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INFORME 2_Benzodiazepinas

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INFORME DE LABORATORIO PRÁCTICA 3 DETERMINACIÓN DE BENZODIACEPINAS ² TRANQUILIZANTES MENORES

Cristian Alexander Guzmán Santofimio. Cristian Alberto Triana Basabe. Andrea Vivian Ortegón Vergara Liseth Katherine Velásquez Martínez

Docente Edgar Hernán Beltrán

UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO TOXICOLOGIA LABORATORIO BOGOTÁ D.C 2010

2. específicamente de Benzodiacepinas (Lorazepam) en la muestra biológica adecuada para esta prueba. después de su administración. farmacológico y terapéutico de las 3. metabolización y forma de excreción. Comprender la estructura química de las Benzodiacepinas y el efecto causante en el organismo. Describir el uso benzodiacepinas. Conocer el fundamento y aplicar la técnica de Cromatografía en Capa Fina para la determinación de benzodiacepinas (Lorazepam) en Orina. .OBJETIVOS Determinar la presencia de tranquilizantes menores. su mecanismo de acción. Objetivos específicos 1.

y convulsiones. El volumen de distribución aparente es amplio (1-2 litros/kg).). El GABA es el neurotransmisor inhibitorio más importante del SNC de los mamíferos y se estima que entre el 30 y 50% de las sinapsis del cerebro son gabaérgicas. en caso de ser necesaria la vía parenteral. DISTRIBUCIÓN . pero no por receptores que contengan la subunidad 3. ansiedad. albúmina principalmente y debido a su escasa fracción libre pasan poco al líquido cefalorraquídeo.v. Las BZD clásicas interaccionan de forma indiscriminada con todos los tipos de receptores. El midazolam es el compuesto más liposoluble y el flumazenil el menos liposoluble. Las BZ son transportadas por la circulación sistémica a la circulación cerebral capilar. contracturas musculares. la duración de acción demuestra el porcentaje de distribución en tejidos periféricos. síntomas de nerviosismo. el grado de unión a proteínas plasmáticas y el porcentaje de aclaramiento y eliminación. La absorción por vía i. la de elección es la i. debido a que estas drogas luego de concentrarse en el cerebro sufren una redistribución tisular periférica sobre todo en lípidos y músculo.m. es un polialcohol muy irritante que hace precipitar la BZ en el tejido muscular y por lo tanto se absorbe mal la droga. MECANISMOS DE ACCION EFECTOS FARMACOLOGICOS Las BZ son agentes GABA agonistas indirectos (GABA: ácido gamma amino butírico) es decir que potencian o amplifican la neurotransmisión gabaérgica inhibitoria. por lo que producen relajación o sensación de calma. el comienzo de acción después de una dosis oral refleja el grado de absorción gastrointestinal (aproximadamente 30 min. Son muy lipofílicas. Generalmente. ESTRUCTURA: Las benzodiacepinas están compuestas por un anillo bencénico (A) unido a un anillo diazepinico (B). mientras que la acción ansiolítica estará mediada por receptores que contengan la subunidad 2. Se utilizan para tratar cuadros de pánico. es irregular. requiriéndose la activación de receptores que contengan la subunidad 1 para conseguir el efecto sedante. estos agentes tienen alto grado de unión a proteínas plasmáticas 80-95%. Que las BZ necesitan una transmisión gabaérgica (sin inhibidores) intacta para producir sus acciones farmacológicas están mediados por la activación de subtipos de receptores tipo A del GABA.MARCO TEÓRICO ² PRE-LABORATORIO BENZODIACEPINAS Grupo de fármacos que producen enlentecimiento de las funciones nerviosas. FARMACOCINETICA DE LAS BENZODIACEPINAS ABSORCIÓN Se absorben rápido y completamente por vía oral. salvo el clorazepato que es una prodroga y se descarboxila rápidamente en el jugo gástrico a Ndesmetildiazepam (o nordiazepam) y luego se absorbe por completo. por lo que cabe esperar de ellas todo el abanico de efectos. Cuando se administran por vía oral a los 30minutos aparecen los efectos ansiolíticos o hipnóticos. insomnio. el solvente que poseen es el polietilenglicol. así la concentración de droga libre en plasma refleja la concentración cerebral. Solo la fracción libre es farmacológicamente activa y es la que difunde a través de las membranas biológicas. La alta unión a proteínas plasmáticas también influencia en la cantidad de droga captada por el cerebro.

