Supervi por: sado Depa r tment of Clini and Laboratory Medicine, c al Osaka City University Medi c al School Professor

Noriyuki Tatsumi, MD Edit por ado : Depa r tment of Clini Hematolog c al y, Osaka City University Medi c al School Takahisa Yamane, MD Department of Central Clinical Laboratory, Osaka City University Hospital Hiroshi Kubota, MT Traducido al e ol por spañ : Sysmex Latinoamérica Oficina repr t e ativa en Miami sen

ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS AUTOMATIZADOS

XE-2100

Casos clínicos

SYSMEX CORPORATION

´ INDICE

Introducción Parámetros de análisis y esquema del proceso de medición Ejemplo de una muestra normal Patrones anormales Lista de mensajes interpretativos Pantalla de resultados y su interpretación Ejemplos de leucocitosis Casos de células inmaduras de tipo mieloide Casos de células inmaduras de tipo linfoide Cambios de resultados durante la terapia Casos de células de apariencia específica

3 4 5 6 8 9 11 17 31 43 51

´ INTRODUCCION
LA IMPORTANCIA DE OBSERVAR EL MATERIAL CON INTELIGENCIA

La tinción Giemsa se emplea desde hace más de 100 años. Incluso ya podíamos ver impresiones claras y nítidas de células sanguíneas, incluyendo neutrófilos y eosinófilos, en el Diario de la Academia de Tokio, Japón (Journal of the Tokio, Japan Academy), del 15 de junio de 1885 (Era de Meiji). En estas impresiones notamos la gran minuciosidad con que nuestros predecesores representaron células sanguíneas, utilizando al máximo los microscopios de baja resolución disponibles en ese tiempo. Eso me lleva a pensar en el gran progreso que han alcanzado en el análisis de la sangre las clínicas contemporáneas en relación con esa época. Afortunadamente, la tecnología utilizada en los contadores hematológicos se ha desarrollado a tal punto que ahora podemos obtener un diferencial leucocitario en uno o dos minutos con unos pocos microlitros de muestra de sangre. Los analizadores actuales no solamente nos ofrecen el conteo del diferencial sino también el conteo absoluto, así como dispersogramas de leucocitos en los cuales las células son distribuidas de acuerdo con sus características ópticas, con la ventaja de que los resultados son mostrados al instante. En leucocitos normales, el análisis automatizado supera ampliamente en precisión y exactitud al análisis manual. En muestras patológicas, el dispersograma aparece con mensajes o avisos de alerta que sugiere el tipo de anormalidad presente; por lo tanto, el análisis microscópico puede realizarse sobre la base de los mensajes o avisos generados por el dispersograma. Esto genera un gran ahorro de tiempo y costos. Hace poco estuve en un curso sobre exámenes de sangre. Para mi sorpresa, muchos encargados del examen microscópico de muestras están habituados al uso de analizadores automatizados, aunque existe al mismo tiempo una tendencia a realizar una observación más superficial en el análisis morfológico y una menos confiable técnica manual para PT en los exámenes de coagulación. Esto parece constituir una influencia negativa del análisis automático, pues existe el riesgo de depositar excesiva confianza solamente en la impresión de los resultados del contador automático. A diferencia de la Era de Meiji, con los impresionantes cambios ocurridos en el sistema médico en general, nosotros nos vemos forzados a obtener y evaluar, en el laboratorio, los valores necesarios para el diagnóstico de múltiples muestras y parámetros en un corto lapso de tiempo. Los analizadores actuales, construidos sobre una base de software de alta tecnología, nos permiten no sólo obtener sino también manipular y procesar cantidades enormes de resultados. Sin embargo, es difícil establecer si toda la información generada retorna al médico. Por ejemplo, a pesar de que la información numérica -que incluye el conteo completo de células o hemograma y el diferencial de leucocitos- es transferida por sistema de cómputo a los médicos, pocos laboratorios transfieren los dispersogramas y los mensajes o señales de avisos a los médicos. Se presta poca atención a la variedad de información que tienen estos analizadores -que incluye datos básicos del análisis microscópico-, aun cuando a la luz de su utilidad clínica deberían ser usados activamente. Tener la mente y la vista entrenados es indispensable para obtener el máximo provecho de esta información cuando se examina la sangre. Espero sinceramente que este compendio les resulte útil, si bien es sólo una mínima parte del esfuerzo diario de los laboratorios de estudio hematológico.

Agosto, 1999

Noriyuki Tatsumi
Profesor, Departamento de Clínica y Laboratorio Médico, Escuela de Medicina de la Universidad de Osaka, Osaka (Japón)

3

Parámetros de análisis y esquema del proceso de medición

* Las equivalencias figuran en la página 7.

4

Ejemplo de una muestra normal
(1)

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

6.90 4.64 154 44.0 94.8 33.1 350 353 46.0 13.4 11.6 10.6 30.0 0.37 4.19 1.54 0.51 0.60 0.06 0.00 1.70 6.7 93.3 6.1 0.6

[109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 60.7 [%] [109/L] 22.3 [%] [109/L] 7.4 [%] 9 [10 /L] 8.7 [%] 9 [10 /L] 0.9 [%] 9 [10 /L] 0.0 [/100WBC] [%] 78.9 [109/L] [%] [%] [%] [%]

(10)

(11)

(12)

WBC IP Message(s)

RBC/ RET IP Message(s)

PLT IP Message(s)

(1) Resultados del análisis. (2) Dispersograma del diferencial (DIFF). (3) Dispersograma de leucocitos y basófilos (WBC/BASO). (4) Dispersograma de células mieloides inmaduras (IMI). (5) Dispersograma de eritrocitos nucleados (NRBC). (6) Dispersograma de reticulocitos (RET). (7) Dispersograma de plaquetas ópticas (PLT-O). (8) Histograma de hematíes o eritrocitos (RBC). (9) Histograma de plaquetas (PLT). (10) Sistema de avisos interpretativos de leucocitos (WBC). (11) Sistema de avisos interpretativos de hematíes y reticulocitos (RBC, RET). (12) Sistema de avisos interpretativos de plaquetas (PLT).

5

Patrones anormales

Fluorescencia

Radiofrecuencia (RF)

Ghost
Dispersión lateral Corriente Directa (CD)

Dispersión frontal

Dispersión frontal

WBC Fragment Fragment WBC Fragment
Fluorescencia Fluorescencia

Dispersión frontal

Dispersión frontal

Fluorescencia
*Las equivalencias figuran en la página 7

Dispersión lateral

6

Blastos (Blasts) En el dispersograma DIFF, los blastos aparecen en el área indicada como Blasts/Atypical Lympho. En el dispersograma IMI, los blastos aparecen en el área indicada como Blasts. Por la acción de los lisantes, los blastos son reducidos a la mitad o a un tercio de su tamaño. Debido a que los blastos poseen un núcleo condensado, desigual y sólo un pequeño número de gránulos inmaduros, son las células de menor densidad. Gránulos inmaduros (Immature Gran) En el dispersograma DIFF, los gránulos inmaduros aparecen en el área indicada como Immature Gran. En el dispersograma IMI, los gránulos inmaduros aparecen en el área indicada como Immature Gran. Así como los blastos, los gránulos inmaduros son reducidos a la mitad o a un tercio de su tamaño por la acción de los lisantes. Asi mismo, por su grado de madurez nuclear y su volumen granular, la densidad de los gránulos inmaduros es mayor que la de los blastos. Desvío izquierdo (Left Shift) En el dispersograma DIFF, las bandas aparecen en el área indicada como Left Shift. En el dispersograma IMI, las bandas aparecen en el área indicada como Left Shift. Linfocitos atípicos (Atypical Lympho) En el dispersograma DIFF, los linfocitos atípicos aparecen en el área indicada como Blasts/Atypical Lympho. En esa área aparecen linfocitos atípicos y blastos. Linfocitos anormales/L-Blastos (Abn Lympho/L-Blasts) Cuando aparecen linfocitos atípicos o anormales en el área indicada como Blasts/Atypical Lympho en el disperosograma DIFF, monitorear con la información del dispersograma IMI. Hematíes nucleados (NRBC) En el dispersograma NRBC, los hematíes nucleados aparecen en el área indicada como NRBC. En el dispersograma DIFF, los hematíes nucleados aparecen en el área indicada como NRBC. Aglutinación de plaquetas (PLT Clumps) En el dispersograma IMI, la aglutinación de plaquetas aparece en el área indicada como PLT Clumps. Debido a que las plaquetas mantienen su forma en el reactivo lisante, aparecen entre el área de los fantasmas (ghost) de hematíes y el área de PLT Clumps. Las aglutinaciones plaquetarias aparecen en el área comprendida entre el área de los fantasmas y el área de neutrófilos. En el dispersograma NRBC también aparecen aglutinaciones plaquetarias en el área indicada como PLT Clumps. GLOSARIO DE PARÁMETROS
WBC: Baso%: Baso#: NRBC: Lymph: Neut: Mono: Eo: RET: PLT-O: HFR: MFR: LFR: IRF: HPC#: HPC%: RBC: Leucocitos Porcentaje de basófilos Número de basófilos Hematíes nucleados Linfocitos Neutrófilos Monocitos Eosinófilos Reticulocitos Plaquetas ópticas Porcentaje de fluorescencia alta Porcentaje de fluorescencia media Porcentaje de fluorescencia baja Fracción de reticulocitos inmaduros Número absoluto de células pluripotenciales hematopoyéticas Porcentaje de células pluripotenciales hematopoyéticas Hematíes o eritrocitos HCT: MCV: RDW-SD: Hematocrito Volumen corpuscular medio Distribución del ancho de la curva de eritrocitos DS RDW-CV: Distribución del ancho de la curva de eritrocitos CV PLT-I: Plaqueta obtenida por impedancia PCT: Platocrito PDW : Distribución del ancho de la curva de plaquetas MPV: Volumen plaquetario medio P-LCR: Porcentaje de plaquetas grandes MCH: Hemoglobina corpuscular media MCHC: Concentración de hemoglobina corpuscular media HGB: Hemoglobina Método SLS (Lauril sulfato sódico) Ghost: Fantasma(s), residuo celular después de la lisis de eritrocitos Fragment: Fragmento(s)

7

Lista de mensajes interpretativos
Ítem WBC Abn Scattergram NRBC Abn Scattergram Neutropenia Neutrophilia Lymphopenia Lymphocytosis Monocytosis Eosinophilia Basophilia Leukocytopenia Leukocytosis NRBC present Canal de análisis WBC/BASO, DIFF NRBC Parámetro clave Dispersograma Dispersograma NEUT#, NEUT% NEUT#, NEUT% LYMPH#, LYMPH% LYMPH#, LYMPH% MONO#, MONO% EO#, EO% BASO#, BASO% WBC WBC NRBC% Dispersograma Dispersograma Dispersograma Dispersograma Dispersograma Dispersograma WBC.D vs. WBC Fórmula o regla para la generación de avisos Determinado de los dispersogramas WBC/BASO y DIFF Determinado del dispersograma NRBC 9 NEUT# < 1.00 x 10 /L (o % ajustado) 9 NEUT# > 11.00 x 10 /L (o % ajustado) 9 LYMPH# < 0.80 x 10 /L (o % ajustado) 9 LYMPH# > 4.00x 10 /L (o % ajustado) 9 MONO# > 1.00 x 10 /L (o % ajustado) 9 EOS# > 0.70 x 10 /L (o % ajustado) 9 BASO# > 0.20 x 10 /L (o % ajustado) 9 WBC < 2.50 x 10 /L 9 WBC >18.00 x 10 /L NRBC% > 0.02 Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI Determinado del dispersograma DIFF Diferencia en el conteo de WBC en los dispersogramas WBC/BASO y DIFF Determinación de valores por cómputo y comparación de los tamaños de ítems Evaluación basada en la forma del pico y la diferencia entre el pico y la base del histograma Determinado del dispersograma RET 9 RET% > 0.05 o RET# > 200 x 10 /L RDW-SD > 65fL o RDW-CV > 0.20 MCV < 70 fL MCV > 110fL MCHC < 290g/L HGB < 100g/L 12 RBC > 6.50 x 10 /L y comparación

