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Informe No 1. Microscopio

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EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO1 GUTIERREZ, Sebastián (273875) – PRIETO, Stefania (273891) – SANTODOMINGO, Olgher (132897) – ZULUAGA, Diego

(273919)

OBJETIVOS Estudiar los principios ópticos y propiedades del microscopio. Conocer y ejercitar el correcto manejo del microscopio. Determinar el diámetro del campo Óptico. Microscopio Compuesto El microscopio compuesto esta constituido por tres sistemas: uno mecánico otro de iluminación y uno que llamamos óptico. El sistema mecánico son todos aquellos mecanismos que hacen del microscopio una herramienta funcional, permite mover todas las

partes del microscopio: el cabezote, la platina, los objetivos, y el portaobjetos. El sistema de iluminación suministra la luz que hace visibles las muestras. El sistema óptico, son todas las lentes que se encuentran el microscopio: sus partes principales son: el Objetivo, el Ocular y el condensador. La figura 11 muestra las partes fundamentales de un microscopio. Ocular: Tiene como fin realizar la magnificación de la imagen aumentada por el objetivo, lleva los rayos de luz al observador, se puede girar para lograr enfocar las imágenes. Objetivo: Lente situada muy próxima al objeto de observación que llamamos simplemente objeto. Amplifica los rayos que atraviesan el objeto y proyecta una imagen aérea en el tubo del microscopio que después es amplificada por el ocular. Porta objetos: En el se fijan las laminas de vidrio en las que se deposita la muestra de interés.

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Imagen tomada y modificada de http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_ %C3%B3ptico

.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO2 GUTIERREZ. Sebastián (273875) – PRIETO. Diego (273919) Condensador: Lentes que concentran los rayos de luz provenientes de la fuente. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación. Patina: Plataforma metálica horizontal entre la fuente de luz y la muestra. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. consta de dos regletas micrométricas (una horizontal sobre el plano del objeto y otra vertical) que permiten realizar mediciones. asciende o desciende el tubo del microscopio. deslizándose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Fuente de Luz: Es la que suministra la luz al condensador. cuenta con un tornillo micrométrico que permite acercar o alejar el objetivo a la muestra hasta lograr la distancia focal. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0. El tornillo macrométrico: girando este tornillo. Principios Físicos y funcionamiento del microscopio . que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos. Brazo: Estructura que junto con el soporte construyen el microscopio. Tambor: En microscopio con más de un objetivo se implementa un tambor rotativo que permite cambiar de un objetivo a otro. El tornillo micrométrico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina. Olgher (132897) – ZULUAGA. en microscopios ópticos puede ser un espejo o una bombilla incandescente. se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación.001 mm.

El ocular funciona prácticamente como una lupa.” (La presencia de esta imagen podría visualizarse si se retirara el ocular y se instalara una pequeña pantalla translúcida en el plano de esta imagen aérea.). debido al límite del poder de resolución. Esta imagen primaria se forma en el aire y por lo tanto se denomina "imagen aérea. la capacidad del microscopio de visualizar los detalles más finos del objeto. Diego (273919) La Figura 22 muestra cómo funciona el sistema de lentes de un microscopio para producir una imagen aumentada de una muestra diminuta. Sebastián (273875) – PRIETO. y los espejos y prismas del interior del tubo binocular. Una vez que el objeto se ha aumentado hasta el punto en donde la imagen se vuelve borrosa. cerca del extremo superior del tubo del microscopio. Sin embargo.com/introduccion/Teoria_de_la_Micro scopia . indicando que se trata de aumentos más allá del límite útil en cuanto a la reproducción fiel de los detalles finos. En la figura 1. En la realidad. se ve el esquema del microscopio tradicional. Con la finalidad de simplificar el dibujo 3 aquí sólo se ve el sistema de lentes del microscopio. el hecho de aumentar el objeto aún más producirá. En realidad no hay un límite máximo de aumentos en un microscopio. Este tipo de incremento inútil del aumento se llama "aumentos vacíos”. con la diferencia principal de que aumenta una imagen aérea en vez de un objeto real. Más adelante veremos el sistema completo. a la derecha. situada bajo la platina. La limitación fundamental no consiste en el aumento sino en el poder de resolución. pero también más borrosa y sin visualización de más detalles. una imagen de tamaño más grande. en vez de proyectar la imagen en una pantalla.biooptic. inclusive el sistema de iluminación. proyecta la imagen primaria aumentada del objeto hacia arriba. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. La lente condensadora. Olgher (132897) – ZULUAGA.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO3 GUTIERREZ. La función del objetivo es comparable a la de una pequeña lente de proyección. no utilizamos una pantalla sino que visualizamos esta imagen a través 2 del ocular. o sea. El Poder de aumento A Es el que determina el número de veces en el que se magnifica la imagen esta dado por la relación entre el tamaño real del objeto y el Imagen modificada de http://www. sólo existe un límite en cuanto a los aumentos útiles. sin embargo.

