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Microbiologia Diapositivas

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¡Transformando Vidas!

PROCESOS BIOTECNOLOGICOS
Q. EN .A. LUZ CARMEN CASTILLO MTZ.

Estructura Eucariota: Núcleo esta definido. Son procariotas. . Procariota: Su significado del griego es "Antes del núcleo" ya que no poseen un núcleo celular lo que conlleva a que su ADN no tenga una envoltura nuclear y que este libremente en el citoplasma Bacteria: Son organismos unicelulares muy pequeños y relativamente sencillos.

.

ELEMENTOS OBLIGADOS • Pared celular • Membrana plasmática • Citoplasma • Ribosomas • Región nuclear • • • • • ELEMENTOS FACULTATIVOS Flagelos Pelos Endosporas Inclusiones citoplásmicas Cápsula .

PROCARIOTA .

La célula bacteriana consta de elementos: • obligados como el citoplasma. que pueden servir como pelos sexuales para el paso de ADN de una célula a otra . Pueden poseer también. Presenta un aspecto viscoso. implantados en la membrana mediante un corpúsculo basal . y en su zona central aparece un nucleoide que contiene la mayor parte del ADN bacteriano. fimbrias o pili muy numerosos y cortos. • Facultativos: Muchas bacterias pueden presentar flagelos generalmente rígidos.

Movilidad y fijación .

D-Peritrichous . A-Monotrichous. B-Lophotrichous.Examples of bacterial flagella arrangement schemes. C-Amphitrichous.

La mayor parte de las bacterias puede ser ubicada en uno de estos dos grupos o en un tercero. La bacterias se pueden agrupación y color: Gram positivas o Gram negativas. de acuerdo a la resistencia al ácido alcohol que presenten.Morfología de las bacterias La clasificación de las bacterias se basa en el estudio de sus características mediante técnicas que oscilan entre las más sencillas tinciones y los más complejos estudios moleculares. .

Tinción de Gram .

que se combinan con elementos cargados negativamente. herramienta de gran utilidad. • La técnica se basa en las diferencias físicas fundamentales de la pared celular y emplea colorantes catiónicos (cristal violeta y safranina).se aprecian de color rojo). . una proporción importante de bacterias puede dividirse en dos grandes grupos: Gram positivas (se observan de color azul .debido al colorante cristal violeta) y Gram negativas (pierden el cristal violeta y conservan la safranina .• Con la tinción diferencial de Gram.

La pared celular de los procariotas La capa responsable de la rigidez en las paredes de Gram (+) y Gram (-) es el peptidoglicano (o mureína). Gram positivas Gram negativas En Bacteria el peptidoglicano representa hasta el 90% de la pared En Bacteria el peptidoglicano constituye el 10% de la pared .

En Bacteria Gram negativas la pared contiene además de peptidoglicano una capa adicional compuesta de lipolisacárido • Envoltura celular .Cuenta con 3 capas: membrana citoplásmica.Bacteria Gram positivas La pared contiene además del peptidoglicano pequeñas cantidades de ácidos teitoicos. • Muchas Bacteria Gram positivas tienen varias capas de peptidoglicano (hasta 25). pared celular y cápsula/glicocálix .

Vibrio. Serratia. Escherichia. Salmonella. Pseudomonas. Flavobacterium. Campylobacter . Yersinia.Gramnegativas • Bacilos aerobios: Acinetobacter. Shigella. Citrobacter. • Bacilos facultativos: Aromonas.

Tipos de metabolismo .

Fuente de carbono • AUTOTROFOS: Carbono Inorgánico Cuya fuente única de carbono es el CO2 • HETEROTROFOS: Carbono Orgánico Cuando su fuente de Carbono es materia orgánica. .

Fuente de energía • FOTOTROFOS: Energía Solar (LUZ). FOTOHETEÓTROFOS: Utilizan la luz como fuente de energía y las biomóleculas como fuente de Carbono LUZ Compuesto Células Orgánicos FOTOAUTÓTROFOS: Utilizan la luz como fuente de energía y el CO2 como fuente de Carbono Luz O2 CO2 Células .

Fuente de energía • QUIMIOTROFOS: Energía química. QUIMIOHETERÓTROFOS: O2 CO2 Compuesto Células Orgánicas • QUIMIAUTOTROFOS: Cuya fuente de energía es un compuesto químico que se oxida. Fe +2 Fe +3 H2S S CO2 Células .

