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Biotecnologia - Resumen

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BIOTECNOLOGÍA

1. Introducción
La biotecnología es el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el hombre. Una definición más exacta y específica de la biotecnología "moderna" es "la aplicación comercial de organismos vivos o sus productos, la cual involucra la manipulación deliberada de sus moléculas de DNA, para la obtención de bienes y servicios y para el desarrollo de actividades científicas de investigación.

3. Antecedentes.
La historia de la biotecnología puede dividirse en cuatro períodos: • El primero corresponde a la era anterior a Pasteur. Se caracterizó como la aplicación artesanal de una experiencia resultante de la práctica diaria. • La segunda comienza con la identificación, por Pasteur, de los microorganismos como causa de la fermentación y el descubrimiento de Buchner de la capacidad de las enzimas de convertir azúcares en alcohol. Estos desarrollos dieron un gran impulso a la aplicación de las técnicas de fermentación en la industria alimenticia y al desarrollo industrial de productos como las levaduras y, finalmente, al desarrollo de la industria química. • La tercera época la expansión vertiginosa de la industria petroquímica tiende a desplazar los procesos biotecnológicos de la fermentación, pero por otro, el descubrimiento de la penicilina, sentaría las bases para la producción en gran escala de antibióticos. Surge la aplicación de variedades híbridas en la zona maicera de los Estados Unidos con espectaculares incrementos en la producción por hectárea. • La cuarta era de la biotecnología es la actual. Se inicia con el descubrimiento de la doble estructura axial del ácido "desoxi-ribonucleico" (ADN), seguido por los procesos que permiten la inmovilización de las enzimas, los primeros experimentos de ingeniería genética y aplicación en de la técnica del "hibridoma" para la producción de anticuerpos "monoclonales"

1. 2. 3. 4.

Descubrimiento del ADN (1953) Penicilina (1928) Primeros experimentos de ingeniería genética (1973) Aplicación de la técnica del “hibridoma” (1975)

En todos estos casos, la innovación biotecnológica surgió en el sector productivo; en cambio, los desarrollos de la nueva biotecnología se originan en los centros de investigación, generalmente localizados en el seno de las universidades.

4. Técnicas que se emplean en Biotecnología Moderna
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inocularse. b) Para la fabricación en gran escala de: • Vacunas • Anticuerpos monoclonales • Proteínas de origen recombinante c) Para la producción de tejidos de sustitución para transplante.4 y temperatura. posibilitando la regeneración directa de la planta.I ) LA MANIPULACIÓN IN VITRO DE CÉLULAS ANIMALES El cultivo de células animales comenzó a desarrollarse cuando se definen los nutrientes necesarios para el crecimiento celular. Las plantas que resultan de la propagación asexual o vegetativa son idénticas entre sí. El proceso se realiza en cuatro etapas: 2 . Las células deben aislarse. y mantenerse en un medio aséptico y en condiciones estrictas de humedad. La reproducción asexual se utiliza desde la antigüedad para obtener un gran número de plántulas a partir de una única planta. Los explantos se cultivan asépticamente en medios con la composición química adecuada. Origen Aplicación Riñón de perro Vacunas veterinarias Tejido conjuntivo Técnicas de de ratón laboratorio Riñón de mono verdeProducción de vacunas africano humanas Pulmón embrionario Producción de vacunas humano humanas 4-II) CULTIVO DE CÉLULAS VEGETALES: la micropropagación.4. d) Para la realización de estudios toxicológicos. la micropropagación se inicia a partir de explantos. pequeños fragmentos de tejido de diversas partes de la planta. En otras palabras: son clones. El número y estructura de los cromosomas se analizan y se presentan en un arreglo llamado cariotipo. Combinando las técnicas de cultivo celular con el desarrollo de materiales biológicos semejantes al colágeno se crea un área nueva de ingeniería de tejidos que apunta a la reparación o sustitución de tejidos lesionados. es decir. De este modo se sustituye. ¿Para qué se emplea el cultivo de células animales? El cultivo in vitro de células animales se emplea para: a) Diagnóstico clínico Una de las primeras pruebas de diagnóstico genético se basa en la observación al microscopio de los cromosomas de células somáticas durante la división celular (mitosis). 7. Ph 7. A diferencia de la multiplicación vegetativa. la experimentación con animales vivos. al menos parcialmente. La capacidad de una célula de regenerar réplicas del organismo del cual deriva se denomina totipotencia.2. Las pruebas de diagnóstico genético basadas en el análisis de cariotipos se emplean con frecuencia en la práctica médica y actualmente están simplificadas por el uso de colorantes específicos para cada par cromosómico.

