabajo investigamos la accin in vivo de la PRL
sobre la supervivencia de los condrocitos a travs de determinar si el incremento en los niveles de PRL circulante inhibe la apoptosis de los condrocitos inducida por la inyeccin intra-articular de una mezcla de citocinas pro-inflamatorias (TNF-, IL-1 e INF-). Ratas macho de la cepa Lewis fueron implantadas con dos adenohipfisis bajo la cpsula renal para incrementar los niveles de PRL circulante. Trece das despus, los animales fueron inyectados con las citocinas y sacrificados a las 48 horas. La apoptosis fue evaluada mediante la tcnica de TUNEL sobre secciones de rodillas includas en parafina. La presencia de implantes adenohipofisiarios result en el incremento significativo de la PRL circulante que fue prevenido por el tratamiento con bromocriptina, un agonista del receptor a dopamina D2, que inhibe la liberacin adenohipofisiaria de la PRL. Las citocinas indujeron la apoptosis de los condrocitos localizados en el margen externo del cartlago articular. La hiperprolactinemia inducida por los implantes adenohipofisiarios previno la apoptosis de los condrocitos inducida por citocinas y el tratamiento con bromocriptina inhibi el efecto protector de los implantes adehohipofisiarios. Consistente con su efecto in vivo, la PRL inhibi la apoptosis de los condrocitos en cultivo inducida por 24 horas de tratamiento con la misma mezcla de citocinas; evaluado mediante la deteccin de fragmentos nucleosomales por ELISA, y la presencia de la caspasa-3 activa por Western blot. Asimismo, la PRL previno el incremento inducido por las citocinas tanto de la expresin de p53 como del cociente Bax/Bcl-2 evaluados mediante qRT-PCR y Western blot, respectivamente. Estos resultados demuestran que la PRL puede actuar como un factor de supervivencia en condrocitos y pone de manifiesto su valor teraputico potencial en artropatas inflamatorias caracterizadas por la degradacin del cartlago. Agradecemos la asistencia tcnica de Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Trabajo auspiciado por DGAPA-IN200509. D 3. EXPRESIN LOCAL Y EFECTOS ESTEROIDOGNICOS DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO EN EL OVARIO DE LA GALLINA Y EN LAS CLULAS DE LA GRANULOSA FOLICULARES (CG). Ahumada-Solrzano, M1, Carranza, M1, Rodrguez-Mndez, A2, Courtois, G1, Luna, M1, Armburo, C1. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, 1.Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Campus Juriquilla; Departamento de Investigacin Biomdica, 2. Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Quertaro, Quertaro, Qro. El desarrollo folicular en la etapa preovulatoria (F2) es regulado principalmente por gonadotropinas (FSH, LH), esteroides (progesterona, estradiol y testosterona), as como por factores intraovricos (EGF, IGF, etc.). En este trabajo se analiz el papel de la hormona de crecimiento (GH) en la regulacin de la produccin de progesterona (esteroidognesis celular), y la proliferacin de las clulas de la granulosa del ovario de gallina. Se utilizaron animales de 35-48 semanas de edad y diferentes estadios de desarrollo folicular (F4 reclutado y F2 preovulatorio). Tanto la expresin del mRNA (por hibridacin in situ) como la presencia de la protena de GH (por inmunohistoqumica) fueron detectadas principalmente en las CG y en menor proporcin en las clulas de la teca de la pared folicular. La secuencia del cDNA de GH de los folculos F2 y F4 fue bsicamente idntica a la obtenida a partir de hipfisis. Adems observamos diversas variantes de peso molecular de la GH (por SDS-PAGE y Western blot) en la pared folicular, donde la principal isoforma mostrada fue una de 17 kDa en todos los estadios foliculares. Por otro lado, en cultivos primarios de CG la adicin de GH (0.1, 1, 10 nM) estimula la sntesis de progesterona (P4) en forma dependiente de la dosis (1.5, 2.9, 5.4 veces, respectivamente). Adems la GH tambin estimul la expresin de la
enzima citocromo P450scc que regula el rompimiento de la cadena lateral del colesterol (3, 4.6, 5, veces, respectivamente), la cual es un enzima reguladora en la produccin de metabolitos durante la esteroidognesis, mientras que la sntesis de 3-hidroxiesteroidedeshidrogenasa (3-HSD) que una enzima constitutiva no mostr cambios por el tratamiento con GH. La expresin local de GH estimul la proliferacin de las CG en estos cultivos, as como la produccin de P4 (1.2, 2.2, 4.4 veces) al adicionar el medio condicionado en concentraciones 4X, 6X y 8X, respectivamente. Estos datos sugieren y apoyan la nocin de que la GH producida localmente puede modular el desarrollo folicular a travs de efectos autocrinos/paracrinos de esteroidognesis y proliferacin en el ovario. Agradecimientos: CONACYT (60296N & 161791) y PAPIIT-UNAM (IN210209). Asistencia tcnica:,E. Nydia Hernndez, Anaid Antaramin, Adriana Gonzlez, Jorge Limn. D
4. ONTOGENIA DE LA ACTIVIDAD ESPONTANEA DEL BULBO OLFATORIO Y SU MODULACIN POR LA PROTENA BETA-AMILOIDE Alvarado-Martnez R.A.1 y Pea-Ortega F1. 1Laboratorio C-01 Circuitos Neuronales, Dept. Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Una disminucin en la capacidad olfatoria ha sido identificada como signo clnico temprano de la enfermedad de Alzheimer. Nuestro grupo de trabajo ha reportado que la protena betaamiloide (PA) afecta la actividad oscilatoria de algunos circuitos neuronales y, a travs de ello, altera las funciones cerebrales asociadas con los mismos. En este trabajo hipotetizamos que las alteraciones en la olfaccin pudieran deberse tambin a la alteracin, mediada por la PA, de los patrones de oscilacin generados en el bulbo olfatorio (BO). Para ello, de manera inicial, se caracteriz la actividad oscilatoria del BO durante el desarrollo postnatal y, posteriormente, se evalu el efecto la PA sobre la misma. Inicialmente, se caracteriz la actividad espontanea del BO en rebanadas obtenidas de ratones macho con una edad de tres semanas. En estas condiciones el BO mostr actividad oscilatoria caracterizada por componentes de frecuencia baja (< 20 Hz), que no son afectados por la aplicacin de PA in vitro. En virtud de que estudios previos de nuestro laboratorio han demostrado que los efectos de la PA sobre la actividad del hipocampo dependen de la edad, decidimos emplear ratones de mayor edad (8 semanas). En animales mayores, la actividad del BO in vitro, exhibi notables diferencias con el grupo de 3 semanas. Primeramente, la actividad del BO evolucion a un patrn constituido por componentes de frecuencia mayor (20- 40 Hz). Por otra parte, esta actividad fue inhibida por la aplicacin de la PA a diferentes concentraciones (3 nM, 10 nM y 30 nM). Un anlisis por bandas de frecuencia (1-4, 5-10, 11-20 y 21-50 Hz) revel que la PA altera de manera generalizada a todo el espectro de frecuencias. Nuestros datos sugieren que la inhibicin de la actividad oscilatoria del BO, producida por la PA, puede deberse al estado de madurez del circuito BO y puede contribuir a la disminucin de la funcin olfatoria observada en la enfermedad de Alzheimer. Apoyos: DGAPA IA201511; CONACyT 59187,151261; Alzheimers Association NIRG-11205443. M
5. EFECTO DE LA CORTICOSTERONA EN EL ESTRIADO DORSAL DE LA RATA WISTAR SOBRE LA MEMORIA ASOCIADA AL CONDICIONAMIENTO DEL MIEDO AL TONO Arenas V.A. 1, Serafn N.1, Prado-Alcal R.A.1, Roozendaal, B.2 y Quirarte, G.L.1 1Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Qro. Mxico y 2Department of Neuroscience, Section Anatomy, University Medical Center Groningen, Groningen, Netherlands. Existen evidencias que demuestran que el estriado participa en el aprendizaje de procedimiento, aprendizaje de hbitos, asociacin de estmulos-respuestas y aprendizaje emocional (Ferreira et al., 2008). Por otra parte, existen evidencias que confirman el papel regulador de los glucocorticoides en la consolidacin de la memoria (Hui et al., 2004), adems del efecto dosis-dependiente producidos por los mismos; es por ello que se ha sugerido que la administracin de corticosterona (CORT) en el estriado pudiera facilitar la consolidacin de memoria asociada a una tarea de condicionamiento del miedo al tono (CMT). Para someter esta hiptesis a la prueba experimental se utilizaron cuatro grupos de ratas macho adultas de la cepa Wistar a las que se les implant bilateralmente cnulas en el estriado. Tras una semana de recuperacin, las ratas fueron entrenadas en la tarea de CMT, que consisti en la administracin de un tono (85 dB) seguido de un choque (0.7 mA). El protocolo const de 5 asociaciones del tono con el choque con intervalos de dos minutos. Inmediatamente despus se les administr CORT (5, 10 o 20 ng) o vehculo (solucin de salina y etanol). La prueba de retencin se realiz 48 horas despus. Se registraron los porcentajes de congelamiento, definido como la ausencia visible total de movimiento, excepto la respiracin. El anlisis estadstico mostr diferencias significativas entre la sesin de entrenamiento y la de prueba, lo que indica que la tarea se adquiri. La prueba mostr diferencias significativas en los porcentajes de congelamiento de los grupos a los que se administr 10 y 20 ng de CORT con respecto al grupo control y no as con el grupo que recibi la dosis de 5 ng, esto sugiere facilitacin de la memoria de la tarea de CMT. Estos hallazgos permiten sugerir la participacin de los receptores a glucocorticoides del estriado dorsal en la consolidacin de esta tarea. Agradecemos la asistencia tcnica de Martn Garca, ngel Mndez, Cristina Medina, Omar Gonzlez, Ramn Martnez y Leonor Casanova. Trabajo apoyado por PAPIIT-UNAM (IN214111) y CONACYT (Donativo 130524 y beca a V.A.A). L 6. ESTUDIO IN VITRO E IN VIVO DEL EFECTO INHIBITORIO DE LAS VASOINHIBINAS SOBRE LA PERMEABILIDAD ENDOTELIAL INDUCIDA POR LA BRADICININA Arredondo Zamarripa D., Arnold E., Garca C., Martnez de la Escalera G., Clapp C. y Thbault S. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa, UNAM. Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Las vasoinhibinas son pptidos derivados de la hormona prolactina capaces de prevenir el incremento de la permeabilidad vascular retiniana (PVR) asociada a la diabetes. En pacientes diabticos el incremento de la PVR se ha relacionado a distintos factores entre ellos la bradicinina (BK). En este trabajo investigamos si las vasoinhibinas inhiben el incremento de la PVR inducido por la BK, as como las vas de sealizacin involucradas en este efecto. La PVR se cuantific mediante el mtodo de azul de Evans en ratas Wistar 24 h despus de ser inyectadas intravitrealmente con BK (50 ng) sola o combinada con vasoinhibinas (1 ug) en 5 l de PBS. La inyeccin intravitreal de BK induce el incremento de la PVR en
comparacin con el control, incremento que fue bloqueado cuando la BK se co-inyect con vasoinhibinas. Con el fin de elucidar algunos de los mecanismos involucrados en este efecto, se cultivaron clulas de la vena umbilical de bovino (BUVEC) en filtros semipermeables de policarbonato hasta formar una monocapa. Las modificaciones en la permeabilidad de la monocapa por la BK (10 uM) sola o combinada con vasoinhibinas (10 nM), se determinaron utilizando la peroxidasa de rbano (HRP) como trazador. La participacin del xido ntrico (NO) se explor farmacolgicamente utilizando un donador y un inhibidor de la sntesis de NO, DETANONO-atos y L-NAME respectivamente. Las vasoinhibinas previenen el incremento de la permeabilidad endotelial inducida por la BK, efecto que se revierte en presencia del DETANONO-ato mientras que el L-NAME mostr un efecto similar al de las vasoinhibinas. Mediante Western-blot de lisados de clulas BUVEC se observ que la BK promueve la fosforilacin de la sintetasa endotelial de NO (eNOS) en el residuo de serina 1179, fosforilacin que se revierte en presencia de vasoinhibinas. En conclusin las vasoinhibinas reducen el incremento de la permeabilidad endotelial inducida por la BK al disminuir los niveles de NO, este podra ser el mecanismo por el cual las vasoinhibinas inhiben el incremento de la PVR inducida por la BK. Agradecemos la asistencia tcnica de Fernando Lpez, Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Proyecto auspiciado por UNAM- IN202209-20. D 7. LA REPETICIN DE LA ESTIMULACIN SEXUAL REGULADA INCREMENTA LA NEUROGNESIS EN EL BULBO OLFATORIO DE LA RATA HEMBRA. Arzate-Vzquez, D.M.; Portillo, W.; Corona R. y Paredes R.G. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla. Nuestro grupo de investigacin ha descrito que una sola experiencia sexual en condiciones de cpula regulada genera una mayor cantidad de clulas nuevas en la capa celular interna del bulbo olfatorio accesorio (BOA) de la rata hembra en comparacin con las hembras que copulan sin regular la interaccin sexual, aquellas expuestas al olor del macho y las sexualmente inexpertas. El aumento en el nmero de clulas nuevas propone que la cpula regulada por la hembra es un estmulo capaz de potenciar la neurognesis en el bulbo olfatorio. El objetivo de este trabajo consisti en evaluar el efecto de la cpula regulada repetida durante el periodo de migracin celular (15 das). Ratas hembra adultas ovariectomizadas y con reemplazo hormonal de estradiol (25 mg/rata) y progesterona (1 mg/rata) fueron divididas aleatoriamente en cuatro grupos: 1) sin contacto sexual (control), 2) una sola sesin de cpula regulada, 3) cuatro sesiones de cpula regulada y 4) cuatro sesiones de cpula no regulada. Tambin se incluy un grupo de hembras intactas sin contacto sexual. Los cinco grupos fueron administrados intraperitonealmente con el marcador de proliferacin celular bromodeoxiuridina en una dosis de 300 mg/kg el primer da del experimento. Los resultados obtenidos muestran un aumento en el nmero de clulas nuevas en la capa celular interna del BOA (p<0.001), y en la capa granular del bulbo olfatorio principal (p<0.001) en el grupo de cuatro sesiones de contacto sexual regulado con respecto a todos los grupos. Esto sugiere que la repeticin de la estimulacin sexual regulada incrementa la migracin o la sobrevivencia de las clulas nuevas originadas durante el primer contacto sexual. Agradecemos la colaboracin tcnica de Francisco Camacho. Apoyado por CONACYT 53547 y DGAPA IN213609. M
8. CARACTERIZACIN DE NEURONAS CATECOLAMINRGICAS MIGRATORIAS DEL MESENCFALO DORSAL vila Gonzlez, D., Garca-Pea, C.M., Tamariz, E*., y Varela Echavarra, A. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. *Departamento de Biomedicina, Instituto de Ciencias de la Salud, Universidad Veracruzana, Xalapa Ver. Mxico RESUMEN Las primeras neuronas catecolaminrgicas se detectan en el romboencfalo y en el mesencfalo ventral por la expresin de hidroxilasa de tirosina (TH), entre los estadios embrionarios (E) 12 y E14 de la rata. En nuestros estudios detectamos en estadios ms tempranos (E11) en la zona del mesencfalo dorsal, la presencia de una nueva poblacin de clulas TH+ cuya morfologa y orientacin sugiri que migraban tangencialmente hacia el rombencfalo. El objetivo de este trabajo fue dilucidar el origen y destino de esta poblacin, caracterizar su fenotipo e identificar los posibles mecanismos que permiten su desplazamiento. Utilizando el trazador celular fluorescente CFDA (diacetato de carboxiflourescena), se marcaron clulas en el mesencfalo dorsal en embriones de rata en cultivo y posteriormente se analiz su migracin. Se observaron clulas CFDA+/TH+ desplazadas caudalmente, algunas de las cuales llegaron hasta el rombencfalo. Se encontr que estas clulas TH+ no expresan marcadores de neuronas noradrenrgicas y del locus coeruleus (-hidroxilasa de dopamina, Phox2a, Phox2b y DCC), pero expresan el marcador mesenceflico Otx2, cuya expresin se detiene poco antes de migrar al rombencfalo. Tambin se observ que las clulas migratorias estn siempre asociadas a axones del tracto mesencfalico del V par craneal (TmesV), revelado por inmunotincin con -III-Tubulina y DCC. La alteracin de la proyeccin de los axones del TmesV en embriones en cultivo indujo alteracin concomitante en la distribucin y orientacin de las clulas migratorias que, sin embargo, permanecieron asociadas a los axones. Esto sugiere que las clulas TH+ del mesencfalo dorsal utilizan el TmesV como sustrato para la migracin neuroflica. AGRADECIMIENTOS A Elsa Nydia Hernndez, Martn Garca Servn, Omar Gonzlez, Ramn Martnez Olvera, Alberto Lara, Lourdes Lara y Leonor Casanova Rico. FINANCIAMIENTO IMPULSA02-UNAM, DGAPA 217810-21 CONACYT 82482, y becas CONACYT (231731 y 173228). M 9. CLONACIN MOLECULAR DE LAS HORMONAS DEL EJE SOMATOTRPICO DE IGUANA VERDE vila-Mendoza J., Carranza M., Luna M. y Armburo C. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El eje somatotrpico es el principal regulador endocrino del crecimiento en vertebrados e involucra principalmente al hipotlamo, la hipfisis, el hgado y el msculo. En la regulacin de este eje participan diversas hormonas hipotalmicas que incluyen a la hormona liberadora de hormona del crecimiento (GHRH), el pptido activador de la adenilato ciclasa hipofisiaria (PACAP), la hormona estimuladora de tirotropos (TRH), la somatostatina (SST), adems la hormona del crecimiento (GH) y el factor de crecimiento similar a insulina tipo I (IGF-I). En reptiles, existen pocos estudios en cuanto a la caracterizacin molecular de
estas hormonas. En el presente estudio se caracteriz el cDNA que codifica para cada una de ellas, a fin de poder evaluar posteriormente las interacciones entre los diferentes componentes del este eje as como la influencia de factores externos. Mediante RT-PCR y empleando oligonucletidos degenerados para cada una de las hormonas, se obtuvieron productos de amplificacin de 500 pb para GHRH, 550 pb para PACAP, 800 pb para TRH, 370 pb parra SST y 312 pb para IGFI. De estos se obtuvo la secuencia de TRH e IGF-I. La secuencia de TRH corresponde al extremo amino terminal de la estructura primaria de la hormona, incluyendo tambin la regin 3 no traducible. La secuencia codifica para un pptido de 147 aa en los cuales hay 5 copias de TRH, de las 7 posibles que comprenden el pptido total. El fragmento de IGFI obtenido codifica para un precursor de 104 aa. Este pptido contiene casi el total de la protena madura (70 aa) aunque falta secuenciar los ltimos 11 aa del extremo carboxilo terminal. El IGFI es un pptido muy conservado a lo largo de la escala filogentica y muestra un porcentaje de identidad por arriba del 50 % entre diferentes especies incluyendo peces, anfibios, reptiles, aves y mamferos. Estos son resultados preliminares que permitirn disear una estrategia experimental para cuantificar la expresin de estas hormonas en respuesta a variaciones de diferentes condiciones medioambientales. Apoyos PAPIIT-UNAM IN21029 y CONACYT F1-60296 y 267642. D
10. ANLISIS DE LA RELEVANCIA FUNCIONAL DE LA PROLACTINA PRODUCIDA POR EL EPITELIO PIGMENTARIO RETINIANO Baeza-Cruz G., Arnold E., Nava G., Clapp C., y Thebault S. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El epitelio pigmentario de la retina (EPR), es una de las capas que conforman la retina, sta presenta una resistencia paracelular diez veces ms alta que su resistencia transcelular, la cual lo define como parte de la barrera hematoretiniana, esencial para la visin. Diversos factores secretados por el EPR contribuyen en la regulacin de su permeabilidad. Dado que la prolactina (PRL), as como las vasoinhibinas (fragmentos de PRL con propiedades antiangiognicas) estn presentes en una lnea celular derivada del EPR humano (ARPE19) y que se sabe que regula la permeabilidad de varios epitelios como el de la glndula mamaria y el del intestino, postulamos que la PRL podra regular la permeabilidad de las clulas ARPE-19. En este trabajo, determinamos que la PRL recombinante humana aumenta la permeabilidad paracelular a dosis de 1,10 y 100 nM en cultivos de clulas ARPE-19 a partir de los 30 min. Tambin observamos que el dao oxidativo con H2O2 aumenta la permeabilidad paracelular y que este aumento no se ve afectado por la PRL. Adems, las vasoinhibinas no modifican la permeabilidad paracelular en las clulas ARPE19 en condiciones normales ni en condiciones de dao oxidativo. Con el fin de llevar estas observaciones de un modelo in vitro a uno in vivo, detectamos la presencia de la PRL y de su receptor en el EPR de la rata mediante inmuhistoqumica. Consideramos que nuestros resultados apuntan hacia la participacin funcional de la PRL en el EPR, y por lo tanto pueden contribuir a la prevencin de su deterioro, por lo que tienen implicaciones clnicas potenciales. Agradecemos la asistencia tcnica de Fernando Lpez, Daniel Mondragn, y Antonio Prado. Trabajo auspiciado por CONACYT 81150. M
11. LOS OLIGMEROS DE LA PROTENA BETA AMILOIDE DISMINUYEN LA ACTIVIDAD ESPONTNEA DEL HIPOCAMPO A TRAVS DE LA VA DE SEALIZACIN INTEGRINAS/FAK/FYN/GSK3. Balleza-Tapia H1, Adaya-Villanueva AF2, Calvo-Venegas F2 y Pea-Ortega F1. 1Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro. 2Departamento de Farmacobiologa, CINVESTAV-SUR, Mxico-DF. La Enfermedad de Alzheimer est relacionada con una disfuncin en el funcionamiento de la red hipocampal producida, en parte, por la protena beta amiloide soluble. Recientemente, hemos demostrado que una solucin oligomerizada de Ab1-42 (soAb) disminuye la actividad espontnea de la red hipocampal (AERH). As mismo, tambin demostramos que dicha disminucin no se manifiesta en rebanadas de hipocampo de ratones carentes de la cinasa Fyn (FynKO). Dada la evidencia, nos propusimos caracterizar la va de sealizacin intracelular y el receptor asociado con la disminucin en la AERH inducida por la soAb Para ello, se realizaron registros extracelulares de campo de la AERH en el rea CA1 de rebanadas de hipocampo y se evalu el efecto de la soAb en presencia o ausencia de antagonistas o inhibidores especficos de receptores de membrana y de cinasas, respectivamente. Los resultados mostraron que el antagonista de integrinas, equistatina, previene el efecto inhibidor de la soAb sobre la AERH. En concordancia con nuestros resultados previos, se observ que dicho efecto inhibidor no se observa en presencia de PP2, un inhibidor de Fyn, as como en rebanadas de hipocampo de ratones FynKO. Dado que las integrinas pueden activar a Fyn a travs de la cinasa FAK, probamos si un inhibidor especfico de FAK (PF5732289) era capaz de prevenir el efecto de la soAb. Los resultados muestran que el inhibidor bloquea completamente el efecto de la soAb sobre la AERH. Finalmente, probamos si la cinasa GSK3, normalmente activada por la cinasa Fyn, participa en la va de sealizacin activada por la soAb. Encontramos que el inhibir a esta cinasa de manera aguda o crnica, previene el efecto de la soAb. Ms an, la activacin indirecta de la GSK3, con wortmanina, induce un efecto inhibitorio similar al producido por la soAb y ocluye el efecto de la misma. Para corroborar estos resultados electrofisiolgicos, demostramos que, bajo las mismas condiciones experimentales, la soAb incrementa la fosforilacin en tirosinas de la GSK3, de manera dependiente de Fyn. En conclusin, nuestros resultados sugieren que la soAb altera la AERH a travs de la activacin de la va de sealizacin integrinas/FAK/Fyn/GSK3. Apoyos: DGAPA IA201511; CONACyT 59187,151261; Alzheimers Association NIRG-11205443. D 12. EFECTOS DE LA EXPOSICIN CRNICA Y SIMULTNEA AL ARSNICO INORGNICO Y ATRAZINA SOBRE EL SISTEMA NIGROESTRIATAL Bardullas U., Giordano M. y Rodrguez V. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Existen una gran cantidad de sustancias txicas a las que podemos estar expuestos ya sea por periodos prolongados o de manera ocasional, lo cual se ha relacionado como factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades neurodegenerativas. A pesar de lo anterior, pocos son los estudios toxicolgicos en la literatura que refieren los efectos de la exposicin crnica y simultnea a mltiples sustancias. La atrazina (ATR) es de los herbicidas ms utilizados mundialmente y ha sido implicado como un potencial txico para el sistema
dopaminrgico. Por otro lado el arsnico inorgnico (Asi) es un metaloide distribuido de manera natural en nuestro pas y diversos reportes ubican al sistema nigroestriatal como uno de sus blancos. Por lo anterior, en este estudio evaluamos desde una perspectiva relevante al medio ambiente, el efecto txico de la interaccin de dos sustancias distribuidas en nuestra geografa, a travs de la exposicin prolongada a dosis bajas, sobre el sistema nigroestriatal de la rata albina. Sesenta ratas macho Sprague-Dawley recin destetados se trataron con 0.5 50 mg Asi/L de agua de bebida, 10 mg ATR/kg en forma de pellets de comida y la combinacin de Asi y ATR durante doce meses. El tratamiento individual con 50 mg Asi/L y ATR tuvo efectos opuestos disminuyendo significativamente la actividad locomotora en un caso y aumentndola en el otro. La coexposicin Asi + ATR no gener alteraciones en esta conducta, lo que sugiere una interaccin de tipo antagnica. Todos los tratamientos alteraron significativamente la coordinacin motora. Finalmente la coexposicin con ATR y As disminuy de forma aditiva el contenido de dopamina estriatal. En resumen los resultados sugieren que la coexposicin crnica al As y ATR muestra diferentes formas de interaccin toxicolgica dependiendo del parmetro analizado. Agradecemos la asistencia tcnica de Biol. Soledad Mendoza. Trabajo auspiciado por PAPIIT 214608-19 y CONACYT 60662. D 13. SEGUIMIENTO DEL DESEMPEO PSICOMOTOR DE BEBS PREMATUROS CON LEUCOMALACIA PERIVENTRICULAR TRATADOS CON DIFERENTE TERAPIA. Barrera-Resndiz JE, Carrillo C, Pedraza C, Martnez J, DonJuan G, Cruz E, Jurez ME, vila D, Belmont H, Harmony T. Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Introduccin: La prematurez es un factor de riesgo importante como antecedente de dao cerebral perinatal. Datos indican que bebs recin nacidos antes de las 33 semanas de gestacin, desarrollan con ms frecuencia leucomalacia periventricular (LPV). La terapia Katona ha demostrado ser eficiente en la normalizacin de habilidades motrices alrededor de los 18-24 meses de edad corregida (EC) cuando se inicia antes de los 2 meses de EC. Por otro lado, la terapia Bobath ha sido utilizada exclusivamente como tratamiento rehabilitatorio, cuando las secuelas motrices estn instaladas en la conducta. Objetivo: Comparar el desempeo psicomotriz de prematuros tratados con diferente tratamiento teraputico durante los primeros 18 meses de EC. Sujetos: Se estudiaron 20 sujetos prematuros con LPV y 10 sujetos control. Material y mtodos: Los sujetos con LPV fueron asignados de manera aleatoria e iniciaron el tratamiento antes de los 2 meses de EC y continuaron hasta los 18 meses. Las evaluaciones se realizaron mensualmente durante el primer ao y de manera bimestral para el segundo. Las evaluaciones utilizadas fueron: La escala de valoracin psicomotriz y las escalas de desempeo motor y cognitivo del Bayley. Resultados: Durante lo primeros 12 meses, los sujetos tratados con terapia Katona obtuvieron mejores puntuaciones en las 3 escalas de valoracin, mientras que en los meses posteriores ambos grupos mostraron puntuaciones similares independientemente de la terapia utilizada. Conclusiones: La terapia Katona muestra ser ms eficiente en el desempeo psicomotriz de los prematuros con LPV durante el primer ao de EC. D
14. LOS POTENCIALES LOCALES DE CAMPO DEL PUTAMEN DEL MONO RHESUS MUESTRAN INCREMENTOS EN LA ACTIVIDAD GAMMA DURANTE LA PRODUCCIN DE MOVIMIENTOS RTMICOS GENERADOS INTERNAMENTE. Bartolo R, Prado L, Merchant H. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El tiempo, en la escala de los cientos de milisegundos, es el contexto en el que se organizan importantes procesos conductuales, como la produccin y reconocimiento del lenguaje y la coordinacin fina del movimiento. No obstante, los mecanismos neurofisiolgicos involucrados en la codificacin y procesamiento de la informacin temporal son poco conocidos. Estudios de Resonancia Magntica Funcional han mostrado una activacin diferencial de las reas premotoras mediales (APM) y del putamen durante la ejecucin de tareas que requieren el uso explcito de informacin temporal, sugiriendo que circuitos cortico-estriato-talmicos participan en la cuantificacin del tiempo. Resultados obtenidos previamente en nuestro laboratorio han revelado que grupos de neuronas de las APM del mono Rhesus codifican el paso del tiempo durante la ejecucin de una tarea de produccin de movimientos rtmicos. En el presente trabajo, realizamos registros de actividad neuronal (unitaria y de campo) en el putamen durante la ejecucin de la misma tarea. Cada ensayo de la tarea consta de dos fases, en la primera el animal sincroniza el golpeteo de un botn con una serie de estmulos (32ms) presentados a intervalos regulares para producir 3 intervalos de tiempo. Enseguida, el animal contina moviendo su mano rtmicamente hasta producir 3 intervalos ms sin el beneficio de la gua sensorial. As en la ltima fase, llamada de continuacin, los movimientos son controlados por un supuesto reloj interno. Se utilizaron cinco duraciones (450-1000ms), y los marcadores sensoriales durante la fase inicial de sincronizacin fueron visuales o auditivos, en bloques de ensayos separados. Los potenciales locales de campo fueron sometidos a un anlisis espectral para revelar modulaciones en la actividad sincrnica de grupos neuronales. Se encontraron modulaciones significativas en las bandas beta y gamma asociadas a diferentes aspectos de la tarea, incluyendo la duracin del intervalo blanco, la fase de la tarea y la modalidad de los estmulos. De manera importante, las modulaciones de la banda gamma presentaron un claro sesgo hacia la fase de continuacin, sugiriendo que ensambles estriatales participan en la produccin de movimientos temporalizados internamente. Agradecemos el apoyo tcnico de Ral Pauln y Juan Jos Ortz. Trabajo financiado por PAPITT: IN200511-22 y CONACYT 053944. D
15. RESPUESTA ASTROCTICA Y MICROGLIAL INDUCIDA POR DAO EXCITOTXICO EN EL HIPOCAMPO DE RATAS NULPARAS O LACTANTES. Cabrera, V, Ramos, E, y Morales, T. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El cerebro de la rata hembra ha sido objeto de estudio de diferentes procesos de neuroplasticidad que ocurren en las distintas etapas reproductivas. Durante la lactancia se presentan una serie de adaptaciones en el cerebro de la madre que le permiten contender con las necesidades propias y de sus cras. Mediante la deteccin de la protena acdica glial fibrilar (GFAP), un marcador de astrocitos, demostramos que el tratamiento con cido kanico (KA) induce gliosis en el rea CA1, CA3 e hilus del giro dentado del hipocampo de ratas nulparas expuestas 24 y 72 horas al KA. Sin embargo, en ratas lactantes, slo
