ESTUDIO DE LÁMINA PERIFÉRICA

DR ROBERTO ROLDAN A. JEFE DE SERVICIO DE PATOLOGIA CLINICA DEL HOSPITAL ESSALUD III

Se debe realizar en todos los pacientes que presenten un Hemograma anormal 
ANEMIA  LEUCOCITOSIS  PLAQUETOPENIA

Estudio de Lámina Periférica
* COMPRENDE EVALUACIÓN MORFOLÓGICA
DE LOS ELEMENTOS FORMES QUE COMPONEN LA SANGRE: SANGRE: : LEUCOCITOS *SERIE ROJA : GLÓBULOS ROJOS *SERIE PLAQUETARIA: PLAQUETAS estudio de lámina periférica comprende la evaluación morfológica de las tres líneas celulares ( elementos formes ) que componen la sangre  Serie Blanca : Leucocitos  Serie Roja : Hematíes  Serie Trombocítica : Plaquetas

*SERIE BLANCA

la misma que se lleva a cabo con otro portaobjetos  El frotis sanguíneo se realiza de forma manual y automatizada ( spinner ) .Extensiones Sanguíneas  El frotis sanguíneo consiste en la extensión uniforme de una gota de sangre sobre un portaobjetos.

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Contiene la zona ideal de observación.En esta región se encuentra el mayor número de linfocitos y GR apilados .Es la zona inicial de la extensión .Su espesor es el apropiado .No es una zona de lectura  Cuerpo .Es la región mas gruesa . que corresponde a la zona que limita con la cola  .En ella existe una adecuada proporción de leucocitos .Partes de una extensión Cabeza .Es la zona media del frotis .

Es la región mas fina .Es la zona final de la extensión .Suele tener un aspecto redondeado .Toda la extensión ha de ser fina y homogénea .La cabeza ha de estar cerca de uno de los extremos del porta .Presencia de barbas en el extremo terminal . hematíes deformados y tonalidad uniforme  Características de un buen frotis . Cola .La cola debe estar cerca de uno de los bordes .Mayor proporción de leucocitos grandes.Los bordes laterales han de estar separados de los bordes del porta por 1 mm aproximadamente .

originado por una falta de uniformidad en el momento de realizar la extensión Un lámina con zonas huecas redondeadas por efecto de restos de grasa y suciedad Excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud excesivo grosor Error en el tamaño de la gota Error en la velocidad de la extensión Error por causa de un ángulo inapropiado Se debe tener en cuenta el Hto del paciente. dependiendo de esta.Defectos de una extensión        Presencia de escalones o estrías. se aplicará el ángulo apropiado de extensión .

Causas de Error en las Tinciones Habituales de Frotis Sanguíneo Si la tinción de una extensión sanguínea es demasiado rosa. probablemente se deba a : Un pH bajo de colorante Un tiempo de coloración insuficiente Un lavado excesivamente prolongado Si la tinción es demasiado azul probablemente sea por : Un empleo de portas sucios Falta de filtración del colorante Una coloración excesivamente prolongada Un secado del colorante durante al tinción Un lavado insuficiente         .

una semana hasta que madure Luego de cumplido el tiempo filtrar nuevamente Listo para su uso técnica de tinción : Cubrir el frotis con el colorante por 1 ± 3 minutos Agregar agua tamponada pH 7.2 ± 7. fuera de la luz para evitar su oxidación por aprox.Preparación del Colorante de Wright ( Merck )               Pesar 2 ± 3 gr del colorante en polvo comercial 1000 ml de metanol Glicerina ( 5 ml ) ± opcional Colocar en un mortero el colorante y añadir la glicerina Añadir de a pocos el metanol al mortero e ir machacando hasta que adquiera una coloración azul intensa y luego verter a un frasco color caramelo o ámbar. previo filtrado con papel filtro Repetir la operación hasta que se acabe el metanol Guardar en lugar oscuro.4 por 5 ± 7 minutos ( homogenizar ) Verificar la formación de una película plateada sobre el colorante Lavar con agua corriente y dejar secar Leer con objetivo de inmersión .

Una extensión de calidad no debe ser gruesa ni muy delgada Una extensión gruesa dificultará la observación de la morfología eritrocitaria y la diferenciación entre linfocitos y monocitos. que el grosor ideal. la mayoría de neutrófilos y monocitos se hallarán en las áreas periféricas.Para tener en cuenta  Un aspecto clave es el grosor del extendido. es aquel que nos permita leer a través de la extensión    . si es muy fina. Esto alterará la relación normal de la distribución celular leucocitaria Se recomienda entonces. Además de dificultar al ojo inexperto la tinción de las células sanguíneas Por el contrario.

su conteo corregido será de 11.111 pmmc .000 leucocitos pmmc y 35 % de GRN.  Usted deberá reportar cualquier célula anormal o indiferenciada que observe Deberá reportar GR nucleados si estos exceden al 6% y corregirá su recuento de leucocitos con la siguiente formula : Leucocitos contados / mm3 x 100 100 + Nº hematíes nucléados = leucocitos corregidos / mm3 Ejemplo : si un paciente tiene un conteo de 15.