Todavía protegidas de la luz solar directa. La incubación se realiza a temperatura entre 23 y 28° recibiendo luz durante 12 a 14 horas diarias. donde además de desarrollar raíces. se lavan y se transfieren a un medio de cultivo aséptico. Las plántulas se pasan del medio de multiplicación a un medio de enraizamiento. Retirados los explantos. aumentarán su capacidad fotosintética adaptándose lentamente a las condiciones ambientales. se desinfectan. sin depender de factores climáticos ni de la época del año. ¿Para qué se utiliza esta técnica?: • Se pueden obtener plantas libres de virus y otros patógenos • Se pueden recuperar plantas en peligro de extinción • Permite la reproducción de especies que naturalmente lo hacen muy lentamente y / o con dificultad ( orquídeas) • Asegura una alta productividad de plantas sanas. A partir de una yema apical se pueden obtener cuatro millones de claveles en un año • Permite introducir una especie en una región sin contaminación previa 3 . Los propágulos se transfieren a un medio de multiplicación obteniéndose numerosos subcultivos. primero al suelo o a otro sustrato y más tarde a un invernadero.1) Establecimiento de un cultivo aséptico. Transferencia de las plántulas. El cultivo in vitro tiene la ventaja de ser más rápido y de ocupar mucho menos espacio que la multiplicación in vivo. 3) Preparación de las plántulas para la transferencia al suelo. se enriquecen y comienzan la fotosíntesis. 4) Aclimatación. 2) Multiplicación.

entrecruzamiento de cromosomas homólogos (crossing over). El RAC. Comité Asesor sobre el ADN recombinante  1975. ¿Para qué sirven los plásmidos? El cromosoma bacteriano contiene los genes qué ésta necesita para su supervivencia. La década del 70 produjo grandes cambios en el uso de esta tecnología y esto trajo aparejado conflictos científicos y éticos diversos.. cortando y uniendo pequeños segmentos de ADN pertenecientes a individuos de una misma especie o no.. Ingeniería genética Es sinónimo de manipulación génica. La transformación es un proceso que permite a las bacterias capturar ADN libre del ambiente.. Treinta años después no hay registro o relato de ningún accidente relacionado con la tecnología del ADN recombinante. como 4 . sin embargo. o metabolizar fuentes de energía novedosa. Actualmente la tecnología del ADN recombinante se explota comercialmente en el mundo entero y se emplea además en centenares de laboratorios de universidades e institutos de investigación. Después de la recombinación los cromosomas contienen nuevas combinaciones de alelos. clonación génica. Con esta tecnología se puede transferir un gen de una especie a otra. Algunos científicos alertaron a sus colegas sobre posibles riesgos de la nueva tecnología y pidieron una moratoria para los experimentos que se realizaban con ella. un fenómeno que ocurre normalmente como consecuencia del intercambio de fragmentos cromosómicos durante la meiosis. las consecuencias de implicancias éticas. También se denomina transformación cuando la bacteria captura diminutas moléculas circulares de ADN llamados plásmidos. Por lo tanto se puede considerar todo óvulo y todo espermatozoide producido por meiosis como recombinante. Monterrey California. Ha sido cuestionada por las posibles consecuencias que podrían implicar para la salud humana. COMO SE RECOMBINA EL ADN EN LA NATURALEZA El ADN se recombina de forma natural en muchas especies durante la meiosis I. el equilibrio del ecosistema y lo más importante aún.. diferentes a las de ambos progenitores. ya que si no existieran controles adecuados podrían introducirse en el ambiente nuevos tipos de organismos. Y estableció no realizar los de alto riesgo como así también la necesidad de trabajar con organismos debilitados. la conferencia de Asilomar. (crossing over) El fenómeno puede provocarse por manipulación. la producción de proteínas en organismos modificados genéticamente o la generación de organismos transgénicos con propiedades nuevas. y determinó la necesidad de clasificar a los experimentos de alto. Este ADN puede ser parte del cromosoma de otra bacteria de igual o distinta especie. algunos potencialmente peligrosos”.  1974: ..  1976.(Paul Gerg y otros) Se formó el RAC. modificación génica. los genes que portan los plásmidos le permiten a la bacteria crecer en ambientes nuevos..”el uso de esta tecnología presenta riesgos potenciales. publicó un conjunto de normas de trabajo que deben ser revisadas periódicamente y además seguidas por todos los investigadores. uniendo moléculas de ADN de diferentes orígenes y obtener una combinación nueva que no existe en la naturaleza.4-III) TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE. La tecnología del ADN recombinante es un instrumento valioso para el estudio de los genomas. nueva genética etc. medio y bajo riesgo. El término recombinante hace referencia a la recombinación genética. reunió investigadores de 17 países. incapaces de sobrevivir fuera del laboratorio.

