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INFORME DE LABORATORIO

INFORME DE LABORATORIO

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Universidad Nacional de Colombia Coagulación y Permeabilidad dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzx cvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbn mqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwerty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc vbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmrty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc
07/03/2011 Juan David Domínguez; Ana María González; Óscar Gómez; Carlos

se esperaron los procesos de coagulación y permeabilidad. aplicadores. Con base en tomas de muestras de sangre. ésta se coagula. glóbulos blancos (WBC. Óscar Gómez Carlos apellido El siguiente informe de laboratorio contiene la descripción de un experimento de toma de sangre realizado. Cuando la muestra se centrifuga.. 2) INTRODUCCIÓN: 2. eritrocitos). está basada en datos teóricos ya especificados en los libros. Se exponen las observaciones. tubos de centrífuga sin y con anticoagulantes.glóbulos rojos (RBC. conforma el 7% del peso corporal (es decir de 5 a 6 litros). Los conceptos claves para el entendimiento del laboratorio son los siguientes: 2.1 El tejido sanguíneo: La sangre es un tejido conjuntivo especializado compuesto por elementos formes . Hidrosulfito de sodio 2.y el plasma sobrenadante (55%) que consiste en una mezcla de materiales simples y compuestos.5%. Se describen los resultados de la realización de dos experimentos. para su posterior comparación con los datos teóricos establecidos en libros. 2 .1. Cuando se extrae sangre del cuerpo y se coloca en un tubo de ensayo. que se conoce como plasma. es importante clarificar algunos conceptos teóricos para su posterior comparación con los resultados obtenidos en el laboratorio. 1 Marco Teórico: La experimentación del presente laboratorio. tanto orgánicos como inorgánicos disueltos en agua. con la ayuda de instrumentación de laboratorio (jeringas. el procedimiento que se siguió y por último. leucocitos) y plaquetas suspendidos en un componente líquido (su matriz extracelular). CaCl2. en búsqueda de la observación de los procesos de coagulación y permeabilidad de la sangre. Ana María González V. anotando los resultados obtenidos en el experimento. agua destilada y 4 reactivos (NaCl. La sangre es de color rojo brillante a oscuro. pipetas. Ferricianuro de Potasio 2.5%)). sobre los procesos y las reacciones que se llevan a cabo durante la coagulación y la permeabilidad de la sangre. se asientan los elementos formes en el fondo del tubo como un precipitado rojo (44%). los análisis y conclusiones.que consiste en eritrocitos (su volumen oficial se llama hematocrito) .cubierto por una capa transparente delgada leucocítica (1%) que consiste en leucocitos y plaquetas . a menos de que se ponga en el tubo un anticoagulante como la heparina.INFORME DE LABORATORIO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA PRACTICA 1 TOMA Y MUESTRA DE SANGRE: PERMEABILIDAD Y COAGULACIÓN 1) RESUMEN: Juan David Domínguez S. Sin embargo.

Prototrombina.000 por mm3. compuestos orgánicos y electrolitos. y en el hematocrito el porcentaje de eritrocitos es de 45 50% del total de células de la sangre. siendo mayor el número en los hombres. que forma las fibras que constituyen el coágulo. o heparina impedirán la transformación de fibrinógeno en fibrina y la muestra no se coagulará. .000. citrato.Lipoproteínas del plasma (Quilomicrones. con glicoporinas trans membrana y un complejo proteico de espectrina del citoesqueleto. No funcionan dentro del torrente sanguíneo. parte de los componentes orgánicos e inorgánicos dejan el plasma para integrarse al coágulo. Agregar anticoagulantes como oxalato. El número de eritrocitos vacila entre los 4. ) .Proteínas del complemento C1 a C9 .000. El número de leucocitos es mucho menor que el de los glóbulos rojos. EDTA. Lipoproteína de muy baja densidad (VLDL) y Lipoproteína de baja densidad (LDL) El plasma se caracteriza por la presencia de fibrinógeno (proteína soluble). fibrinógeno. que se diferencia del plasma es de color pajizo y se denomina suero. acelerador de globulina) .Proteínas de coagulación (ej. iones. La fibrina puede ser destruida por una proteína llamada plasmina. mientras que el suero se caracteriza por la ausencia de fibrinógeno. compuestos nitrogenados.000 glóbulos blancos por mm3 de sangre. ya que este se transforma en fibrina (proteína insoluble). cuya función dentro del torrente sanguíneo es transportar el oxígeno y el CO2 a los tejidos del cuerpo y desde ellos. que representa alrededor del 90% de su volumen. ELEMENTOS FORMES: Eritrocitos: También llamados glóbulos rojos o hematíes. pues en el adulto solo hay 6500 a 10. Durante la coagulación. Leucocitos: Los leucocitos son glóbulos blancos que se clasifican en dos categorías principales: granulocitos y agranulocitos. El principal componente del plasma es agua. pero lo usan como medio para transportarse de una región del cuerpo a otra. nutrientes y gases el 1%. Las proteínas constituyen el 9% y las sales inorgánicas. plaquetas.Plasma y suero: Es un líquido amarillento en el cual están suspendidos células. miden 7 micras de diámetro y contienen una membrana compleja. La relación hemoglobina/hematocrito es de 1:3 respectivamente. Las proteínas del plasma son: -Albúmina -Globulinas ( . Los eritrocitos están llenos de hemoglobina. Por lo general protegen el cuerpo 3 . El líquido restante.000 9. son las células más pequeñas y numerosas de la sangre.

