qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb Laboratorio de Bioquímica nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwer Toma y Muestra de Sangre Facultad de Medicina tyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas

Universidad Nacional de Colombia Coagulación y Permeabilidad dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzx cvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbn mqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwerty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc vbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmrty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc
07/03/2011 Juan David Domínguez; Ana María González; Óscar Gómez; Carlos

5%. La sangre es de color rojo brillante a oscuro. Ana María González V. agua destilada y 4 reactivos (NaCl. 2 . Los conceptos claves para el entendimiento del laboratorio son los siguientes: 2. en búsqueda de la observación de los procesos de coagulación y permeabilidad de la sangre. ésta se coagula. Con base en tomas de muestras de sangre. se asientan los elementos formes en el fondo del tubo como un precipitado rojo (44%). leucocitos) y plaquetas suspendidos en un componente líquido (su matriz extracelular). está basada en datos teóricos ya especificados en los libros. Sin embargo. es importante clarificar algunos conceptos teóricos para su posterior comparación con los resultados obtenidos en el laboratorio. Se describen los resultados de la realización de dos experimentos. que se conoce como plasma. a menos de que se ponga en el tubo un anticoagulante como la heparina. tubos de centrífuga sin y con anticoagulantes. pipetas. los análisis y conclusiones.que consiste en eritrocitos (su volumen oficial se llama hematocrito) . sobre los procesos y las reacciones que se llevan a cabo durante la coagulación y la permeabilidad de la sangre. Se exponen las observaciones. el procedimiento que se siguió y por último.1. se esperaron los procesos de coagulación y permeabilidad. glóbulos blancos (WBC.. aplicadores. conforma el 7% del peso corporal (es decir de 5 a 6 litros).5%)). Óscar Gómez Carlos apellido El siguiente informe de laboratorio contiene la descripción de un experimento de toma de sangre realizado. Ferricianuro de Potasio 2.1 El tejido sanguíneo: La sangre es un tejido conjuntivo especializado compuesto por elementos formes .y el plasma sobrenadante (55%) que consiste en una mezcla de materiales simples y compuestos.INFORME DE LABORATORIO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA PRACTICA 1 TOMA Y MUESTRA DE SANGRE: PERMEABILIDAD Y COAGULACIÓN 1) RESUMEN: Juan David Domínguez S.glóbulos rojos (RBC. Hidrosulfito de sodio 2. Cuando se extrae sangre del cuerpo y se coloca en un tubo de ensayo. CaCl2. eritrocitos). anotando los resultados obtenidos en el experimento. para su posterior comparación con los datos teóricos establecidos en libros. 1 Marco Teórico: La experimentación del presente laboratorio.cubierto por una capa transparente delgada leucocítica (1%) que consiste en leucocitos y plaquetas . Cuando la muestra se centrifuga. tanto orgánicos como inorgánicos disueltos en agua. 2) INTRODUCCIÓN: 2. con la ayuda de instrumentación de laboratorio (jeringas.

EDTA. siendo mayor el número en los hombres. que se diferencia del plasma es de color pajizo y se denomina suero. La relación hemoglobina/hematocrito es de 1:3 respectivamente. El número de eritrocitos vacila entre los 4.000 9. La fibrina puede ser destruida por una proteína llamada plasmina. iones.Proteínas del complemento C1 a C9 . compuestos nitrogenados. citrato. Durante la coagulación.000. y en el hematocrito el porcentaje de eritrocitos es de 45 50% del total de células de la sangre. fibrinógeno. Agregar anticoagulantes como oxalato.Lipoproteínas del plasma (Quilomicrones. nutrientes y gases el 1%. Las proteínas del plasma son: -Albúmina -Globulinas ( . Leucocitos: Los leucocitos son glóbulos blancos que se clasifican en dos categorías principales: granulocitos y agranulocitos. Los eritrocitos están llenos de hemoglobina. plaquetas.Proteínas de coagulación (ej.Plasma y suero: Es un líquido amarillento en el cual están suspendidos células. acelerador de globulina) . El principal componente del plasma es agua. cuya función dentro del torrente sanguíneo es transportar el oxígeno y el CO2 a los tejidos del cuerpo y desde ellos. o heparina impedirán la transformación de fibrinógeno en fibrina y la muestra no se coagulará. Las proteínas constituyen el 9% y las sales inorgánicas. ya que este se transforma en fibrina (proteína insoluble). El número de leucocitos es mucho menor que el de los glóbulos rojos. Por lo general protegen el cuerpo 3 . con glicoporinas trans membrana y un complejo proteico de espectrina del citoesqueleto. son las células más pequeñas y numerosas de la sangre. Prototrombina. pero lo usan como medio para transportarse de una región del cuerpo a otra. ) . El líquido restante. ELEMENTOS FORMES: Eritrocitos: También llamados glóbulos rojos o hematíes. que representa alrededor del 90% de su volumen. mientras que el suero se caracteriza por la ausencia de fibrinógeno. Lipoproteína de muy baja densidad (VLDL) y Lipoproteína de baja densidad (LDL) El plasma se caracteriza por la presencia de fibrinógeno (proteína soluble).000. pues en el adulto solo hay 6500 a 10. No funcionan dentro del torrente sanguíneo.000 por mm3. que forma las fibras que constituyen el coágulo. compuestos orgánicos y electrolitos. parte de los componentes orgánicos e inorgánicos dejan el plasma para integrarse al coágulo. . miden 7 micras de diámetro y contienen una membrana compleja.000 glóbulos blancos por mm3 de sangre.