<Anormal>

WBC (Leucocitos )

NRBC DIFF/IMI DIFF/IMI DIFF/IMI DIFF/IMI DIFF/IMI DIFF

<Sospecha>
Blasts? Immature Gran? Left Shift? Atypical Lympho? Abn Lympho/L-Blasts? NRBC? RBC Lyse resistance

<Anormal>
RBC Abn Distribution Dimorphic Population RET Abn Scattergram Reticulocytosis Anisocytosis Microcytosis Macrocytosis Hypochromia Anemia Erythrocytosis RBC RBC RET RL, RU, MP aviso DW , Aviso MP de valores (histograma) Dispersograma RET#, RET% RDW-SD, RDW-CV MCV MCV MCHC HGB RBC MCHC,MCH,RBC,RU (%)

RBC (Hematíes)

<Sospecha>
RBC Agglutination? Turbidity/HGB Interference? Iron Deficiency? HGB Defect? Fragments? RET, RBC RBC Determinación de valores por cómputo de los tamaños de ítems MCHC MCHC > 365g/L MCHC,MCV, RDW-CV Determinación de valores por cómputo de los tamaños de ítems RDW-CV, MCV Determinación de valores por cómputo de los tamaños de ítems Dispersograma,RDW-SD, Determinado del dispersograma RET PU,PU(%),MCV ,RL,MCHC Determinación de valores por cómputo de los tamaños de ítems Dispersograma PDW, PL(%), PU(%), PMFV , PLT P-LCR, MPV, PU , PLT PLT

y comparación y comparación

y comparación

<Anormal>
PLT (Plaquetas) PLT Abn Scattergram PLT Abn Distribution Thrombocytopenia Thrombocytosis RET PLT Determinado del dispersograma RET Determinación de valores por cómputo y comparación de los tamaños de ítems 9 PLT < 60 x10 /L 9 PLT > 600 x 10 /L

<Sospecha>
PLT Clumps? PLT Clumps (S)? DIFF IMI, NRBC , PLT Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF IMI y NRBC , PDW, PL(%), PU(%), PMFV Determinación de valores por cómputo y comparación , PLT, P-LCR, MPV, PU de los tamaños de ítems

Nota 1) Nota 2) RL: RU: PL: PU: PL(%): PU(%): Aviso MP: Aviso DW:

Los límites de los mensajes anormales que están basados en números pueden ser modificados por el usuario. Las reglas y las fórmulas están sujetas a cambios para mejorarlas. Posición del discriminador inferior de los hematíes. Posición del discriminador superior de los hematíes. Posición del discriminador inferior de las plaquetas. Posición del discriminador superior de las plaquetas. Porcentaje en el cual el discriminador inferior cruza la curva de las plaquetas, asumiendo que el pico de esta curva es el 100%. Porcentaje en el cual el discriminador superior cruza la curva de las plaquetas, asumiendo que el pico de esta curva es el 100%. Aviso generado cuando el histograma de hematíes tiene múltiples picos. Aviso generado cuando RDW-SD no puede ser analizado.

8

Pantalla de resultados y su interpretación
Casos en los cuales no aparecen datos en la pantalla
Los mensajes que se muestran en el cuadro son generados cuando aparecen hallazgos anormales que son interpretados por el instrumento como error de muestreo (sampling error), error de análisis (analysis error), datos fuera de rango (over range), baja confiabilidad (low reliability), etc.
Categoría En pantalla Interpretación

Imposible de analizar Fuera de rango Baja confiabilidad de datos Error de análisis

[-----] [++++] [*] [----]

El análisis no puede ser realizado debido a que la separación del diferencial o la autodiscriminación no es posible. El límite de los rangos mostrados ha sido excedido. Cuando se detecta una anormalidad en una muestra, esto indica que los datos no son confiables. (Los resultados pueden ser revisados en el banco de datos). Los datos no pueden ser obtenidos debido a una falla mecánica.

• En el caso de WBC<0.10 x 109/L, los datos del diferencial de cinco partes no son emitidos. • En el caso de WBC<1.00 x 109/L, aparece un asterisco (*) a la derecha del resultado del diferencial de cinco partes, lo que indica baja confiabilidad.

En el caso de mensajes interpretativos
Cuando aparece un mensaje interpretativo (IP), los resultados son juzgados como no confiables debido a la anormalidad indicada por el IP Aparece un asterisco (*) a la derecha del resultado o la marca (--), como se ve . en la tabla.
RBC RET# HCT MCV MCH MCHC RET# RET% IRF LFR MFR HFR

WBC NEUT LYMPH

MONO

EO BASO

NRBC

HGB MCH MCHC

RDW SD

RDW CV

PLT PLT-O

PDW MPV PLCR PCT

WBC Abn Scattergram 1)Lymph, Mono 2)Neut, Eo 3)Mono, Neut 4)Lymph, Neut 5)Lymph, Baso (DIFF) 6)Mono, Eo 7)Ghost, Baso (DIFF) 8)Ghost, Lymph 9)Ghost, Neut 10)Ghost, NLME 11)BASO, NLME NRBC Abn Scatergram NRBC present Blasts? Immature Gran? Left Shift? Atypical Lympho? Abn Lympho/L-Blasts? NRBC? RBC Lyse resistance RBC Abn Distribution 1)MP-Flag 2)RDW-SD abnormality 3)Other Dimorphic Population RET Abn Scattergram RBC Agglutination? Turbidity/ HGB Interference? Iron Deficiency? PLT Abn Scattergram PLT Abn Distribution 1)PDW abnormality 2) Other PLT Clumps? PLT Clumps(S)?

*

---------* -* * * * * * * *

--

----

-----* ----* ----*

* -* *

* *

* *

* *

* * *

* *

* * * *

* * * *

* *

* * * * --* --* * -* * * * * * * * * -* * *

* *

* *

* *

* *

* *

* *

9

Casos en los cuales no aparecen los mensajes interpretativos (IP)
1. Si los parámetros requeridos para la determinación del mensaje (IP) no pueden ser calculados, aparece la señal (----) o (++++). 2. Cuando el conteo absoluto de leucocitos (WBC#) es menor que 0.50 x 109/L, no se determinan mensajes de sospecha para los leucocitos. 3. Cuando el conteo absoluto de leucocitos (RBC#) es menor que 0.50 x 1012/L, no se determinarán mensajes interpretativos de hematíes, excepto RBC Abn Distribution. 4. En las muestras medidas en modos especiales, tales como control de calidad.

Otros
Indica que los datos fueron corregidos debido a alguna interferencia, como hematíes nucleados (NRBC) o fragmentos de eritrocitos (RBC). WBC& : Indica que los resultados fueron corregidos por el conteo de hematíes nucleados (NRBC), detectados en el canal NRBC. LYMPH#& : Indica que el número de linfocitos (LYMPH#) fue corregido por el número de hematíes nucleados (NRBC#), detectado en el canal NRBC. LYMPH%& : Indica que el porcentaje de linfocitos (LYMPH%) fue corregido por el número de hematíes nucleados (NRBC#), detectado en el canal NRBC. PLT& : Indica que los resultados reportados son las plaquetas ópticas PLT-O, debido a que los resultados del método de impedancia no son confiables. (@) : Indica que los resultados están fuera de los límites de linearidad. (&) :

10

Ejemplos de leucocitosis
Neutrofilia Linfocitosis Monocitosis Eosinofilia Basofilia 12 13 14 15 16

11

Ejemplos de leucocitosis

Neutrofilia
Información medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 12.97 2.05 64 20.8 101.5 31.2 308 242 72.9 19.5 10.2 9.9 23.0 0.24 12.09 0.67 0.11 0.09 0.01 0.00 0.60 26.6 73.4 17.7 8.9 * [109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] [109/L] [109/L] [109/L] [109/L] [109/L] [%] [%] [%] [%] [%]

Diferencial manual
Banda 6.5 [%] Segmentados 88.0 [%] Linfocitos 1.5 [%] Monocitos 2.0 [%] Eosinófilos 1.0 [%] Basófilos 1.0 [%] Macroplaquetas (+)
93.2 5.2 0.8 0.7 0.1 0.0 12.3 * * * * [%] [%] [%] [%] [%] * [/100WBC] [109/L]

* + + * * * * * * * * *

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages

PLT IP Messages

Neutrophilia Lymphopenia

Anisocytosis Anemia

PLT Clumps?

Observaciones
Este es un caso de neutrofilia donde el conteo manual dio un resultado de 94.5% y el XE-2100 de 93.2%. En el dispersograma DIFF aparecen muchos puntos azules en el área de neutrófilos (indicado por ) típico de neutrofilia. Debido a que el porcentaje de bandas es de 6.5%, pero menor que 0.9 x 109/L, no aparece el mensaje “Left Shift?” En este caso no se notan agregados de pla. quetas, pero sí plaquetas grandes. En consecuencia, aparece el mensaje “PLT Clumps?” .

12

Ejemplos de leucocitosis

Linfocitosis
Información medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 1.87 4.67 146 40.5 86.7 31.3 360 72 42.6 13.6 ------------0.10 1.77 0.00 0.00 0.00 0.00 0.31 8.4 91.6 6.0 2.4 * [109/L] [1012/L] [g/L] Diferencial manual [%] Banda 0.5 [%] [fL] Segmentados 4.5 [%] [pg] Linfocitos 93.5 [%] [g/L] 9 Monocitos 1.0 [%] * [10 /L] Eosinófilos 0.0 [%] [fL] Basófilos 0.0 [%] [%] [fL] Mielocitos 0.5 [%] [fL] Plaquetas gigantes (+) [%] [%] 5.3 * [%] * [109/L] 9 * [10 /L] 94.7 * [%] * [109/L] 0.0 * [%] 0.0 * [%] * [109/L] 9 [10 /L] 0.0 [%] * [109/L] 0.0 * [/100WBC] [%] 14.5 [109/L] [%] [%] [%] [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Neutropenia Leukocytopenia

PLT Abn Distribution PLT Clumps (S)?

Observaciones
Este es un caso de linfocitosis donde el conteo manual dio un resultado de 93.5% y el XE-2100 de 94.7%. En el dispersograma DIFF aparecen muchos puntos rosados en el área de linfocitos (indicado por ), indicativo de linfocitosis.