Poiquilocitosis.Evaluación de la Serie Roja  En este punto el observador deberá reportar su minucioso examen de los GR. indicando la presencia de Hipocromía.  Tambien indicará la presencia de células inmaduras de la serie roja si las hubieran .  Deberá reportar también inclusiones eritrocitarias y hemoparásitos si los hubiera. Anisocitosis y Poiquilocitosis.

M A D U R A C I Ó N S E R I E R O J A .

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y esto debido a su alto contenido en hemoglobina. Hipercromía : se denomina así a las células rojas profundamente coloreadas en relación al resto. mayor al que debería contener  . leve hipocromía : 6 .30 d. marcada hipocromía : > 30  Nota : la hipercromía no esta reportada aquí pero se relaciona con la presencia de esferocitos. esferocitos.Hipocromía : cuando una célula roja individual contiene un área pálida central que es mayor a la tercera parte de su diámetro se denomina célula hipocrómica  Rango medio para denominar hipocrómía en 10 campos microscópicos ( 100 ± 160 hematíes por campo )  a. moderada hipocromía : 16 .5 b.15 c. normocromía : 0 .

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      Acantocitos AHA A.C . sideroblástica AHM Enfermedad hepática Enfermedad renal PostPost.esplecnotomía Drepanocitos  Células facliformes  A. drepanocítica  Enfermedad Hb S .

megaloblastica Talasemia mayor A. hemolíticas Leucemia aguda Hiperesplenismo Megalocitos   Anemias megaloblasticas Diámetro > a 11 micras .       Esquistocitos Son GR fragmentados AHM A.

‡ ANEMIA MEGALOBLASTICA

‡ ELIPTOCITOSIS HEREDITARIA ‡ MIELOFIBROSIS ‡ TALASEMIA MAYOR ‡ TRAUMA MECANICO

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    Rouleaux Cuando los GR se presentan en fila de moneda Mieloma Multiple Incremento de gamma globulina Macroglobulinemia de Waldenstrom .

Dianocito Célula en Tiro al Blanco ‡ ESTOMATOCITOSIS HERDITARIA ‡ LEUCEMIA AGUDA ‡ ALCOHOLISMO CON ENFERMEDAD HEPÁTICA ‡ ARTEFACTOS ‡ TALASEMIAS .

Anillo de Cabot Cuerpos de Pappenheimer Punteado Basófilo Cuerpos de Heinz .

Pappenheimer Cuerpos de Howell Jolly Policromatofilía Reticulocitos .

Serie Blanca        La fórmula leucocitaria es la denominación usual que se da al recuento porcentual de los diferentes leucocitos que circulan en la sangre En condiciones de normalidad esta constituida por 5 poblaciones de leucocitos : Neutrófilos ( en su gran mayoría segmentados ) Eosinófilos Basófilos Monocitos Linfocitos .

lámina. . El recuento diferencial leucocitario suministra información sobre aspectos cualitativos y cuantitativos de los diferentes leucocitos de la sangre y permite la detección de células anormales  Se basa en la observación microscópica de 100 a 200 leucocitos dispuestos en una extensión de sangre ( frotis ) convenientemente teñida  La calidad de la extensión de la sangre es de vital importancia para la realización de una correcta lectura de la lámina.

Variables que pueden influir en la formula leucocitaria realizada mediante el método visual      Distribución irregular y no aleatoria de los leucocitos en la extensión Realización de la lectura en una zona inapropiada Variaciones de la calidad y las características de la tinción ( tinción ácida o básica ) Observación de un número insuficiente de células Pericia del observador en la identificación celular  neutrófilos segmentados Vs neutrófilos en banda  monocitos Vs linfocitos activados o atípicos  formas inmaduras de granulocitos neutrófilos .

SERIE MIELOIDE .

rojizo y tiende a centrarse Su cromatina es laxa y contiene de 2 a 3 nucleolos visibles Su citoplasma es basófilo y algunas contienes finas granulaciones azurófilas . grande. redondeado.Mieloblastos :      Es redondeado Diámetro entre 15 ± 20 µ Su núcleo es grande. redondeado.

redondeado. repleto de gránulos primarios muy azurófilos .      Promielocito : Se origina por maduración y maduración del mieloblasto Es redondeado Diámetro de 16 ± 25 µ Núcleo grande. grande. puede ella. menos rojizo y tiende a excentrarase Cromatina laxa y generalmente se observa nucleolos en ella. presentar zonas de condensación Citoplasma abundante. abundante. redondeado.

M I E L O C I T O S .

JUVENILES O METAMIELOCITOS .

METAMIELOCITOS .

CÉLULAS EN BANDA O EN CAYADO O ABASTONADOS .

Células Neutrófilas en Banda .

