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Pruebas Serologicas

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PRUEBAS SEROLOGICAS

APLICADAS AL DIAGNOSTICO

DE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS

PRUEBAS SEROLOGICAS
Las pruebas serológicas son forma de evaluación relativas , que detectan concentraciones de inmunoglobulinas . Se detectan en diferentes enfermedades : hepatitis , sífilis , chagas etc. Toda prueba Dx. Posee dos características : La sensibilidad y la especificidad .

Sífilis
Enfermedad sistémica contagiosa causada por la espiroqueta Treponema pallidum y caracterizada por fases clínicas secuenciales y años de latencia . Se clasifica en adquirida y congénita  Sífilis adquirida : Etapas Fase primaria : Chancro; linfoadenopatía regional .

Continuación
Fase secundaria : diversas lesiones dermatológicas que imitan a varios trastornos , por ejemplo ; exantema cutáneo , erociones de las mucosas , alopecia y otras muchas manifestaciones . Fase latente : ( asintomático ) Fase tardía o terciaria . ( sintomática no contagiosa ) : S. terciaria benigna , S. cardiovascular y neurosífilis .  Sífilis congénita : Precoz sintomática observada en lactantes de hasta 2 años . Tardía : observada en épocas posteriores de la vida : dientes de Hutchinson , cicatrices de queratitis intersticial .

Diagnóstico
Pruebas serológicas para sífilis : Existen pruebas treponémicas y no treponémicas P. No treponémicas : determinan anticuerpos reagínicos que se detectan con un antígeno a base de cardiolipina lecitina y colesterol altamente purificado .. Son relativamente específicas , no son exclusivas para la sífilis .

Continuación « 

VDRL: Venereal Disease Research Laboratory . Prueba de floculación , en la que los anticuerpos reagínicos presentes en el suero del paciente reaccionan visiblemente con cardiolipina . Numerosos procesos pueden aumentar las reaginas séricas e inducir positividad del VDRL Los resultados se informan como positivos débilmente positivos y negativos

Continuación «
RPR : Rapid plasma reagin . Prueba de floculación macroscópica . Esta prueba es más sensible pero menos específica . Utilizada para detección y cuantificación de reagina . Se aplica para la selección rápida de pacientes de los que se sospecha que tienen sífilis . Para la revisión de la respuesta inmunológica al tratamiento .

Pruebas Treponemicas
El antígeno utilizado es Treponema pallidum , su finalidad es detectar anticuerpos antitreponémicos específicos que aparecen en infecciones como : Sífilis , frambesia , tienen mayor especificidad , confirman datos obtenidos en pruebas no treponémicas , estas pruebas son complejas y costosas . TPI, FTA-Abs , TPHA .

SALMONELLOSIS
Los 2,200 serotipos conocidos de Salmonella se pueden agregar en 1) adaptados al huésped humano 2) adaptados a huéspedes no humanos o 3) no adaptados a huéspedes específicos . El primer grupo comprende S. typhi y S. paratyphi A, B y C que sólo son patógenos para humanos y causan de modo habitual fiebre entérica

FIEBRE TIFOIDEA
Enfermedad sistémica causada por S. typhi y caracterizada por fiebre, postración , dolor abdominal y exantema de color rosado . Los m.o penetran en el cuerpo a través del T. G. y llega al torrente sanguíneo por canales linfáticos . Se produce inflamación linfocitica en el ileon y colon dentro de la lámina propia y las placas de Peyer .

Continuación
El diagnostico se basa en el aislamiento de bacilos tifoideos mediante cultivo , pero el cuadro clínico y las anomalías hematológicas pueden sugerir el Dx. Los bacilos tifoideos se suelen aislar en cultivo de sangre o médula ósea sólo durante las dos primeras semanas de enfermedad , mientras que los cultivos de heces son en general positivos durante la tercera a quinta

ANTIGENOS FEBRILES (WIDAL )
Anticuerpos de clase IgM e IgA frente a antígeno somático ³0´ son los primeros en aparecer elevandose hasta 1/400 .Se detectan por aglutinación mediante la reacción de Gruber-Widal , títulos bajos 1/100 aunque inespecíficos también tienen valor .  Ap. Contra el antígeno flagelar suelen aparecer al 10 día . 

