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Establecimiento in

vitro de meristema de
Dianthus caryophyllus
(Clavel)
Nelson Peña – Diego Carrillo – Gustavo Robles
26/08/2010
Introducción
Dianthus caryophyllus, del griego karya= nogal y phillon=
hoja la cual su nombre vulgar es el clavel, que es una
planta originaria de la cuenca del mediterráneo, se
caracteriza por su fácil y rápida multiplicación y esto la ha
llevado a ser una de las plantas ornamentales con más
importancia dentro del comercio internacional de esquejes.

En el presente trabajo se mencionaran los pasos a seguir


para conseguir una dosis apropiada de 6-
bencilaminopurina (BAP), hormona pertenecientes a las
citocinina, para así lograr un buen crecimiento en el
establecimiento in vitro de Dianthus caryophyllus. Para ello
utilizaremos un método de desinfección apropiado para los
explantes que en este caso serán meristemas, se trabajara
con un medio de establecimiento Murashige y Skoog (MS) al
cual se le agregaran dos dosis diferentes de hormona BAP
con un número de repeticiones representativa para realizar
posteriores pruebas estadísticas analizando dos variables,
altura y número de brotes.
Hipótesis

H0= No existe crecimiento estadísticamente significativo


con la aplicación de 6-bencilaminopurina en el cultivo in
vitro de Dianthus caryophyllus (clavel).

Objetivos generales

-Determinar dosis hormonal para establecimiento in vitro de


Dianthus caryophyllus.

-Cuantificar el efecto de la fitohormona 6-


bencilaminopurina.

Objetivos especifico

-Evaluar estadísticamente dos dosis de hormona 6-


bencilaminopurina

Materiales

 45 pastilleros.
 500 ml. de medio M.S (1962)
 170 mg. de BAP.
 Papel aluminio.
 Agua destilada.
 50 esquejes de clavel (yemas apicales).
 Bisturí.
 Pinzas.
 Cámara de flujo laminar.
 Cámara de cultivo.
 3 tapas de placa petri estéril.
Dianthus caryophyllus (Clavel)

El clavel es una Planta perenne, presenta la mayor


producción y exportación en Chile, debido a su alta
demanda. Su problema para producirlas es que presenta
grandes pérdidas por contaminación en propagación no in
vitro, por lo cual escogimos esta planta para establecerlas
in vitro y reducir las pérdidas por la contaminación, por
ende utilizaremos meristemas para realizar una
desinfección de éste y así obtener plantas establecidas sin
contaminación, para luego suministrarles hormona (BAP) y
ver el crecimiento del tallo, brotes y hojas del clavel.

Desinfección

Según la bibliografía encontrada, el protocolo más


recomendado y efectivo en la desinfección de yemas de
Dianthus es:

i. Lavado con agua corriente.


ii. Lavado con alcohol al 70% por un minuto.
iii. Enjuague con agua destilada estéril.
iv. Lavado con hipoclorito de sodio al 2,5% en constante
agitación lenta por 10 minutos.
v. Enjuague para eliminar el hipoclorito de sodio.
Este procedimiento tiene que ser efectuado con total
prolijidad y asepsia ya que es un paso fundamental en la
etapa de establecimiento.

Factores y repeticiones

Factor hormonal: 6-bencilaminopurina (BAP) citocinina


Factor dosis: Se realizaran dos dosis de hormona mas un
control con 15 repeticiones cada una. Las dosis serán de 1
mg/L y 3 mg/L , haciendo un total de 45 unidades
experimentales.

Variables a evaluar y análisis estadístico

Las variables que se realizaran serán: número de hojas,


numero de brotes y altura de la planta. Todas estas
variables serán medidas cada 15 días.

Los análisis estadísticos que se realizaran serán

- T –student para determinar mejor concentración hormonal


- Correlación de Pearson para ver relación entre variables cuantitativas
*Los análisis anteriores serán ejecutados en spss.
Referencias Bibliográficas.

- www.inia.cl/medios/biblioteca/ta/NR19037.pdf , explorado el día


20 de agosto del 2010.

- RODRIGUEZ, PRETEL, SANCHEZ, MERCADO, 2007, Efecto


de 6-bencylaminopurina y acido indolacetico en la
micropropagacion in vitro de yemas de Dianthus caryophyus L.

- Pierik, R. 1988. Cultivo in vitro de las plantas superiores.


Madrid, Mundiprensa.

- Propagación in vitro a partir de meristemas de clavel Ana María


Afanador

- GUEVARA, BARNEY, VILLEGAS, Cultivo de meristemo de


clavel.
Cronograma
19-ago 26-ago 30-ago 01-sep 08-sep 15-sep 30-sep 15-oct 29-oct 15-nov 18-nov
avance
X
proyecto
entrega de
X
informe
recolección de
material X
vegetal
esterilización
X
de material
preparación y
autoclavado de
X
medio de
cultivo
verter medio en
X
pastillero

desinfección de
X
yemas
establecer
meristemas en X
frasco
verificar
explantes X X X X X X
infectados
medición de
X X X X X
variables
confección de
X X X X X X X X X X
carta Gantt
entrega y
presentación X
proyecto final

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