el tratamiento prolongado con KA (72h) induce respuesta astroctica en el hilus del giro dentado, pero no en las dems reas analizadas. Adems, la lactancia incrementa el nmero de astrocitos en el hilus del giro dentado, en los que induce cambios morfolgicos como el aumento de los procesos astrocticos y del tamao de su soma. En este trabajo se investig la respuesta inflamatoria microglial ocasionada por la aplicacin intracerebral de 100 ng/1l de KA vehculo en reas del hipocampo (CA1, CA3, y giro dentado) de ratas lactantes y ratas nulparas. La inmunodeteccin de la molcula adaptadora de unin a calcio ionizado 1 (Iba1), expresada en la microgla activada durante la respuesta inflamatoria, nos permiti observar poco o nulo aumento de clulas microgliales en respuesta al KA en las reas CA1, CA3, e hilus del giro dentado del hipocampo en ratas lactantes; mientras que el KA indujo un aumento significativo en el nmero de clulas positivas a Iba1 en cada una de las reas analizadas del hipocampo de ratas nulparas, con respecto a su control correspondiente, y 24 72 h despus del KA. Estos datos indican que la lactancia modifica la magnitud de la lesin causada por KA en el hipocampo, y en consecuencia la respuesta inflamatoria microglial. El aumento de clulas GFAP-positivas en el giro dentado de ratas lactantes no se relaciona con la respuesta microglial y sugiere un posible fenmeno de plasticidad en esta rea inducido por la maternidad. Apoyado por PAPIIT-DGAPA, UNAM 204709; CONACYT 51044. M 16. EXPRESIN DEL RECEPTOR DE ANDRGENOS Y DE LA AROMATASA EN EL REA PREOTICA DE LA RATA MACHO A DIFERENTES INTERVALOS DESPUS DE LA CONDUCTA SEXUAL. Antonio-Cabrera E; Sandoval-Payn GA; Paredes RG. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa. UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. En las ratas macho, la expresin de la conducta sexual depende de la testosterona y de su aromatizacin a estradiol en estructuras cerebrales implicadas en la modulacin de la conducta sexual masculina como el rea preptica medial (APM). En el APM, la accin de la testosterona y del estradiol sobre la conducta sexual masculina, depende de la expresin de sus receptores para andrgenos (RA) o para estrgenos (RE), respectivamente, as como de la actividad de la enzima aromatasa (P450arom). Previos estudios han demostrado que en el APM, 24 h despus de una eyaculacin, existen cambios en la densidad de clulas inmunorreactivas al RA y al RE. El objetivo del presente trabajo fue evaluar si en el APM, a diferentes intervalos despus de una eyaculacin, existen cambios en el contenido del RA y de la P450arom. Para ello, usamos ratas macho sexualmente expertos (SE) sacrificados 7 das despus de su ltima eyaculacin, ratas macho SE que fueron sacrificados 30 min o 24 h despus de una eyaculacin y ratas macho SE sacrificados 10 das despus de la castracin. El contenido del RA y de la P450arom fue determinada por western blot en bloques de tejido cerebral que contenan al APM. Los datos muestran que el contenido de la P450arom, pero no la del RA en el APM, se modifica por la cpula. Es decir, 30 min despus de la eyaculacin existe mayor contenido de P450arom. El contenido de P450arom vuelve a niveles basales 24 h despus de una eyaculacin. Estos resultados sugieren que la cpula produce cambios fisiolgicos especficos como los niveles de expresin de protenas en el APM. Acknowledgments: Francisco Camacho; supported by CONACYT 53547 and DGAPA IN213609. D
17. PERCEPCIN DE SLABAS EN LACTANTES PREMATUROS CON LEUCOMALACIA PERIVENTRICULAR: UN ESTUDIO CON POTENCIALES RELACIONADOS A EVENTOS. Caldern M, Ricardo-Garcell J, Avecilla G., Harmony T. Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo Dr. Augusto Fernndez Guardiola, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa UNAM Campus Juriquilla. Antecedentes. Los nios que nacen de manera prematura pueden tener distintas secuelas en su neurodesarrollo, entre las que se encuentran los problemas de lenguaje. Desde el nacimiento los bebs estn percibiendo los estmulos que provienen de la voz humana. Este proceso es fundamental para que el lactante adquiera el repertorio fontico propio de su lengua materna y despus poder producirlo. Objetivo: comparar las respuestas de tres grupos de lactantes ante un paradigma de estimulacin auditiva, utilizando slabas del espaol, a las 6 semanas de edad para determinar qu sucede con los bebs que nacen de manera prematura. Mtodo: se realiz un registro de Potenciales Relacionados a Eventos (PREs) en las 19 derivaciones del Sistema Internacional 10-20. Se presentaron trenes de estmulos de 4 slabas cada uno (pa /ta), los cuatros estmulos podan ser iguales el ltimo poda variar para evocar una respuesta de discriminacin. Los grupos de estudio fueron: un grupo de lactantes sanos nacidos a trmino (n=14), un grupo de lactantes prematuros sin lesin cerebral aparente (n=10) y un grupo de lactantes prematuros con Leucomalacia Periventricular (LPV, n=17). Resultados: en los tres grupos estudiados se pudo observar el componente P350 pero con amplitudes distintas. El grupo de bebs sanos tuvo la mayor amplitud mientras que el grupo de lactantes con LPV present la menor amplitud de los tres. Conclusin: de los tres grupos evaluados, los lactantes prematuros con LPV parecen ser los que procesan de modo diferente los estmulos procedentes de la voz humana. Esto puede ser un riesgo para la adquisicin futura del lenguaje, como lo sugieren otros estudios. Agradecemos el apoyo tcnico de: Ing. Hctor Belmont Tamayo y David vila Acosta. Trabajo auspiciado por PAPIIT IN220110-3. D 18. EVALUACIN DE LA MEMORIA ESPACIAL EN RATAS ESTRESADAS Y TRATADAS CON DOS FRMACOS 5-HT6 Campos-Contreras A.1, Ossio R.3, Prado-Alcal RA3 Briones-Aranda A.2 y Quirarte G.L.3 1Facultad de Qumica, Universidad Autnoma de Quertaro, 2Universidad Autnoma de Chiapas y 3Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Qro., Mxico. Se ha reportado que el estrs agudo inducido por el nado forzado (NF) tiene la capacidad de modificar varios sistemas de neurotransmisin como el serotoninrgico. Se sabe que los agonistas y antagonistas 5-HT6 modifican los procesos de consolidacin de la memoria y la respuesta al estrs. El objetivo principal de este trabajo fue investigar, la influencia del NF sobre el efecto cognitivo de agonistas y antagonistas del receptor 5-HT6. Como factor estresante agudo, se utilizo el NF y la memoria se evalu con el laberinto acutico de Morris (LAM) con plataforma oculta. Se utilizaron 60 ratas macho de la cepa Wistar, de 250 a 300 gr de peso divididas en 6 grupos. Los primeros 3 grupos sin NF, recibieron inmediatamente despus del entrenamiento en LAM, vehculo (solucin salina), el antagonista Ro 40-
6790 (10 mg/kg; i.p.) o el agonista E-6837 (5 mg/kg; i.p.). Los siguientes 3 grupos se sometieron a NF (24 horas previas al entrenamiento del LAM), y recibieron los mismos tratamientos farmacolgicos anteriormente descritos. La memoria se prob 24 hrs despus del entrenamiento. Los resultados mostraron que en las ratas no estresadas, el agonista E6837, indujo un aumento significativo en el tiempo de permanencia de nado en el rea donde se encontraba la plataforma oculta. Lo anterior se podra interpretar como facilitacin de la memoria espacial de largo plazo. Sorprendentemente, en los animales con NF tratados con el vehculo tambin mostraron facilitacin de la memoria espacial, similar a lo encontrado con el agonista. Sin embargo, nicamente en los animales previamente estresados, que fueron tratados con el antagonista Ro 40-6790, se pudo revertir el efecto del NF. Los datos indican que es probable que los cambios inducidos por el estrs sobre la memoria, estn relacionados con niveles elevados de corticosteroides y por alteraciones en el nmero y sensibilidad del receptor 5-HT6. Agradecemos a la compaa ESTEVE por la donacin de los frmacos y a Martin Garca, ngel Mndez, Norma Serafn, Cristina Medina, Omar Gonzlez, Ramn Martnez y Leonor Casanova por la ayuda tcnica. Trabajo apoyado por PAPIIT-UNAM (IN214111) y CONACYT (Donativo 130524 y Beca Postdoctoral 36743 a A.B.A). L 19. CARACTERIZACIN DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO (GH) EN EL OJO DE LA IGUANA VERDE (IGUANA IGUANA). Carranza M*, vila J, Ahumada M, Luna M, y Armburo C. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, Campus Juriquilla, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Quertaro, Qro. 76230. macasa@servidor. unam.mx La hormona de crecimiento (GH) es una protena que se sintetiza principalmente en la hipfisis de los vertebrados, aunque recientemente se ha mostrado su expresin en otros tejidos de sistemas como el nervioso, el inmune y el reproductor. Asimismo, se ha postulado que la heterogeneidad molecular de la GH contribuye a su amplia diversidad funcional. Entre los diferentes tejidos estudiados, se sabe que en el ojo y especficamente en la retina, la GH que se expresa en la etapa embrionaria del pollo es una variante de 15 kDa y que sta puede estar implicada en la regulacin de la apoptosis. Sin embargo, en los reptiles no se sabe nada sobre la expresin extrahipofisiaria de GH. Por lo que en este trabajo se analiz la presencia de esta hormona en el ojo de la iguana verde (Iguana iguana). Mediante un ELISA heterlogo, se determin que la concentracin de la GH fue de 105.7 12.7 ng/ mg protena. Las bandas de GH inmunorreactiva (GH-IR) detectadas por SDS-PAGE y Western blot, mostraron los siguientes pesos moleculares: 52, 46, 40, 35 y 15 kDa, siendo las mayoritarias las de 52 y 46 kDa. En condiciones reductoras se obtuvieron otras bandas de: 49, 26, 21, 16, 15 y 13 kDa. Por inmunohistoqumica se identific y localiz la existencia de GH-IR en las clulas ganglionares y en los conos y bastones de la retina. Adems, se demostr la expresin del ARNm de GH en conos y bastones mediante hibridacin in situ. Los datos obtenidos permiten sugerir que la GH al igual que en otras especies de vertebrados podra tener una funcin parcrina y/o autcrina en el ojo de la iguana. Apoyado por PAPIIT210209-21, CONACyT60296. Agradecimientos: Lorena Lpez, G. Courtois. T
20. EFECTOS TROFICOS EJERCIDOS POR PROLACTINA (PRL) SECRETADA POR ADENOHIPFISIS DE RATAS LACTANTES. Castilla A, Navarro N y Mena F. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Campus UNAM-UAQ, Juriquilla; Quertaro. La hormona prolactina (PRL) est constituida por una serie de formas variantes de diferente peso molecular que van de 7 a 93 kDa, las cuales son secretadas por la adenohipfisis (AH) de ratas lactantes y ejercen efectos in vitro, tanto autcrinos como parcrinos de regulacin sobre la secrecin de formas variantes de la propia hormona por los lactotropos de ratas lactantes, y de ratas macho. Los objetivos del presente estudio son determinar si las formas variantes de la PRL secretadas por las regiones central y lateral de la AH de ratas lactantes succionadas y no succionadas, ejercen efecto trfico sobre lactotropos de AH de ratas lactantes y ratas macho; manifestndose por cambios tanto funcionales como en el nmero de lactotropos expuestos al medio condicionado (MC) de AH de lactantes, determinados por inmunocitoqumica; (sal de tetrazolium) MTT y ADN genmico. Los resultados preliminares obtenidos muestran que el porcentaje de lactotropos pero no de somatotropos de ratas macho aumenta de manera significativa, despus de la incubacin con MC de AH de ratas lactantes. Con respecto al efecto del MC de lactantes sobre el metabolismo y viabilidad celular se encontr que aumentaron los lactotropos tanto en AH de ratas lactantes como de ratas macho, lo cual concuerda con los resultados previos de los efectos autcrinos y parcrinos sobre la secrecin de la PRL por AH de ratas lactantes y de ratas macho. En conclusin, los resultados obtenidos sugieren que los efectos autcrinos y parcrinos ejercidos por las formas variantes de la PRL secretadas por la AH de ratas lactantes, se correlacionan con efectos trficos, vgr., incremento en el metabolismo y viabilidad celular, as como en el nmero de lactotropos. Agradecemos la ayuda tcnica del MVZ. Martn Garca Servn y Biol. Mara Eugenia Ramos Aguilar. Este trabajo fue apoyado por donativos de CONACYT (No. 128037) y de PAPIIT (No. IN206711-3). T 21. VARIABILIDAD DE LA RESPUESTA NEURONAL COMO OTRA FUENTE EN LA CODIFICACIN DE INFORMACIN EN LA CORTEZA CEREBRAL. Chvez B, Prez O, Merchant H, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Una manera de caracterizar la respuesta de las neuronas en funcin de una variable conductual es utilizando la tasa de disparo, que corresponde al nmero de potenciales de accin ocurridos en un intervalo de tiempo. De hecho, se ha observado que diversas reas corticales utilizan la sintonizacin neuronal para una variable conductual especfica como un cdigo para representar informacin. La sintonizacin neuronal implica un cambio sistemtico en la tasa de disparo promedio en relacin de la variable conductual, y puede ser descrita por una funcin matemtica. El promedio de la tasa de disparo se calcula entre los ensayos de la tarea donde la variable conductual es la misma. Sin embargo, recientemente se ha reportado que la variabilidad entre los ensayos para un mismo valor del parmetro conductual tambin contiene informacin sobre las propiedades de este parmetro. As, en este trabajo, se describe un mtodo para cuantificar la informacin asociada a la variabilidad interensayo que no es explicada por algoritmos de sintona a la direccin del movimiento en
una tarea de movimientos de alcance en monos Rhesus. Con este fin se utilizaron mtodos estadsticos de discriminacin y clasificacin lineal multivariable usando las matrices de correlacin de la respuesta de dos neuronas entre pares de direcciones del movimiento. Los resultados obtenidos muestran que una gran proporcin de las neuronas sintonizadas a la direccin del movimiento en la corteza motora primaria, tienen una correlacin alta en la variabilidad de las respuestas interensayo cuando sus direcciones preferentes son similares. En contraste, esta correlacin en la variabilidad no se observa entre pares de neuronas con direcciones preferentes opuestas. Por lo tanto, estos resultados sugieren una organizacin modular en las direcciones preferentes en la corteza motora, donde la correlacin en la variabilidad de la respuesta slo se da en neuronas conectadas dentro de un microcircuito y cuyas direcciones preferentes son similares. Agradecemos la asistencia tcnica de Ral Pauln. Trabajo financiado por PAPITT: IN200511-22 y CONACYT 053944. L
22. EFECTO NEUROPROTECTOR DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO EN CULTIVOS ORGANOTPICOS DE CEREBELO DE POLLO Crdoba-Manilla C, Alba-Betancourt C, Carranza M, Armburo C y Luna M. Departamento de Biologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. En el sistema nervioso central (SNC) de diversas especies se ha encontrado la presencia de GH, su RNAm y su receptor (GHR), y se ha sugerido que puede ejercer un efecto neuroprotector. En el pollo, una de las estructuras del SNC con mayor expresin de GH es el cerebelo, una estructura altamente conservada en la filogenia y que es particularmente sensible a sufrir dao por isquemia. En este trabajo evaluamos el efecto anti-apopttico de GH en un modelo de hipoxia-baja glucosa (HBG; 5% O2, 1% glucosa) en cultivos organotpicos de cerebelo de pollo. Mediante tcnicas de inmunohistoqumica se observ que la estructura laminar de la corteza cerebelosa se conserv (capa molecular, Purkinje y granular) y que hay una co-localizacin de la inmunorreactividad a GH con NeuN en clulas granulares; con calbindina en clulas de Purkinje y en menor proporcin con GFAP en astrocitos. La expresin de GH aument en condiciones de HBG en comparacin con el grupo control de 311.343.8 a 596.670.8 ng/mg protena, determinado por ELISA. Para evaluar el efecto anti-apopttico de esta hormona se realiz el tratamiento con 1 y 10nM rcGH durante las condiciones de HBG y 24h posteriores de re-oxigenacin. Se determin la actividad de caspasa-3, como un marcador de la proporcin de apoptosis, y se encontr un incremento en las condiciones de dao (11.62.1U/ml) con respecto al control (3.81.0 U/ml) la cual disminuy significativamente con el tratamiento con rcGH (1nM, 6.00.1 U/ml). Adems, se evaluaron mediante Western-blot dos protenas de la familia Bcl-2 (Bax y Bcl2), implicadas en la modulacin de la permeabilidad en la membrana mitocondrial afectada por el dao HBG y se determin que la proporcin relativa Bax/Bcl-2 (control 6719%) se ve afectada a favor de Bax en HBG (19141%) y disminuye con el tratamiento de rcGH (1nM; 9710%). En conclusin, el modelo de HBG utilizado afecta la permeabilidad mitocondrial, aumentando la relacin Bax/Bcl-2, siendo la GH capaz de reducir esta proporcin y como resultado esta hormona ejerce un efecto anti-apopttico, determinado mediante la reduccin de la actividad de caspasa-3. Agradecimiento por la asistencia tcnica de Courtois G y Hernndez N. Trabajo auspiciado por PAPIIT-DGAPA, UNAM 210209, CONACYT F1-60296, 118353 y 234456. M
23. CARACTERIZACIN DE LA RESPUESTA OLFATORIA DEL RATN TRIPLE TRANSGNICO PARA LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER (3xTg-AD) Coronas-Smano G, Portillo-Martnez W1, Paredes R1, Aguilar-Vzquez A, BeltrnCampos V, Daz-Cintra S. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, 1Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La enfermedad de Alzheimer es un desorden neurodegenerativo que se caracteriza por prdida de la memoria y por presentar en el enfermo sntomas neuropsiquitricos y conductuales, los cuales se le han atribuido a la sobreproduccin del pptido -amiloide formando las placas amiloideas en las neuronas y tambin por la hiperfosforilacin de la protena tau, formando las redes neurofibrilares. Se han diseado diferentes modelos animales que intentan reproducir las caractersticas patolgicas para el estudio de la enfermedad. Un modelo que se gener recientemente es el ratn triple transgnico para la enfermedad de Alzheimer (3xTg-AD), el cual es knock-in para PS1M146V, APPSwe y tauP301L. Se ha propuesto como un sntoma temprano de esta enfermedad la disminucin olfatoria de los pacientes. Las alteraciones en el olfato pueden repercutir en la prdida del apetito, lo cual se acompaa con prdida de peso y un pobre estado nutricional. El objetivo de este estudio fue determinar si el 3xTg-AD presenta alteraciones en la percepcin de olores sexuales y de olores voltiles de alimentos. Los ratones que se utilizaron en este experimento fueron hembras 3xTg-AD y silvestres (129/C57BL/6) las cuales fueron divididas en tres grupos de diferentes edades: Grupo 1) 4-5 meses; Grupo 2) 10-11 meses y Grupo 3) 16-18 meses. Seis animales por grupo fueron utilizados en tres pruebas: 1) discriminacin de olores voltiles (fresa y canela); 2) motivacin sexual 3) preferencia sexual (orina). Nuestros resultados sugieren un dficit olfatorio en hembras 3xTg-AD de 10-11 meses porque no son capaces de discriminar olores de fresa y canela. Y por otro lado, un dficit de discriminacin de olores sexualmente relevantes a partir de los 4-5 meses de edad. Estos hallazgos sugieren una alteracin en el bulbo olfatorio principal y en el bulbo olfatorio accesorio, probablemente debido a la agregacin de depsitos de -amiloide. Agradecemos la ayuda tcnica del MVZ Martn Garca Servn, Sendar D. Nery Flores y Francisco J. Pozos Varela. Trabajo auspiciado por DGAPA-UNAM No. IN-202809 y CONACYT No. 102278. M
24. CARACTERIZACIN FUNCIONAL DEL RECEPTOR PURINRGICO P2X7 EXPRESADO EN EL EPITELIO SUPERFICIAL OVRICO DE RATN. Cruz-Rico A, Vzquez-Cuevas FG, Garay E y Arellano RO. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La superficie del ovario est revestida por el epitelio superficial del ovario (OSE). Se ha propuesto que el OSE participa en los eventos tempranos de la ovulacin iniciando una activacin en cascada de proteasas que formarn el conducto por el que ser expulsado el ovocito. Esta estructura presenta ciclos de proliferacin, diferenciacin y apoptosis, importantes para el proceso ovulatorio y que lo hacen susceptible de transformacion neoplsica. El ATP acta sobre receptores P2X, canales catinicos con una alta permeabilidad a Ca2+ y de los cuales se han clonado las subunidades P2X1 al P2X7. El receptor P2X7 (P2X7R),
es un homotrmero, no se desensibiliza en presencia del agonista y su estimulacin repetida induce la apertura de una conductancia que permite el paso de molculas hasta 1kDa, esta actividad induce apoptosis por acumulacin de Ca2+ en el citosol va el apoptosoma mitocondrial. El objetivo del presente estudio fue la deteccin y caracterizacin del P2X7R en el OSE de ratn. Para esto, se evalu la expresin y funcin del P2X7R en el OSE mediante: 1) RT-PCR en cultivos primarios de OSE e inmunohistoqumica en rebanadas del ovario y 2) Estudios funcionales de movilizacin de Ca2+ intracelular en cultivos, y de apoptosis en el ovario inyectado en cada etapa del ciclo estral con BzATP, un agonista selectivo del P2X7R. El anlisis de los transcritos y de la inmunofluorescencia indicaron la expresin del P2X7R en el OSE. La respuesta funcional generada por la estimulacin con BzATP en los cultivos primarios de OSE, provoc un aumento en la concentracin intracelular de Ca2+ dependiente del Ca2+ extracelular que no mostr desensibilizacin. Los estudios in vivo demostraron que el BzATP es capaz de inducir apoptosis en el OSE durante los das del proestro y del diestro, pero no del metaestro. En conjunto, estos resultados sugieren que la expresin del P2X7R en el OSE de ovario de ratn es funcional y puede tener un papel diferencial durante el ciclo estral. Donativos: Beca para ACR CONACyT 289595, PAPIIT IN214409 para ROA e IN208209 para FGV-C y CONACyT 82340 para ROA. M
Martes 20 de Septiembre, Cartel 25 al 48
Septiembre 20, 2011
25. LA SUPLEMENTACIN CON TRIYODOTIRONINA (T3), DISMINUYE LA EXPRESIN DE ALGUNOS MARCADORES DE INVASIN, INDUCIDOS POR LA ESTIMULACIN bADRENRGICA EN LOS TUMORES PROSTTICOS. Delgado-Gonzlez E*, Aceves C y Anguiano B. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa. UNAM-Campus Juriquilla. En la carcinognesis existen factores que favorecen o disminuyen la progresin tumoral. En cncer prosttico, la estimulacin b-adrenrgica sostenida promueve la formacin de metstasis, mientras que dosis elevadas de adrenalina, favorece la transdiferenciacin del epitelio secretor, a un fenotipo neuroendcrino (alto potencial invasivo). Por el contrario, en el cncer heptico la administracin de T3 revierte las lesiones histopatolgicas inducidas con un cancergeno qumico. El objetivo de este trabajo fue evaluar si el tratamiento con dosis moderadas de T3, frena la progresin tumoral inducida por la estimulacin b-adrenrgica (isoproterenol, ISO), en un modelo in vivo de cncer prosttico. Se trabaj con ratones inmunosuprimidos (nu/nu), implantados con clulas humanas de cncer prosttico (LNCaP). Se formaron los siguientes grupos: control, ISO (200 mg/da/ratn, implante subcutneo de lenta liberacin), T3 (2.5 mg/da/ratn, en el agua para beber) e ISO + T3. La duracin de los tratamientos fue de 6 semanas. Se registr el peso corporal, as como la incidencia y volumen tumoral. En el tumor se evalu la expresin (RT-PCR) de un marcador de angiognesis (factor de crecimiento epidermal vascular, VEGF) y de fenotipo neuroendcrino (cromogranina A, CgA). Ninguno de los tratamientos afect el peso corporal. En los grupos ISO e ISO + T3, la aparicin de los tumores ocurri en la semana 3, mientras que en los grupos control y T3 ocurri hasta la semana 5. En comparacin con el grupo control, los ratones del grupo ISO presentaron un menor volumen tumoral (50%) y mayor expresin de VEGF (100 %) y CgA (200%), lo cual est relacionado al proceso de transdiferenciacin celular. Es probable que la disminucin del volumen tumoral se deba a que las clulas con fenotipo neuroendcrino, pierden la capacidad de proliferar. En comparacin con el control, la T3 no tuvo efectos en el peso tumoral, ni en la expresin de VEGF o CgA, pero en el grupo ISO + T3 previno la sobre-expresin de estos marcadores. Estos hallazgos concuerdan con la nocin de que T3 inhibe la transcripcin de algunos genes dependientes de la estimulacin b-adrenrgica y sugieren un posible efecto protector de T3 en el cncer prosttico. AGRADECIMIENTOS: Agradecemos el apoyo tcnico del Dr. Martn Garca Servn, Q.F.B. Guadalupe Delgado, y Bil. Felipe Ortiz Cornejo. Proyecto financiado por CONACYT (78955, 87196, 127368) y PAPITT-UNAM IN2012010). * Becario CONACYT (202474). D 26. ANLISIS DE LA EXPRESIN DE VIRUS ADENOASOCIADOS TIPO 2 EN LA RETINA DE RATAS DIABTICAS. Daz-Lezama N., Ramrez M., Moreno-Carranza B., Martnez de la Escalera G. y Clapp C. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La retinopata diabtica (RD) es la principal causa de ceguera en los adultos. Las opciones teraputicas actuales de la RD son limitadas y comprometen la funcionalidad
de la retina, por lo que uno de los principales objetivos en este campo de investigacin es la bsqueda de nuevas estrategias teraputicas capaces de interferir con la disfuncin vascular en la RD. Al respecto, una opcin promisoria es la transferencia intraocular de genes inhibidores de la funcin vascular mediante el uso de vectores derivados de virus adenoasociados recombinantes del serotipo 2 (rAAV2). Estos vectores presentan como ventajas la transduccin permanente de mltiples tipos celulares de la retina y baja toxicidad. Caracterizamos el uso de estos vectores en la RD inyectando intravitrealmente AAV2 que transducen a la protena verde fluorescente y analizando la localizacin y nivel de expresin de la GFP en la retina de ratas diabticas y ratas sanas. Para ello, se indujo diabetes en ratas Wistar mediante la administracin de estreptozotocina (60mg/Kg, i.p.). Dos semanas despus, ratas diabticas (>250 mg/dl glucosa en sangre) y ratas sanas fueron inyectadas intravitrealmente con 8X1012 genomas del vector AAV2-GFP y al cabo de cuatro semanas se evalu la expresin de la GFP en secciones de retina y en montajes planos de la misma por inmunohistoqumica y fluorescencia directa, respectivamente. Mediante inmunohistoqumica detectamos que las clulas transducidas y sus proyecciones se localizaban en la capa de clulas ganglionares de la retina. Adems, corroboramos dicha localizacin mediante montajes planos de retina y al realizar el anlisis de las imgenes obtenidas, encontramos que las ratas diabticas mostraron tres veces mas expresin de la GFP con respecto a las ratas sanas (diabticas 327 77.57% vs sanas 100 25.23%). Estamos investigando si el aumento en la expresin de la GFP en la retina de ratas diabticas se debe a una mayor concentracin de proteoglicanos de heparn sulfato que son los receptores de los AAV2. En conclusin, nuestros resultados confirman la localizacin en la capa de clulas ganglionares de los transgenes traducidos por la administracin intravitreal de los AAV2 y sugieren que en la retinopata diabtica las condiciones de la retina favorecen el uso de estos vectores para la transferencia de molculas teraputicas. Agradecemos la asistencia tcnica de Fernndo Lpez-Barrera, Gabriel Nava, Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Trabajo auspiciado por CONACYT SALUD-2008-C01-87015. M 27. EXTRACCIN Y PURIFICACIN DE DOS CONORFAMIDAS DEL VENENO DE Conus spurius Falcn Alcntara A.1, Lobato Galindo J.J.1,2, Ortiz Ordez E.2, Aguilar Ramrez M.B.1, Heimer de la Cotera E.P1. 1Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Juriquilla, Qro.; 2Departamento de Morfologa, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, IPN, Mxico, D.F. Los caracoles del gnero Conus son cazadores que producen un veneno complejo para capturar a sus presas, defenderse de sus depredadores y disuadir a sus competidores. Los venenos de Conus contienen una gran diversidad de pptidos farmacolgicamente activos, la mayora de los cuales actan sobre los canales inicos y receptores en el sistema neuromuscular. Algunas conotoxinas se consideran promisorias en el desarrollo de productos farmacuticos para una variedad de patologas. Este estudio contina la caracterizacin del veneno de Conus spurius mediante la extraccin y purificacin de toxinas; con esto se aumentar el conocimiento sobre el veneno de esta especie. Los especmenes fueron recolectados en Yucatn, Mxico. El extracto crudo del veneno obtenido por la homogeneizacin del conducto venenoso se llev a sequedad para su almacenamiento. Se resuspendi en agua para su estudio, obteniendo un sobrenadante (SrA) y un precipitado, el cual fue resuspendido en acetonitrilo (SrD); ambos se cromatografiaron en RP-HPLC en una columna C18 (ledo a 220 nm). Se seleccion la fraccin 28 de cada una de las
cromatografas por tener el mismo tiempo de retencin, para ser purificadas y determinar su estructura primaria. Los pptidos SR-F10 y SR41-2 fueron aislados y purificados a partir de SrA y SrD, respectivamente; su estructura primaria se determin por la degradacin automtica de Edman y por espectrometra de masas. Ambos pptidos tienen 12 aminocidos y ningn residuo de cistena. Las secuencias fueron: SR-F10 = GPMoxGWLPVFYRF-NH2 (masa, 1483.80 Da) y SR41-2 = GPMGWLPVFYRF-NH2 (masa, 1467.80 Da). Estas secuencias presentan la estructura caracterstica de las Conorfamidas, de la familia de neuropptidos RFamida, recientemente reportadas a partir de C. spurius y que tienen actividad biolgica. La conorfamida Sr1, muy parecida a las caracterizadas en este trabajo, provoca hiperactividad en ratones; otra conorfamida (Sr2) de la misma especie causa parlisis en moluscos. Faltara determinar si el manejo del extracto crudo provoc la modificacin o si es inherente del organismo; independientemente del lo que resulte sera deseable realizar un bioensayo para determinar la actividad biolgica de los pptidos obtenidos. Financiado por CONACyT 43754, PAPIIT-DGAPA-UNAM IN-204403, y por el presupuesto del Lab. de Neurofarmacologa Marina del INB-UNAM. T
28. IDENTIFICACIN, MEDIANTE RT-PCR, DE TOXINAS DEL CARACOL MARINO Conus nux Flores-Martnez E 1, Aguilar MB 1, Falcn Alcntara A 1, Michel Morfn E 2, Landa Jaime V 2,3 y Heimer de la Cotera E 1. 1 Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Juriquilla, Qro., Mxico; 2 Departamento de Estudios para el Desarrollo Sustentable de Zonas Costeras, CUCSUR-Universidad de Guadalajara, San Patricio-Melaque, Jal., Mxico; 3 Posgrado en Ciencias Biolgicas y Agropecuarias, Universidad Autnoma de Nayarit, Tepic, Nay., Mxico. Los caracoles marinos del gnero Conus se destacan por la gran diversidad de genes que codifican pptidos neurotxicos presentes en su veneno. Estas toxinas son producidas en forma de bibliotecas estructuralmente combinatorias de pre-pro-pptidos las cuales presentan una gran cantidad de mutaciones en prcticamente todos los residuos de la secuencia del pptido maduro. Utilizando la tcnica de RT-PCR, se buscaron conotoxinas de las superfamilias A y T del caracol marino C. nux, habitante de las costas del Pacfico mexicano. Se disearon oligonucletidos basados en secuencias conservadas en las regiones 5 y 3 no codificantes (UTR) de ambas superfamilias. Cinco nuevas secuencias de ADN que codifican pptidos precursores de la superfamilia A fueron identificadas; los precursores presentan un pptido seal de 21 residuos de aminocidos, una regin pro de 16 residuos de aminocidos y cinco toxinas maduras distintas de 23 residuos de aminocidos, las cuales pertenecen a dos subfamilias estructurales, la 4/4 y la 4/5. En el caso de la superfamilia T, se identificaron nueve secuencias nuevas de ADN que codifican precursores de siete nuevas conotoxinas T1, las cuales presentan un arreglo de cistenas CC-CC, un pptido seal de 19 residuos de aminocidos, una regin pro de 16 residuos de aminocidos y una toxina madura de 23 aminocidos; con un par de oligonucletidos de esta superfamilia se lograron amplificar dos precursores distintos de dos conotoxinas de la superfamilia O1. Los resultados aqu presentados son tiles para la sntesis de nuevas conotoxinas con el fin de identificar sus blancos moleculares. Este trabajo fue financiado por los donativos CONACyT 79929 y PAPIIT-DGAPA-UNAM IN-204403, CONACyT-Gobierno del Estado de Jalisco JAL-2009-05-124426, y por el presupuesto del Lab. de Neurofarmacologa Marina del INB-UNAM.
