BIOENERGTICA Y CADENA RESPIRATORIA Los seres vivos necesitan energa La energa es la capacidad de realizar un trabajo.

Las clulas convierten energa potencial, normalmente en forma de enlaces covalentes carbono-carbono o enlaces fosfoanhidro del ATP, en la energa necesaria para la divisin celular, crecimiento, biosntesis y transporte activo a travs de membrana, entre otras cosas. El sol es la fuente ltima de energa para la vida de todos los organismos ya que la luz es utilizada por los organismos fotosintticos para convertir el carbono inorgnico del CO2 en carbono orgnico de los glcidos, a partir de los que sintetizan todas sus molculas. Los animales utilizan nutrientes vegetales o animales para sintetizar sus propias molculas. Procesos acoplados y energa Las clulas obtienen la energa a partir de su entorno y sintetizan los componentes de sus macromolculas mediante un conjunto ordenado de reacciones qumicas conocidas como metabolismo. En el metabolismo celular ocurren simultneamente procesos degradativos (catablicos) y de sntesis (anablicos) donde la energa liberada en unos es utilizada en otros. (Fig. 1).

Figura 1. Esquema que muestra la relacin energtica entre el catabolismo y el anabolismo. Las reacciones que liberan energa se denominan exergnicas y aquellas reacciones que necesitan energa para que ocurran son endergnicas. Las reacciones exergnicas son espontneas ya que ocurren con disminucin de la energa libre G (G productos G reactivos < 0), de acuerdo a las leyes de la termodinmica.

Una reaccin A B + C G = + 5 Kcal/mol (endergnica), es termodinmicamente desfavorable y para que ocurra debe estar acoplada a una termodinmicamente favorable: B D G = - 8 Kcal/mol

En ausencia de esta segunda reaccin, la reaccin endergnica no se producira. Como los cambios de energa libre son aditivos, la conversin de A hasta C y D tiene un G negativo, es decir, una reaccin termodinmicamente desfavorable puede ser dirigida por una termodinmicamente favorable acoplada a ella. A B A B + C G = + 5 Kcal/mol D G = - 8 Kcal/mol C + D G = - 3 Kcal/mol

En las clulas, a menudo las reacciones energticamente desfavorables estn acopladas a la hidrlisis del ATP, reaccin con un G = - 7,5 Kcal/mol por lo que la reaccin global tiene G negativo. ATP + H2O ADP + Pi + energa

El sistema ATP-ADP es muy importante en el ciclo de la energa celular (Fig. 2). El ADP puede aceptar un fosfato con consumo de energa para convertirse en ATP y este proceso se conoce como FOSFORILACIN.

ADP + Pi + energa

ATP

Movimiento Biosntesis Transporte activo

ATP ADP

G= -7,5 kcal G= 7,5 kcal

Fotosntesis Oxidacin de macromolculas

Figura 2. Ciclo ATP ADP y algunos procesos celulares a los que se asocia.

Panormica del metabolismo En la figura 3 se presenta un mapa metablico simplificado, donde se muestra tres niveles de complejidad tanto para las vas catablicas como para las anablicas. En el nivel 1 del catabolismo las macromolculas se hidrolizan y rinden monmeros. En el nivel 2 confluyen una serie de metabolitos comunes a todas las vas metablicas y en el ltimo la degradacin total culmina con la formacin de molculas sencillas como CO2 y H2O.

Figura 3. Rutas centrales del metabolismo energtico.

Si una molcula glucdica, por ejemplo un polisacrido, fuera oxidada a CO2 y agua en un solo paso, se liberara una cantidad de energa varias veces mayor a la que una molcula transportadora puede tomar y, por lo tanto, se perdera energa en forma de calor con el consiguiente perjuicio para la clula. Por el contrario, las clulas utilizan enzimas para llevar a cabo la oxidacin en una serie de reacciones donde se liberan pequeas cantidades de energa que son almacenadas en enlaces qumicos de molculas transportadoras. En

algunas de esas reacciones se transporta energa como ATP y en otras, como coenzimas reducidas, NADH.H y FADH2 (Figura 4).

Figura 4. Catabolismo de glcidos.

El NADH y el FADH2 son molculas ricas en energa porque contienen un par de electrones con elevado potencial de transferencia. El NAD+ es el cofactor de la mayora de las enzimas deshidrogenasas que actan en las rutas oxidativas de los nutrientes.

Oxidaciones y generacin de energa En las reacciones bioqumicas los electrones liberados por una molcula se transfieren a otra; as que si una molcula se oxida (pierde electrones), hay otra que se reduce (gana electrones). A veces junto a los electrones se transfieren protones y por lo tanto la reduccin es una ganancia de hidrgenos y la oxidacin una prdida de los mismos (Fig. 5).

