TROPICAL FORESTRY PAPERS

36

Cordia a//iodora
Genetics y Mejoramiento de Arboles

Editado par D.H. Boshier y A.T. Lamb

OXFORD FORESTRY INSTITUTE DEPARTMENT OF PLANT SCIENCES UNIVERSITY OF OXFORD

1997

Biologla Reproductiva 13

Biologia Reproductiva

D.H. Boshier y A.T. Lamb' Oxford Forestry Institute, Department of Plant Sciences, University of Oxford, South Parks Road, Oxford, OXI3RB. J Direccion actual: ETSU, Harwell, Didcot, Oxon, OX JJ ORA.

3.1

Introducci6n

Para que la conservati6n genetica, el manejo forestal y los programas de mejoramiento genetico sean efectivos, se requiere, entre otros t6picos, del conocimiento de la biologla reproductiva de la especie. Sin embargo, dicho conocimiento es muy Iimitado para la mayoria de las especies forestales tropicales (Bawa et al.; 1990; NRC, 1991). Los estudios deberlan cubrir un rango amplio de t6picos, incluyendo fenologla de la floraci6n, mecanismos de incompatibilidad, polinizaci6n y biologla de la semilla, para lograr la comprensi6n completa de la biologfa reproductiva de la especie. EI conocimiento de la fenologia de la floraci6n de una especie, tanto en arboles individuales como dentro y entre poblaciones, es de importancia fundamental para entender su estructura genetica y asegurar la producci6n de semilla para la reforestacion. Variacion en el tiempo de floraci6n a todos los niveles (inflorescencia, arbol, poblaci6n) puede representar un medio importante mediante el cual una especie se adapta ecologica y fisiol6gicamente a su ambiente (Primack, 1980). En el bosque humedo tropical, la variaci6n observada en el periodo de floracion entre especies con formas de vida diferente puede reflejar seleccion por interacciones 6ptimas planta-polinizador (Stiles, 1978), 0 cambios estacionales en el estado hldrico (Borchert, 1983). La manera en que los arboles individuales florecen en el tiempo, con respecto a los demas y a los polinizadores, afectaran los patrones del flujo de genes (Levin, 1979). La floraci6n secuencial desde el apice hasta la base de la copa puede resultar en que ramas de floraci6n temprana atraigan un tipo de polinizador, mientras que ramas de floracion tardia atraigan otro. Por el contrario, la floracien aleatoria dentro de la copa puede estimular un mayor movimiento de polinizadores entre la flores y los arboles (Bawa, 1983). Los arboles adyacentes se pueden cruzar en un afio pero no en el siguiente, debido a varlaciones en la sincronla de la floraci6n y/o en la cantidad de floracion, Este capitulo presenta los resultados de un estudio de C. alliodora, a 10 largo de tres estaciones de floracion, que cubre fenologia de la floracion y la fructificacion, sistemas de incompatibilidad y polinizadores (Boshier, 1992 y 1995), en varios sitios de la regi6n atlantica hiimeda de Costa Rica. Los resultados cubren patrones, duracion y efectos ambientales sobre la floraci6n/

fructificacion dentro de inflorescencias, arboles y poblaciones. EI capitulo tambien resume informaci6n de la literatura sobre datos de floracion para C. alliodora a 10 largo de su rango, y presenta resultados de estudios sobre polinizadores y meeanismos de incompatibilidad de la especie.

3.2

Flores

En un sitio en la regi6n Atlantica humeda de Costa Rica (2600 mm de precipitacion promedio anual, con ningun mes con menos de 70 mm), la antes is (apertura floral)fue noctuma, ocurriendo entre las 18:00 y 0 I:00 h (Boshier, 1992). Se encontr6 que la hora de la antesis fue relativamente consistente para cada arbol de una noche a la otra y, dentro de un arbol, todas las flores que abrieron esa noche 10 hicieron dentro de aproximadamente dos horas del inicio de la antesis. La dehiscencia de las anteras generalmente ocurrio justo despues de la antesis, aunque bajo condiciones muy humedas, la dehiscencia tome mucho mas tiempo. En algunas noches muy humedas, la dehiscencia de las anteras no ocurrio sino hasta despues de la madrugada del dia siguiente. En un sitio en la regi6n del paclflco seen de Costa Rica (precipitacion promedio anual de aproximadamente 2200 mm, < 70 mm de precipitacion promedio mensual en el periodo diciembre-abril), se ha informado que la antesis ocurre de las 19:00 a las 05:00h (Opler et al., 1975). Los estigmas estan receptivos inmediatamente despues de la antesis (Foto 2a). Los resultados de polinizaciones controladas, realizadas en flores emasculadas, y en flores de polinizacion abierta, en el campo, indicaron que las flores permanecen receptivas en la zona humeda durante 1.5 a 3 dias despues de la antesis. En la zona seca, los estigmas estuvieron receptivos unicamenre durante un dla (Opler et al., 1975). AI final de estos periodos, los estigmas adquirieron una apariencia march ita (Foto 2b). Mediante examen microscopico se observ6 en todos los casos, que el polen compatible logro la penetraci6n en el ovule aim cuando fue depositado en estigmas que previamente habfan sido polinizados por polen incompatible. Por 10 tanto, parece que no existe el problema de estigmas obstruidos con polen de la misma flor que posteriormente pudiera evitar una polinizacion cruzada efectiva.

D.H. Boshier y A.T. Lamb

14 Cordia alliodora: genetica y mejoramiento de arboles

Se observaron varias anonnalidades en incluyendo, relativamente frecuentes, flores estilo rizado muy pronunciado, aunque esto efectos sobre la fertilizacion 0 la produccion de

la flor, con un no tuvo semillas.

Se reconocieron los siguientes estados de floracion (Figura 2.1, ver tarnbien Fotos 2c, 2d, 2e; modificados a partir de Mendoza, 1965): 1 2 3 4 Sa 5b 6 7 inicio de la formacion de bot ones florales; botones florales individuales visibles, peru no lIenos; botones florales individuales Henos; petalos blancos emergen de los botones florales, pero no abren; petalos abren, estigma receptivo; petalos aim blancos, estigma marchito; petalos se vuelven cafes; el embrion empieza a hincharse.

En el Cuadro 3.1 se muestra la duracion de cada estado de floracion en la zona hiimeda de Costa Rica. EI periodo desde la polinizacion (estado Sa) hasta la maduracion de la semilla tome entre 36 y 45 dias, con un periodo adicional de 30 dias entre la maduracion de la semilla y la dispersion natural. Cuadro 3.1 Numero promedio de dias (efecto de la precipitacion eliminado) para alcaozar cada estado floral a partir del estado 4 (petal os blancos emergen del boton pero no abren) para flores individuales de Cordia alliodora, en un sitio de la zona humeda de Costa Rica. Tambien se muestran los tiempos estimados de maduracion de la semilla y de recoleccion optima (fuente: Boshier, 1992).
No. promedio
dedlas (acumuladol