Agradezco la beca 37388 otorgada por CONACYT y la asistncia tcnica brindada por la Unidad de Proteogenmica del Instituto de Neurobiologa de la UNAM campus Juriquilla y del Laboratorio Nacional de Genmica para la Biodiversidad (LANGEBIO) del CINVESTAV campus Irapuato. M 29. ESTUDIO DE LA MIGRACIN DE DIFERENTES POBLACIONES DE CLULAS CAJAL-RETZIUS DURANTE EL DESARROLLO CORTICAL Frade Prez M. D. , Miquelajuregui Graf A. y Varela Echavarra A. , Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa. Instituto de Neurobiologa, UNAM. La corteza de los mamferos est organizada en capas que dependen para su formacin de la glicoprotena Reelina secretada por las clulas Cajal-Retzius que se localizan en la capa ms externa. Las clulas C-R se originan en varios dominios del telencfalo. Dos de estos dominios, el dominio olfativo localizado en el primordio de la corteza olfativa y un dominio rostral lateral en la cercana de los bulbos olfatorios, estn siendo analizados en nuestro laboratorio. A partir de dichos sitios de origen las clulas C-R migran tangencialmente dentro de la zona marginal hacia la neocorteza siguiendo diferentes rutas de migracin. Se ha publicado que las clulas C-R de dominio olfativo migran dorsalmente para ubicarse en la corteza dorsal mientras que las del dominio rostral se posicionan en la corteza rostral. Mediante inyecciones de un trazador fluorescente hemos observado que las clulas marcadas en el dominio olfativo migran en direccin ventral contrario a lo que indica la bibliografa y una poblacin de las clulas del dominio rostral migran caudalmente hacia el dominio olfativo. Del total de estas clulas marcadas aproximadamente la cuarta parte expresa Reelina lo que podra indicar que se trata de clulas C-R. Estas diferencias observadas en la migracin de clulas C-R podran indicar que existen subpoblaciones de ciertos dominios que aun no han sido estudiadas. Agradecimientos: Martn Garca Servn, Nydia Hernndez, Alberto Lara, Ramn Martnez, Lorena Ortiz Martnez, Leonor Casanova, Lourdes Lara Ayala. Financiamiento: CONACYT 101433, Becas: D.F.P.(CONACYT), A.M.G.(DGAPA-UNAM) D
30. EFECTOS DEL CONSUMO CRNICO DE SABORES DULCES CON DIFERENTE CONTENIDO CALRICO SOBRE LA PREFERENCIA DE SABOR Y EL RE-APRENDIZAJE AVERSIVO Fregoso-Urrutia D.J. y Miranda M.I. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La preferencia por alimentos con sabor dulce ha sido bien establecida debido a que son asociados con un valor hednico positivo y representan una fuente rpida de energa, que en consecuencia, afectan la qumica cerebral y la conducta. Por lo tanto, la preferencia por sabores dulces inducir un consumo excesivo que conlleva severos costos a la salud. Se ha sugerido que dicha preferencia no slo depende del sabor sino tambin de su valor nutricional; sin embargo, el incremento en el consumo de edulcorantes, como la sacarina que no posee valor energtico alguno, ha sido reportado extensivamente. De tal forma, a pesar de las evidencias, an no se conoce el impacto del valor hednico de los alimentos despus
de su consumo y los efectos del consumo crnico de sabores dulces en el aprendizaje y la memoria de reconocimiento al sabor.El objetivo principal de este trabajo fue determinar, en ratas macho adultas (270-310 gr), la preferencia por sabores dulces con diferente contenido calrico (sacarina o sacarosa) durante un consumo crnico (14 das); as como evaluar el impacto del ste consumo crnico en el reaprendizaje asociativo y aversivo utilizando el modelo de condicionamiento de aversin al sabor (CAS) y la extincin de la aversin. Los resultados mostraron que el consumo crnico de una solucin de sacarosa al 10%, como el nico lquido disponible, induce gradualmente un aumento significativo del consumo diario y, a pesar de que el consumo de alimento slido disminuy, el peso corporal increment significativamente. En contraste, el consumo crnico de sacarina al 0.1%, no produjo cambios significativos en el volumen de consumo, en la ingesta de alimento slido o en el peso corporal. Si bien, ambos grupos, sacarina y sacarosa, mostraron una fuerte inhibicin latente del CAS, requirindose varias sesiones de adquisicin, el grupo de consumo crnico de sacarosa mostr una extincin significativamente ms rpida que el grupo que consumi sacarina. Estos resultados sugieren que el contenido calrico de los sabores dulces juega una funcin importante en el desarrollo de la preferencia y afecta significativamente procesos de re-aprendizaje asociativo del mismo estmulo. Agradecemos la asistencia tcnica de Liliana Purn-Sierra, Yectivani Jurez y ngela Gabriela Vera-Rivera. Trabajo auspiciado por DEGAPA IN209911-3. M 31. SISTEMA EXPERTO PARA EL DIAGNOSTICO DEL ESTADO DEL REA MOTORA EN LA UNIDAD DE INVESTIGACIN EN NEURODESARROLLO (UIN) AUGUSTO FERNNDEZ GUARDIOLA. Garay A*, Mendoza J*, lvarez P,Belmont H, Carrillo C., Barrera J., Harmony T., Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico; *Facultad de Informtica Universidad Autnoma de Quertaro. Los sistemas expertos (SE) son llamados as porque emulan el comportamiento de un experto en un dominio concreto y en ocasiones son usados por stos mismos para mejorar el funcionamiento de su rea. Partiendo de una base de conocimientos anterior los sistemas expertos tienen como objetivo aumentar la calidad y rapidez en las respuestas dando as lugar a una mejora de la productividad y efectividad del experto. El desarrollar un SE para el rea de Terapia Fsica de la UIN permite llevar un control comparativo del desarrollo psicomotriz de bebs sanos y bebs que fueron expuestos a factores de riesgo de dao cerebral en la etapa perinatal, as como tambin reducir el tiempo de evaluacin y mejorar el diagnstico. Este sistema est diseado para evaluar en el rea motriz a infantes entre los 16 y 20 meses de edad y apoyar a terapeutas encargados del tratamiento de los pacientes con riesgo de dao cerebral, mediante la utilizacin de este sistema experto el terapeuta sin amplios conocimientos en el rea puede dar un diagnostico muy cercano al real. Para este desarrollo se utilizo la base de conocimientos proporcionada por los expertos de la UIN en el rea de Terapia Fsica, se definieron los parmetros para cada uno de los diagnsticos que se pueden presentar, as como las preguntas y posibles respuestas. Se utiliz Vp-expert como herramienta base de desarrollo de este SE que nos permite crear los criterios necesarios que harn que las condiciones utilizadas por los expertos se cumplan. L
32. MEMORIA DE TRABAJO EN NIOS CON ANTECEDENTE DE LEUCOMALACIA PERIVENTRICULAR EN TERAPIA NEUROHABILITATORIA Y NIOS SANOS Garca-Gomar ML; Santiago-Rodrguez E, Harmony T., Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo Dr. Augusto Fernndez Guardiola, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM. Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La leucomalacia periventricular (LPV) es la principal forma del dao cerebral perinatal en prematuros, produce necrosis de la sustancia blanca, aunque tambin se ha encontrado afectado el ncleo dorsomedial (NDM) del tlamo entre otras estructuras cerebrales. La Memoria de Trabajo (MT) es la retencin activa de la informacin para una accin prospectiva y depende de conexiones reciprocas entre el NDM y el lbulo prefrontal, adems de muchas ms. Por lo anterior se espera que existan alteraciones de la MT en nios con antecedente de LPV, sin embargo no existen estudios donde se describan. El objetivo del estudio fue analizar la MT en nios con antecedente de LPV en terapia neurohabilitatoria y compararla con un grupo de nios sanos. Se evaluaron 4 nios con antecedente de LPV (19.6 4.7 meses de edad) y 5 nios sanos (20.2 6.7 meses de edad). Se les aplic una tarea de MT con registro sincrnico de electroencefalograma (EEG). Se analizaron las respuestas conductuales, as como los espectros de potencia durante los estados de reposo, atencin y memoria. Los nios con antecedente de LPV tuvieron un porcentaje de respuestas correctas del 49% y los sanos un porcentaje similar 56% (p=0.22).En el estado de reposo la potencia absoluta de las frecuencias de 7.81 a 8.20 Hz sobre regiones frontales bilaterales y parietales izquierdas fue mayor en el grupo de nios con antecedente de LPV que en los nios sanos (p<0.05). En los dos grupos se encontr potencia absoluta menor en la frecuencia 10.16Hz sobre regiones frontales izquierdas (F7-AVR) en el estado de Memoria (0.41 V2) que en el de Atencin (0.61 V2) (p0.05). Se concluye que los nios con antecedente de LPV presentan oscilaciones cerebrales distintas a las de los nios sanos tanto en estado de reposo como durante la tarea de MT probablemente debidas a una mielinizacin inadecuada secundaria a la LPV. D 33. AXONES ASCENDENTES DOPAMINRGICOS UTILIZAN COMO SUSTRATO A AXONES DESCENDENTES GABARGICOS DURANTE LA FORMACIN DE LA VA NIGROESTRIAL POR MEDIO DE PROTENAS ROBO Y NCAM Garca-Pea C.M.1, Kim M.2 Mastick G.2 Varela-Echavarra A.1 y Tamariz E.3 Departamento de Neurobiologia del desarrollo y Neurofisiologia, Instituto de Neurobiologa. UNAM1, University of Nevada, Reno2 e Instituto de Ciencias de la Salud, Universidad Veracruzana3. Las neuronas dopaminrgicas (nDA) ubicadas en el rea ventral del mesencfalo embrionario proyectan sus axones hasta su blanco en el estriado navegando a travs del diencfalo, formando con ello la va nigroestrial. Diversas molculas gua como las Efrinas, Semaforinas clase 3, Slits, Netrina-1 y protenas Wnt han sido implicadas en el control de esta proyeccin. Evidencia de nuestro laboratorio y de otros grupos, sin embargo, indica que los receptores para estas molculas no se expresan en las nDA en estadios tempranos o se expresan slo en un porcentaje muy bajo de ellas sugiriendo que existe otro mecanismo involucrado para la proyeccin estereotpica. En el presente trabajo se analiz la interaccin de los axones dopaminrgicos con otros axones como mecanismo de gua. Por medio de inmunofluorescencia observamos que los axones dopaminrgicos
interactan a lo largo de su trayectoria al estriado con un haz de axones GABArgicos que contiene a los axones mamilotegmentales(MTT). El MTT expresa protenas Robo conocidas como receptores de las protenas Slit,y como molculas de adhesin; tambin expresan la protena de adhesin NCAM presente tambin en las nDA. En estudios funcionales en embriones en cultivo, versiones solubles (Fc) de los ectodominios de Robo1, Robo2 y NCAM indujeron alteraciones drsticas en la proyeccin dopaminrgica. En embriones de ratn mutantes carentes de Slit1/2 o de Robo1/2, la proyeccin dopaminrgica tambin se vi alterada. Sin embargo, mientras que en los mutantes Slit1/2 los axones dopaminrgicos permanecieron asociados a axones GABArgicos que tambin proyectaron anormalmente, mientras que en los mutantes Robo1/2 se disociarn de ellos. Estos resultados sugieren que los axones dopaminrgicos interactan con axones GABArgicos descendentes por medio de la protena de adhesin NCAM y de las protenas Robo1 y Robo2 de manera independiente de Slit1/2. D
34. SIRTUNAS BOVINAS: CARACTERIZACIN INICIAL Y EXPRESIN DE LAS SIRTUNAS 1 Y 3 EN HGADO, MSCULO Y TEJIDO ADIPOSO Ghinis-Hozumi, Y.1, Gonzlez-Gallardo, A.2, Gonzlez-Dvalos, L.1, Antaramian, A.2, Villarroya, F.3, Shimada, A.1, Varela-Echavarra, A.2 y Mora, O.1 1 Laboratorio de Rumiologa y Metabolismo Nutricional (RuMeN), Facultad de Estudios Superiores Cuautitln, UNAM, 2 Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico, 3 Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular, Facultat de Biologa, UB, Espaa Las sirtunas son las enzimas homlogas del regulador de informacin silenciosa en mamferos, caracterizado inicialmente en S. cerevisiae. Las sirtunas pertenecen a la familia de las desacetilasas de histonas dependientes de NAD+. En los vertebrados se han descrito siete sirtunas localizadas en los diferentes compartimientos celulares y con diferentes protenas blanco. Estas enzimas regulan, entre otros procesos, el metabolismo de glucosa y de lpidos. Las sirtunas en bovinos no se han estudiado, por lo que el objetivo de este trabajo fue obtener las secuencias codificantes de las siete sirtunas y determinar la expresin de Sirt1 y Sirt3 en hgado, msculo y tejido adiposo de bovinos adultos y neonatos. Por medio de PCR, obtuvimos las secuencias de los genes de las sirtunas, incluyendo el dominio cataltico y los sitios activo y de unin a zinc, los cuales son secuencias caractersticas de esta familia. Adicionalmente, se cuantific la expresin relativa de Sirt1 y Sirt3 en hgado, msculo y tejido adiposo por medio de PCR en tiempo real, normalizando con la media geomtrica de los genes de referencia ciclofilina A y -actina. La expresin de Sirt1 es menor en hgado y msculo (P > 0.05) y mayor en tejido adiposo (P = 0.0071) de adultos con respecto a los neonatos. En el caso de Sirt3, la expresin fue mayor en los tejidos de adulto, con diferencias estadsticamente significativas en hgado (P = 0.0141) y msculo (P = 0.0017). Mientras que nuestros resultados indican que la mayor y menor expresin de Sirt1 es en hgado y msculo y de Sirt3 en msculo y tejido adiposo, respectivamente, en otras especies ambas sirtunas presentan la mayor expresin en hgado. Estas diferencias en la expresin pueden estar asociadas a las diferencias metablicas entre especies no rumiantes y rumiantes, principalmente que en los rumiantes los requerimientos de glucosa se cubren por medio de gluconeognesis. En este primer estudio de las sirtunas bovinas se estableci un patrn de expresin tejido-especfico y regulado por el desarrollo, sin embargo,
se requiere de mayor investigacin para establecer la relacin entre el metabolismo en el rumiante y la funcin de las sirtunas. Financiado por SEP-CONACYT 55429 y SAF2008-01896 del Ministerio de Ciencia e Innovacion, Espaa. D 35. LOCALIZADOR DIGITAL DE ESTRUCTURAS ANATMICAS EN IMGENES POR RESONANCIA MAGNTICA REFERIDAS A UN ESPACIO ESTEROTAXICO Gonzlez-Santos L., Ortiz, J. J., Pasaye E. H., Concha L., Barrios F.A. Imagen Funcional Cerebral, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico Se presenta un programa de computo para localizar, de manera digital, estructuras anatmicas cerebrales en un espacio esterotaxico 3D en coordenadas MNI (Montreal Neurological Institute) referido a atlas digitales de imagen por resonancia magntica que funciona desde SPM (Statistical Parametric Mapping) y tambin es compatible con FSL (FMRIB Software Library). El programa puede localizar alrededor de 160 estructuras anatmicas referenciadas a un sistema coordenado especfico (espacio esterotxico MNI) y proporcionar su ubicacin espacial, en imgenes volumtricas 3D de atlas de cerebros humanos. Estas coordenadas permiten obtener el nombre de la estructura de inters y en su caso el rea de Brodman relacionada a dicha estructura. Este programa fue desarrollado en lenguaje MatLab, trabaja de manera iterativa y puede ser llamado desde SPM, el usuario localiza el apuntador dentro del rea cerebral que le interesa y el programa muestra el nombre de la estructura a la que se apunta y las coordenadas espaciales (MNI o Thalairach) en tiempo real. El programa puede ser utilizado para: a) aprender neuroanatoma humana, b) cuando se est trabajando en las coordenadas del espacio MNI o Tailaraich, para localizar las estructuras de reas activadas que producen en los programas SPM o FSL, entre otros. Agradecemos la asistencia tcnica y comentarios crticos del Dr. Joel Martnez. T
36. DIFERENCIACIN REGIONAL DE LA EXPRESIN DE ARC EN EL ESTRIADO PROVOCADA POR UN APRENDIZAJE AVERSIVO MEDIADO POR DIFERENTES INTENSIDADES DE CHOQUE ELCTRICO Gonzalez-Franco D.A., Prado-Alcal R.A., Ramrez-Amaya V. y Quirarte G. L. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Quertaro, Qro.,Mxico. El bloqueo de la actividad neuronal en el estriado, produce deficiencias en la memoria, sin embargo, al someter a los animales a experiencias de aprendizaje incrementado estos tratamientos se hacen inocuos. Una hiptesis es que en estas condiciones, un mayor nmero de circuitos neuronales son reclutados y una traza mltiple previene la prdida de la memoria. Utilizando la deteccin de la protena del gen de expresin inmediata temprana Arc (por sus siglas en ingls Activity-Regulated Cytoskeletal-Associated Protein), como indicador de actividad neuronal, se determino la actividad neuronal en el estriado (comprendida como neuronas Arc positivas), durante la adquisicin y evocacin de una tarea de evitacin. A grupos independientes de ratas se les entren con diferentes intensidades de choque elctrico (0.5, 1.0 o 2.0 mA), adems se estudi un grupo que no recibi choque elctrico,
otro que se le aplic el choque ms alto sin entrenarlo y un grupo intacto. Se detect la protena de Arc por medio de inmunofluorescencia en cortes coronales y se analiz el rea de seal de las imgenes obtenidas. Los resultados muestran un aumento diferencial en la expresin de Arc en diferentes regiones del estriado nicamente cuando los animales son sometidos a una experiencia de aprendizaje incrementado (2.0 mA), es decir, a mayor intensidad utilizada en el entrenamiento, mayor es el nmero de clulas que expresan Arc en las regiones ventrales y no en las dorsales del estriado. Es importante mencionar que al administrarse el choque elctrico ms alto, sin entrenamiento, no se present esta activacin. Estos datos sugieren que la experiencia de aprendizaje incrementado recluta un mayor nmero de unidades neuronales en la regin ventral del estriado durante la adquisicin de la tarea. Agradecemos la asistencia tcnica de ngel Mndez, Martn Garca, Norma Serafn, Paola Bello, Omar Gonzlez, Carlos Lozano, Lourdes Lara, Francisco J. Valles, y Leonor Casanova. Apoyado por PAPIIT-UNAM (IN214111 y IN216510) y CONACYT (130524 y 130802). M
37. MORFOLOGA Y ANLISIS CROMATOGRFICO DEL APARATO VENENOSO DE Conus purpurascens Gorrostieta-Hurtado E., Michel-Morfn E.2, Aguilar-Ramrez M. B., Falcn-Alcntara A., Palma-Tirado L.1, Heimer de la Cotera E. P. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa. UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico; 1Departamento de Estudios para el Desarrollo Sustentable de Zonas Costeras, Universidad de Guadalajara, San Patricio Melaque, Jalisco, 2Unidad de Microscopa INB-UNAM. Conus purpurascens es un caracol piscvoro, cuyo veneno se encuentra principalmente en el conducto venenoso, aunque algunos autores mencionan que en el bulbo existe una biosntesis en menor proporcin con respecto al conducto, y se maneja la hiptesis de que los dientes radulares estn precargados de veneno en el saco radular. Este estudio describe la anatoma externa, histologa y el perfil cromatogrfico del aparato venenoso. Se utilizaron tcnicas convencionales para la descripcin anatmica, tcnicas de secado de punto crtico para la observacin en microscopa electrnica de transmisin, tcnicas histolgicas para la descripcin de tejidos, y cromatografa de alta resolucin para la separacin de los componentes de los extractos crudos. Se describi el bulbo, conducto, saco radular y probscide, los cuales estn conformados por tejido epitelial, conjuntivo y grnulos de protenas; estos ltimos estaban presentes en el bulbo, el conducto, el saco radular y el diente radular. El perfil cromatogrfico mostr que el conducto venenoso, saco radular y bulbo posiblemente contienen pptidos o protenas. Se concluye que, adems del conducto, el saco radular y el bulbo presentan grnulos proteicos, con posible actividad biolgica. Los datos apoyan la hiptesis de que los dientes de la rdula se cargan en el saco radular y que existe biosntesis y/o almacenamiento de veneno en el bulbo. Fuentes de financiamiento: - Programa de Apoyo a Proyectos de Investigacin e Innovacin Tecnolgica (PAPIITDGAPA-UNAM), Clave IN211611. - Presupuesto del Lab. de Neurofarmacologa Marina del INB-UNAM. - Fondo Mixto CONACyT-Gobierno del Estado de Jalisco Clave: JAL200905124426. I Posdoctoral
38. EFECTO DE LA INHIBICIN DE LA TRANSCRIPCIN EN EL ESTRIADO DORSAL SOBRE LA CONSOLIDACIN DE LA MEMORIA DE UN APRENDIZAJE INCREMENTADO EN UNA TAREA DE EVITACIN INHIBITORIA. Hernndez M.I., Medina A.C., Quirarte G.L. y Prado-Alcal R.A. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El estudio de las bases neurobiolgicas del proceso de la consolidacin de la memoria ha sido abordado ampliamente. Se ha reportado que la consolidacin de la memoria es un proceso que depende del tiempo y de la sntesis de nuevas protenas. Por lo tanto, si se inhibe la sntesis de protenas se producir amnesia. En trabajos previos de nuestro laboratorio, se ha demostrado que en condiciones de aprendizaje incrementado, se impide la amnesia producida por la administracin de inhibidores de sntesis de protenas, por va sistmica o en el hipocampo, estructura implicada en la memoria. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de un inhibidor de la transcripcin en el estriado dorsal sobre la consolidacin de la memoria de un aprendizaje incrementado. A grupos aleatorizados de ratas macho de la cepa Wistar, se les administr en el estriado dorsal, bilateralmente, una de varias dosis del inhibidor de la transcripcin, DRB, (20, 40 80 160 ng), o el vehculo DMSO al 8%. Quince minutos despus de la administracin, las ratas fueron entrenadas en la tarea de evitacin inhibitoria con 1.5 mA de choque elctrico. A otras ratas que fueron entrenadas con nivel alto de reforzamiento (3.0 mA), se les administr 40 ng de DRB. La prueba de retencin se realiz 48 horas despus del entrenamiento. Nuestros datos muestran que con la intensidad baja de choque, el DRB induce amnesia, pero con la intensidad alta, la consolidacin de la memoria no se ve afectada. Estos resultados nos permiten concluir que la inhibicin de la transcripcin en el estriado dorsal, produce amnesia y este efecto desaparece cuando los animales son sometidos a experiencias de aprendizaje incrementado. Agradecemos el apoyo tcnico de ngel Mndez, Norma Serafn, Omar Gonzlez, Alberto Lara y Martn Garca. Trabajo apoyado por CONACYT (128259) y PAPIIT (IN208110). L 39. CONDUCTAS AVERSIVAS Y EFECTO DEL pH CIDO EN RATAS EXPUESTAS SUBCRNICAMENTE AL HERBICIDA GLIFOSATO Hernndez-Plata I, Giordano M, Rodrguez Crdova V. Departamento de Neurobiolgica Conductual y Cognitiva. Laboratorio de Plasticidad Cerebral. Instituto de Neurobiologa UNAM, Juriquilla, Mxico. El glifosato es una molcula compuesta de glicina y acido fosfnico y es el ingrediente activo de algunas mezclas de herbicidas ampliamente utilizadas en el mundo. A pesar de que estas mezclas son consideradas ligeramente txicas para los animales, hay evidencia que muestra lo contrario. En el laboratorio hemos encontrado que el tratamiento subcrnico de glifosato (pH=2) causa hipoactividad en las ratas macho. Los objetivos del presente trabajo son conocer si las ratas tratadas con glifosato de forma subcrnica desarrollan conductas aversivas y si el pH cido del tratamiento influye en la hipoactividad. Para ello se plantearon tres experimentos, 1) condicionamiento de aversin al sabor, 2) condicionamiento de aversin al lugar y 3) evaluacin de los efectos del pH en animales tratados subcrnicamente con solucin salina, glicina (150 mg/kg de peso) y glifosato (150 mg/kg de peso), para este experimento todas las soluciones se prepararon por duplicado ajustndose a pH=7 y pH=2. En cuanto a los resultados de aversin al sabor, se observ que los animales tratados con salina o glifosato (pH=2) no presentan dicha aversin, slo la presentaron aquellos que
recibieron cloruro de litio (0.4 M). Asimismo, los animales tratados con salina o glifosato (100 mg/kg; pH=2) no desarrollaron aversin al lugar (su sitio preferido fue el mismo antes y despus del tratamiento). El tercer experimento mostr que la actividad locomotora de los animales tratados solamente con glicina pH=2 o glifosato pH=2 presentaron hipoactividad. Lo anterior muestra que la hipoactividad generada por el tratamiento subcrnico con glifosato no es resultado de un malestar generalizado, y que tampoco es resultado de aversin al lugar, sino a efectos del glifosato sobre estructuras nerviosas centrales y/o perifricas involucradas en el control motor. Adems, la glicina en la molcula de glifosato juega un papel importante en el efecto de la hipoactividad de este compuesto. Agradecemos la asistencia tcnica de Soledad Mendoza. Trabajo apoyado por CONACyT 60662, 103907; PAPIIT 214608-19, 211709-21; Beca CONACyT 164300 a IHP. D
40. LA PROTENA BETA AMILOIDE INHIBE LA ACTIVIDAD SINPTICA GABARGICA DE INTERNEURONAS DEL HIPOCAMPO Huanosta-Gutirrez A, Pea-Ortega F. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro Mxico. El deterioro cognoscitivo temprano en la enfermedad de Alzheimer (EA) parece ser producido por los efectos neuropatolgicos de la protena beta amiloide (PBA). Recientemente, nuestro grupo de trabajo, y algunos otros, se han enfocado en la tarea de determinar las bases celulares del deterioro cognoscitivo producido por la PBA en estructuras relevantes para la memoria y el aprendizaje como es el hipocampo. Entre los varios mecanismos propuestos, se ha encontrado que la PBA puede inducir deterioro cognoscitivo al alterar la generacin de patrones oscilatorios producidos por circuitos neuronales en el hipocampo. Por otra parte, tanto las evidencias experimentales como los modelos de los circuitos hipocampales indican que las interneuronas (INs) generan los distintos patrones de oscilacin en el hipocampo. El inters de este trabajo es estudiar si la alteracin de los patrones oscilatorios del hipocampo producida por la PBA tienen su origen en la alteracin de las propiedades intrnsecas de las interneuronas GABArgicas y si esto se refleja en una alteracin de la transmisin sinptica entre estas. Para cumplir con el objetivo se realizaron registros de clula nica en la regin CA1 de rebanadas de hipocampo. En este trabajo identificamos tres poblaciones de INs con caractersticas anatmicas y electrofisiolgicas distintas. Nuestros resultados muestran que la aplicacin aguda de la PBA tiene un efecto sutil en la frecuencia de disparo de estas poblaciones de INs y el hallazgo ms relevante fue la inhibicin, mediada por la PBA, de la transmisin sinptica GABArgica que reciben las INs. Tomando en cuenta los cambios producidos por la PBA sobre la frecuencia de los sinpticos espontneos GABArgicos podemos concluir que esta inhibicin es de origen presinptico. An faltan experimentos por realizar para poder determinar los mecanismos celulares a travs de los cuales la PBA afecta a diferentes tipos de neuronas y cmo es que este efecto se refleja en una alteracin de la actividad del circuito hipocampal. Trabajo auspiciado por: DGAPA IA201511; CONACyT 59187,151261; Alzheimers Association NIRG-11-205443 D
41. EFECTO DE LA MICROINYECCIN DE ANISOMICINA EN LA AMGDALA CEREBRAL SOBRE LA CONSOLIDACIN DE LA MEMORIA MEDIADA POR DIFERENTES INTENSIDADES DE REFORZADOR NEGATIVO. Jurez Y., Medina A.C., Quirarte G.L. y Prado-Alcal R.A. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla. Quertaro, Qro. 76230. Mxico. Se ha propuesto que la sntesis de protenas de novo es requerida para la memoria de largo plazo, por lo que, la administracin de inhibidores de la sntesis de protenas (ISPs) impiden dicho proceso. Se sabe que que la administracin de ISPs en la amgdala de ratas entrenadas en la tarea de evitacin inhibitoria (EI) produce amnesia, pero no se ha determinado si al incrementar la intensidad del choque elctrico se mantiene dicho efecto. El objetivo del estudio fue determinar si la administracin de anisomicina (ANI), en la amgdala produce un efecto amnsico cuando los sujetos son entrenados con un choque elctrico de mayor magnitud. Se implantaron bilateralmente cnulas en la amgdala a ratas adultas. Despus se les administr ANI en la amgdala treinta minutos antes del entrenamiento en la tarea de EI. Cuarenta y ocho horas despus del entrenamiento se realiz la prueba de retencin. Se tuvo un diseo de grupos independientes con 3 dosis de ANI (31.25, 62.5 100 g), adems se incluy un grupo control (vehculo). Las ratas fueron entrenadas con un choque de 3.0 mA. A otros grupos se les administr 62.5 100 g y fueron entrenadas con un choque de 5.0 mA. Los resultados mostraron que todas las ratas tratadas con ANI presentaron amnesia; independientemente de la intensidad, baja o alta, de reforzamiento. Estos resultados indican que, para el caso de la amgdala, no se produce el efecto protector del aumento de la intensidad del choque que se ha encontrado en otras regiones cerebrales. Trabajo apoyado por CONACYT (128259) y PAPIIT (IN208110). Agradecemos la importante colaboracin de Leonor Casanova, ngel Mndez, Norma Serafn, Luis A. Prado, Omar Gonzlez, Alberto Lara y Martn Garca. Beca de CONACYT a Y.J. (372289). M
42. EXPRESIN DE LOS RECEPTORES PURINRGICOS P2Y2, P2Y4 Y P2Y6 EN LAS CLULAS DERIVADAS DEL EPITELIO SUPERFICIAL OVRICO DE MAMFERO Lara-Meja A, Vzquez-Cuevas FG, Arellano RO. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. INB-UNAM. La superficie del ovario se encuentra cubierta por el epitelio ovrico superficial (OSE), en el contexto patolgico se sabe que el 90% de los cnceres ovricos se originan en esta estructura. Los constantes cambios que sufre el ovario durante el ciclo folicular, aunado al fenotipo epitelio-mesnquimal de esta estructura, le confieren susceptibilidad. El sistema purinrgico regula diferentes procesos celulares como la proliferacin y la apoptosis; el ATP acta sobre receptores de membrana denominados P2X y P2Y. Los receptores P2Y son receptores acoplados a protenas G, en el presente trabajo hacemos referencia a los subtipos 2, 4 y 6 que son sensibles a nucletidos de uridina y se encuentran acoplados a protenas Gq. Por medio de inmunofluorescencia detectamos la expresin de los receptores P2Y2, P2Y4 y P2Y6 en cultivos del OSE de ratn, en la linea celular derivada del OSE murino (MM14. Ov) y en clulas de carcinoma ovrico humano (SKOV3). La localizacin de los receptores P2Y2 es distinta entre las clulas OSE y SKOV3 respecto a las MM14.Ov; para los otros