TORCH
Prueba sanguínea que detecta ciertas infecciones presentes en el recién nacido , nos referimos a : Toxoplasma , Rubéola Citomegalovirus y Herpes simple . Las razones para su realización son determinar infecciones congénitas a través de la placenta que pueden llevar a malformaciones , retraso en el crecimiento y problemas neurológicos . También se hace necesario evaluar a la madre para interpretar las pruebas del recién nacido .

TOXOPLASMOSIS
Infección por T. gondii , que causa toda una gama de manifestaciones desde linfadenopatía benigna asintomática hasta enfermedad del SNC en potencia letal , coriorretinitis y retraso mental . El feto en desarrollo y los pacientes inmunodeprimidos experimentan riesgo especial de enfermedad grave . La ingestión de ooquistes procedentes de los excrementos de los gatos representan el modo más común de contagio oral , también ocurre al comer carne poco cocida que contiene quistes tisulares .

Toxoplasmosis 
 

La determinación de Ig M específica es la que resuelve más dudas en el embarazo . Títulos menores de 1:16 indican que probablemente nunca ha habido una infección . Títulos de 1:16 a 1:256 probable infección previa Títulos de 1:1024 infección activa de toxoplasma La detección de títulos anti-Toxoplasma gondii en LCR también pueden ser diagnóstico .

Rubéola  

Los anticuerpos pueden cuantificarse mediante inmunofluorescencia o mediante ELISA , importante el Dx. de esta infección durante el embarazo pues se asocia al desarrollo de malformaciones . Se debe valorar Ig. M. Títulos iguales o superiores a 1/64 de IF. o de 50200 unidades ELISA indican buena protección .

Citomegalovirus El diagnóstico de la infección por (CMV)suele realizarse mediante la demostración de Ap. clase IgM , a través de las pruebas de Elisa o evidenciando una seroconversión . Infecciones por Herpesvirus Se pueden cuantificar los niveles de anticuerpos contra los distintos tipos de herpesvirus .El virus del herpes simples subtipo 1 y 2 es una causa poco frecuente , pero muy grave de encefalitis , es de gran utilidad la demostración de antígeno en tejido cerebral por inmunofluorescencia e inmunoperoxidasa .  

Legionelosis
La técnica SEROLÓGICA más utilizada es la IFI pero también técnicas de ELISA y de microaglutinación. El título diagnóstico para una sola determinación ha de ser mayor o igual a 1/256 y si se trata de dos determinaciones seriadas se requiere un aumento de 4 veces el título inicial que como mínimo debe ser mayor o igual a 1/128. 

Leishmaniasis
El diagnóstico serológico resulta útil en la leishmaniasis visceral .La técnica más útil parece ser la inmunofluorescencia indirecta . Se considera diagnóstica la existencia de seroconversión . Si se dispone de un solo suero títulos mayores o iguales a 1/64 apoya el diagnóstico si se trata de zonas no endémicas .

leptospirosis
Zoonosis que afecta a animales domésticos y salvajes varía desde una infección inaparente hasta la enfermedad fatal .  Existe un estado de portador en donde los animales eliminan leptospiras con la orina durante meses  Las infecciones humanas se adquiere por contacto con la orina o tejidos de un animal infectado o en forma indirecta por contacto con agua o tierras contaminadas .  Puede ser una enfermedad laboral pero también se adquiere de modo accidental durante actividades recreativas ( al nadar en aguas contaminadas ) 

Leptospirosis
El método diagnóstico más utilizado es el que consiste en la aglutinación macroscópica en suspensión de leptospiras vivas y lectura microscópica en fondo oscuro . Con una sola muestra se precisa un título de 1/300 - 1/500 para poder considerarlo como significativo .