Su núcleo es segmentado en lóbulos. forman también el trombo plaquetario y la agregación plaquetaria. derivadas de los megacariocitos. pues fagocitan y destruyen bacterias mediante el contenido de sus gránulos. También hay fosfolípidos en la membrana. tapando la lesión rápido antes de que se forme el coágulo. Plaquetas: O trombocitos.de sustancias extrañas. Monocitos. 4 . cuya función es la fagocitosis del complejo antígeno anticuerpo y la destrucción de parásitos. En su membrana celular hay glucoproteínas que hace que se adhieran a las zonas dañadas de la pared vascular.000 400. Su número va entre 150. mas no al endotelio. Su porcentaje varía entre 2 4% del total de leucocitos. de 1 a 3 micras. que activan varias fases del proceso de coagulación. y llegando al tejido conjuntivo para ejercer su función. Granulocitos: Tienen gránulos específicos. Su función no es formar el coágulo. para que diferentes células crezcan ayuden a reparar las paredes dañadas. Eosinófilos. miosina y tromboasterina. Linfocitos. 3)mitocondrias y sistemas enzimáticos que forman ATP y ADP. migrando (diapédesis) por las células endoteliales. Su función es limitar una hemorragia al adherirse al recubrimiento endotelial del vaso sanguíneo en caso de una lesión. cuya función es diferenciarse en macrófago y fagocitar y presentar antígenos. 2) retículo endoplásmico y aparato de Golgi que sintetizan enzimas y almacenan calcio. Su porcentaje en el total de leucocitos es menos del 1%. con una zona hialunómera y una granulómera. No puede reproducirse. es decir 150 400 en número por mm3. cuya función es antimicrobiana. y su número vacila entre 50 y 100 por mm3.000 por mm3.500 7. cuya función es la mediación de reacciones inflamatorias. Neutrófilos. Agranulocitos: que carecen de gránulos específicos. Su porcentaje va entre 20 25% de los leucocitos y su número de 1.000 por mm3. 5) factor estabilizador de fibrina (coagulación) y 6) un factor de crecimiento. 4) sistemas enzimáticos que sintetizan prostaglandinas (que causan reacciones vasculares). Su número va entre 3. pero forman la fase hemostática primaria. transportándose por el torrente sanguíneo. En su citoplasma hay factores activos del tipo: 1) moléculas de proteína actina. que ayudan a contraer las plaquetas. y su vida es de 8 a 12 días. son células anucleadas pequeñas. Su porcentaje es de 3 a 8% de los leucocitos y su número es de 200 a 800 por mm3. Basófilos. cuya función es la reacción inmunitaria de mediación celular (Células T) y la reacción inmunitaria de mediación humoral (Células B).500 a 2. Su porcentaje es de 60 75% del total de leucocitos.500.

