qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb Laboratorio de Bioquímica nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwer Toma y Muestra de Sangre Facultad de Medicina tyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas

Universidad Nacional de Colombia Coagulación y Permeabilidad dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzx cvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbn mqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwerty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc vbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmrty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc
07/03/2011 Juan David Domínguez; Ana María González; Óscar Gómez; Carlos

se esperaron los procesos de coagulación y permeabilidad. Cuando la muestra se centrifuga. para su posterior comparación con los datos teóricos establecidos en libros.1.y el plasma sobrenadante (55%) que consiste en una mezcla de materiales simples y compuestos. Se exponen las observaciones. eritrocitos).que consiste en eritrocitos (su volumen oficial se llama hematocrito) .. está basada en datos teóricos ya especificados en los libros.5%)). 1 Marco Teórico: La experimentación del presente laboratorio. 2) INTRODUCCIÓN: 2. tubos de centrífuga sin y con anticoagulantes. glóbulos blancos (WBC. leucocitos) y plaquetas suspendidos en un componente líquido (su matriz extracelular). a menos de que se ponga en el tubo un anticoagulante como la heparina.1 El tejido sanguíneo: La sangre es un tejido conjuntivo especializado compuesto por elementos formes . pipetas. Ferricianuro de Potasio 2.glóbulos rojos (RBC. anotando los resultados obtenidos en el experimento. que se conoce como plasma. en búsqueda de la observación de los procesos de coagulación y permeabilidad de la sangre. se asientan los elementos formes en el fondo del tubo como un precipitado rojo (44%).INFORME DE LABORATORIO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA PRACTICA 1 TOMA Y MUESTRA DE SANGRE: PERMEABILIDAD Y COAGULACIÓN 1) RESUMEN: Juan David Domínguez S. Los conceptos claves para el entendimiento del laboratorio son los siguientes: 2. con la ayuda de instrumentación de laboratorio (jeringas. es importante clarificar algunos conceptos teóricos para su posterior comparación con los resultados obtenidos en el laboratorio. Sin embargo. aplicadores.cubierto por una capa transparente delgada leucocítica (1%) que consiste en leucocitos y plaquetas . Se describen los resultados de la realización de dos experimentos. Ana María González V. 2 . sobre los procesos y las reacciones que se llevan a cabo durante la coagulación y la permeabilidad de la sangre. La sangre es de color rojo brillante a oscuro. Hidrosulfito de sodio 2. tanto orgánicos como inorgánicos disueltos en agua.5%. Óscar Gómez Carlos apellido El siguiente informe de laboratorio contiene la descripción de un experimento de toma de sangre realizado. el procedimiento que se siguió y por último. Con base en tomas de muestras de sangre. Cuando se extrae sangre del cuerpo y se coloca en un tubo de ensayo. conforma el 7% del peso corporal (es decir de 5 a 6 litros). CaCl2. los análisis y conclusiones. agua destilada y 4 reactivos (NaCl. ésta se coagula.

La fibrina puede ser destruida por una proteína llamada plasmina. Durante la coagulación.Plasma y suero: Es un líquido amarillento en el cual están suspendidos células. que forma las fibras que constituyen el coágulo. . iones. El principal componente del plasma es agua. plaquetas. acelerador de globulina) .000 por mm3. La relación hemoglobina/hematocrito es de 1:3 respectivamente. Las proteínas constituyen el 9% y las sales inorgánicas. o heparina impedirán la transformación de fibrinógeno en fibrina y la muestra no se coagulará.000 9. que representa alrededor del 90% de su volumen.Proteínas de coagulación (ej. Los eritrocitos están llenos de hemoglobina. ELEMENTOS FORMES: Eritrocitos: También llamados glóbulos rojos o hematíes. El número de leucocitos es mucho menor que el de los glóbulos rojos. nutrientes y gases el 1%.000. Prototrombina.000. siendo mayor el número en los hombres. El número de eritrocitos vacila entre los 4.000 glóbulos blancos por mm3 de sangre. Lipoproteína de muy baja densidad (VLDL) y Lipoproteína de baja densidad (LDL) El plasma se caracteriza por la presencia de fibrinógeno (proteína soluble). ) . El líquido restante. compuestos nitrogenados. Leucocitos: Los leucocitos son glóbulos blancos que se clasifican en dos categorías principales: granulocitos y agranulocitos. ya que este se transforma en fibrina (proteína insoluble). son las células más pequeñas y numerosas de la sangre. EDTA. con glicoporinas trans membrana y un complejo proteico de espectrina del citoesqueleto. cuya función dentro del torrente sanguíneo es transportar el oxígeno y el CO2 a los tejidos del cuerpo y desde ellos. No funcionan dentro del torrente sanguíneo. mientras que el suero se caracteriza por la ausencia de fibrinógeno. compuestos orgánicos y electrolitos. miden 7 micras de diámetro y contienen una membrana compleja. y en el hematocrito el porcentaje de eritrocitos es de 45 50% del total de células de la sangre. pues en el adulto solo hay 6500 a 10.Proteínas del complemento C1 a C9 . que se diferencia del plasma es de color pajizo y se denomina suero. parte de los componentes orgánicos e inorgánicos dejan el plasma para integrarse al coágulo. Por lo general protegen el cuerpo 3 . pero lo usan como medio para transportarse de una región del cuerpo a otra.Lipoproteínas del plasma (Quilomicrones. Agregar anticoagulantes como oxalato. fibrinógeno. Las proteínas del plasma son: -Albúmina -Globulinas ( . citrato.