receptores analizados no hubo diferencias. La caracterizacin funcional fue realizada por registro de las variaciones en la concentracin de Ca2+ intracelular, aplicando agonistas selectivos para los receptores estudiados. Utilizando los valores mximos construimos curvas concentracin-respuesta y calculamos la EC50. El anlisis revel una entidad farmacolgica que es activada por UTP en clulas del OSE y en MM14.Ov, y que puede corresponder al receptor P2Y2 o al receptor P2Y4; una entidad farmacolgica que responde a UDP en los 3 tipos celulares que corresponde con el receptor P2Y6. En las clulas SKOV3 detectamos dos entidades farmacolgicas con rdenes de magnitud distinta, lo que sugiere que los receptores que responden a UTP se distribuyen en dos poblaciones. Esta diferencia puede reflejarse en los procesos regulados por estos receptores, como la proliferacin y la diferenciacin, lo que ha sido observado en otros sistemas y que ubican a los receptores purinrgicos como potenciales blancos terapeticos. Donativos: PAPIIT IN214409 para ROA e IN208209 para FGV-C y CONACyT 82340 para ROA. M 43. ANLISIS DEL EFECTO DEL HALOPERIDOL SOBRE LA PROGRESIN DE LA ARTRITIS INDUCIDA POR ADYUVANTE EN LA RATA Ledesma-Colunga M.G., 1 Adn N., 1 Quintanar-Stephano A.,2 Mndez I.,1 Martnez de la Escalera G.,1 y Clapp C.1 1 Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. 2Centro de Ciencias Bsicas, Universidad Autnoma de Aguascalientes, Aguascalientes, Mxico. La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune inflamatoria crnica que se caracteriza por afectar principalmente a las articulaciones y cuya evolucin es generalmente progresiva. El estudio de frmacos capaces de contrarrestar la progresin de la AR reviste gran inters. La prolactina (PRL) es una hormona hipofisaria con efectos inmunomoduladores que puede influir sobre la progresin de la AR. Se ha reportado que la PRL se incrementa en la circulacin de pacientes con AR y que la hiperprolactinemia de la lactancia se asocia con un menor riesgo de exacerbacin de la enfermedad. Para analizar la posible influencia de la PRL en la artritis, evaluamos el efecto de la hiperprolactinemia sobre la inflamacin de las patas traseras de ratas macho con artritis inducida por adyuvante (AIA). La hiperprolactinemia se gener dos das antes de la induccin de la AIA, a travs de la administracin crnica de haloperidol, un antagonista dopaminrgico que estimula la secrecin hipofisiaria de PRL. Los resultados obtenidos muestran que el haloperidol no solo disminuy la inflamacin de las articulaciones sino que tambin fue capaz de evitar la prdida de peso caracterstica del modelo de artritis utilizado. Para analizar si los efectos observados pudieran ser debidos a la hiperprolactinemia, cuantificamos los niveles de PRL en suero por radioinmunoensayo (RIA) a los 3, 14 y 32 das despus de la administracin de haloperidol, observndose niveles elevados de PRL a los 3 y 14 das pero no a los 32 das cuando los niveles de PRL fueron normales. De manera opuesta, en el grupo de AIA sin haloperidol se observ hiperprolactinemia a los 32 das, en correlacin con una marcada inflamacin articular. Estos resultados sugieren que la hiperprolactinemia inducida en las etapas tempranas de la artritis puede tener un efecto protector contra la enfermedad, mientras que en las etapas posteriores su efecto pudiera ser opuesto. Esta investigacin propone que el haloperidol tiene valor potencial preventivo y teraputico en la AR. Estudios en proceso investigan el mecanismo responsable de esta accin del haloperidol y la posibilidad de que la PRL ejerza efectos inflamatorios opuestos dependiendo del tiempo de desarrollo de la artritis.
Trabajo auspiciado por DGAPA-IN200509. Agradecemos la asistencia tcnica de Fernndo Lpez-Barrera, Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Trabajo auspiciado por DGAPA-IN200509. M
44. REGULACIN DE LA SECRECIN HIPOFISIARIA DE PROLACTINA DURANTE LA DIABETES. Lemini M., Ruiz-Herrera X., Martnez de la Escalera G., Macotela Y. y Clapp C. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Quertaro, Mxico. La hormona prolactina (PRL) puede proteger contra la diabetes y sus complicaciones. La PRL estimula la proliferacin, supervivencia y produccin de insulina por las clulas b pancreticas. Adems, la PRL es procesada proteolticamente a vasoinhibinas, una familia de pptidos que inhiben el incremento en la vasopermeabilidad retiniana determinante de la retinopata diabtica. Recientemente, se mostr que la PRL se incrementa en la circulacin de pacientes diabticos y que este incremento disminuye en pacientes con el grado mas avanzado de retinopata, sugiriendo la presencia de factores capaces de regular a la alta y a la baja la secrecin hipofisiaria de esta hormona en la diabetes. Dos de estos factores podran ser el factor de necrosis tumoral a (TNFa) y el factor de crecimiento transformante b (TGFb ), los cuales contribuyen a la resistencia a la insulina y a la fibrosis en la diabetes, respectivamente. En este trabajo, investigamos efectos directos del TNFa y del TGFb sobre la sntesis y secrecin de PRL por la lnea celular GH4C1 derivada de lactotropos hipofisiarios murinos en cultivo. Encontramos que el TNFa estimula, mientras que el TGFb inhibe la expresin del ARN mensajero de la PRL y la secrecin de la PRL determinados por qRT-PCR, Western blot y radioinmunoensayo. El efecto de ambas citocinas fue mayor en condiciones de hiperglucemia (25 mM de glucosa) que en condiciones de normoglucemia (5.5 mM de glucosa) y la co-administracin de dichas citocinas antagoniz las acciones estimulatorias e inhibitorias respectivas. Estos hallazgos sugieren que la interaccin entre el TNFa y el TGFb puede regular la secrecin hipofisiaria de PRL en la diabetes. Adems, encontramos que la resistencia a la insulina en la prediabetes inducida por una dieta alta en grasa en la rata se correlaciona con un aumento en la expresin del ARNm de la PRL hipofisiaria. Estudios en proceso pretenden evaluar la interaccin entre el TNFa y el TGFb sobre la expresin y secrecin de PRL en este modelo experimental de diabetes tipo 2. Agradecemos la asistencia tcnica de Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Trabajo auspiciado por CONACYT SALUD-2008-C01-87015. D
45. EFECTOS DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO SOBRE LA APOPTOSIS EN CLULAS DE BOLSA DE FABRICIO DE POLLO Luna-Acosta JL, Alba-Betancourt C., Luna MM, Carranza M, Armburo C. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa. UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico La hormona de crecimiento (GH) participa en la regulacin de la apoptosis de distintos tipos celulares. Anteriormente reportamos que la GH en la bolsa de Fabricio vara con
su desarrollo, incrementndose durante la fase de crecimiento rpido y disminuyendo abruptamente durante la involucin. Aqu deteminamos qu mecanismos (directo o indirecto) median los efectos anti-apoptticos de la GH en cultivos primarios de este tejido. Estos cultivos mostraron inmunorreactividad al AbBu-1 (95.40.95%), al AbIgG (69.077.2%) y a AbIgM (24.88.4%), conteniendo principalmente linfocitos B. Para evaluar el efecto directo de GH sobre la viabilidad celular y la apoptosis (caspasa 3 y TUNEL) mediada por la va PI3K/Akt, los cultivos se incubaron en presencia de GH-10nM, IGF-I-40nM, GH/IGF, IGF/-IGF, -IGF, GH+wortmanina, wortmanina y GH/-GH. Con GH e IGF-I la delta de viabilidad fue significativamente (7.152.4%) mayor que el control. Con IGF-I 40nM la actividad de caspasa 3 disminuy significativamente (4020%) comparado con los cultivos no tratados. Se realiz inmunoneutralizacin de IGF-I para determinar si los efectos de la GH sobre viabilidad y apoptosis son mediados a travs de IGF-I o directos. Al evaluar los efectos sobre la apoptosis no se inhibi la actividad de caspasa 3 con GH+anticuerpo, (641% de actividad). IGF-I+anticuerpo y anticuerpo solo no mostr diferencias significativas (8815% y 724% actividad) respecto al control. Se encontraron diferencias de viabilidad entre el control y los tratamientos de GH+anti-IGF-I (180.78%), IGF-I+ -IGF-I (80.54%), y el anticuerpo contra IGF-I (60.24%). La actividad de caspasa 3 disminuy significativamente con GH+IGF pero no IGF-I+-IGF en comparacin con el control. Esto indica un efecto directo de GH. Para determinar si la PI3K/Akt media el efecto sobre la apoptosis en los cultivos se trat con 10M de wortmanina (Inhibidor de PI3K). La viabilidad mostr que GH+wortmanina no increment la viabilidad (6.970.65%). Al compararlo con los tratamientos con GH o IGFI con el tratamiento de GH+wortmanina, GH o IGF-I se increment significativamente la viabilidad. La actividad de caspasa 3 no disminuy con respecto al control (1005.74%) cuando se trat con GH+wortmanina (87.71.97%). Estos resultados indican que los efectos antiapoptticos de la GH son directos y mediados por la va PI3K/Akt. Agradecimientos: apoyado parcialmente por PAPIIT (IN-210209), CONACYT (FI-60296beca de posgrado 200220), Unidad Microscopia Evelyn Flores, Nydia Hernndez y laboratorista Gerardo Courtois) . D 46. INTEGRACIN FUNCIONAL DE UNA LNEA CELULAR GABARGICA EN EL HIPOCAMPO DE LA RATA. Mrquez-Ramos A1, Giordano M2 y Pea-Ortega F1. 1Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, 2Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El sistema nervioso central tiene una capacidad limitada para reparar funciones cerebrales alteradas por cambios en las propiedades elctricas de las clulas (como en la epilepsia); o bien por la prdida neuronal, como en el caso de la isquemia y las enfermedades neurodegenerativas. La terapia celular se propone como una alternativa teraputica que permitir remplazar clulas que se han visto alteradas o que han degenerado. Si bien hay evidencias electrofisiolgicas, neuroqumicas e histolgicas de que las clulas trasplantadas podran integrarse en el tejido husped, es necesario determinar el grado de integracin funcional de las clulas trasplantadas, los cambios funcionales que sufren estas clulas y los cambios en la dinmica de los circuitos trasplantados. El objetivo principal de este trabajo es el estudio de las relaciones funcionales que se establecen entre el tejido husped y las clulas trasplantadas en un modelo in vitro. Para ello, se utiliz la lnea celular M2132O CL-4 (CL-4); que sobreproduce y libera GABA y que se ha utilizado en el tratamiento de la epilepsia experimental. Previamente, demostramos que la CL-4 se activa y libera
GABA en respuesta a la elevacin del potasio extracelular y a la activacin de receptores glutamatrgicos, lo que indica su potencialidad de responder dentro de un circuito neuronal. Utilizando tcnicas electrofisiolgicas y de epifluorescencia, en este trabajo, demostramos que el trasplante de la CL-4 en cultivos organotpicos de hipocampo cambia las propiedades tanto de las clulas trasplantadas, como las del tejido husped. La CL-4 cambia su fenotipo funcional de tipo-glial in vitro a tipo-neuronal una vez trasplantadas. La caracterizacin funcional de los cultivos organotpicos trasplantados con la CL-4, a travs de imgenes de epifluorescencia, demostr que las clulas CL-4 presentan actividad correlacionada con clulas del husped y entrada sinptica comn. Adems, el trasplante de la CL-4 en el hipocampo induce una reduccin de la excitabilidad del circuito, posiblemente debido al GABA que libera la CL-4 en respuesta a estmulos sinpticos provenientes del tejido husped. Nuestros resultados sugieren que el trasplante de una lnea celular en un circuito neuronal establece una relacin dinmica que modifica las propiedades de ambos. Apoyos: DGAPA IA201511; CONACyT 59187,151261; Alzheimers Association NIRG-11205443. Categora: D 47. OBTENCIN DE LAS CUALIDADES AFECTIVAS DE TRES TIPOS DE AMBIENTES Martnez-Soto, Joel; Gonzales-Santos, L. y Barrios, F. A. Imagen Funcional Cerebral,Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM El presente estudio se elabor con la finalidad de obtener un conjunto de imgenes para estudiar los correlatos neurales de la experiencia afectiva de la restauracin psicolgica ambiental-RPA proveniente de la observacin de tres tipos de ambientes: naturales (AN), con naturaleza urbana (NU) y construidos sin naturaleza (CsN). Se dise una estrategia de investigacin que comprende dos estudios: 1) seleccin y definicin de imgenes para estos tres tipos de ambientes y 2) obtencin de las valencias afectivas de dichas imgenes. En el estudio 1 participaron 5 arquitectos del paisaje y 2 estudiantes de posgrado expertos en fotografa quienes valoraron 450 imgenes (tipo AN= 250; NU= 115 y CsN= 85) a travs de un software diseado ex profeso. Con la evaluacin de la calidad visual, complejidad y representatividad de las imgenes, se extrajeron un total de 117 fotografas (AN= 47; NU= 37 y CsN= 33) que fueron aplicadas en el siguiente estudio para obtener las valencias afectivas de placer, activacin y dominancia (Mehrabian y Russell, 1974). En el estudio 2 participaron 110 estudiantes clnicamente sanos (81 mujeres, 23 hombres; edad media 20 aos, DE = 4.7) quienes juzgaron 117 imgenes a travs del Maniqu de Autoevaluacin (SelfAssessment Manikin; Lang, 1985) en una version computarizada desarrollada en nuestro laboratorio. En el valor otorgado a la valencia afectiva (agrado vs. desagrado) y activacin (e.g. excitacin vs. calma) se encontraron diferencias estadsticamente significativas que favorecen positivamente a los ambientes naturales vs. los de naturaleza urbana y los construidos sin naturaleza. No se documentaron diferencias entre el factor de dominancia y los tipos de ambiente. Los resultados de esta investigacin han hecho factible la seleccin de 55 imgenes con altas y bajas valencias que sern utilizadas para redesarrollar los paradigmas con los que se ejecutarn los estudios de resonancia magntica funcional, para establecer los correlatos neurales de la experiencia afectiva de la RPA. Fuente de financiamiento: DGAPA Categora del primer autor: Posdoc
48. VAS DE SEALIZACIN INTRACELULAR ACTIVADAS POR ESTIMULACIN DEL RECEPTOR P2X7 EN CLULAS DE CNCER OVRICO Martnez-Ramrez A.S., Vzquez-Cuevas F.G., Garay E., Garca-Carranc A., PrezMontiel D., and Arellano R.O. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM; Laboratorio de Virus y Cncer, Unidad de Investigacin Biomdica en Cncer, Instituto de Investigaciones Biomdicas, UNAM, INCAN; Departamento de Patologa, Instituto Nacional de Cancerologa, Secretara de Salud. El epitelio ovrico superficial (OSE) forma una monocapa de clulas que rodean al ovario, se sabe que el 90% de los cnceres ovricos humanos se originan en el OSE siendo una patologa altamente maligna. Los receptores P2X son canales inicos activados por ligando y estn ampliamente expresados en las clulas somticas ovricas, en las cuales activan varias vas de sealizacin. Se han descrito siete subunidades P2X (P2X1-P2X7), que forman receptores homotrimricos o heterotrimricos. El receptor P2X7 presenta caractersticas funcionales que son diferentes de otros miembros de la familia; por ejemplo su activacin induce apoptosis por sobrecarga de Ca2+, y sus extremos amino y carboxilo terminales presentan sitios de interaccin protena-protena. En el presente trabajo se muestra que el receptor P2X7 es altamente expresado en las clulas del OSE en ovarios humanos sanos; esta expresin se conserva en tumores ovricos en los cuales se observa hiperplasia e hipertrofia de la capa del OSE. En clulas SKOV3 el anlisis de incremento de Ca2+ por fluorescencia funcional revel que la respuesta del receptor en estas clulas se desensibiliza mientras que en clulas sanas no presenta desensibilizacin. El antagonista selectivo A438079 es capaz de inhibir la respuesta inducida por BzATP, confirmando la participacin de P2X7 en la respuesta de las clulas SKOV3. La estimulacin del receptor P2X7 induce la fosforilacin de las cinasas ERK y AKT y no se presenta activacin de caspasa 3. El estudio de la fosforilacin de ERK mostr un componente dependiente de Ca2+ a tiempos cortos (5-15 min), y otro dependiente de la actividad de cinasa de EGFR. Estos datos sugieren que el receptor P2X7 participa en la progresin tumoral, induciendo vas de sealizacin relacionadas con procesos proliferativos y de evasin del proceso apoptotico. Beca CONACYT a ASMR (369701). Trabajo auspiciado por CONACYT-Mxico 82340, PAPIIT-UNAM IN214409 y PAPIIT-UNAM IN208209. Categora: M
Mircoles 21 de Septiembre, Cartel 49 al 72
Septiembre 21, 2011
49. DIFERENTES NIVELES DE SNTESIS DE PROTENAS GENERAN CAMBIOS EN LA MEMORIA DE LARGO PLAZO? Medina A.C.1, Navarro A.1, Gonzlez-Salinas S.1, Antaramin A.2, Quirarte G.L,1 y Prado-Alcal, R.A1. 1Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, 2Unidad de Proteogenmica, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla. Quertaro, Qro. 76230. Mxico. Se sabe que la sntesis de protenas de novo, durante el proceso de consolidacin, es importante para la formacin de la memoria de largo plazo. La inhibicin de la sntesis de protenas usando cicloheximida (CXM) produce amnesia en ratones y en ratas. Sin embargo, en nuestro laboratorio encontramos que una sola aplicacin sistmica de CXM (2.8 mg/kg) produjo diferentes niveles de sntesis de protenas a lo largo de cuatro das. Encontramos un 68% como porcentaje mximo de inhibicin a los 30 min de su administracin. A las 6 hr el efecto inhibitorio termin. Encontramos una sobre expresin de protenas a las 24 hr que se mantuvo hasta las 72 hr y regres a los niveles basales 96 hr despus del tratamiento. Con estos resultados hipotetizamos que 1) la CXM producir amnesia cuando se administra 30 min antes del entrenamiento; 2) La CXM no producir amnesia si se administra 6 96 hr antes del entrenamiento y 3) La CXM producir mejora en la memoria cuando se administra 24 hr antes del entrenamiento. Por lo tanto, decidimos poner a prueba emprica estas hiptesis. Se emplearon ratas macho Wistar (250-350 g). Se formaron grupos independientes y se les administr CXM o vehculo 30 min, 6, 24 96 hr antes del entrenamiento en la tarea de evitacin inhibitoria. La prueba de retencin se realiz cuatro das despus del entrenamiento. Encontramos que la CXM produjo amnesia en todos los casos, independientemente del grado de inhibicin protenica. Es probable que la amnesia fue producida por algunos de los efectos colaterales que se presentan por la administracin de CXM y no por la inhibicin de la sntesis de protenas misma. Agradecemos el apoyo tcnico de ngel Mndez, Norma Serafn, Omar Gonzlez, Alberto Lara y Martn Garca. Trabajo apoyado por CONACYT (128259) y PAPIIT (IN208110). T 50. EL EFECTO ANTINEOPLSICO DEL YODO MOLECULAR INVOLUCRA CAMBIOS EN EL POTENCIAL INVASIVO DE XENOTRANSPLANTES DE CNCER MAMARIO HUMANO. Mendieta I, Nez-Anita RE, Delgado G y Aceves C. Departamento de Neurobiologa celular y molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM-Juriquilla El cncer mamario (CaMa) es el primer lugar en incidencia y muerte por neoplasias a nivel mundial en mujeres. La letalidad del CaMa no la confiere el tumor primario per se sino su elevada capacidad de hacer metstasis a rganos vitales. Estudios previos demostraron que la suplementacin de yodo molecular (I2) reduce significativamente la progresin tumoral mamaria tanto in vivo como in vitro. Anlisis moleculares indican que el I2 reduce la proliferacin, induce apoptosis e inhibe la expresin de protenas relacionadas con la vascularizacin e invasin tumoral como el factor de crecimiento de endotelio vascular (VEGF), el activador de plasmingeno de tipo uroquinasa (uPA) y su receptor (uPAR).
Utilizando xenotransplantes en ratones inmunodeficientes (nu/nu) se determin el efecto de la suplementacin de I2 sobre la implantacin, progresin y potencial metasttico de clulas tumorales mamarias humanas responsivas a estrgenos y con bajo potencial invasivo (MCF-7) y resistentes a estrgenos y con alto potencial invasivo (MDA-MB231). Se inocularon ratones hembras nu/nu (8 semanas de edad) con 5x106 clulas de una u otra lneas parentales en 50 l de PBS y 50 l de matrigel, y se dividieron en control (grupo C) y yodo (grupo I2; 0.025% en el agua de beber) durante 6 semanas. Se cuantific la presencia y tamao tumoral, as como la tasa de proliferacin (inmunohistoqumica de antgeno nuclear de proliferacin celular; PCNA) y la expresin de VEGF, uPA y uPAR. Nuestros resultados mostraron que el suplemento de yodo disminuye la incidencia, el crecimiento tumoral y la tasa de proliferacin de ambas lneas celulares; MCF-7 (50%; 0.5 0.07 cm3; 34.3% clulas positivas a PCNA/campo); MDA-MB231 (20%; 0.18 0.08 cm3; 34.8% clulas positivas a PCNA/campo) comparado con el control (95.1%; 2.2 0.3 cm3; 42.8% clulas positivas a PCNA/campo). Observamos adems, disminuciones significativas en la expresin de VEGF en ambas lneas celulares as como de uPA y uPAR en las MDA-MB231, sugiriendo que el I2 interfiere en los procesos cancerosos mamarios independientemente de su respuesta estrognica y su potencial invasivo. Agradecemos la asistencia tcnica de Felipe Ortiz, Martn Garca. Trabajo auspiciado por CONACYT 78955 y PAPIIT-UNAM 201210. Categora L 51. EFECTOS DE LA EXPOSICIN AGUDA AL HERBICIDA ATRAZINA EN LA EXPRESION DE FOS Mendoza-Trejo M.S., Giordano M y Rodrguez Crdova V. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La atrazina (ATR) es un herbicida ampliamente utilizado en el mundo y ha sido implicado como un txico para el sistema dopaminrgico. Estudios in vitro e in vivo muestran que la administracin de ATR en roedores disminuye los niveles de dopamina estriatal, reduce el nmero de neuronas TH positivas y TH negativas en la sustancia nigra pars compacta y el rea ventral tegmental. Tambin se ha observado que los animales tratados con ATR reducen su actividad locomotora inmediatamente despus de la administracin del herbicida. En este trabajo se evalu la presencia de Fos (producto proteico del gen temprano c-fos) que se utiliza como marcador de actividad neuronal, inmediatamente despus de la administracin de ATR (fase de hipoactividad). Se utilizaron ratas macho de la cepa Sprague-Dawley de 440-450 g, las cuales bajo anestesia general recibieron metilcelulosa (MC) 1% 50 mg ATR/kg va I.P.). Noventa minutos despus de la administracin del vehculo o ATR las ratas fueron perfundidas. Posteriormente se cortaron los cerebros de los roedores de dos maneras, el hemisferio derecho fue seccionado en cortes coronales de 50 m, mientras que el izquierdo se seccion en cortes sagitales de 50 m y se realiz la tcnica de inmunohistoqumica para detectar la protena Fos. El conteo de clulas positivas a Fos se efecto con el programa ImageJ 1.43u. No encontramos diferencias en la expresin de Fos en el estriado, pero para las evaluaciones realizadas en Sustancia nigra (SN), corteza prefrontal (CPF) y amgdala (A) se observ un aumento en el nmero de clulas que expresaban Fos despus de la administracin de ATR en comparacin con el control. Estos datos indican que al no haber diferencias en la expresin de Fos en el estriado, las clulas medianas espinosas no responden a ATR, mientras que las neuronas de la SN, CPF y A s se activan despus del estmulo.
Agradecemos la asistencia tcnica MVZ Martn Garca Servn, Ing. Luis Antonio Prado Loeza y Unidad de Microscopa. Trabajo auspiciado por PAPIIT IN 214608-20 y 211709-22, CONACYT 60662 y 103907. T 52. LA 3,5-T2 Y LA T3 ACTIVAN ISOFORMAS DISTINTAS DEL RECEPTOR A HORMONAS TIROIDEAS 1 EN EL Fundulus heteroclitus Mendoza Cisneros A., Villalobos P., Valverde-R C., Orozco A. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Hace solo dos dcadas, la 3,5-T2 era considerada como un producto inactivo de la desyodacin de T3. Sin embargo, nosotros mostramos que en el telesteo Fundulus heteroclitus (Fh), la 3,5-T2 tiene efectos tiromimticos, y que, al igual que la T3: i) revierte el efecto del hipotiroidismo sobre la expresin de genes regulados positiva- y negativamente por TH, y ii) recluta poblaciones distintas de factores de transcripcin a los elementos de respuesta a TH (TRE). Adems, encontramos que el Fh expresa por lo menos dos isoformas del receptor de hormonas tiroideas beta 1 (TR1); ambas carecen de 76 amino cidos (aa) en la regin N-terminal, comparadas con el TR1 de humano, y una de ellas (isoforma larga) contiene un inserto de 9 aa localizado justo al inicio del dominio de unin al ligando. Para evaluar la influencia de este inserto, as como de la regin N-terminal sobre la capacidad de activacin de los TR1 mediada por T3 o por 3,5-T2, construimos receptores quimricos y utilizamos un ensayo de transactivacin (gen de luciferasa acoplado a un TRE). Nuestros resultados muestran que, en la lnea celular GH3 que es tpicamente responsiva a TH, la actividad de transactivacin es mayor en las clulas transfectadas con el TR1 largo y tratadas con 3,5-T2, o bien en las clulas tratadas con T3 y transfectadas con el TR1 corto (sin inserto de 9 aa). Tambin observamos que la regin AF1 de los TR1 largo y humano es importante para la transactivacin en presencia de 3,5-T2 pero no de T3. Juntos, los presentes resultados sugieren que los efectos genmicos de la 3,5-T2 estn mediados por al menos una isoforma diferente del TR1, la cual interacta con una poblacin de factores de transcripcin distinta a la que interacta con los TR1 ligados con T3. Agradecemos el apoyo de Miguel ngel Maqueda. D 53. SISTEMA INFORMTICO PARA LA ADMINISTRACIN DE CITAS Y REPORTES DE LA UNIDAD DE INVESTIGACIN EN NEURODESARROLLO (UIN) AUGUSTO FERNNDEZ GUARDIOLA. Mendoza J*, Garay A*, lvarez P, Belmont H, Harmony T, Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, *Facultad de Informtica UAQ, Quertaro, Quertaro Debido a la necesidad de llevar cabo una mejor gestin de la informacin de los pacientes en la Unidad de Neurodesarrollo, se plante el desarrollo de un sistema de control de citas de pacientes y reportes de estudios realizados, como proyecto de servicio social. Se desarrollo un nuevo sistema basndose en uno existente para no perder ningn dato pero utilizando herramientas nuevas de tal manera que se tiene una mayor seguridad, eficiencia, rapidez, y comodidad, adems de ser un sistema flexible en cuanto a las necesidades de incorporacin de nuevos mdulos en un futuro, el cual contara con la documentacin necesaria que permita modificaciones de acuerdo a las necesidades que surjan en la UIN.
Cabe mencionar que este sistema supera al anterior ya que se hicieron algunos cambios para adaptarla al nuevo sistema as como la normalizacin de la misma para mejorar la operatividad y el performance del sistema. El sistema implementa nuevas funcionalidades tales como: una bsqueda que permite especificar parmetros como fechas, nombres o claves, un calendario que permite seleccionar fechas de forma ms rpida, un flujo de pginas controlado que permite navegar sin tener que reingresar al sistema, las cuales ofrecen al usuario una interfaz ms amigable y robusta. El sistema se desarroll utilizando el Framework SpringMVC que se rige por el patrn de diseo modelo-vista-controlador, el cual permite separar los datos de la interfaz del usuario de esta forma aumenta la seguridad y facilita modificaciones futuras. Para trabajar el framework se utiliz el IDE Net Beans 6.8 con Java 1.6.0 y Spring 3.0, base de datos MySQL 5.1 y servidor Apache Tomcat 6.0. L 54. CARACTERIZACIN HISTOQUMICA DE PROTENAS DEL RETCULO ENDOPLSMICO QUE MOVILIZAN EL CALCIO INTRACELULAR EN EL NCLEO SUPRAQUIASMTICO Mercado C. y Daz-Muoz M. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, Campus UNAM-Juriquilla, Quertaro, Mxico. Estudios anatmicos han demostrado que el ncleo supraquiasmtico (NSQ) es una estructura heterognea que tiene dos importantes divisiones: la ventrolateral (VL) y la dorsomedial (DM). La VL contiene la mayora de las vas aferentes provenientes de la retina y est enriquecida con el polipptido intestinal vasoactivo (VIP), mientras que la DM presenta la mayora de las fibras eferentes y est enriquecida principalmente con el neuropptido arginina vasopresina (AVP). Se reconoce una diversidad de protenas en el retculo endoplsmico (RE) que regulan la homeostasis del calcio intracelular. Recientemente nuestro grupo de trabajo report que el canal intracelular de calcio sensible a ryanodina (RyR) es fundamental en la ritmicidad del NSQ. Por lo que, se plante hacer un estudio detallado de la distribucin regional y temporal del RyR y de otras protenas del RE que intervienen en la dinmica del calcio intracelular en el NSQ. Mediante inmunofluorescencia se detect el receptor inositol 1, 4, 5-trifosfato (IP3R), la ATPasa de calcio (SERCA) y el RyR en rebanadas hipotalmicas del cerebro de rata. Las rebanadas se colectaron en dos puntos a lo largo del da: a la mitad del da (ZT 4-7) y a la mitad de la noche (ZT 16-19). Ambas poblaciones de rebanadas mostraron clulas inmunoreactivas a IP3R, SERCA y RyR, desde la parte rostral hasta la parte caudal del NSQ. RyR y SERCA se distribuyeron de forma homognea en el citoplasma de las clulas, sin embargo IP3R present una distribucin totalmente diferente, ya que la marca de IP3R se encontr principalmente localizada alrededor de los ncleos celulares con una tendencia hacia los polos. IP3R no co-localiz con RyR y SERCA, pero RyR y SERCA s co-localizaron. La posible participacin de los depsitos intracelulares de calcio en la ritmicidad circadiana del NSQ ser resultado de su ubicacin anatmica y su regulacin fisiolgica. Agradecemos la asistencia tcnica de la Ing. Elsa Nydia Hernndez Ros en Microscopia Confocal y de la Dra. Olivia Vzquez Martnez por su asistencia tcnica en el laboratorio. Este proyecto fue financiado por DGAPA/UNAM. I
55. IDENTIFICACIN DE CONOTOXINAS DE LA SUPERFAMILIA A DEL CARACOL MARINO Conus princeps Morales-Gonzlez D. 1, Aguilar Ramrez M.B. 1, Falcn Alcntara A. 1, Michel Morfn E 2, Landa Jaime V 2,3 y Heimer de la Cotera E.P. 1. 1 Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Juriquilla, Qro., Mxico; 2 Departamento de Estudios para el Desarrollo Sustentable de Zonas Costeras, CUCSUR-Universidad de Guadalajara, San Patricio-Melaque, Jal., Mxico; 3 Posgrado en Ciencias Biolgicas y Agropecuarias, Universidad Autnoma de Nayarit, Tepic, Nay., Mxico. Los caracoles del gnero Conus representan un grupo de depredadores marinos que producen veneno, mismo que usan para cazar a sus presas. Los componentes farmacolgicos del veneno son pptidos denominados como conotoxinas, las cuales estn compuestas de 12-30 residuos de aminocidos, presentando de 2-5 enlaces disulfuro y en algunos casos modificaciones postraduccionales. Las conotoxinas, inicialmente codificadas en sus genes respectivos, se traducen en un precursor denominado prepropptido (80 a 100 aminocidos) cuya organizacin general consiste en una secuencia seal en la regin amino terminal, seguida de una regin pro y una regin de toxina madura en el extremo carboxilo. Tanto la secuencia seal as como el arreglo de cistenas en la regin de la toxina madura determinan a la superfamilia a la que pertenecen. Las conotoxinas actan sobre receptores de membrana, canales inicos y transportadores de neurotransmisores. Esta propiedad les confiere utilidad como herramientas de investigacin en las neurociencias, adems de su potencial en el rea teraputica. En este trabajo se identific la presencia de precursores de conotoxinas pertenecientes a las superfamilia A por clonacin de cDNA a partir de RNA total proveniente del conducto venenoso de la especie vermvora C. princeps. La amplificacin de cDNA se obtuvo mediante el uso de oligonucletidos basados en secuencias conservadas de cDNAs encontradas en otras especies. Los productos de las amplificaciones fueron ligados en un vector e introducidos en E. coli. Posteriormente se seleccionaron algunos clones para ser purificados y secuenciados. Se determin la presencia de 16 precursores de 59 a 65 residuos de aminocidos con una secuencia seal altamente conservada (identidad 90100%), una regin pro (identidad 20-100%) y la regin de la toxina madura (identidad 15-100%), que present arreglos de cistena caractersticos de la superfamilia A (CC-CC): a4/5, a4/6 y a4/7. Algunas secuencias de cDNA que codificaban un mismo precursor presentaron diferencias en ciertos nucletidos, pero codificando el mismo aminocido. Estas conotoxinas podran actuar sobre receptores de nACh del subtipo neuronal y muscular. Financiado por CONACyT (79929 y JAL-2009-05-124426) y PAPIIT-DGAPA-UNAM (IN204403), y por el presupuesto del Lab. de Neurofarmacologa Marina del INB-UNAM. Se agradece el apoyo de la Unidad de Proteogenmica-INB-UNAM. M