4. éste se replica e invade a otras células del huésped. La aparición de nuevas enfermedades recientemente son prueba de la recombinación genética en la naturaleza. “cortando” el ADN de los virus.petróleo u otros hidrocarburos. las secuencias del ADN viral se incorporan a uno de los cromosomas del huésped. Alteración de la secuencia de ADN. los científicos pueden producir todo el ADN recombinante que necesitan. Identificar las moléculas específicas de ADN recombinante que contienen un gen que interesa en particular puede ser un labor de años. cada vez que se divide. se puede establecer su secuencia exacta de nucleótidos. Las bacterias se dividen formando nuevas células portadoras de copias del plásmido introducido. Cuando se producen nuevos virus a partir del ADN incorporado. La célula replica el ADN viral incorporado junto con el resto de su ADN. Se fragmenta el ADN con enzimas de restricción (las bacterias las pueden producir). esto las hace particularmente resistentes y por esa razón suelen ser causa de infecciones intrahospitalarias. 3. Se aparean los extremos empleando enzima (ADN ligasa)= ADN recombinante 5. es decir que ésta replica el ADN recombinante cada vez que se divide. produciendo Versiones modificadas de los genes. Después de clonar un gen. Este procedimiento es conocido como la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa o PCR y no requiere un organismo vivo. 5 . estas enzimas “cortan” el ADN en puntos específicos para poder producir fragmentos mas cortos de ADN. Algunos plásmidos contienen genes que le permiten a la bacteria vivir en ambientes con antibióticos. o producir diarreas en el huésped donde se aloje la bacteria lo cual favorece su acción infectante. La PCR permite hacer miles de millones de copias de los genes elegidos con mayor rapidez y economía que mediante el cultivo en bacterias. determinando los límites del gen y la secuencia de aminoácidos de la proteína que codifica el gen. CÓMO SE RECOMBINA EL ADN EN EL LABORATORIO TÉCNICA DE OBTENCIÓN DE ADN RECOMBINANTE La tecnología del ADN recombinante consiste en distintas técnicas: 1. Una vez que el virus toma la maquinaria celular. Estos fragmentos sirven para generar una colección de ADN recombinante conocida como biblioteca de genes. Se introduce el plásmido en una célula bacteriana donde se replica 6. lo que le valió compartir el premio Nobel de química en 1993. En la naturaleza las bacterias las usan como forma para defenderse. El método más común para hacerlo se basa en una variante de la reacción en cadena de la polimerasa y produce grandes cantidades de segmentos específicos de ADN en un tubo de ensayo. 2. En ocasiones. 7. éstos pueden tener incorporados (por error) genes humanos en el ADN del virus: de este modo se crea un virus recombinante. Conclusión: con sólo cultivar las bacterias que contienen el plásmido deseado. Esta técnica fue perfeccionada en 1986 por Kary Mullis. Se trata al plásmido con la misma enzima.

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