biooptic. El poder de resolución esta determinado por la ecuación [2]. depende del diseño del objetivo.pdf . El objetivo que recibe un cono de luz mayor. Esto se aprecia mirando las imágenes comparativas.A del objetivo. La figura 33 nos muestra la relación entre el poder de resolución y la apertura numérica. Un objetivo capaz de aprovechar un gran cono angular de luz procedente de la muestra. hay que añadir más profundidad.com/introduccion/Teoria_de_la_Microsc opia. de esta manera un aumento de 100 diámetros se representa por 100X. A= TIm agen TObjeto [1] detalles más finos. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. P. Diego (273919) tamaño de la imagen esta dado por la ecuación [1]. Este margen se llama profundidad de foco del microscopio y varía considerablemente en función de la N. en el cual se visualizan nítidamente otros objetos.R = λ [2] 2 N . Olgher (132897) – ZULUAGA. hay un margen finito por encima y por debajo de este objeto. y nos indica que la imagen esta aumentada 100 del tamaño del objeto.A El poder de resolución El poder de resolución de un microscopio por lo general Poder de definición En el microscopio nos permite formar imágenes con contornos claros y definidos. Poder de profundidad Al enfocar un objeto por medio de un microscopio. 3 Imagen modificada de http://www. ya que el ojo es capaz de realizar un cierto grado de acomodación según la ecuación [4].EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO4 GUTIERREZ. Sebastián (273875) – PRIETO. según la ecuación [3]. tendrá mejor poder de resolución que un objetivo limitado a un cono de luz más pequeño. figura 3 proporciona una imagen que reproduce mucho mejor los ( N − ( NA) ) d= 2 2 ( NA) 2 [3] Para la visualización del objeto.

se dispone el tambor en el de menor aumento (x10). En esta práctica determinaremos cual es la distancia de trabajo o distancia frontal con el fin de al trabajar predeterminar la distancia de trabajo y así no es necesario mover la cremallera evitando desgastes innecesarios del tornillo micrométrico y la cremallera. • Si usa liquido de inmersión debe limpiarlo antes de guardar el microscopio. al realizar este procedimiento se observa que la imagen queda enfocada para todos los objetivos. después se puede cambiar a los demás objetivo solo resta enfocar finamente. • Al guardar el microscopio debe enrollarse el cable en el tubo y . Olgher (132897) – ZULUAGA. Desplazar el objetivo a una distancia aproximada de 2 cm de la muestra. Diego (273919) d′=d+ 250 [4] M2 no en la parte inferior de la platina para evitar desajustes en el diafragma y condensador. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. • Regule la menor luminosidad cuando deje de hacer observaciones por un periodo largo.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO5 GUTIERREZ. ya que la humedad puede causar fricción y esta puede dañar el mecanismo del carro. Enfoque visual a menor aumento (x10) Después de poner la intensidad de la luz en bajo encender el aparato. una tomando el brazo y la otra sosteniendo la base del estático y derecho. • Use papel para lentes en caso de ser necesario limpiarlos. así. en el caso de los microscopio del laboratorio se trata de microscopios parafocales y esto es fácil de comprobar al fijar la preparación y cambiar de objetivo. es recomendado poner la muestra en la platina y mover el tornillo macrométrico hasta lograr enfocar la muestra. • El portaobjetos no debe estar húmedo por la parte inferior. Sebastián (273875) – PRIETO. condición que contiene los microscopios de este tipo. observando por el ocular se acerca el objetivo Normas y Recomendaciones generales para el buen uso del Microscopio • Transporte el Microscopio con ambas manos. • Descargue suavemente el microscopio sobre la mesa de trabajo. al encender o apagar el microscopio verifique que la intensidad lumínica se encuentra en el mínimo. • Haga inventario de las partes del microscopio e informe cualquier irregularidad. En Microscopios parafocales basta enfocar la muestra con el objetivo de menor aumento X10 y todos los demás objetivos pueden ser usados haciendo una pequeña corrección con el tornillo micrométrico.