Su función es limitar una hemorragia al adherirse al recubrimiento endotelial del vaso sanguíneo en caso de una lesión.500. para que diferentes células crezcan ayuden a reparar las paredes dañadas. En su membrana celular hay glucoproteínas que hace que se adhieran a las zonas dañadas de la pared vascular. Su número va entre 3. cuya función es antimicrobiana. es decir 150 400 en número por mm3. y llegando al tejido conjuntivo para ejercer su función. pues fagocitan y destruyen bacterias mediante el contenido de sus gránulos. Su número va entre 150. tapando la lesión rápido antes de que se forme el coágulo. migrando (diapédesis) por las células endoteliales. Monocitos.000 por mm3. También hay fosfolípidos en la membrana. que ayudan a contraer las plaquetas. transportándose por el torrente sanguíneo. 5) factor estabilizador de fibrina (coagulación) y 6) un factor de crecimiento. derivadas de los megacariocitos. Agranulocitos: que carecen de gránulos específicos. Basófilos. cuya función es la reacción inmunitaria de mediación celular (Células T) y la reacción inmunitaria de mediación humoral (Células B). forman también el trombo plaquetario y la agregación plaquetaria. con una zona hialunómera y una granulómera. Su función no es formar el coágulo. 2) retículo endoplásmico y aparato de Golgi que sintetizan enzimas y almacenan calcio. Su porcentaje es de 60 75% del total de leucocitos. Linfocitos. cuya función es la mediación de reacciones inflamatorias. mas no al endotelio. Su porcentaje varía entre 2 4% del total de leucocitos. cuya función es la fagocitosis del complejo antígeno anticuerpo y la destrucción de parásitos. No puede reproducirse.500 7. Su porcentaje es de 3 a 8% de los leucocitos y su número es de 200 a 800 por mm3.000 400.de sustancias extrañas. 4) sistemas enzimáticos que sintetizan prostaglandinas (que causan reacciones vasculares). En su citoplasma hay factores activos del tipo: 1) moléculas de proteína actina. Eosinófilos. Su núcleo es segmentado en lóbulos. son células anucleadas pequeñas. 4 . Plaquetas: O trombocitos. pero forman la fase hemostática primaria. y su número vacila entre 50 y 100 por mm3. Su porcentaje en el total de leucocitos es menos del 1%. 3)mitocondrias y sistemas enzimáticos que forman ATP y ADP.000 por mm3. y su vida es de 8 a 12 días. miosina y tromboasterina. de 1 a 3 micras. cuya función es diferenciarse en macrófago y fagocitar y presentar antígenos. Su porcentaje va entre 20 25% de los leucocitos y su número de 1. Granulocitos: Tienen gránulos específicos.500 a 2. que activan varias fases del proceso de coagulación. Neutrófilos.