BIOTRANSFORMACIÓN ELIMINACIÓN En general las BZ son metabolizadas primariamente por enzimas microsomales hepáticas.  CONTRAINDICACIONES: están contraindicadas (teratogénicas. neurodermitis) o importante factor etiológico como las alteraciones psiconeuróticas que cursan con ansiedad. Frecuentemente aparece: sedación. Los ancianos. En la abstinencia alcohólica aguda. fase I) y luego conjugadas (metabolitos inactivos. La mayoría de las BZ deben ser primero oxidadas (metabolitos activos. sufriendo oxidación microsomal (fase I) y luego glucuronoconjugación (fase II). sedación. somnolencia.  USOS TERAPEUTICOS Las BZ son agentes sintomáticos y solos son útiles en tratamientos a corto plazo debido al desarrollo de tolerancia de sus acciones farmacológicas (EJ: efecto hipnotico). En el asma severa. alteraciones urinarias. En casos de intoxicación aguda mantener libres las vías aéreas. depresión. En alteraciones neuromusculares se comprobó que el diazepam es superior a cualquier otro relajante muscular como por ejemplo cari soprodol. el dolor discal de las lesiones de la columna y también el tétanos. ataxia. Puede prolongarse la vida media y producirse acumulación. Los metabolitos oxidados son activos y pueden ligarse o unirse al receptor de BZ (aunque en general poseen menos actividad que la droga madre). debido al peligro de producir apneas nocturnas y por la relajación muscular que producen las BZ podría disminuirse la capacidad ventilatoria. La miastenia es otra contraindicación de las BZ. temblor. el diazepam es el agente de elección ya que controla el insomnio y la . desorientación. Ocasionalmente: mareos. También alivia las contracturas musculares. cambios en la libido. Aproximadamente la mitad de los pacientes presentan en mayor o menor grado somnolencia durante los primeros días de tratamiento. raramente es mortal y cuando lo es seguramente la BZ se asoció a otra droga (ejemplo: alcohol). aunque la frecuencia y gravedad de las reacciones puede variar de unas a otras. fase II). amnesia anterógrada (dificultad para recordar hechos recientes) y dificultad de concentración.  EFECTOS SECUNDARIOS El perfil toxicológico de las benzodiacepinas ansiolíticas es muy parecido. dermatitis. En los ancianos debe disminuirse la dosis a la mitad. La intensidad de los efectos depende de las dosis utilizadas y son más importantes en personas con alteraciones hepáticas y en ancianos porque al disminuir su metabolismo aumenta mucho su semivida plasmática. clormezanona. enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Los pacientes con insuficiencia renal son más sensibles a los efectos depresores del SNC. puede haber acumulación de BZ. las reacciones adversas son una prolongación de la acción farmacológica y afecta al SNC. diarrea o estreñimiento. Pueden producir incoordinación motora con riesgo de caída. prurito. insomnio. En la insuficiencia hepática. La eliminación se realiza por filtración y secreción tubular principalmente metabolitos glucuronoconjugados y en menor cantidad los oxidados. baclofeno. -En pacientes con porfiria se puede producir un ataque agudo. no con otros depresores) como intento de suicidio. monitorear signos vitales y administrar el antagonista flumazenil. Excepcionalmente: hepatitis. por ejemplo. En la mayor parte de los casos. disfasia o disartria (alteración del lenguaje). cefalea.  TOXICOLOGIA Las BZ poseen amplio margen terapéutico es decir que la dosis efectiva 50 y la dosis letal 50 están muy distanciadas una de otra. urticaria. discrasias sanguíneas. en el glaucoma de ángulo estrecho (medicado o no) y en pacientes con glaucoma en ángulo abierto no medicado. debido al efecto miorrelajante que producen. A diferencia de los barbitúricos no son potentes inductores enzimáticos hepáticos. También en la hipersensibilidad a la droga. alteraciones de la visión y audición. ictericia. pueden producir síndrome de abstinencia neonatal) en el embarazo y lactancia (pasan por la leche materna). tensión emocional. Es por eso que una sobredosis de Bz (pura. Están indicadas en enfermedades orgánicas donde la ansiedad es un componente (úlcera. son más susceptibles a los efectos depresores y pueden presentar además síndrome paradojal y síndrome confusional.