Olgher (132897) – ZULUAGA. Para los diferentes objetivos obtuvimos las distancias de campo consignadas en la tabla 1. Por medio de combinaciones inteligentes de formas de lentes y tipos de cristal se consigue contrarrestar los defectos de una superficie aplicando defectos iguales u opuestos en otras superficies de forma que el resultado final se aproxime a la Imagen. Aberración esférica Término aplicado para describir el hecho de que los rayos procedentes de un punto y que atraviesan la parte más externa de la lente tienen distinto foco que los que pasan por el centro de la misma. Stefania (273891) – SANTODOMINGO.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO6 GUTIERREZ. Aberración en la imagen del los lentes ópticos El sistema de lentes no es perfecto. Determinación del campo óptico Φ diámetro Tabla 1. y una de las características de las superficies esféricas es que no forman imágenes perfectas. Los sistemas de lentes están compuestos por lentes individuales con superficies esféricas. Sebastián (273875) – PRIETO. Diego (273919) lentamente hacia la platina hasta lograr enfoque. que se consigue girando el ocular. Campo de trabajo para Microscopio en el laboratorio. Las aberraciones principales de una imagen formada por una lente esférica son las siguientes: l. Todos los sistemas de lentes tienen un número menor o mayor de aberraciones según la complejidad del diseño. comparando la con la figura 6 que nos muestra la imagen distorsionada que debido a la aberración esférica algunos rayos de luz que deberían pasar por el Al conseguir claramente la imagen medimos la distancia de trabajo como se muestra en la figura 4. Para superar este problema se realizan combinaciones de lentes convergentes y divergentes. Objetiv o x4 x10 x40 Campo de Trabajo 20 mm 8 mm 1 mm . La Figura 5 muestra la imagen de un objeto puntiforme. En el momento en el que se logra enfocar la preparación debe graduarse los lentes del ocular para lograr las distancias interpupilares del observador.

II. Diego (273919) centro han sido dispersados hacia fuera. Olgher (132897) – ZULUAGA. Esta difusión desfavorable causa una pérdida de contraste en las imágenes. Imagen distorsionada por aberración esférica. Figura 6. En la figura 84 se puede apreciar el grave deterioro que sufre la imagen de un objeto puntiforme debido a la aberración de coma. Figura 7. el resultado es un deterioro general de la imagen desplazada del eje. una imagen astigmática nunca puede enfocarse de modo que resulte una imagen nítida.pdf .Imagen afectada por astigmatismo III. Astigmatismo Se produce cuando objeto puntiforme situado fuera el eje se visualiza como dos imágenes lineales separadas. Debido a este defecto. que son paralelos o perpendiculares al radio del campo. Imagen de objeto puntiforme. a excepción de los detalles 4 Imagen tomada de http://www. la imagen de un objeto puntiforme aparece en forma de cometa. Sebastián (273875) – PRIETO. Si en el centro del campo tenemos aberración de coma. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. Figura 5. sin embargo. a la estructura de aro.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO7 GUTIERREZ. las cuales se encuentran a diferentes distancias de la superficie de la lente. será un claro ejemplo de que el objetivo está dañado. Coma Se dice que una lente está afectada por coma cuando diferentes zonas circulares concéntricas de la superficie de la lente proporcionan aumentos diferentes a una imagen desplazada del eje.biooptic. La figura 7 nos muestra esta aberración en una imagen puntiforme.com/introduccion/Teoria_de_la_Microsc opia.

