qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb Laboratorio de Bioquímica nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwer Toma y Muestra de Sangre Facultad de Medicina tyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas

Universidad Nacional de Colombia Coagulación y Permeabilidad dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzx cvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbn mqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwerty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc vbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmrty uiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxc
07/03/2011 Juan David Domínguez; Ana María González; Óscar Gómez; Carlos

La sangre es de color rojo brillante a oscuro.y el plasma sobrenadante (55%) que consiste en una mezcla de materiales simples y compuestos. glóbulos blancos (WBC. Ana María González V. Se exponen las observaciones. que se conoce como plasma.. para su posterior comparación con los datos teóricos establecidos en libros. 2) INTRODUCCIÓN: 2. Cuando se extrae sangre del cuerpo y se coloca en un tubo de ensayo. Los conceptos claves para el entendimiento del laboratorio son los siguientes: 2. 2 . tubos de centrífuga sin y con anticoagulantes. anotando los resultados obtenidos en el experimento. los análisis y conclusiones. aplicadores.5%)). sobre los procesos y las reacciones que se llevan a cabo durante la coagulación y la permeabilidad de la sangre. está basada en datos teóricos ya especificados en los libros. en búsqueda de la observación de los procesos de coagulación y permeabilidad de la sangre. se esperaron los procesos de coagulación y permeabilidad. conforma el 7% del peso corporal (es decir de 5 a 6 litros). ésta se coagula. Con base en tomas de muestras de sangre. agua destilada y 4 reactivos (NaCl.cubierto por una capa transparente delgada leucocítica (1%) que consiste en leucocitos y plaquetas . 1 Marco Teórico: La experimentación del presente laboratorio.glóbulos rojos (RBC. Se describen los resultados de la realización de dos experimentos. Óscar Gómez Carlos apellido El siguiente informe de laboratorio contiene la descripción de un experimento de toma de sangre realizado.que consiste en eritrocitos (su volumen oficial se llama hematocrito) . CaCl2. Hidrosulfito de sodio 2. Cuando la muestra se centrifuga. eritrocitos). Sin embargo. con la ayuda de instrumentación de laboratorio (jeringas. se asientan los elementos formes en el fondo del tubo como un precipitado rojo (44%). es importante clarificar algunos conceptos teóricos para su posterior comparación con los resultados obtenidos en el laboratorio.1 El tejido sanguíneo: La sangre es un tejido conjuntivo especializado compuesto por elementos formes .INFORME DE LABORATORIO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA PRACTICA 1 TOMA Y MUESTRA DE SANGRE: PERMEABILIDAD Y COAGULACIÓN 1) RESUMEN: Juan David Domínguez S. Ferricianuro de Potasio 2.5%. pipetas.1. el procedimiento que se siguió y por último. tanto orgánicos como inorgánicos disueltos en agua. a menos de que se ponga en el tubo un anticoagulante como la heparina. leucocitos) y plaquetas suspendidos en un componente líquido (su matriz extracelular).

parte de los componentes orgánicos e inorgánicos dejan el plasma para integrarse al coágulo. cuya función dentro del torrente sanguíneo es transportar el oxígeno y el CO2 a los tejidos del cuerpo y desde ellos.Proteínas de coagulación (ej.000 glóbulos blancos por mm3 de sangre. Durante la coagulación.000 por mm3. Prototrombina. nutrientes y gases el 1%. compuestos nitrogenados. Los eritrocitos están llenos de hemoglobina. miden 7 micras de diámetro y contienen una membrana compleja. ya que este se transforma en fibrina (proteína insoluble). mientras que el suero se caracteriza por la ausencia de fibrinógeno. La fibrina puede ser destruida por una proteína llamada plasmina. Las proteínas constituyen el 9% y las sales inorgánicas. plaquetas. El principal componente del plasma es agua. son las células más pequeñas y numerosas de la sangre. Lipoproteína de muy baja densidad (VLDL) y Lipoproteína de baja densidad (LDL) El plasma se caracteriza por la presencia de fibrinógeno (proteína soluble). El número de leucocitos es mucho menor que el de los glóbulos rojos. La relación hemoglobina/hematocrito es de 1:3 respectivamente. Por lo general protegen el cuerpo 3 .Proteínas del complemento C1 a C9 . o heparina impedirán la transformación de fibrinógeno en fibrina y la muestra no se coagulará. No funcionan dentro del torrente sanguíneo. que forma las fibras que constituyen el coágulo.000. EDTA. siendo mayor el número en los hombres.000. acelerador de globulina) . compuestos orgánicos y electrolitos. que representa alrededor del 90% de su volumen. El número de eritrocitos vacila entre los 4. . pues en el adulto solo hay 6500 a 10. ELEMENTOS FORMES: Eritrocitos: También llamados glóbulos rojos o hematíes. Agregar anticoagulantes como oxalato. iones. y en el hematocrito el porcentaje de eritrocitos es de 45 50% del total de células de la sangre. ) .000 9. con glicoporinas trans membrana y un complejo proteico de espectrina del citoesqueleto. que se diferencia del plasma es de color pajizo y se denomina suero. El líquido restante. Las proteínas del plasma son: -Albúmina -Globulinas ( .Lipoproteínas del plasma (Quilomicrones.Plasma y suero: Es un líquido amarillento en el cual están suspendidos células. pero lo usan como medio para transportarse de una región del cuerpo a otra. Leucocitos: Los leucocitos son glóbulos blancos que se clasifican en dos categorías principales: granulocitos y agranulocitos. fibrinógeno. citrato.