toda la brecha o el extremo roto se rellenan con un coágulo. Es una proteína inestable. Entre 20 60 minutos después. En el torrente sanguíneo hay más anticoagulantes. 2) que el coágulo se disuelva. La protrombina es una proteína del plasma. cerrando el vaso todavía más. El mecanismo general de taponamiento tiene 3 etapas esenciales: 1) cascada compleja de reacciones químicas que afecta a más de una docena de factores de coagulación sanguínea.2. con peso molecular de 33. Una vez formado el coágulo puede suceder que: 1) lo invadan los fibroblastos. 2) la formación de un tapón de plaquetas.1. el coágulo se retrae. se activan los procoagulantes y anulan los anticoagulantes para que aparezca el coágulo. se llega por los siguientes mecanismos: 1) espasmo vascular (es decir que la pared de músculo liso del vaso se contrae para reducir el flujo de sangre). formando tejido conjuntivo. Esto continua hasta la organización completa del coágulo en tejido fibroso en 1 a 2 semanas. a la que. de peso molecular 68. uno de los cuales es la trombina. Es el tercer mecanismo de la hemostasia (prevención de la pérdida de sangre. 3 -6 minutos después de la lesión. alfa2-globulina. 2) el activador de la protrombina cataliza la conversión de protrombina en trombina en presencia de Ca2+ iónico. Las que estimulan la coagulación se llaman procoagulantes y las que la inhiben anticoagulantes. 3) la trombina actúa para polimerizar el fibrinógeno en fibras de fibrina (ver más arriba la composición del plasma y del suero) en 10 15 segundos. Recién hecha la lesión.700.700 y en concentración de 15mg/dl en el plasma. que atrapan en su red plaquetas. o 1 o 2 minutos si el trauma fue menor. el coágulo empieza a aparecer en 15 o 20 segundos si el trauma fue grave. llamada coágulo a partir de un fluido orgánico. 3) la formación de un coágulo sanguíneo como resultado de la coagulación. con la ayuda de la vitamina K. que puede desdoblarse en compuestos más pequeños. Se forma un complejo de sustancias activadas llamadas en grupo activador de la protrombina. pero en el caso de la ruptura de un vaso. 4) proliferación final de tejido fibroso en el coágulo sanguíneo para cerrar el agujero en el vaso de manera permanente). 5 .2 Hemostasia y coagulación sanguínea: Se le llama coagulación a la formación de una aglomeración sólida. La protrombina se forma continuamente en el hígado. La teoría básica dice que en la sangre hay más de 50 sustancias que causan o afectan la coagulación. células sanguíneas y plasma para formar el coágulo. cuando hay ruptura de un vaso.

000) que está en el plasma a concentración de 100 700 mg/dl. no se filtra normalmente de los vasos a los líquidos intersticiales. Es fundamental en el proceso de coagulación. impidiendo las pérdidas de sangre. El propio coágulo libera sustancias (retroalimentación positiva) para promover más coagulación hasta que deje de perderse sangre. El factor estabilizador de la fibrina. acompañada de los iones de calcio. El líquido exprimido se llama suero. Cuando hay daño en un vaso. que luego convierte la 6 . que actúa eliminando cuatro péptidos de peso molecular bajo de la molécula de fibrinógeno formando una molécula de monómero de fibrina. refuerza mucho el coágulo creando enlaces covalentes entre los monómeros de fibrina. haciendo el coágulo débil. el coágulo sanguíneo se compone de una red de fibras de fibrina en todas las direcciones que atrapan células sanguíneas. unidas a varias fibras de fibrina. se activa por sí mismo o con ayuda de la trombina. que se polimeriza con otras moléculas de monómero de fibrina. adhiriéndose a la superficie dañada. Por tanto. por sus elementos contráctiles (ver composición de las plaquetas arriba) hacen que el coágulo se retraiga. y es por ello que difiere del plasma. La trombina es una enzima proteica. y no tiene fibrinógeno ni factores de coagulación. Las plaquetas. los monómeros se unen mediante enlaces de hidrógeno débiles y las fibras no se entrecruzan entre sí. liberado por las plaquetas. de tal manera que exprime la mayor parte de su líquido en 20 60 minutos. El suero no puede coagular. y haciendo entrecruzar las fibras. se conduce a la formación del activador de la protrombina. Se forma en el hígado y debido a su gran tamaño. La contracción hace que los bordes del vaso dañado vuelvan a juntarse. plasma y plaquetas. La contracción la activa y la acelera la trombina. Recién polimerizados. El coágulo empieza a contraerse. para formar las fibras de fibrina grandes que constituyen el retículo del coágulo sanguíneo.El fibrinógeno es una proteína de peso molecular alto (340.