que, una vez que se ha iniciado la floracion, pueden pasar entre 5 y IS dias para que abran todas las flores dentro de una inflorescencia. Este proceso, sin embargo, puede verse afectado por la lluvia. Los periodos prolongados de lIuvia continua a 10 largo de varios dias (conocidos como ternporales), ocurren entre diciembre y abril en la costa Atlantica de America Central, y se caracterizan por temperaturas mas bajas, alta humedad y ausencia de luz solar (Coen, 1983). Un temporal dura generalmente entre dos y cuatro dias (aunque pueden ocurrir dos consecutivamente) y pueden tener un efecto dramatico sobre la floracion, Las aoteras no logran abrir y con frecuencia se desprenden de las flores; con pocos polinizadores presentes, no ocurre polinlzacion durante ese periodo. Bajo tales circunstancias, la antesis tambien se retrasa e incluso puede ocurrir durante las horas del dfa. EI desarrollo de las flores parece detenerse y, despues de que cesa la lIuvia, hay un periodo sin apertura floral, que corresponde aproximadamente a la longitud del temporal (Figura 3.1). La mayoria de las perdidas evidentes en la floracion ocurren algunos dias despues de la aotesis (en el estado 5; Cuadro 3.2). Las perdidas parecen ser una consecuencia de; a) la falta de deposicion de polen compatible, y b) absicion de flores polinizadas con polen compatible, debido a limitacion de recursos que conlleva a competencia entre sernillas despues de la fertilizacion. No se ha detenninado el grado al cual las flores polinizadas con polen compatible son rechazadas, debido a posible competencia. La falta de polinizacion no parece ser la causa de perdida floral, ya que con buen clima, todos los estigmas examinados tenlan polen. Aunque la precipitacion extiende el periodo de receptividad del estigma (presumiblemente un efecto de la humedad), el efecto global de la lIuvia prolongada es negativo debido a una reducida disponibilidad de polen y de polinizacion, EI analisis microscopico de las flores colectadas despues de la floracion durante las Iluvias mostro ausencia de polen en los estigmas 0 una deposicion minima. Las flores de los mismos arboles, colectadas despues de la floracion en buen clima, mostraron un alto porcentaje de estigmas con polen compatible (Cuadro 3.3). Como consecuencia, es posible que las inflorescencias 0 ramillas de inflorescencias que florecen duraote los temporales, no produzcan semilla. En una inflorescencia en un sitio de la zona humeda de Costa Rica, las ramillas que florecieron durante un periodo de lIuvia continua (96 mm del 23 al 26 de febrero, 1989) no produjeron semilla, en cornparacion con 5-16% de produccion de semilla para ramillas de la misrna inflorescencia que florecieron durante un periodo sin Iluvia (4-7 de marzo, 1989; Boshier, 1992).

Estado Oesaipci6n 5a
5b

error es~ndar
1.0 1,7 2,1 1.9

petalos abren, esligma nteeplivo aun blancos, petalos esligma

marchito

3,6 4.0
12.1 27.4 40-49 aprox.57 73.5

6 7

petalos se weiven cafes

embri6n empieza a hincharse tiempo estimado a Ia maduraci6n lasemilla recoIecci6n 6ptima de semilla calda de fa semilla de

9.4

=ver Capitulo 6 para detalles de recoleccien de sernillas

3.3 Floracion y produccion dentro de las inOorescencias

de semilla

Las ramillas dentro de una inflorescencia individual generalmente empiezan a florecer a pocos dias unas de otras, pero sin ningun orden en particular, de manera

Oxford Forestry Institute Tropical Forestry Paper No. 36

Biologla Reproductiva

15

Figura 3.1 Efecto de las lluvias prolongadas ("temporales") sobre la fenologia floral de Cordia alliodora durante la estacion de floracion de 1989, en un sitio de la zona humeda de Costa Rica (fuente: Boshier, 1992).

)(precipilaCiO"n (mm)

• hares de insolacioo
30

~x,

+ % apcrtun
x

floral (2 il1norenclas- en cada periodo sin floracion

uno de -4 fibolcs)

20

Pretipit.cion m .. , Hun de insolaci6n Apertur. noral (%)

t,
I'

*
-I
...

I'

IS

I'

i' I' I'

10_~.:
s
1
;...

-'\11
\
I I

~J\ ,(v/
)( X)( '" X

o >k x:*:xx*".,_=-48 :51

X'~~.
\
"

_J.)I(**x-K-~_X n n

Dbl•• partir dell de cnerl!)19"

Cuadro 3.2 Produccion de semilla y perdidas en cada estado de desarrollo floral para Cordia alliodora en un sitio de la zona humeda de Costa Rica, estacion de floracion de 1989 (% del nurnero original de botones florales en el estado 3; fuente: Boshier, 1992).
Estadode desImlIIO DescripciOn peroida

desViac:iOn
astandar 6.9 4,1

3 4 5 6
7 'rodesamlla

yemas IIoraIes individuales llenas

petalos

yemas 1IoraIes, no alll8n

blanoos emergen

de las

8,2 5.3 47,3 22,0 1.8 15.5

~ atJren. estigma receptivo y semarchila petaIos se lOman ambriOn empieza a IIJIcharse

16,2 13.6 2.4

11.2

care

Media de 5 arboles. 2 intlorescencias

por arbol

Cuadro 3.3

Efecto de la precipitacion

sobre

la

polinizacion de cinco arboles de Cordia alliodora en

varios sitios de la zona humeda de Costa Rica (n varia de 19 a 31 f1ores; fuente: Boshier, 1992).
Esligmas receptivos durante DIMas cruces No. promedio de OlMOS de polen compatibles
IJClf

No. de

tIboI 1 2

estiQina
2.2

33,3

4 5

20,6 18.2 20.4

0.0 10.5 0.0 0.0 0.0

i%l

Estigmas receptivos durante buen CIima cruces No. promedio de granos de polen tompalillies
lJClfestigma

La produccion de semilla, por 10 tanto, puede ser muy variable dentro del mismo arbol, dependiendo de las condiciones climaticas prevalecientes durante la receptividad floral de cada ramilla de la inflorescencia. La reduccion en la producci6n de semilla tambien puede deberse a dail.os flsicos. Las inflorescencias colectan gran cantidad de agua y el aumento en el peso puede hacer que ramas, aun relativamente grandes, se quiebren. En general, solo una pequeJl.a pero variable proporcion de botones florales producen semilla. Boshier (1992) encontr6 que la cantidad de semilla por inflorescencia no mostro correlaci6n con el numero de flores y parece depender principalmente de la proporcion de polinizacion compatible y del clima. La producclon de semilla de polinizaci6n abierta fue de 15.5% ± 11.2 (porcentaje del numero original de botones florales en el estado 3), Esto fue consistente con otros estudios en las zonas humedas (I 6.9"10± 8.3; Mendoza, 1965) y secas (23.6% ± 21.2; Opler et al., 1975) de Costa Rica. En todos los casos, las altas desviaciones estandar reflejan la variabilidad considerable entre ramillas dentro de inflorescencias, entre inflorescencias y entre arboles individuales.

(%1

588,2 192.0 486.8

39.4 34.8 51,9

D.H. Boshier y A.T. Lamb

16 Cordia ailiodora: geneticay mejoramientode Arboles

3.4 Floraci6n y producci6n de semilla dentro de poblaciones

No es sorprendente que para una especie de tan amplia distribuci6n, la epoca de floraci6n varia a 10 largo de su rango natural. En Mexico, America Central y el Caribe, la floraci6n generalmente se inicia alrededor de diciembre y puede extenderse hasta abril (Greaves y McCarter, 1990). La floraci6n parece ser mas prolongada en climas no estacionales; por ejemplo, en Colombia, esta ocurre a 10 largo de todo el ailo bajo estas condiciones, aunque hay picos de floraci6n (Melchior, 1977; Neyra Roman, 1981; Venegas Tovar, 1971). Sin embargo, algunos de los informes en la literatura sobre la epoca de floraci6n son contradictorios (ej. Cuadro 3.4). La floraci6n en La Selva, Costa Rica, fue reportada de enero a febrero (Frankie et al., 1974) y de marzo a mayo (Opler et al., 1975). Sin embargo, de acuerdo con observaciones del autor principal, algunos arboles pueden estar en floraci6n en La Selva a 10 largo de todos estos meses. Tales discrepancias i1ustran la necesidad general de utilizar muestras suficientemente grandes en estudios fenol6gicos para investigar la variaci6n tanto dentro como entre poblaciones. Cuadro 3.4 Informes de floraci6n de Cordia alliodora en Costa Rica.
CiudadI ubicaciOn, Provincia Bagaces. Guanacaste Desconocido. Guanacaste La Pacifica, Guanacaste EspNza, Puntarenas La Selva. Heredia La Selva. Heredia Turrialba, Cartago

