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FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA INSTITUTO DE QUIMICA ORGANICA APLICADA A LA

FARMACIA

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INVESTIGACION QIDMICA Y BIOLOGICA DE Lepidium meyenii


Walp(MACA)
Virginia Garro Caceres, E Leon. C. Fuertes,

E. Carrasco La maca (Leptdium meyenii Walp), siendo un cultivo oriundo 0 tradicional, basta el momento no es considerada importante; por el contrario han disminuido las areas dedicadas a su cultivo. Esto se debe ala falta de incentivo a la produccion. Nuestro proposito es mostrar parte de los resultados de la investigacion sobre la obtencion de la fructosa, de gran importancia en la tecnologia alimentaria. Introduccion El proyecto es un estudio acerca de Lepidtum meyenii Walp, planta descrita por los cronistas bajo el nornbre de maca, ligada a nuestra cultura. Fue utilizada por nuestros antepasados como ali mento, reconstituyente y estimulante; por tradicion, aun se consume. Se cultiva en Junin, cuya alturaes de 3800 - 4100msnm. Nos impulse a realizar este trabajo la riqueza de alcaloides y azucares que posee esta especie botanies, asi como su accion en el organismo humano, enfuncion de su composicion. Metodo a) Cromatografia en capa fina analitica. Para la operacion de separacion y purificacion seemple6

Silicagel G-60 previamente bufferados con fcsfatomonopotasico, utilizando como sustancia de solvente acetona: acetato de etilo y agua (85: 15:5), y como revelador Napto Resorsinol. Para el proceso de purificacion se acetilo la muestra problema y el standard y se identific6 por cromatografiaen capafina y espectroscopia, que se realize en los laboratorios Mobil Oil del Peru y Castrol del Peru. b) Equipos e instrumentos. Equipo de Soxhlet modificado. Rota Vapor. Equipo Desaga completo e infrarrojo. c) Parte experimental. Polvos de tuberculo
(Lepidtum meyenii Walp).

1. Extraccion en Soxhlet con metanol 900 g. (durante 48 horas). 2. Concentrado al vacio con Rota Vapor. 3. Redisolver con 200 ml de metanol y cIorofonno. 3. 1. MetanoJ. Azucares monosacaridos
(Fase metanolica).

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3. 2. Fasecloroformica. Contienealcaloides, seacidifica, luegose alcalinizaapH8,5 y se extrae con diclorometano.


3.2.l. Alcaloides crudos,

d) Tratamiento del extracto metancliee. El extracto previamente acetilado dio reaccion positiva para el monosacarido fructosa por cromatografia en capa fina y par espectroscopia infrarroja. e) Resultados. Se realizo la marcha fitoquimica a partir del extracto metanolico del tuberculo seco y pulverizado, que revelo la presencia de
fructosa y la identificacion de alcaloides.

TffiWREMA

~ . UNMSM

INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA

INVESTIGACION DE SISTEMAS SANGUINEOS EN LIMA (I PARTE)


Teodomiro Lucano Carbajal. J. Parreno, T. Astocondor, E Flores

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Creite y Landois comunicaron en 1869 y 1874, el descubrimiento de fenomenos de heteroaglutinacion e isoaglutinacion, este ultimo en la raza humana, sin mayores explicaciones, Bordet, en 1895, interpreto la heteroaglutinacion como consecuencia de diferencias quimicas, y Landsteiner, en 1900, descubrio el sistema sanguineo ABO, a los que llam6 A,B, C. Landsteiner inicia asi una serie de brillantes estudios y observaciones que 10 llevo a ocupar el primer puesto entre los inmun61ogos del siglo, aunque solo en 1930 se le reconocio otorgandole el Premio Nobel. Decastelo y Sturli, discipulos suyos, individualizaron en eI afio 1902, el poco frecuente tipo AB y enseguida Landsteiner comunico su teoria de los cuatro grupos sanguineos. Schults en 1910, Y Ottenberg en 1911, introdujeronelmetododeestimareJgruposanguineo antes de la transfusion, y con gran perspicacia Ottenberg y Kaliski sefialaron que el peligro principal que entraflaba la transfusion es la accion del suero del receptor sobre los hematies del donante. Nuevamente en 19 l 1, el sistema ABO es revisado al descubrir Von Dungern y Hirszfeld los subgrupos Aj y A2. Mas adelante, se conocieron nuevos alelomorfos del tipo A, como el A3, A4, As YA6• de poca importancia en clinica pero grande en genetica
y antropologia.

