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CHARLES E. PADILLA GÁLVEZ
„
DAME

j Es una tinción muy usada para micobacterias,
cuando el volumen de muestras a examinar es
elevado. Se fundamenta en la afinidad que poseen
los ácidos micólicos de la pared celular de las
micobacterias por los colorantes fluorescentes o
fluorocromos Auramina y Rodamina.
j Estos colorantes se fijan a las bacterias que
aparecen de color amarillo o naranja brillante
contra un fondo oscuro.
j n aspecto importante de la coloración rodamina-
auramina es que luego los frotis pueden ser
reteñidos con la coloración de Ziehl-
eelsen o
Kinyoun directamente sobre la tinción con el
fluorocromo, si se elimina antes el aceite de
inmersión.
cnica
j 1. Extensión.
j 2. Desecación.
j 3. „ijación. Dejar enfriar.
j 4. Coloración: Cubrir la preparación con el
colorante auramina-rodamina previamente filtrado.
Mantenerlo así durante 15 min.
o hay que
calentar.
j 5. Lavar con agua destilada.
j 6. Decoloración con alcohol -HCl. Cubrir la preparación
con el decolorante y dejar actuar de 3 a 4 minutos.
j 7. Lavar con agua destilada.
j 8. Añadir permanganato potásico al 0,5% en agua destilada
y dejar actuar de 2 a 4 minutos. El permanganato se utiliza
para eliminar la fluorescencia residual de los desechos de
fondo. Pero debe evitarse el tratamiento excesivo con el
contra colorante porque puede rebajar la intensidad
fluorescente de los bacilos coloreados.
j 9. Lavar con agua destilada.
j 10. Secar al aire y observar con el microscopio de
fluorescencia.
j El agudo contraste entre las micobacterias coloreadas
brillantemente y el fondo oscuro ofrece las grandes
ventajas de una fácil, rápida y completa observación.
Puede usarse un objetivo de 25X (100X en la tinción
de Ziehl-
eelsen y similares), para observar el frotis,
lo que permite la inspección de un área extensa en poco
tiempo. tras ventajas son el mejor contraste, el
mínimo esfuerzo visual y la relativa falta de
Importancia de la agudeza para el color del observador.

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A ME
 400X 1000X

MAXIM DE 30 300
CAMPS
SERVADS

IEMP AL 3 Minutos 15 Minutos

PARA SERVAR S:96.5%

EXE
DID E: 98%
CLRACI
DE ZIEHL-

EELSE

ACILSCPIA Y I
CI
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ACIDRRESISE
ES
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„luorescencia 83% 83% 92%

Ziehl-
eelsen 61% 66% 80%

CLRACIÓ
A A RAMI
A-
RDAMI
A