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FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR-LABORATORIO

FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR-LABORATORIO

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Esta practica llevada a cabo en el laboratorio, permite entender detalladamente el fraccionamiento subcelular. En los resultados obtenidos se puede visualizar los diferentes componentes celulares (citoplasma, mitocondrias, citosol, etc)
Esta practica llevada a cabo en el laboratorio, permite entender detalladamente el fraccionamiento subcelular. En los resultados obtenidos se puede visualizar los diferentes componentes celulares (citoplasma, mitocondrias, citosol, etc)

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Published by: Jorge Alexander Cabrera Sanchez on Apr 06, 2011
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PRACTICA

# 1

FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR

¿QUÉ ES EL FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR? Es la extracción de un homogeneizado de los órganos o tejidos.  Este homogeneizado esta formado por las células rotas de los órganos o tejidos.  El homogeneizado debe ser conservado en una solución que le brinde el medio adecuado para la conservación de los organelos.  .

basadas en la diferencia de densidades y tamaño y peso de los organelos.METODO: CENTRIFUGACION y DIFERENCIAL: Consiste en someter el homogeneizado a diferentes velocidades en la centrifuga para lograr separaciones. y Este tipo de centrifugación debe hacerse a una temperatura de 4°C. .

154 M Tijera Jeringa Algodón Placa Petri Vaso de precipitados Tubos de ensayo Gradilla Licuadora Centrifuga Balanza Embudo .MATERIALES: Hígado de pollo KCl 0.

154M hasta que expulse los residuos de sangre hasta quedar de un color claro. 2° inyectar KCl 0. 1° colocamos el hígado en la placa Petri. .EXTRACCIÓN DE BIOMOLÉCULAS Y ORGANELOS.

4° agregarle la misma cantidad de KCl 0.154M y llevarlo a la licuadora para homogeneizar. triturar con una tijera.3° en la misma placa. .

5° filtrar el homogeneizado y luego colocarlo en los tubos de ensayo y posteriormente contrapesar para colocarlo en la centrifuga. . 6° centrifugar a 1000g durante 10·.

7° retirar de la centrifuga y extraer el sobrenadante en otro tubo de ensayo y conservar el sedimento. donde se encuentran las células y núcleos. . 8° colocar el sobrenadante nuevamente en la centrifuga a 10000g durante 30·.

que en este caso es la Fracción Mitocondrial. .9° retirar nuevamente el centrifugado y extraer el sobrenadante. donde se encuentran las mitocondrias y lisosomas.

y debido a esto los organelos y células pueden haber muerto y por la temperatura del medio donde nos encontrábamos. . debido a que el hígado utilizado no era lo suficientemente fresco.DISCUSIÓN: El producto obtenido no tuvo un alto porcentaje de rendimiento.

. en la segunda centrifugada. en la primera centrifugada.CONCLUSION: Finalmente se pudo extraer lo suficiente como para identificar en el sedimento las celular y núcleos. y las mitocondrias y lisosomas.

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