antisueros antiM y alltiN, 10 que dio origen at sistemaMN. Estos sistemas sangulneos tienen mucha importancia transfusional genetica, antropologica, en Medicina Legal y en cas os de migracion poblacional. Porestas razones, es necesarioconocer y/oactualizar lafrecuencia porcentual de portadores de los referidos aglutinogenos en la poblacion de Lima, motivo de esta investigacion. Asi, en la II Parte de la investigacion podemos reportar los siguientes resultados:
SISTEMA ABO: Grupos Sangulneos
GrupoO GrupoA, GrupoB GrupoAB 70% 20%

SISTEMA Rh·Hr:
Grupos SanguillC(Js Rho(D) positive 92% Rho(D} tregativo S%

SISTEMA MN:
Grupos Sanguine os GrupoM 42% Grepo N 30% GrupoMN 28%

S%
2%

Se puede apreciar que todos los grupos A son Aj' De18% de Rh,,(D) negatives, 4% son Rh.,'(C) positivos y 4% de Bra' son positives.

EFECTOS DE LA INTOXICACION POR INHALANTES EN NINOS


Jesus Lizano Gutierrez, J Ito,

En 1937 Landsteiner y Wiener descubrieron el factor Rh, formado por varios aglutinogenos: Rh o segun Wiener y D segun Fisher-Race Rho' segun Wiener y C segun Fisher-Race Rh .," segun Wiener y E segun Fisher-Race Vinculados a estos tres aglutinogenos existen tres faetores alelicos denominados Hr que son: Hr; segun Wiener y d segun Fisher-Race Hr: segun Wiener y c segun Fisher-Race Hr segun Wiener y e segun Fisher-Race En 1927 Landsteiner y Levinedescubrieronlos
0"

Los nifios de alto riesgo, nifios abandonados 0 que voluntariamente dejaron su casa y que viven en las calles son usuarios de las sustancias inhalantes contenidas en los adhesives de contacto, altamente toxicos y mas para un organismo en desarrollo. Los daiios organicos que ocasionan se dan a nivel de celulas hepaticas, SNC, sistema hematopoyetico y otras. Aiiadido al trastorno de conducta que provocan al interferir con la percepcion de diversos estimulos fisicos, emocionales, intelectuales y sociales durante fa etapa de desarrollo y consolidacion de la personalidad, provocan un verdadero estado de detenci6n del desarrollo fisico, el cual es agravado por un posible estado de desnutricion. Dada la trascendencia de este problema social,

THEOREMA'.

UNMSM

y considerando los pocos estudios directamente relacionadosconelproblemamencionadoennuestro medio, se muestrearon sangre y orina de 25 menores inhaladores y 20 menores aparentemente sanos en su domicilio, en edades de 10 a 15 aiios. Se evaluaron los metabolitos principales de los solventes deadhesivos de contacto: Tolueno (acido hipurico), acetato de etilo (alcohol etilico) y del benceno (los fenoles totales y libres). Asimismo se determinaron los valores bioquimicos-clinicos en sangre y orina: Transaminasas GOT y GPT, glicemia, recuento de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, recuento de leucocitos y hemograma. Se encontraron diferencias altamente significativas en los valores de acido hipurico y alcohol etilico, los cuales dieron una cifra media de acido hipurico gIL de 1,41 ± 0,162 para los no inhaladores yde 8,20± 5,77parainhaladores; yde alcohol etilico gIL de negatividad para los no inhaladores y de 0,226 ± 0,207 para inhaladores. Asimismo se encontraron cifras estadisticamente significativas en los valores de fenoles totales y libres; igualmente en los valores de glicemia. Actualmene se sigue evaluando los metabolitos y sintomatologia para identificar un cuadro clinico que caracterice el abuso de estas sustancias.

