qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb Laboratorio de Bioquímica nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwer Toma y Muestra de Sangre Facultad de Medicina tyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas

Universidad Nacional de Colombia Coagulación y Permeabilidad dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzx cvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbn mqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwerty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc vbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmrty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc
07/03/2011 Juan David Domínguez; Ana María González; Óscar Gómez; Carlos

con la ayuda de instrumentación de laboratorio (jeringas. Cuando la muestra se centrifuga. que se conoce como plasma. en búsqueda de la observación de los procesos de coagulación y permeabilidad de la sangre.5%)). los análisis y conclusiones. 2 . leucocitos) y plaquetas suspendidos en un componente líquido (su matriz extracelular). agua destilada y 4 reactivos (NaCl. CaCl2. Los conceptos claves para el entendimiento del laboratorio son los siguientes: 2. se asientan los elementos formes en el fondo del tubo como un precipitado rojo (44%).1 El tejido sanguíneo: La sangre es un tejido conjuntivo especializado compuesto por elementos formes . está basada en datos teóricos ya especificados en los libros. Ferricianuro de Potasio 2. pipetas. Se exponen las observaciones. Ana María González V. 1 Marco Teórico: La experimentación del presente laboratorio. es importante clarificar algunos conceptos teóricos para su posterior comparación con los resultados obtenidos en el laboratorio.. Óscar Gómez Carlos apellido El siguiente informe de laboratorio contiene la descripción de un experimento de toma de sangre realizado.y el plasma sobrenadante (55%) que consiste en una mezcla de materiales simples y compuestos. se esperaron los procesos de coagulación y permeabilidad. Hidrosulfito de sodio 2.cubierto por una capa transparente delgada leucocítica (1%) que consiste en leucocitos y plaquetas . a menos de que se ponga en el tubo un anticoagulante como la heparina.glóbulos rojos (RBC. Sin embargo. eritrocitos). 2) INTRODUCCIÓN: 2. ésta se coagula. conforma el 7% del peso corporal (es decir de 5 a 6 litros). anotando los resultados obtenidos en el experimento.1. sobre los procesos y las reacciones que se llevan a cabo durante la coagulación y la permeabilidad de la sangre. Con base en tomas de muestras de sangre. el procedimiento que se siguió y por último. Cuando se extrae sangre del cuerpo y se coloca en un tubo de ensayo. glóbulos blancos (WBC.5%. La sangre es de color rojo brillante a oscuro. aplicadores.INFORME DE LABORATORIO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA PRACTICA 1 TOMA Y MUESTRA DE SANGRE: PERMEABILIDAD Y COAGULACIÓN 1) RESUMEN: Juan David Domínguez S. tubos de centrífuga sin y con anticoagulantes.que consiste en eritrocitos (su volumen oficial se llama hematocrito) . Se describen los resultados de la realización de dos experimentos. tanto orgánicos como inorgánicos disueltos en agua. para su posterior comparación con los datos teóricos establecidos en libros.

compuestos nitrogenados. Las proteínas constituyen el 9% y las sales inorgánicas. Agregar anticoagulantes como oxalato. nutrientes y gases el 1%.Plasma y suero: Es un líquido amarillento en el cual están suspendidos células.Proteínas de coagulación (ej. El número de leucocitos es mucho menor que el de los glóbulos rojos. ) . Las proteínas del plasma son: -Albúmina -Globulinas ( . o heparina impedirán la transformación de fibrinógeno en fibrina y la muestra no se coagulará. plaquetas. acelerador de globulina) . El principal componente del plasma es agua. que representa alrededor del 90% de su volumen.000 por mm3. Lipoproteína de muy baja densidad (VLDL) y Lipoproteína de baja densidad (LDL) El plasma se caracteriza por la presencia de fibrinógeno (proteína soluble).Proteínas del complemento C1 a C9 . No funcionan dentro del torrente sanguíneo. pero lo usan como medio para transportarse de una región del cuerpo a otra.000 glóbulos blancos por mm3 de sangre. pues en el adulto solo hay 6500 a 10. Los eritrocitos están llenos de hemoglobina.000 9. siendo mayor el número en los hombres. EDTA. Leucocitos: Los leucocitos son glóbulos blancos que se clasifican en dos categorías principales: granulocitos y agranulocitos. La fibrina puede ser destruida por una proteína llamada plasmina.000. que forma las fibras que constituyen el coágulo. . con glicoporinas trans membrana y un complejo proteico de espectrina del citoesqueleto. citrato. mientras que el suero se caracteriza por la ausencia de fibrinógeno.Lipoproteínas del plasma (Quilomicrones. parte de los componentes orgánicos e inorgánicos dejan el plasma para integrarse al coágulo. La relación hemoglobina/hematocrito es de 1:3 respectivamente. Por lo general protegen el cuerpo 3 . ya que este se transforma en fibrina (proteína insoluble).000. son las células más pequeñas y numerosas de la sangre. ELEMENTOS FORMES: Eritrocitos: También llamados glóbulos rojos o hematíes. Durante la coagulación. compuestos orgánicos y electrolitos. fibrinógeno. cuya función dentro del torrente sanguíneo es transportar el oxígeno y el CO2 a los tejidos del cuerpo y desde ellos. miden 7 micras de diámetro y contienen una membrana compleja. iones. El número de eritrocitos vacila entre los 4. y en el hematocrito el porcentaje de eritrocitos es de 45 50% del total de células de la sangre. El líquido restante. que se diferencia del plasma es de color pajizo y se denomina suero. Prototrombina.

