NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-114-SSA-1994, BIENES Y SERVICIOSS. METODO PARA LA DETERMINACION DE SALMONELLA EN ALIMENTOS.

Introduccion Las bacterias del genero Salmonella son una de las bacterias patogenas mas importantes que pueden provocar enfermedades en el hombre por ingestion de alimentos contaminados. Son causantes de la salmonelosis humana, que es la infeccion bacteriana de origen alimenticio que se presenta con mayor frecuencia. Aproximadamente la tercera parte de los alimentos implicados en los brotes de salmonelosis son carnes, productos carnicos y productos derivados de las aves (huevos y ovoproductos), aunque no hay que olvidar otros tales como la leche y sus derivados. El genero Salmonella pertenece a la familia enterobacteriaceae. Son bacilos Gram-negativos y su tamaño oscila entre 1 y 3 µm de longitud entre .5 y 7 µm de diametro. Generalmente poseen flagelos peritricos que les dan movilidad. Son bacterias anaerobias facultativas que fermentan la glucosa produciendo acido y gas. (casi todas las especies de salmonella producen sulfhidrico a partir de las proteinas y son capaces de descarboxilizar algun aminoacido. Su temperatura optima de crecimiento es de unos 37°C y la aw minima es aproximadamente de .93. el intervalo de pH de crecimiento esta comprendido entre los valores de 4.1 y 9.0 multiplicandose, por lo tanto en los alimentos de baja acidez. Marco teorico Esta practica utiliza una tecnica para la deteccion de salmonella en alimentos que en nuestro caso fue pollo asado. para determinar los limites permitibles de este y si cumple con el estandar de calidad necesario.

Objetivo de la practica Aprender . Y concluir si es apto para consumo humano. Preenriquecimie nto enriquecimiento selectivo identificacion bioquimica Seleccion en medios solidos Despues de pasar los 2 primeros pasos esenciales el primero de preenriquecimiento donde utilizamos caldo lactosado y la muestra es enriquecida .conocer el metodo general para la determinacion de salmonella en pollo asado. Resultados: La tecnica para la deteccion de salmonella en alimentos se basa en un esquema general de 4 pasos basicos.

XLD: salmonella desarolla colonias rojas con centro negro por la produccion de acido sulfhidrico. Verde Brillante (VB): salmonella presenta colonias rojas o rosas que pueden ser transparentes rodeadas por medio enrojecido. Posteriormente se tomo una asada y se estrio en los medios solidos xilosa lisina desoxicolato (XLD). agar verde brillante (VB) Sulfito Bismuto y Hektoen y obtuvimos los siguientes resultados. las bacterias fermentadoras de la . Y el segundo que es de enriquecimiento selectivo. el cual es empleado con el proposito de incrementar las poblaciones de salmonella e inhibir otros microorganismos presentes en esta parte utilizamos caldo tetrationato y rappaport.en un medio nutritivo no selectivo que permite restaurar las celulas de salmonella dañadas a una condicion fisologica estable. Esta prueba la podemos considerar como negativa ya que las colonias no presentaron esas caracteristicas.

grises o negras. En algunos casos las colonias pueden aparecer completamente negras. ya que las colonias presentan caracteristicas de salmonella. En este si se puede considerar positivo ya que las colonias presentan las caracteristicas de salmonella. Este medio de cultivo fue el que utilizamos para sembrar en las bioquimicas ya que fue en el que las colonias se presentaron identicas como lo indica la norma a una muestra positiva de salmonella. Generalmente el medio circundante (halo) es café. Algunas cepas producen colonias verdes sin la formación del halo oscuro. con o sin brillo metálico.lactosa dan colonias amarillas. Se considero positivo. Agar entérico Hektoen: colonias verdes o azulverdes con o sin centro negro. tornándose posteriormente negro. Agar Sulfito de Bismuto: las colonias típicas de Salmonella pueden ser cafés. .

Prueba bioquimica Citrato Control Negativo Control Positivo + Muestra + utilizan el citrato como unica fuente de carbono. En estos cultivos llevamos a cabo una siembra de klebsiella que se presenta como positiva mostrando un crecimiento se indica d ecolor azul el medio en el pico de flauta siendo asi un medio alcalino + positiva a las pruebas de descarboxilación de lisina Imagen Lia - + .Identificacion bioquimica Este paso permite la identificacion generica de los cultivos de Salmonella y la eliminacion de cultivos sospechosos falsos.