se usan en el Peru para elaborar el "Catalogo de Medicamentos Vegetales". 2. Difundir el conocimiento y usa cientifico de los medicamentos. Procedimiento 1. Se elaboraron encuestas dirigidas a la familia usuaria del medicamento vegetal. 2. Se aplicaron encuestas en las provincias del dpto. de lea. 3. Se tabularon las respuestas.
Resultados 1. Encuestados: 200 familias. 2. Usuarios de medicamentos vegetales:

MUJERES
Ocupaci6n
%

VARONES
Ocupaci6n % 51 8

de casa Profesora Comerciante Enfennera Estudiante J~bilada


Ama

4 2 2 2 74%

Agricultor Chofer Empleado Profesor Medico Policia


Albafiil

6
6 3 3

2
2

2 24%

LOS MEDICAMENTOS VEGETALES MAS USADOS ENELPAIS


Jose Rojas Penas, B. Huaman, R. Soria

3. Medicamentos vegetales mas usados:

MEDICAlvlENTO % Manzanilla
Llanten

MEDICAlvlENTO % Linaza Valeriana Hercampure Achicoria


Hinojo 86 84 82 80 54 26 26 22
18

Eucalipto
Lim6n

Introduccion En el Peru, los habitantes de las diferentes localidades, solucionan sus problemas de salud empleando medicamentos naturales y medicamentos de patente. Los medicamentos naturales que mas se usan son los vegetaIes. Cada localidad tiene sus propios medicamentos vegetales. Vnos son nativos y crecen silvestres. Otros son oficiales y se cultivan. Fueron utilizados desde epocas muy antiguas yactuaImente se siguen usando para curar enfermedades 0 primeros auxilios, por necesidad y por tradicion, en forma empirica, no cientificamente. Objetivos I. Conocer los medicamentos vegetaIes que mas

Oregano Hierba Buena 98 Sangre de Grado 98 Paico 96 Malva 92 Ufia de Gato 88


Conclusiones

100 100 100 100 100

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Chanca Piedra Toronjil Romero


Marco

Chamico

12

I. Todas las familias encuestadas de todos los niveles culturales y economicos usan medicamentos vegetales (100%). Las mujeres los usan mas (74%). 2. Los medicamentos vegetales mas usados en el dpto. de lea son 20. Oficiales son 15. Nativos son 5. 3. Se debe difundir el conocimiento yuso eientifico de los medieamentos.
TlnUlR~M"4 &_ ITN'M~M

ESTUDIO CLINICO DE LA ESPECIE Psoralea pubescens Pers


Margarita Lobaton Erazo, J Lopez

El valor medicinal del culen (Psoralea pubescens) es conocido ancestralmente en nuestro pais, por 10 que forma parte de nuestra medicina tradicional. En el presente trabajo, se pretende fomentar el uso del culen, asi como de otras plantas medicinales, a partir de un criterio cientifico, bajo normas tecnologicas universalmente reconocidas. Por eso, preconizamos en este primer caso, el uso del culen en forma, de tintura, to que permite una elaboracion y uso en condiciones estables y bien definidas. Se sabe, al momento, que la accion carminativa y antidiarreica del culen se debe a la presencia de psoraleno, psoradilina y isopsoraleno , aparte de taninos, que son los principales responsables de Ia actividad antidiarreica,

~ Se solicito la aprobacion de los pacientes para proteger los derechos y la salud de los mismos en este tratamiento. ~ Se disefia el tipo de ensayo a efectuar durante cuatro semanas. ~ La edad de los pacientes oscila entre los 23 y 49 MOS. ~ Se considera paciente para el tratarniento aquel portador del sindrome de inmunodeficiencia adquirida estadios III y IV, con diarrea mayor de dos meses de evolucion, donde no se hallaron causas bacterianas 0 parasitarias, como origen dediarreacronica. En todos los cases, previamente fueron tratados para los hallazgos de fondo. 2. Criterio de seleccion de los pacientes. ~ Pacientes HN afectos a diarrea parasitaria y bacteriana, refractarios con presentacion del paras ito. ~ Pacientes con HIV y diarreas ocasionadas por tuberculosis intestinal 0 micosis intestinal.
3. Diseiio del ensayo clinico.

