Microscopio Óptico

El microscopio:
El microscopio es el aparato más importante e indispensable en un laboratorio de
Histologia, su función es permitir observar la imagen de un objeto, organismo u
tejido, considerablemente aumentada.
Se Divide en 3 Sistemas:
Sistema Óptico | -Ocular: amplía la imagen del objetivo.-Objetivo: genera una
imagen real, invertida y aumentada.-Foco: dirige los rayos luminosos hacia el
condensador.
Sistema Mecánico | -Soporte: mantiene la parte óptica. Consta de la base y el
brazo.-Platina: lugar donde se deposita la preparación.-Revólver: contiene los
sistemas de lentes objetivos. Permite girar y cambiar los objetivos.-Tornillos de
enfoque: macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el
enfoque correcto.
Sistema de Iluminación| -Condensador: concentra los rayos luminosos sobre la
preparación.-Diafragma: regula la cantidad de luz que entra en el condensador-
Espejo: Tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en
todas las direcciones.

Partes de Microscopio

Pie: Como su nombre indica es la base del microscopio, o sea, la parte donde
éste se sostiene.
Lámpara: Es el instrumento con el que se ilumina la muestra bien sea por luz
directa o indirecta. Se dice que es luz directa (al menos yo lo digo) cuando tiene
una pequeña bombilla que es alimentada por pilas o a través de la red eléctrica y
se dice que es luz indirecta cuando se utiliza un espejo situado donde tendría que
estar la bombilla para desviar la luz desde cualquier punto hasta la muestra, a todo
esto también es una posibilidad encontrarnos con ambos tipos de luz en un
microscopio.
Brazo: Es el cuerpo del microscopio situado entre el revolver y el pie más o
menos.
Ocular: Simplemente es por donde miramos las muestras.
Revólver: Es el aparato que se usa para girar los objetivos y ajustar el que
precisemos.
Platina: Es donde colocamos la muestra para observarla.
Objetivos: Se usan varios para dar más o menos aumento a una muestra,
podemos cambiar de objetivo con el revolver.
Portaobjetos sirve para colocar la muestra que vallamos a observar.
Cubreobjetos: Se usa para cubrir las muestras que vallamos a observar
Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina
hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y el
micrométrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la
platina a una determinada altura.
Tubo: es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera.

Sistema Óptico e iluminación

La parte óptica fundamental del microscopio está formada por dos sistemas
centrados de lentes de aumento o convergentes: el objetivo y el ocular, y por el
aparato de iluminación, que facilita y mejora la observación microscópica.

El objetivo
Está compuesto por un sistema centrado de lentes convergentes. Existen distintos
tipos de objetivos, que se diferencian por las características de su composición, o
por la manera de utilizarse:
Objetivos a seco: En éstos, el aire se interpone entre su lente y el preparado. Los
objetivos más comúnmente utilizados son de 4, 10, 40 y 45 X.
Objetivos a inmersión: Se distinguen de los anteriores porque entre la lente y el
preparado se debe interponer un medio transparente con un índice de refracción
(n) superior al del aire (n=1), y semejante al del vidrio (n=1.5), que permite
aprovechar un mayor número de rayos refractados por el preparado para la
formación de la imagen. El medio utilizado es un aceite de inmersión, como por
ejemplo el aceite de cedro. La distancia al preparado utilizando estos objetivos es
muy pequeña y suelen tener un muelle protector para evitar roturas.

El ocular recibe la imagen dada por el objetivo. Está compuesta por dos lentes: la
inferior o colectora, y la superior, o lente ocular.

El aparato de iluminación
Situado debajo de la platina, está formado por:

Espejo: cuando existe, posee una cara plana y otra cóncava destinadas a
proyectar el haz de rayos que iluminará el objeto, dirigiéndolos hacia arriba del eje
óptico. Los microscopios con luz incorporada generalmente no poseen espejo.
Condensador: está constituido por un sistema de lentes convergentes que
proyecta sobre el preparado en forma de un amplio cono el haz de luz que lo
atraviesa. Concentra los rayos luminosos procedentes de la fuente de luz sobre la
preparación.
Diafragma: dispuesto debajo del condensador, sirve para graduar la cantidad de
rayos luminosos que llegan al objeto.
Filtros de luz: son placas de vidrio coloreadas que dejan pasar las radiaciones de
longitud de onda más convenientes para la más adecuada observación (қ=400-
500 nm), absorbiendo las restantes.

USO DEL MICROSCOPIO

USO CORRECTO Y NORMAS DE SEGURIDAD E HIGIENE
1. - Ya que está el microscopio óptico en la mesa de trabajo, se quita el forro.
2. - Se le quita el nudo al cable y se conecta.
3. -Se coloca la muestra para observar.
4. - Se coloca la muestra de adelante hacia atrás, abriendo las pinzas con
cuidado, colocando la lámina con la muestra.
5. - se enciende la lámpara del microscopio.
6. - Se acomodan los oculares de tal forma que se puedan observar las imágenes
en un solo campo.
7. - Se moverá el carro del microscopio óptico para centrar la imagen con los
objetivos.
8. - Para dar inicio a observar la lámina, el objetivo debe estar colocado en el
numero 10, si no está colocado en la forma correcta, será necesario mover el
revolver a la derecha o ala izquierda
9. - Nunca se debe empezar a observar con el objetivo 40x o 100x10. - Con el
tornillo macrométrico sube la platina para observar la imagen.
Después de utilizar el microscopio óptico se deberá hacer lo siguiente: 
1. - apagar la lámpara
2. - se quita la lámina con la muestra
3. - se cierran los oculares
4. - se baja la platina.
5. - Se mueve el carro para que quede en la posición correcta.
6. -Se desconecta el cable que alimenta de corriente a la lámpara del mismo y se
hace nudo.
7. - Los oculares y los objetivos se limpian
8.- Se coloca el forro.