la media del rodal (dap promedio 45.6 ± 13.9 em, rango 14.9 • 94.0 em) y que la media de los arboles que no florecieron en uno 0 dos ailos (dap promedio 40.3 ± 11.1 em, rango 18.9 - 75.5 em). EI ultimo grupo tambien mostr6 un mayor rango en dap que los que no florecieron, con algunos arboles grandes produciendo muy pocas flores 0 ninguna en algunos ailos y grandes cantidades otros ailos. La incapacidad de floraci6n, tambien informada en C. glabra y Tabebuia rosea, puede deberse al aborto de inflorescencias 0 al desarrollo incompleto de los botones florales (Borchert, 1983). En contraste, en la zona seca, todos los arboles de C. alliodora sexualmente maduros florecen y producen semilla todos los ailos (Opler et al., 1975; Boshier, datos no pubJicados). Las bases fisiol6gicas de la floraci6n en arboles tropicales y por 10 tanto, el efecto de los factores ecologicos, no estan bien comprendidas, aunque se ha enfatizado la necesidad de distinguir entre la inducci6n floral y el control de la antesis (Borchert, 1983; Dick, 1996; Opler et al., 1976). Se ha mencionado que la Iluvia fuera de epoca durante la estaci6n seca aetna como una seftal para la floracion en varias especies de Arboles y arbustos tropicales (ej. cafe; Alvim, 1960), incJuyendo C. globra y C. panamensis (Augspurger, 1982; Borchert, 1983; Holdsworth, 1961; Opler et al., 1976). En Mexico, se ha notado el efecto de la lluvia fuera de estaci6n en producir un segundo periodo de floraci6n en C. alliodora el mismo ailo (Miller, 1985), La lluvia, mediante una Iiberaci6n del estres de humedad o una reducci6n brusca en la temperatura, puede inducir una antesis sincronizada (Opler et al., 1976). Se cree que un posible disparador de la antesis en arboles tropicales es la perdida de cierto numero de hojas, 10 cual resulta en rehidrataci6n de arboles previamente afectados por deficit hldricos (Reich y Borchert, 1984). La antesis indueida por calda de hojas puede ser altamente asincrona, mientras que las lIuvias posteriores a periodos de sequia pueden inducir floraciones mas sincronlzadas (Borchert, 1983). Se cree que los primordios florales de C. alliodora son producidos durante la estaci6n humeda previa y permanecen dormantes durante algunos meses. En la zona seca, la antesis en C. alliodora puede ser inducida por la caida de las hojas; sin embargo, en la zona humeda, la floraci6n se inicia antes de que ocurra cualquier periodo de deficit hldrico, y el papel de este en el proceso es aun un tema de diseusi6n. A 10largo de la estaci6n, la producci6n de flores dentro de un arbol fue continua, sin ningun pico de floraci6n facilmente definido. Las flores receptivas estaban dispersas aleatoriamente en la corona en todo momento (Foto 2f). La duraci6n de la floraci6n para arboles individuales vari6 de una a ocho semanas y mostr6 una correlacion positiva con la cantidad de flores producidas (Cuadro 3.5), mientras que la ultima se incremento con

elima'
seco seco seco seco
bUrnedo bUmedo hurnedo bUrnedo

Epoca de IIoraciIIr1 mediados ene.-Ieb mediacIos ene.-leb., ocasionalmenle hasta abriI Ieb.-rnar. finales ene.·mec!. aIlr. ene.-leb. mar.-may. ene.-rnar. inicios a rned. die. Inido a med. aIlr.

ReIerencia Frankie et ai, 1974 0pIer et ai, 1975 Daubenmire, 1972 Boshier.I992 Frankie et 3(, 1974 0pIer et ai, 1975 Menooza, 1965 Boshier,I992

·seco • en promedio,mas de 5 meses sucesivospor ailo con menosde 70 mmde lluvia. ·Mmedo . en promedio,ningun mes con menos de 70 mm de Iluvia. La duraci6n de la floracion y la abundancia de flares muestra variaci6n tanto entre individuos de la misma poblaci6n en un ailo en particular como entre ailos para un mismo individuo. En un sitio de la zona humeda de Costa Rica, entre lOy 25% de los arboles no floreeieron en alguno de los tres alios estudiados, 5.5% no florecieron ningun allo y 29% no florecieron al menos un ailo (Boshier, 1992). Los arboles que no floreeieron durante todos los alios generalmente eran mas pequellos (dap promedio 25.4 ± 7.9 em, rango 14.9·44.5 em) que

I=~'

OxfordForestryInstituteTropicalForestryPaperNo. 36

Biologia Reproductiva

17

el tamafio del arbol (medido por dap). La produccion de semilla no mostre ninguna relaci6n con la produccion de flores y, como en el caso de las inflorescencias individuales, pareciera ser dependiente en primera instancia del clima y posiblemente de la proporcion de flores polinizadas por polen compatible. Se presento un grado de consistencia entre la cantidad de flores producida por arboles individuales de un ano al siguiente, con cerca de un tercio de arboles mostrando la misma cantidad de flores cada ano (Cuadro 3.6). Tambien se encontr6 una correlacion posmva estadlsticamente significativa (r > 0.5, P < 0.001) entre aftos para la epoca de floraci6n de arboles individuales, medidos por el primero, mediano y ultimo dla de la floracien. Cuadro 3.5 Nurnero promedio de dias de floracion por arbol, en relacion con la cantidad de flores (medido subjetivamente) en Cordia aliiodora durante tres estaciones de floracion, en un sitio de la zona humeda de Costa Rica (n=502; fuente: Boshier, 1992).
C8nlidad de IIores 0 1 2 3 4 5 Descripci6n sin IIores < 10 paniculas poca floraci6n fIoraci6n mediana floraci6n alia fIoraci6n muy alia No. promedio dedlas 13.7 25.7 34.8 37.1 44.8 desYiaci6n estilndar 7.4 7.9 7.6 4.8 4.7 Arboles t%l 16.2 7.3 30.2 37.1 7.2 2.0

Cuadro 3.6 Consistencia en la cantidad de flores producidas por arboles individuales de Cordia alliodora en la zona humeda, Costa Rica, durante tres estaciones de floracion (cada celda indica el numero de arboles, ·ver Cuadro 3.5 para los detalles de las categorfas; fuente: Boshier, 1992).
cantidad de !Iores en 1990 0 Cantidad de IIores en 1989 CBieaorfa' 1 2 4 :3 0 0 0 0 5 0 1 0 6 15 25 2 4 20 47 15 0 3 6 0 0 0 0 2 Cantidad de IIores en 1989 Caleaorfa' 1 2 3 4 2 3 3 0 4 4 0 0 8 28 20 3 1 13 40 13 0 5 0 3 0 0 0

2 3 4 5 Cantidad de flores en 1991 0

0 20 5 19 10 2 0

5 0 0 0
3

6 0

2 3 4 5 Cantidadde IIores en 1991 0

0 20 13 20 2 1 0

0 0 0 1 1

Se calcularon los indices de sincronia de floracion para todo el rodal y para arboles individuales, en relacion con los arboles de los alrededores. La sincronia del individuo i se cakulo de acuerdo con el numero de dlas que la f1oraci6n de i se traslap6 con la floracion de todos los demas individuos en la poblaci6n. Una sincronfa perfecta ocurre cuando el valor del Indice es uno, es decir, todos los dias de f1oraci6n del individuo ; se traslapan con los dias de florae ion de todos los demas individuos de la poblaci6n. Cuando el indice es cero, no bay traslape entre ninguno de los dlas de florae ion del individuo i y los demas individuos de 1a poblaci6n. EI Indice de sincronia de 1a poblacion es la suma de los Indices para todos los individuos en la poblaci6n, dividido por el numero de individuos (Augspurger, 1983; Apendice 3). Los indices de sincronta calculados para localizadas en los alrededores de arboles seleccionados, no mostraron ningun patr6n consistente. En algunos casos, hubo mayor sincronia entre arboles dentro de un area pequena, con valores descendiendo al valor medio del rodal conforme aument6 el area de muestreo. En otros casos, con forme se aument6 el area de muestreo, la sincronia aumento al valor promedio del rodal. A 10 largo de tres estaciones de f1oraci6n, el patr6n de sincronia vari6 dentro de la misma area del rodal. Tales observaciones indicaron la naturaleza a1tamente dinarnica de la fenologia de la floracion en C. aJliodora y su influencia sobre las parejas potenciales.