Stefania (273891) – SANTODOMINGO. . Diego (273919) Figura 9. Este defecto se controla combinando adecuadamente los diferentes tipos de cristal. esta aberración produce una imagen curvada de un objeto plano. Sebastián (273875) – PRIETO. Figura 8. y viceversa. Figura 9. aquí la lente sufre de curvatura del campo. cuando la parte central de la imagen está claramente enfocada los límites del campo parecen quedar fuera del foco. IV. Curvatura de campo. V. Esto se debe a que el centro y los límites de la imagen se enfocan a distancias distintas. Curvatura del campo Como su nombre indica. sin embargo. Olgher (132897) – ZULUAGA. Fíjese en las líneas curvadas cerca del contorno. Distorsión en el sistema de lentes VI. Como consecuencia. Distorsión en el sistema de lentes Provoca que las líneas rectas aparezcan curvadas.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO8 GUTIERREZ. Imagen afectada por coma. La figura 8 muestra la imagen del mismo rayado cruzado que se ve en figura 9. Aberración cromática Se debe a que la distancia focal de la lente varía con la longitud de onda.

SALISBURY. implementó la luz polarizada para la observación discriminada de sustancias químicas el los objetos observados. Para 1908 se implementa en el microscopio la luz fluorescente por Köhler y Sicdentopf. Descubrimientos científicos implantados en los microscopios por W. y Zernike diseña en 1932 el Microscopio de contraste de fases. que pigmentadas y expuestas a alguna frecuencia lumínica polarizada permitían determinar composición de las muestras. De las primeras investigaciones realizadas con el microscopio se resaltan los descubrimientos realizados por Robert Hooke quien mediante observaciones de un corcho plantea una teoría de células. que fue perfeccionado por Kepler en 1611 que lo establece como un microscopio compuesto. Sebastián (273875) – PRIETO. Madrid 2000. Gracias a su uso se logra en 1838 observar los núcleos celulares. BIBLIOGRAFIA NASON. en 1674 mediante el perfeccionamiento del microscopio compuesto Leeuwenhock logra observar los protozoarios. Ed. A. Nicol en el año de 1828. 2000.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO9 GUTIERREZ. muy poco quedo por hacer después de que Ernest Ruska Y Max Knoll en 1932 desarrollan el microscopio Electrónico que mediante herramientas computacionales mostraron los rincones mas íntimos de las células y en la actualidad permiten observaciones nanométricas. diferenciándose un gran número de células y tejidos animales cuando Retzius en 1881 se asuma a un con fines investigativos. Olgher (132897) – ZULUAGA. se identifica la célula como unidad estructural y funcional en animales y plantas. Quekett publica un tratado sobre el uso del microscopio aun usado. Diego (273919) VII. y un tornillo fino. En el año de 1608 Zacharrias Cansen desarrolla el microscopio con dos lentes convexas. Aberración cromática de aumento Se produce cuando los rayos de luz de un determinado color se proyectan con más aumentos que los rayos de luz de otro color. DF. “Fisiología de las plantas”. . Reseña Histórica Se estima que el primer microscopio fue desarrollado por Anton van Leeuwenhoek hacia 1600. Ed. rápidamente aparecieron los Microscopios de interferencia quien los presenta al mundo en 1930. Paraninfo. F. México. “Biología”. consistía en una pequeñamente convexa que funcionaba como una lupa. En 1849 J. Stefania (273891) – SANTODOMINGO. Limusa.

educacion.ph . Sebastián (273875) – PRIETO.natureduca.wikipedia. Olgher (132897) – ZULUAGA.com/botan_o rgan_tallo1.html http://www.es/w3/eos /MaterialesEducativos/primaria/con ocimiento/reinovegetal/temas/temas framfoto. Stefania (273891) – SANTODOMINGO.EL MICROSCOPIO PRINCIPIOS OPTICOS Y MANEJO10 GUTIERREZ.ite.org/wiki/Microsc opio http://www. Diego (273919) [En línea] http://es.

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