56. LA PROLACTINA PROMUEVE LA REGENERACIN HEPTICA TRAS LA HEPATECTOMA PARCIAL Moreno-Carranza B.,1 Vega C.,1 Lopez-Barrera F.,1 Nava G.,1 Cruces-Sols H.,1 Quintanar-Stephano A.,2 Martnez de la Escalera G.1 y Clapp C.1 Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico; 2Centro de Ciencias Bsicas, Autnoma de Aguascalientes, Aguascalientes, Mxico La regeneracin del hgado despus de la reseccin parcial (HP) depende de la proliferacin de los hepatocitos y la posterior proliferacin de los capilares sinusoidales hepticos que permiten a los nutrientes y factores de crecimiento llegar a los nuevos hepatocitos en replicacin. La prolactina (PRL) es un potente mitgeno heptico y un factor proangiognico en muchos tejidos. Esta hormona es capaz de estimular el crecimiento de los vasos sanguneos de forma directa o indirecta a travs de incrementar la secrecin de factores angiognicos como el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). En el presente estudio nos propusimos investigar el efecto de la PRL en el crecimiento del hgado y en la expresin de VEGF y su receptor VEGFR2 tras la HP del 70% o la ciruga control (sham). Para ello, indujimos hiperprolactinemia implantando dos adenohipfisis bajo la cpsula renal de ratas macho, las cuales fueron sometidas a una de las dos cirugas (HP y sham) 15 das despus del implante. Los niveles de PRL fueron 10 veces ms elevados en las ratas implantadas y se correlacionaron con un incremento significativo en el peso del hgado comparado con los animales control dos das despus de las cirugas. Los incrementos en la PRL srica y en el peso del hgado fueron bloqueados por el tratamiento con bromocriptina, un agonista dopaminrgico que inhibe la secrecin hipofisiaria de PRL. Por otra parte, en ratones nulos para el receptor de PRL (PRLR-/-) se observaron hgados ms pequeos y regeneracin reducida dos das despus de la HP, en comparacin con los animales silvestres (PRLR+/+). Finalmente, la expresin de VEGF y VEGFR2, medida mediante qRT PCR, estuvo incrementada y reducida en el hgado de ratas implantadas y ratones PRLR-/-, respectivamente. En conclusin, la PRL estimula la regeneracin heptica y esta accin puede involucrar la estimulacin de la angiognesis mediada por VEGF y VEGFR2. Estos resultados sugieren a la PRL como un factor teraputico potencial para mejorar la funcin heptica despus de la reseccin o el trasplante. Agradecemos la asistencia tcnica de Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Trabajo auspiciado por CONACYT 127496. I 57. ESTANDARZACION DE TECNICAS INMUNOHISTOQUIMICAS PARA LA IDENTIFICACIN Y CUANTIFICACIN DE CLULAS TRONCALES EN CORTES DE CNCER MAMARIO HUMANO. 1,2Moreno-Vega A, 2Vega-Riveroll L, 2Delgado G, 3Hernndez N y 2Aceves C. 1Licenciatura en Tecnologa, Centro de Fsica Aplicada y Tecnologa Avanzada; 2Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular y 3Unidad de Microscopia, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El cncer de mama es la neoplasia con mayor incidencia y mortalidad mundial en mujeres. Estudios enfocados a entender el origen de las clulas tumorignicas han propuesto dos hiptesis igualmente sustentadas y complementarias. El modelo de las Clulas Troncales Cancerosas (CTC) y el modelo de las Clulas de Transicin Epitelio Mesnquima (TEM). El primero sugiere que dentro de un tumor, slo algunas clulas mantienen la capacidad
pluripotencial o troncal y que mediante su divisin asimtrica una de las clulas hijas mantiene la poblacin troncal, mientras que la otra inicia su diferenciacin, produciendo as una heterogeneidad tumoral. El segundo propone, que clulas cancerosas diferenciadas adquieren caractersticas de tipo troncal al sufrir una regresin en su diferenciacin conocida como transicin epitelio-mesenquimal, lo cual mantiene una poblacin heterognea de clulas de la misma manera que en el modelo anterior. Estudios histopatolgicos han mostrado que las clulas de tipo troncal, se agrupan en nichos especficos dentro de los tumores, tienen una alta capacidad proliferativa y presentan resistencia a tratamientos qumicos u hormonales convencionales. Este tipo de clulas expresan marcadores moleculares especficos que han permitido su identificacin dentro de la poblacin tumoral. Estudios en nuestro laboratorio han mostrado que el suplementado de yodo molecular (I2) genera efectos diferenciadores y apoptticos en clulas tumorales mamarias dependiendo de la dosis, y en tumores slidos (animales o humanos) estos efectos se ven circunscritos a zonas especficas del tumor. Estos hallazgos nos han permitido proponer la existencia una sensibilidad diferencial al I2 de las diversas estirpes celulares que componen el cncer mamario. Este trabajo describe la estandarizacin de tcnicas de inmunohistoqumica y microscopa confocal para la identificacin de CTC y/o de TEM en tumores mamarios de mujeres controles y con suplemento diettico de I2. Se establecieron las condiciones ptimas para la cuantificacin de las protenas membranales CD44, CD24 y E-cadherina que consistieron en el establecimiento de titulaciones de los anticuerpos para determinar su concentracin ptima e incubaciones con Sudn Negro para eliminar la autofluorescencia presente en el tejido. En breve iniciaremos el anlisis del efecto del yodo en estas estirpes celulares. Trabajo apoyado: CONACYT 78955 y PAPIIT 201210 L 58. T3 Y 3,5-T2 PARTICIPAN EN EL CRECIMIENTO DE TILAPIA A TRAVS DE UNA VA DE SEALIZACIN DIFERENTE Navarrete-Ramrez P., Villalobos P., Valverde-R C., Orozco A., Instituto de Neurobiologa, Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Campus UNAM Juriquilla, Quertaro, Qro 76230, Mxico. La triyodotironina (T3) es la hormona tiroidea (TH) con mayor bioactividad y sus acciones estn mediadas por su unin a los receptores nucleares de TH (TR). En nuestro laboratorio hemos demostrado que en algunos telesteos, la 3,5-T2, un producto de la desyodacin del anillo externo de la T3, es tambin bioactiva. Los efectos de la 3,5-T2 parecen estar mediados por una isoforma diferente del TR1 que contiene un inserto de 9 aminocidos en su dominio de unin al ligando y a la cual hemos denominado TR1 largo (L-TR1). Para dilucidar el mecanismo de accin de la 3,5-T2 utilizamos el paradigma del crecimiento y analizamos la participacin de 3,5-T2 y T3 en este proceso, as como la posible regulacin diferencial de sus vas de sealizacin. Para ello, tratamos juveniles de tilapia (~0.8 0.02 g; n=20/grupo experimental) por inmersin con 1.3 nM de: T3, 3,5-T2, la prohormona T4, el ismero inactivo rT3, y metimazol (MMI: 4.5 mM; control negativo). Todos los grupos experimentales fueron tratados por 8 horas, tres veces a la semana durante un mes. Registramos el crecimiento, en trminos de peso corporal (g) y medimos la expresin de GH, IGF-1, S-TR1 (TR1 corto: sin el inserto de 9 aa) y L-TR1. Estos genes estn involucrados en el crecimiento y/o son parte de la va de sealizacin de TH. La tasa de crecimiento de los peces expuestos a T4, T3 o 3,5-T2 fue similar y significativamente mayor (~26%) a la del grupo control (p <0.001). El crecimiento en los peces expuestos a rT3 fue equivalente a
la del control, mientras que las tilapias tratadas con MMI presentaron el menor crecimiento (p <0.001). La expresin intraheptica de GH e IGF-1 fue regulada a la alta tanto por 3,5-T2 como por T3, sin embargo, la expresin del L-TR1 fue significativamente mayor solo en los peces tratados con 3,5-T2 mientras que la de S-TR1 fue regulada a la alta nicamente por T3. Nuestros resultados apoyan la nocin de que T3 y 3,5-T2 participan en el crecimiento, sin embargo, sus vas de sealizacin estn reguladas de manera diferencial. Agradecemos a SAGARPA la donacin de las tilapias, a Miguel Angel Maqueda y a la Dra. Anaid Antaramian. Este trabajo fue parcialmente financiado por CONACYT 080420 y PAPIIT IN203409 D
59. PRUEBA DE RECONOCIMIENTO DE OBJETOS EN EL RATN TRIPLE TRANSGNICO (3xTg-AD) PARA LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER Nery Flores S.D1, Coronas-Smano G, Aguilar-Vzquez A, Portillo-Martnez W2, Daz-Cintra S. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. (1Pasante de Lic en C. Quim. UADEC). La enfermedad de Alzheimer (EA) es un trastorno cerebral progresivo y degenerativo, definida por la presencia de placas amiloides y maraas neurofibrilares que causan un deterioro de las funciones cognitivas, incluyendo prdida de la memoria. En la actualidad se cuenta con un modelo de ratn triple transgnico (3xTg-AD) que emula los cambios patolgicos presentes en la EA, ya que contiene tres transgenes mutantes: PS1M146V, APPSwe y tauP301L. La prueba de reconocimiento de objetos se basa en la tendencia natural de los roedores para explorar preferentemente objetos nuevos. Para la realizacin de este trabajo, se utilizaron 2 grupos de ratones 3xTg-AD con sus respectivos controles, todos los animales fueron hembras y se dividieron de acuerdo a su edad (7 y 18 meses). Los ratones se familiarizaron en dos ambientes, ambos conteniendo dos objetos idnticos no txicos en donde exploraron libremente durante 5 min con un intervalo de 30 min entre ambos ambientes. Manualmente con un cronmetro se tom el tiempo en que exploraron cada uno de los objetos. Posteriormente se realizaron dos pruebas, una a los 90 min y otra a las 24 horas, en donde se remplaz uno de los objetos. En cada prueba el ratn explor durante 3 min y se registr el tiempo en que explor cada uno de los objetos (cuando tuvo un contacto fsico al oler, tocar o mover el objeto y/o al enfocarlo de manera obvia en un rea no mayor de 3 cm). El tiempo se valor como el porcentaje de preferencia o de exploracin del objeto nuevo, definido como: el tiempo dedicado a explorar el objeto reemplazado/tiempo total de exploracin de los objetos por 100. Los resultados obtenidos mostraron un deterioro significativo en la memoria a largo plazo en los ratones 3xTg-AD de 18 meses de edad, en donde hemos reportado alteraciones en su capacidad de discriminacin olfatoria (CoronasSmano et al., 2011). Adems, estos resultados se correlacionan con la presencia de placas Ab amiloides y Tau hiperfosforilada en el hipocampo. Agradecemos la ayuda tcnica del MVZ Martn Garca Servn, Fanny Y, ngeles Huerta; Paulina Anguiano Arreola y Francisco J. Pozos Varela. Trabajo auspiciado por DGAPAUNAM No. IN-202809 y CONACYT No. 102278. L
60. PREVIENE EL YODO LA PROGRESIN DEL CNCER PROSTTICO? Olvera-Caltzontzin P*, Delgado G, Aceves C y Anguiano B. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Estudios en cncer tiroideo y mamario muestran que el tratamiento con yodo induce apoptosis y reduce la proliferacin celular, as como la expresin de factores asociados a invasin celular. En ambos rganos, el transporte de yoduro (I-) est mediado por el simporter Na+/I- (NIS), mientras que el de yodo molecular (I2) est mediado por difusin facilitada. Estudios de nuestro grupo muestran que las clulas de cncer prosttico humano captan ambas formas qumicas de yodo, y que estas ejercen un efecto apopttico (Bax/ Bcl2, caspasa 3). En este estudio se evalu in vivo, la captura de yodo, as como el efecto del consumo de yodo en la prevencin de cncer. Se trabaj con un modelo de ratn transgnico (TRAMP), el cual desarrolla neoplasia intraepitelial y cncer prosttico a partir de la pubertad. Los ratones silvestres (wt) se utilizaron como grupo control (prstata no tumoral). Se evalu la captura de yodo radiactivo (125I- e 125I2), en la prstata de ratones wt y TRAMP de 12 y 24 semanas de edad. El tejido tanto normal como canceroso, capta ambas formas qumicas de yodo. La participacin de NIS en la captura de yodo se evalu usando un bloqueador especfico (ClO4) para este transportador. En presencia de ClO4 la captura de I- se inhibi en ratones de 12 semanas de edad, no as a las 24 semanas de edad. En contraste, el ClO4-, no tuvo ningn efecto sobre la captura del I2. Por otro lado, los animales (wt y TRAMP) fueron suplementados con yodo (I2 + I-, 0.25 mg y 0.5 mg, respectivamente) durante 12 y 24 semanas, a partir del inicio de la pubertad (6 semanas). En los ratones TRAMP, la suplementacin con yodo no tuvo ningn efecto en el peso del tracto genitourinario, en el grado o incidencia de lesiones malignas, ni en la tasa de proliferacin (clulas positivas al antgeno nuclear de proliferacin celular). En conclusin, nuestros datos muestran que la prstata normal y cancerosa capta yodo, pero que el yodo no tuvo ningn efecto en el tamao o histologa tumoral. Estudios en curso analizan la participacin del yodo en procesos anti-metastsicos. Agradecemos el apoyo del MVZ Martn Garca Servn, Felipe Ortiz Cornejo y de Moiss Prez Mendoza. Trabajo auspiciado por DGAPA/PAPIIT IN201210 y CONACYT 87196, 78955, 127368. *Becario CONACYT 254140. D 61. DONDE SE LOCALIZA LA SELECTIVIDAD DE LAS DESYODASAS PARA ORD O IRD? UN ENFOQUE ESTRUCTURA-FUNCIN Olvera-Vidal AM1*, Orozco A1, Aguilera P1 and Valverde-R C1, 1 Neurobiologa Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Mxico Las Desyodasas de yodotironinas (Ds) son un grupo de deshalogenasas reductivas que pertenecen a la familia de las selenoenzimas y comprenden 3 distintos isotipos: D1, D2 y D3. Las Ds controlan la disponibilidad y bioactividad de las hormonas tiroideas (TH) removiendo, de manera secuencial y estreo-especfica, los tomos de I2 de la molcula de TH. As, la desyodacin del anillo externo (ORD) de la T4 genera productos activos como T3 y 3,5-T2, mientras que la del anillo interno (IRD) produce metabolitos inactivos como rT3. La D2 y la D3 catalizan exclusivamente las vas ORD e IRD, respectivamente, mientras que la D1 cataliza ambas vas; sin embargo, la identificacin de la regin en la protena que les confiere esta selectividad cataltica an no se conoce. El modelaje in silico de las Ds sugiere que el arreglo molecular de los 3 parlogos incluye 4 dominios funcionales:
TM (transmembranal), B (bisagra), V (vinculador) y G (globular). Para comprender mejor la relacin estructura-funcin de estas enzimas, inicialmente alineamos las secuencias (aminocidos) de los diferentes parlogos (n=67: D1=22; D2=23; D3=22) y encontramos que el dominio G que incluye la regin cataltica, es muy similar entre los 3 (60% de identidad), mientras que los dominios TM, B y V se muestran como los ms variables (20%). Sin embargo y sorprendentemente TM, B y V estn conservados entre ortlogos (D1 50%; D2 55% and D3 60%). Estos hallazgos nos permitieron dividir las secuencias en 2 grandes regiones: la primera mitad o regin variable (RV) incluye los dominios TM, B y V, mientras que la segunda mitad corresponde a la regin conservada (RC) que incluye el dominio G. Esta informacin nos llevo a proponer que la selectividad de las Ds depende, en cierta medida, del arreglo estructural de la RV. Para probar o descartar esta hiptesis, actualmente estamos construyendo quimeras entre la D2 y la D3 intercambiando sus respectivas RV. La caracterizacin de las quimeras nos dar pistas acerca de las caractersticas de la relacin estructura-funcin de esta importante familia de selenoenzimas. Agradecimientos: A los apoyos CONACYT 080420 and PAPIIT IN203409. M 62. SENSIBILIDAD DE LAS PRUEBAS DE ALTERNANCIA ESPONTNEA Y ALTERNANCIA RETARDADA PARA LA EVALUACIN DE LESIONES EN EL ESTRIADO DE LA RATA ALBINA Pacheco Reyes C.A., Mendoza-Trejo M.S., Rodrguez V.M. Giordano M. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El estriado participa en la regulacin del movimiento y en procesos de aprendizaje y memoria, en especial de tareas que requieren el reconocimiento de derecha e izquierda como son tareas de respuesta egocntrica. El objetivo de este proyecto fue evaluar si las pruebas de alternancia retardada y espontnea pueden detectar una lesin en el estriado dorso-lateral. Ratas macho Wistar mantenidas en un ciclo de luz oscuridad (12:00-12:00 h) invertido, con acceso libre a agua y alimento, fueron lesionadas de forma bilateral en el estriado dorsolateral (coordenadas: AP+1.0 mm y L;-2.6 mm de bregma; DV -5.5 mm de la dura) y se organizaron en tres grupos (n=8). Un grupo control (CN) al que se le inyect vehculo, un grupo con cido kanico (AK; 5nmoles) y otro grupo con cido 3-nitropropinico (NTP; 500 moles); se inyect un volumen de 1l en cada hemisferio. A los 7 y 30 das se midi su actividad locomotora espontnea mediante un sistema de monitoreo automatizado. A los 15 das de recuperacin se inici la privacin de agua para el condicionamiento usando un laberinto en T. Una vez terminada esta tarea se perfundi a los animales para obtener el cerebro y localizar la lesin usando tincin de Nissl y la reaccin de citocromo oxidasa. Se encontr que los animales del grupo AK fueron significativante ms activos que los otros dos grupos en varios parmetros de actividad motora a los 7 das posteriores a la lesin y que esta hiperactividad se redujo a los 30 das posteriores a la lesin. La lesin con NTP no produjo ningn cambio. En la tarea de alternancia espontnea, se encontr que los animales del grupo AK cometi un mayor nmero de errores y que el grupo NTP tard el menor tiempo en resolver la tarea. En la prueba de alternancia retardada el grupo AK fue significativamente mas lento. En conclusin, las pruebas de aprendizaje de alternancia espontnea y alternancia retardada no son suficientemente sensibles para detectar una lesin neurotxica en el estriado dorso-lateral. Trabajo auspiciado por PAPIIT IN-211709-22, CONACYT 103907 y beca del Programa Delfn a CAPR. Categora: L
63. EXPRESIN DE RECEPTORES TIPO P2Y2 EN LA LNEA CELULAR DE CNCER OVRICO SKOV3 Y SU POSIBLE PARTICIPACIN EN LA INDUCCIN DE LA TRANSICIN EPITELIO-MESNQUIMA. Pea GA, Vzquez-Cuevas F y Arellano RO. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. INB-UNAM. La incidencia de cncer ovrico en mujeres ocupa el quinto lugar en el mundo y el tercero en Mxico; el 90% de estos se originan en el epitelio ovrico superficial (OSE), posiblemente debido a que el OSE sufre cambios durante el ciclo ovulatorio, como son procesos de apoptosis, proliferacin y de transicin epitelio mesnquima (EMT). La sealizacin celular juega un papel importante en la regulacin de estos cambios y su estudio es esencial para entender la patofisiologa del OSE. Sin embargo, la comunicacin dependiente del sistema purinrgico no ha sido estudiada. El sistema purinrgicos ejerce sus acciones al actuar sobre receptores de membrana llamados P2X y P2Y, los receptores P2Y son receptores acoplados protenas G que participan en diferentes procesos como la regulacin de la proliferacin y diferenciacin celular. En este trabajo se identificamos la expresin de receptores P 2Y2, en la lnea celular SKOV3, derivada de un adenocarcinoma y evaluamos si su activacin selectiva induce la expresin de marcadores de la induccin de la EMT. La transicin epitelio-mesnquima (EMT) es un proceso de diferenciacin que lleva a las clulas de un fenotipo epitelial a un fenotipo mesnquimal caraterizado por su capacidad de migracin, en el cncer se le considera un mecanismo metasttico. Por RT-PCR logramos la amplificacin del transcrito de P2Y2 y por inmunofluorescencia observamos la expresin de la protena. Para estudiar la funcin de P2Y2 se utiliz UTP, un agonista selectivo de los receptores P2Y2, estimulando a diferentes tiempos. En primer trmino documentamos que el receptor es funcional, pues la estimulacin con UTP (10M) produce la fosforilacin de las MAPK-ERK desde el primer minuto del estmulo. Cuando las clulas se incubaron con el agonista por 24 horas se document mediante RT-PCR que se expresan marcadores tpicos de EMT (TWIST1, TWIST2 y SNAIL) y por microscopa confocal observamos que presentaban fibras de estrs. Nuestros datos sugieren que el ATP extracelular actuando a travs del receptor P2Y2 participa en la induccin de EMT en clulas de cncer ovrico, sugiriendo que este receptor podra estar implicado en los procesos de transformacin maligna de las clulas. Agradecemos la asistencia del Sr. Horacio Ramrez Leyva y Dra. Edith Garay. Donativos por CONACyT No. 55397, PAPIIT IN205605 PARA R.O.A. y PAPIIT IN208209 para F.V-C.; G.P es apoyado por PAPIIT IN208209. L
64. MECANSIMOS DE MODULACIN DE LA CORTEZA SENSORIMOTORA SOBRE LAS RESPUESTAS NOCICEPTIVAS EN LA MDULA ESPINAL DE LA RATA Prez-Snchez, J., Conds-Lara, M., Martnez-Lorenzana, G., Rodrguez-Jimnez, J., Rojas-Piloni, G. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La estimulacin elctrica de la corteza sensorimotora produce una inhibicin de las respuestas nociceptivas en la mdula espinal. Esta accin se interpreta como un control cortical sobre la informacin sensorial, que podra estar mediado directamente por la activacin de interneuronas en el asta dorsal, o bien indirectamente, activando vas
descendentes del tallo cerebral. Recientemente, hemos demostrado que la activacin de la proyeccin corticoespinal modula directamente las respuestas nociceptivas provocadas por la estimulacin de fibras C en la mdula espinal de la rata. Sin embargo, el mecanismo por el cual la corteza sensorimotora modula la informacin nociceptiva es aun desconocido en su totalidad. En este trabajo, se analiz el curso temporal de la modulacin generada por la activacin de la via corticoespinal sobre las respuestas, a estimulos nociceptivos, registradas en la mdula espinal. Se estudiaron, en ratas macho Wistar de 280-300g, diferentes intervalos de tiempo entre la estimulacin cortical y la activacin de las fibras que conducen la informacin aferente del dolor. Adems, se analiz el efecto de la estimulacin de la corteza sensorimotora sobre la potenciacin post-tetnica producida por un estmulo de alta frecuencia aplicado en el nervio citico. Se encontr que los efectos inhibitorios producidos por la corteza son mayores en los intervalos ms cercanos a la aparicin de la respuesta a fibras C (20-150 ms). Asimismo, el estmulo de alta frecuencia al nervio citico (100Hz, 250ms) produjo un aumento en la amplitud de los potenciales de campo producidos por la activacin de fibras C durante 30 minutos. El tiempo de esta potenciacin se redujo de manera importante cuando el estmulo al nervio citico fue dado junto con un estmulo a la corteza sensorimotora (100Hz, 450ms). Estos resultados sugieren que la activacin de la va corticoespinal modula la liberacin de neurotransmisor de las aferentes nociceptivas sobre las neuronas del asta dorsal de la mdula espinal. Auspiciado por: Beca CONACyT No. 368067 (JPS) y los proyectos: CONACyT No. 78927 (GRP), PAPIIT No. IN202610 (GRP). M 65. MODELO DE UNA RED NEURONAL RECURRENTE EN EL PROCESAMIENTO DE INFORMACIN TEMPORAL Prez O., Merchant H. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El procesamiento del tiempo en la escala de los cientos de milisegundos es un elemento fundamental en conductas complejas como la percepcin y la ejecucin del lenguaje o el movimiento. Sin embargo, el mecanismo neuronal del procesamiento temporal en esta escala es poco conocido. Estudios de resonancia magntica funcional han permitido identificar el circuito que se activa en este procesamiento, este es llamado ganglios basales-tlamo-corteza, el cual comprende diversas reas corticales, entre las cuales esta el rea motora suplementara (AMS). De este modo, estudios neurofisiolgicos realizados en nuestro laboratorio en monos Rhesus ejecutando diferentes paradigmas temporales han mostrado que AMS juega un papel importante en el procesamiento de tiempo en los cientos de milisegundos. Por ejemplo, se han identificado poblaciones de neuronas que incrementan su taza de disparo monotnicamente en funcin del paso del tiempo, estas son llamadas rampas de actividad y cuantifican el tiempo que resta para el termino del intervalo cuantificado. Adems, se ha registrado otro tipo de poblacin la cual su actividad est sintonizada a la duracin del intervalo producido, es decir que responde con mayor magnitud en una duracin en particular. Sin embargo, debido a las limitaciones tcnicas de muestreo y resolucin espacial de los registros electrofisiolgicos es difcil determinar las propiedades funcionales de los circuitos neuronales encargados de este tipo de repuestas dependientes del tiempo, en especial en AMS. Por lo tanto, en este trabajo estudiamos un modelo computacional de red recurrente de neuronas Integrate-and-Fire que combina propiedades sinpticas dependientes del tiempo como facilitacin y depresin a corto plazo y conductancias lentas. Primero, se observ que un grupo de neuronas del modelo responden
selectivamente a un intervalo de tiempo al cambiar los pesos sinpticos de la red. Sin embargo, este resultado es muy sensible al ruido intrnseco de las neuronas o la actividad espontanea en el circuito. Adems, se encontr que al aadir en la red las propiedades de respuesta en rampa, el circuito fue capaz de producir selectividad a la duracin de los intervalos de manera ms robusta. Estos resultados sugieren que redes neuronales que simulan plasticidad a corto plazo junto con conductancias lentas son suficientes para que una red neuronal pueda codificar intervalos de tiempo en la escala de los cientos de milisegundos, utilizando rampas de actividad y sintona a la duracin de los intervalos. Agradecemos la asistencia tcnica de Luis Prado, Juan Ortz y Ral Pauln. Trabajo financiado por PAPITT: IN200511-22 y CONACYT 053944. D
66. ESTABLECIMIENTO DE UN SISTEMA DE CULTIVO DE CLULAS MESENQUIMALES DE POLLO Y SU DIFERENCIACIN HACIA CLULAS ADIPOSAS Prez-Serrano, R.1, Gonzlez-Dvalos, L.1, Antaramian, A.2, Shimada, A.1, VarelaEchavarra, A.2 y Mora, O.1 1 Laboratorio de Rumiologa y Metabolismo Nutricional (RuMeN), Facultad de Estudios Superiores Cuautitln, UNAM, 2 Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El uso de herramientas biotecnologas aplicadas al sector pecuario permitir que los procesos productivos sean eficientes para cubrir la demanda del mercado con productos de origen animal inocuos y de alta calidad. Los tejidos involucrados en las caractersticas de la canal son el adiposo y muscular siendo originarios a partir de las clulas mesenquimales (MSC) en animales neonatos, las cuales presentan propiedades de multipotencialidad, elevada capacidad de autorrenovacin y alto potencial proliferativo. Dentro del proceso de adipognesis el receptor activado por el proliferador de peroxisoma gamma (PPAR) controla la expresin de algunos genes involucrados en el metabolismo energtico de este linaje celular. En el presente trabajo se aisl MSC de la mdula sea de pollos de 1-2 das de eclosin. Para determinar el potencial proliferativo se obtuvieron tres curvas de comportamiento celular mediante 15 subcultivos seriales cada 4 das durante 66 das. La curva de crecimiento celular registr 4500 clulas (y=-10089.5+108.5x-0.6x2 r2=0.91, P<0.01); el nmero de duplicaciones mximas registradas fueron de 2.9 (y=1.85+0.05x0.0009x2 r2=0.7,P<0.01) y el tiempo de duplicacin mnimo obtenido fue de 1.3 das (y=2.480.07x+0.001x2 r2=0.8,P<0.01), en el caso de las dos ltimas curvas los datos se registraron para el da 22 de cultivo. La multipotencialidad se determin induciendo las clulas a la adipognesis en los subcultivos 1, 3, 8, 10 con la finalidad de conocer el momento idneo para la induccin. Se midi el factor de transcripcin PouV (homologo de Oct4) como marcador de MSC y PPAR como marcador positivo de adipognesis. Dichos genes fueron medidos mediante el RT-PCR convencional y tiempo real. Los resultados se analizaron en un modelo completamente al azar para determinar el efecto de los tratamientos. Los resultados indicaron que no existi diferencia significativa (P>0.1) en los subcultivos 1, 3, y 8, en el caso del 10 aumento 3.8 veces de expresin de PPAR en clulas tratadas respecto al control inicial (P<0.01). Los resultados indicaron que las MSC requieren de un periodo mnimo de 46 das de multiplicacin celular permitindoles expresar su mayor potencial proliferativo y su posterior capacidad de diferenciacin, siendo en este momento ms sensibles a la induccin adiposa. Financiado por PAPIIT IN200910., Categora: L
67. IMPLEMENTACIN DE UN SISTEMA SEMICRNICO PARA EL REGISTRO DE ACTIVIDAD NEURONAL EXTRACELULAR MLTIPLE EN PRIMATES. Prado L, Mendoza G, Mndez JC, Merchant H. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El objetivo ms importante de las neurociencias cognitivas es entender cmo el cerebro procesa la informacin del mundo externo y la utiliza para generar conductas adaptativas. Probablemente el paradigma neurofisiolgico ms verstil para el estudio de las funciones cognitivas en animales ha sido el registro de la actividad extracelular de neuronas en monos que realizan una tarea conductual. Dicha tcnica utiliza un pequeo nmero de electrodos para registrar simultneamente la actividad extracelular de neuronas en regiones de inters. Sin embargo, actualmente se reconoce que incluso las conductas ms sencillas involucran la actividad coordinada en el tiempo de un gran nmero de neuronas distribuidas en distintas regiones corticales y subcorticales. Por ello, es necesario desarrollar nuevas tcnicas que permitan determinar la forma en que grupos de neuronas interactan durante el procesamiento de la informacin. En la actualidad, los avances en los mtodos de fabricacin de microelectrodos con sitios mltiples de registro han permitido medir la actividad de cientos de neuronas de manera simultnea en distintas regiones del cerebro. En nuestro laboratorio estamos desarrollando una tcnica de registro semicrnico de mltiples neuronas en monos despiertos. Con tal finalidad, emplearemos arreglos de silicn con 64 sitios de registro (NeuroNexus Technologies, impedancia de cada sitio: 3 MW) implantados de manera semicrnica en regiones corticales especficas. La seal neurofisiolgica ser preamplificada y digitalizada mediante un preamplificador de 128 canales (PZ2, TuckerDavies Technologies). Para la adquisicin, el filtrado y la discriminacin de los datos se emplear un procesador dedicado (RZ2, Bioamp processor, Tucker-Davies Technologies) que incluye un software especializado. Este software a su vez se comunicar en lnea con un programa escrito en lenguaje de Matlab para almacenar y analizar la informacin neurofisiolgica de manera inmediata. Este sistema nos permitir obtener registros extracelulares unitarios, multiunitarios y de potenciales locales de campo para cada uno de los 64 sitios de registro del arreglo de electrodos. En experimentos preliminares en gatos hemos obtenido este tipo de seales de diferentes regiones corticales, lo cual promete que este sistema ser til para el estudio de funciones cognitivas en el primate. Agradecemos la asistencia tcnica de Juan Ortz y Ral Pauln. Trabajo financiado por PAPITT: IN200511-22 y CONACYT 053944. T.
68. REGULACIN COLINRGICA MEDIANTE EL RECEPTOR H3 PARA HISTAMINA EN LA CORTEZA INSULAR, DURANTE LA FORMACIN DE LA MEMORIA AVERSIVA AL SABOR Purn-Sierra L. y Miranda M. I. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El sistema colinrgico juega un papel fundamental durante la fase temprana de la formacin de la memoria, particularmente en la corteza insular (CI), la cual es una estructura necesaria para la formacin de memorias como la del condicionamiento de aversin al sabor (CAS). Por ejemplo, se han descrito incrementos de la actividad colinrgica en la CI durante el