En el periodo de prueba de 4 semanas se trato a 06 pacientes intemados, a los que se administro 10 siguiente: 20 gotas de tintura de culen cada 4 horas. Los controles se efectuaron por el numero de deposiciones que inicialmente tenian rango de 3 a 8 camaras al dia. Resultados

Estudio clfnice de Psoralea pubescens Se probe la eficacia de la tintura de culen en pacientes afectados de diarrea cronica asociada a sindrome de inmunodeficiencia adquirida. Introduction El sindrome de inmunodeficiencia adquirida es una pandemia mundial que tam bien afecta al Peru, en un numero que sobrepasa los 1 000 casos registrados. Una de sus principales manifestaciones clinicas de la diarrea cronica y discurrente, con evacuaciones acuosas abundantes que, como corolario, ocasionan un marcado descenso 0 perdida de peso, deshidratacion y desnutricion, llegando a la caquexia. En estas circunstancias se estima conveniente emplear formulaciones nuevas. Conocidas las bondades tradicionales del culen, se ha preparado tintura de culen, considerando su necesidad de aplicacion en los sectores sociales con poca capacidad adquisitiva, 10 que no permite el empJeo de medicamentos de origen quimico para este tratamiento en el sindrome de diarrea cronica. Pacientes y metodos 1. Criteria de coleccion de pacientes.
THEOREMA ,. UNMSM

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Cuadro 1

Edad
CASO 01 02 03 04 05 M

Peso
F ~ ~

P.L
40 76
49
56

P.E. 40 73 48 54 46

49 43 23 44 31
23

· · ·
·

47

06

Comentarios EI presente estudio se ha realizado en pacientes del sindrome de inmunodeficiencia adquirida en un hospital nacional del Peru entre los meses de agosto del afio 1993 a febrcro de 1994. La tintura en estudio ha sido enfrentada al duro rete de tratamiento de diarrea cronica en pacientes

HN encontrandose mejoria del cuadro clinico con disminucion de la frecuencia de las camaras diarreicas a un promedio de 2 a 3 camaras al dia y disminuci6n de los dolores tipo retortijones que precedian a las mismas. EI peso de los pacientes no disminuy6 signifieativamente pero tampoco aument6. Conclusion La tintura de culen tiene efecto en el tratamiento de la diarrea cronica refractaria a tratamientos convencionales en eI SIDA, tal vez por el mecanismo de disminuir la sobreproteeci6n bacteriana (efecto bactericida) como causa de diarrea cronica, Por el tiempo de prueba no puede valorarse como suficiente, creemos que debiera ser evaluada por un periodo de 6 meses, con estudios de recuento bacteriologico de las bacterias en heces, para determinar si las causas de estas diarreas son de etiologia bacteriana por superpoblaci6n, en cuyo caso habria que valorar el efecto de esta tintura en cuanto a sus propiedades en la disminucion de la flora intestinal, que se encuentra patologicarnente incrementada. Demostro efecto antiespasm6d.ico al disminuirse los retortijones que precedian a las camaras diarreicas, 10 mismo que la flatulencia. No se pudo determinar efecto antiviral en el intestino, pues el sitio de estudio no tiene metoda de diagn6stico para detenninar diarreas virales.

CARACTERIZACION DE PRINCIPIOS ANTIMICROBIANOS DE PLANTAS MEDICINALES


Nancy Lozano Reyes, L. Vargas, E. Bonilla

Diversas plantas medicinales son empleadas en la medicina popular por sus cualidades antisepticas, antifebrifugas y desinfectantes. Existen diversos estudios sobre la determinacion de la actividad antimicrobiana en los que no se menciona con precision los responsables de dicha actividad. EI objetivo del presentetrabajo radica justamente en la identificacion de dichos compuestos haciendo uso de tecnicas cromatograficas y microbiologicas. En nuestro trabajo anterior "Actividad antimicrobiana de plantas en el tratamiento de enfermedades infecciosas" se realize un screening