500. que ayudan a contraer las plaquetas. derivadas de los megacariocitos. Agranulocitos: que carecen de gránulos específicos. cuya función es la mediación de reacciones inflamatorias. 4 . para que diferentes células crezcan ayuden a reparar las paredes dañadas. Monocitos. Plaquetas: O trombocitos. Su núcleo es segmentado en lóbulos. 4) sistemas enzimáticos que sintetizan prostaglandinas (que causan reacciones vasculares). Su función es limitar una hemorragia al adherirse al recubrimiento endotelial del vaso sanguíneo en caso de una lesión. y llegando al tejido conjuntivo para ejercer su función. cuya función es la reacción inmunitaria de mediación celular (Células T) y la reacción inmunitaria de mediación humoral (Células B). y su número vacila entre 50 y 100 por mm3.500 7. Su número va entre 3. Su función no es formar el coágulo. Su porcentaje va entre 20 25% de los leucocitos y su número de 1. y su vida es de 8 a 12 días. Linfocitos. tapando la lesión rápido antes de que se forme el coágulo. pues fagocitan y destruyen bacterias mediante el contenido de sus gránulos. Neutrófilos. 3)mitocondrias y sistemas enzimáticos que forman ATP y ADP. Su porcentaje en el total de leucocitos es menos del 1%. No puede reproducirse. de 1 a 3 micras. miosina y tromboasterina. con una zona hialunómera y una granulómera. En su citoplasma hay factores activos del tipo: 1) moléculas de proteína actina.000 por mm3. pero forman la fase hemostática primaria. son células anucleadas pequeñas. 2) retículo endoplásmico y aparato de Golgi que sintetizan enzimas y almacenan calcio. migrando (diapédesis) por las células endoteliales. Su número va entre 150. transportándose por el torrente sanguíneo. cuya función es antimicrobiana. Eosinófilos. forman también el trombo plaquetario y la agregación plaquetaria. Su porcentaje varía entre 2 4% del total de leucocitos. 5) factor estabilizador de fibrina (coagulación) y 6) un factor de crecimiento. que activan varias fases del proceso de coagulación. También hay fosfolípidos en la membrana. Basófilos. En su membrana celular hay glucoproteínas que hace que se adhieran a las zonas dañadas de la pared vascular. Su porcentaje es de 3 a 8% de los leucocitos y su número es de 200 a 800 por mm3. Su porcentaje es de 60 75% del total de leucocitos.500 a 2. mas no al endotelio. cuya función es diferenciarse en macrófago y fagocitar y presentar antígenos.de sustancias extrañas.000 400. es decir 150 400 en número por mm3. Granulocitos: Tienen gránulos específicos. cuya función es la fagocitosis del complejo antígeno anticuerpo y la destrucción de parásitos.000 por mm3.