Figura 5. El par redox NAD+ - NADH en la transferencia de electrones. A los pares de compuestos tales como el NADH y NAD+ se les denomina pares redox ya que el NADH es convertido en NAD+ por la prdida de electrones en la reaccin. NADH NAD+ + H+ +2e-

El NADH es un dador fuerte de electrones porque sus electrones estn unidos por un enlace de alta energa y as es favorable que pierda sus electrones. Por el contrario es difcil formar un enlace de alta energa y el NAD+ es un aceptor de electrones dbil. La tendencia a transferir electrones de un par redox se puede medir experimentalmente formando un circuito elctrico con una mezcla equimolar del par redox con un segundo par que se selecciona como estndar (Eo=0,00 V). De esa forma se puede medir la diferencia de voltaje entre ellos que se denomina potencial redox E.
Par redox estandar:

H2

2H+ + 2 e- (Eo=0,00 V)

Los sistemas que tienen un potencial negativo respecto al H2 son reductores, tienen baja afinidad electrnica. Los electrones se desplazarn espontneamente desde un par redox que tiene baja afinidad por los electrones como el del NADH/ NAD+ hacia un par redox como el O2/H2O que tiene alto potencial redox y, por consiguiente, una elevada afinidad por los electrones (Tabla 1).

Transporte de electrones La mayor parte de la energa libre que se produce durante la oxidacin de glcidos, lpidos y protenas es retenida en las coenzimas reducidas NADH y FADH2. Durante la respiracin se liberan electrones del NADH y el FADH2, que al final son transferidos al O2 para formar H2O, segn las reacciones generales: NADH + H+ + O2 FADH2 + O2 NAD+ + H2O FAD + H2O

Estas reacciones son muy exergnicas y la energa liberada en las mismas es suficiente para impulsar la sntesis de varias molculas de ATP a partir de ADP y Pi. En la mitocondria se maximiza la produccin de ATP mediante la transferencia de electrones del NADH y del FADH2 a travs de una serie de transportadores electrnicos, todos menos uno, componentes integrales de la membrana interna. La secuencia de reacciones se denomina cadena transportadora de electrones o cadena respiratoria y el oxgeno es el aceptor final de electrones. La mayora de los transportadores de electrones mitocondriales tienen grupos prostticos como hemo, centros Fe-S y cobre y estn unidos a cuatro complejos multiproteicos. Por ejemplo los citocromos son protenas con un grupo hemo y el transporte de electrones se produce por la oxidacin y reduccin del tomo de Fe en el centro del hemo: Fe3+ox + eFe2+red

Los cuatro complejos enzimticos responsables del transporte de los electrones son : 1) complejo de la NADH deshidrogenasa, 2)complejo de la succinato deshidrogenasa, 3) complejo citrocromo b-c (citocromo c coenzima Q oxidoreductasa) y 4) complejo de la citocromo oxidasa. Tambin forman parte de la cadena de transporte, la coenzima Q y el citocromo c (Fig. 6). La coenzima Q o ubiquinona es el nico transportador de electrones que no est unido a una protena y es soluble en fosfolpidos por lo que se difunde libremente en la membrana mitocondrial interna. Cada uno de los transportadores de electrones, ordenados segn su potencial redox (Tabla 1), desde los de menor afinidad a mayor afinidad por los electrones, se reduce al ganar electrones del transportador que le precede en la cadena y a continuacin se oxida porque dona sus electrones al transportador siguiente (Fig. 6). En cada transferencia sucesiva los electrones pierden energa libre que se emplea para generar un gradiente de protones. Tabla 1. Potenciales redox estndar de hemireacciones redox Hemireaccin E (V) NAD+ + H+ + 2eNADH + H+ -0,320 + FAD + 2H + 2e FADH2 +0,031 Ubiquinona + 2H+ + 2eubiquinol +0,07 2 citocromo box + 2e2 citocromo bred +0,10 2 citocromo cox + 2e2 citocromo cred +0,254 2 citocromo aox + 2e2 citocromo ared +0,385 O2 + 2H+ + 2eH2O +0,816

Figura 6. Flujo de electrones a travs de la cadena respiratoria desde el NADH y el FADH2 hasta el O2. Sntesis de ATP: la mayor parte del ATP se forma en procesos de transporte de electrones asociados a membranas. En eucariotas el transporte de electrones hasta el oxgeno se realiza en la membrana interna de las mitocondrias y en procariotas en la membrana celular. Cualquiera sea la membrana, el pasaje de los electrones por la cadena de transportadores, libera energa que es utilizada para bombear protones en contra de su gradiente de concentracin a travs de la membrana hacia un espacio limitado y de esa forma se genera un gradiente electroqumico de protones a ambos lados de la misma (figura 7). El gradiente as formado constituye una forma de almacenar energa que luego puede ser utilizada para realizar un trabajo til si se permite que los iones fluyan a favor de su gradiente electroqumico hacia el otro lado de la membrana. La mitocondria tiene doble membrana, una externa que es permeable a molculas pequeas o iones y una interna que est plegada formando crestas y es impermeable a iones y molculas cargadas. De esta forma, las mitocondrias tienen dos compartimentos: el espacio intermembrana y la matriz que es el espacio encerrado por la membrana interna.