2 3 4 5

0 12 3 4 0 1 0

Cantidad de fIores en 1990 Cateaoria' 1 2 4 3 3 6 5 2 4 12 2 0 4 31 39 0 0 10 56 6 0 0 5 6 0 0 0 3

5 0 0 1 0 0

3.5

Incompatibilidad y heterostilia

areas

La heterostilia es un polimorfismo controlado geneticarnente, el cual se encuentra en aproximadamente 2S familias de plantas que florecen, y se manifiesta por la presencia de dos (distilia) 0 tres (tristilia) formas f1orales, las cuales, en la mayorfa de los casos, difieren reciprocamente en la altura a la cual se encuentran los estigmas y las anteras, Esto es reconocido como un mecanismo que promueve la alogamia, y que usualmente es acompaftado por un sistema de incompatibilidad que evita tanto la autofertilizacion como la fertilizaci6n intramorfa. EI sistema de incompatibilidad es esporofitico (la reacci6n es determinada por el fenotipo de los padres en vez del genotipo del grana de polen y del estilo (Figura 3.2), de tal modo que el polen incompatible puede germinar, pero se inhibe el crecimiento del tubo germinativo, no permitiendole penetrar por el estilo hasta el ovule (cf gametofitico, con 10 cual el mecanismo de incompatibilidad actua en la base del estilo 0 del ovule). EI sistema es controlado por dos aiel os (dialelico) con 10 cual solo hay dos fenotipos en la poblacion, S (genotipo Ss) y s (genotipo 88). La incompatibilidad trabaja sobre la base de un autorechazo, de tal modo que los fenotipos 8 solo pueden cruzarse con los fenotipos s. Por 10 tanto,

D.H. Boshier y A.T. Lamb

18 Cordia alliodora: genetica y rnejoramiento

de arboles

las cruzas S x S y s x s (alocruza 0 autocruza) son incompatibles, mientras que las cruzas Ss x S5 son compatibles y deberlan producir plantulas con fenotipos S y s en iguales proporciones. Es probable que la mayoria de los casos de incompatibilidad heteromorfica

estan control ados por dos grupos Iigados en los cuaies los genes que controlan los caracteres heteromorficos estan fuertemente ligados al locus de incompatibilidad Ss, como un supergene (Richards, 1986).

Figura 3.2. Representation esquematica de un sistema heteromorfico de autoincompatibiJidad (ver texto para detalles).

ssxss

ssxSs

Ssxss

SsxSs

Desde tiempos tan lejanos como 1877, Darwin registro la presencia de heterostilia en una especie indeterminada de Cordia y note que en este caso, la variaci6n se debia unicarnente a la longitud del estilo y no reciprocamente en los estambres. Muchas especies de Cordia son heterostilas (Johnston, 1950; Opler et al., 1975; Miller, 1985); ciertamente, en una ocasion, el no reconoeer este hecho conllevo originalmente a que una especie fuese c1asificada como dos especies (c. thasiana y C. apurensis; Agostini y Velazquez, 1983). Los puntos de vista sobre la siruacion de C. alliodora han variado. Basados en especlmenes de herbario, Gibbs y Taroda (1983) estudiaron al complejo C. alliodora • C. trichotoma y distinguieron las dos especies en base a los patrones de heterostilia, ademas de diferencias en el

tamano de la flor, el tamano del grano de polen y su caracteristica mirmecofila, Miller (1985) estudi6 colecciones de C. alliodora de America Central y Mexico, y Ilego a la conclusion que la heteroslilia aparentemenle se ha descompuesto. La revision taxon6mica de Cordia sect. Gerascanthus realizada por Johnston (1950) senalo que C. alliodora era la unica especie que carecla de distilia, con flores de un solo tipo de corola con un estilo corto y estambres exertos. Del mismo modo Opler et al. (1975) informo que C. alliodora era monom6rfica, pero se refiri6 a ella como homostila, con los brazos estigmaticos apenas desiguales a las anteras. Por medio de polinizaciones controladas tarnbien encontraron variaciones en los grados de autoincompatibilidad en C. alliodora, aunque

Oxford Forestry Institute Tropical Forestry Paper No. 36

Biologia Reproductive 19

Mendoza (1965) encontre que la especie era ampliamente autoincompatible. Para tener exito en el mejoramiento de esta especie, se requiere establecer claramente la naturaleza precisa del mecanismo de incompatibilidad en C. alliodora, junto con cualquier variacion en los estilos y la relaci6n entre estos dos fenomenos. En estudios de C. alliodora, usando una combinacion de polinizaci6n controlada en el campo y en el laboratorio y microscopfa de luz y fluorescencia, fue evidente un fuerte mecanismo de incompatibilidad (Boshier, (995). Cruzas dialelicas completas e incompletas realizadas en el laboratorio en flores cortados (ver Apendice 2), demostraron la existencia de dos grupos de incompatibilidad igualmente frecuentes. Los arboles dentro de cada grupo fueron incompatibles entre si, pero compatibles con cualquier arbol del otro grupo (Cuadro 3.7). En general se encontro una muy buena concordancia entre los grupos de incompatibilidad asignados con base en observaciones microscopicas y la produccien de semilla en el campo (ver ejemplos en Cuadro 3.8). La baja produccicn de semilla de algunos cruces compatibles probablemente se debio a problemas con las tecnicas de polinizacion en el campo y a la variabilidad inherente entre arboles en cuanto a la produccion de semilIa (ver Seccion 3.3). De estos resultados se puede inferir un mecanismo de incompatibilidad dialelico, tipico de los taxones heterostilos, EI mecanismo de incompatibilidad opera de la misma manera dentro y entre las familias de polinizacion abierta: se evita la autopolinizacion pero no se reducen los cruces relacionados en favor de los cruces no relacionados (Cuadro 3.7). Cuadro 3.7. Resultados de dos juegos de cruces diahllicos completos llevados a cabo para determinar la incompatibilidad en C. alliodora (fuente Boshier, 1995). a) dialelo entre ocho arboles no relacionados
Progenitor paterno Grupo Progenitor matemo
8

b) dialelo entre siete arboles de una polinizacion abierta (athol madre 27)
Prooenitor oaterno Grupo Progenitor materna a a a b 27-6 27·10 27·16 27·17 27·18 27·19 27·20 C C C C C C C C C 27.0 27-10 27-16 27-17 C C C C

familia

de

27-18 27·19

27-20 C C C

C C C C

a a
b

x - y donde "x" es el indicador de la familia y "y" es el

indlcador del arbol individual. compatible

incompatible: C

Cuadro 3.8 Ejemplos de produccion de semilla en cruces controlados de Cordia alliodora realizados en el campo. Designacion del grupo de incompatibilidad basada en evaluaciones de crecimiento del tubo polinico (fuente: Boshier, 1995).
C6digo del arbol individual Femenino MaSQJlino Grupo incompat. Estado floral· No. Prod. total de semilla 1%\ IIcm!s 475 714 261 836 376 479 489 1434 1228 714 1635 1960 551 1091 1022 3578 47.6 5.2 613 123 0.0 27.8 0.0 12.0 11.8 6.0

6 249 609

7a

7b 226 37 160 103 133 0 172 145 43 494 267 2 218 65 12

26-11 23-1 grupo 23-7 inoompat. b 26-14 26·16 26·17 27-18

autocruza

a a a a
b

a
b

27·20 22·1 grupe 23-7 incompat b 24-10 26·16 27-16 27-17 27-18 27-19 sell

a a
b

1·16 I C I C I
I

5-8 C I C I C C I I

7·12 I C
I

16-4 18-14 19·2 20-17 21·5 C I C I C C I I I C I C I I C C I C I C I

I

a a
b

68 93 8 677 56 375 1 346 0 489 0 1262 0 1083 a 671 a 1141 0 1680 549 873 957 3566 13 0

