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Fosfatasa ácida prostática

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Fosfatasa ácida prostática

Definición Es un examen de sangre que se utiliza para medir la fosfatasa ácida prostática (una enzima que se encuentra principalmente en los hombres en la glándula prostática y en el semen) con el fin de determinar la salud de la glándula prostática. La disfunción prostática ocasiona la liberación de fosfatasa ácida (FA) en el torrente sanguíneo. Nombres alternativos Prueba de fosfatasa ácida prostática masculina; prueba fosfatasa ácida prostática; fosfatasa ácida en suero Forma en que se realiza el examen La sangre se extrae de una vena, usualmente de la parte anterior del codo o del dorso de la mano. El sitio de punción se limpia con un antiséptico y luego se coloca una banda elástica alrededor del brazo con el fin de ejercer presión y restringir el flujo sanguíneo a través de la vena. Esto hace que las venas bajo la banda se llenen de sangre. Se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre en un frasco hermético o en una jeringa. Durante el procedimiento, se retira la banda para restablecer la circulación y, una vez que se ha recogido la sangre, se retira la aguja y se presiona moderadamente sobre el sitio de punción para detener cualquier sangrado. Preparación para el examen Este examen generalmente no requiere preparación especial. Como en cualquier otro examen sanguíneo, el médico puede limitar ciertos alimentos o medicamentos poco tiempo antes de realizar el examen para asegurar una muestra confiable. Los medicamentos que pueden interferir con las mediciones de FA son, entre otros: fluoruros, oxalatos, clofibratos y alcohol. Lo que se siente durante el examen Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras sienten sólo un pinchazo o sensación punzante. Posteriormente, hay una sensación pulsátil en el área. Razones por las que se realiza el examen Este examen se realiza con mayor frecuencia para determinar si el paciente tiene cáncer de próstata, una anomalía de la glándula prostática, o para hacer un seguimiento de la respuesta del cáncer prostático al tratamiento. Esta prueba ya no se utiliza de manera rutinaria. La disponibilidad del ensayo PSA más sensible y más específico ha reemplazado ampliamente el uso clínico de la prueba FA.

Valores normales Los valores normales varían de un laboratorio a otro. Si se desea información sobre los valores normales se recomienda consultar con el médico o remitirse al laboratorio de confianza. Significado de los resultados anormales Existen muchas razones para obtener valores anormales de FA y las más comunes son, entre otras:
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Cáncer de próstata Cáncer de próstata que se ha diseminado fuera de la próstata (particularmente al hueso) Disminución del flujo sanguíneo hacia la próstata Enfermedad de Paget (los huesos se tornan más gruesos y más blandos) Anemia Infección (usualmente severa) Tromboflebitis Enfermedad de Gaucher Hiperparatiroidismo Ataque cardíaco Enfermedad renal Estimulación física de la próstata (colonoscopia, enemas, examen de la próstata) Mieloma múltiple Prostatitis

Cuáles Son Los Riesgos
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Sangrado excesivo Desmayo o sensación de mareo Hematoma (sangre acumulada bajo la piel) Infección (riesgo leve cada vez que se se presenta ruptura de la piel) Múltiples punciones para localizar las venas

Consideraciones especiales Es posible que el cáncer de próstata, localizado sólo en la glándula prostática, no produzca niveles suficientemente altos como para indicar un problema. Si los resultados de una prueba FA son normales, esto no descarta la posibilidad de tener cáncer de próstata. Las venas y arterias varían en tamaño de un paciente a otro y de un lado del cuerpo a otro, razón por la cual puede ser más difícil obtener una muestra sanguínea de algunas personas que de otras.

almohadas. camisones. pisos. opalescente. tapizados de automóviles.2-7. Al secarse. ligeramente amarillo. etc.CIENCIAS FORENSES PARA TODOS Importancia de los Fluidos Seminales en la Escena del delito y su Investigación Basado en el Tratado de Criminalística Tomo II de la Policía Federal Argentina Editado por Malena González de León El estudio de los Fluidos Seminales en la Escena del Crimen se encuentra directamente ligado a los Crímenes de Índole Sexual y serán de vital importancia al momento de realizar la reconstrucción del hecho y el establecimiento de identidad del agresor o agresores. sábanas.3 y esta compuesto por el plasma seminal y los espermatozoides que pueden ser separados por centrigufación . y a veces amarillento. Posee un ph de 7. Componentes no proteicos: Cloruro de Na 200 mg% Dióxido de Carbono 50 ml% Fósforo inorgánico 40-50 mg% . Qué se estudia en el Semen: ( en este informe solo se desarrollará el primer punto) Si de hecho es semen Si de serlo es o no humano Muchas veces el grupo sanguíneo Si hubo eyaculación interna o externa Si el agresor había consumido drogas Composición del Semen: El semen es un líquido de aspecto lechoso. adquiere un color blanco grisáceo. la mancha pierde su olor. vehículos. muebles. y contiene millones de espermatozoides. posee un olor alcalino característico. alfombras. los espermatozoides mueren. El semen antes de secarse. Donde puede ser encontrado: Manchas en vestimenta. El Semen es la sustancia que segregan los órganos reproductores masculinos y en la cual se encuentran los espermatozoides. e imparte a las telas un efecto almidonado.

nucleoproteína. CH2OH CH2 . albúmina. fosfatasa alcalina. NH2-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-CH2-CH2-NH2 El plasma seminal esta compuesto también por proteínas y enzimas. Interviene en el transporte de los lípidos y en su metabolismo formando los fosfolípidos . NO contiene hormonas sexuales y si contiene colina. una tromboquinasa . que es producto parcial de la hidrólisis de la espermina . coagulasa . proteasas no coagulables.Fósforo Ácido soluble 95 mg% Fósforo de la espermina 15-30 mg% Calcio 24-25 mg% Glucosa 200-300 mg% Urea 72 mg% Ácido Láctico 90-100 mg% Colesterol 80 mg% Entre las sustancias fosforadas se encuentra el difosfato de espermita que responde a la formula general: C10-H26-N4-H3 · 2 PO4H3 · 6 H20 El semen humano contiene 112-268 mg% de fosfato de espermita y junto a esta. fosfatasa ácida (de gran valor pericial). La Colina. se encuentra otra base en el semen. licuasa . la espermidina . presente en todas las células. fibrinolisina y fibrinogenasa . Pequeñas cantidades de globulinas. es una base orgánica constitutiva de la lecitina. y una amilasa de ph 6-7.