etc). pero no insomnio rebote. El triazolam se prefiere en pacientes que les cuesta conciliar el sueño. por su acción rápida y vida media corta (5 horas) evitando el efecto residual matinal. flurazepam y nitrazepam poseen acción prolongada. El flunitrazepam.). Las BZ son útiles en todo tipo de convulsiones. fallecimiento de un ser querido.. antidepresivos tricíclicos. en la medicación preanestésica y en anestesiología combinadas con otros agentes (midazolam+ fentanilo por ejemplo). especialmente los enzimoinmunoensayos competitivos. También son útiles para evitar o controlar el síndrome de abstinencia alcohólica (delirium tremens). por otra parte.. producen sedación matinal. Las técnicas inmunológicas se basan en la reacción antígeno-anticuerpo y comprenden el mismo conjunto de técnicas empleadas en química clínica. se basan en la distinta solubilidad de los componentes de una muestra frente a una fase móvil y permiten la separación de todos esos componentes para su posterior identificación. Estas últimas comprenden un gran número de reacciones químicas llevadas a cabo sobre la muestra con reactivos relativamente asequibles (por ejemplo la de Trinder para salicilatos.agitación. Las técnicas cromatográficas. cocaína. o secundario a otra medicación o en el insomnio por dolor o stress (cambio de trabajo. una extracción líquido-líquido y finalmente se procedió a realizar la cromatografía en capa fina para determinar benzodiacepinas en una muestra de Orina Falsear la Mx con 6 gotas de ATIVAN Tomar 10 ml de Orina sin centrifugar HIDRÓLISIS ÁCIDA Colocar en baño de maría por 15min entre 6070º C Colocar tubo de reflujo y agitar Realizar una hidrólisis ácida con 3 ml de HCL concentrado Marcar el Erlenmeyer y cápsula de porcelana Enfriar los tubos y pasar el hidrolizado a un Erlenmeyer . Están indicadas en el insomnio sobre todo cuando es debido a mioclonos. las cromatográficas y las colorimétricas. que tiene por objeto a la vez concentrar las sustancias buscadas y eliminar las interferencias producidas por otros componentes de la orina PROCEDIMIENTO Se falseó la Muestra. Contrariamente a las técnicas anteriores el primer paso es una preparación o ´clean upµ de la muestra. TECNICAS DE DETERMINACION Existen tres grandes grupos de técnicas analíticas: las inmunológicas. opiodes. Fujiwara para hidrocarburos halogenados) y si bien han prestado y prestan un gran servicio a la toxicología de urgencia y de recursos limitados su baja especifidad y sensibilidad no permite recomendarlas para esta determinación. cannabinoides. Muchos psicofármacos pueden realizarse por polarización de fluorescencia (FPIA) y multiplicación enzimática (EMIT) y existen ´casettesµ con anticuerpos para los grupos de drogas usualmente encontrados en comas o accidentes (benzodiacepinas. se realizó una hidrólisis ácida.

