Informe de bioqumica Cuantificacin de hemoglobina

Presentado por: Roberth Tehern medina Armando Quintero Mara Alejandra Prez

Al docente: Jose cantillo

Corporacin universitaria Rafael Nez

Facultad Medicina

Cartagena bolvar Ao 2011

INTRODUCCION La hemoglobina es el componente principal de los glbulos rojos, qumicamente es una proteina conjugada propia del conjunto de las hemoproteinas; tiene como funcin principal transportar oxigeno de los pulmones hacia los tejidos. Una molcula de hemoglobina consta de dos pares de cadena de polipeptidos, denominados en conjunto globina; cuatro grupos prostticos denominados hem o hemo, los cuales contienen cada uno un tomo de hierro ferroso (Fe2+) cada grupo hem est unido a una cadena de polipeptidica en un sitio determinado de ella. Una molcula hemoglobina tiene la capacidad de combinarse con cuatro molculas de oxigeno (O2), por medio del hierro ferroso de cada grupo hem presente en las cadenas (cada hierro una a un O2). La hemoglobina no asociada al oxigeno se denomina hemoglobina reducida (Hb); cuando cada grupo hem se asocia a una molcula de oxgeno, se forma la oxihemoglobina (HbO2); tanto en la Hb; como en la HbO2 el hierro del grupo hem permanece como hierro ferroso; cuando el hierro se oxida a hierro frrico (Fe3+) se forma la metahemoglobina o hemiglobina (Hi) y la molcula pierde la capacidad de combinarse con el oxgeno. La anemia es la alteracin ms corriente relacionada con la hemoglobina, consiste en una disminucin de su concentracin por debajo de lo normal, se presenta como unas complicaciones de otras enfermedades. La hemoglobina tambin puede verse aumentada en ciertos trastornos por una superproduccin de glbulos rojos, caso que recibe el nombre de policitemia. Junto con otros parmetros hematolgicos la determinacin de hemoglobina se utiliza para evaluar estados anmicos, perdidas de sangre, hemolisis y policitemina; adems que ayuda al diagnstico de enfermedades relacionadas con los casos mencionados.

OBJETIVOS y y Permitir aplicar el mtodo de la cianometahemoglobina para aprender a cuantificar hemoglobina en sangre humana Ofrecer un acercamiento al trabajo hematolgico en laboratorio, para desarrollar destrezas en el mismo.

FUNDAMENTO TEORICO La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del transporte de oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos.La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de produccin de energa, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire. La hemoglobina reacciona con el reactivo de drabkin, el cual contiene ferrocianuro de potasio (K3Fe (CN), cianuro de potasio (KCN) y bicarbonato de sodio (NaHC3) La mayora de las formas de homoglobina que se encuentran en la sangre son convertidas en metahemoglobina (hemioglobina, Hi) por accin del K3Fe (CN), posteriormente la Hi recciona con el KCN, que proporciona los iones cianuro (CN), para formar cianometahemoglobina (HiCN), el cual es un compuesto coloreado que tiene una absorbancia mxima a una longitus de onda de 540nm

Los resultados normales varan, pero en general son:

y y

Hombre: de 13.8 a 17.2 g/dL Mujer: de 12.1 a 15.1 g/dL

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL y y y Extraer 3 ml de sangre: tratar con anticoagulante (1 ml de EDTA al 1%) agite para homogenizar. Coloque 5 ml de reactivo de drabkin en un tubo de ensayo. Con una pipeta de hemoglobina, vierta en el tubo que contiene drabkin, 20ul (0,02 ml) de sangre bien homogenizada; para asegurar la completa adicin de la sangra, limpie la parte exterior de la pipeta con el papel absorbente, luego enjuguela por dentro con la mezcla recin formada, por lo menos 3 veces. Agite y deje reposar por 10 minutos Prepara un blanco y patrn y lea en el espectrofotmetro la absorbancia a 540 nm.

y y

Cm= Am por Cp entre Ap Cm= concentracin de la muestra Cp= concentracin del patrn Am= absorbancia de la muestra Ap= absorbancia del patrn

PREGUNTAS 1. Con la formula anterior se relizan los clculos de la concentracin de homoglobina en la muestra. Compare el resultado obtenido con los valores normales correspondientes.

Am= 0,307 Cp= 15 gr/dl Ap=0,441 Cm= 0,307 por 15 gr/dl entre 0,441= 10,44 gr/dl Debido a que los valores normales son 13.8 17.2 mg/dl y ser comparados con el resultado del clculo realizado podemos concluir que la hemoglobina en esta persona est en un nivel bajo.