Y sus acepciones son la oligozoospermia (menor cantidad) y azoospermia (falta de espermatozoides). La eyaculación normal consta de 1. la concentración de este glúcido en el semen depende del funcionamiento hipofisiario ”. .NCH3 CH3 CH3 ( hidroxido de trimetil . los artículos deberán manejarse con mucho cuidado. La fracción prostática y por último los espermatozoides junto con el líquido segregado por las vesículas seminales. la galea capitis . de ph 8. La cabeza del espermatozoide es ovalalada piriforme y representa alrededor del 10% del total del largo. Es importante tener en cuenta que el esperma es producto de tres porciones distintas del sistema genital y sus composiciones son diferentes. es de cabal importancia el proteger las prendas que contengan a los mismos. Transporte y Cuidado de las manchas como evidencia: Dado que los estudios de semen se realizan principalmente en base a la presencia de espermatozoides. Muchos expertos consideran que la presencia de un espermatozoide completo es la única prueba irrefutable de la presencia de semen. La misma se forma a partir de la glucosa sanguínea y para ello es necesaria la testosterona (hormona masculina). y reaparece si se suministra a éstos dicha hormona…Mas aún: dada la relación existente entre la hipófisis y las glándulas sexuales y la recién mencionada. cuello. y las anormalidades son la hipospermia (volumen inferior a 1. Por esta razón.5 a 6 ml de fluido. Los espermatozoides: Son células móviles constituidas por una cabeza.000. “lo prueba el hecho que la fructosa desaparece por castración de animales.HO-.5ml) y aspermia (falta de semen).4 que neutraliza la acidez de la uretra. no deberá doblarse ni enrollarse la parte manchada y definitivamente no deberá someterse a fricción. ya que sin ella permanecen inmóviles. En la misma se distinguen una parte anterior ( acrosoma ) y otra posterior (núcleo) y se encuentra cubierta por una tenue membrana.000 de espermatozoides por ml de semen. cuerpo y cola con una longitud que varía de las 50 a 70 micras Se calcula que en el producto normal de una eyaculación se encuentran alrededor de 60. de las glándulas sexuales con la formación de fructosa. La primera proviene de las glándulas de Cowper .hidroxietil amonio) La fructosa es la responsable de la movilidad de los espermatozoides.

1. el gran problema que presenta la fluorescencia es que no es específica del semen. sino que producirá la misma reacción con otros fluidos biológicos.54 gr. por lo que en algunos casos donde las prendas contienen fibras de blancos ópticos. Métodos Cristalográficos: La Reacción de Florence Este método se basa en la formación de cristales de yoduro de colina. -195 ºC ) . Métodos Físicos: Examen UV Los métodos físicos consisten en la exposición de la mancha ala radiación ultravioleta. Examen directo con luz de longitud de onda 365nm que en general es poco efectiva. Las manchas de semen presentaran una fosforescencia qie persistirá por 20 segundos luego de retirada la fuente UV.Estudios que se realizan en el semen. 1. la única prueba irrefutable de presencia de semen en la muestra es la observación microscópica de un espermatozoide completo.56 gr. Calloway y sus colaboradores aconsejan la siguiente aplicación de luces para el análisis de las manchas: Examen directo con luz ultravioleta de longitud de onda 254nm a temperatura ambiente. El reactivo de Florence se constituye de 2. Esta técnica es de utilidad principalmente para el estudio de grandes superficies donde se sospecha que ha habido un delito de índole sexual y no ha podido ser determinado el sitio donde presuntamente se encontrarían las manchas. Estas ultimas fluorescerán sobre fondos no fluorescentes. Aquí se deberían observar bien salvando sobre tejitos fluorescentes. Si la mancha se encuentra en una superficie dura se procederá a rasparla y colocar los . la cual se encuentra presente en el esperma en forma de fosforil -colina y lecitina. 2. la cual inducirá una fluorescencia característica con una intensidad máxima de cerca de 4200mu. de Ioduro de potasio y 30 mililitros de agua destilada. se obtiene el efecto inverso donde las manchas fluorescerán con menor intensidad al resto de la tela. Existen para la investigación de las manchas seminales una cierta variedad de estudios que a continuación serán desarrollados. Por esta razón se mencionaran una serie de análisis recordando que en su mayoría son únicamente de carácter Preliminar. R.pero la observación será satisfactoria si el material es colocado dentro de un bloque de hielo seco. Examen a lux UV previa refrigeración (nitrógeno a temperatura de ebullición. de Iodo metálico. De todas formas. Es importante destacar que para muchos laboratorios periciales. Los autores A.

Si la mancha se encuentra todavía húmeda. • Se centrifugará por 5 minutos y a continuación se retirará el trozo de genero soporte escurriéndolo cono una varilla de extremo plano. principalmente porque no se conocen otros fluidos que registren simultáneamente una alta presencia de colina junto con fosfatasa ácida como en el esperma. Se lo deja en reposo por no mas de 20 minutos. pero resultará de gran importancia en el análisis de muestras de esperma aspérmicas . pero puede complicarse con el paso sucesivo del tiempo. • En un tubo de colocará una pequeña fracción de la zona maculada cubierta con la menor cantidad posible de agua destilada y se colocará en una centrífuga. la contaminación adquirida y la superficie en la que se encuentra la muestra. la misma se extraerá con la ayuda de agua destila. o por lo menos es de reciente data.residuos en el portaobjetos. para que los cristales no se disuelvan. Métodos Microscópicos Como fue destacado anteriormente. Si por el contrario la mancha está en una sup. para que por capilaridad corra entre el porta y el cubre. pero debido a la contaminación con la que generalmente se encuentran estos restos. la presencia de un espermatozoide completa es la prueba innegable de semen como parte constitutiva de la mancha. Luego de agregar unas gotas de agua destilada. Blanda. Los cristales de Ioduro de Colina son láminas romboidales de color pardo. como mencionado anteriormente. Es muy común que en las muestras puedan detectarse parciales de espermatozoides. el vidrio se . colocandolo en un porta objetos y secando a Baño Maria. la colina no es exclusiva del semen. por lo general esta determinación no será muy compleja. Y no debe olvidarse también el caso de los sujetos azoospérimicos . muchas veces estas células pueden ser confundidas con esporas y bacterias. Deber recordarse que. Del libro “Tratado de Criminalística Tomo II” de la Policía Federal Argentina citaremos las técnicas recomendadas para la mejor observación de estas células. Una alternativa a la centrifugación es la colocación de la tela con la mancha hacia abajo sobre un vidrio de reloj. y se observa al microscopio. Se colocará un cubreobjetos y una o dos gotas del reactivo de florence . 3. en los que no habrá secreción de espermatozoides en lo absoluto. ya sean cabeza o cola. • Se centrifugará a 1200 rpm por 5 minutos • Decantar el liquido sobrenadante y agitar enérgicamente el residuo sólido del fondo del tubo • Finalmente se tomara una gota del residuo y poniéndolo en porta objetos y cubriéndolo ose observará a l microscopio.

