1.- Cul es el fundamento de la electroforesis capilar? La electroforesis es la migracin de iones presentes en una disolucin por influencia de un campo elctrico.

La electroforesis capilar permite resoluciones sin precedentes. La electroforesis capilar se basa en los mismos principios de las tcnicas electroforeticas convencionales, pero utiliza condiciones y tecnologa distinta que nos permiten obtener una serie de ventajas al respecto, Las molculas tienen cargas similares poseen distintas relaciones carga/masa, debido a inherentes diferencias de peso molecular. En conjunto estas diferencias constituyen la base suficiente para una migracin diferencial, cuando los iones en la disolucin se someten a un campo elctrico, por la imposicin de una diferencia de potencial elctrico entre dos electrodos. Los cationes se trasladan hacia el ctodo (-) y los aniones hacia el nodo (+) a velocidades que dependen del equilibrio entre la fuerza impulsora del campo elctrico sobre los iones cargados de la muestra y las fuerzas de retardo entre las molculas que migran y el medio circundante, que son principalmente fuerzas de friccin electrosttica. Una columna tubular abierta reduce la altura de plato, y mejora la resolucin, eliminando el termino de camino mltiple (A) de la ecuacin de Van Deemter H = A+ B +Cux Ux La electroforesis capilar reduce aun mas la altura de plato, eliminando el trmino de transferencia de masa (Cux), que se debe al tiempo finito necesario para que un soluto alcance el equilibrio entre las fases mvil y estacionaria. En electroforesis capilar, no existe fase estacionaria. La nica fuente importante de ensanchamiento en condiciones ideales es la difusin longitudinal (B/ux). La electroforesis capilar de ordinario funciona con 50000-500000 platos tericos que es un orden de magnitud mejor de resolucin que en cromatografa. Junto con el hecho de que se requieren volmenes pequeos de la muestra, ha despertado una gran expectacin en diferentes campos, tal como lo demuestra el incremento de publicaciones realizadas en las reas de bioqumica, biotecnologa, industria farmacutica, anlisis clnicos. El capilar y los viales se llenan en un electrolito con capacidad amortiguadora. La muestra que esta formada por un conjunto de aniones y cationes, se introduce dentro de este sistema ocupando la zona o franja. Al someter este sistema a la afluencia de un campo elctrico, las especies inicas del electrolito y de la muestra migran hacia el electrodo. Cuando ya haya ocurrido tiempo desde el inicio de la aplicacin, del campo elctrico los componentes de la muestra migraran cada uno a su velocidad y se separaran en diferentes zonas, segn la movilidad de cada analito.

Qu tipo de factores afectan a las separaciones electroforticas? Dar ejemplos Los factores que pueden afectar la separacin de los compuestos de inters cuando se utiliza esta modalidad de CE son la composicin; la naturaleza de los compuestos con carga elctrica afecta su velocidad de migracin de varias formas: carga la velocidad de migracin aumenta cuando hay un incremento de la carga del analito, generalmente, la magnitud de la carga depende del pH, tamao la velocidad de migracin es menor en las molculas grandes debido al incremento de las fuerzas de friccin y electroestticas ejercidas por el medio circundante, la forma las molculas de tamao similar pero con diferentes formas, tales como las protenas fibrosas y las globulares, exhiben distintas caractersticas migratorias, a causa de los diferentes efectos de las fuerzas de friccin y electroestticas. La concentracin a medida que la fuerza inica del buffer aumenta, la proporcin de corriente conducida por este crece y la participacin de la muestra en dicha conduccin de corriente disminuye, con lo que se reduce la velocidad de migracin, adems, una elevada fuerza inica del buffer incremente la intensidad global de corriente y, consecuentemente la produccin de calor. PH tiene poca influencia sobre los compuestos completamente ionizados tales como las sales inorgnicas, pero en compuestos orgnicos el pH determina la magnitud de la ionizacin de los cidos orgnicos, es decir, aumenta con el pH, mientras que lo inverso ocurre con las bases orgnicas; por lo tanto, su velocidad de migracin depende del pH. En compuestos tales como los aminocidos (anfolitos), que tiene propiedades bsicas y acidas, se produce ambos efectos. La adsorcin es la causa de la formacin de una cola de la muestra, de suerte que esta se traslada con forma de un cometa en vez de una banda definida, con lo que se reduce la resolucin de la separacin, la adsorcin puede tambin disminuir la velocidad de migracin. Como varia la separacin de los analitos en funcin de los electrolitos, en cual se analizan herbicidas fenoxiacidos y fenilureas empleando dos electrolitos diferentes como borato y fosfato, el estudio de la influencia del voltaje aplicado en la separacin observndose una disminucin del tiempo de migracin al aumentar el voltaje as como un empeoramiento en la separacin. Qu tipo de sustancias pueden separarse por Electroforesis capilar? Puede separarse y analizarse por CE una gran variedad de molculas de pequeo tamao, tales como herbicidas sintticos, pesticidas y frmacos con caracteristicas basicas solubles en agua, con caractersticas basicas insolubles en agua, caracteristicas acidas solubles en agua, caracteristicas acidas solubles en agua, siempre que sean molculas cargadas o puedan derriba izarse para dar un in. Tambin separa molculas biolgicas incluyendo aminocidos, ppticos, protenas fragmentos de DNA y cidos nucleicos, numerosas pequeas molculas orgnicas, metales ionizados. Protenas, aminocidos e hidratos de carbono se han separado en tiempos mnimos por CE. En el caso de los hidratos de carbono, que sean compuestos neutros, las separaciones estn precedidas por la

formacin de complejos de borato cargados negativamente, que se forman fcilmente si se emplea un tampn borato como medio de separacin. Qu es el flujo electroosmtico? Un constituyente fundamental de la electroforesis capilar es el llamado flujo electroosmtico (FEO). Este flujo se origina por la presencia del campo elctrico en una solucin inica cuando entra en contacto con un electrolito con una superficie slida cargada. Los iones cargados en el sistema bajo la influencia del voltaje aplicado son desplazados hacia el ctodo de acuerdo a su carga y arrastra disolventes con ellos dada su solvatacin originando as el denominado as flujo electroosmtico. Una gran ventaja de este flujo es que permite efectuar separaciones por electroforesis deteccin de aniones y cationes de manera simultanea, en ausencia del flujo solo migrarian los aniones o los cationes hacia el detector.
Electroforesis capilar

Fenmenos electrocinticos: ELECTROOSMSIS Fen electrocin ticos:

Al aplicar campo elctrico El resto de las cargas (+) se mueven hacia el polo (-) Se genera un flujo de tampn que arrastra todo lo que hay en el interior del capilar

Bibliografa Flujo electroosmtico Rubison, Qumica analtica contempornea, Editorial Pearson pp Movilidad electroosmtica eo 471-481 Castillo, Revilla, Lopez,ELECTROSMOSIS Rivera, Fundamentos de electroforesis capilar Editorial UNAM, Mxico, D.F. pp 13-61, 101-128, 139-143. Harris, Daniel, Anlisis qumico cuantitativo Editorial Revert, Mxico. 1999, Ed 2, pp746-761.