Deterninacion De Azucares Reductores

DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES

Fundamento

La determinacin de azucares reductores se realiza utilizando el mtodo calorimtrico de Acido Dinitrosaliclico (DNS). Este mtodo se selecciona por ser rpido y reproducible.

La concentracin se obtiene a partir de la recta obtenida al realizar la curva de calibracin, que correlaciona la Absorbancia medida a 540 nm con la concentracin de Glucosa. Los patrones son preparados con D-Glucosa de Merck.

Procedimiento de preparacin del reactivo DNS Pesar 4 g de NaOH y Disolverlos de 250 mL de agua destilada y 75 g de Tartrato de Sodio y potasio. Agregara 2,5 g de DNS, bajo calentamiento a bao de Maria. Aforara 500 mL con agua destilada. Almacenar a temperatura ambiente y proteger de la Luz

Procedimiento para la determinacin de azucares reductores

Agregar 1 mL de reactivo a 1 mL de muestra usando tubos tapa rosca. Poner en calentamiento durante 5 minutos en bao de agua Detener la reaccin en un bao con Hielo Agregar 10 mL de agua destilada y dejar en reposo 15 min. Medir la Absorbancia ptica a 540 nm contra el blanco obtenido en el procedimiento anterior (para este blanco se agrega agua destilada en lugar de muestra).

Procedimiento de Elaboracin de la recta de Absorbancia Vs concentracin de azucares reductores.

Preparacin de patrones

Tomar solucin de 1 g/l de Glucosa Aforar 10 mL, llevar a frasco de tapa rosca Tomar muestra de 8 mL y aforar a 10 mL con agua destilada Tomar Volumen de 6 mL y aforar a 10 mL con agua destilada

Tomar Volumen de 4 mL y aforar a 10 mL con agua destilada Tomar Volumen de 2 mL y aforar a 10 mL con agua destilada

Se desarrolla el procedimiento de azucares reductores, tres veces para asegurar la reproductividad de los datos.