13

Ejemplos de leucocitosis

Monocitosis
Información medida por el XE-2100
WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT * NEUT & LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 6.62 [109/L] Diferencial manual 3.38 [1012/L] Banda 0.5 [%] 103 [g/L] Segmentados 48.5 [%] 31.0 [%] Linfocitos 23.5 [%] 91.7 [fL] Monocitos 17.5 [%] 30.5 [pg] Eosinófilos 0.0 [%] 332 [g/L] Basófilos 0.0 [%] 349 [109/L] Mielocitos 3.5 [%] 49.8 [fL] Metamielocitos 0.5 [%] 15.9 [%] Linfocitos atípicos 1.0 [%] 10.1 [fL] Granulación tóxica (+) 9.6 [fL] Hematíes nucleados (+) 20.9 [%] 0.34 [%] 3.82 [109/L] 57.7 [%] 1.25 [109/L] 18.9 - [%] 1.24 + [109/L] 18.7 + [%] 0.02 * [109/L] 0.3 * [%] 0.06 * [109/L] 0.9 * [%] 0.04 [109/L] 0.6 [/100WBC] 2.45 [%] 82.8 [109/L] 33.2 [%] 66.8 [%] 23.8 [%] 9.4 [%] * Parámetros de investigación IG
WBC IP Messages

0.23 [109/L] 3.5 [%]

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Monocytosis Immature Gran? Left Shift?

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Observaciones En este caso se midió una cantidad de monocitos de 17.5% por método manual y 18.7% por el XE-2100. En el dispersograma DIFF aparecen muchos puntos verdes en el área de monocitos (indicado por ), indicativo de monocitosis. Los puntos están ubicados por encima del área de neutrófilos (indicado por ) en el dispersograma DIFF Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros (IG), lo cual es corroborado . por la presencia de puntos rojos en el dispersograma IMI. En la pantalla de investigación (research) del XE-2100 se obtuvo 3.5% de granulocitos inmaduros, resultado similar a los 3.5% de mielocitos y 0.5% de metamielocitos medidos por el método manual.

14

Ejemplos de leucocitosis

Eosinofilia
Información medida por el XE-2100
WBC 28.67 * RBC 3.88 HGB 109 HCT 33.9 MCV 87.4 MCH 28.1 MCHC 322 PLT 249 * RDW-SD 51.8 RDW-CV 16.0 PDW 10.8 * MPV 10.0 * P-LCR 24.5 * PCT 0.25 * NEUT 2.19 * LYMPH 2.58 * MONO 0.39 * EO 23.44 * BASO 0.07 NRBC 0.00 * RET 1.04 IRF 9.8 LFR 90.2 MFR 8.2 HFR 1.6 [109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 7.6 * [109/L] 9.0 * [109/L] 1.4 * [109/L] 81.8 * [109/L] 0.2 [109/L] 0.0 * [%] 40.4 [%] [%] [%] [%]

Diferencial manual
Banda 0.0 [%] Segmentados 8.5 [%] Linfocitos 11.5 [%] Monocitos 1.0 [%] Eosinófilos 78.5 [%] Basófilos 0.5 [%] Aglutinación de plaquetas (+)

[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Eosinophilia Leukocytosis

PLT Clumps?

Observaciones
En este caso se midió una cantidad de eosinófilos de 78.5% por método manual y 81.8% por el XE-2100. En el dispersograma DIFF aparecen puntos rojos en el área de eosinófilos (indicado por ), indicativo de eosinofilia. En el canal DIFF del XE-2100, la unión específica de un ácido orgánico presente en el STROMATOLYSER-4DS con los gránulos de los eosinófilos, aumenta la intensidad de dispersión de luz lateral, lo cual permite distinguir entre neutrófilos y eosinófilos.

15

Ejemplos de leucocitosis

Basofilia
Información medida por el XE-2100
WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT & LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 21.81 + [109/L] 3.46 [1012/L] 100 [g/L] 31.5 [%] 91.0 [fL] 28.9 [pg] 317 [g/L] 2547 @ [109/L] 53.9 [fL] 17.1 + [%] 10.4 [fL] 9.7 [fL] 22.4 [%] 2.48 + [%] 14.35 * [109/L] 65.8 3.27 * [109/L] 15.0 0.33 * [109/L] 1.5 0.35 * [109/L] 1.6 2.93 * [109/L] 13.4 0.22 [109/L] 1.0 4.00 [%] 138.4 21.4 [%] 78.6 [%] 17.2 [%] 4.2 [%]

Diferencial manual
Banda 1.0 [%] Segmentados 64.0 [%] Linfocitos 13.5 [%] Monocitos 1.5 [%] Eosinófilos 3.5 [%] Basófilos 13.5 [%] Promielocitos 0.5 [%] Mielocitos 0.5 [%] Metamielocitos 0.5 [%] Linfocitos atípicos 1.5 [%] Hematíes nucleados 2/200 leucocitos
* * * * * [%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

* Parámetros de investigación
IG 0.58 [109/L] 2.7 [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Neutrophilia Basophilia Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift?

Thrombocytosis

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Observaciones
En este caso se midió una cantidad de basófilos de 13.5% por método manual y 13.4% por el XE-2100. En el dispersograma WBC/BASO aparecen grupos de puntos negros en el área de basófilos (indicado por ), indicativo de basofilia. En el dispersograma DIFF aparece una mancha azul (indicado por ) en el área rodeada de linfocitos, neutrófilos y área de fantasmas. Esto indica el área de basófilos en el dispersograma DIFF .

16

Casos de celulas inmaduras de tipo mieloide ´

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1(1) Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1(2) Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1(3) Leucemia mieloide aguda (LMA)-M2 Síndrome mielodisplásico (SMD)-AREB-t Mielofibrosis

18 20 22 24 26 28

17

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1(1)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 3.74 2.96 88 25.3 85.5 29.7 348 35 48.0 15.4 14.8 11.5 37.0 0.04 0.27 * 2.25 * 1.22 * 0.00 * 0.00 * 0.00 0.09 12.6 87.4 6.3 6.3 [109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 7.2 [109/L] 60.2 [109/L] 32.6 [109/L] 0.0 [109/L] 0.0 [109/L] 0.0 [%] 2.7 [%] [%] [%] [%]

Diferencial manual
Banda 0.0 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 22.5 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinófilos 0.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Blastos 77.5 [%]

* * * * *

[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Neutropenia Monocytosis Blasts? Immature Gran?

Anemia

Thrombocytopenia

Observaciones
En el dispersograma DIFF los puntos se extienden desde el área de linfocitos y monocitos hacia , zonas de mayor fluorescencia lateral (indicado por ), lo que sugiere la aparición de blastos. En el dispersograma IMI aparecen muchos puntos rojos en la zona donde la radiofrecuencia (RF) es baja (indicado por ), lo que sugiere la presencia de blastos (77.5% medido por el método manual de conteo diferencial).

18

Hallazgos clínicos
En marzo de 1999, un paciente visitó al médico debido a que sufría de fiebre y dolor anal. Al observarse leucocitosis y presencia de blastos, el paciente fue derivado a nuestro departamento. En el momento de la admisión, tenía un valor de proteína C reactiva (PCR) de 0.18g/L y una temperatura de 39-40 °C. Los resultados de rayos X y tomografía computarizada de tórax revelaron neumonía y se observó un absceso anal. En consecuencia, se inició una terapia con antibióticos. Para la leucemia se ordenó una terapia combinada de Idarubicina y Citarabina desde el 26 de mayo hasta el 15 de junio, seguido de Citarabina y Daunorubicina. No se consiguió remisión completa.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)
Células T CD2 6.0 CD3 2.7 CD4 1.3 CD5 3.6 CD7 4.0 CD8 2.4 Células B Granulocitos/Monocitos CD10 0.2 CD13 93.0 CD19 1.1 CD15 0.3 CD20 1.4 CD33 28.9 HLA-DR 12.3 CD34 94.7 CD36 6.6 Células NK CD16 0.7 CD56 8.8 CD57 0.7 Otros CD41 1.1

Observaciones
Los estudios con marcadores de superficie celular mostraron resultados positivos para CD13 y CD33 (marcadores para series granulocítica y monocítica). Se obtuvo resultado negativo para CD36, expresado en la serie plaquetaria y monocítica. En consecuencia, este caso es considerado una leucemia mieloide.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción peroxidasa Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Observaciones
(x 1000)

Este es un caso diagnosticado como LMA-M1. En sangre periférica se encontró un 77.5% de blastos tipo I (tamaño pequeño, citoplasma angosto, cariotipo anormal). Se observó una reacción leve a la peroxidasa.

19

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1(2)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC 254.70 @ [109/L] RBC 1.94 - [1012/L] HGB 68 - [g/L] HCT 20.2 - [%] MCV 103.1 [fL] MCH 35.1 [pg] MCHC 340 [g/L] PLT & 2.9 * [109/L] RDW-SD 63.5 + [fL] RDW-CV 17.0 + [%] PDW 14.2 * [fL] MPV 10.1 * [fL] P-LCR 29.9 * [%] PCT 0.02 * [%] NEUT ---- [109/L] LYMPH ---- [109/L] MONO ---- [109/L] EO 0.01 * [109/L] BASO 1.29 * [109/L] NRBC 0.00 * [109/L] RET 0.14 [%] IRF 18.8 [%] LFR 81.2 [%] MFR 12.5 [%] HFR 6.3 [%]

Diferencial manual
Banda 0.5 [%] Segmentados 0.5 [%] Linfocitos 4.0 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinófilos 0.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Blastos 95.0 [%]

---------0.0 * 0.5 * 0.0 * 2.7

[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC Abn Scattergram Basophilia Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift?

Anemia

Thrombocytopenia PLT Clumps?

Observaciones
En el dispersograma DIFF los puntos se extienden desde el área de linfocitos y monocitos hacia , zonas de mayor fluorescencia lateral (indicado por ). El diferencial de leucocitos no puede ser determinado. Este es un caso de 95% de blastos medidos por el método manual. Los puntos rojos están ampliamente distribuidos en el dispersograma IMI, lo que sugiere la presencia de gran cantidad de blastos.

20

Hallazgos clínicos
Un paciente con malestar general desde mayo de 1999, visitó al médico en junio de ese año. Debido a que los resultados del laboratorio indicaron leucocitos 28.5 x 109/L (blastos 97.0%), hemoglobina 84g/L, plaquetas 10 x 109/L y LDH 1,361 IU/L, el paciente fue derivado a nuestro departamento. Se le diagnosticó LMA-M1 por medio de una punción de médula ósea realizada el 30 de junio.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción peroxidasa

Observaciones
La estructura nuclear es fina. Algunas células tienen uno o dos nucléolos y la mayoría de ellos son indiferenciados. El núcleo posee una hendidura en la parte central. El citoplasma se coloreó azul con ligera turbidez. El porcentaje de blastos tipo I es del 95%. La reacción a la peroxidasa fue de nula a moderada.

(x 1000) Tinción May-Giemsa

(x 1000)

21

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1(3)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 21.47 + [109/L] 4.16 [1012/L] Diferencial manual 120 [g/L] 36.7 [%] Banda 0.5 [%] 88.2 [fL] Segmentados 2.0 [%] 28.8 [pg] Linfocitos 6.5 [%] 327 [g/L] Monocitos 0.5 [%] 63 [109/L] Eosinófilos 0.0 [%] 46.3 [fL] Basófilos 0.0 [%] 14.4 [%] Blastos 90.0 [%] 14.9 [fL] Mielocitos 0.5 [%] 11.5 [fL] 36.6 [%] 0.07 - [%] ---- [109/L] ---- [%] ---- [109/L] ---- [%] ---- [109/L] ---- [%] 0.01 * [109/L] 0.0 * [%] 0.12 * [109/L] 0.6 * [%] 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] 1.36 [%] 56.6 [109/L] 15.7 [%] 84.3 [%] 13.9 [%] 1.8 [%]
RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC IP Messages

WBC Abn Scattergram Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift

Observaciones
En el dispersograma DIFF los puntos se extienden desde el área de linfocitos y monocitos , hacia zonas de intensa fluorescencia lateral (indicado por ). El diferencial de leucocitos no puede ser determinado. En el dispersograma IMI aparecen muchos puntos rojos en el área donde la radiofrecuencia es muy débil (indicado por ). Esto sugiere que los blastos (90% medido por el diferencial manual) están distribuidos en esa área.