Su función no es formar el coágulo. y su número vacila entre 50 y 100 por mm3.000 400. cuya función es diferenciarse en macrófago y fagocitar y presentar antígenos. para que diferentes células crezcan ayuden a reparar las paredes dañadas. y su vida es de 8 a 12 días. También hay fosfolípidos en la membrana. que ayudan a contraer las plaquetas. 4 . Su porcentaje en el total de leucocitos es menos del 1%. 3)mitocondrias y sistemas enzimáticos que forman ATP y ADP. Su número va entre 150. Su porcentaje es de 3 a 8% de los leucocitos y su número es de 200 a 800 por mm3. Neutrófilos. En su membrana celular hay glucoproteínas que hace que se adhieran a las zonas dañadas de la pared vascular.500.000 por mm3. con una zona hialunómera y una granulómera. que activan varias fases del proceso de coagulación. transportándose por el torrente sanguíneo. pero forman la fase hemostática primaria. de 1 a 3 micras. migrando (diapédesis) por las células endoteliales. Granulocitos: Tienen gránulos específicos. Su número va entre 3.500 7. Agranulocitos: que carecen de gránulos específicos. son células anucleadas pequeñas. forman también el trombo plaquetario y la agregación plaquetaria. derivadas de los megacariocitos. cuya función es la mediación de reacciones inflamatorias. Linfocitos. mas no al endotelio. 2) retículo endoplásmico y aparato de Golgi que sintetizan enzimas y almacenan calcio.500 a 2. Eosinófilos. pues fagocitan y destruyen bacterias mediante el contenido de sus gránulos. cuya función es la reacción inmunitaria de mediación celular (Células T) y la reacción inmunitaria de mediación humoral (Células B). 4) sistemas enzimáticos que sintetizan prostaglandinas (que causan reacciones vasculares).de sustancias extrañas. Basófilos. y llegando al tejido conjuntivo para ejercer su función. miosina y tromboasterina. cuya función es antimicrobiana. tapando la lesión rápido antes de que se forme el coágulo. En su citoplasma hay factores activos del tipo: 1) moléculas de proteína actina. es decir 150 400 en número por mm3. Su función es limitar una hemorragia al adherirse al recubrimiento endotelial del vaso sanguíneo en caso de una lesión. Su porcentaje varía entre 2 4% del total de leucocitos. Plaquetas: O trombocitos. Su porcentaje va entre 20 25% de los leucocitos y su número de 1. Monocitos. No puede reproducirse.000 por mm3. 5) factor estabilizador de fibrina (coagulación) y 6) un factor de crecimiento. cuya función es la fagocitosis del complejo antígeno anticuerpo y la destrucción de parásitos. Su porcentaje es de 60 75% del total de leucocitos. Su núcleo es segmentado en lóbulos.