.

Formas bacterias. • Oval o esférica (coco) • Cilíndrica o en forma de bastón (bacilo) • Formas intermedias de algunos casos anteriores.(Esférica y bastón = cocobacilo) • Espiral o helicoidal (espirilo) • Filamentosa .

En forma cúbica de 8 elementos: Sarcinas.Agrupación bacteriana • COCOS (aislado) En parejas: Diplococos. . En cadena: Estreptococos. En racimos: Estafilococos. En cubo: Tétradas.

Agrupaciones helicoidales • HELICOIDAL  Borrelia Treponema Leptospira .

Bajo condiciones optimas una bacteria puede desarrollarse y dividirse extremadamente rápido. reproducen lo hacen a través de fisión binaria es una forma de reproducción asexual. así las poblaciones . y cuando se minutos.8 fijo.Reproducción • Las bacterias se bacterianas pueden desarrollan a un tamaño duplicarse hasta en 9.

la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias. . se • Tras la duplicación del ADN.Reproducción • Generalmente las bacterias reproducen por bipartición. que está dirigida por la ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas.

Reproducción por bipartición .

la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias.• Tras la duplicación de ADN. Que puede realizar por: • Transformación. • Pero además de este tipo de reproducción asexual. • Conjugación • Transducción . que esta dirigida por al ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas. mediante los cuales se intercambias fragmentos de ADN. las bacterias poseen unos mecanismos de producción sexual o parasexual.

de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde vive.Transformación • Consiste en el intercambio genético producido cuando una bacteria es capaz de captar fragmentos de ADN. .

Conjugación • En este proceso. un fragmento de ADN. • La bacteria que se llama F+ posee un plásmido. una bacteria donadora F+ transmite a través de un puente o pili. además del cromosoma bacteriano . a otra bacteria receptora F-.

Transducción • En este caso la transferencia de ADN de una bacteria a otra. . se realiza a través de un virus bacteriógrafo. que se comporta como vector intermedio entre las dos bacterias.

Tarea 1 • Realizar una investigación de la célula eucariota. y realizar un cuadro comparativo entre los eucariotas y las procariotas .

Ejemplos: • LEVADURAS • ALGAS • PROTOZOOS .

PROTOZOO
• Su tamaño va desde 1 µm, son visible a simple vista. • Se multiplican por bipartición o gemación o esporulación o reproducción asexual. • Se encuentran en agua dulce, salada, suelos, plantas y parásitos animales

Alga celular
• Pueden ser microscópicos o gigantes de mas de 100 pies. • Su reproducción es por fisión binaria asexual. • Crecen en agua dulce y marina y en el suelo.

Algas y microalgas: biohidrógeno
 Organismos fotosintéticos.  Viven usualmente en medios acuáticos aunque también se pueden encontrar en ambientes terrestres y algunas especies pueden en condiciones heterótrofas.  Especies: Formas unicelulares (microalgas) Estructuras muy complejas (macroalgas).  Alimento: Son fosfatos y nitratos que pueden extraer de residuos orgánicos.

como alimento y suplemento de efluentes y como materia prima para cosméticos. . bioetanol.Aplicaciones: Como fertilizantes. En años recientes se han estudiado como alternativa para la obtención de biocombustibles: biodícel. biohidrógeno y biometano. Biorremediación: Degradación de sustratos.

• Su tamaño es de 0. .2 µm • Consta de una cadena de Ác.VIRUS • No son considerados como células. • Son parásitos obligados es decir requieren una célula viva para su propagación. Nucléico o ADN O RNA envuelta en una capa de proteína.015 µm a 0.

3. 1. tipo de alimentación y su reproducción.-Streptococcus faecalis 4..-Pseudomonas 6...Bacillus subtilis.Tarea 2 Realizar un esquema de cada de las siguientes bacterias su forma.Staphylococcus aureus 5. tipo de bacterias por su tinción gram.Escherichia coli 2.Saccaromyces cereviceae ..

Aislamiento e identificación .

Aislamiento e identificación .