302
13.6 04 20.0 6.4 0.3

a a
0

1·16

C I I I C C
I

C I C I C C I I

b
8

se
7·12 16-4 18-14 19-2 20·17 21·5

a a
b

C I
I

* 6 = flores

abortadas, 7a

= semilla

vacia, 7b = semilla buena

•
b b

C C

I C

C C

Los trabajosen laboratorio con material fijado cada tres horas despues de la polinizaci6n cruzada indicaron que la fertlllzacion ocurrio entre 15 y 24 horas despues de la polinizaci6n. Los cruces compatibles e incompatibles fueron facilmente distinguibles despues de este tiempo, aunque pudieron ser identificados con certeza tan pronto como nueve horas despues de la pclinizacion (ver

D.H. Boshier y A.T. Lamb

20 Cordia alliodora: genetica y mejoramiento de arboles

Apendice 2 para la metodologla). El polen incompatible generalmente germino y la superticie estigmatica easi siempre fue penetrada, pero el crecimiento del tubo polmico fue distorsionado y Iimitado a los 16bulos estigmaticos. Ocasionalmente los tubos polinieos erecieron mas alia del estigma, pero nunea mas de un euarto de la longitud del estilo (Fotos 2g y 2h). La inhibicion del erecimiento del tubo polinieo a varios niveles en el estigma es earaeteristieo del tipo de meeanismo de ineompatibilidad asociado con taxones heter6stilos (Gibbs, 1986; Richards, 1986).
Los arboles de C. alliodora presentan un continuo de tipos de estilo desde e I estilo corto, donde estos se eneuentran b~o las anteras, pasando por tipos donde el estigma y las anteras se eneuentran al mismo nivel ("hom6stilos") hasta casos ocasionales de estilos largos ubieados por encirna de las anteras (Figura 3.3; Boshier, 1995; Gibbs y Taroda, 1983; Miller, 1985). Cuando estos caraeteres fueron observados en relacion con la agrupacion de incompatibilidad de arboles individuales, emergio un patron de variacion estilar, con los arboles del grupo "a" generalmente mostrando estilos mas cortos (Cuadro 3.9). Se encontraron diferencias estadlsticamente significativas entre grupos de incompatibilidad para una serie de variables relacionadas con la variacion en la longitud de los estilos, pero no en la posicion de las anteras. Sin embargo, la situacion se complico por el efecto de la familia en muchos caracteres florales, de manera que las formas florales, excepto en los tipos de estilo corto

pronunciado (26% de los arboles estudiados), no pudieron ser asignadas con exactitud a grupos de incompatibilidad directamente en el campo. La diferencia en longitud del estilo entre grupos de incompatibilidad dentro de una familia se puede ver en la Figura 3.4, mientras que la ausencia de separaci6n donde los individuos provienen de una serie de arboles no relacionados es evidente en la Figura 3.5. En ninguno de los especimenes hubo una reduccion en la longitud del filamento de los estambres, apoyando la opini6n de que la heterostilia esta relativamente subdesarrollada en C. alliodora y se expresa unicarnente como una variacion en la longitud del estilo. No se estudiaron todos los caracteres que tlpicamente pueden mostrar variacion en taxones heter6stilos (ej. tamai'lo de las papilas estigmaticas, la apariencia del polen, numero de granos de polen por antera). Sin embargo, el diametro del polen no mostr6 variacion entre las formas (Cuadro 3.9), en coneordancia con los resultados de Gibbs y Taroda (1983). Otros estudios con especies de Cordia (Gibbs y Taroda, 1983; Miller, 1985; Nowicke et al., 1988; Nowicke y Miller, 1990) han revelado pocas diferencias entre formas 0 5010 un debil dimorfismo en estos caracteres auxiliares. En C. goeldiana, donde visualmente se reconocieron tres formas, similarmente las polinizaciones controladas mostraron la existencia de dos grupos de incompatibilidad, con los tipos "homostilos" intermedios comportandose como los del tipo de estilo largo (Kanashiro, 1986). Parece probable que trabajos similares con C. trichotoma revelarlan dos grupos de incompatibilidad dentro de las tres formas reconocidas por Gibbs y Taroda (1983).

Cuadro 3.9 Valores medios y errores estandar para caracteres florales por familia y por grupos de incompatibiIidad Cordia alliodora (fuente: Boshier, 1995). Familia Numero de arboles 7 3 6 8 F P Numero arboles
de

en

Alturadel estigma (mm) 9.33±0.88 9.28±O.83 11.17±1.11 8.95±O.70 B.l1 0.001 Alturadel estigma (mm) 9.42±1.09 10.25±0.98 2.36 0.025

Alturadel estambre (mm) 11.76±O.45 10.2O±1.10 1'.79±O88 10.88±0.90 4.02 0.022 Alturadel estambre (mm) 11.42±0.95 11.53±1.09 0.32 0.75

Alturadel estigma/ longitudde la flor O.78±O.05 0.79±0.01 O.87±O.03 0.78±0.O5 B.46 0001 Alturadel estigma/ longitudde la
flor

Alturadel estambrel longiludde la

Dor

Alturadel estambrel altura del estigma 2.41±O.72 0.93:tO.43 0.62:tO.44 1.92±0.46 14.01 0.000 Alturadel estambrel altura del estigma 1.99±0.86 1.27±0.86 2.46 0.02

Numero de arboles

Diametrodel polen (IJm)

16 23 26 27

0.98±O.O2 O.86±O.05 0.92:tO.02 0.94:tO.03 13.58 0.000 Anura del estambrel longitudde la
lIor

12 19 14 F
p

31.72±1.36 3123:tO.68 31.87±1.56 1.32 028 Diametrodel polen !Ilm) 32.16±1.46 32.06±1.6 0.24 0.81

Grupo

NLimero de arboles 37 23 t p

a
b

20

15 t P

0.7B±0.05 0.B4±O.05 344 00017

0.94±O.03 0.94±0.05 0.24 0.81

12 flores medidas por arbol individual, valores de F y t para analisis de varianza y pruebas de t respectivamente.

Oxford Forestry Institute Tropical Forestry Paper No. 36

Biologia Reproductiva

21

Figura 3.3 Cortada vertical por flores de Cordia alliodora de estilo corto y estilo largo.

Figura 3.4 Heterostilia e incompatibilidad en arboles individuales pertenecientes a una familia (no. 16) de Cordia alliodora (fuente: Boshier, 1995).

13

• grupo de incompatabilidad

.. b

+ grupo
12 _

de incompatabilidad

II Altur. del nti,m.

(mm)

10

/+++1:4:.

a:

•
7, 9 10

•• ••• •••• •• • ••••• •• .. •••

II 12

++v. t···+ + ••••••

+ ..

++ +++ + ++ + +

13

14

Altur. de ttl A"ler. (mmJ

D.H. Boshier

A.T. Lamb

22 Cordia alliodora: genetica y mejoramiento de arboles

Figura 3.5 Heterostilia e incompatibilidad en arboles no relacionados de Cordia atliodora (fuente: Boshier, 1995).

14 • gmpo de incmpllibihdad 13 8 b

+ grupo de incompalibilidad

12

II A~'ur. del ntigma (mm)

10 ~

S-i-- ..
B

*f

++ + + ++ +: +++ + + + ••• + +• :J:t-t++ • + ••• .+. + ++ ~:. • + • •• • • •• .+ ••

++ +

4·· ·
II
(mm)

+t+

10

12

IJ

14

IS

Alt .. rt de I. anten

Hubo un grado de falla bajo, pero significativo, en el mecanisme de incompatibilidad de aproximadamente el uno por ciento (ej. Cuadro 3.8). En estudios mas pequeilos, Mendoza (1965) obtuvo resultados similares con material autopolinizado, pero Opler et al. (1975) encontraron una ruptura mucho mayor del mecanismo de incompatibilidad: tres de ocho arboles produjeron cantidades significativas de semilla por autopolinizacion, 10 cual da una tasa de falla promedio cercana al 15%. Este resultado es dificil de explicar ya que, aunque el trabajo fue realizado en la region del Pacifico seco de Costa Rica, no se esperaria una diferencia dramatica en el mecanismo de incompatibilidad entre las dos regiones climatic as. Se cree que la incompatibilidad distilica es controlada por un supergene, es decir, un grupo de genes juntos ligados fuertemente en el mismo cromosoma y usualmente heredados como una unidad (mostrado en Primula spp. por Ernst, 1955 y Dowrick, 1956 y en Limonium por Baker, 1966). Los altos valores pueden deberse a la recombinacion del supergene, resultando en la ocurrencia de individuos autocornpatibles los cuales, por chance debido al pequeno tamano de la muestra, fueron muestreados a una frecuencia anormalmente alta. Los resultados de estudios de alozimas (Secci6n 4.2) apoyan la opinion de que la especie es fuertemente autoincompatible.

