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Reacción de Biuret

Reacción de Biuret

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Reacción de Biuret Los péptidos y proteínas producen una reacción coloreada muy usada para la valoración de los mismos

, llamada reacción del Biuret. Las proteínas por sus uniones peptídicas reaccionan con los iones cúpricos del reactivo en medio alcalino formando un complejo de color violeta. Se necesitan 2 ó más uniones peptídicas para que se forme el complejo coloreado. Esta prueba sirve para la identificación de tripéptidos en adelante. (Wharton 1972) Un color violeta resulta cuando los iones cúpricos en medio alcalino se complejan con los electrones no saturados de los átomos de nitrógeno y oxígeno de los enlaces de todas las proteínas. La cantidad de color producido es proporcional a la concentración de proteínas y es medida espectrofotométricamente a 550 nm. (Wharton 1972)

En soluciones alcalinas Cu+2 se complejan con las uniones de péptidos de proteínas resultando en la formación de un color morado. La intensidad del color es proporcional a la concentración de proteínas. Este método es generalmente aplicable porque el número de enlaces peptídicos por unidad de peso para todas las proteínas es casi el mismo. Sin embargo, el método es un poco insensible siendo el límite menor de 0.25mg de proteínas. Los buffers tris así como otras sustancias encontradas en extractos de tejidos crudos interfieren con esta prueba. (Wharton 1972)

Las sustancias que dan el color violeta tienen dos grupos ²CONH2 unidos directamente o por un carbono o nitrógeno. Los compuestos que contienen ² CH2NH2, -C(NH)NH2 Y ²CSNH2 en lugar de los grupos ²CONHH2. Las estructuras peptídicas se encuentran en proteínas y sus derivados contienen enlaces peptídicos también dan positivo para la prueba de Buiret. (Stawnton, 1967)

H -CO-NH-C-CO-NH-

la histidina da positivo. Los dipéptidos dan pruebas negativas. La presencia de sulfato de magnesio y muchas sales de amonio interfieren con la prueba. 1967) . (Stawnton. Este efecto puede disminuirse con la adición de base.R De los aminoácidos. La gelatina da un color casi azul. Las proteínas dan color morado o violeta mientras que las proteosas o peptonas dan un color rosado y los péptidos dan un color rosado claro.

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