Neutrófilos Vs No Segmentados Neutrófilos Células en Banda .

de tamaño entre 12 y 14 um. así como cierto número de gránulos primarios ( 10 ± 20 % ) o azurófilos dificilmente visibles al quedar enmascarados por los neutrófilos. NEUTRÓFILOS POLISEGMENTADOS     Son células redondeadas. Su núcleo es de color violeta oscuro y presenta cromatina densa Algunas veces su núcleo presenta un pequeño ápéndice en ³palillo de tambor´ ( cromatina sexual ) . El citoplasma es rosa pálido y contiene numerosos gránulos neutrófilos que se tiñen de color marrón con las coloraciones panópticas habituales. um. Su núcleo está segmentado en 2 a 5 lóbulos. cromatínicos. neutrófilos. unidos por unos finos puentes cromatínicos.

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Granulaciones Tóxicas Pelger .Huet .

Vacuolas Citoplasmáticas Vacuolas Degenerativas .

. anafilaxia.BASÓFILO  Poseen un núcleo bilobulado y grandes gránulos esféricos basofílicos y metacromáticos dados por heparina e histamina. Liberan además aminas vasoactivas y sustancia de reacción lenta de la anafilaxia.

hidrolasas. ácida. gránulos. ácida. hidrolasas. violeta. etc . grandes y acidófilos que no cubren el núcleo Estos gránulos se tiñen con la eosina y contienen diversas sustancias como la peroxidasa.Eosinófilos      Célula redondeada 12 ± 17 µ Núcleo violeta. generalmente bilobulado simétrico unido por un puente de cromatina o en forma de anteojos Presenta gránulos. fosfatasa peroxidasa.

Serie Linfoide: Linfocitos Linfoblasto Prolinfocitos .

generalmente elevada pero pueden presentar zonas mas laxas . pálida.Linfocitos        Diámetro variable de 7 ± 18 µ Pueden diferir en su relación N/C El citoplasma es variable ( escaso o abundante ) Su coloración es azul pálida. Es estadíos. pero aumenta en los linfos reactivos ( estimulados ) Pueden presentar una granulación azurófila escasa en el ciptoplasma Núcleo redondeado y cromatina compacta La densidad de la cromatina puede variar entre los diferentes estadíos.

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LINFOCITOS ATÍPICOS .

MAS LINFOCITOS ATÍPICOS .

basófilo. con zona clara perinuclear adjacente al núcleo Puede contener una o mas vacuolas No presenta granulaciones citoplasmáticas . basófilo. moderado.Plasmocitos         8 ± 20 µ de diámetro Relación N/C 2:1 o 1:1 Núcleo redondo u oval Cromatina densa azul ± purpura con grandes muescas cerca al margen nuclear No presenta nucleolos Citoplasma moderado.

incluye macrófagos (histiocitos). osteoclastos. Poseen un núcleo excéntrico en forma de U ó en forma ³arriñonada´ El núcleo suele presentar una ubicación central 14 ± 20 µ de diametro Citoplasma abundante y de color lila pálido Presenta fina granulación azurófila Presenta cromatina laxa o filamentosa En ocasiones se halla vacualizado Son los precursores del sistema mononuclear fagocítico. .MONOCITOS         Son las células circulantes de mayor tamaño. células de Kupfer en el hígado y la microglia en el sistema nervioso central. que fagocítico. macrófagos alveolares.

Promonocito Serie Monocítica Monoblasto Monocito .

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degranuladas. frotis. . degranuladas. es decisivo. pequeñas o macroplaquetas Se debe informar si existe la presencia de agregados plaquetarios Es muy importante una impecable técnica en el momento de realizar el frotis.Serie Trombocítica      Debemos reportar la cantidad de plaquetas en lámina ( trombocitopenias o trombosis ) Debemos dar un informe detallado sobre la citomorfología de las plaquetas Reportar si hay plaquetas normales.

Promegacariocito Megacariocito en Brotación Megacariocito Granular Megacariocito Productor de Plaquetas .

000 : 100.Serie Trombocítica Las plaquetas son las células sanguíneas mas pequeñas del organismo  Se producen por fragmentación simple del citoplasma de los megacariocitos.000 .50.000 a 450.10 días y su rango va de 150.000 .  poseen una vida media de 7 .000 .000 pmmc  Trombocitopenia : Leve Moderada Severa : 150.  Son células anucleadas de forma discoide de 2 ± 4 micras de diámetro y 8 micras de volumen.100.000 : < 50.

Macroplaqueta Plaquetas Normales • 450.000 pmmc se denomina trombocitosis se denomina trombocitemia . 000 pmmc • 1¶000.

39 ( + 3 ) Hto : • 40 ( + 1 )    .Recuento en Lámina Periférica Damacheck :  ( Rcto 1000 GR + F ) x 100  Factor = ? Hto ” 35 ( + 5 ) Hto : 35 .

GRACIAS .

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