5 ml de solución 1 N de ác clorhídrico. Métodos Cromatograficos : TLC Los métodos de cromatografía en capa delgada son utilizados principalmente cuando no es posible visualizar un espermatozoide completo. • La corrida se realizará en clorhídrico 1N. 4. se tomara la cantidad encontrada en 1 cm2 y se procederá de la misma manera. es recomendable sembrar 10ul de colina y 10 de espermita. Para un manchar de varias horas se recomiendan 30 minutos. Para los casos en lo que hay contaminación sanguínea. Para la coloración de los preparados se recomienda la técnica de May. • Cubrir adecuadamente el tercio superior de la zona de la corrida cromatográfica y revelar el resto con el reactivo de Dragendorff : Solución A: Subnitratote bismuto = 850 mg Ácido Acético = 10 ml Agua destilada = 40 ml Solucion B . MayGrünwald . se recomienda utilizar una solución de saponina en el preparado.cubrirá con un cristalizador con un tiempo dependiente de la antigüedad de la mancha. Un dato importante es la supervivencia que presentan los espermatozoides en fluido vaginal. En la cromatografía se analizaran las bases nitrogenadas colina y espermita y la enzima fosfatasa ácida. se tomara el soporte con una pinza y transferirá el contenido a un portaobjeto por contacto. De poseerlas.Giemsa . Medgalin : • Para la toma de muestra se recomienda cortar 1cm2 del soporte y centrifugarlo con 0. Si la muestra es producto de un raspado. la cual alisara los hematíes. Aquí describiremos la técnica desarrollada por D. Luego. • Agitar bien para la disolución y salificacion de las bases y centrifugar.Grünwald . • Sembrar 20ul del extracto y 10ul de semen testigo. Hematoxilina-eosina. etc. en el que fueron encontrados inmóviles hasta 100 días después de ser eyaculados. azul de Loeffler . En este caso se tomara como determinante la negativa y como orientativa la reacción positiva. Hessel y F.

Ioduro de postasio = 40 gr Agua destilada = 100 ml Se mezclan 5 ml de la solución A con 5 ml de la solución B en 100 ml de agua en que se habrán disuelto 20 ml de ácido acético glacial. • Resultado positivo de colina: rosado de Rf :0.5 • Cubrir la zona revelada y utilizar ahora Iodoplatinico .85 Yodo Platinico : Cloruro de platino al 10% p/v = 1 ml Ioduro de potasio al 4% p/v = 25 ml Agua destilada c. Revelando con el reactivo de Dragendorff como fue explicado anteriormente. que en caso de espermita positiva dará color púrpura con relación de frentes 0.9 (3:10:488) Luego se realiza la corrida cromatográfica en papel con un líquido resolutivo compuesto der n butranol -ácido acético-agua (12:3 y el revelado con una solución acetónica de nihidrina al 0.25% con calentamiento a estufa de 80 ºC luego de la aspersión.s. . El punto interesante en esta técnica es la constancia numérica de 11 aminoácidos entre los cuales esta la presencia cuantitativa de la ornitina . La desventaja que presenta este método es que no analizaría simultáneamente la colina.p = 100ml Standards : Colina: 10 mg de clorhidrato de colina + 10 ml de agua destilada Espermita: 1 mg de tetraclorhidrato de espermita + 1 ml de agua destilada Semen: 1ml de semen humano fresco + 4 ml de ClH 1 N 5. que debe provenir de la arginina . Métodos Electroforéticos Este es un método bidimensional que se realiza sobre papel combinando métodos electroforéticos con cromatográficos que permite la separación de la espermina de los aminoácidos del semen. Primero se realiza la resolución electroforética en una solución de piridina-ácido acético-agua ph 3. para lo que se debería realizar otra corrida electroforética con igual solvente y testigos de colina y espermina .

pag 271. lamentablemente.metil umbeliferol que se agrega sobre la placa en un papel impregnado con el reactivo en solución buffer de ph 3. la prostática presenta mayor movilidad y actividad. Faletti Toxicología y Química Legal . El método práctico para medir la cantidad de fosfatasa ácida fue derivado del trabajo de King y Armstrong quienes encontraron que el cálculo de la cantidad de fenol liberado por un subestrato de disodio . este crimen no ha podido resolverse aún en la Justicia.cap V.Armstrong y deberán ser superiores a 30 unidades. Alicia G. La proporción de esta enzima encontrada en el esperma no es comparable con la encontrada en ninguna otro fluido biologico . Un método electroforético para la identificación de la fosfatasa ácida consiste en la investigación de esta banda con el fosfato de 4. algunos se han resuelto y otros aún no.ya que la ornitina no es proteíno -genética. En el caso de la sanguínea. El artículo que presentamos esta vez acerca algunos datos sobre la investigación del caso de Jimena Hernández que contribuyen a entender por qué. La fosfatasa ácida catalizará la hidrólisis liberando la metil umbeliferota.fenil -fosfato proporciona una medida fehaciente del grado de hidrólisis del subestrato producido por la fosfatasa . Métodos Enzimáticos sobre la Fosfatasa Ácida: Fosfatasa ácida es cualquier enzima capaz de hidrolizar un fosfato orgánico en medio ácido. 6. Los valores de esta enzima en fluido seminal se expresarán en valores King .5 – 5. La fosfatasa ácida prostática produce la hidrólisis de la fosforil colina en ácido fosfórico y colina. “Tratado de Criminalística – Tomo II – La química Analítica en la Investigación del Delito” . Casos de química legal En esta sección se describen los detalles sobre Toxicología y Química Forense de casos resonantes que llegaron a la Justicia. por lo que su fluorescencia será muy superior a las demás. El caso "Jimena Hernández" por la Dra. Esta enzima actúa entre un ph 4. gracias a la composición de la archilamida se provoca la inhibición de la fosfatasa eritrocitaria . que es fuertemente fluorescente en azul pálido. A diferencia de otras fosfatasas ácidas.