22

Hallazgos clínicos
El 6 de junio de 1999, un paciente presentó dolor en la rodilla derecha y en la articulación de la cadera, lo que le impedía caminar. El paciente visitó al ortopedista el 7 de junio y se le administraron antibióticos, pero los síntomas persistieron. El 9 de junio, visitó el Departamento de Ortopedia del Hospital T. El hemograma indicó leucocitos 25.7 x 109/L (blastos 95%), hemoglobina 117g/L y plaquetas 70 x 109/L, por lo que el paciente fue derivado a nuestro hospital.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)

Observaciones
Células T CD2 <1.0 CD3 <1.0 CD4 <1.0 CD5 <1.0 CD7 <1.0 CD8 <1.0 Células B CD10 <1.0 CD19 <1.0 CD20 <1.0 HLA-DR 4.4 Granulocitos/Monocitos CD13 81.8 CD14 1.7 CD33 94.5

Los marcadores de superficie celular mostraron resultados positivos para CD13 y CD33. Se obtuvo resultado negativo para CD14. Debido a que los marcadores linfoides fueron negativos, el caso se consideró como una leucemia mieloide.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción peroxidasa

Observaciones
Este es un caso de inicio de una LMA-M1. Los blastos tipo I (coloreados en gris azulado, con estructura nuclear fina y un gran citoplasma) comprenden el 90%. Se observó reacción a la peroxidasa de nula a débil.

(x 1000) Tinción May-Giemsa

(x 1000)

23

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M2
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 54.18 2.03 75 22.5 110.8 36.9 333 33 61.8 15.2 ---------------------0.01 0.04 0.36 0.91 36.9 63.1 22.5 14.4 + + [109/L] [1012/L] Diferencial manual [g/L] [%] Banda 0.0 [%] [fL] Segmentados 1.5 [%] [pg] Linfocitos 3.5 [%] [g/L] Monocitos 0.5 [%] [109/L] Eosinófilos 0.0 [%] [fL] Basófilos 0.5 [%] [%] [fL] Blastos 90.0 [%] [fL] Promielocitos 3.0 [%] [%] Mielocitos 1.0 [%] [%] Hematíes nucleados (+) [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] 0.0 * [%] [109/L] 0.1 * [%] [109/L] 0.7 [/100WBC] [%] 18.5 [109/L] [%] [%] [%] [%]

* +

* *

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC Abn Scattergram Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift

Macrocytosis Anemia

PLT Abn Distribution Thrombocytopenia

Observaciones
En el dispersograma DIFF los puntos en las áreas de los linfocitos y monocitos (indicado por , ) forman una agrupación amplia. El diferencial de leucocitos no puede ser determinado. En el dispersograma IMI se encuentran muchos puntos rojos (indicado por ). Esto indica que blastos, promielocitos y mielocitos (90%, 3% y 1%, respectivamente, determinados por el método manual) están distribuidos en esta área. En el dispersograma NRBC se observan puntos rosados (indicado por ), lo cual sugiere la presencia de hematíes nucleados.

24

Hallazgos clínicos
En abril de 1999, un paciente visitó al médico porque tenía algunos nódulos linfáticos inflamados en la región inguinal. La evaluación clínica reveló un conteo de leucocitos de 3.9 x 109/L (blastos 32%) hemoglobina 80g/L, plaquetas 73 x 109/L y LDH 622 IU/L. Por lo tanto, el paciente fue derivado a nuestro departamento. Al paciente se le diagnosticó LMA-(M2) por medio de una punción de médula ósea efectuada el 27 de mayo.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)

Observaciones
Células T CD2 4.9 CD3 2.8 CD4 2.1 CD5 3.5 CD7 4.3 CD8 2.5 Células B CD10 1.1 CD19 0.3 CD20 0.6 HLA-DR 8.2 Granulocitos/Monocitos CD13 86.5 CD14 1.1 CD33 32.5 Células NK CD16 1.5

Resultados positivos solamente para los marcadores de superficie celular CD13 y CD33. Por lo tanto, este caso fue considerado como una leucemia mieloide.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa (Blastos tipo I) Tinción May-Giemsa (Blastos tipo II) Tinción peroxidasa

(x 1000)

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones
En este caso se encuentran mezclados blastos tipo I (con relación núcleo/citoplasma muy alta y el citoplasma angosto), vistos en la figura de la izquierda, y blastos tipo II (con citoplasma ancho y maduro, con gránulos poco distinguibles o distinguibles), los cuales se ven en las dos primeras figuras. Este es un caso de primera aparición de LMA-M2. En la figura de la derecha vemos una reacción a la tinción o coloración con peroxidasa fuerte.

25

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Síndrome mielodisplásico (SMD)-AREB-t
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & 10.08 RBC 3.20 HGB 92 HCT 27.5 MCV 85.9 MCH 28.8 MCHC 335 PLT & 37 RDW-SD 43.2 RDW-CV 13.5 PDW 17.2 + MPV 11.1 P-LCR 36.2 PCT 0.03 * NEUT & 4.99 LYMPH & 2.31 * MONO 2.26 * EO 0.00 * BASO 0.02 * NRBC 0.12 RET 0.14 IRF 16.7 LFR 83.3 MFR 13.0 HFR 3.7 [109/L] Diferencial manual [1012/L] Banda 2.5 [%] [g/L] Segmentados 42.0 [%] [%] [fL] Linfocitos 21.5 [%] [pg] Monocitos 6.0 [%] [g/L] Eosinófilos 0.0 [%] [109/L] Basófilos 5.5 [%] [fL] Blastos 17.5 [%] [%] Mielocitos 3.5 [%] [fL] Metamielocitos 1.0 [%] [fL] Linfocitos atípicos 0.5 [%] [%] Hematíes nucleados (+) [%] 9 [10 /L] 49.5 [%] [109/L] 22.9 * [%] [109/L] 22.4 * [%] [109/L] 0.0 * [%] [109/L] 0.2 * [%] [109/L] 1.2 [/100WBC] [%] 4.5 [109/L] [%] [%] [%] * Parámetros de investigación [%] IG 0.50 [109/L] 5.0 [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages

PLT IP Messages

Monocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift?

Anemia

Thrombocytopenia

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Observaciones En el dispersograma DIFF no puede determinarse el límite entre linfocitos y monocitos (indicado por ), lo que sugiere la presencia de blastos. Se encuentran puntos por encima de la zona de monocitos (indicado por ), lo cual sugiere la aparición de linfocitos atípicos. Este es un caso de 17.5% de blastos, 3.5% de mielocitos y 1.0% de metamielocitos medidos por el método manual. Estas células están presentes en el área de puntos rojos en el dispersograma IMI (indicado por ).

26

Hallazgos clínicos
Un paciente presentó dolor de cuello a fines de enero de 1998. El hemograma reveló pancitopenia el 24 de febrero, mientras que el 28 de febrero la punción de médula ósea reveló la presencia de blastos, por lo que fue derivado a nuestro departamento. Debido a que una segunda punción reveló un 18.2% de blastos y 3 líneas de malformación, el paciente fue diagnosticado como una osteomielodisplasia. Se le administró en dos oportunidades Citarabina y G-CSF pero no hubo remisión. Al paciente se le estuvo administrando Etoposida oral y se , le puso bajo seguimiento como paciente ambulatorio.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa (blasto) Tinción May-Giemsa (blasto) Tinción May-Giemsa (linfocito atípico)

(x 1000)

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones
Este es un caso de síndrome mielodisplásico con anemia refractaria con excesivos blastos en transformación o SMD (AREB-t), en el cual se encontró un 17.5% de blastos (la relación núcleo/citoplasma es alta, el citoplasma presenta color gris azulado y se encuentran gránulos azurófilos). Se observan plaquetas y bandas gigantes.

27

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Mielofibrosis
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
Diferencial manual WBC & 47.03 * [109/L] 12 RBC 3.02 [10 /L] Banda 20.0 [%] HGB 84 [g/L] Segmentados 37.0 [%] HCT 27.3 [%] Linfocitos 5.0 [%] MCV 90.4 [fL] Monocitos 0.0 [%] MCH 27.8 [pg] Eosinófilos 1.0 [%] MCHC 308 - [g/L] Basófilos 5.0 [%] Blastos 0.5 [%] PLT 711 * [109/L] Promielocitos 0.5 [%] RDW-SD 64.4 + [fL] Mielocitos 17.5 [%] RDW-CV 20.5 + [%] Metamielocitos 12.5 [%] PDW 11.6 * [fL] Megacariocitos 1.0 [%] MPV 10.5 * [fL] Hematíes P-LCR 28.2 * [%] nucleados 5/200 leucocitos PCT 0.74 * [%] * NEUT & 28.95 [109/L] 61.5 [%] LYMPH & 1.78 * [109/L] 3.8 * [%] MONO 1.05 * [109/L] 2.2 * [%] EO 0.07 * [109/L] 0.1 * [%] BASO ---- [109/L] ---- [%] NRBC 1.70 * [109/L] 3.6 * [/100WBC] RET 5.01 [%] 151.3 [109/L] IRF 32.9 [%] LFR 67.1 [%] MFR 25.8 [%] * Parámetros de investigación HFR 7.1 [%] IG 13.02 [109/L] 28.2 [%]
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC Abn Scattergram Monocytosis Leukocytosis NRBC Present Blasts? Immature Gran? Left Shift?

Reticulocytosis Anisocytosis Anemia

Thrombocytosis PLT Clumps?