.

se realiza el protocolo de la cromatografía en capa fina con sus correspondientes reactivos. Allí la muestra de orina se falseó con la adición de 8 gotas de Ativán. Finalmente. o porque la cantidad dispersada sobre la placa no fue la adecuada. nitrito de sodio (NaNO2) más NEDA (Neftilendiamina) con el fin de observar manchas o complejos de color morado-rosado. El RF es específico para cada analito y para la fase móvil. se utilizó el método de cromatografía en capa fina. El resultado del RF se tomó en base a los resultados de la mesa 3. sea por que los reactivos (NEDA y Nitrito de Sodio) estuvieran contaminados o alterados de alguna manera. Las muestras mayormente no mostraron resultados positivos o no de manera muy clara. El resultado que obtuvimos fue negativo a pesar de que se falseo la muestra. en la cual el frente de corrido fue igual a 7 cm y la distancia recorrida por el analito fue de 1 cm. lo que indica que es positivo para benzodiacepinas. requiere de un eluyente compuesto por tolueno 20: 1 acetona. como se debía esperar y para esto se determinaron dos posibles causas: Es factible que se agregara muy baja proporción de ativán (benzodiacepina patrón) a la muestra inicial.   4 RF=___1___ = 0. se realizó con el fin de que nuestra muestra sea positiva para benzodiacepinas partiendo del supuesto de que era completamente libre de estas inicialmente.RESULTADOS Para la determinación de benzodiacepinas en orina. por lo que los resultados no fueron muy claros. se adicionan a la placa por medio de un frasco aspersor.14285714 7 . La última parte de este método. También es factible que el problema estuviera en el revelado de la placa. Después de la adición del Ativán. Este procedimiento. 1 2 RF= Distancia recorrida por la muestra Distancia recorrida por el solvente ANÁLISIS DE RESULTADOS En la obtención de resultados se tuvieron algunos problemas.

en este caso la orina.ni/enfermeria/doc_inter/benzodiacepinas. SUGERENCIAS A CADA DEBILIDAD.CONCLUSIONES  Los medicamentos benzodiacepinas poseen importantes acciones farmacológicas.pdf http://bernirey80. es de gran importancia saber realizar las técnicas para la determinación de esta en la muestra biológica mas adecuada. ya que en toxicología de urgencias se reportan casos de intoxicación por este fármaco cuando es administrado en uso delictivo. Reorganización del material de trabajo aplicando el adecuado procedimiento para cualquier determinación.pdf http://www.  La cromatografía de capa delgada corresponde a un sistema analítico que permite separar los diferentes componentes de una muestra problema.files.com/2007/05/benzodiazepinas. hipnóticos y relajantes musculares.gob.ar/retel/n04/004. anticonvulsivantes. ansiolítico.sertox.wordpress.pdf o o o . X BIBLIOGRAFÍA Documentos web disponibles en: o o http://www.edu.com/pfarma/taxonomia/general/gp000042. sedantes.portalfarma.minsa.unne.  Debido a las propiedades toxicológicas de las benzodiacepinas. Actuando en gran medida sobre el sistema nervioso central.com. DEBILIDADES Mala distribución del tiempo durante la práctica al procesar la muestra para determinación de benzodiacepinas. pdf http://med.pdf http://www. AUTOEVALUACIÓN LOGROObjetivos cumplidos SI NO FORTALEZAS Dominio de los conceptos básicos utilizados en toxicología y diferenciación entre los tranquilizantes menores y tranquilizantes mayores. con el fin de identificarlos y/o cuantificarlos. debido a su metabolización.ar/catedras/farmacologia/temas_farma/volumen5/2_benzo diaz.nsf/voDocum entos/66FD0F16FCE04F02C125725D003A8CC8/$File/DOSSIER%20BENZODIAZEPINAS. propiedades toxicológicas y aplicaciones terapéuticas como anestésicos.

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