700 y en concentración de 15mg/dl en el plasma. pero en el caso de la ruptura de un vaso. 5 . Es una proteína inestable. alfa2-globulina. 4) proliferación final de tejido fibroso en el coágulo sanguíneo para cerrar el agujero en el vaso de manera permanente). cerrando el vaso todavía más. La protrombina se forma continuamente en el hígado. con la ayuda de la vitamina K. 2) el activador de la protrombina cataliza la conversión de protrombina en trombina en presencia de Ca2+ iónico. En el torrente sanguíneo hay más anticoagulantes. Una vez formado el coágulo puede suceder que: 1) lo invadan los fibroblastos. el coágulo se retrae. a la que.2 Hemostasia y coagulación sanguínea: Se le llama coagulación a la formación de una aglomeración sólida. de peso molecular 68. llamada coágulo a partir de un fluido orgánico. 3 -6 minutos después de la lesión. Se forma un complejo de sustancias activadas llamadas en grupo activador de la protrombina. con peso molecular de 33. La protrombina es una proteína del plasma. Es el tercer mecanismo de la hemostasia (prevención de la pérdida de sangre. 3) la formación de un coágulo sanguíneo como resultado de la coagulación. 2) la formación de un tapón de plaquetas. 3) la trombina actúa para polimerizar el fibrinógeno en fibras de fibrina (ver más arriba la composición del plasma y del suero) en 10 15 segundos. que puede desdoblarse en compuestos más pequeños. La teoría básica dice que en la sangre hay más de 50 sustancias que causan o afectan la coagulación. el coágulo empieza a aparecer en 15 o 20 segundos si el trauma fue grave. Entre 20 60 minutos después.2. 2) que el coágulo se disuelva. Las que estimulan la coagulación se llaman procoagulantes y las que la inhiben anticoagulantes. o 1 o 2 minutos si el trauma fue menor. se llega por los siguientes mecanismos: 1) espasmo vascular (es decir que la pared de músculo liso del vaso se contrae para reducir el flujo de sangre). El mecanismo general de taponamiento tiene 3 etapas esenciales: 1) cascada compleja de reacciones químicas que afecta a más de una docena de factores de coagulación sanguínea.1. uno de los cuales es la trombina.700. formando tejido conjuntivo. que atrapan en su red plaquetas. toda la brecha o el extremo roto se rellenan con un coágulo. Esto continua hasta la organización completa del coágulo en tejido fibroso en 1 a 2 semanas. cuando hay ruptura de un vaso. se activan los procoagulantes y anulan los anticoagulantes para que aparezca el coágulo. Recién hecha la lesión. células sanguíneas y plasma para formar el coágulo.

por sus elementos contráctiles (ver composición de las plaquetas arriba) hacen que el coágulo se retraiga. La contracción hace que los bordes del vaso dañado vuelvan a juntarse. y es por ello que difiere del plasma.El fibrinógeno es una proteína de peso molecular alto (340. plasma y plaquetas. Por tanto. y haciendo entrecruzar las fibras. adhiriéndose a la superficie dañada. La trombina es una enzima proteica. Se forma en el hígado y debido a su gran tamaño. que luego convierte la 6 . Cuando hay daño en un vaso. El suero no puede coagular. Recién polimerizados. impidiendo las pérdidas de sangre. que actúa eliminando cuatro péptidos de peso molecular bajo de la molécula de fibrinógeno formando una molécula de monómero de fibrina. haciendo el coágulo débil. unidas a varias fibras de fibrina. para formar las fibras de fibrina grandes que constituyen el retículo del coágulo sanguíneo. refuerza mucho el coágulo creando enlaces covalentes entre los monómeros de fibrina. La contracción la activa y la acelera la trombina. de tal manera que exprime la mayor parte de su líquido en 20 60 minutos.000) que está en el plasma a concentración de 100 700 mg/dl. que se polimeriza con otras moléculas de monómero de fibrina. el coágulo sanguíneo se compone de una red de fibras de fibrina en todas las direcciones que atrapan células sanguíneas. no se filtra normalmente de los vasos a los líquidos intersticiales. El factor estabilizador de la fibrina. y no tiene fibrinógeno ni factores de coagulación. El coágulo empieza a contraerse. liberado por las plaquetas. los monómeros se unen mediante enlaces de hidrógeno débiles y las fibras no se entrecruzan entre sí. acompañada de los iones de calcio. se activa por sí mismo o con ayuda de la trombina. Las plaquetas. Es fundamental en el proceso de coagulación. se conduce a la formación del activador de la protrombina. El propio coágulo libera sustancias (retroalimentación positiva) para promover más coagulación hasta que deje de perderse sangre. El líquido exprimido se llama suero.