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Observaciones En el dispersograma DIFF aparecen puntos azules distribuidos por encima del área de neutrófilos (indicado por ). Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros, lo que es avalado por el hecho de que aparecen puntos rojos en el dispersograma IMI. En el dispersograma NRBC aparecen puntos rosados (indicado por ), lo que sugiere la presencia de hematíes nucleados (NRBC). Los hematíes nucleados medidos por el método manual arrojaron un resultado de 5 por cada 200 leucocitos, similar al obtenido por el XE-2100 de 3.6 hematíes nucleados por cada 100 leucocitos.
28

Hallazgos clínicos
A un paciente se le diagnosticó una mielofibrosis en 1991. El 8 de mayo de 1998, el paciente fue admitido en el Departamento de Radiología con una hipertensión portal complicada por várices en el esófago y por várices gástricas. Se cree que la razón de las várices fue el aumento del flujo sanguíneo en la vena lienal a raíz de la esplenomegalia. El 5 de junio de 1998 se realizó una embolización de la arteria esplénica.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa (blasto) Tinción May-Giemsa (micro-megacariocito)

Observaciones
Se observó un aumento de mieloblastos y leucocitos segmentados en sangre periférica, además de un incremento de basófilos y plaquetas. Se notó la presencia de micromegacariocitos y eritroblastos.
(x 1000) (x 1000)

29

Principio del XE-2100 (1)
Citometría de flujo por láser semiconductor
El XE-2100 ilumina la muestra mediante un rayo láser semiconductor y clasifica las células por medio de tres señales que estas producen: luz dispersa frontal, luz dispersa lateral y fluorescencia lateral. La intensidad de la luz dispersa frontal indica el volumen celular; la luz dispersa lateral, el contenido interno celular, como núcleo y gránulos; y la fluorescencia lateral, la cantidad de ADN y ARN presente.
Tubo fotomultiplicador (fluorescencia de 660nm o más)

30

Casos de células inmaduras de tipo linfoide

Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L1(1) Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L1(2) Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L2(1) Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L2(2) Leucemia linfocítica crónica (LLC)

32 34 36 38 40

31

Casos de células inmaduras de tipo linfoide

Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L1(1)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & 194.44@[109/L] Diferencial manual RBC 2.28 - [1012/L] HGB 65 - [g/L] Banda 0.5 [%] HCT 18.4 - [%] Segmentados 0.5 [%] MCV 80.7 - [fL] Linfocitos 4.5 [%] MCH 28.5 [pg] Monocitos 0.5 [%] MCHC 353 [g/L] Eosinófilos 0.0 [%] PLT & 74 * [109/L] Basófilos 0.0 [%] RDW-SD 44.8 [fL] Blastos 93.0 [%] RDW-CV 17.1 + [%] Linfocitos atípicos 1.0 [%] PDW ---- [fL] Hematíes MPV ---- [fL] nucleados 1/200 leucocitos P-LCR ---- [%] PCT ---- [%] NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO ---- [109/L] ---- [%] EO 0.20 * [109/L] 0.1 * [%] BASO ---- [109/L] ---- [%] NRBC 0.43 * [109/L] 0.2 * [/100WBC] RET 1.46 [%] 33.3 [109/L] IRF 22.6 [%] LFR 77.4 [%] MFR 17.9 [%] HFR 4.7 [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC Abn Scattergram Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift?

Anemia

PLT Abn Distribution PLT Clumps?

Observaciones En el dispersograma DIFF los puntos en las áreas de linfocitos y monocitos forman un solo grupo , (indicado por ). Esto sugiere que los blastos (93% según el método manual) aparecen en esta área. En el área donde la fluorescencia lateral es más fuerte, se encuentran puntos (indicado por ) que sugieren la presencia de linfocitos atípicos. En el dispersograma IMI aparecen puntos rojos que sugieren la presencia de blastos. En este caso se encontró un eritrocito nucleado por cada 200 leucocitos, según el método manual. En el dispersograma NRBC aparecen puntos rosados (indicado por ), lo que demuestra que incluso en las muestras con un pequeño número de hematíes nucleados la detección es sensible.
32

Hallazgos clínicos
Un paciente experimentó pérdida de apetito desde fines de julio de 1999 y desarrolló un estado febril a principios de agosto, que duró aproximadamente dos días. El paciente visitó a su médico el 15 de agosto y el examen de sangre reveló leucocitos 101.6 x 109/L, hemoglobina 64g/L y plaquetas 10 x 109/L. Debido a estos hallazgos, el paciente fue remitido a nuestro hospital.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)

Observaciones
Células T CD2 3.2 CD3 3.0 CD4 1.4 CD5 3.3 CD7 4.4 CD8 1.4 Células B CD10 93.6 CD19 94.4 CD20 4.5 CD21 1.1 HLA-DR 95.8 Granulocitos/Monocitos CD13 1.9 CD14 <1.0 CD33 <1.0

El estudio de marcadores de superficie obtuvo resultados positivos para CD10, CD19 y HLA-DR; fue negativo para CD20. Por lo tanto, este caso está considerado como una LLA célula tipo pre-B.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción peroxidasa

Observaciones
Este es un caso de diagnóstico nuevo de LLA-L1. Los blastos constituyen un 93% de las células. Son de tamaño pequeño, con alto porcentaje de núcleo/citoplasma (N/C), poco citoplasma y de cariotipo extremadamente anormal, pues presenta lobulación y reacción peroxidasa negativa.

(x 1000) Tinción May-Giemsa

(x 1000)

33

Casos de células inmaduras de tipo linfoide

Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L1(2)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 28.99 + [109/L] Diferencial manual 3.62 [1012/L] 105 [g/L] Banda 0.0 [%] 32.0 [%] Segmentados 1.5 [%] 88.4 [fL] Linfocitos 1.5 [%] 29.0 [pg] Monocitos 0.0 [%] 328 [g/L] Eosinófilos 0.5 [%] 172 [109/L] Basófilos 0.0 [%] 49.1 [fL] Blastos 96.0 [%] 15.2 [%] Metamielocitos 0.5 [%] 12.9 [fL] Hematíes nucleados (+) 11.6 [fL] 37.1 [%] 0.20 [%] 1.74 [109/L] 6.0 - [%] 26.62 + [109/L] 91.8 + [%] 0.55 [109/L] 1.9 [%] 0.03 [109/L] 0.1 [%] 0.05 [109/L] 0.2 [%] 0.19 [109/L] 0.7 [/100WBC] 1.46 [%] 52.9 [109/L] 12.4 [%] 87.6 [%] 11.1 [%] 1.3 [%]
RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC IP Messages

Lymphocytosis Leukocytosis Abn Lympho/L-Blasts?

Observaciones En el dispersograma DIFF el límite entre las áreas de monocitos y linfocitos es indistinguible (in, dicado por ). Además, en el dispersograma IMI no hay puntos rojos que denotarían la presencia de células inmaduras. Estos resultados sugieren la presencia de linfoblastos. En el dispersograma NRBC hay puntos rosados (indicado por ), que sugieren la presencia de hematíes nucleados.

34

Hallazgos clínicos
Un paciente, con malestar general y síntomas de resfrío común, visitó al médico en junio de 1999. Se notó la presencia de leucocitosis, anemia y trombocitopenia. Debido a que en el diferencial de leucocitos se encontraron blastos, el paciente fue remitido a nuestro departamento.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)

Observaciones
Células T Células B Granulocitos/Monocitos Células NK

CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8

6.0 3.9 3.1 3.7 5.2 2.8

CD10 CD19 CD20 HLA-DR

88.0 94.2 82.1 97.1

CD13 CD14 CD15 CD33 CD34 CD36

5.5 0.4 0.3 0.7 72.5 7.6

CD16 2.0 CD56 2.8 CD57 1.5
Otros

CD41 0.8

Los marcadores de superficie positivos fueron CD10, CD19, CD20 y HLA-DR. Por lo tanto, se considera que este caso es una leucemia linfática de células B bastante maduras.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa Tinción peroxidasa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones
A este paciente se le diagnosticó por primera vez LLA-L1. Los blastos constituyen un 96% de las células. Son de tamaño pequeño, alto porcentaje de núcleo/citoplasma (N/C) con un solo nucléolo o con nucléolos indistinguibles y peroxidasa negativa.

35

Casos de células inmaduras de tipo linfoide

Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L2(1)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & 48.26 + [109/L] Diferencial manual RBC 3.93 [1012/L] Banda 4.0 [%] HGB 117 [g/L] HCT 35.8 [%] Segmentados 18.0 [%] MCV 91.1 [fL] Linfocitos 10.5 [%] MCH 29.8 [pg] Monocitos 2.5 [%] MCHC 327 [g/L] Eosinófilos 0.5 [%] PLT 179 [109/L] Basófilos 0.0 [%] RDW-SD 59.4 + [fL] Blastos 61.5 [%] RDW-CV 18.2 + [%] Mielocitos 2.5 [%] PDW 10.6 [fL] Metamielocitos 0.5 [%] MPV 9.9 [fL] Hematíes P-LCR 23.0 [%] nucleados 6/200 leucocitos PCT 0.18 [%] 9 NEUT ---- [10 /L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO ---- [109/L] ---- [%] EO 0.12 * [109/L] 0.2 * [%] BASO ---- [109/L] ---- [%] NRBC 0.22 [109/L] 0.5 [/100WBC] RET 3.43 [%] 134.8 [109/L] IRF 20.9 [%] LFR 79.1 [%] MFR 17.1 [%] HFR 3.8 [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC Abn Scattergram Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift?

Observaciones En el dispersograma DIFF los puntos en las áreas que ocupan los linfocitos y monocitos forman , un solo grupo (indicado por ). El diferencial de leucocitos no pudo ser determinado. En el dispersograma IMI se ven puntos rojos (indicado por ). Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros en esta área, los cuales fueron observados en el diferencial manual. En este caso se encontró, por el método manual, 6 eritrocitos nucleados por cada 200 leucocitos. En el dispersograma NRBC se observan puntos rosados (indicado por ). El conteo de hematíes nucleados detectados por el XE-2100 es de 0.5 por cada 100 leucocitos.

36

Hallazgos clínicos
Un paciente, cuyo principal síntoma era la inflamación de un ganglio linfático cervical, visitó nuestro departamento en mayo de 1999. Algunos de los resultados obtenidos fueron leucocitos 40.9 x 109/L (blastos 85%), hematíes 3.71 x 1012/L, hemoglobina 109g/L y plaquetas 159 x 109/L. A este paciente se le diagnosticó LLA(L2) mediante una punción de médula ósea.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)
Células T
CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8 12.6 7.5 3.3 6.7 99.0 2.6

Células B
CD10 0.2 CD19 62.9 CD20 7 .3 HLA-DR 89.6

Granulocitos/Monocitos Células NK
CD13 CD14 CD33 CD34 CD36 30.6 0.6 45.8 88.5 14.1 CD16 13.9 CD56 7.4

Observaciones
Los marcadores positivos fueron CD7, CD19, HLA-DR, CD13, CD33 y CD34. Se considera una tumorigénesis a nivel muy inmaduro.

Otros
CD25 10.1

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa (sangre periférica)

Observaciones
En la sangre periférica, los blastos constituyen el 61.5%. Estos varían de pequeños a medianos y tienen alto porcentaje núcleo/citoplasma (N/C), presentan formación de lóbulos en el núcleo y nucléolos no distinguibles. En la médula ósea se encuentran muchos blastos (grandes, alto porcentaje núcleo/citoplasma y segregación nuclear marcada). Coloración con peroxidasa negativa. Este es un caso que muestra el comienzo de una LLA-L2.

(x 1000) Tinción peroxidasa (médula ósea)

(x 1000)

37

Casos de células inmaduras de tipo linfoide

Leucemia linfocítica aguda (LLA)-L 2(2)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 5.12 [109/L] 2.79 [1012/L] 95 [g/L] 28.4 [%] 101.8 [fL] 34.1 [pg] 335 [g/L] 42 * [109/L] 51.0 [fL] 17.8 + [%] 16.3 * [fL] 13.2 * [fL] 47.7 * [%] 0.06 * [%] 2.54 * [109/L] 49.6 0.75 * [109/L] 14.6 1.70 * [109/L] 33.2 0.07 [109/L] 1.4 0.06 [109/L] 1.2 0.03 [109/L] 0.6 1.82 [%] 50.8 19.9 [%] 80.1 [%] 15.5 [%] 4.4 [%]

Diferencial manual
Banda 13.0 [%] Segmentados 40.0 [%] Linfocitos 12.5 [%] Monocitos 3.0 [%] Eosinófilos 1.0 [%] Basófilos 1.0 [%] Blastos 28.5 [%] Mielocitos 1.0 [%] Hematíes nucleados (+)

* [%] * [%] * [%] [%] + [%] [/100WBC] [109/L]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Lymphopenia Monocytosis

Anemia

PLT Abn Distribution Thrombocytopenia

Atypical Lympho? Abn Lympho/L-Blasts?