. pueda desarrollar debe tomar del ambiente las sustancias necesarias para obtención de energía que será empleada para la biosíntesis y como consecuencia particular la reproducción celular. A estas sustancias se les llama nutrientes. Un medio de cultivo debe contener todos los nutrientes necesarios en cantidades adecuadas para sobrevivir.Introducción Para que un M.O.

agua y pH adecuado.Medios de cultivo Conjunto de nutrientes con determinadas condiciones ambientales que permiten que los microorganismos crezcan y se reproduzcan. . Aportan carbón y nitrógeno y elementos minerales. factores decrecimiento.

3) Estudios microscópicos. Visualización de las características de las colonias en medios sólidos. . 4) La realización de antibiogramas para determinar la sensibilidad. 2) Como paso previo para el estudio e identificación del mio. Problema. 5) Pruebas CMI (Concentración mínima de inhibición) 6) Para conservación de especias microbianas o muestras.Usos 1) Separación y aislamiento de los diferentes especies de microbios presentes en una siembra.

Requerimientos ENERGETICO Fuentes de Carbono: Azucares Fuentes de Nitrógeno. Gelatinas NO ENERGETICOS Fuentes de Azufre: Aminoácidos. Factores de arranque: Factores inhibidores: . Factores de crecimiento: Sales. Fuentes de fósforos:  Fosfatos.

Componentes principales • • • • • Agar. Factores de crecimiento. Extractos de carne o levaduras Minerales . Vitaminas.

Extracto de carne • Contiene las substancias hidrosolubles del tejido animal que incluyen carbohidratos. vitaminas hidrosolubles y sales. . Pectona Principal fuente de Nitrógeno orgánico: puede contener además algunas vitaminas y a veces carbohidratos. dependiendo del material proteico digerido. compuestos orgánicos de nitrógeno.

5 a 7.5 o máximo de 9.5 La mayoría de las bacterias asociadas a la vida vegetal o animal.5 para algunas especies exóticas . • pH mínimo 0.pH • pH óptimo 6.

Halofilicas: Bacterias que viven en altas concentraciones de NaCl. • Halofilicas facultativas: Bacterias que viven con o sin NaCl.Agua • Presión Osmótica: Tensión que se ejerce cuando el agua difunde a través de una membrana. • • Plasmolisis: La bacteria explota. • Presión hidrostática: Tensión al líquido. .

el agar disuelto se gelifica cuando la temperatura se reduce por debajo de 45 ºC. el agar no es fuente de nutrientes para las bacterias.Agar • Usado como agente solidificante. . Extracto de levadura • Una fuente muy rica de vitaminas B. contiene además nitrógeno orgánico y compuestos carbonados.

mas exigentes.. Ejemplo G.O.Ch. G.A.Clasificación de los medios 1. Ejemplo : A.N. ‘Factor de crecimiento’ cuya finalidad es promover el desarrollo de M. 2. M..S. Medios basales: Son medios simples que contienen en general los nutrientes esenciales para promover el desarrollo a microorganismos poco exigentes nutricionalmente ‘in vitro’ . E.5. Medios enriquecidos: Son medios que han sido complementado con otros nutrientes que proporcionan. .

4. patógenos que pudieran encontrarse en dicha muestra.Medios Diferenciales: Contienen sustancias químicas o indicadores que permiten identificar con facilidad algunos géneros o especies bacterianas por el aspecto característico de las colonias y su capacidad bioquímica.. .B.O.Medios selectivos o inhibitorios: Se utiliza para suprimir el desarrollo y al mismo tiempo promover y/o seleccionar el crecimiento de los M.3. y A.V. Ejemplo: Las bioquímicas. Ejemplo: A.BP.

Tienen la capacidad amortiguadora que facilita la viabilidad del M. Ejemplo: Caldo tetrationato. Ejemplo: Cary-Blair . 6. por un lapso corto de tiempo y que posteriormente deseamos recuperar.5....Medios de transporte: Sirven para mantener viables a los M.O. para que no se multiplique pero que permanezca latente.O.Medios de enriquecimiento: Son generalmente caldos que poseen un efecto inhibitorio sobre géneros bacterianos favoreciendo al mismo tiempo al desarrollo de otro que interesa más.

.A. destinados para el mantenimiento de bacterias.7. Ejemplo: B. esto es con el propósito de que el medio no se acidifique y las bacterias no mueran..Medios de conservación: Son generalmente medios basales. estos medios deben estar desprovistos de carbohidratos.B.