importante como otros aspectos de la biologia reproductiva. Se pueden utilizar varias tecnicas para estudiar los polinizadores potenciales de una especie. Sin embargo, las correlaciones entre las observaciones sobre patrones de movimiento de los polinizadores y el transporte efectivo del polen, son dificiles de mostrar y, en algunos casos, son debiles debido al acarreo de polen previo (Levin, 1981). Variaciones en el flujo del nectar en el tiempo, tarnbien pueden proveer informacion de cuando y cuales vectores son responsables de la polinizaci6n. La epoca de produccion de nectar, asi como la cantidad y calidad (concentraci6n de azucar) puede variar de arbol a arbol. Aun dentro de una inflorescencia, pueden existir patrones de producci6n de nectar que ejereen influencia en el comportamiento de los polinizadores (Frankie y Haber, 1983). La morfologia floral, en particular la presencia de plataformas de aterrizaje, la produccion de nectar y observaciones de los visitantes de las flores, sei'lala a los insectos como los vectores principales de la po1inizaci6n de C. alliodora. Esto es confirmado par los resultados de un sitio de la zona hurneda en Costa Rica, donde las intlorescencias aisladas con bolsas a prueba de insectos o a prueba de polen no produjeron semilla, en comparacion con niveles tipicos de produccion de semilla de inflorescencias abiertas las cuales florecieron al mismo tiempo (Boshier, 1992). Se ha observado una gama de especies que polinizan a C. alliodora, probablemente reflejando la naturaleza preliminar de la mayoria de los estudios y que para especies can una estaci6n de. f1oraci6n prolongada, como la de C. a/liodora, diferentes insectos pueden aetuar como polinizadores durante la estaci6n. Los polinizadores

3.6

Polinizadores

EI vector de la polinizaci6n es un factor importante en la biologla reproductiva de una especie. De hecho, el estudio de los polinizadores y su manejo, puede ser tan

Oxford Forestry Institute Tropical Forestry Paper No. 36

Biologia Reproductive

23

tambien pueden variar de una parte a otra del rango de una especie, y particularmente entre zonas climaticas, Con una variedad de polinizadores, los cuales varian en los patrones de alimentacion y vuelo, se puede esperar que los patrones de flujo de polen puedan variar tanto dentro como entre poblaciones. La apariencia pequena y sencilla de las flores de C. alliodora es ciertamente consistente con el sfndrome polifilico, no especializado, de los visitantes (Richards, 1986), donde es atraida una amplia variedad de insectos polinizadores. En tales circunstancias, las flores tienden a ser numerosas, por 10 general en inflorescencias grandes, con formas no sofisticadas, con presentacion y recibimiento simple de polen. La exactitud de la polinizaci6n cruzada es sacrificada por cualquier polinizaci6n, y como resultado, la mayoria sera autopolinizada, con polen ya sea de las anteras de las mismas flores 0 de flores del mismo individuo (Richards, 1986). Arm cuando esto es cierto para C. alliodora, se evitan los efectos de los altos niveles de endogamia mediante un fuerte mecanismo de incompatibiIidad de manera que ocurre poca aatofertilizacion. La naturaleza no especializada de las flores tambien Ie permite a C. afliodora atraer ·polinizadores y producir grandes cantidades de semillas donde se ha plantado como ex6tica (ej. Liberia, McCarter, 1988; y Vanuatu, Neil, (983).

Algunos de los visitantes estuvieron subrepresentados en la coleccion; ej. se observ6 a muchas mariposas visitando las copas de arboles grandes en los sitios de la zona humeda pero eran dificiles de recolectar. En sus extensos estudios sobre mariposas de Costa Rica, DeVries (com. pers., y 1987) report6 un numero de especies de mariposas visitando flores de C. alliodora (Papilionidae; Papilioastylus pallas, Eurytides (3 spp.), NymphaJidae; Doxocopa laure, Marpesia (2 spp.), Adelpha (2 spp.), Riodinidae; Ancy/uris inca, Anteros allectus, Chorinaea faunus, Emesis (2 spp.), Judttha molpe, Melanis (2 spp.), Rhetus arcius, Synargis mycone. Thisbe (2 spp.). Cuadro 3.10 Insectos registrados a) visitando flores de Cordia alliodora en un sitio de 1a zona humeda de Costa Rica durante tres estaciones de floracion' (fuente: Boshier, 1992) b) visitando flores de C. alliodora en sitios no identificados de la zona seca, periodos de observacion no especificados' (fuente: Opler et al., 1975).
ZQIlahUmeda Olden Coleoptera FlIllilia Genero y espeeie (no. de especies) Brenlhidae 8rtinIJJssp. (1) Callha-idae Ch8u/iogn8I/Iu&sp. (1) ClYysomelidae aalmIi;a spp. (3) Dipter. Hemiptera Hymenoptera Bibionidae' spp. (2) especie no idenlificada Apidae' Tli9<mspp.(3). PIeOeissp.(l). ~sp.(l). """" mellifrn flalicMae'
A~sp.(l)
ZonBS8C8

Familia Genero y espeeie Brenlhidae

Las flores de C. alliodora tienen corolas largas, contraidas en relacion con otras especies de Cordia. limitando Ia recompensa de nectar, pero no de polen, a aqueUos visitantes de lengua relativamente larga (Opler et al., 1975). Sin embargo, la recoleccion y observacion de insectos visitando flores de C. al/iodora en zonas hlimedas (Boshier, 1992) y secas (Opler et al., 1975) de Costa Rica mostraron una gran variedad de polinizadores potenciales incluyendo; abejas, avispas, mariposas, polillas, escarabajos y moscas (Cuadro 3.10). Tanto en zonas humedas como en zonas secas, las abejas de la familia Halictidae, los ninfalidos y las mariposas hesperidas (Hesperidae) se consideraron como polinizadores importantes (para criterio ver Cuadro 3.10). Adernas, en la zona seca, las abejas antof6ridas, las polillas de los noctuidos, geornetridos y piralidos parecieron importantes. Los piralidos no se encontraron en los sitios de 1a zona humeda, mientras que las polillas de los noctuidos y geometridos se encontraron esporadicamente, y no se consideraron importantes. Las abejas antoforidas no fueron evidentes en los sitios de la zona humeda pero otras abejas pequefias (Apidae y Halictidae) fueron visitantes frecuentes y se consideraron importantes. Las moscas de la familia Bibionidae se consideraron potencialmente importantes en los sitios de la zona humeda, pero solo estuvieron presentes en la rnitad de la estaci6n de floracion (marzo y abril) y no se registraron en la zona seca. En am bas zonas, htlmeda y seca, los colibries fueron visitantes ocasionales (tarnbien informado por Stiles, 1978).

Syrphidae Tachinidae

Anthophoridae' Apidae

Haliclidae' Sphecidae Vespidae

Vespidae S~ sep/erI/Tion8H$ ~ fralBmus lepidoplera Geornetridae Subfamilia Oenochromalinae spp.(2) flesperidae'

iJrtJanIJspro/Bus,

Ctenuchidae Geornetridae' flesperidae'

sp.(l) Noc1uidae' Nymphalidae' PYraiidae'

Nocluidae spp. (2) Nymphslidae' AnatIis fsIimJI, An8tIia ja/rrJ(JI!aB Riodinidae sw. (2)

'La frecuencia de visitas registradas, la presencia de polen de C. alliodora observado en los cuerpos de los especimenes, y la abundancia en la coleccion de referencia sugiri6 que los principales polinizadores eran de familias marcadas con un

asterisco.
'La frecuencia de visitas registradas y la eficiencia de polinizaci6n (subjetivamente basado en el comportamiento en flores y en la tendencia para el movimiento entre plantas) sugiri6 que los principales polinizadores eran de familias marcadas con un asterisco.