Sarampión
El diagnóstico serológico se basa en la demostración de la seroconversión o presencia de la IgM específica .Los títulos máximos se obtienen dos semanas después del comienzo del exantema cuatro semanas después de la inmunización .Luego descienden a los seis meses siguientes , para mantenerse posteriormente más o menos estables .

Triquinosis
El diagnóstico serológico se basa en una técnica de floculación. Títulos >a 1/5 son significativos pero con esta técnica hay que tener presente que la detección de Ap no es posible hasta tres o cuatro semanas después de la infección , aunque después persisten dosificables durante años . Ultimamente se está utilizando un técnica ELISA más sensible y precoz .

Yersiniasis
La prueba serológica más empleada es la aglutinación , exigiéndose títulos mayores o iguales a 1/160 . Es posible la existencia de falsos positivos en las infecciones por distintos tipos de Yersinia , así como Francisella tularensis Vibrio cholerae y también Salmonella.

Enfermedad de Lyme La detección de anticuerpos específicos por inmunofluorescencia indirecta frente al agente responsable de la enfermedad de Lyme ³ Borrelia burgdorferi es una técnica útil para el diagnóstico de esta enfermedad . Los anticuerpos IgM alcanzan su máximo entre la tercera y sexta semana después del comienzo de la enfermedad , mientras que la IgG aumenta más lentamente existiendo una tasa mayor meses más tarde coincidiendo con la aparición de artritis.

Fiebre botonosa mediterránea
El diagnóstico se realiza por : Pruebas de Fijación de complemento : 1/20 Microaglutinación !/160 IFI : !/40 . Estas pruebas suelen positivizarse entre 7 y 15 días de iniciada la enfermedad . La inmunofluorescencia indirecta suele dar falsos positivos con Rickettsia mooseri.

AMEBIASIS
El diagnóstico serológico es de mucha utilidad en esta patología sobre todo en las formas extraintetinales. La técnica más útil parece ser la hemaaglutinación pasiva . Se consideran títulos significativos los mayores o iguales a 1/ 256, sobre todo en zonas no endémicas . BRUCELOSIS El diagnóstico serológico práctico de la brucelosis se basa en las pruebas de seroaglutinación , de Coombsantibrucela y de Rosa de Bengala

HCG Latex :Test de Embarazo
Hormona producida por el tejido placentario de la mujer embarazada.  Excretada en sangre y orina durante el embarazo puede detectarse entre el 7 al 10 día de la concepción  Los niveles continúan elevándose hasta 100,000 - 3 000 000 mUI/L.al término del primer trimestre del embarazo . 

HIDATIDOSIS 
   

Zoonosis que tiene como agente etiológico la forma larvaria de Equinococcus granulosus . Causa : perros infectados en zonas endémicas . Deficiente control veterinario en camales . Manifestaciones clínicas : pulmones, hepática , óseo , SNC, corazón , riñones cerebro Diagnostico de laboratorio : Inmunoserològico Punción de quiste contraindicado .

PRUEBA DE DOBLE DIFUSION Arco 5 . 

Reacción de precipitación antígeno anticuerpo en un medio semisólido que consiste en detectar en el suero de un paciente Anticuerpos contra el Antìgeno del Arco 5 , mediante la identidad inmunológica con un suero control positivo

Precipitación  Unión de antígeno ± anticuerpo complejo al principio soluble . Se aglomeran formando redes si la relación es óptima precipitan por el alto peso molecular alcanzado .  Visualizándose bandas o líneas de precipitación 

Materiales y Reactivos utilizados para la prueba 
    

Caja con los reactivos . Suero control. Antígeno hidatídico y diluyente. Placa con agar noble. Saca bocados de acero: 10, 6, 1 mm Suero del paciente.

GUIA DE LECTURA

Ag4

Sp1
Sc3

Sp2

1.- Suero en estudio (resultado positivo) 2.-Suero en estudio (resultado negativo) 3.- Suero control positivo (a Ag del arco 5) 4.- Antigeno

El que no entiende una mirada tampoco entenderá una larga explicación « GRACIAS

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