Durante la vía extrínseca. y su forma activa va acompañada de la letra a . Este activador puede formarse de dos maneras: 1) mediante la vía extrínseca. ejercen la función principal. haciéndolo reaccionar con sustancias como ión citrato u oxalato. Tanto en la vía extrínseca como en la intrínseca. Reacciones que ocurren durante la coagulación: En la página x se muestran las gráficas de los procesos que ocurren durante la coagulación de la sangre. Estos factores se designan en números romanos. Si no hay iones de calcio no hay coagulación. ocurren las siguientes reacciones: 1) Se libera la tromboplastina tisular (o factor tisular) 2) Factor X + Complejo lipoprotéico del factor tisular + Factor VIIa + Ca2+ Factor Xa 3) Factor Xa + Fosfolípidos del factor tisular + Fosfolípidos liberados por plaquetas ´Factor V Activador de la protrombina 4) Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina 5) Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina 6) Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina 7) Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado 8) Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Durante la vía intrínseca. mediante la des ionización. En ambas vías. se puede llegar a la coagulación en 15 segundos. es decir que en un caso grave. mientras que la vía intrínseca es más lenta. reduciendo la concentración de iones de calcio. para que se den las reacciones de coagulación. Es por esto. 7 .protrombina en trombina. se necesitan los iones de calcio para la promoción o aceleración de todas las reacciones de la coagulación. 2) mediante la vía intrínseca que empieza en la propia sangre. tardando de 1 a 6 minutos. ocurren las siguientes reacciones: 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) Trauma en la sangre + Factor XII Factor XIIa Trauma en la sangre liberación de fosfolípidos plaquetarios (Factor plaquetario 3) Factor XIIa + Factor XI + cininógeno de AMP + precalicreína Factor XIa Factor XIa + Factor IX Factor IXa Factor IXa + Factor VIII + Fosfolípidos plaquetarios + Factor plaquetario 3 + Factor X Factor Xa Factor Xa + Factor V + Fosfolípidos del tejido o plaqueta Activador de la protrombina Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Una diferencia importante entre la vía extrínseca e intrínseca es que la primera puede ser de naturaleza explosiva. los factores de la coagulación. la mayoría formas inactivas de enzimas proteolíticas. que para evitar la coagulación in vitro. que comienza con el traumatismo de la pared vascular y de los tejidos circundantes.

El tiempo para la coagulación se conoce como tiempo de protrombina. cuando se hace la llamada tiempo de protrombina . 2.En el laboratorio se hacen pruebas de coagulación. anulando el efecto del oxalato. Preguntas de discusión: ¿Qué efecto tiene el oxalato de potasio sobre el plasma sanguíneo? ¿Para qué se diluye el plasma en solución salina? ¿Qué efecto tiene el CaCl2 en la coagulación? ¿Qué efecto tiene el NaCl en la coagulación? 8 . En dicho procedimiento.2 Aprendizaje de los procedimientos del laboratorio de bioquímica (entre ellos el manejo adecuado del material. el manejo de las unidades utilizadas para la cuantificación y los aspectos importantes de bioseguridad y prevención de accidentes) 2.1 Objetivos Correcto aprendizaje de la obtención de una muestra de sangre venosa 2.2.6 Conocer procedimientos llevados a cabo en el laboratorio.5 Poder establecer la diferencia entre suero.2. Luego.2.2.8 Con base en el conocimiento de los procesos y reacciones que ocurren normalmente. mediante la realización in vitro de estos procesos. y dura aproximadamente 12 segundos. El factor tisular activa la reacción protrombina trombina por medio de la vía intrínseca. 2. 2. útiles para el diagnóstico médico para tratamientos preventivos y curativos.2.7 Observación en vivo de las reacciones que suceden en la coagulación y permeabilidad de la sangre.2.2. se añade oxalato de inmediato a la sangre extraída al paciente hasta que no quede protrombina que pueda convertirse en trombina.3 Conocimiento de los procesos y reacciones que se llevan a cabo normalmente en la coagulación y permeabilidad de la sangre 2.4 Conocimiento de la composición de la sangre y de las características principales de los elementos que la conforman. se mezclan con un exceso de iones de calcio y de factor tisular con la sangre oxalatada.2 2.2. 2. plasma y la sangre desfibrinada 2. poder determinar una anormalidad en dichos procesos y reacciones.

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