preservada bajo determinadas condiciones y en concentración adecuada. Fernando Cardini como perito de parte e integrante de la Cátedra de Toxicología y Química Legal de la FCEyN. además de la presencia acusadora de una mancha de semen en la malla con la que fue encontrada sin vida. Hoy se sabe que los espermatozoides proveen la mayoría del DNA en una muestra eyaculada por el hombre pero existe además una pequeña cantidad de DNA proveniente de leucocitos y células epiteliales. Por lo tanto los nuevos análisis debían hacerse con metodologías más confiables y acorde a las condiciones a que habían sido sometidas las muestras. En este caso. lavado. es encontrado en el natatorio de un centenario colegio católico. manipuleo incorrecto. contaminación. Por lo tanto un individuo azoospérmico tendrá en el semen tan sólo un 6% del DNA que tendría un individuo normal. esto no invalida la conclusión de la presencia de fluido seminal. Esto confirmó la presencia de fluido seminal en la prenda de la víctima. a las 18 horas. Esto permitió concluir que el marcador principal seminal aceptado hasta el momento (FAP) podía encontrarse en una malla de esas características. cierra la causa resolviendo que la niña murió ahogada a pesar de que los pulmones y el estómago de la pequeña víctima. por la insistencia de la madre de la víctima. Dos meses más tarde el Juez de Instrucción actuante. Básicamente el espermatozoide es categórico. se hallan frente a un rastro de alta complejidad. sin precedentes en la justicia argentina. Las primeras pericias químico legales realizadas sobre la prenda de la niña se informaron en agosto de 1988 y daban como resultado la presencia de fluido seminal en la misma. la intervención de los medios y gracias al accionar de un abogado que desafió al sistema. el caso se abre nuevamente. no exhiben ni una sola gota de agua. Cuando en diciembre de 1988. se hace necesaria una ampliación de la pericia. las probabilidades de encontrar el patrón genético del emisor eran elevadas.El día 12 de julio de 1988. de vieja data y habían sido sometidas además a variables de degradación como inmersión. los químicos legistas intervinientes. Es así que en Química Forense se han buscado otros marcadores seminales que hasta la fecha son mucho más confiables para la confirmación de la presencia de semen como la enzima "fosfatasa ácida prostática (FAP) y la proteína P-30. Por lo tanto se sometieron muestras testigo (fluido seminal humano en tela similar a la de la víctima) a las mismas condiciones que había sufrido la muestra en cuestión. aún después de 45 minutos de inmersión en agua de pileta. Si bien no se hallaron espermatozoides en la muestra. A fines de diciembre. Los antecedentes bibliográficos indicaban que en una mancha seca de origen seminal. etc. pero su ausencia no descarta la posibilidad de que el fluido en estudio sea semen. A esta conclusión llega el Laboratorio Químico de la Policía Federal. La siguiente etapa consiste en la búsqueda de marcadores genéticos que permitan tipificar el fluido encontrado. Normalmente en la investigación de delitos de violación y abuso sexual la búsqueda de semen es de gran importancia ya que éste puede utilizarse como elemento de identificación humana y para descartar sospechosos. Esta cantidad es suficiente para obtener resultados confiables y concluyentes para ser usados como prueba. se plantea la colaboración de profesionales del exterior para analizar el DNA de la muestra. Algunos meses después. Esto se debe básicamente a que estos elementos figurados se destruyen con cierta facilidad o porque puede tratarse de semen de un individuo oligozoospérmico o azoospérmico (poca cantidad o ausencia de espermatozoides respectivamente). el cuerpo sin vida de la alumna Jimena Hernández. La cantidad de muestra era pequeña. y este marcador se viene usando desde los años 70. ya que tan sólo un par de años antes habían comenzado a dar su aporte a la Ciencia Forense primero en Europa y luego en EEUU. Se trató de estudiar las isoenzimas polimórficas pero lamentablemente el tiempo transcurrido mostró la inactividad de estas sustancias. en base a los resultados obtenidos en la determinación de fosfatasa ácida prostática y a la formación de cristales de ioduro de colina (cristales de Florence). entre ellos el Dr. Cabe destacar también la posibilidad de individuos que se practicaron la vasectomía. la evidencia física hallada . Nuestro país fue pionero en el uso de la FAP.

mostraba una baja concentración de fluido. siempre deja algo en el escenario del crimen y a su vez se lleva algo consigo. . En una investigación criminal deben formularse todas las hipótesis posibles y plantear en base al método científico todos los diseños de experimentos necesarios para validar o refutar cada una de ellas. A pesar de ellos.en la malla de Jimena. Fernando Cardini presentado en su oportunidad. Tal vez la historia hubiera sido otra si el primer Juez de Instrucción. el desestimar un informe pericial en lugar de cuestionarlo.. A principios del siglo XX. Es lógico suponer que un resultado positivo hubiera brindado información muy valiosa en la investigación. Justamente la preocupación primordial de la Criminalística. Lamentablemente ya habían pasado muchos meses desde el homicidio y esto era una importante ventaja para el victimario. la evidencia física indiscutible de la presencia de la FAP y la demostración experimental de que este tipo de material biológico se mantenía a pesar de la inmersión por más de 45 minutos dio lugar a la verificación de la única hipótesis valedera e irrefutable. es estudiar esos rastros e indicios denominados por Locard "testigos mudos que no mienten" mediante la aplicación del método científico. Además aseguraban que el no haber podido obtener un resultado positivo en la búsqueda de un marcador genético. En este caso. humanísticas y sociales. Alicia G.. A pesar de ello.. en lugar de desestimar la primera pericia realizada de la prenda. la Justicia Argentina consideró que bien valía la pena este intento y remitió el escaso material a un laboratorio especializado de EEUU. auxiliada por la Química Forense. paradigmas como "no hay espermatozoides. Jimena había sido asesinada y colocada en la pileta para simular un accidente. exposición prolongada a agentes oxidantes (cloro de la pileta) y comprobada degradación de proteínas y enzimas. Watson conoce a Sherlock en el laboratorio de química justo cuando este acaba de descubrir un método para identificar trazas de sangre seca. no hay semen". Desde tiempos remotos la Historia y luego la literatura -en busca de un compañero de pieza. ¿Probamos una hipótesis? Si cuando un hombre comete un delito. fundamentaba aún más su posición y que el caso no había sido asesinato sino un accidente fatal. el desconocimiento de un correcto manipuleo de las muestras. ausencia de espermatozoides. discutirlo o ampliarlo llevaron al Caso Jimena a quedar en los anales de la Justicia Argentina como un "crimen perfecto" Casos de química legal El As en la Manga Dra. Cabe citar el último párrafo del informe escrito por el Dr. al juzgado interviniente después de conocer los resultados de los análisis: "…. Faletti Toxicología y Química Legal Cuántas veces al leer la historia de personajes reales o de ficción nos preguntamos si existe el crimen perfecto. esa mancha no era semen. alta contaminación microbiana. además de la indemostrable hipótesis de accidente fatal.se han servido del conocimiento de la Química Forense para investigar los más enigmáticos crímenes con el auxilio de muchas disciplinas de las ciencias exactas. No olvidemos que el tiempo lo manejamos en un solo sentido y no nos permite hacer los análisis que se podrían haber realizado 6 meses atrás". se hubiera planteado otra hipótesis de investigación. Edmond Locard de la Universidad de Lyon enunció el principio de intercambio según el cual "todo contacto deja una huella". naturales. Algunos "expertos forenses" sostenían que si no se habían encontrado espermatozoides.