3) la formación de un coágulo sanguíneo como resultado de la coagulación. 3) la trombina actúa para polimerizar el fibrinógeno en fibras de fibrina (ver más arriba la composición del plasma y del suero) en 10 15 segundos.1. La protrombina es una proteína del plasma.2 Hemostasia y coagulación sanguínea: Se le llama coagulación a la formación de una aglomeración sólida. con peso molecular de 33. Entre 20 60 minutos después. se llega por los siguientes mecanismos: 1) espasmo vascular (es decir que la pared de músculo liso del vaso se contrae para reducir el flujo de sangre). toda la brecha o el extremo roto se rellenan con un coágulo. 5 . pero en el caso de la ruptura de un vaso. 4) proliferación final de tejido fibroso en el coágulo sanguíneo para cerrar el agujero en el vaso de manera permanente). de peso molecular 68.700.2. La teoría básica dice que en la sangre hay más de 50 sustancias que causan o afectan la coagulación. La protrombina se forma continuamente en el hígado. 2) que el coágulo se disuelva. Es una proteína inestable. formando tejido conjuntivo. Es el tercer mecanismo de la hemostasia (prevención de la pérdida de sangre. con la ayuda de la vitamina K. uno de los cuales es la trombina. llamada coágulo a partir de un fluido orgánico. que puede desdoblarse en compuestos más pequeños. cerrando el vaso todavía más. o 1 o 2 minutos si el trauma fue menor. que atrapan en su red plaquetas.700 y en concentración de 15mg/dl en el plasma. el coágulo se retrae. Recién hecha la lesión. se activan los procoagulantes y anulan los anticoagulantes para que aparezca el coágulo. Se forma un complejo de sustancias activadas llamadas en grupo activador de la protrombina. 2) la formación de un tapón de plaquetas. Una vez formado el coágulo puede suceder que: 1) lo invadan los fibroblastos. Esto continua hasta la organización completa del coágulo en tejido fibroso en 1 a 2 semanas. cuando hay ruptura de un vaso. 2) el activador de la protrombina cataliza la conversión de protrombina en trombina en presencia de Ca2+ iónico. alfa2-globulina. el coágulo empieza a aparecer en 15 o 20 segundos si el trauma fue grave. El mecanismo general de taponamiento tiene 3 etapas esenciales: 1) cascada compleja de reacciones químicas que afecta a más de una docena de factores de coagulación sanguínea. células sanguíneas y plasma para formar el coágulo. 3 -6 minutos después de la lesión. Las que estimulan la coagulación se llaman procoagulantes y las que la inhiben anticoagulantes. a la que. En el torrente sanguíneo hay más anticoagulantes.

El propio coágulo libera sustancias (retroalimentación positiva) para promover más coagulación hasta que deje de perderse sangre. El líquido exprimido se llama suero. La contracción la activa y la acelera la trombina. se activa por sí mismo o con ayuda de la trombina. y haciendo entrecruzar las fibras. se conduce a la formación del activador de la protrombina.El fibrinógeno es una proteína de peso molecular alto (340.000) que está en el plasma a concentración de 100 700 mg/dl. y es por ello que difiere del plasma. Cuando hay daño en un vaso. El coágulo empieza a contraerse. La contracción hace que los bordes del vaso dañado vuelvan a juntarse. el coágulo sanguíneo se compone de una red de fibras de fibrina en todas las direcciones que atrapan células sanguíneas. los monómeros se unen mediante enlaces de hidrógeno débiles y las fibras no se entrecruzan entre sí. no se filtra normalmente de los vasos a los líquidos intersticiales. refuerza mucho el coágulo creando enlaces covalentes entre los monómeros de fibrina. que actúa eliminando cuatro péptidos de peso molecular bajo de la molécula de fibrinógeno formando una molécula de monómero de fibrina. adhiriéndose a la superficie dañada. haciendo el coágulo débil. acompañada de los iones de calcio. El factor estabilizador de la fibrina. y no tiene fibrinógeno ni factores de coagulación. plasma y plaquetas. Las plaquetas. El suero no puede coagular. que se polimeriza con otras moléculas de monómero de fibrina. Recién polimerizados. de tal manera que exprime la mayor parte de su líquido en 20 60 minutos. para formar las fibras de fibrina grandes que constituyen el retículo del coágulo sanguíneo. que luego convierte la 6 . La trombina es una enzima proteica. Es fundamental en el proceso de coagulación. liberado por las plaquetas. unidas a varias fibras de fibrina. impidiendo las pérdidas de sangre. por sus elementos contráctiles (ver composición de las plaquetas arriba) hacen que el coágulo se retraiga. Se forma en el hígado y debido a su gran tamaño. Por tanto.