protrombina en trombina. ocurren las siguientes reacciones: 1) Se libera la tromboplastina tisular (o factor tisular) 2) Factor X + Complejo lipoprotéico del factor tisular + Factor VIIa + Ca2+ Factor Xa 3) Factor Xa + Fosfolípidos del factor tisular + Fosfolípidos liberados por plaquetas ´Factor V Activador de la protrombina 4) Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina 5) Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina 6) Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina 7) Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado 8) Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Durante la vía intrínseca. que comienza con el traumatismo de la pared vascular y de los tejidos circundantes. ocurren las siguientes reacciones: 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) Trauma en la sangre + Factor XII Factor XIIa Trauma en la sangre liberación de fosfolípidos plaquetarios (Factor plaquetario 3) Factor XIIa + Factor XI + cininógeno de AMP + precalicreína Factor XIa Factor XIa + Factor IX Factor IXa Factor IXa + Factor VIII + Fosfolípidos plaquetarios + Factor plaquetario 3 + Factor X Factor Xa Factor Xa + Factor V + Fosfolípidos del tejido o plaqueta Activador de la protrombina Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Una diferencia importante entre la vía extrínseca e intrínseca es que la primera puede ser de naturaleza explosiva. mediante la des ionización. haciéndolo reaccionar con sustancias como ión citrato u oxalato. reduciendo la concentración de iones de calcio. los factores de la coagulación. Este activador puede formarse de dos maneras: 1) mediante la vía extrínseca. para que se den las reacciones de coagulación. Si no hay iones de calcio no hay coagulación. Durante la vía extrínseca. que para evitar la coagulación in vitro. ejercen la función principal. Es por esto. mientras que la vía intrínseca es más lenta. la mayoría formas inactivas de enzimas proteolíticas. se necesitan los iones de calcio para la promoción o aceleración de todas las reacciones de la coagulación. 2) mediante la vía intrínseca que empieza en la propia sangre. 7 . se puede llegar a la coagulación en 15 segundos. es decir que en un caso grave. Tanto en la vía extrínseca como en la intrínseca. Reacciones que ocurren durante la coagulación: En la página x se muestran las gráficas de los procesos que ocurren durante la coagulación de la sangre. y su forma activa va acompañada de la letra a . Estos factores se designan en números romanos. tardando de 1 a 6 minutos. En ambas vías.

5 Poder establecer la diferencia entre suero.2.2.2. Luego. se mezclan con un exceso de iones de calcio y de factor tisular con la sangre oxalatada.7 Observación en vivo de las reacciones que suceden en la coagulación y permeabilidad de la sangre.En el laboratorio se hacen pruebas de coagulación. 2. 2.3 Conocimiento de los procesos y reacciones que se llevan a cabo normalmente en la coagulación y permeabilidad de la sangre 2.1 Objetivos Correcto aprendizaje de la obtención de una muestra de sangre venosa 2. el manejo de las unidades utilizadas para la cuantificación y los aspectos importantes de bioseguridad y prevención de accidentes) 2. cuando se hace la llamada tiempo de protrombina . poder determinar una anormalidad en dichos procesos y reacciones. 2. plasma y la sangre desfibrinada 2. El tiempo para la coagulación se conoce como tiempo de protrombina. El factor tisular activa la reacción protrombina trombina por medio de la vía intrínseca.2 2. En dicho procedimiento.4 Conocimiento de la composición de la sangre y de las características principales de los elementos que la conforman.8 Con base en el conocimiento de los procesos y reacciones que ocurren normalmente. anulando el efecto del oxalato. Preguntas de discusión: ¿Qué efecto tiene el oxalato de potasio sobre el plasma sanguíneo? ¿Para qué se diluye el plasma en solución salina? ¿Qué efecto tiene el CaCl2 en la coagulación? ¿Qué efecto tiene el NaCl en la coagulación? 8 . y dura aproximadamente 12 segundos. se añade oxalato de inmediato a la sangre extraída al paciente hasta que no quede protrombina que pueda convertirse en trombina.6 Conocer procedimientos llevados a cabo en el laboratorio.2 Aprendizaje de los procedimientos del laboratorio de bioquímica (entre ellos el manejo adecuado del material.2.2.2.2. 2. mediante la realización in vitro de estos procesos. útiles para el diagnóstico médico para tratamientos preventivos y curativos.2.

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