procesamiento del estimulo gustativo novedoso, durante la adquisicin del CAS pero no cuando el estimulo gustativo es familiar. Es por ello que resulta necesario conocer la manera en que se regula la actividad colinrgica durante el aprendizaje del CAS. Recientemente se ha encontrado que la histamina puede modular la funcin colinrgica cortical; previos estudios has mostrado que el bloqueo de los receptores H1 en el NBM o la activacin de los receptores H3 en la CI, impide la formacin pero no la evocacin del CAS, sugiriendo de esta manera que la histamina podra ser necesaria para la regulacin colinrgica requerida durante el aprendizaje del CAS. El principal objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la administracin de R-alfa-metilhistamina un agonista del receptor H3 (RAMH, 10M / 0.5l) sobre la liberacin de acetilcolina en la CI, durante la formacin del CAS mediante la tcnica de microdilisis en ratas en libre movimiento. El segundo objetivo fue determinar la co-localizacin de los receptores H3 en la CI sobre neuronas GABArgicas mediante la tcnica de inmunofluorescencia y microscopia confocal, en base a las evidencias de que GABA podra ser el regulador de acetilcolina durante la evocacin de la tarea del CAS. Los resultados mostraron que la infusin cortical de RAMH impidi la formacin del CAS y redujo los niveles de acetilcolina en la CI, observados durante el consumo de un sabor novedoso. Estos datos muestran que los receptores H3 para histamina en la CI regulan la actividad colinrgica durante el aprendizaje del CAS. Adems los resultados de inmunofluorescencia mostraron la presencia de los receptores H3 sobre neuronas GABArgicas en la CI, indicando que los receptores H3 podran modular la actividad colinrgica mediante la activacin de neuronas GABArgicas durante el CAS. Agradecemos la asistencia tcnica de Angela Gabriela Vera-Rivera, Elsa Nydia HernndezRos and Martn Servn. Trabajo auspiciado por DEGAPA-PAPIIT IN209911. D
69. EFECTO DE LA HORMONA CORTISONA SOBRE LA EXPRESIN DE ACUAPORINA 7 (AQP7) Y 11 HIDROXIESTEROIDEDESHIDROGENASA1 (11-HSD1) EN CLULAS 3T3L1. Quesada-Lpez TP1, Mora-Izaguirre MO2, Pia-Garza E3. , 1Licenciatura en Nutricin, Facultad de Ciencias Naturales. Universidad Autnoma de Quertaro. 2Departamento de Rumiologa y Metabolismo Nutricional (RuMeN). UNAM. 3Facultad de Medicina, UNAM La obesidad es una enfermedad que se ha incrementado en la ltima dcada, en Mxico alrededor del 33% de la poblacin la padece. Durante su desarrollo, diversos tejidos presentan modificaciones ocasionando la aparicin de otras patologas; entre ellos el tejido adiposo. En la obesidad, y en el desarrollo del Sndrome Metablico (SM), las clulas del tejido adiposo se exponen continuamente a corticoesteroides, especficamente a la cortisona, ocasionando el incremento de la 11-hidroxiesteroidedeshidrogenasa1 (11-HSD1), enzima responsable de la conversin a su forma activa, el cortisol. Tambin se ha reportado que en la obesidad se disminuyen los niveles de Acuaporina 7 (AQP7) protena relacionada con el transporte de glicerol. El objetivo del presente estudio fue conocer y relacionar el efecto de la adicin de diferentes niveles de cortisona sobre la expresin de 11-HSD1 y AQP7 en durante la diferenciacin de la lnea celular 3T3L1. Para ello se plantearon tres diferentes protocolos de aplicacin durante la diferenciacin celular: continuo, medio-final y final. En cada protocolo de aplicacin se probaron cuatro diferentes concentraciones de cortisona: 0, 10, 100 y 1000 nM. Al final del proceso de diferenciacin se obtuvo el RNA total de las clulas de todos los tratamientos, se realiz una transcripcin reversa para obtener el cDNA
y se midi por PCR de tiempo real la expresin de 11-HSD1 y AQP7, utilizando MnSOD como gen de referencia. Los resultados indican que, en el caso de las tres aplicaciones, la adiciones de los diferentes concentraciones de cortisona provocaron una disminucin en la expresin de ambas, AQP7 y 11-HSD1 (P<0.05). En todos los casos, la expresin disminuy a mayor concentracin de cortisona y mayor tiempo de exposicin durante la diferenciacin; en el caso de AQP7 fue especialmente notoria la disminucin en el protocolo continuo. Se puede concluir que la cortisona, aplicada durante el proceso de diferenciacin adipocitaria, afecta la expresin tanto de 11-HSD1 como de AQP7, sto podra explicar los efectos negativos de los corticoesteroides sobre el metabolismo de las clulas adiposas pues, aparentemente, a mayor concentracin de cortisona su conversin a la forma activa y la excrecin de glicerol por parte del adipocito se disminuyen. Agradecimientos: Unidad de Proteogenmica (INB UNAM) Proyecto financiado por PAPIITIN200910 Estudio in vitro sobre las bases celulares y moleculares de diferenciacin muscular y adiposa en especies productoras de carne, su efecto en el metabolismo energtico y sus posibles complicaciones. L
70. DESNUTRICIN PERINATAL SOBRE EL DESARROLLO FSICO DE LA CABEZA DE LA RATA: EFECTOS TRANSGENERACIONES (F0-F4). Regalado M, Torrero C, Salas M. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa. Instituto de Neurobiologa, Campus UNAM Juriquilla. Quertaro. Boulevard Juriquilla 3001, Quertaro, Qro. 76230. Mxico Las ratas adultas desnutridas durante la etapa perinatal, a pesar de tener condiciones ptimas en su nutricin a lo largo de varias generaciones muestran efectos persistentes como deficiencias en el peso corporal, cerebral, en la capacidad funcional de las clulas, y por lo tanto incremento en la mortalidad de las cras. Estos efectos pueden ser atribuidos a la mala nutricin proveniente de la madre durante la gestacin y al alterado vnculo materno. Debido a sta, se evalu el desarrollo fsico de las cras macho a travs de 4 generaciones sucesivas en la rata Wistar desnutrida, por la privacin neonatal de alimento, y sensorial por 10 a 12h diarias del 1-23 postparto. A la edad de 120 das las hembras (F0) con antecedentes de desnutricin se cruzaron con machos normales. En las F1 a F4 las hembras recibieron una dieta normal y fueron cruzadas con machos normales. El destete ocurrio a los 25 das. Los animales control recibieron una dieta normal ad libitum, de chow de Purina. Las medidas fsicas de la cabeza consisti en anotar cada 5 das hasta el da 30, la longitud naso-occipital (no) y bitemporal (bt) de las cras as como el peso corporal. Los resultados de los sujetos F0 desnutridas la no est reducida en todos las edades; sin embargo, la generacin F1 solo los das 10 y 20; pero en F2 y F4 el no aumenta en los sujetos de descendencia desnutrida. La longitud bt en F0 desnutrida disminuy en todas las pruebas. Asimismo, las cras en F1 mostraron una disminucin, los das 25 y 30. Por lo tanto, en las F2 y F3 se increment la distancia bt en los das 10-15 y solo a partir de los das 25 y 30 disminuye en F3 y esta prevalece en F4 en los das 15, 20 y 30 das de edad. El peso corporal de los desnutridos F0, disminuy en los das 10, 20, 30, y obteniendo en F1 un incremento en el da 30 y en F3 y F4 en los das 25 y 30. Los hallazgos sugieren que la falta de atencin maternal de las madres desnutridas (F0) afecta el desarrollo de la progenie (F1) a pesar de haber recibido una dieta normal. Los resultados indican que las madres transmiten deficiencias durante la gestacin y la lactancia, as como, en el ingreso
de nutrimentos esenciales y de estimulacin sensorial necesarios durante los periodos de divisin y crecimiento celular rpido, que afectan a la progenie de varias generaciones. Con el apoyo parcial de la DGAPA IN207310-22. T 71. IMPACTO DE LA RESTRICCIN PROTENICA MATERNA (RPM) DURANTE LA GESTACIN Y/O LACTANCIA SOBRE EL APRENDIZAJE Y MEMORIA ESPACIAL EN LAS CRAS MACHO DE LA RATA Reyes-Castro L.A.1, Parga-Martnez N.J.2, Bautista C.J. 1, Larrea F.1, Quirarte G.L.2, Zambrano E1. 1 Departamento de Biologa de la Reproduccin, INNSZ, Mxico D.F. 2 Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro, Qro., Mxico. Estudios epidemiolgicos y con animales de experimentacin demuestran que el ambiente subptimo intrauterino y durante la lactancia modifican el crecimiento y predisponen a alteraciones en la vida adulta del individuo, tales como el desarrollo de diabetes mellitus, obesidad, hipertensin y disfunciones endcrinas. Actualmente existe escasa informacin acerca del efecto del estrs perinatal sobre procesos cognitivos como el aprendizaje y la memoria en la progenie de ratas cuyas madres fueron sometidas a restriccin protenica. En el presente estudio se evalu el impacto de la restriccin protenica materna durante la gestacin y/o la lactancia en el aprendizaje y la memoria espacial de cras macho de la cepa Wistar. Ratas preadas de 120 das de edad fueron alimentadas con dietas isocalricas con contenido normal 20% (C) o restringidas con 10% de protena (R). Se evalu el aprendizaje y la memoria espacial en cras cuyas madres recibieron restriccin de protenas durante: 1) la gestacin y la lactancia (RR), 2) la lactancia (CR), 3) el embarazo (RC). A los 110 dias despus del destete, las cras fueron entrenadas y evaluadas en la tarea espacial del laberinto acutico de Morris (LAM). El entrenamiento consisti en una sesin de 8 ensayos y 24 hrs despus se evalu la memoria espacial, analizando la latencia de llegada y el nmero de entradas a la zona blanco, as como el tiempo de permanencia en el cuadrante donde se encontraba previamente la plataforma de escape. Los resultados mostraron que las cras provenientes de madres restringidas durante el embarazo, la lactancia, as como en la gestacin y la lactancia tuvieron un retraso en el aprendizaje y un deterioro en la memoria espacial. Esto sugiere que el consumo de una dieta baja en protenas durante la gestacin y/o la lactancia modifica el desarrollo adecuado del cerebro, lo cual repercute negativamente en el aprendizaje y la memoria espacial de la progenie en la vida adulta. Agradecemos la asistencia tcnica de Martn Garca, ngel Mndez y Norma Serafn. D
72. ANLISIS DE LPIDOS Y CARBOHIDRATOS EN UN MODELO DE DIABETES TIPO II EN Drosophila melanogaster Reyes De la Torre Alejandro, Pinedo Vargas Ana Laura, Riesgo-Escovar Juan R., Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico. La diabetes tipo 2 es una enfermedad crnica que se caracteriza por resistencia perifrica a la insulina, niveles elevados de glucosa y cidos grasos libres en sangre. La insulina, una hormona cuya va de sealizacin se encuentra evolutivamente conservada desde
nematodos hasta vertebrados, regula el metabolismo anablico. La va de la insulina se encuentra tambin conservada evolutivamente en la mosca de la fruta, Drosophila melanogaster. Se ha observado que larvas y moscas adultas de uno y dos das mutantes de la va tienen niveles elevados de lpidos y carbohidratos. Hasta el momento, no se ha indagado en el aspecto crnico de la diabetes tipo 2 en Drosophila melanogaster. En este trabajo se determinaron lpidos y carbohidratos totales de moscas hembras adultas silvestres y mutantes homocigotas chico1/chico1 (el homlogo en la mosca de los genes IRS de vertebrados) de 1, 7, 14 y 28 das despus de la eclosin. Adems, se observaron preparaciones de adipoctios aislados de tejido graso de moscas homocigotas chico1/chico1 y de combinaciones heteroallicas y controles de otras mutantes de la va de la insulina: Dp110A/Dp1105W3, InRE19/InR3T5, PKB1/PKB3, y S6KL-1/S6KP1713 de 1 da despus de la eclosin. Los resultados muestran que existen diferencias significativas en los lpidos totales entre moscas silvestres y chico1 homocigotas de 1, 14 y 28 das (P<0.001). Tambin se observaron diferencias en carbohidratos totales entre moscas silvestres y chico1 de 1 y 14 das (P<0.001). La homeostasis de lpidos y carbohidratos est alterada en las moscas mutantes, puesto que en controles no hay cambios en los niveles de lpidos y carbohidratos a travs del tiempo y en mutantes s. Sin embargo, experimentos preliminares en adipocitos aislados teidos para revelar lpidos totales no muestran diferencias en la cantidad de lpidos por adipocito, pero los resultados no son concluyentes an (n<10 moscas por grupo). Alternativamente, las diferencias en el nivel de lpidos puede estar dado por diferencias en el nmero total de adipocitos, y no por una mayor acumulacin de lpidos en adipocitos mutantes. Agradecemos la asistencia de la Dra. Ma Teresa Pea-Rangel y de Claudia Gonzlez Flores. Financiamiento: UNAM. Categora del primer autor: M (estudiante de maestra).
Jueves 22 de Septiembre, Cartel 73 al 94
Septiembre 22, 2011
73. SUBGRUPOS ELECTROENCEFALOGRAFICOS EN PACIENTES CON TRASTORNO POR DEFICIT DE ATENCION E HIPERACTIVIDAD (NIOS Y ADOLESCENTES) Ricardo Garcell J, 1Reyes E, 1Galindo Villa G, 1Miranda E, 1Robles E, 1Balderas E, 1Palacios L, 1De la Pea F, 2Otero G, Fernndez Bouzas A, Harmony T. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo Dr. Augusto Fernndez Guardiola, Instituto de Neurobiologa, UNAM; 1Instituto Nacional de Psiquiatra Ramn de la Fuente Muiz; 2Facultad de Medicina de la Universidad Autnoma del Estado de Mxico. Introduccin. Diferentes evidencias sugieren que el Trastorno por Dficit de Atencin e Hiperactividad (TDAH) es una entidad cuya heterogeneidad va ms all de los subgrupos diagnsticos que se utilizan en la prctica clnica (inatento, hiperactivo, combinado). Objetivo. Investigar la presencia de subgrupos, mediante el electroencefalograma cuantitativo, en pacientes mexicanos con TDAH. Sujetos y mtodo. Todos los pacientes estaban vrgenes de tratamiento farmacolgico, tenan un CI 80 (Escala Wechsler) y se realizaron dos estudios. Primer estudio: Se calcularon las medidas potencia absoluta y relativa (bandas , , , ) en 196 pacientes con TDAH: 81% del sexo masculino, 76% del tipo combinado, 88 nios (media=8.8 aos) y 108 adolescentes (media=14.7 aos). Estos valores se compararon con las de sujetos normales y se obtuvieron los Mapas-Z individuales en cada medida y cada banda. Segundo estudio. Se calcularon las fuentes de actividad elctrica cerebral (AEC) mediante el mtodo VARETA y se compararon con las de sujetos normales de la misma edad. Se evaluaron 57 pacientes, 88 % del sexo masculino, 81 % del tipo combinado, 29 nios (6-7 aos) y 28 adolescentes (15-18 aos) y se determinaron la topografa y la frecuencia de la mxima solucin inversa. Resultados. El 87% de los pacientes tuvo Mapas Z anormales: las desviaciones del desarrollo de la AEC (79%) prevalecieron sobre el retardo en la maduracin de la AEC (8%). Las desviaciones del desarrollo ms frecuentes fueron: ausencia de un patrn especfico de anormalidad y exceso de actividad (theta o alfa) en las regiones frontocentrales (primer estudio). Todos los pacientes tuvieron fuentes anormales y las regiones frontales fueron la localizacin ms frecuente: en los nios predominaron en la banda theta y en los adolescentes en la banda alfa (segundo estudio). Conclusiones. Existen subgrupos electroencefalogrficos en los pacientes con TDAH y las fuentes de AEC muestran que los nios y los adolescentes tienen diferentes anormalidades en el EEG, Agradecimientos. A SEP-CONACYT por el financiamiento parcial del proyecto 42126 y a todos sus participantes. A Elvia Serra, a los alumnos de servicio social, Lourdes Ayala y Leonor Casanova. T
74. USO DE BIOMATERIALES PARA LA LIBERACIN DE SEMAFORINAS RECOMBINANTES EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Rios A, Giordano M, Tamariz Domnguez E1, Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico; 1Departamento de Biomedicina, Instituto de Ciencias de la Salud,, Universidad Veracruzana, Xalapa,Veracruz, Mxico. La liberacin de protenas en el sistema nervioso central est restringida por la presencia de la barrera hematoenceflica, limitndose as el paso de las protenas no esenciales; por este motivo la liberacin local de sustancias en el Sistema Nervioso Central requiere del empleo de vehculos que sean biocompatibles y biodegradables adems de que los productos de su biodegradacin no produzcan neurotoxicidad. En particular, estos biomateriales se podran emplear para liberar protenas quimitropicas que pudieran dirigir y estimular el crecimiento axonal de clulas implantadas, por ejemplo en modelos de la enfermedad de Parkinson, favoreciendo la inervacin correcta y la restauracin de la va nigro-estriada. En este estudio se evaluaron dos biomateriales, hidrogeles de metilcelulosa y microesferas de PLGA (Copolimero Ac.Lctico- Ac.Gliclico) en los que se encapsul a la semaforina 3A recombinante (sema 3A-Fc); esta protena tiene un efecto atrayente en neuronas dopaminrgicas (MV) durante la formacin de la va nigro-estriada y repelente en las neuronas del ganglio de la raz dorsal (DRG) durante el desarrollo embrionario. Los ensayos in vitro mostraron que la metilcelulosa permite la liberacin de protenas y mantiene la funcionalidad de la sema 3A-Fc ya que en cultivos del MV se observ un mayor crecimiento de los axones dopaminrgicos en comparacin con el control y en DRG se observ que los axones cercanos a la fuente de la protena se retrajeron ms que los que estaban alejados de la misma. Los resultados hasta el momento indican que los hidrogeles de metilcelulosa podran ser usados para liberar protenas en el cerebro; sin embargo es importante tambin verificar que este vehculo al ser implantado en el cerebro no cause una reaccin inflamatoria. Agradecemos el apoyo tcnico de Nydia Hernndez Ros de la Unidad de Microscopa. Trabajo auspiciado por PAPIIT IN-211709-22, CONACYT 82482 y 103907. M
75. ACAL, UN NUEVO REGULADOR NEGATIVO DE LA VA DE SEALIZACIN DE DROSOPHILA MELANOGASTER. Ros Barrera LD, Riesgo Escovar JR. Departamento de Neurobiologa del desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La va de sealizacin de la cinasa de Jun (JNK, Jun N-terminal Kinase) est conservada en los metazoarios. Drosophila melanogaster posee un slo homlogo de esta cinasa y de otros genes de esta va de sealizacin, por lo que ha sido un modelo muy til para disectar sus elementos. Durante el desarrollo embrionario de Drosophila, la va de JNK controla el cerrado dorsal, un proceso por el cual la epidermis lateral se estira hacia la regin dorsal del embrion para recubrirlo completamente. Los mutantes para genes de la va son incapaces de completar el cerrado dorsal y mueren; este hecho facilita la identificacin de nuevos genes involucrados. En este trabajo caracterizamos un gen cuyos mutantes presentan defectos en el cerrado dorsal, por lo que nuestra hiptesis es que su producto participa en la va de JNK. Por la semejanza de las cutculas de los alelos mutantes de estos embriones
con embarcaciones, el gen se nombr acal, que significa balsa en nhuatl. Nuestros resultados sugieren que acal es un RNA no codificante, ya que no posee marcos abiertos de lectura grandes y/o conservados. Se han aislado RNAs pequeos de este locus que podran ser microRNAs producidos a partir del transcrito primario de acal. Consistentemente, el transcrito est enriquecido en la fraccin nuclear, como se esperara para un precursor de microRNAs. acal se expresa en la epidermis, desde donde podra participar en la va de JNK. Por otro lado, los mutantes de acal presentan activacin ectpica de la va de JNK, lo cual indica que acal regula negativamente dicha sealizacin. Experimentos futuros se enfocarn en detectar los productos maduros de acal, y cul es el mecanismo por el que inhiben la va de JNK durante el cerrado dorsal. D 76. PAPEL DE LA GLIA EN LA RECONFIGURACION DEL GENERADOR DEL RITMO RESPIRATORIO EN LA HIPOXIA Rivera A.J. y Pea-Ortega F. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Los ritmos respiratorios son generados por neuronas del Complejo Pre-Btzinger (CPB), las cuales son capaces de producir dos ritmos en condiciones normales de oxigenacin: la eupnea y los suspiros. Adems, en condiciones de hipoxia hay una respuesta respiratoria que reconfigura al CPB y genera un tercer ritmo: los boqueos. La respuesta respiratoria a la hipoxia inicia con la aceleracin del ritmo respiratorio, seguida de una depresin de la respiracin que eventualmente lleva a la generacin de los boqueos. Los boqueos son considerados un mecanismo de autoresucitacion que parece estar alterado en el Sndrome de muerte sbita del lactante (SMSL). stos, se caracterizan por rfagas inspiratorias de inicio ms rpido y de menor duracin comparadas con las de la eupnea. Los mecanismos neuronales que participan en la generacin de los ritmos, as como en el proceso de la reconfiguracin de la hipoxia, han sido extensamente estudiados. Sin embargo, se conoce poco acerca de la participacin de las clulas gliales en la reconfiguracin de este circuito. El objetivo del presente trabajo es estudiar la participacin de las clulas gliales en la reconfiguracin que sufre el circuito en condiciones de hipoxia, tanto in vitro como in vivo, con el uso de una gliotoxina (fluoroacetato, FA), as como de imgenes de epifluorecencia. Nuestra primera observacin fue que las clulas gliales cambian su actividad en condiciones de hipoxia: Mientras que un grupo de clulas gliales deprimen su actividad en estas condiciones, otro grupo incrementa su actividad. Por otra parte, el registro de la actividad respiratoria, tanto in vitro o como in vivo, muestra que el FA no afecta la generacin de los ritmos respiratorios en condiciones normales de oxigenacin. Sin embargo, se observ que en condiciones de hipoxia el FA afecta el patrn de boqueos y evita la aceleracin inicial del ritmo respiratorio. Adems, in vivo, la aplicacin de FA evita la autoresuscitacin despus de la hipoxia prolongada. Todos esos resultados sugieren que la glia participa en la respuesta respiratoria a la hipoxia. Apoyos: DGAPA IA201511; CONACyT 59187,151261; Alzheimers Association NIRG-11205443. D
77. LA PERMEABILIDAD SELECTIVA DE LAS UNIONES COMUNICANTES DETERMINA LA ESPECIFICIDAD DE LAS SEALES TRANSMITIDAS POR ATP O AII EN EL FOLICULO DE XENOPUS Robles-Martnez L*, Serrano-Flores B*, Vzquez-Cuevas F, Garay E and Arellano RO. Depto. Neurobiologa celular y molecular, Instituto de Neurobiologa-UNAM Las clulas foliculares (c.f.) de Xenopus expresan receptores acoplados a protena G activados especficamente por ATP o angiotensina II (AII). Estos receptores activan preferencialmente a la fosfolipasa C (PLC), en folculos de Xenopus se ha mostrado que el receptor de AII estimula la PLC y sntesis de IP3, que permea a travs de uniones comunicantes (u.c.) al citoplasma del ovocito donde libera Ca2+ desde retculo endoplsmico, con la subsecuente apertura de canales de Cl- dependientes de Ca2+, generando respuestas oscilatorias. En cambio el ATP genera corrientes de Cl- rpidas (FCl) e independientes de la [Ca2+]i en el ovocito, ya que ambas corrientes parecen activarse por PLC, la especificidad de la respuesta que generan debe depender de otro(s) element(s). En este trabajo se muestra que: 1) ATP pero no AII gener una corriente entrante de Cl- dependiente del influjo de Ca2+ en c.f. (Iiw,Ca), 2) los canales responsables de Iiw,Ca tambin generan la FCl; entonces, ambas respuestas dependen de canales de Cl- localizados en las c.f., 3) FCl e Iiw,Ca fueron eliminadas por U73122 y 2-APB, drogas que bloquean PLC/IP3. 4) Experimentos con folculos inyectados con BAPTA o cargados de forma general con BAPTA-AM, un derivado permeable del quelante, mostraron que las respuestas a ATP solo fueron eliminadas con BAPTA-AM pero no por inyecciones de BAPTA en el ovocito, mientras que las provocadas por AII fueron eliminadas en ambos casos. Esto indica que molculas como BAPTA no permean las u.c. entre las c.f. y el ovocito, sugiriendo que molculas como el IP3 podran ser tambin impermeables, condicin que explicara las respuestas especficas a ATP. Esto ltimo permite plantear la hiptesis de la co-existencia de dos tipos de c.f.; uno que expresa receptores a ATP otro a AII. El tipo purinrgico, expresara especificamente la maquinaria molecular para generar FCl e Iiw,Ca, y estaran acopladas al ovocito a travs de u.c. impermeables a BAPTA e IP3; caractersticas que no estaran presentes en c.f. expresando receptores a AII. CONACyT-Mxico 82340 para ROA, PAPIIT-UNAM IN214409 para ROA y IN208209 para FV-C. Serrano Flores Barbara (D), Robles Martnez Leticia (M). * Los autores contribuyeron de igual forma en el estudio 78. EFECTOS DIFERENCIALES DE MUSCIMOL Y BICUCULINA EN EL NCLEO BASAL MAGNOCELULAR SOBRE LA LIBERACIN DE ACETILCOLINA CORTICAL DURANTE LA FORMACIN Y EVOCACIN DE LA MEMORIA DEL SABOR Rodrguez-Garca G., Garca-Medina N.E., Miranda M.I. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Evidencias muestran que la transmisin colinrgica en la corteza insular (CI), estructura relevante para la memoria gustativa, es imprescindible durante la formacin de la memoria del sabor. Dicha transmisin colinrgica esta mediada por el ncleo basal magnocelular (NBM), quien provee inervaciones colinrgicas y GABArgicas a la corteza cerebral. Particularmente, se ha descrito un incremento significativo en la liberacin de ACh en la CI durante el consumo de estmulos gustativos novedosos, que est ausente durante el consumo de sabores familiares. Otros trabajos neuroqumicos han demostrado que la
liberacin de ACh disminuye en la corteza parietal, cuando se administra muscimol, en el NBM; lo que indica que la liberacin de ACh en la corteza cerebral es regulada en el NBM probablemente por la actividad de GABA. El objetivo de este trabajo fue determinar a travs de microdilisis en libre movimiento los efectos de la activacin o inhibicin de los receptores GABAA en el NBM, sobre la liberacin de ACh en la CI, durante la formacin de la memoria apetitiva. Mediante inyecciones bilaterales en el NBM del agonista muscimol antes del consumo del sabor novedoso, y del antagonista bicuculina antes del consumo del sabor familiar, se evalu el aprendizaje y la memoria de reconocimiento del sabor. Asimismo, se cuantific simultneamente la liberacin de acetilcolina en la CI. Los resultados mostraron que el agonista muscimol en el NBM impidi el incremento de ACh en la CI, inducido por la presentacin del sabor novedoso, as como la formacin de la memoria de preferencia del sabor. Por otra parte, el antagonista, bicuculina, en el NBM bloque la evocacin de la memoria de reconocimiento del sabor familiar y afect la liberacin de ACh cortical. Los resultados muestran que la actividad de GABA est relacionada con la familiaridad del estmulo gustativo durante la memoria de reconocimiento de preferencia al sabor, y que podra haber un incremento de GABA en la CI y/o en el NBM durante el consumo de estmulos gustativos familiares, para evocar adecuadamente la memoria apetitiva. En conjunto, se sugiere que los receptores GABA estn mediando la transmisin colinrgica en la memoria de reconocimiento del sabor familiar. Agradecimientos: Angela Gabriela Vera Rivera, Alejandro Rangel Hernndez, Martn Garca Servin. Trabajo auspiciado por CONACyT C54524. D
79. CAMBIOS EN LA HORMONA DE CRECIMIENTO (GH) EN EL TIMO DEL POLLO DURANTE EL DESARROLLO Y EN RESPUESTA A LA ADMINISTRACIN DE LPS. Rodrguez-Mndez, A.J. 1,2, Carranza, M. 1, Armburo, C. 1, Luna, M. 1. 1. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Campus Juriquilla, Quertaro, Qro., 76230, Mxico. 2. Departamento de Investigacin Biomdica, Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Quertaro, Quertaro, Qro., 76017 Mxico. La hormona de crecimiento (GH) se expresa en tejidos linfoides de distintas especies, en donde puede jugar un papel como factor autocrino/paracrino. En este trabajo se evaluaron los cambios en la expresin y distribucin del ARNm de la GH mediante hibridacin in situ con una ribosonda en el timo de pollo durante la ontogenia. Se evalu la distribucin de la GH mediante inmunohistoqumica y el patrn de isoformas mediante SDS-PAGE/ Western blot. Se detect tanto el RNAm y como a la GH en clulas de la corteza del timo (timocitos), y en la mdula (clulas dendrticas y macrfagos). La seal de la corteza tmica fue ms intensa en etapas perinatales que en etapas post-eclosin, en donde la seal fue ubicua. El cDNA de la GH del sistema inmune es idntico al de la hipfisis, sin embargo las variantes de GH detectadas en timo, se asociaron con molculas de 10, 17, 26, 28, 30, 34, 36, 40, 42, 44, 48, 50 y 58 kDa. Las variantes de 34-40 kDa (50%) fueron las ms abundantes en el timo de los embriones, mientras que el fragmento de 17 kDa (60%) predomin en etapas post-eclosin, con excepcin de las 2s (30%). La concentracin de GH determinada por ELISA en embriones fue de 35 ng/mg de protena y se incremento significativo entre las 2 y 4s (80 ng/mg de protena), y disminuy a las 10 y 20s (50 y 40 ng/ mg de protena respectivamente). Se evaluaron los cambios en la concentracin de GH en
hipfisis, suero y timo despus de 2.5 y 8 horas de un estmulo inmunolgico a travs de la inyeccin intrabraquial con lipopolisacrido de E.coli, (LPS, 5 mg/kg). La concentracin de GH mostr un incremento significativo (2 veces) en el timo de los pollos tratados con LPS al compararlos con el control. Los resultados indican que la expresin local de GH se modifica con la edad, y en respuesta a endotoxinas que genera un estmulo inflamatorio. Por lo anterior, se plantea que la expresin local de la GH como un factor autocrino/paracrino que influya en el desarrollo y respuesta funcional del timo. Agradecimientos: CONACYT (60296N & 161791) and PAPIIT-UNAM (IN210209). I 80. EFECTO DE LA PROLACTINA EN EL TEJIDO ADIPOSO DURANTE LA OBESIDAD. Ruiz-Herrera X, Lemini M, Arnold E, Lpez-Barrera F, Martnez de la Escalera G, Clapp C, Macotela Y. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La obesidad se caracteriza por el almacenamiento excesivo de grasa corporal. La grasa se almacena en clulas especializadas del tejido adiposo, conocidas como adipocitos. El tejido adiposo blanco se clasifica en grasa visceral y subcutnea. El aumento de grasa visceral incrementa el riesgo de desarrollar enfermedades metablicas, mientras que el aumento de grasa subcutnea no ejerce tal riesgo. El tejido adiposo regula el metabolismo a travs de secretar adipocinas que afectan las funciones de rganos como el cerebro, hgado y msculo. Uno de los factores que pueden regular la funcin del tejido adiposo es la hormona prolactina (PRL). El tejido adiposo secreta PRL y su receptor (RPRL) tiene mayor nivel de expresin en los preadipocitos y adipocitos del tejido adiposo visceral, comparado con el tejido subcutneo. En roedores, la PRL aumenta la ingesta de alimento y en pacientes obesos con prolactinomas la reduccin de los niveles de PRL, ocasionan una disminucin del peso corporal, aunque estos resultados son aun controversiales. Adems, en los ratones knockout para el RPRL disminuye la masa del tejido adiposo visceral. El objetivo de este trabajo es determinar el efecto de la PRL en el tejido adiposo visceral y subcutneo en animales delgados y obesos. Ratas macho Wistar se distribuyeron en 4 grupos: dieta control, dieta control ms hiperprolactinemia, dieta alta en grasa y dieta alta en grasa ms hiperprolactinemia. Los animales se mantuvieron en las dietas respectivas durante 8 semanas. La hiperprolactinemia se indujo despus de 4 semanas del inicio de la dieta mediante el implante subcutneo de bombas liberadoras de PRL. Encontramos que la hiperprolactinemia no modifica el peso corporal ni la ingesta de alimento, pero es capaz de aumentar el peso de tejido adiposo e incrementar la sensibilidad a la insulina en animales obesos. La hiperprolactinemia adems, previene el aumento en el tamao de los adipocitos viscerales provocado por una dieta alta en grasa y estimula la hiperplasia del tejido adiposo visceral y subcutneo en condiciones de obesidad. En conclusin, la hiperprolactinemia ejerce efectos benficos en el organismo obeso al menos en parte a travs de estimular la hiperplasia y funcionalidad de los adipocitos. Agradecemos la asistencia tcnica de Daniel Mondragn, Antonio Prado y Martn Garca. Trabajo auspiciado por Conacyt 127496. M