D.H. Boshier y A.T. Lamb

24 Cordia alliodora: genetica y mejoramiento

de arboles

Se registr6 un numero de visitantes frecuentes en las flores de C. alliodora pero fue improbable que afectaran la polinizaci6n. Entre estos, los gorgojos bruchidos (Amblycerus spp.) son depredadores frecuentes de semillas, mientras que tambien se observaron los escarabajos carnivoros de la familia Carabidae, los cuales posiblemente estaban depredando las larvas de los bruchidos. Se observe los escarabajos de Phyllophaga sp. alirnentandose de flores frescas recien abiertas, y rararnente se observe a las honnigas cortadoras (Alta sp.) removiendo flores. Se observaron muchas especies de honnigas, de las que habitan los domatios de los brotes, moviendose libremente entre las inflorescencias, pero nunca se observaron dentro de las corolas de las flores 0 en los estambres. Se observaron pocos visitantes nocturnos en los sitios de la zona humeda de Costa Rica, en contraste con los de la zona seca, donde es posible la polinizaci6n tanto de noche como de dia (Opler et al., 1975; Opler y Janzen, 1983). Un estudio en la zona humeda sobre la deposici6n de polen mostr6 que en la noche no hay polinizaci6n, con toda la polinizaci6n compatible ocurriendo durante el dia (Cuadro 3.11). En la zona seca, hubo una considerable cantidad de polinizaci6n noctuma, de la cual 5610 una pequefia proporci6n era compatible, sugiriendo que los polinizadores noctumos se movian principalmente dentro del mismo arbol. Las desviaciones estandar tan altas que se observaron para el porcentaje de flores con polen compatible, posiblemente son un reflejo del mecanismo de incompatibilidad y de la variaci6n entre arboles en cuanto a las fuentes de po len. Cuadro 3.11 Deposici6n de polen y poreentaje promedio de flores de Cordia alliodora con tubes polfnicos compatibles; flores recolectadas durante la estaci6n de floracion de 1991 en localidades humedas y secas en Costa Rica (fuente: Boshier, 1992).
SitiQ HOt. de recolecci6n No. de graoos de polen !)Ill' ostigma 8 348
error ostanda< % de noraci6. desviaOO<1 osl8roJar

inflorescencia que se abren durante la noche pueden variar desde 20 hasta 900. Con un numero de 100 inflorescencias en un arbol de tamai'io mediano, de las cuales un 20% pueden estar en floraci6n en cualquier momento, y asumiendo que todas las visitas afectan la polinizaci6n, se requieren alrededor de 18,000 visitas diarias. Sin embargo, practicamente todas las flores estudiadas tenian polen en el estigma, indicando que es poco probable que la falta de polinizaci6n sea un factor Iimitante en la reproduccion sexual de C. alliodora. A pesar que se podia esperar que ocurriera alguna polinizaci6n a partir de polinizaci6n aut6gama automatica (dentro de la f1or), particularmente en arboles de estilo corto, se present6 poca evidencia de esto. La deposici6n previa de polen incompatible en el estigma no inhibi6, sin embargo, polinizaci6n y fertilizaci6n adicional por polen compatible, de tal modo que la deposici6n de polen alocompatible nonnalmente deberia ser efectiva siempre que el estigma este receptivo (Boshier, 1992). La mayoria de las abejas y otros insectos capturados u observados en C alliodora se c1asificaron como pequenos o polinizadores de corta distancia (Frankie et al., 1977; Janzen, 1971; 1974; 1983). Algunos de estos animales posiblemente son mejores polinizadores y mils criticamente, mejores polinizadores entre arboles que otros, Las grandes inflorescencias de C a/liodora proporcionan platafonnas de aterrizaje grandes y, tipicamente, estos pequeflos polinizadores caminan por muchas flores mientras recorren la inflorescencia, de tal modo que ocurre mucha autopolinizaci6n (Janzen, 1983). Los arboles que florecen masivamente pueden, sin embargo, aumentar los movimientos de los polinizadores pequenos entre plantas al atraer gran variedad de especies, resultando en un aumento en la agresividad de las intreracciones entre especies territoriales 0 forrajeras (Frankie, 1975 y 1976; Hubbell y Johnson, 1977; Rausher y Fowler, 1979). Mientras mucha de la polinizaci6n de C. alliodora ocurre a distancias cortas, se sabe que otros posibles polinizadores como las mariposas, se desplazan, y quizas por 10 tanto, afectan el flujo de genes a 10 largo de grandes distancias (Baker, 1969). Las Boraginaceae son bien conocidas como fuentes atractivas de nectar para una variedad de insectos (ej. DeVries, 1987). C. alliodora produce nectar en un disco anular nectarifiro que esta debajo del ovario (Figura 3.3), como en todas las Cerdanae (Miller, 1985). Las flores producen un olor dulz6n y desagradable, el cual es unicamente detectado por los humanos cuando estan cerea de las flores, aunque estudios en otros generos han mostrado que otros insectos pueden detectar tales olores desde kilometres. En un sitio en la zona humeda en Costa Rica, inmediatamente posterior a la antesis, hubo poca producci6n de nectar, y el principal flujo ocurri6 en algun momento antes del amanecer aunque el inicio de la producci6n de nectar fue variable y pareci6 que algunas flores nunca produjeron nectar. La cantidad total de

zona humed.

La

Montana. T unialba,

05:30 17:00 05:30 17:00 05:30 17:00

6 190 18 206 263 215

0.0 67.6 0.0 18.3 6.5 35.1

0,0 42,5 0.0 20.7 6.7 29.0

Ion. humeoa

Sanla Rosa, Tunialba.

21 275 361 475

Bagaces, zona seca

Tres arboles muestreados cada dia durante dos dias en La Montana y Bagaces, un arbol muestreado diariamente durante seis dias en Santa Rosa: el numero de flores muestreado vari6 entre 20 y 50. Considerando el gran numero de flores receptivas presentes en un arbol en cualquier momento, se necesita una gran cantidad de visitantes 0 visitas para lograr una polinizacion completa. EI numero de flores en una

Oxford Forestry Institute Tropical Forestry Paper No. 36

Biologla Reproductiva

25

nectar producido por flor vario entre cero y mas de dos microlitros, con una concentracion de azucar entre 20% y 40"10: los valores promedios fueron mayores que los 0.94 microlitros dados por Opler et al. (1975) para las zonas secas. Con cerca de cinco millones de flores producidas por los arboles grandes durante muchas semanas, los recursos gastados en la producci6n de nectar son considerables.

cualquier ailo, y entre alios para cualquier individuo. En la zona humeda, una proporci6n de los arboles no florece en ningun aIIo, mientras en la zona seca todos los Arboles sexualmente maduros florecen cada aIIo. La produccion de flores aumenta con el tamallo del arbol, y la duraci6n de la floracion estA positivamente correlacionada con la cantidad de flores producidas. Los individuos florecen por una a ocho semanas, sin ningun pico de floracion definido. La producci6n de semilla no muestra ninguna relaci6n con la producci6n de flores y, al igual que en las inflorescencias individuales, pareciera ser principalmente dependiente en el clima y en la proporci6n de polen compatible depositado. Un fuerte rnecanismo de incompatibilidad esporofltico (con un locus dialelico) es evidente en C. alliodora, con un nivel de falla bajo (cerca del uno por ciento). Las cruzas controladas demostraron la existencia de dos grupos de incompatibilidad, con aproximadamente igual nurnero de arboles por grupo. Los arboles dentro de un grupo son incompatibles entre 51, pero son compatibles con cualquier arbol del otro grupo. EI mecanismo de incompatibilidad opera del mismo modo dentro y entre familias: se previene la autopolinizacion pero no disminuyen las cruzas relacionadas en favor de las cruzas no relacionadas, Los resultados de estudios de alozimas (Seccion 4.2) apoyan la opinion de que la especie es fuertemente autoincompatible. La fertilizacion ocurre entre 15 a 24 horas despues de la polinizacion. Las cruzas compatibles e incompatibles son facilmente distinguibles en este momento, pero pueden ser identificadas con certeza tan pronto como nueve horas despues de la polinizaci6n. EI polen incompatible generalmente germ ina pero el crecimiento de los tubos polinicos es limitado y deforme. La inhibicion del tuba polinico a varios niveles en el estigma es caracterfstico del tipo de mecanismo de incompatibilidad demostrado para C. alliodora . La incompatibilidad esta ligada a una forma relativamente no desarrollada de heteromorfia floral, expresada en la forma de variac ion de la longitud del estilo, con diferencias estadisticas significativas entre grupos de incompatibilidad para un nurnero de variables relacionadas a la longitud del estilo, pero no a la posicion de la antera. Debido a efectos de familia, en el campo no es posible detenninar el grupo de incompatibilidad de un arbol, La polinizacion de C. alliodora es predominantemente entornofila, con las flores pequeilas no especializadas atrayendo una amplia variedad de polinizadores potenciales. Se ha observado un rango de especies polinizando C. alliodora, probablemente reflejando la naturaleza inicial de la mayorfa de los estudios y el hecho de que algunos polinizadores son estacionales y varian de