700. 4) proliferación final de tejido fibroso en el coágulo sanguíneo para cerrar el agujero en el vaso de manera permanente). el coágulo empieza a aparecer en 15 o 20 segundos si el trauma fue grave. el coágulo se retrae. Entre 20 60 minutos después. La protrombina se forma continuamente en el hígado. cerrando el vaso todavía más. se activan los procoagulantes y anulan los anticoagulantes para que aparezca el coágulo. Es el tercer mecanismo de la hemostasia (prevención de la pérdida de sangre. o 1 o 2 minutos si el trauma fue menor. 2) que el coágulo se disuelva. El mecanismo general de taponamiento tiene 3 etapas esenciales: 1) cascada compleja de reacciones químicas que afecta a más de una docena de factores de coagulación sanguínea. que atrapan en su red plaquetas. que puede desdoblarse en compuestos más pequeños.1. Es una proteína inestable. 3 -6 minutos después de la lesión. células sanguíneas y plasma para formar el coágulo. Las que estimulan la coagulación se llaman procoagulantes y las que la inhiben anticoagulantes. Recién hecha la lesión. 3) la formación de un coágulo sanguíneo como resultado de la coagulación. toda la brecha o el extremo roto se rellenan con un coágulo. llamada coágulo a partir de un fluido orgánico. uno de los cuales es la trombina. formando tejido conjuntivo. a la que. Una vez formado el coágulo puede suceder que: 1) lo invadan los fibroblastos. 2) la formación de un tapón de plaquetas.2. de peso molecular 68. con la ayuda de la vitamina K. con peso molecular de 33. La teoría básica dice que en la sangre hay más de 50 sustancias que causan o afectan la coagulación. Se forma un complejo de sustancias activadas llamadas en grupo activador de la protrombina. La protrombina es una proteína del plasma. se llega por los siguientes mecanismos: 1) espasmo vascular (es decir que la pared de músculo liso del vaso se contrae para reducir el flujo de sangre). cuando hay ruptura de un vaso. 2) el activador de la protrombina cataliza la conversión de protrombina en trombina en presencia de Ca2+ iónico.700 y en concentración de 15mg/dl en el plasma.2 Hemostasia y coagulación sanguínea: Se le llama coagulación a la formación de una aglomeración sólida. alfa2-globulina. En el torrente sanguíneo hay más anticoagulantes. Esto continua hasta la organización completa del coágulo en tejido fibroso en 1 a 2 semanas. 3) la trombina actúa para polimerizar el fibrinógeno en fibras de fibrina (ver más arriba la composición del plasma y del suero) en 10 15 segundos. pero en el caso de la ruptura de un vaso. 5 .

no se filtra normalmente de los vasos a los líquidos intersticiales. y no tiene fibrinógeno ni factores de coagulación. haciendo el coágulo débil. se conduce a la formación del activador de la protrombina. El coágulo empieza a contraerse. refuerza mucho el coágulo creando enlaces covalentes entre los monómeros de fibrina.000) que está en el plasma a concentración de 100 700 mg/dl. por sus elementos contráctiles (ver composición de las plaquetas arriba) hacen que el coágulo se retraiga. Por tanto. La contracción la activa y la acelera la trombina.El fibrinógeno es una proteína de peso molecular alto (340. Cuando hay daño en un vaso. el coágulo sanguíneo se compone de una red de fibras de fibrina en todas las direcciones que atrapan células sanguíneas. y haciendo entrecruzar las fibras. Es fundamental en el proceso de coagulación. que se polimeriza con otras moléculas de monómero de fibrina. plasma y plaquetas. liberado por las plaquetas. Recién polimerizados. El líquido exprimido se llama suero. que actúa eliminando cuatro péptidos de peso molecular bajo de la molécula de fibrinógeno formando una molécula de monómero de fibrina. que luego convierte la 6 . de tal manera que exprime la mayor parte de su líquido en 20 60 minutos. unidas a varias fibras de fibrina. se activa por sí mismo o con ayuda de la trombina. adhiriéndose a la superficie dañada. El suero no puede coagular. impidiendo las pérdidas de sangre. acompañada de los iones de calcio. El factor estabilizador de la fibrina. y es por ello que difiere del plasma. La trombina es una enzima proteica. para formar las fibras de fibrina grandes que constituyen el retículo del coágulo sanguíneo. Se forma en el hígado y debido a su gran tamaño. La contracción hace que los bordes del vaso dañado vuelvan a juntarse. Las plaquetas. El propio coágulo libera sustancias (retroalimentación positiva) para promover más coagulación hasta que deje de perderse sangre. los monómeros se unen mediante enlaces de hidrógeno débiles y las fibras no se entrecruzan entre sí.