la muerte de Napoleón Bonaparte fue durante mucho tiempo un "verdadero crimen perfecto" hasta que nuevas evidencias le dieron al caso otra vuelta de tuerca indicando que en su exilio el Emperador había sido envenenado lentamente con arsénico suministrado periódicamente por uno de sus allegados. Tras la pista del vil no metal . Recién en recién en 1840 James Marsh logró demostrar por un método científico la presencia de arsénico en una víctima de envenenamiento. el arsénico permanece en el organismo acumulándose en distintos tejidos como hígado. dolores. El As en la manga ¿y en el pelo también? Entre los venenos más antiguos usados por el hombre para asesinar estaba el arsénico porque "no dejaba rastros evidentes en el cuerpo". dependiendo de si la intoxicación se produjo en forma aguda o crónica. vómitos. En esa época sólo se identificaba al elemento. Los síntomas de intoxicación con arsénico son múltiples y muy desagradables. en muchos casos. uñas y huesos. y sobre todo en cabellos. Efectivamente. cambiar la historia. lo que hacía fácil de confundirlo con úlceras gástricas o enfermedades hepáticas. En intoxicaciones crónicas. pero su método no convencía a jueces ni jurados de la época.. recién a mediados del siglo XX se pudo cuantificar y estimar dosis administradas. problemas hepáticos y renales y otras manifestaciones inespecíficas. riñón. sino muchos años después cuando el cabello del mismo Napoleón dio todas (o casi todas) las respuestas.entonces aumentando la sensibilidad en los métodos de detección de esos indicios se podría.. pero los más comunes son gastrointestinales.. ¿Cómo se descubrió el veneno y quién fue el asesino? Por supuesto que no fue en esa época. Los primeros intentos para determinar arsénico en los cuerpos fueron realizados por Karl Schelle en 1775.

El cuerpo presentaba sólo una ligera putrefacción en la punta de la nariz y en los bordes de las orejas. ¡Hay un hongo en mi empapelado! Varias personas que lo rodeaban fueron descartadas como sospechosas porque no permanecieron constantemente a su lado. Hamilton Smith. Escocia. Sólo un . El cabello y las uñas crecen a un ritmo constante y en intoxicaciones crónicas. varios cabellos más de Napoleón fueron analizados. general sir Hudson Lowe. aproximadamente cada 15 días durante el exilio en la isla. característica típica de los cuerpos que han sido envenenados con arsénico. Cuando murió el emperador. el resto estaba intacto. cuya familia pertenecía al círculo de los reinantes Borbones. refiriéndose al parecer al gobernador de la isla. un cirujano italiano hizo la autopsia y dictaminó cáncer de estómago como causa de la muerte. propios del envenenamiento arsenical. Los resultados confirmaron que a Napoleón le habían suministrado arsénico en forma constante. el Dr. Napoleón escribió en su testamento: "Estoy muriendo antes de mi hora. donde permaneció varios años hasta que en 1840 fue embarcado con destino a Francia. Del museo del Ejército de los Inválidos se obtuvo el cabello de Napoleón para ser enviado a Smith. fue condenado al destierro en la isla inglesa de Santa Helena adonde llegó el 17 de octubre de 1815. Los franceses siempre estuvieron molestos por aquella acusación en su testamento y por las historias que en esa época afirmaban que en realidad había sido envenenado por su compañero y asistente. a raíz de la derrota que sufrió en la batalla de Waterloo. en el exilio. para ser depositado en la gran tumba-monumento de Los Inválidos. Posteriormente. conde Charles Tristán de Montholon. el arsénico se absorbe en ellos en una forma igualmente constante. del Departamento de Medicina Forense de la Universidad de Glasgow. que habían afectado al emperador y que se tenían registrados en los informes médicos de la época. asesinado por la oligarquía británica y su asesino a sueldo". Muy poco antes de su muerte. durante cuánto tiempo.Napoleón Bonaparte. El cuerpo desenterrado estaba casi perfectamente conservado. en París. Por el año 1960. Los picos en los gráficos de arsénico obtenidos del pelo coincidían con el conjunto de síntomas agudos. requisito necesario por el método empleado. El cadáver fue enterrado en la isla. quien determinó que la muestra tenía tres veces más arsénico que lo normal. de modo que las pruebas efectuadas con una determinada longitud de cabello muestran claramente cuándo empieza el envenenamiento. unos obtenidos cuando Napoleón regaló un mechón suyo a una joven en 1918 y otros obtenidos cuando rasuraron su cabeza al día siguiente de su muerte. etc. fue el inventor de un método para analizar por activación neutrónica el contenido de arsénico en los cabellos. cuándo se tomó la última dosis.