(+)ornitina (-)indol. lo que origina que el medio tome un color amarillo debido a la formación de ácidos MIO - + (+)movilidad. Urea - + - RM (-)Adicionar al medio de cultivo de 96 h de incubación de dos a tres gotas de solución de rojo de metilo.Kliger - + + fermentación de la lactosa o la sacarosa. desarrollo de color amarillo .

Adicionar 0. Según la norma a mas del 90% o más positivos indica la presencia de salmonella. desarrollo de color rojo ladrillo.2 ml de solución de hidróxido de potasio 40%.6 ml de solución de alfa naftol.VP + Adicionar 0. .

ni la lactosa. no produce esporas. en agar Hectoen son verde azuladas con centro negro o sin el. Los centros negros se deben a la produccion de SH2. Esta bacteria pertenece a la familia Enterobacteriaceae . Las etapas criticas de la contaminacion de las pieles aviares estan en el desplumado y la evisceracion principalmente. no se desarrolla en presencia de cianuro de potasio.(1) La mayoria de los brotes de salmonella se deben a la ingestion de carnes poco. la ornitina y la lisina. mal cocinadas o contaminadas posteriormente a su preparacion como lo pudimos observar en el pollo asado. es de forma bacilar. tal vez su coccion no fue la adecuada o se contamino por contaminacion cruzada. al contacto con pollos que no habian sido cocinados aun. . descarboxila la arginina. equipo y utensilios utilzados en la preparacion y troceado de las pieles. Las colonias crecidas sobre agar sulfito bismuto positivas muestran un centro negro rodeado de un borde claro. no licua la gelatina. han servido como vehiculos en brotes de salmonelosis. esstan bordeadas de un precipitado negro con brillo metalico por la reduccion de iones de bismutoo que transforman en bismuto metalico a veces las colonicas son marrones grises o verdes. En la formula hdel medio hay dos indicadores: azul de bromotimol y fuchina acida que según actuen sirven para diferenciar las colonias lactosa positivas y las lactosa negativas. anaerobio facultativo. En este medio las sales biliares inhiben el crecimiento de la flora competitiva. La contaminacion de las pieles de pollo y otra aveces procede del tracto intestinal o del material fecal de los animales que manchan sus patas y plumas.Discusion: Salmonella es la enterobacteria mas estudiada entre patogenos aislados de alimentos debido a la alta incidencia del padecimiento que origina. Es muy corriente la contaminacion cruzada a traves de las manos de los operarios. no produce ureasa. habitualmente movil mediante flagelos peritricos aunque existen mutantes inmoviles. (3) con estas caracteristicas fue como la encontramos al momento de sembrarla en los medios selectivos y bioquimicas Muchos alimentos. no utiliza el malonato de sodio. sobre todo los de origen animal o contaminados con aguas residuales. Uno de los principales reservorios de Salmonella es la carne de aves de corral. no fermenta la sacarosa.(2) Las colonias de salmonella crecidas sobre agar XLD son rojas con centros negros debido a un cambio de pH por fermentacion de la xilosa y descarboxilacion de la lisina.

fue positivo a todas las bioquimicas caracteristicas de salmonella lo que nos indica la presencia de ella en el alimento.Conclusion Se puede concluir que el alimento analizado en nuestro caso pollo asado. . hicieron falta mas pruebas bioquimicas para determinar su especie. Por tanto se concluye que no es apto para consumo humano.

Manual de practicas de Microbiologia Basica y Microbiologia de alimentos . Del Rosario Pascual Anderson. 2005. Enfermedades de origen alimentario. Mexico.Bibliografia: 1) Ma. Editorial Diaz Santos: Mexico. 2004. P. 26-30 2) Luis Roberto Alarcón. UACJ. 41-44 . P. P. Microbiologia alimentaria metodologia analitica para alimentos y bebidas . 2005. Del Rosario Pascual Anderson. Editorial Diaz Santos: Mexico. 87-91 3) Ma.

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