Reacciones que ocurren durante la coagulación: En la página x se muestran las gráficas de los procesos que ocurren durante la coagulación de la sangre. ejercen la función principal. es decir que en un caso grave. la mayoría formas inactivas de enzimas proteolíticas. 2) mediante la vía intrínseca que empieza en la propia sangre. Si no hay iones de calcio no hay coagulación. ocurren las siguientes reacciones: 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) Trauma en la sangre + Factor XII Factor XIIa Trauma en la sangre liberación de fosfolípidos plaquetarios (Factor plaquetario 3) Factor XIIa + Factor XI + cininógeno de AMP + precalicreína Factor XIa Factor XIa + Factor IX Factor IXa Factor IXa + Factor VIII + Fosfolípidos plaquetarios + Factor plaquetario 3 + Factor X Factor Xa Factor Xa + Factor V + Fosfolípidos del tejido o plaqueta Activador de la protrombina Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Una diferencia importante entre la vía extrínseca e intrínseca es que la primera puede ser de naturaleza explosiva. Tanto en la vía extrínseca como en la intrínseca. se puede llegar a la coagulación en 15 segundos. haciéndolo reaccionar con sustancias como ión citrato u oxalato. se necesitan los iones de calcio para la promoción o aceleración de todas las reacciones de la coagulación. Este activador puede formarse de dos maneras: 1) mediante la vía extrínseca. los factores de la coagulación. que comienza con el traumatismo de la pared vascular y de los tejidos circundantes. Estos factores se designan en números romanos. y su forma activa va acompañada de la letra a . 7 . Durante la vía extrínseca. reduciendo la concentración de iones de calcio. Es por esto. para que se den las reacciones de coagulación. ocurren las siguientes reacciones: 1) Se libera la tromboplastina tisular (o factor tisular) 2) Factor X + Complejo lipoprotéico del factor tisular + Factor VIIa + Ca2+ Factor Xa 3) Factor Xa + Fosfolípidos del factor tisular + Fosfolípidos liberados por plaquetas ´Factor V Activador de la protrombina 4) Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina 5) Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina 6) Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina 7) Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado 8) Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Durante la vía intrínseca. tardando de 1 a 6 minutos. En ambas vías. mediante la des ionización. mientras que la vía intrínseca es más lenta. que para evitar la coagulación in vitro.protrombina en trombina.

Luego.2 2. mediante la realización in vitro de estos procesos. se mezclan con un exceso de iones de calcio y de factor tisular con la sangre oxalatada. 2. anulando el efecto del oxalato. 2. En dicho procedimiento.1 Objetivos Correcto aprendizaje de la obtención de una muestra de sangre venosa 2. se añade oxalato de inmediato a la sangre extraída al paciente hasta que no quede protrombina que pueda convertirse en trombina.4 Conocimiento de la composición de la sangre y de las características principales de los elementos que la conforman.2.2.En el laboratorio se hacen pruebas de coagulación.2. útiles para el diagnóstico médico para tratamientos preventivos y curativos.8 Con base en el conocimiento de los procesos y reacciones que ocurren normalmente. Preguntas de discusión: ¿Qué efecto tiene el oxalato de potasio sobre el plasma sanguíneo? ¿Para qué se diluye el plasma en solución salina? ¿Qué efecto tiene el CaCl2 en la coagulación? ¿Qué efecto tiene el NaCl en la coagulación? 8 . poder determinar una anormalidad en dichos procesos y reacciones. y dura aproximadamente 12 segundos. cuando se hace la llamada tiempo de protrombina .2.2.2 Aprendizaje de los procedimientos del laboratorio de bioquímica (entre ellos el manejo adecuado del material.2.2. El factor tisular activa la reacción protrombina trombina por medio de la vía intrínseca.3 Conocimiento de los procesos y reacciones que se llevan a cabo normalmente en la coagulación y permeabilidad de la sangre 2.6 Conocer procedimientos llevados a cabo en el laboratorio.7 Observación en vivo de las reacciones que suceden en la coagulación y permeabilidad de la sangre. plasma y la sangre desfibrinada 2.2. 2. El tiempo para la coagulación se conoce como tiempo de protrombina.5 Poder establecer la diferencia entre suero. el manejo de las unidades utilizadas para la cuantificación y los aspectos importantes de bioseguridad y prevención de accidentes) 2. 2.

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