Pacientes investigaciones llevaron a los científicos a encontrar las pruebas definitivas que señalaron a Montholon como el autor del asesinato. el pequeño fue atacado por la espalda por un puma. tomo II. habían pasado más de 18 horas y un felino de esas características realiza su digestión dentro de las 12-13 horas. utilizados en esa época. aunque en principio no parezca. para realizar las visitas a pie de estas maravillosas Cataratas. estaba jugando en el jardín de su casa junto a su hermana de seis años y otros niños. joven.oficial francés. Esta teoría no tenía tantos elementos probatorios como la anterior. Alicia Faletti Hasta ahora les he presentado crímenes causados por el hombre. La misma determinación por métodos químicos tradicionales. Muchos de los datos y relatos históricos fueron obtenidos de: · Causa de muerte. Al día siguiente. la rápida evolución en el campo del análisis instrumental permitió ampliar los alcances de la ciencia forense. el 6 de mayo de 1821. de Fernando Cardini. sitio masivamente visitado durante las caminatas. dónde. y quién cometió un hecho delictivo. 2001. Estos resultados no conformaron a todos los historiadores. el hijo menor de Esteban Terán Luna. Es lógico suponer que el asesinar con arsénico antes de 1840 brindaba al criminal alta probabilidad de éxito pero con el avance constante de las ciencias y todos los métodos disponibles para conocer el cómo. cuándo. que recorría la selva muy cerca del salto Dos Hermanos. Los primeros análisis dieron resultados negativos ya que no pudo comprobarse que hubiera ingerido carne humana. algunos se han resuelto y otros aún no. el conde Montholon permaneció a su lado hasta día de su muerte. Ignacio. quienes propusieron la teoría de una intoxicación accidental ocasionada por papeles que tapizaban las paredes. de Editorial Policial. Si visitaron alguna vez las Cataratas del Iguazú es el paso obligado y por cierto muy concurrido. El animal fue trasladado a un laboratorio médico veterinario en Foz de Iguazú para practicarle la autopsia. Caso Ignacio Terán Luna por la Dra. Casos de química legal En esta sección se describen los detalles sobre Toxicología y Química Forense de casos resonantes que llegaron a la Justicia. Con esta técnica (activación neutrónica con espectrometría gamma y detectores de germanio-litio) es posible detectar trazas de arsénico del orden de 10-10 a 10-7 g en pocos miligramos de muestra. de Frank Smith. una patrulla de guardaparques divisó y mató a un puma hembra. Editorial Planeta. jefe de guardaparques del Parque Nacional Iguazú. a escasos 100 m del acceso al paseo superior de las Cataratas. requiere un gramo de muestra en el caso de pelos normales. Según el relato de los otros niños. parece arriesgado anticipar que puede haber crímenes perfectos. y que por el ataque de un hongo liberaban arsénico al ambiente. de apenas 20 meses de edad. Ahora relataré un caso muy cercano en el tiempo y en la distancia que también fue producto de las manos del hombre. De inmediato las autoridades ordenaron un intenso rastrillaje para capturar al felino disponiendo a su vez el cierre del parque al público hasta nuevo aviso. Desde el ataque hasta la captura del animal. que estaban pintados con arsenito de cobre. 1983 · Tratado de Criminalística. Su ropa y parte de su cuerpo fue hallado oculto en el follaje unas horas después del ataque no muy lejos de la vivienda que ocupaba el guardaparque y su familia. especialmente a los franceses. En los últimos años. El 21 de Setiembre de 1997. Editorial Dunken. quien lo arrastró hasta el interior del Parque. 1983 · Técnicas de Investigación Criminal. por lo que se dudaba si el animal capturado era o no el responsable de la .

diámetro promedio. Acumula gran información del individuo a quien pertenece. ante la posibilidad de que pelos hallados en el contenido intestinal del animal pudiesen ser investigados. Si bien se obtuvo la certeza de que se trataba de cabellos humanos. Cardini muestras de pelos extraídos del contenido intestinal. Por otro lado. El 13 de Octubre un comunicado de prensa emitido por la APN mencionaba que el puma hembra abatido el 22 de Setiembre en el área de Cataratas del Parque Nacional de Iguazú había sido quien efectuó el ataque en el que perdió la vida Ignacio. raza. grupo sanguíneo y tipificar su DNA. los coatíes son alimento natural de los pumas y cuando acercamos a estos inofensivos y hermosos animalitos.muerte de Ignacio. responsable de la muerte de Ignacio. ya que desde hacía unas semanas se venían efectuando avistajes de un ejemplar de puma que capturaba a sus presas naturales (coatíes y cuises) a la vista de los turistas. Por si no saben. En un gran número de investigaciones criminales. Lo que no se explicó en ese comunicado es que este lamentable hecho fue producto. En estos hisopados pudo comprobarse la presencia de sangre humana perteneciente al pequeño Ignacio. . pelo del puma de diferentes partes del cuerpo y cabellos del menor extraídos de la remera. En los pelos de la garra del animal se observó un rastro adherido a ellos que parecía ser sangre seca. estamos acercando también a sus depredadores. Los cabellos de la remera del niño fueron comparados con los extraídos del felino y pudo comprobarse que sus características morfológicas eran similares (pigmentación. Esa es la otra razón por la que este no mal intencionado animal no le temía al hombre y evidentemente confundió al más pequeño del grupo con un coatí. Fernando Cardini. visitó alguna vez el Parque Nacional Iguazú se debe haber cansado de observar carteles que dicen: "no alimente a los coatíes". no sólo estamos alterando su equilibrio. brinda evidencias científicas de poder probatorio. El 9 de octubre los profesionales de la Administración de Parques Nacionales (APN) remitieron una veintena de hisopados en solución fisiológica de la base y vaina de las garras y de los pelos que las rodeaban. se obtuvo un dato adicional que permitió corroborar que el puma en cuestión era el responsable de la muerte del niño. humano o no. ¿Por qué digo esto? Si Ud. Por frágil que pueda parecer. tipo de medulación e índice escamoso). al darle de comer a los animales del parque. líquido intestinal. La otra razón también tiene que ver con las manos del hombre. una vez más. la presencia de cabellos humanos. e incluso si está completo se puede conocer el sexo. Los estudios realizados demostraron que en el contenido intestinal del puma había una serie de pelos de animales pequeños y además. Ese puma hembra. longitud. ¿Se entiende ahora? Esta es una de las razones por las cuales muchas personas visualizaron pumas muy cerca. de qué parte del cuerpo proviene. Por la minuciosa observación de los diferentes pelos del animal que habían sido remitidos. sino también los estamos acercando cada vez más al contacto humano. Por lo tanto para estos estudios se le remitieron al Dr. especialista en pericias químicas y ex docente de la Cátedra de Toxicología y Química Legal de esta Facultad. estamos estimulando que ellos dejen de tenernos miedo y se acerquen cada vez más. si bien sólo era perceptible bajo el microscopio con un aumento de 400 x. ¿Quién no se tienta de darle algo de comer a un animal tan lindo e inofensivo? ¿Y sacarnos una foto con ellos? ¿Quién no! Bueno. el estudio de pelos encontrados en la escena del hecho. Al alimentarlos. El parque continuaba cerrado mientras se proseguían con las investigaciones coleccionando rastros del animal que pudieran llegar a la verdad de los hechos. como no se reportaron otros ataques a personas dentro del parque hacía poco probable que se tratara de cabellos humanos de otra persona. A fines de setiembre se consultó al Dr. fue criado en cautiverio por el hombre y en el momento "oportuno" devuelto a su hábitat. la ausencia de raíz no permitió otros estudios para descartar otro origen que no fuera el del pequeño Ignacio (estudios de sexo. grupo sanguíneo o DNA). el pelo a menos que se queme o se trate con ácidos. es prácticamente indestructible. de las manos del hombre.