Observaciones
En el dispersograma DIFF el límite entre las áreas de monocitos y linfocitos es indistinguible (indicado , por ). Esto sugiere que los blastos (observados con el método manual) están presentes en esta área. Los pocos puntos rojos presentes en el dispersograma IMI (indicado por ) sugieren la presencia de unos pocos granulocitos inmaduros.

38

Hallazgos clínicos
Un paciente que presentaba malestar general visitó al médico en febrero de 1996. Se notó la presencia de trombocitopenia, leucocitosis y blastos, por lo que fue remitido a nuestro departamento. En respuesta a la quimioterapia se produjo una total remisión. En enero de 1997 se le realizó un trasplante alogénico de médula ósea, pero el paciente tuvo una recaída en mayo de 1998. Se obtuvo remisión otra vez en respuesta a la terapia de inducción de reremisión. Se produjo recurrencia nuevamente en mayo de 1999. Se le dio una dosis media de Citarabina que no produjo resultado. Desde el 21 de julio se le comenzó a tratar con terapia combinada de Citarabina, Enocitabina, Etoposida, Vindesina y Vinblastina.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)
Células T CD3 7.2 CD4 1.9 CD7 7.1 CD8 5.9 Células B Granulocitos/Monocitos Células NK CD10 67.6 CD13 1.5 CD16 5.1 CD19 71.4 CD14 1.7 CD56 4.1 CD20 5.3 CD33 0.7 HLA-DR 58.3 CD34 0.4

Observaciones
Los datos del marcador de superficie se obtuvieron al comienzo de la enfermedad. Hubo resultados positivos para CD10, CD19 y HLA-DR, que son marcadores para las series células B. Se obtuvo un resultado negativo para CD20. Por lo tanto, este caso se considera como LLA tipo célula pre-B.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa

Observaciones
Este es un caso de recurrencia de LLA-L2. Los blastos constituyen el 28.5% (presentan alto porcentaje núcleo/citoplasma, muy poco citoplasma y algunos núcleos lobulados).

(x 1000) Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

39

Casos de células inmaduras de tipo linfoide

Leucemia linfocítica crónica (LLC)
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 11.46 3.23 101 31.5 97.5 31.3 321 245 64.9 18.4 10.4 10.2 25.3 0.25 1.19 10.02 0.21 0.03 0.01 0.00 1.31 19.5 80.5 15.0 4.5 [109/L] Diferencial manual [1012/L] [g/L] Banda 0.0 [%] [%] Segmentados 10.0 [%] [fL] Linfocitos 86.5 [%] [pg] Monocitos 1.5 [%] [g/L] Eosinófilos 0.0 [%] [109/L] Basófilos 0.0 [%] [fL] Prolinfocitos 2.0 [%] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 10.4 - [%] [109/L] 87.4 + [%] [109/L] 1.8 [%] [109/L] 0.3 [%] [109/L] 0.1 [%] [109/L] 0.0 [/100WBC] [%] 42.3 [109/L] [%] [%] [%] [%]

+ +

+

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Lymphocytosis Abn Lympho/L-Blasts?

Observaciones
En el dispersograma DIFF el límite entre las áreas de linfocitos y monocitos es indistinguible (indicado , por ). Además, ningún granulocito inmaduro aparece en el dispersograma IMI. Estos resultados sugieren la aparición de linfocitos anormales.

40

Hallazgos clínicos
Un paciente visitó el departamento de medicina general de nuestro hospital en abril de 1996, debido a un dolor en el hipocondrio izquierdo y progresivo dolor de espalda. Aunque el conteo de leucocitos fue de 8 x 109/L, se observaron en el conteo diferencial un 55% de linfocitos y 8% de linfocitos atípicos, por lo que se le realizó una punción de la médula ósea. El porcentaje de linfocitos maduros aumentó notablemente a 91.2% y el marcador de superficie CD19 también aumentó a 67.4%. Este caso fue diagnosticado como LLC.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)
Células T CD2 14.7 CD3 17.5 CD4 13.9 CD5 15.3 CD8 4.2 Células B CD10 1.0 CD19 78.8 CD20 79.7

Observaciones
Los marcadores de superficie son CD5-, CD10, CD19+ y CD20+. Proliferan las células maduras B. Análisis morfológicos revelaron que la mayoría de las células son linfocitos maduros. Por lo tanto, este caso se considera como LLC-B CD5 negativo.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones Este es un caso de LLC. Los linfocitos maduros son bastante dominantes. Se observan unos pocos prolinfocitos (alto porcentaje de núcleo/citoplasma y nucléolos distinguibles).

41

Principio del XE-2100 (2)
Canal del diferencial leucocitario (DIFF)
Un surfactante provoca lisis completa de eritrocitos y plaquetas, mientras que los leucocitos son parcialmente lisados. Un segundo reactivo tiñe los ácidos nucleicos. Este canal diferencia los leucocitos en cuatro tipos. Un surfactante en el STROMATOLYSER-4DL causa lisis o destrucción de leucocitos y plaquetas, provocando al mismo tiempo pequeñas aberturas en la membrana de los leucocitos. Un colorante polimetino en el STROMATOLYSER-4DS migra hacia el leucocito dañado y se une a los ácidos nucleicos y a los organelos citoplasmáticos. Cuando las células son expuestas a la luz del láser de 633nm, la intensidad de la fluorescencia es proporcional al contenido del ácido nucleico. Un ácido orgánico en el STROMATOLYSER-4DL se une específicamente a los gránulos de los eosinófilos, lo cual permite diferenciarlos de los neutrófilos mediante una señal más alta de luz lateral dispersa.

42

Cambios en los resultados durante la terapia
Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1 Leucemia mieloide crónica (LMC) 44 47

43

Cambios en los resultados durante la terapia

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M1
Hallazgos clínicos
En marzo de 1999, un paciente visitó al médico a causa de fiebre y dolor anal. En el frotis se observó leucocitosis y blastos, por lo que el paciente fue remitido a nuestro departamento. En el momento de la admisión, el paciente tenía un valor proteína C reactiva (PCR) de 0.18g/L y una temperatura de 39-40 ºC. Los resultados de las radiografías y un TC de tórax revelaron neumonía, y se observó un absceso anal. Consecuentemente, se inició una terapia con antibióticos. Para la leucemia, se le administró una terapia combinada de Idarubicina y Citarabina desde el 26 de mayo hasta el 15 de junio, seguida por Daunorubicina y Citarabina. No se obtuvo una remisión completa.
(x 10 /L)
9

(x 10 /L)

9

Discusión
(1) Junio 7, 1999

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

0.64 2.48 72 22.0 88.7 29.0 327 34 50.0 15.7 12.5 10.2 29.1 0.03 0.02 0.58 0.03 0.01 0.00 0.00 0.08 3.8 96.2 3.8 0.0

-

-

* * * * * *

[109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 3.1 [109/L] 90.6 [109/L] 4.7 [109/L] 1.6 [109/L] 0.0 [109/L] 0.0 [%] 2.0 [%] [%] [%] [%]

RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages

Thrombocytopenia

WBC IP Messages

* * * * * *

[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

Neutropenia Lymphopenia Leukocytopenia Blasts?

Estos datos se obtuvieron 6 días después de la administración de 150 mg de Citarabina. El conteo de leucocitos fue de 0.64 x 109/L y se encontró un pequeño número de puntos en el dispersograma del XE-2100. En el dispersograma IMI se notan puntos rojos en el área donde la radiofrecuencia es más baja (indicado por ), lo que podría sugerir la presencia de células hematopoyéticas pluripotenciales.

44

Cambios en los resultados durante la terapia (2) Junio 14, 1999

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

3.74 2.96 88 25.3 85.5 29.7 348 35 48.0 15.4 14.8 11.5 37.0 0.04 0.27 2.25 1.22 0.00 0.00 0.00 0.09 12.6 87.4 6.3 6.3

-

-

* * * * *

[109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 7.2 [109/L] 60.2 [109/L] 32.6 [109/L] 0.0 [109/L] 0.0 [109/L] 0.0 [%] 2.7 [%] [%] [%] [%]

RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages

Thrombocytopenia

WBC IP Messages

* * * * *

[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

Neutropenia Monocytosis Blasts? Immature Gran?

En el dispersograma DIFF los puntos en el área de linfocitos y en el área en la cual la fluorescencia , lateral es fuerte forman un solo grupo (indicado ). Esto sugiere la presencia de blastos, lo que es respaldado por el hallazgo de puntos rojos en el área donde la radiofrecuencia es más baja (indicado por ) en el dispersograma IMI.

(3) Julio 5, 1999

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

0.32 2.90 89 25.9 89.3 30.7 344 25 44.7 13.6 13.4 10.9 33.0 0.03 0.04 0.20 0.08 0.00 0.00 0.00 0.12 11.9 88.1 11.9 0.0

-

-

* * * * * *

[109/L] [1012/L] RBC/RET IP Messages [g/L] [%] Anemia [fL] [pg] [g/L] PLT IP Messages [109/L] Thrombocytopenia [fL] [%] [fL] WBC IP Messages [fL] [%] Neutropenia [%] Lymphopenia 9 [10 /L] 12.5 * [%] Leukocytopenia 9 [10 /L] 62.5 * [%] 9 [10 /L] 25.0 * [%] [109/L] 0.0 * [%] [109/L] 0.0 * [%] [109/L] 0.0 [/100WBC] [%] 3.5 [109/L] [%] [%] [%] [%]

El conteo de leucocitos es de 0.32 x 109/L y está en su nadir.

45

Cambios en los resultados durante la terapia (4) Julio 9, 1999

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

1.47 2.54 76 22.8 89.8 29.9 333 27 45.8 14.0 ------------0.09 1.20 0.18 0.00 0.00 0.00 0.89 27.3 72.7 21.9 5.4

- [109/L] [1012/L] - [g/L] - [%] [fL] [pg] [g/L] * [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] * [109/L] 6.2 * [109/L] 81.6 * [109/L] 12.2 * [109/L] 0.0 * [109/L] 0.0 [109/L] 0.0 [%] 22.6 [%] [%] [%] [%]

RBC/RET IP Messages

Anemia
PLT IP Messages

PLT Abn Distribution Thrombocytopenia
WBC IP Messages

* * * * *

[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

Neutropenia Leukocytopenia Blasts? Immature Gran?

En el dispersograma DIFF los puntos en el área de linfocitos y en el área en que la fluorescencia lateral , es fuerte forman un solo grupo (indicado por ). Esto sugiere la presencia de blastos, lo que es respaldado por el hallazgo de puntos rojos en el área donde la radiofrecuencia es más baja (indicado por ) en el dispersograma IMI. Estos datos son similares a los obtenidos el 14 de junio.

(5) Julio 19, 1999

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

0.81 3.48 106 31.9 91.7 30.5 332 33 43.5 13.0 11.1 12.7 41.4 0.04 0.01 0.80 0.00 0.00 0.00 0.00 0.18 5.3 94.7 5.3 0.0

- [109/L] [1012/L] [g/L] - [%] [fL] [pg] [g/L] - [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] - [%] * [109/L] * [109/L] * [109/L] * [109/L] * [109/L] * [109/L] [%] [%] [%] [%] [%]

RBC/RET IP Messages

PLT IP Messages

Thrombocytopenia

WBC IP Messages

1.2 98.8 0.0 0.0 0.0 0.0 6.3

* * * * *

Neutropenia [%] [%] Leukocytopenia [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

El conteo de leucocitos disminuye nuevamente a 0.81 x 109/L en respuesta a la terapia combinada de Mitixantrona, Enocitabina, Etoposida, Vindesina, Vincristina y Predonisolona iniciada el 12 de julio.