Este activador puede formarse de dos maneras: 1) mediante la vía extrínseca. ocurren las siguientes reacciones: 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) Trauma en la sangre + Factor XII Factor XIIa Trauma en la sangre liberación de fosfolípidos plaquetarios (Factor plaquetario 3) Factor XIIa + Factor XI + cininógeno de AMP + precalicreína Factor XIa Factor XIa + Factor IX Factor IXa Factor IXa + Factor VIII + Fosfolípidos plaquetarios + Factor plaquetario 3 + Factor X Factor Xa Factor Xa + Factor V + Fosfolípidos del tejido o plaqueta Activador de la protrombina Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Una diferencia importante entre la vía extrínseca e intrínseca es que la primera puede ser de naturaleza explosiva. es decir que en un caso grave. los factores de la coagulación. En ambas vías. tardando de 1 a 6 minutos. ejercen la función principal. 2) mediante la vía intrínseca que empieza en la propia sangre. reduciendo la concentración de iones de calcio. 7 . Reacciones que ocurren durante la coagulación: En la página x se muestran las gráficas de los procesos que ocurren durante la coagulación de la sangre. se puede llegar a la coagulación en 15 segundos. y su forma activa va acompañada de la letra a . que para evitar la coagulación in vitro. se necesitan los iones de calcio para la promoción o aceleración de todas las reacciones de la coagulación. mientras que la vía intrínseca es más lenta. mediante la des ionización. Si no hay iones de calcio no hay coagulación. que comienza con el traumatismo de la pared vascular y de los tejidos circundantes. Estos factores se designan en números romanos. Es por esto. Durante la vía extrínseca.protrombina en trombina. la mayoría formas inactivas de enzimas proteolíticas. Tanto en la vía extrínseca como en la intrínseca. haciéndolo reaccionar con sustancias como ión citrato u oxalato. para que se den las reacciones de coagulación. ocurren las siguientes reacciones: 1) Se libera la tromboplastina tisular (o factor tisular) 2) Factor X + Complejo lipoprotéico del factor tisular + Factor VIIa + Ca2+ Factor Xa 3) Factor Xa + Fosfolípidos del factor tisular + Fosfolípidos liberados por plaquetas ´Factor V Activador de la protrombina 4) Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina 5) Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina 6) Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina 7) Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado 8) Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Durante la vía intrínseca.

6 Conocer procedimientos llevados a cabo en el laboratorio. cuando se hace la llamada tiempo de protrombina .2. anulando el efecto del oxalato.2.2 Aprendizaje de los procedimientos del laboratorio de bioquímica (entre ellos el manejo adecuado del material. el manejo de las unidades utilizadas para la cuantificación y los aspectos importantes de bioseguridad y prevención de accidentes) 2. Luego.En el laboratorio se hacen pruebas de coagulación. El tiempo para la coagulación se conoce como tiempo de protrombina. se añade oxalato de inmediato a la sangre extraída al paciente hasta que no quede protrombina que pueda convertirse en trombina.1 Objetivos Correcto aprendizaje de la obtención de una muestra de sangre venosa 2. 2.2. Preguntas de discusión: ¿Qué efecto tiene el oxalato de potasio sobre el plasma sanguíneo? ¿Para qué se diluye el plasma en solución salina? ¿Qué efecto tiene el CaCl2 en la coagulación? ¿Qué efecto tiene el NaCl en la coagulación? 8 . 2.2 2. plasma y la sangre desfibrinada 2.8 Con base en el conocimiento de los procesos y reacciones que ocurren normalmente. En dicho procedimiento.2. útiles para el diagnóstico médico para tratamientos preventivos y curativos. poder determinar una anormalidad en dichos procesos y reacciones. mediante la realización in vitro de estos procesos. 2.2. El factor tisular activa la reacción protrombina trombina por medio de la vía intrínseca.4 Conocimiento de la composición de la sangre y de las características principales de los elementos que la conforman.2.2. y dura aproximadamente 12 segundos. 2.7 Observación en vivo de las reacciones que suceden en la coagulación y permeabilidad de la sangre.5 Poder establecer la diferencia entre suero.2.3 Conocimiento de los procesos y reacciones que se llevan a cabo normalmente en la coagulación y permeabilidad de la sangre 2. se mezclan con un exceso de iones de calcio y de factor tisular con la sangre oxalatada.

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