antimicrobiano de diversas plantas, en las que una Gentianella ha dado resultados positivos frente a la mayoria de los microorganismos ensayados. Por esa razon se ha elegido a la Gentianella graminea, eonocida vulgarmente como chinchinali o campanilla. Esta es una Gentianaceae ampliamente distribuida en la serrania peruana, que creee sobre los 3 000 msnm, utilizada por los pobladores andinos como febrifugo, en la neumonia y para el lavado de heridas. La especie medicinal objeto de nuestro estudio fue recolectada en nov. 92 en Celendin-Cajamarca (Jalca), la cual fue identificada por el Prof. Raul Soria y el Museo de Historia Natural de la UNMSM. Los tallos y las flores de la planta seca y estabilizada fueron extraidos con metanol yetanol por maceracion a temperatura ambiente. Los extractos obtenidos se ensayaron por el Metodo de Difusi6n en Disco-Placa-Cultivo, en concentraciones de 100 mg/ml, empleando para ellos Staphylococcus aureus ATCC 6538, E. coli ATCC 25982 y C. albicans ATCC 10231, usando como patrones de referencia sulfato de estreptomicina y Nistatina (para bacterias y levadura respectivamente). Todos los extractos dieron resultados positivos frente a los microorganismos Gram positivos y solo el extracto metanolico del tallo presento actividad frente a la C. a/bicans. Los extractos que presentaron resultados posi tivos se testearon biocromatograficamente para determinar las fracciones activas. Para ella se emplearon placas de Silicagel G60 con soporte de aluminio, con el objeto de fraccionar los extractos empleando como Fases Moviles (n-hexano-acetato de etilo 6:4; BAW 5: 1:4). Los cromatogramas obtenidos fueron ensayados frente al Staphylococcus aureus y C. alb/cans. Se obtuvo una fraccion activa del extracto metanolico del tallo y tres fracciones activas del extracto etanolico de la flor; todas estas fracciones resultaron positivas frente al S. aureus. El extracto metanolico del tallo presenta una fraccion activa bastante significativa, razon por la cual se investigaron los principios responsables, utilizandose reactivos especificos, determinandose que se trataba de flavonoides. Orientamos nuestro trabajo hacia la busqueda de flavonoides, para los cual se realize un screening fitoquimico, detectandose la presencia de compuestos fenolicos, flavonoides y compuestos triterpenicos, con la ayuda de reactivos especificos para cada grupo.
THEOREMA6- UNMSM

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Mediante metodos cromatograficos se ha identificado la presencia de cinco fracciones correspondientes al grupo de los flavonoides, para los cual se empleo Silicagel G60 y un sistema de solventes (n-hexanoacetato de etilo 6:4) y con In ayuda de reveladores como luz Uv 245 y 366 run, vapores de 12, H2 SO 4 50 %, KOH sat. Metoh y FeC13• Posteriormente se aislaron por cromatografia en capa fina preparativa (Silicagel G60 I n-hexano: acetato de etilo 6:4) las cinco fracciones, las que fueron recromatografiadas por cromatografia bidimensional (Silieagel G60 BAW 5:1:4 lAc. acetico 5%) para corroborar su pureza, encontrandose solo dos fracciones puras, Las fracciones 1 y 2 se corrieron en el espectrofotometro de Diode Reverso HP 8452 A para obtener sus espectros UV -V, obteniendose los siguientes resultados: Fracci6n I A. moOH
Fraccion 2
!Ill!><

IDENTIFICACION DE METABOLITOS DE LA COCAINA EN USUARIOS DE MATE DE COCA YPBC


Mauro Chinchayan Roman, R. Anaya

208,254,278,332 208, 254,278, 338

mcOH max

Segun Mabry y Co" comparativamente estas fracciones corresponderian a los espectros de las sustancias :
Pendulin Hyrnenoxin

A~!IIl!>< 253,273,330

Am~H~

250,279,336

Cuyas estructuras corresponden a:

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O~glucosil

Antecedentes EI presente trabajo tuvo como antecedentes las pruebas de descarte toxicologico realizadas en los laboratories de toxicologia de la Policia Nacional del Peru, asi como pruebas hechas en la Catedra de Toxicologia y Quimica Legal de la Facultad de Farmacia de la UNMSM, en donde normalmente se precede a Ia identificacion del metabolite benzoilecgonina sabre las muestras de orina de los presuntos usuarios de PBC, para determinar la presencia del alcaloide cocaina. Cabe destacar que la PBC es un producto obtenido a partir de la hoja de coca, y que desde su aparicion publica en 1970 ha estado rodeada de una problematica vinculada sobre todo a su alto poder adictivo, que sin Iugar a dudas ha ensombrecido mucho a 1ahoja de coca, cuyo usa popular, debido a sus propiedades fisiologicas y terapeuticas, era ampliamente difundido entre los antiguos peruanos. Por mucho tiempo se le estuvo negando la posibilidad de ser correctamente aprovechada. Finalmente a partir del afio 82 aparecio un producto denominado "Mate de Coca DELISSE", cuya venta libre y consumo es recomendado para jovenes, adultos y ancianos. De aqui es facil deducir que si la PBC y el mate de coca son productos obtenidos a partir de la hoja de coca, entonces las pruebas de descarte toxicologico, practicadas sobre muestras de orina de sus usuarios, pueden dar resultados similares. Objetivo Realizar una identificacion de los metabolitos de la cocaina en muestras de orina obtenidas tras la ingesta del matedecoca, comodespues del consume de pasta basica de cocaina,

OH Hymenoxin

HO

OH

Seran necesarios estudios complementarios de espectros IR, RMN y Masa para confinnar 10 propuesto y elucidar la estructura de las otras fracciones.
llIEOREMA '-IlNMSM

Metodologia Cuarenta voluntarios ingirieron infusiones de mate de coca, a diferentes concentraciones; se les dividio en cuatro grupos: El primer grupo ingirio una taza que contenia una bolsita filtrante al ilia, el segundo grupo una taza que contenia tres bolsitas filtrantes al dia, el tercer grupo una taza con seis

bolsitas fiitrantes, y el cuarto grupo una taza que contenianueve bolsitas filtrantes, durante un periodo de tres was. Durante este mismo periodo se reaIizaron las recolecciones de dos muestras diarias de orina, sobre las que se realize un analisis cromatografico en capa fina, para la determinacion cualitativa de los metabolitos formados tras la ingesta del mate de coca. En segundo lugar se realiz6la identificacion de

metabolitos en el analisis de muestras de orina de treinta consumidores habituales de pasta basica de


cocaina. Teenica operatoria

Cromatografia en capa fina. Sistema de solventes: Cloroformo: metanol: amomaco. Revelador: Rvo de Drangendorff

Identificacion de cocaina y metabolitos en alurnnos del l ,? al 4.Q de secundaria (resumen)


GRUPO MATE % 34.0 8.8

Resultados

ME 85

BE

22

220

51

46

*TOTAL
385 100

11.9

Identificaeion de cocaina y metabolitos en presuntos usuarios de PBe GRUPO

PBe
'%

C 25 44.6

ME

6 10.8

BE

25 44,6

o o

• TOTAL 56 100

C= cocalna; ME= metilecgonina;

*TOTAL DE MANCHAS IDENTIFlCADAS BE= benzoilecgonina; E= ecgonina

ConcJusiones . Del estudio realizado podemos afirmar que un usuario de mate de coca puede ser confundido con un consumidor de PBC, cuando se realizan sobre sus muestras de orina las pruebas de des carte

toxicologico. El metabolite principal identificado en ambos tipos de usuarios fue 1a benzoilecgonina, existiendo tambien la metilecgonina.

Teeniea de analisis
Material biologico (orina)

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Ajusrede pH ~9
(NH.OH iO%)

Extraccion
C!orofonn oQ.P. (5mJ) AgitaciOn per 3 vecesl5 minutos. Separar la fuse cloroformica. Evaporar sin quemar ]a muestra.

Separacion
cromatografiea
Agregar gotss de eloroformo (pararedis olver Ia muestra), Picar30-4 o veces con capilares, Uevar al SIStema de solwntc;s. . Revelar conRw. de Drqendorff.

Identificacion

TIIEOREMA ,. UNMSM

Identificacilm de cocaina ysus metabolitos en orina de escolares de 1.0 a 4.0 de Secundaria

60 50 40 30 20 10
0

Grupo I

GrupoIT

Grupo Ill
Benzoilecgonina

Grupo IV
• Ecgonina

IIICocama IIIMetilecgonina 0
* Sobre 4 grupos

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THEOREMA

6 - UNMSM