81. CARACTERIZACIN ULTRAESTRUCTURAL DE LA LNEA CELULAR GABARGICA M213-20 CLONA-4 TRANSFECTADA CON EL GEN DE LA GAD67 HUMANA. Snchez G2, Crabez A1, Giordano M2. 1Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, 2Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Blvd. Juriquilla 3001, Juriquilla, Quertaro. Estudios previos indican que las crisis epilpticas en modelos animales pueden ser controladas por el suministro de un neurotransmisor inhibitorio como el cido -amino butrico (GABA) empleando clulas modificadas genticamente como vehculo, y esto constituye la base para el desarrollo de una alternativa teraputica para la cura de formas de epilepsia intratables. La lneas celulares M213-20 y M213-20 clona-4 derivada de la anterior y transfectada con un vector que contiene el gen de la glutamato descarboxilasa 67 (GAD67) humana, han sido probadas en cuanto a su capacidad para sintetizar y liberar GABA, tanto in vitro como in vivo, mostrndose funcionalmente capaces de reducir la aparicin de crisis convulsivas en un modelo de epilepsia en ratas Sprague-Dawley. Sin embargo, no se han caracterizado morfologicamente por lo cual el propsito de este estudio es realizar el anlisis ultraestructural de las clulas y establecer si hay diferencias citolgicas entre la lnea que expresa el transgn y la lnea parental. Cada lnea celular se sembr en portaobjetos y se fij con glutaraldehdo al 3% en amortiguador de cacodilato de sodio, se deshidrat en una serie porcentual de etanol y se embebi en resina Epon812. Se realizaron cortes finos para contrastarlos con citrato de plomo y posteriormente se analizaron con un microscopio electrnico JEOL modelo 1010. Los resultados mostraron la presencia de lisosomas secundarios en las clulas de la lnea progenitora M213-20 sin alteracin en los otros orgnulos como mitocondrias, ribosomas y microtbulos; en tanto que las clulas de la clona-4 que contienen el transgn, presentaron cuerpos de inclusin nucleares los cuales no se observaron en la lnea parental. Los hallazgos de este estudio permitirn ampliar el conocimiento de las caractersticas estructurales de una lnea celular modificada genticamente. Esta caracterizacin pone de manifiesto el efecto de la interaccin del agente exgeno con las clulas transfectadas. Agradecemos la asistencia tcnica de la Biol. Soledad Mendoza Trejo as como la de la IBQ. Lourdes Palma Tirado de la Unidad de Microscopa del INB. Trabajo auspiciado por CONACYT (103907), DGAPA-UNAM PAPIIT (211709) y por la beca de posgrado CONACYT (376511) para GMS. M
82. ESTUDIO MULTIDISCIPLINARIO DE UN GRUPO DE NIOS CON DESARROLLO MENTAL NORMAL Y DE OTRO CON RETARDO SIGNIFICATIVO, A LOS DOS AOS DE EDAD, SEGN LA ESCALA DE BAYLEY. Sanders Peralta AA, Ricardo-Garcell J, Cruz E, Martnez de la Escalera D, Barrera J, Avecilla G, Porras E, Arias E, Cruz Y, Pedraza MC, Caldern M, Moreno AJ, Carabez D, Carrillo C, Colmenero M, Ferndez-Bouzas A, Harmony T. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo (UIN) Dr. Augusto Fernndez Guardiola, Instituto de Neurobiologa (INB), UNAM. Introduccin. La Escala de Desarrollo Infantil Bayley (EDIB) es la prueba psicolgica estandarizada ms utilizada en la valoracin de bebs que presentan factores de riesgo de dao cerebral. Cuenta con dos subescalas (mental y motriz) cuyas puntuaciones se
transforman en dos ndices estandarizados para la edad del nio: ndice de desarrollo mental (IDM) e ndice de desarrollo psicomotor (IDP). Objetivo. Profundizar sobre los factores que influyen en el retraso significativo del desarrollo mental de bebs a los 2 aos de edad. Sujetos y mtodo. Se estudiaron 96 bebs con factores de riesgo de dao cerebral, los cuales se clasificaron en dos grupos segn el IDM a los dos aos de edad corregida (EC): con desarrollo mental normal (DMn=49) y con retraso significativo (DMrs=47). Doce bebs del grupo DMrs fueron excluidos por presentar dao sensorial (retinopata e hipoacusia) quedando 35 (60% masculinos, 57.1% prematuros). Grupo DMn=49: 45% masculinos, 63.3% prematuros). Se realizaron evaluaciones en el primer trimestre y a los 2 aos de EC con el Mtodo Katona, las imgenes por resonancia magntica (IRM) y el electroencefalograma (EEG) convencional. Resultados. Los factores de riesgo ms frecuentes, en ambos grupos, fueron: prematurez, asfixia, sepsis e hiperbilirrubinemia. Todos los nios DMn mejoraron con la terapia Katona vs 77% del grupo DMrs. Veintitres nios DMn y 23 DMrs tuvieron IRM los primeros 3 y a los 24 meses de EC. El 16.3% de los nios DMn tuvo normal su primera IRM vs 5.7% el grupo DMrs. Este grupo mostr valores del cuerpo calloso significativamente menores (p0.05) que los nios DMn a los 24 meses de EC. No se observaron diferencias significativas en las proporciones de EEGs convencionales normales y anormales entre ambos grupos (n=25 en cada uno) en el primer trimestre ni a los 24 meses de EC. Conclusiones. Las anormalidades en las IRM cerebrales en el primer trimestre y el menor volumen del cuerpo calloso a los 24 meses de EC parecen influir en la respuesta al tratamiento neurohabilitatorio y en el desarrollo mental normal Agradecimientos. Delia Figueroa, Erminda Rodrguez, David Avila, Paulina Alvarez, Hctor Belmont, Teresa Alvarez, Leonor Casanova. M
83. ESTUDIO PROSPECTIVO SOBRE LA ATENCIN, EL LENGUAJE Y LAS FUNCIONES EJECUTIVAS EN UN GRUPO DE NIOS CON FACTORES DE RIESGO DE DAO CEREBRAL. Santiago-Hernndez MR,1 Ricardo-Garcell J, Riveroll R, Cruz E, Cruz Y, Guidobono V, Porras E, Barrera J, Avecilla G, Gonzlez B, Pedraza MC, Arias A, Caldern M, Colmenero M, Carrillo C, Salvador J, Ferndez-Bouzas A, Harmony T. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Unidad de Investigacin en Neurodesarrollo (UIN) Dr. Augusto Fernndez Guardiola, Instituto de Neurobiologa (INB), UNAM. 1Maestra en Psicologa, FES Zaragoza, UNAM. Introduccin. El retraso en el desarrollo cognitivo de los nios se ha relacionado con antecedentes de riesgo de dao neurolgico. Objetivo. Estudiar la asociacin entre las puntuaciones del ndice de Desarrollo Mental (IDM) de la Escala de Desarrollo Infantil Bayley y las puntuaciones obtenidas en los procesos cognitivos de atencin (A), lenguaje (L) y funciones ejecutivas (FE) definidos mediante la Escala Wechsler de inteligencia para nios preescolares (WPPSI: Wechsler Preschool and Primary Scale of Intelligence), escolares (WISC: Wechsler Intelligence Scale for Children) y de la Evaluacin Neuropsicolgica Infantil (ENI). Sujetos y mtodo. Se analizaron 4 evaluaciones transversales en 18 nios con factores de riesgo de dao cerebral, estudiados desde los 3 meses hasta los 6-8 aos en la UIN del INB. 1: Se determin el IDM a 24-36 meses de edad corregida. 2: Aplicacin del WPPSI a los 4 aos. 3: Valoracin con WISC a los 6-7 aos. 4: Aplicacin de la ENI a los 6-8 aos. Se determinaron los meses de retraso respecto al IDM, en cada nio, y se calcul el coeficiente de correlacin de Pearson entre estos valores y las puntuaciones del
WPPSI, WISC y la ENI obtenidas en los procesos cognitivos atencin, lenguaje y funciones ejecutivas. Resultados. Existieron correlaciones negativas significativas entre los procesos de atencin visual (AV) y auditiva (AU), lenguaje expresivo (LE) y comprensivo (LC) y las FE del Bayley, evaluados a travs del IDM, con diferentes variables de la atencin, el lenguaje y las FE de las escalas Wechsler y la ENI: AV y FE del Bayley con atencin, lenguaje y FE de WPPSI, WISC y ENI; AU del Bayley con atencin, lenguaje y FE de WISC y ENI; LE del Bayley con atencin, lenguaje y FE del WISC y LC del Bayley con atencin, lenguaje y FE de la ENI. Conclusiones. Los retardos en el IDM de Bayley se asocian de manera inversa con el rendimiento en varios procesos cognitivos: atencin, lenguaje y funciones ejecutivas en diferentes edades. Agradecimientos. Delia Figueroa, Erminda Rodrguez, Daniela Martnez de la Escalera, Teresa Alvarez, Hctor Belmont, David Avila, Paulina Alvarez, Gabriela Medina, Astrit Yaez, Lilia Gonzlez. M 84. DIFERENCIA ENTRE LAS MOLCULAS ACTIVADAS DURANTE EL INFLUJO DE Ca2+ ESTIMULADO POR RECEPTORES PURINRGICOS Y MUSCARNICOS EN OVOCITOS DE Xenopus Serrano-Flores B, Arellano RO y Garay E. Depto. Neurobiologa celular y molecular, Instituto de Neurobiologa-UNAM. Las clulas eucariotas incrementan la concentracin de Ca2+ citoplsmico mediante dos vas principales: 1) liberacin de Ca2+ desde reservorios intracelulares, y 2) influjo desde el medio, permeando a travs de canales localizados en la membrana. Esta ltima va incluye a los canales SOC que permiten el influjo cuando en el retculo endoplsmico (r.e.) disminuye la concentracin de Ca2+. En el laboratorio hemos clonado el receptor P2Y8 de Xenopus, su expresin en la membrana del ovocito y activacin por ATP abre canales SOC, generando una respuesta llamada corriente Tin, la cual es acarreada a travs de canales de Cl- dependientes de Ca2+. Tin es activada de forma regular por otros receptores del ovocito (e.g., receptores muscarnicos), que actan aumentando la sntesis de IP3 y provocando la liberacin de Ca2+ desde el r.e.; sin embargo, estas respuestas son de carcter transitorio mientras que las activadas por P2Y8 son sostenidas, sugiriendo una diferencia importante en su operacin. Estudiando las razones de esta diferencia fundamental, hemos comenzado con la identificacin de molculas involucradas en las dos Tin . Los resultados muestran que: 1) el ovocito expresa stim1 y stim2, secuencias que codifican para molculas que participan como sensores de Ca2+ y activadores del canal SOC; 2) La inyeccin del ovocito con un oligo antisentido para stim1 disminuye >50% la amplitud de la corriente transitoria Tin activada por receptores muscarnicos, pero no tuvo efecto sobre la Tin sostenida activada por P2Y8; 3) La inyeccin de un oligo antisentido para stim2 disminuye la amplitud de Tin >90% activada por cualquiera de los dos receptores, sugiriendo un papel central de stim2 en la respuesta. Esto indica que diferentes molculas participan en la activacin de canales SOC, y que esto depende del tipo de receptor que promueva su apertura, dando como resultado respuestas inicas con caractersticas biofsicas diferentes con posibles consecuencias importantes en la dinmica del Ca2+ intracelular. CONACyT-Mxico 82340 y PAPIIT-UNAM IN214409 para ROA. Serrano-Flores B(D)
85. EFECTO DEL CIDO LIPICO SOBRE LA DIFERENCIACIN MUSCULAR Y ADIPOSA EN EL POLLO DE ENGORDA Sigler S.1 , Gonzlez-Dvalos2 L., Shimada A.,2 Pia E.3 y Mora O.2 Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico, 1Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Autnoma de Quertaro, Quertaro, Mxico, 2Laboratorio de Rumiologa y Metabolismo Nutricional (RuMeN), Facultad de Estudios Superiores Cuautitln, UNAM, 3 Facultad de Medicina, UNAM, Mxico D.F. El cido lipico es un cido graso de ocho carbonos; es un potente antioxidante. Participa en la biognesis mitocondrial y eficientiza el uso de la glucosa, entre otras cosas. Respecto a su uso en animales destinados al consumo humano, se ha visto que mejora la ganancia de peso de las canales y la conformacin magra de estas, pero aun no se sabe si dicha ganancia es debida a la hiperplasia o hipertrofia del tejido muscular y/o adiposo. El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto del cido lipico sobre la diferenciacin de mioblastos y adipoblastos provenientes de pollos in vitro, midiendo para ello la expresin de miogenina y PPAR, respectivamente. Se usaron pollos de engorda de la lnea Ross recin nacidos, que fueron sacrificados para obtener fibroblastos de tejido muscular y adiposo, para con ellos iniciar la diferenciacin hacia el linaje correspondiente. El tratamiento fue cido lipico a una concentracin de 100M para el tejido muscular, y de 125M, 250M, 500M para el tejido adiposo. Al tercer da de tratamiento con el medio de diferenciacin se extrajo el RNA y se realiz RT-PCR y de tiempo real para medir la expresin de miogenina y PPAR. Mediante qPCR se evalu por cuantificacin relativa la expresin de miogenina y PPAR, normalizando con la media geomtrica de los genes de referencia -actina y GAPDH, respectivamente. No se observaron diferencias entre los grupos tratados y los controles en ninguno de los tipos celulares (P>0.05). Estos resultados sugieren que el aumento de peso en las canales probablemente no es debido a la hiperplasia celular de los tejidos en cuestin por lo que puede deberse a una posible hipertrofia muscular. Agradecimientos: Unidad de Proteogenmica (INB-UNAM) Financiado por PAPIIT (IN200910) Categora: L
86.EFECTOS DE LA ADMINISTRACIN DE CORTICOSTERONA EN EL ESTRIADO SOBRE LA SELECCIN DE UNA ESTRATEGIA DE APRENDIZAJE EN EL LABERINTO DE TOLMAN Siller Prez C.1, Espinoza-Gonzlez V.1, Serafn N.1, Prado-Alcal R.A.1, Roozendaal B.2 y Quirarte G.L. 1 1Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Qro., Mxico y 2Department of Neuroscience, Section Anatomy, University Medical Center Groningen, Groningen, Netherlands. Se sabe que las hormonas del estrs como los glucocorticoides y las catecolaminas participan en los procesos cognitivos como el aprendizaje y la memoria ejerciendo un papel modulatorio. Recientemente se ha propuesto que el estrs facilita el uso de la memoria de procedimiento (E-R) sobre la memoria espacial (E-E). Adicionalmente, el estriado dorsal, estructura relacionada con las asociaciones E-R, expresa una cantidad moderada de receptores a glucocorticoides del tipo GR. Por lo que el objetivo de este trabajo es observar
si existe una facilitacin en la seleccin de E-R sobre E-E despus de haberse administrado corticosterona en el estriado anterodorsal. Se utilizaron ratas macho de la cepa Wistar a las que se les practic una ciruga estereotxica para la implantacin de cnulas bilaterales (11 mm) en el estriado antero dorsal (AP bregma=0, ML=3.2 mm, DV=-4.0 mm). Despus del perodo postoperatorio se les someti a una restriccin alimenticia al 85% de su peso de alimentacin ad libitum y as se mantuvieron a lo largo del experimento. Fueron entrenadas y probadas en la tarea del laberinto de Tolman, se formaron grupos independientes a los que se les administr corticosterona (10 30 ng) vehculo intracerebralmente despus de la fase de entrenamiento moderado. Se encontr que los sujetos control presentaron predominantemente en la fase de entrenamiento moderado una estrategia espacial y en la fase de entrenamiento extendido una estrategia de procedimiento. Mientras que los sujetos que recibieron corticosterona tuvieron una facilitacin en la seleccin de la estrategia espacial en la fase extendida en forma dosis-dependiente; los animales que recibieron 30 ng tuvieron una facilitacin pronunciada, con la dosis de 10 ng no se observ tal efecto. Por lo tanto se concluye que la corticosterona tiene un efecto facilitador en la seleccin y mantenimiento de la memoria espacial con respecto a la memoria de procedimiento cuando se administra corticosterona en el estriado. Agradecemos la asistencia tcnica de Martn Garca, ngel Mndez, Cristina Medina, Omar Gonzlez y Leonor Casanova. Trabajo apoyado por PAPIIT-UNAM (IN214111) y CONACYT (Donativo 130524 y Beca 371741 a C.S.P). M 87. LOS EFECTOS ANTITUMORALES DE LA 6-YODO--LACTONA PODRIAN PARCIALMENTE ESTAR MEDIADOS POR LA INHIBICIN DE LA 5-LIPOOXIGENASA1, EN CELULAS DE CNCER PROSTTICO. Sosa S*, Aceves C y Anguiano B. Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. En el cncer de prstata, el cido araquidnico (AA) es metabolizado primordialmente por las enzimas 5, 12 y 15-1 lipooxigenasa (LOX), las cuales dan lugar a la formacin de lpidos con actividad protumoral (eicosanoides). En cncer mamario se ha mostrado que el yodo molecular (I2) en presencia de AA da lugar a la formacin de un yodolpido con actividad antitumoral, la 6-yodo--lactona (6-IL). En estudios previos hemos mostrado que clulas provenientes de un cncer de prstata humano captan yodo (LNCaP), lo cual se acompaa de efectos antiproliferativos y apoptticos. El propsito de este trabajo fue: 1) analizar los efectos de la administracin de 6-IL sobre la viabilidad y apoptosis de las clulas LNCaP y 2) explorar si la 6-IL podra inhibir la actividad de 5-LOX1 en un sistema libre de clulas. La viabilidad se evalu mediante el mtodo de exclusin con azul de tripano y la apoptosis mediante el cociente anexina/calcena (fluorescencia). La actividad de 5-LOX-1 se evalu a travs de medir la formacin de producto (perxidos). El efecto de la 6-IL se analiz con diferentes dosis (1-100 M) y a diferentes tiempos (24, 48 y 72 y 96 h). Se observ que la 6-IL efectivamente reduce la viabilidad e induce apoptosis (IC50 20 M). En el ensayo enzimtico se utiliz AA como sustrato y se realiz en ausencia y presencia de 6-IL. Los resultados muestran que a partir de 50 M, la 6-IL inhibe la actividad enzimtica a travs de un mecanismo acompetitivo. Nuestros datos sugieren que los efectos antitumorales de la 6-IL podran estar parcialmente mediados por la inhibicin de la 5-LOX-1. Estudios en curso analizan los efectos de la 6-IL sobre la expresin (RNAm) de esta enzima. Agradecemos el apoyo de Guadalupe Delgado y Felipe Ortiz. Trabajo auspiciado por: PAPIIT IN201210 y CONACYT 87196, 78955. *Becario CONACYT 221009- Categora: M
88. FUNCIN DE LOS RECEPTORES A DOPAMINA EN EL NCLEO ACCUMBENS DURANTE LA FORMACIN Y EVOCACIN DE LA MEMORIA AVERSIVA Y APETITIVA. Soto-Alonso G.A., Rangel-Hernndez J.A., Nez-Jaramillo L., Miranda M.I. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiologa, UNAM campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. La memoria gustativa puede estudiarse a travs del condicionamiento de aversin al sabor (CAS) y a travs de la evaluacin de la preferencia al sabor. El ncleo accumbens (NAc) est involucrado en la conducta de ingesta y reforzadores, constituye un rea clave en el circuito de recompensa y adicciones y participa mediante la activacin de receptores a glutamato en la formacin de la memoria gustativa aversiva. Los niveles altos de dopamina (DA) en esta estructura, se asocian con un incremento en la liberacin de acetilcolina (ACh) en la corteza insular (CI), estructura importante para la formacin de la memoria gustativa. El objetivo fue evaluar los efectos de la activacin y del bloqueo de los receptores dopaminrgicos en el NAc durante la formacin o evocacin de la memoria del CAS o la preferencia del sabor. A travs de implantes de cnulas en el NAc se inyect DA (40 g/l, 0.5 l) o el antagonista de los receptores de DA tipo D2, haloperidol (HAL: 1 y 5 g/l, 0.5l), antes de la adquisicin o de la evocacin del CAS, as como antes de la presentacin del sabor novedoso o del sabor familiar durante el protocolo de preferencia. Los resultados mostraron que la adquisicin o evocacin del CAS no son afectados por DA o HAL. Por otra parte, tanto DA y HAL, cuando fueron inyectados antes del consumo del sabor novedoso, impidieron la formacin de la memoria, ocasionando un retardo en el desarrollo de la preferencia; lo que sugiere que el incremento en la actividad dopaminrgica durante la adquisicin impide la formacin de la memoria apetitiva, y por lo tanto la preferencia del sabor. No se encontraron efectos cuando stos fueron inyectados antes de la presentacin del sabor familiar. En conclusin la regulacin de los niveles de dopamina en NAc es diferente segn el tipo de aprendizaje, siendo importante durante la formacin de la memoria apetitiva, pero no durante la formacin de la memoria aversiva del mismo sabor. La evocacin de la memoria tanto apetitiva como aversiva, no se ve alterada por la manipulacin de los receptores de DA en el NAc. Agradecimientos: ngela Gabriela Vera Rivera, Nadia Edith Garca Medina, MVZ. Martn Servn y M. en C. Nydia Hernndez Ros. Trabajo auspiciado por DEGAPA-PAPIIT IN209911 y CONACyT C54524. L
89. PREVALENCIA DE ELEMENTOS P EN ESPECIES DE DROSOPHILA DEL CENTRO DE MXICO. Tllez A. y Riesgo J., Departamento de Biologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM. Los elementos P son transposones presentes en varias especies de la familia Drosophilidae (Diptera), entre otras. Ya que la presencia de elementos P no es necesariamente congruente con la filogenia de la familia, se ha propuesto la transferencia horizontal como un mecanismo evolutivo para este elemento. Con anterioridad se ha demostrado que este tipo de transposn fue transmitido horizontalmente de Drosophila willistoni a D. melanogaster a partir de que ambas especies se volvieron simptricas. Sin embargo, considerando la gran diversidad de la familia Drosophilidae, la bsqueda de elementos P se ha limitado a slo unas cuantas
poblaciones y especies. Asimismo, existen muchas regiones dentro de Mxico dnde se desconoce qu especies de drosophlidos habitan; este es el caso del centro y noroeste del pas. Con la intencin de conocer la distribucin de los elementos P en las poblaciones naturales y compararla con la filogenia descrita para la familia, en el presente trabajo se han hecho colectas de especies de Drosophila que habitan el centro de Mxico. Hasta el momento se han encontrado cuatro gneros: Drosophila, Sinopthalmus, Chymomyza y Zaprionus; por su parte, dentro del gnero Drosophila se han encontrado 17 especies en 12 localidades. A su vez, se ha registrado la presencia de Zaprionus indianus, una especie que ha invadido recientemente el continente americano. Para analizar la presencia de elementos P, se han hecho amplificados por medio de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) y se han detectado amplificados en D. melanogaster y Z. Indianus, especies que se han vuelto simptricas recientemente. Financiamiento: UNAM. Categora: L
90. ESTABLECIMIENTO DE UNA COLONIA DE Lehmannia valentiana COMO MODELO PARA ESTUDIOS DE EMBRIOLOGIA COMPARADA Y REGENERACION Tllez Chvez, E. y Varela Echavarra, A. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. El estudio del desarrollo del plan corporal de los Metazoarios ha permitido identificar elementos genticos que han sido seleccionados por poseer un valor adaptativo en dicho proceso y que se han conservado en las diversas taxas que constituyen este grupo. El estudio del desarrollo de invertebrados actualmente se realiza principalmente en especies modelo como el nemtodo Caenorhabditis elegans y la mosca de la fruta Drosophila melanogaster. Los moluscos son un grupo importante de macroinvertebrados y su desarrollo embrionario es hasta ahora muy poco conocido. Con el fin de contribuir al entendimiento del desarrollo, ciclo de vida y regeneracin del grupo, iniciamos el estudio de un miembro de la familia Limacidae, Lehmannia valentiana (Mollusca, Gasterpoda, Pulmonata, Stylommatophora), un gasterpodo pulmonado terrestre y hermafrodita. Determinamos las condiciones adecuadas para su sobrevivencia y reproduccin que incluyen humedad, alimento, sustrato, temperatura y luz. Adems llevamos a cabo estudios iniciales de su ontogenia a fin de generar un catlogo de los diferentes estadios de desarrollo. Tambin se llevaron a cabo estudios de histologa que demuestran la regeneracin de la cola y los tentculos despus de su amputacin. Por otra parte, llevamos a cabo estudios preliminares en los que observamos que por ayuno prolongado los adultos de esta especie pueden reducir su tamao hasta en un 70%. Esperamos que la informacin derivada de este estudio sirva de base para anlisis ontognicos comparativos de este grupo con otros metazoarios. Agradecemos por su apoyo tcnico a Lorena Ortiz, Leonor Casanova, Omar Gonzlez, Ramn Martnez y Alberto Lara. Financiamiento: CONACYT101433. L.
91. EFECTO DE LA INHIBICIN DE LA TRANSCRIPCIN EN EL HIPOCAMPO DORSAL SOBRE LA CONSOLIDACIN DE LA MEMORIA DE UN APRENDIZAJE INCREMENTADO Torres-Garca M.E., Medina A.C., Quirarte G.L. y Prado-Alcal R.A. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla.Quertaro, Qro. 76230. Mxico. Se ha postulado que el proceso de consolidacin de la memoria es dependiente de la sntesis de protenas. Al administrar inhibidores de esta sntesis, ya sea sistmica o intracerebralmente se produce un efecto amnsico. No se sabe si este efecto producido por inhibidores de la transcripcin se presenta cuando los sujetos son sometidos a condiciones de sobrerreforzamiento. El objetivo fue determinar si la administracin de 5,6-Dicloro-1-D-ribofuranosilbenzimidazol (DRB), un inhibidor de la transcripcin, en el hipocampo dorsal produce amnesia en ratas entrenadas en una tarea de evitacin inhibitoria (EI) con intensidad baja o alta de reforzamiento. En ratas macho (Wistar, 250-350 g), se implant bilateralmente cnulas en el hipocampo dorsal. Despus, fueron entrenadas en una tarea de EI. Se administr DRB (20, 40 u 80 ng) 15 minutos antes del entrenamiento usando un choque elctrico de 1mA. En otros grupos se administr DRB (80 ng) usando un choque de 1 2 mA. Otros grupos recibieron DRB (80 ng) antes del entrenamiento y antes de la prueba, usando un choque elctrico de 1 mA. En todos los casos la prueba de retencin se realiz 48 h despus del entrenamiento. En todas las condiciones hubo un grupo de ratas tratadas con vehculo. El DRB produjo amnesia con dosis de 40 y 80 ng cuando se aplic un choque elctrico de 1 mA. Pero cuando las ratas fueron entrenadas con el choque elctrico alto, el efecto amnsico no se present. No se observ dependencia de estado. Concluimos que en condiciones de sobrerreforzamiento la sntesis de ARNm en el hipocampo dorsal no es necesaria para la formacin de la memoria de largo plazo. Agradecemos el apoyo tcnico de Jorge Garca, Adriana Gonzlez, ngel Mndez, Norma Serafn, Luis A. Prado, Omar Gonzlez y Martn Garca. Trabajo apoyado por CONACYT (128259) y PAPIIT (IN208110). Beca de CONACYT a M.E.T.G. (372289). M 92. NEUROGNESIS EN EL BULBO OLFATORIO INDUCIDA POR LA ESTIMULACIN SEXUAL EN LA RATA MACHO. Unda N, Corona R, Portillo W, Paredes RG. Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva. Instituto de Neurobiologa, U.N.A.M. Juriquilla Quertaro, Mxico. En la rata macho, la integridad del sistema olfatorio es importante para la expresin de la conducta sexual. El bulbo olfatorio (B0) es una de las estructuras que en la edad adulta presenta neurognesis (generacin de neuronas nuevas). Se ha mostrado que la exposicin a ambientes de olores enriquecidos y la deteccin de feromonas incrementan la neurognesis en el BO. El objetivo del presente trabajo es evaluar si la conducta sexual induce un mayor nmero de clulas nuevas en el BO accesorio (BOA) y principal (BOP) de la rata macho adulta. Otro de los objetivos es determinar si el control de la estimulacin sexual modifica la neurognesis del BO. Se utilizaron ratas macho de la cepa Wistar sexualmente expertos (animales que haban eyaculado en tres pruebas), los cuales se dividieron en los siguientes grupos: a) machos control que no copularon, b) exposicin, machos que fueron expuestos a una hembra sexualmente receptiva sin tener contacto fsico, c) Cpula regulada por una hembra, machos que copularon con hembras que regularon los contactos
copulatorios y dos grupos de machos que copularon libremente y que d) eyacularon una vez y e) eyacularon tres veces. A los sujetos se les administr el marcador mittico 5-bromo-2deoxyuridina (BrdU) durante la prueba conductual y fueron sacrificados 15 das despus. Para detectar el nmero de clulas nuevas que incorporaron el marcador BrdU se realiz una inmunohistoquimica, en el BOA y BOP capas mitral, granular y glomerular. Nuestros datos demuestran que los machos que copulan regulando la interaccin sexual tienen un mayor nmero de clulas nuevas en el BOA capa granular que los machos control. Estos resultados, nos sugieren que en la rata macho la estimulacin sexual recibida cuando el controla la interaccin sexual incrementa la neurognesis del BO indicando que la conducta sexual induce cambios plsticos en el sistema nervioso central. Agradecimientos a CONACyT 53547, Papitt 213609 y DGAPA IN213609. M 93. ESTUDIO DE LA MIGRACIN DE NEURONAS DOPAMINRGICAS DIENCEFLICAS Vera Daz, J., Garca-Pea, C.M. y Varela Echavarra, A. Departamento de Neurobiologa del Desarrollo y Neurofisiologa, Instituto de Neurobiologa, UNAM Campus Juriquilla, Quertaro, Mxico. Durante el desarrollo embrionario del cerebro, las neuronas dopaminrgicas o positivas a hidroxilasa de tirosina (TH+) se ubican principalmente en el mesencfalo (ncleos A8-A10), el diencfalo (ncleos A11-A15) y en el telencfalo (ncleos A16 y A17). Sin embargo, se ha observado en estudios recientes que existen diferencias en la distribucin de las neuronas dopaminrgicas del adulto y del embrin. Adems, estudios en el laboratorio han revelado que clulas TH+ del estadio embrionario (E) 12 del diencfalo ventral poseen caractersticas morfolgicas de neuronas en migracin, usando aparentemente como sustrato fibras axonales que se detectan por la expresin de -III tubulina (-III tub+). Con la finalidad de determinar el origen y destino de las neuronas TH+ del diencfalo ventral se realizaron marcajes con el trazador fluorescente CFDA en embriones de rata en cultivo exo-tero durante 24 horas. Se concluy con este estudio que las clulas marcadas con CFDA del diencfalo ventral migran del estadio E12 al E13 en direccin dorsal integrndose posiblemente a la zona incerta (A13). Se encontraron neuronas en migracin que expresan TH y algunas que no expresan este marcador. Agradecemos por su apoyo tcnico a Elsa Nydia Hernndez, Martn Garca Servn, Lorena Ortiz, Omar Gonzlez, Ramn Martnez, Alberto Lara y Leonor Casanova. Financiamiento: IMPULSA02-UNAM, DGAPA 217810-21 y becas CONACYT (245808 y 173228) M.
94. MEMORIA DECLARATIVA EN NIOS INDUCIDA POR EVENTOS EMOCIONALES. Yanome Y1., Torres A.O.2, Arellanos Mejorada A.G2., Luna M.3 y Quirarte G.L.3 1Facultad de Psicologa, Universidad Anhuac, 3Departamento de Neurobiologa Conductual y Cognitiva y 2Departamento de Neurobiologa Celular y Molecular Instituto de Neurobiologa, UNAM, Campus Juriquilla, Quertaro Mxico. Eventos que involucran un contenido emocional (CE) facilitan la consolidacin de la memoria (Cahill et al., 1995). Las experiencias emotivas producen la liberacin de las hormonas del
estrs y activan sistemas cerebrales implicados en la memoria de largo plazo (MLP) (Cahill et al., 1998). Un estudio de Franz y Tomaz (2000) en el que se replic el trabajo de Cahill et al. (1995) report que aunque no se encontraron diferencias estadsticamente significativas, los sujetos a quienes les fue contada la historia emotiva recordaban un mayor nmero de detalles en comparacin con los de una historia neutral. Con el objetivo de conocer si la memoria en nios tambin se facilita por medio de eventos emocionales en este trabajo se estudi la memoria declarativa en nios entre 9 y 11 aos (n=40). Para ello se les aplic la prueba de coeficiente intelectual WISC IV y la prueba de atencin de Conners para padres y maestros, con la finalidad de no incluir a los nios que no tuvieran un coeficiente intelectual promedio o que presentaran problemas de atencin. A los nios se les presentaron 11 diapositivas con una narracin grabada y se asignaron a uno de tres grupos de acuerdo al contenido de la narracin: un grupo al que se le present una historia neutral (HN), otro al que se le present una historia emotiva A (HEA) y uno al que se le present una historia emotiva B (HEB). Al final de la presentacin se recolect una muestra de saliva en la que se midi la enzima alfa amilasa como respuesta fisiolgica al stress. A cada uno se le midi y registr la presin arterial (PA) y el ritmo cardiaco (RC) antes y despus de la presentacin. Una semana despus se les aplic un cuestionario con 77 reactivos de opcin mltiple, acerca de las historias. No se observaron diferencias significativas entre los grupos, ni en la memoria medida una semana despus, ni en los niveles de la enzima alfa amilasa. Los nios de todos los grupos presentaron buena memoria, lo que pudiera sugerir que las historias consideradas emocionales no lo son para la muestra utilizada o que a esta edad la buena memoria no depende necesariamente de experiencias emotivas. Agradecemos la ayuda tcnica de Norma Serafn, Martha Carranza, Alfredo Briones, Ral Ossio y Thalia Fernndez. M

