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Mtodos de estudio de los virus y los Virus Bacterianos. Integrantes: Katerin Meza Juliana Mier Nataly Deluquez Lic.

: Hermides Nieto Grado 10B

Esquema del Tema


1. Cultivo de virus. 2. Mtodos de deteccin y cuantificacin de virus. y Mtodos fisicoqumicos: Observacin de virus al microscopio electrnico. Ensayos de hemaglutinacin. Estudios de infectividad. Mtodos inmunolgicos para el estudio de virus. Deteccin de c. nucleicos de virus.
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Cultivo de los Virus


Los virus se han de cultivar sobre clulas adecuadas. Depende del virus del que tratemos (si son de plantas, bacterias, animales,...). Los ms fciles de cultivar son los virus de bacterias. Se cultivan sobre cultivos de bacterias en medio lquido o slido. y Los virus animales, se pueden cultivar de diferentes formas: En animales enteros. As se haca en el comienzo de la virologa. En la actualidad se usa poco. En huevos embrionados de gallina. En huevos fecundados despus de 6-8 das a partir de la puesta. Tambin pueden ser de otras aves. Los virus se inyectan en el interior del huevo con una jeringa y dependiendo del tipo de virus se deben inyectar en una regin determinada. En cultivos de clulas animales. Es la forma ms usada. Pueden ser de 3 tipos fundamentalmente:
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Cepa Celular
Estas cepas celulares sirven para producir ms cultivos. Se pueden subcultivar (cultivar varias veces). Entonces, una cepa celular es un cultivo de clulas animales obtenido a partir de un cultivo primario y cuyas clulas pueden ser subcultivadas varias veces. Las cepas celulares con el tiempo degeneran, no pudiendo volver a subcultivarse. y Se pueden obtener cultivos primarios y cepas celulares a partir de diferentes tejidos. Para virus humanos, se suelen usar tejidos de hombre, pero tambin de monos (africanos) y tambin de embriones (de monos y humanos

Mtodos de deteccin y cuantificacin de virus.


Se basan en detectar a los virus al microscopio electrnico, como cuerpos fsicos que son, o bien, se basan en una propiedad qumicque tienen algunos de estos virus, que es la capacidad de aglutinar glbulos rojos (ensayos de hemaglutinacin). y a.1. Observacin de virus al microscopio ptico. Se pueden aplicar numerosas tcnicas de microscopa electrnica para observar virus. Pero en los anlisis de rutina, para detectar y cuantificar virus slo se emplean los mtodos ms sencillos. Los ms complejos (inclusin en resinas, cortes), slo se usan en investigacin.
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incin negativa. Consiste en mezclar una suspensin donde suponemos que estn los virus, con una sal densa a los electrones, p. ej. acetato de uracilo, fosfotungstato potsico (c. fosfotungstico). Esta mezcla se deposita en una rejilla de microscopa electrnica y se observa al microscopio electrnico de transmisin. Con esta tcnica, los virus no se tien en realidad, sino que lo que se tie es el medio. Esta es la ms usada porque es la ms sencilla. Sombreado. Consiste en depositar a los virus sobre una rejilla y hacer incidir sobre la misma un metal, normalmente platino, con un cierto ngulo, respecto a la rejilla. El platino, cubre a los virus, pero queda en un lado una sombra de color claro (el platino queda oscuro). Entonces al observar la rejilla, se vern los virus oscuros y la sombra clara. Entonces se observa una imagen de aspecto tridimensional.
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Mediante estas dos tcnicas, se puede demostrar la presencia de virus en una muestra, pero tambin se pueden contar, por un procedimientos especial.

Ensayo de Hamaglutinacin. Hamaglutinacin.


Se basan en la capacidad que tienen diferentes virus de unirse a glbulos rojos, incluso aunque no los infecten. Un virus es capaz de unir entre s a 2 glbulos rojos. Pero si hay bastantes virus en una muestra, se forman unos agregados de virus y glbulos rojos que sedimentan con facilidad, y se produce la aglutinacin de glbulos rojos o hemaglutinacin. y Si en una muestra no hay virus, o incluso si hay pocos, no se formarn estos agregados. En una muestra, si no hay virus o hay pocos, no se produce hemaglutinacin, se formarn dmeros. y En una hemaglutinacin se pueden detectar virus y cuantificarlos (virus hemaglutinantes). Tenemos una muestra que queremos saber si existen virus que aglutinen glbulos rojos. En la muestra Dnde hay virus? Se aaden los glbulos rojos y se dejan incubar. Si no hay virus o hay muy pocos, los glbulos rojos tambin acaban sedimentando, pero quedan en el fondo del tubo formando un sedimento pequeo en el fondo del tubo en el centro y bien delimitado.
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Virus Bacterianos
Clasificacin de los virus bacterianos. y A los virus bacterianos se les suele llamar bacterifagos o fagos. Parasitan tanto a bacterias y arqueas. La mayora de los virus bacterianos tiene DNA como genoma. Este DNA normalmente es de cadena doble (aunque tambin hay de cadena sencilla). Slo existe unos pocos virus con RNA que pueden ser tanto de cadena sencilla como doble. y La mayora de los fagos, son virus desnudos (sin envoltura), aunque algunos s la poseen.
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Multiplicacin de los bacterifagos. y Existe gran diversidad de estrategias de multiplicacin de los fagos, pero un esquema general podra ser este: y Ahora vamos a centrarnos en dos tipos de ciclos de multiplicacin, que son los ms conocidos: y A. Ciclo ltico. Tomamos como ejemplo a los virus llamados Tpar (T2, T4, T6) que pertenecen a la familia Myoviridae, que son virus desnudos, con DNA de cadena doble y parsitos de E. Coli. Muchos virus bacterianos tienen un ciclo de multiplicacin al que se denomina ltico porque los virus se multiplican en el interior de la bacteria ay salen de la misma matando o lisando a la clula. A ste tipo de virus con este ciclo, se les denomina virus virulentos. Vamos a tomar como ejemplo al virus T4como caracterstico del ciclo ltico.
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