Figura 7. Esquema de la mitocondria y del movimiento de protones. En la membrana interna se encuentran embebidas las protenas que constituyen la cadena respiratoria y las molculas de ATP sintasa necesarias para la obtencin de ATP por fosforilacin oxidativa. Los pliegues de la membrana interna de la mitocondria incrementan enormemente la superficie en la que tiene lugar la sntesis de ATP. La energa de los electrones se conserva en el gradiente de protones Tres de los complejos multiproteicos transportadores de electrones desde el NADH son responsables del bombeo de protones desde la matriz mitocondrial hacia el espacio intermembrana (Fig. 8). Como consecuencia, se establece un gradiente electroqumico de protones, tornndose mas positivo el espacio intermembrana que la matriz mitocondrial, lo que genera una fuerza protn-motriz. La energa acumulada en ese gradiente de protones impulsa, cuando estos se mueven nuevamente hacia la matriz (a favor del gradiente electroqumico), la formacin de ATP.

Figura 8. Transporte de electrones (en azul) y de protones (en rojo) en la membrana mitocondrial interna.

Fosforilacin oxidativa En las membranas donde se forma ATP, los H+ fluyen a favor de su gradiente electroqumico a travs de un complejo proteico denominado ATP sintasa que cataliza la sntesis de ATP a partir de ADP y fosfato inorgnico. Esta enzima acta como una turbina permitiendo que el gradiente de protones impulse la produccin de ATP. Este proceso se llama quimismosis y la forma de produccin de ATP asociada al transporte electrnico, fosforilacin oxidativa. La relacin P/O corresponde a cuantos ATP se sintetizan por cada par de electrones transportados hasta el oxgeno. Esta relacin es 3/1 cuando se inicia a partir de NADH y 2/1 para el FADH2. ATP sintasa La molcula que hace posible la sntesis de ATP es la ATPsintasa (Fig. 9) que genera una va hidroflica de pasaje de los protones a travs de la membrana mitocondrial interna, a favor de su gradiente electroqumico. La energa liberada durante ese pasaje se acopla a la fosforilacin del ADP para dar ATP, reaccin que requiere energa. La ATP sintasa o complejo F0F1 es una protena de gran tamao formada por varias subunidades que tiene su parte F0 en la membrana y la F1 proyectada hacia la matriz mitocondrial y es capaz de producir hasta 100 molculas de ATP por segundo. Las molculas de ADP producidas en el citosol de la clula entran por transportadores de membrana a la mitocondria para convertirse rpidamente en ATP que es bombeado al citosol para ser utilizado en el metabolismo. Las bacterias aerobias tienen los transportadores de electrones de la cadena respiratoria en la membrana plasmtica y producen ATP a partir de los electrones provenientes de coenzimas de deshidrogenasas que actan en el citosol. Esta semejanza entre el proceso en mitocondrias y bacterias constituye una evidencia de que las mitocondrias pudieron originarse de bacterias aerobias invasoras de las clulas eucariotas durante el curso de la evolucin.

Figura 9. Modelo de la ATP sintasa.

F1

Fo

Inhibidores Numerosos productos qumicos pueden bloquear la transferencia de electrones en la cadena respiratoria, o la transferencia de electrones al oxgeno. Todos ellos son potentes venenos. Por ejemplo, el monxido de carbono se combina directamente con la citocromo oxidasa terminal, y bloquea la entrada de oxgeno a la misma y el cianuro se une al hierro del citocromo e impide la transferencia de electrones. Desacopladores En la fosforilacin oxidativa el proceso de oxido-reduccin de las molculas de la cadena respiratoria est acoplado a la formacin de ATP y para ello se requiere que la membrana mitocondrial interna est intacta. Algunos compuestos qumicos desacoplan los dos procesos y, por lo tanto, se produce el pasaje de electrones pero no se produce ATP y la energa se disipa como calor. Cuando hay desacopladores se bombean protones al espacio intermembrana como consecuencia del pasaje de electrones pero los protones vuelven a la matriz mitocondrial sin atravesar la ATP sintasa porque estos compuestos aumentan la permeabilidad de la membrana para los protones. El 2,4 dinitrofenol es un ejemplo de compuesto que acta como desacoplador y ha sido usado en agricultura como herbicida. Grasas pardas El pasaje en la cadena respiratoria tiene como funcin primaria la produccin de ATP pero en determinadas situaciones tiene otra funcin. La grasa parda que se encuentra en mamferos recin nacidos o animales en hibernacin es un tejido en el que abundan mitocondrias especializadas que no sintetizan ATP a partir del pasaje de los electrones, sino que producen calor. Estas mitocondrias tienen termogenina, una protena ausente en otras mitocondrias, que funciona como un canal para que los protones vuelvan desde el espacio intermembrana a la matriz sin atravesar la ATP sintasa.