46

Cambios en los resultados durante la terapia

Leucemia mieloide crónica (LMC)
Hallazgos clínicos
Una mujer de 57 años presentó distensión abdominal el 26 de abril de 1999. Al mismo tiempo, experimentaba pérdida del apetito y de peso. Ella visitó el Departamento de Medicina Interna en nuestro hospital el 31 de mayo. Los hallazgos en los exámenes incluyeron leucocitos 180.3 x 109/L, LDH 1,530 IU/L, los cuales eran mucho más altos que lo normal; por lo tanto, la paciente fue remitida al Departamento de Hematología. Mediante punción en la médula ósea y examen de cromosomas (ph1 positivo) se le diagnosticó LMC.
(x 109/L)

LEUCOCITOS
α

LEUCOCITOS

Junio

Junio

Junio

Julio

Julio

Julio

Julio

Discusión
(1) Junio 11, 1999 RBC/RET IP Messages WBC & 204.26 @ [109/L] 12 RBC 3.54 [10 /L] Anemia HGB 96 [g/L] HCT 30.9 [%] * Parámetros de investigación MCV 87.3 [fL] MCH 27.1 [pg] IG 22.50 [109/L] 11.0 [%] MCHC 311 [g/L] PLT 353 * [109/L] RDW-SD 59.5 + [fL] PLT IP Messages RDW-CV 19.5 + [%] PLT Abn Distribution PDW ---[fL] MPV ---[fL] P-LCR ---[%] PLT Clumps? PCT ---[%] 9 [10 /L] 45.3 [%] * NEUT & 92.42 WBC IP Messages LYMPH ---[109/L] ---- [%] 9 MONO ---[10 /L] ---- [%] WBC Abn Scattergram EO 12.48 * [109/L] 6.1 * [%] Eosinophilia BASO ---[109/L] ---- [%] Leukocytosis NRBC 2.08 * [109/L] 1.0 * [/100WBC] 9 RET 2.49 [%] 88.1 [10 /L] Blasts? IRF 29.5 [%] Immature Gran? LFR 70.5 [%] Left Shift? MFR 22.4 [%] HFR 7.1 [%]

Este es un caso de LMC en el que el conteo leucocitario es más de 200 x 109 /L. En el dispersograma DIFF no se pueden clasificar los leucocitos. En el dispersograma IMI, numerosos puntos rojos están distribuidos a través de todo el gráfico, lo que sugiere la presencia de muchos granulocitos inmaduros.
* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

47

Cambios en los resultados durante la terapia

(2) Junio 25, 1999

WBC & 119.02 @ [109/L] RBC 3.79 [1012/L] RET Abn Scattergram HGB 100 [g/L] Anisocytosis HCT 32.3 [%] MCV 85.2 - [fL] MCH 26.4 [pg] * Parámetros de investigación MCHC 310 [g/L] PLT 394 * [109/L] IG 10.08 [109/L] 8.5 [%] RDW-SD 59.2 + [fL] RDW-CV 20.7 + [%] PDW ---[fL] PLT IP Messages MPV ---[fL] P-LCR ---[%] PLT Abn Distribution PCT ---[%] 9 [10 /L] 51.0 [%] *NEUT & 60.63 PLT Clumps? LYMPH ---[109/L] ---- [%] MONO ---[109/L] ---- [%] WBC IP Messages EO ---[109/L] ---- [%] BASO ---[109/L] ---- [%] NRBC 1.29 * [109/L] 1.1 * [/100WBC] WBC Abn Scattergram Leukocytosis RET 2.69 * [%] 102.0 * [109/L] IRF 33.5 * [%] LFR 66.5 * [%] Blasts? MFR 24.8 * [%] Immature Gran? HFR 8.7 * [%]
Left Shift?

RBC/RET IP Messages

El conteo de leucocitos disminuye a la mitad de los datos medidos el 11 de junio como respuesta a la terapia con Hidroxi Carbamida, Ranimustine y otras. Pero aún es más de 100 x 109/L.
* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

(3) Julio 5, 1999

WBC & 17.87 * [109/L] RBC 3.97 [1012/L] HGB 104 [g/L] * Parámetros de investigación HCT 33.7 [%] MCV 84.9 - [fL] IG 2.59 [109/L] 14.5 [%] MCH 26.2 [pg] MCHC 309 - [g/L] PLT & 215 * [109/L] RDW-SD 60.2 + [fL] PLT IP Messages RDW-CV 19.8 + [%] PDW ---[fL] PLT Abn Distribution MPV ---[fL] P-LCR ---[%] PLT Clumps? PCT ---[%] 9 [10 /L] 47.8 [%] * NEUT & 8.54 WBC IP Messages LYMPH & 2.92 * [109/L] 16.3 * [%] 9 MONO 3.12 * [10 /L] 17.5 * [%] Neutrophilia EO 0.05 * [109/L] 0.3 * [%] Monocytosis 9 BASO 0.65 * [10 /L] 3.6 * [%] 9 NRBC 0.21 * [10 /L] 1.1 * [/100WBC] Basophilia RET 1.52 [%] 60.3 [109/L] Blasts? IRF 28.1 [%] LFR 71.9 [%] Immature Gran? MFR 23.1 [%] Left Shift? HFR 5.0 [%]

RBC/RET IP Messages

El conteo de leucocitos ha disminuido más y el diferencial puede ser determinado en el dispersograma DIFF del XE-2100.
* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

48

Cambios en los resultados durante la terapia (4) Julio 19, 1999

WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT * NEUT & LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

45.32 3.97 106 34.2 86.1 26.7 310 445 65.7 21.9 17.8 13.1 47.4 0.58 31.03 1.87 3.18 0.00 ---0.44 3.05 23.1 76.9 17.5 5.6

* [109/L] Anisocytosis [1012/L] [g/L] [%] * Parámetros de investigación [fL] [pg] IG 6.63 [109/L] 14.6 [%] [g/L] * [109/L] + [fL] PLT IP Messages + [%] * [fL] PLT Abn Distribution * [fL] * [%] PLT Clumps? * [%] [109/L] 68.5 [%] * [109/L] 4.1 * [%] WBC IP Messages * [109/L] 7.0 * [%] 9 * [10 /L] 0.0 * [%] WBC Abn Scattergram [109/L] ---- [%] Monocytosis * [109/L] 1.0 * [/100WBC] Leukocytosis 9 [%] 121.1 [10 /L] [%] Blasts? [%] Immature Gran? [%] Left Shift? [%]

RBC/RET IP Messages

El conteo de leucocitos ha aumentado nuevamente. Los puntos rojos en el dispersograma IMI han aumentado también. Estos resultados sugieren una recurrencia.
* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

(5) Julio 26, 1999

WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT * NEUT & LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

9.18 3.98 107 34.4 86.4 26.9 311 235 64.5 20.7 16.2 12.1 41.2 0.31 6.14 1.30 0.60 0.02 0.36 0.00 0.94 16.9 83.1 15.0 1.9

+ +

* * * *

RBC/RET IP Messages [109/L] [1012/L] Anisocytosis [g/L] [%] * Parámetros de investigación [fL] [pg] IG 0.76 [109/L] 8.3 [%] [g/L] 9 [10 /L] [fL] PLT IP Messages [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 66.9 [%] WBC IP Messages [109/L] 14.2 * [%] Basophilia [109/L] 6.5 * [%] [109/L] 0.2 * [%] [109/L] 3.9 * [%] Blasts? [109/L] 0.0 [/100WBC] Immature Gran? [%] 37.4 [109/L] Left Shift? [%] [%] [%] [%]

El conteo de leucocitos finalmente ha descendido a menos de 10 x 109/L y el diferencial de leucocitos puede ser determinado por el XE-2100. En el dispersograma DIFF los puntos azules se extienden , desde el área de los neutrófilos hasta el área por encima de éstos (indicado por ), lo que sugiere la aparición de granulocitos inmaduros.
* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

49

PRINCIPIO DEL XE-2100 (3)
Canal de leucocitos y basófilos (WBC/BASO)
En este canal, el XE-2100 usa señales frontales y laterales de luz dispersa. Un reactivo acídico produce lisis y reducción del tamaño de los hematíes y las plaquetas. Este reactivo reduce también los leucocitos, dejando solamente los núcleos. Los basófilos permanecen casi en su estado original. El conteo total de leucocitos y de basófilos son obtenidos a través de este canal. El surfactante STROMATOLYSER-FB produce, por su acción lisante, fantasmas de hematíes y de plaquetas reduciendo los leucocitos sólo a sus núcleos, con excepción de los basófilos. Las diferencias volumétricas resultantes entre los basófilos y otras células son analizadas usando la información de señales de luz dispersa lateral y luz dispersa frontal. La intensidad de la luz dispersa frontal indica el volumen de las células, mientras que la luz dispersa lateral representa la complejidad de los residuos celulares. Los basófilos aparecen como una población separada. Los núcleos también están separados de los fantasmas. El conteo total de leucocitos es la suma de los núcleos y basófilos. Los hematíes nucleados están incluidos en este conteo.

50

Casos de células de apariencia específica
Caso de linfocitos de apariencia atípica Caso de hematíes de apariencia falciforme Muestra infantil Linfoma blástico NK 52 54 56 58

51

Casos de células de apariencia específica

Caso de linfocitos de apariencia atípica
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 11.71 * 2.45 66 21.3 86.9 26.9 310 176 * 45.9 14.6 23.1 * 13.4 * 49.3 * 0.24 * 5.35 * 4.29 * 1.28 * 0.45 * 0.34 + 0.00 * 0.36 15.7 84.3 11.8 3.9 [109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] 45.8 * [109/L] 36.6 * [109/L] 10.9 * [109/L] 3.8 * [109/L] 2.9 + [109/L] 0.0 * [%] 8.8 [%] [%] [%] [%]

Diferencial manual
Banda 9.0 [%] Segmentados 58.5 [%] Linfocitos 15.0 [%] Monocitos 6.0 [%] Eosinófilos 5.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Mielocitos 0.5 [%] Linfocitos atípicos 6.0 [%] Formaciones rouleaux
[%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

Lymphocytosis Monocytosis Basophilia

Anemia

PTL Abn Distribution PLT Clumps(S)?

Atypical Lympho? Abn Lympho/L-Blasts?

Observaciones
En el dispersograma DIFF aparecen puntos rosados en el área donde la fluorescencia es fuerte (indicado por ), lo que sugiere la presencia de linfocitos atípicos. Se observaron linfocitos atípicos (6%) en el frotis, lo que concuerda con los mensajes de sospecha generados por el XE-2100.

52

Hallazgos clínicos
Un paciente que tenía un poco de fiebre y crecimiento sistemático de los nódulos linfáticos, visitó al médico en octubre de 1999. Debido a que el conteo de linfocitos, la proteína total y la γ globulina habían aumentado, el paciente fue remitido a nuestro departamento. El resultado de los exámenes reveló leucocitos 12.6 x 109/L (linfocitos atípicos 10%), hematíes 3.70 x 1012/L,hemoglobina 106g/L, plaquetas 177 x 109 /L, proteína total 96g/L y porcentaje de γ globulina del 48.9%. A este paciente se le diagnosticó un linfoma célula T angioinmunoblástico mediante una biopsia en el nódulo linfático derecho, la que se efectuó el 4 de noviembre de ese año.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa

(x 1000) (x 1000)

Observaciones
Se encontraron linfocitos atípicos de Downey tipo I (con citoplasma teñido de azul oscuro). La estructura nuclear es áspera y algunos linfocitos atípicos presentan lobulación nuclear. Los hematíes se presentan en forma de rollos.