Métodos de aislamiento .Técnicas para aislar e identificación de microorganismos 1. Material de siembra 2. Inoculo 3.

Debe partir de un cultivo puro con una concentración adecuada. • Incubación :A temperatura adecuada de 12 a 24 horas . Si la muestra es líquida se tomará con pipeta graduada o pipeta Pasteur una cantidad suficiente después se homogeniza. • Preparación: Si la muestra es sólida o semisólida se tomada con asa estéril.Preparación de Inoculo • Definición: Es una cantidad suficiente y representativa de la bacteria problema.

c)Si se realiza con hisopo realice igual que en a). Siembra del inoculo en medio líquido. b)Si se realiza con pipeta se toma el volumen conocido (según dilución) de la muestra problema y se vierte al medio de cultivo líquido agitando vigorosamente. a)Si se utiliza asa de siembra se toma de la muestra problema y se adiciona al medio líquido agitando el asa. .Métodos de siembra 1.

Técnica de Barry .Siembra del inoculo en medio sólido.

Aislamiento en Estría .

Estría múltiple .

Técnica de los cuatro cuadrantes .

Técnica por dilución .

Siembra del inoculo por picadura a) Siembra por picadura .

Siembra por estría en tubo con medio sólido inclinado (bisel o pico de flauta) .

Siembra por picadura y estría .

Temperatura PSICRÓFIALAS: CRECEN DE 0-20 ºC MESÓFILAS: CRECEN DE 25-40 ºC TERMÓFILAS FACULTATIVAS: CRECEN DE 25-55 ºC TERMÓFILAS: CRECEN A TEMP >A 50 ºC .

. ANAEROBIAS: CRECEN SOLO EN AUSENCIA DE O2 LIBRE ANAEROBIAS FACULTATIVAS: CRECEN EN PRESENCIA O AUSENCIA O2 LIBRE MICROAEROFILAS: CRECEN EN PEQUEÑAS CANTIDADES DE O2 LIBRE . .Requerimientos del oxigeno AEROBIAS: CRECEN SOLO EN PRESENCIA DE O2 LIBRE .

forma.Morfologia • Entre las principales características de las bacterias se encuentran su tamaño. estructura y tipo o modo de agrupación. • Todas estas características van a constituir la morfología propias de las células bacterianas: .

es decir las tendencia que representan los distintos tipos bacterianos para asociarse entre sí formando pequeños grupos de 2 o más bacterias.Agrupación • Las agrupaciones macroscópicas son visibles a simple vista y corresponden a su crecimiento en un punto en un medio de cultivo sólido para formar colonias que serán distintas y características para cada tipo bacteriano. • Agrupaciones microscópicas solo por microscopía y corresponde a lo que realmente se entiende por agrupación bacteriana. .

La reproducción de esa bacteria en otras muchas en ese punto del medio sólido origina lo que se conoce como colonia • Estas colonias presentaran una morfología microscópica fácilmente reconocible y variable en función de: 1.Morfología microscópica Tras el periodo de incubación estimado como el adecuado en el medio sólido donde se ha realizado la siembra. deberán aparecer pequeñas masas visibles a simple vista. • . Características o tipo de medio de cultivo sólido. 2. Tipo de microorganismo problema. Criterio importante a la hora de una valoración taxonómica de los mismos.

Conteo de colonias en los diferentes medios de cultivo y como se reporta .

entonces se reporta: >100 UFC/ml Valor estimado. Ejemplo: No existe crecimiento de UFC en placa de 1:100.Conteo de UFC • Sin colonias Reportar menos de 1 por el inverso de la dilución más baja. .

. REPORTAR: >250 UFC/ 10g o ml de muestra valor estimado.500 ó 5.700 veces por el inverso de la dilución más baja.Conteo de UFC • Más de 250 UFC / g o ml Reportar mayor de 6.

psicrofilas.. . con pH de 7.Eres el Jefe de Laboratorio de Microbiología. Además describe el procedimiento como lo harías (no omitas ningún paso. • Las características son: Es polvo. de “Chiken Happy” y te piden que le realices una prueba al producto final. ni medio de cultivo). sabemos que pueden crecer microorganismos mesolíticos. Como control de calidad.0. Es necesario crear un medio rico en nutrientes que crezcan de todo.Tarea 3 • 1.

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