o quizás causalidad (¿?). pero que se había recuperado en el hospital. La mañana del 22 de julio de 1955. Duérmase mi niño. Stephen. indicaba que no existía envenenamiento alguno con "sustancia conocida": Sólo aclaraba la presencia atípica de una pequeña cantidad de almidón de maíz y eosina teñidos de rojo. Pero el patólogo. El cadáver. Dra. los toxicólogos criminalistas de los años ’50 debieron afinar el olfato (y las pipetas) ante la aparición de los “venenos modernos”. que estaba muy enfermo.. Editorial Dunken. 2001. el niño ya estaba muerto.. sospechando la presencia de barbitúricos comúnmente administrados en cápsulas medicinales rojas. el uso extendido de barbitúricos después de la segunda guerra mundial causó un aumento de suicidios. afortunadamente. Sabía que no existían precedentes de un crimen con barbitúricos. hizo una nueva prueba de laboratorio. Harold Miller. El informe del laboratorio químico. Fue en 1955 cuando el asesinato de un niño demostró al mundo que los barbitúricos podían utilizarse. el biberón del niño y la almohada sobre la que había vomitado. pero dedujo que no se necesitaba demasiado para matar a un niño pequeño. como agente homicida. Casos de química legal El caso Terence Armstrong: ¿Seconal para niños? Dra.Si bien se restablecía la tranquilidad y el parque era reabierto nuevamente a los turistas. del Dr. El Dr. Cuando el doctor llegó a la casa del matrimonio Armstrong. Miller disolvió cápsulas rojas de seconal (poderoso barbitúrico) en jugos gástricos y descubrió que quedaban reducidas a almidón de maíz y eosina. Alicia G. . Alicia G. llamó al médico para que revisara a su hijo de 5 meses. dio letra a escritores y cineastas y desafió a los toxicólogos forenses quienes se vieron en la necesidad de poder determinar estos compuestos en los cuerpos de las víctimas. muerto un año antes y Pamela de dos años. Efectivamente. hubo un hecho que tal vez haya sido casualidad …. Fernando Cardini. El médico no pudo determinar la causa de la muerte por lo que solicitó una autopsia al Dr. un enfermero de 26 años. que alarmó a los médicos. Terence. fueron remitidos al laboratorio para examinarlos. Faletti Toxicología y Química Legal El relato histórico fue obtenido a partir de una entrevista con el Director del Parque Nacional de Iguazú y los detalles técnicos fueron obtenidos de "Técnicas de Investigación Criminal". En la laringe y en el estómago del niño se encontraron cascarillas rojas y restos de maíz. El matrimonio además de Terence. el cianuro y la estricnina. y que una vez más el hombre intervino tanto para provocar como para resolver este crimen. John Armstrong. Faletti Toxicología y Química Legal Lejos de haber logrado un respiro con el control gradual de los venenos "antiguos" como el arsénico. no quedó convencido con el informe y. después del análisis del contenido gástrico. veinticinco años después que Al Capone desafiara la ley seca y a su fotogénico guardián Elliot Ness. había tenido otros dos hijos. El análisis del vómito en la almohada del bebé demostró la presencia de 2 mg de seconal. del vómito y del biberón. que habría sufrido una repentina enfermedad en mayo del año anterior. además.

Por entonces. la niña de dos años.M1 . vaya y pase. cromatográficos o espectrofotométricos entre otros.com. se había empezado a experimentar para averiguar el tiempo que tardaban las cápsulas de seconal en abrirse en el estómago. Ante esta evidencia el juez declaró culpable a John Armstrong de la muerte de su hijo. Cuando el Tribunal negó el divorcio. Este proceso tardaba 90 minutos. sino además se tenía que probar que en la casa había seconal el día del crimen y pasó un año hasta que consiguieron esta prueba. ya. absorbían los fluidos gástricos y hacía que el almidón de maíz del interior se hinchara provocando así la ruptura de la cápsula que descargaba el hipnótico en el estómago. ya!!! Para demostrar la culpabilidad de los Armstrong. permiten detectar y cuantificar cualquier sustancia conocida capaz de provocar la muerte. Estas evidencias aún no alcanzaban para ser usadas como prueba para demostrar el asesinato ya que las cantidades encontradas no eran suficientes. no bastaba con haber encontrado seconal en la almohada y el biberón de Terence.google. Editorial Dunken. Los chicos. de Fernando Cardini.mx/books? id=d3A0gNxXoVQC&pg=PA289&lpg=PA289&dq=prueba+de+fosfatasa+acida+en+se men&source=web&ots=QFMoYViy6&sig=qgNWWx4J1sk7wMXqEsZmbukzg0I&hl=es&sa=X&oi=book_result&resnum= 9&ct=result#PPA288. la madre de Terence se presentó a la Corte para solicitar el divorcio por maltrato y amenazas por parte de su marido. la policía inició investigaciones para determinar las causas de la muerte del otro hijo de los Armstrong. 1983 Técnicas de Investigación Criminal. Nota editada por Química Viva Muchos de los datos y relatos históricos fueron obtenidos de: · · Causa de muerte. fue imposible detectar barbitúricos en el cadáver de Stephen dado el tiempo transcurrido desde la muerte. 2001. papá les trae unos caramelitos Averiguando en el hospital donde trabajaba el padre de Terence se pudo saber que había sido robada una importante cantidad de cápsulas de seconal. Se descubrió que la metil celulosa que teñida con eosina formaba la cápsula. En julio de 1956. los métodos químicos disponibles ya sean cristalográficos. Stephen. Muy a pesar de los investigadores. y el caso se cerraba sin que la ciencia pudiera ofrecer elementos de prueba para esclarecerlo y llegar al culpable. había seguido el mismo curso. LIBRO MEDICINA FAMILIAR: http://books. Asimismo la repentina enfermedad de Pamela. Editorial Planeta. pero el divorcio lo quiero ya.Si se portan bien.impidieron que este fuera un "crimen perfecto". La ciencia forense por esos años no estaba preparada para ese tipo de investigaciones y sólo las derivaciones finales de este caso –¿emocionales?-. la mujer indignada fue a la policía y manifestó que su marido tenía cápsulas de seconal en su poder el día del crimen. de Frank Smith. Pero con estas evidencias. Hoy. cuya acta de defunción había sido firmada por un médico de 83 años que no había visto al niño. y agregó que en su declaración de entonces lo negó por las amenazas de su marido.