53

Casos de células de apariencia específica

Caso de hematíes de apariencia falciforme
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC & 12.76 [109/L] Diferencial manual RBC 1.68 - [1012/L] Banda 6.0 [%] HGB 59 - [g/L] HCT 16.8 - [%] Segmentados 30.0 [%] MCV 100.0 [fL] Linfocitos 50.5 [%] MCH 35.1 [pg] Monocitos 1.0 [%] MCHC 351 [g/L] Eosinófilos 11.5 [%] PLT 373 [109/L] Basófilos 1.0 [%] RDW-SD 62.2 + [fL] Hematíes RDW-CV 17.4 + [%] nucleados 20/200 WBC PDW 10.9 [fL] Poiquilocitos (+) MPV 9.9 [fL] P-LCR 23.7 [%] PCT 0.37 + [%] 9 * NEUT & 7.83 * [10 /L] 61.3 * [%] LYMPH & 2.69 * [109/L] 21.1 * [%] MONO 1.52 * [109/L] 11.9 * [%] EO 0.48 * [109/L] 3.8 * [%] BASO 0.10 * [109/L] 0.8 * [%] NRBC 1.17 [109/L] 9.1 [/100WBC] RET 19.19@ [%] 322.4 * [109/L] IRF 28.2 * [%] LFR 71.8 * [%] MFR 21.0 * [%] * Parámetros de investigación HFR 7.2 * [%] IG 0.14* [109/L] 1.1* [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages

PLT IP Messages

Monocytosis NRBC Present Immature Gran?

RET Abn Scattergram Reticulocytosis Anemia

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Observaciones En el dispersograma NRBC aparecen puntos rosados (indicado por ), lo que sugiere la presencia de hematíes nucleados. El resultado obtenido por el XE-2100 es 9.1 hematíes nucleados por cada 100 leucocitos, similar a los datos obtenidos con el método manual. En el dispersograma RET, puntos en el área de fluorescencia baja y hematíes maduros forman un grupo redondo (indicado por ). Este tipo de dispersograma se presenta muy pocas veces.

54

Hallazgos clínicos
A una paciente se le diagnosticó una enfermedad de células falciformes cuando tenía tres años de edad. En su segundo parto fue internada en el Departamento de Obstetricia y Ginecología de nuestro hospital. Los exámenes del 26 de octubre de 1999 revelaron leucocitos 11.1 x 109/L, hematíes 1.78 x 1012/L, hemoglobina 86g/L, Hematocrito 18.6%, plaquetas 379 x 109/L, T-Bil 27 µ mol/L, LDH 1,197 IU/L, AST 75 IU/L y ALT 24 IU/L.

Información obtenida del análisis del frotis
Fotografía de microscopía electrónica

Observaciones
Este es un caso de enfermedad de células falciformes. Se encontraron numerosos eritroblastos y poiquilocitos con forma falciforme, los que se confirmaron como células falciformes en la prueba para la determinación de anemia falciforme.

(x 2000) Tinción May-Giemsa

Fotografía de microscopía de fase de contraste (Análisis de anemia falciforme)

(x 1000)

(x 400)

55

Casos de células de apariencia específica

Muestra infantil
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
Diferencial manual
WBC & RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 9.20 [10 /L] Banda 0.5 [%] 4.51 * [1012/L] Segmentados 46.5 [%] 164 [g/L] Linfocitos 40.5 [%] 48.8 * [%] Monocitos 7.0 [%] 108.2 * [fL] Eosinófilos 1.0 [%] 36.4 * [pg] Basófilos 3.0 [%] 336 * [g/L] Mielocitos 0.5 [%] 9 349 [10 /L] Linfocitos atípicos 1.0 [%] 66.8 * [fL] Hematíes nucleados 4/200 WBC 17.0 * [%] Macroplaquetas (+) 11.2 [fL] Cuerpos de Howell-Jolly (+) 10.5 [fL] Punteado basófilo (+) 27.6 [%] 0.37 + [%] 5.29 * [109/L] 57.4 * [%] 3.18 * [109/L] 34.6 * [%] 0.57 * [109/L] 6.2 * [%] 0.09 * [109/L] 1.0 * [%] 0.07 * [109/L] 0.8 * [%] 0.34 [109/L] 3.7 [/100WBC] 3.47 [%] 156.5 * [109/L] 32.6 [%] 67.4 [%] 23.3 [%] 9.3 [%]
9

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages

PLT IP Messages

NRBC Present Immature Gran?

RBC Abn Distribution Anisocytosis

Observaciones
En el dispersograma DIFF todas las células se agrupan generalmente en la región donde la sensibilidad , a la fluorescencia es menor. Este patrón se considera característico de la sangre de los niños. Los puntos rojos difusos en el dispersograma IMI (indicado por ) sugiere la presencia de granulocitos inmaduros. Se considera que los mielocitos (0.5% según el método manual) están distribuidos en esta área. Este caso presenta 4 hematíes nucleados por cada 200 leucocitos, según el método manual. En el dispersograma NRBC, los puntos rosados (indicado por ) sugieren la aparición de hematíes nucleados.

56

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa

Observaciones
Esta es una muestra de un niño en la que no se observó anormalidad, excepto que hay eritroblastos en la sangre periférica.

(x 1000) (x 1000)

57

Casos de células de apariencia específica

Linfoma blástico NK
Información del XE-2100
Información medida por el XE-2100
WBC 12.99 [109/L] Diferencial manual RBC 3.82 [1012/L] HGB 112 [g/L] Banda 12.0 [%] HCT 33.7 [%] Segmentados 21.5 [%] MCV 88.2 [fL] Linfocitos 19.5 [%] MCH 29.3 [pg] Monocitos 1.5 [%] MCHC 332 [g/L] Eosinófilos 13.0 [%] 9 PLT 129 [10 /L] Basófilos 1.0 [%] RDW-SD 46.7 [fL] Mielocitos 2.5 [%] RDW-CV 15.6 [%] Metamielocitos 0.5 [%] PDW 11.8 [fL] Linfocitos atípicos 28.5 [%] MPV 11.1 [fL] P-LCR 30.7 [%] PCT 0.14 - [%] * NEUT & 41.3 [109/L] 31.8 [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO ---- [109/L] ---- [%] EO 1.20 * [109/L] 9.2 * [%] BASO 0.08 * [109/L] 0.6 * [%] NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] RET 1.94 [%] 74.1 [109/L] IRF 24.1 [%] LFR 75.9 [%] * Parámetros de investigación MFR 18.3 [%] HFR 5.8 [%] IG 0.28 [109/L] 2.2 [%]

WBC IP Messages

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

WBC Abn Scattergram Eosinophilia Immature Gran?

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Observaciones En el dispersograma DIFF hay puntos que se extienden incluso por encima del área de neutrófilos , (indicado por ). Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros. Los datos obtenidos según el método de conteo manual (2.5% de mielocitos + 0.5% de metamielocitos) son similares a los datos de 2.2% de granulocitos inmaduros obtenidos en la pantalla de investigación del XE-2100. Linfocitos atípicos (28.5% según el método de conteo manual) se ubican entre las áreas de linfocitos y monocitos (indicado por ). Por lo tanto, estos dos tipos de células no pueden ser clasificadas. En el dispersograma IMI aparecen puntos rojos (indicado por ). Esto indica la presencia de mielocitos y metamielocitos (observados en el método manual) en esta área.

58

Hallazgos clínicos
Un paciente visitó el Departamento de Dermatología de nuestro hospital a causa de un tumor sistémico múltiple (diámetro de 1-5 cm) en abril de 1999. A este paciente se le diagnosticó un linfoma maligno mediante una biopsia del tumor. Los resultados del examen realizado el 10 de junio revelaron leucocitos 11.2 x 109/L (linfoma atípico 23%), LDH 691 IU/L y sIL 2R 3.625 U/L. El análisis del frotis de sangre periférica mostró que este caso era un linfoma blástico de linfocitos tipo NK.

Información obtenida por el método de citometría de flujo
Datos (sangre periférica)
Células T CD2 97 .9 CD3 22.5 CD4 78.3 (11.3) CD5 26.4 CD7 36.0 CD8 11.3 Células B Granulocitos/Monocitos Células NK CD10 4.4 CD14 0.1 CD16 3.6 CD19 1.8 CD33 3.4 CD56 69.4 CD20 2.6 CD34 1.0 HLA-DR 69.4
Otros

Observaciones
Por la información del marcador de datos de superficie, se considera que un 30% de linfocitos normales están incluidos en los portales. Se observa la presencia de linfocitos en los cuales se expresan marcadores de superficie anormal: CD2+, sCD3-, CD4+dull (es imposible la contaminación de monocitos porque CD14 es negativo), CD5-, CD7-, CD8-, CD16-, CD19-, CD20-, CD25-, CD56+ y HLA-DR+.

CD25 11.4

Los números en paréntesis muestran un porcentaje positivo con sensibilidad de fluorescencia normal. Se observan dos picos para CD4.

Información obtenida del análisis del frotis
Tinción May-Giemsa

Observaciones
Se observan linfocitos atípicos grandes cuya estructura nuclear es áspera. También se observan células (con baja lobulización nuclear) que son clasificadas como linfocitos anormales.

(x 1000) Tinción May-Giemsa

(x 1000) 59

Principio del XE-2100 (4)
Canal de hematíes nucleados o eritroblastos (NRBC)
En el canal de hematíes nucleados o eritroblastos (NRBC), un surfactante causa que los hematíes y plaquetas se contraigan y al mismo tiempo tiñe los ácidos nucleicos de leucocitos y de hematíes nucleados. El XE-2100 cuenta los hematíes nucleados usando fluorescencia lateral y la información de luz dispersa frontal, la que es obtenida al iluminar la muestra con un rayo láser semiconductor. El surfactante en el STROMATOLYSER-NR causa lisis en las membranas de hematíes, dejando que sólo el núcleo de los hematíes nucleados estén presentes. Las membranas leucocitarias no son lisadas y su citoplasma es retenido. La tintura de polimetina fluorescente en el STROMATOLYSER-NR penetra la membrana de la célula de leucocitos y tiñe los organelos citoplasmáticos. De este modo, dos poblaciones claras emergen debido a diferencias en la intensidad de la fluorescencia. Usando las señales de la luz dispersa frontal, se pueden distinguir las diferencias volumétricas entre las células nucleadas y las fantasmas.
Tinción

Hematíes

60

La intención de los mensajes generados por este instrumento se limita a la identificación de muestras que contengan células anormales, sujetas a revisión por personal de laboratorio calificado. SYSMEX CORPORATION División Científica 4-4-4 Takatsukadai, Nishi-ku KOBE 651-2271, Japón Teléf.: 078-991-1911 Fax: 078-992-5842 e-mail: scientific@sysmex.co.jp
Publicado por: Sysmex Latinoamérica. Oficina representativa en Miami. Página web: http://www.sysmex.com © Derechos de autor Sysmex Corporation. Esta es una traducción del texto original en inglés. Este libro no puede ser reproducido ni parcial ni totalmente sin permiso previo de la compañía.

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