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JORNADAS

Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Septiembre 19 al 23, 2011

Director, Instituto de Neurobiologa, UNAM Teatro Auditorio Centro Acadmico Cultural

LUNES 19 a JUEVES 22, SEPTIEMBRE

SESIN: INTERACCIONES MOLECULARES Y VAS DE SEALIZACIN Coordinador: Francisco Carmona Aldana

Aceves, C., Anguiano, B.

ENTREGA DE PREMIOS A LOS CARTELES RECONOCIMIENTOS POR ANTIGEDAD 2:30 PM

Explanada del Instituto de Neurobiologa

10:30 11:30 AM / 12:30 - 1:30 PM

SESIN: REGULACIN DE LA CONDUCTA Y PLASTICIDAD NEURONAL Coordinador: Jimena Sandoval Arroyo

Portillo, W., Paredes, R.

Los resmenes incluidos en esta Memoria son responsabilidad de sus autores.

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SESIN: EFECTOS BIOLGICOS Y REGULACIN DE HORMONAS Y PPTIDOS Septiembre 19, 2011

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SESIN: INTERACCIONES MOLECULARES Y VAS DE SEALIZACIN Septiembre 19, 2011

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SESIN: REGULACIN DE LA CONDUCTA Y PLASTICIDAD NEURONAL Septiembre 20, 2011

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SESIN: CIRCUITOS NEURONALES EN LA FISIOLOGA Y LA PATOLOGA Septiembre 22, 2011

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Los resmenes incluidos en esta Memoria son responsabilidad de sus autores.

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Lunes 19 de Septiembre, Cartel 1 al 24

Septiembre 19, 2011

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