Tipo de microscopio | Características

Microscopio de luz polarizada | -Es usado para trabajos de mineralogía, así
como investigaciones histológicas y microquímicas.-Su función es transformar la
luz natural en luz polarizada.
Microscopio de campo oscuro | -Es usado en la observación de objetos
sumamente pequeños (menores a 0.1 micra aunque mayores a 0.001 de micra).-
Su función es hacer que los organismos se observen como cuerpos auto-
luminosos sobre un fondo oscuro.
Microscopio Electrónico | -Es usado para investigaciones de ultra estructuras
celulares, microorganismos, virus, etc.-Su función es obtener el control de los
aumentos deseados así como el enfoque de las estructuras por medio de cambios
en la corriente electrónica.
Microscopio de fluorescencia | -Es usado para detectar sustancias con
autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos.-Su
función es suministrar imágenes de calidad y agilizar el flujo de trabajo.
Microscopio por contraste de fases | -Es usado en la observación de
estructuras transparentes.-Su función es permitir poner de manifiesto estructuras
de diferentes espesores.
 Microscopia
Microscopía es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los
objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del
ojo normal.
Si bien el microscopio es el elemento central de la microscopía, el uso del mismo
requiere para producir las imágenes adecuadas, de todo un conjunto de métodos y
técnicas afines pero extrínsecas al aparato. Algunas de ellas son, técnicas de
preparación y manejo de los objetos de estudio, técnicas de salida,
procesamiento, interpretación y registro de imágenes, etc.

Microscopía óptica: (microscopía de luz clásica), consiste en hacer pasar luz

visible de una fuente (difractada, reflejada o refactada en el sujeto de estudio) a
través de lentes ópticos simples o múltiples, para lograr una vista ampliada de la
muestra[2] . La imagen resultante puede ser detectada directamente por el ojo
humano, impresa en una placa fotográfica o registrada y mostrada digitalmente (y
eventualmente almacenada en algún soporte digital). Ejemplo:

Uso de la Microscopia e Importancia

Microscopía óptica normal (de campo brillante coloreado): El material a observar

se colorea con colorantes específicos que aumentan el contraste y revelan
detalles que no aprecian de otra manera.

Microscopía de campo brillante: el material se observa sin coloración. La luz

pasa directamente y se aprecian detalles que estén naturalmente coloreados.

El microscopio en campo oscuro utiliza una luz muy intensa en forma de un

cono hueco concentrado sobre el espécimen. El campo de visión del objetivo se
encuentra en la zona hueca del cono de luz y sólo recoge la luz que se refleja en
el objeto. Por ello las porciones claras del espécimen aparecen como un fondo
oscuro y los objetos minúsculos que se están analizando aparecen como una luz
brillante sobre el fondo.
Importancia: Esta forma de iluminación se utiliza para analizar elementos
biológicos transparentes y sin manchas, invisibles con iluminación normal.

Microscopía en contraste de fase: se usa principalmente para aumentar el

contraste entre las partes claras y oscuras de las células sin colorear. Es ideal
para especímenes delgados, o células aisladas. El microscopio de fase ilumina el
espécimen con un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo oscuro.
Sin embargo en el microscopio de fase el cono de luz es más estrecho y entra en
el campo de visión del objetivo, que contiene un dispositivo en forma de anillo que
reduce la intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un cuarto de la
longitud de onda. Este tipo de iluminación provoca variaciones minúsculas en el
índice de refracción de un espécimen transparente, haciéndolo visible.

Importancia: Este tipo de microscopia es muy útil a la hora de examinar tejidos

por lo que se utiliza con frecuencia en biología y medicina.
 INTRODUCCIÓN

La histología como la biología es un área muy rica visualmente, sin embargo

muchas de las estructuras son más pequeñas de lo que el ojo humano puede ver
sin ayuda, el ojo humano tiene una resolución de cerca de 100 µm por lo que para
observar las muestras histológicas no visibles para la resolución humana, se
utilizan microscopios como el microscopio Óptico.

El microscopio óptico tiene un limite resolución de cerca de 200 nm (0.2 µm). Este
limite se debe a la longitud de onda de la luz (0.4-0.7 µm). Las células observadas
bajo el microscopio óptico pueden estar vivas o fijadas y teñidas para lo cual es
importante manejar los sistemas del microscopio para obtener una imagen nítida
del tejido a avaluar lo que incluye la Microscopia que se refiere a el uso correcto
del microscopio pues este requiere varios tipos de ajuste, técnicas y métodos
destinados, los cuales son necesarios para poder ver con claridad y en todo su
detalle cada objeto que se deba estudiar.

Los organismos vivos están compuestos de células y pueden ser unicelulares o

multicelulares. Ya que la mayoría de las células no son visibles a simple vista,
para observar y estudiar células y tejidos, se usan diferentes tipos de
microscopios. El microscopio de disección, se utiliza para el estudio de objetos
relativamente grandes, de aproximadamente 0.05 a 20 milímetros. El microscopio
compuesto, se utiliza para el estudio de objetos de aproximadamente uno a 2000
micrómetros, aunque se pueden ver cosas aun más pequeñas con el empleo de
técnicas especiales, por lo que es imprescindible saber cómo usar correctamente
este instrumento, con el cual se observarán algunas preparaciones listas y
preparadas por profesionales de la salud.