KITS DE REACTIVOS Y MATERIALES COMPLETOS PARA: a) Pruebas para detectar semen por técnica Anti P30 y Electroforesis b) Pruebas de amilasa c) Pruebas de precipitinas d) Pruebas de fosfatasa ácida e) Pruebas de paternidad f) Pruebas de rodizonato de sodio g) Pruebas de luminol h) Pruebas para grupo sanguíneo VIOLACIÓN Identificación de semen por medios físicos (luminiscencia inducida por UV. Funciones La función del líquido seminal es la de nutrir y proteger a los espermatozoides del medio ácido del aparato genital femenino. Individualización del semen usando técnicas para pesquisa del DNA (en laboratorios de referencia) II. El semen es una secreción que llevan los espermatozoides suspendidos en un líquido. 1. microscopia) y químicos (reacciones de probabilidad y de confirmación) sobre cuerpos..Semen Este líquido es importante en el laboratorio debido a las pruebas que actualmente se realizan de fertilidad. Evaluación cuantitativa de la fosfatasa ácida en el contenido vaginal. objetos y ropas. . el líquido seminal.

5 para equilibrar la acidez vaginal. ác.Secreción del líquido seminal La muestra debe ser analizado antes de 30 minutos después de la recogida y debe haber un período de abstinencia de 2-3 días.Testículos: Forman los espermatozoides y generan la célula germinal. lo normal es de 1.5-8.Secreción de espermatozoides .Glándulas seminales: Se encuentra en la pared posterior de la vejíga (vesículas seminales). enzimas proteolíticos que favorece la movilidad de los espermatozoides y tiene un pH de 6. Composición Su composición es fundamentalmente de fructosa que es el alimento principal de los espermatozoides.Examen macroscópico o Aspecto: Coágulo viscoso de aspecto blanquecino y turbio o Volumen: Es muy variable.Días febriles Una vez que tenemos estos datos podemos empezar el examen de semen: . Debemos coger el producto total de la eyaculación ya que normalmente sale fraccionado en tres partes: . Ascórbico y líquido ascítico.Próstata: Genera un 20% del volumen del líquido seminal que contiene fosfatasa ácida prostática.Secreción de las glándulas uretrales . Toma de muestras Hay que recoger el producto total de la eyaculación en un recipiente estéril templado (el frío inmoviliza los espermatozoides).7 y con las tiras normales no se aprecia la variación.Tiempo de la eyaculación al examen . Análisis Al laboratorio antes de analizar la muestra nos deben de llegar los siguientes datos: . . o pH: Se mida con una tira de papel especial que mide variaciones de 6.2.Días de abstinencia . Es importante saber que no existe relación con la fertilidad. Formando la mayor parte de la secreción seminal que contiene fructosa. 3. .5-5 ml.5 ya que el pH del semen es de 7. 4. Los órganos que intervienen en la formación del líquido seminal son: . .Fecha .

§ Progresiva lenta: Van en línea recta de manera lenta y no consiguen atravesar el campo de observación § No progresivos: Se mueven girando sobre sí mismo pero sin conseguir avanzar en el campo. Pasados unos 10-20 minutos el coágulo debido a los enzimas proteolíticos se rompe y se vuelve a transformar en un líquido viscoso. Al observar al microscopio vemos los espermatozoides muertos teñidos debido a que las membranas se vuelven permeables. mientras que los espermatozoides vivos no se tiñen.Examen microscópico o [espermática]: Contamos los espermatozoides en una cámara de recuento.Presencia de leucocitos. prácticamente en línea recta.Microcefaleas: Cabeza pequeña .Macrocefaleas: Cabeza grande .Pruebas bioquímicas: No son muy importantes y el médico se encarga de ponernos las pruebas específicas del paciente.Duplicidades: Repetición de cola o cabeza . Para ello debemos matarlos con una solución de formol y bicarbonato con una dilución al 1/20 ya que están muy concentrados en el semen y se haría dificultoso su recuento. Los valores normales de espermatozoides son de 60-150 millones de espermatozoides por mililitro por lo que al hacer el recuento debemos tomarlo en cuenta al dar el resultado ya que la cámara mide en mm3= o Motilidad: Sin diluir entre porta y cubre en fresco. § Inmóviles o Vitalidad: En el semen normal hay una pequeña proporción de espermatozoides muertos. .o Viscosidad: Tiene que ser de tal manera que si pasamos de un tubo a otro el semen tiene que caer gota a gota sin formar hilos. . En caso de que esto no sucediera se produciría infertilidad en el hombre. hematíes y células inmaduras del testículo . Normalmente se hace la determinación de fructosa por el método enzimático. La estructura normal de un espermatozoide es la siguiente: Pueden existir anomalías en los espermatozoides como son: . Los tipos que existen son: § Progresiva rápida: Los que pasan rápidamente por el campo de observación. Debemos tener cuidado ya que tenemos que calentar un poco el porta. o Licuefacción: El semen sale líquido pero al poco tiempo se forma un coágulo. o Morfología: Hacemos una extensión del semen y una tinción para células. Esto se hace realizando una tinción con eosina en fresco.

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