3.7

Resumen

Las flores de C. alliodora abren durante la noche: • en la regi6n humeda Atlantica de Costa Rica entre las IS.00 y 01.00 Y en lazona seca de las 19.00 a las 05.00. Para cada arhol se encontr6 consistencia en la hora de la antes is de una noche a la siguiente y para cualquier arbol, todas las flores que abrian esa noche 10 hicieron dentro de un periodo de dos horas. Los estigmas son receptivos inrnediatamente en la antesis. En la zona humeda, las flores se mantienen receptivas por 1.5 a 3 dias despues de la antesis, mientras que en la region seca del Pacifico, las flores se mantienen receptivas s610 por un dia. Por 10 general, las ramillas de las inflorescencias comienzan a florecer a unos pocos dias unas de otras, pero sin ningun patron observable. La lIuvia prolongada puede tener un efecto dramatico: las anteras no se abren y usualmente se desprenden de las flores; pocos polinizadores estan presentes, no ocurre polinizacion; se demora la antesis e incluso ocurre durante el dia; se detiene el desarrollo de las flores y, despues que cesa la Uuvia, hay un periodo sin apertura floral.

La mayoria de las perdidas evidentes en floracion ocurren

algunos dias despues de la antes is. Las perdidas son debidas a la deposicion de polen incompatible y al irecbazo de flores polinizadas por polen compatible, y no (por falta de polinizacion, Un nurnero pequeilo de botones .florales produce semilla; sin embargo, existe un alto grado de variacion en la producci6n de semilla entre las ramillas de una inflorescencia, entre inflorescencias y entre arboles individuales.

La temporada de f1oraci6n varia a traves de la distribucion

IllltUraI. Infonnes contradictorios en la Iiteratura obedecen

IItamallo pequeilo de muestra usado en los estudios y a la

Vlriaci6n entre poblaciones cercanas geograficarnente. En M6xico, Centro America y el Caribe, la floracion pncralmente se inicia cerca de diciembre pudiendose elrlender hasta abril, mientras que en el extremo sur de su ago, la floraci6n se inicia en enero. Pareciera que la flDracion es mas prolongada en dimas no estacionales; ej. iii Colombia ocurre durante todo el aIIo bajo tales ClClndiciones. iLa duracion del periodo de florae ion y la abundancia de 'ftores varia entre individuos de la misma poblacion, en

D.H. Boshier y A.T. Lamb

26 Cordia alliodora: genetica y mejoramiento de arboles

una parte a otra del Tango de distribucion de C. alliodora; particulannente entre zonas climaticas. Los insectos recolectados y observados visitando las flores de C. alliodora en las zonas humedas y secas de Costa Rica incluyeron abejas, avispas, polillas, mariposas, escarabajos y moscas, muchas de las cuales son pequei\as y polinizadores de corta distancia. En un sitio de la zona humeda, inmediatamente despues de la antesis, hubo poca producci6n de nectar; el principal flujo de nectar ocurri6 en algun momento antes del amanecer. Hay una gran proporci6n de autopolinizacion; sin embargo, se evitan los efectos de los altos niveles de endogamia mediante un fuerte mecanismo de incompatibilidad, de manera que ocurre poca autofertilizaci6n.

Hay una tasa de falla muy baja en el mecanismo de incompatibilidad: no se requiere de la emasculacion para lIevar a cabo polinizaciones controladas despues de asegurarse que el arbol es autoincompatible. La incompatibilidad de una proporcion tan alta de cruces tiene implicaciones importantes para el mejoramiento genetico para asegurar niveles similares de ganancia y reducir los peligros potenciales de la endogamia, la poblacion de mejoramiento debera tener el doble del tamai\o normal. Los disellos de cruzamiento en generaciones de mejoramiento avanzado generalmente han asumido que todos los cruces seran completa 0 mayormente compatibles, pero para C. alliodora este no es el caso. Las implicaciones son consideradas adicionalmente en el Capitulo 8. EI conocimiento acerca de los polinizadores de C. alliodora, sus patrones de alimentaci6n y de vuelo, y por 10 tanto su efecto en el flujo de genes, es rudimentario.

3.8
•

Implicaciones
La producci6n de semilla en C. alliodora, generalmente es abundante y no pareciera ser problematica, aun en ambientes ex6ticos. Esto puede causar problemas cuando recolectores inescrupulosos recogen grandes cantidades de semilla de unos pocos arboles, 0 cuando la estrategia de recolecci6n no esta planeada adecuadamente. Es particularmente importante seguir las directrices de recolecci6n presentadas en este documento (Capitulo 6), a fin de evitar muestras de semillas que contienen grandes cantidades de semilla inmadura y bajos niveles de variabilidad genetica. Para cada arbol, el periodo de floracion prolongado y ellargo periodo entre la rnaduracion de la sernilla y la dispersi6n natural demostraron la necesidad de retrasar la recoleccion de semilla para asegurar una maxima representacion de semilla madura. La recolecci6n prematura de semilla no solo dara lotes de semilla con un bajo porcentaje de germinacion (Capitulo 6), sino tambien resultara de un muestreo sesgado de los arboles de floracion temprana y por 10 tanto una muestra no balanceada del pool de genes. Los grupos de incompatibilidad de arboles individuales no pueden ser determinados con certeza a partir de observaciones de la rnorfologia floral. La determinacion de los grupos de incornpatibilidad se pueden hacer de manera relativamente simple y rapida por rnetodos de laboratorio (Apendice 2). No se han encontrado diferencias en los cruces reclprocos, por 10 tanto el uso de medios dialelos, incluyendo las autocruzas, es suficiente para determinar los grupos de incompatibilidad. •

La naturaleza no especializada de las flores atrae una variedad de polinizadores potenciales. Aunque ocurre mucha autopolinizaci6n, la deposition de polen incompatible no inhibe la posterior polinizacion y fertilizaci6n con polen compatible.

amplia

• •

Las visitas abundantes a las flores en Costa Rica por la abeja melifera exotica (Apis melli/era), y la producclon de grandes cantidades de semilla viable de C. alliodora en Liberia y Vanuatu como exoticas indican que es improbable que exista escasez de polinizadores ailn en ambientes exoticos, Por el contrario, la abundante produccion de semilla puede indicar un problema potencial como mala hierba cuando se planta como exotica.

Referencias Agostini, G., Velazquez, D. 1983. Notas sobre Cordia thaisiana Agostini (Boraginaceae), Ernstia 16: 14-

15.
Alvim, P. de T. 1960. Moisture stress as requirement flowering of coffee. Science 132: 354. for

Augspurger, C.K. 1982. A cue for synchronous flowering. In: The ecology of a neotropical forest: Seasonal rhythms and longer term changes. eds. Leigh, Jr., E.G., Rand, A.S., Windsor, n.M. Smithsonian Institution Press, Washington, D.C. pp.

133-150.

Oxford Forestry Institute Tropical Forestry Paper No. 36