Su porcentaje es de 60 75% del total de leucocitos. mas no al endotelio.500. Plaquetas: O trombocitos. Neutrófilos. Su porcentaje va entre 20 25% de los leucocitos y su número de 1. Su núcleo es segmentado en lóbulos. Linfocitos. cuya función es la reacción inmunitaria de mediación celular (Células T) y la reacción inmunitaria de mediación humoral (Células B). transportándose por el torrente sanguíneo. que ayudan a contraer las plaquetas. Su porcentaje varía entre 2 4% del total de leucocitos. cuya función es la fagocitosis del complejo antígeno anticuerpo y la destrucción de parásitos. pero forman la fase hemostática primaria. 5) factor estabilizador de fibrina (coagulación) y 6) un factor de crecimiento. Eosinófilos. Monocitos. 4 . Su número va entre 150. 4) sistemas enzimáticos que sintetizan prostaglandinas (que causan reacciones vasculares). forman también el trombo plaquetario y la agregación plaquetaria. miosina y tromboasterina. Agranulocitos: que carecen de gránulos específicos. cuya función es diferenciarse en macrófago y fagocitar y presentar antígenos. 3)mitocondrias y sistemas enzimáticos que forman ATP y ADP. Su porcentaje es de 3 a 8% de los leucocitos y su número es de 200 a 800 por mm3. es decir 150 400 en número por mm3. tapando la lesión rápido antes de que se forme el coágulo. cuya función es antimicrobiana.500 a 2.000 por mm3. En su membrana celular hay glucoproteínas que hace que se adhieran a las zonas dañadas de la pared vascular.000 400. Basófilos. migrando (diapédesis) por las células endoteliales. de 1 a 3 micras. que activan varias fases del proceso de coagulación. 2) retículo endoplásmico y aparato de Golgi que sintetizan enzimas y almacenan calcio. En su citoplasma hay factores activos del tipo: 1) moléculas de proteína actina. y su vida es de 8 a 12 días. También hay fosfolípidos en la membrana. Su porcentaje en el total de leucocitos es menos del 1%. cuya función es la mediación de reacciones inflamatorias. son células anucleadas pequeñas. derivadas de los megacariocitos. Su función no es formar el coágulo. Granulocitos: Tienen gránulos específicos. para que diferentes células crezcan ayuden a reparar las paredes dañadas. No puede reproducirse. Su función es limitar una hemorragia al adherirse al recubrimiento endotelial del vaso sanguíneo en caso de una lesión.500 7.000 por mm3. y su número vacila entre 50 y 100 por mm3. pues fagocitan y destruyen bacterias mediante el contenido de sus gránulos.de sustancias extrañas. Su número va entre 3. con una zona hialunómera y una granulómera. y llegando al tejido conjuntivo para ejercer su función.

llamada coágulo a partir de un fluido orgánico.2. 4) proliferación final de tejido fibroso en el coágulo sanguíneo para cerrar el agujero en el vaso de manera permanente). Se forma un complejo de sustancias activadas llamadas en grupo activador de la protrombina. 5 . formando tejido conjuntivo. alfa2-globulina. Las que estimulan la coagulación se llaman procoagulantes y las que la inhiben anticoagulantes. con la ayuda de la vitamina K. La protrombina es una proteína del plasma. 2) la formación de un tapón de plaquetas. Es una proteína inestable. cerrando el vaso todavía más.2 Hemostasia y coagulación sanguínea: Se le llama coagulación a la formación de una aglomeración sólida.1. a la que. que puede desdoblarse en compuestos más pequeños. El mecanismo general de taponamiento tiene 3 etapas esenciales: 1) cascada compleja de reacciones químicas que afecta a más de una docena de factores de coagulación sanguínea. En el torrente sanguíneo hay más anticoagulantes. o 1 o 2 minutos si el trauma fue menor. La teoría básica dice que en la sangre hay más de 50 sustancias que causan o afectan la coagulación. de peso molecular 68. se activan los procoagulantes y anulan los anticoagulantes para que aparezca el coágulo. el coágulo se retrae. 3) la trombina actúa para polimerizar el fibrinógeno en fibras de fibrina (ver más arriba la composición del plasma y del suero) en 10 15 segundos. Recién hecha la lesión. Es el tercer mecanismo de la hemostasia (prevención de la pérdida de sangre. toda la brecha o el extremo roto se rellenan con un coágulo. Esto continua hasta la organización completa del coágulo en tejido fibroso en 1 a 2 semanas. La protrombina se forma continuamente en el hígado. uno de los cuales es la trombina. Una vez formado el coágulo puede suceder que: 1) lo invadan los fibroblastos. Entre 20 60 minutos después. se llega por los siguientes mecanismos: 1) espasmo vascular (es decir que la pared de músculo liso del vaso se contrae para reducir el flujo de sangre). 2) que el coágulo se disuelva.700. células sanguíneas y plasma para formar el coágulo. con peso molecular de 33. 3 -6 minutos después de la lesión. el coágulo empieza a aparecer en 15 o 20 segundos si el trauma fue grave. 2) el activador de la protrombina cataliza la conversión de protrombina en trombina en presencia de Ca2+ iónico. que atrapan en su red plaquetas. 3) la formación de un coágulo sanguíneo como resultado de la coagulación. pero en el caso de la ruptura de un vaso. cuando hay ruptura de un vaso.700 y en concentración de 15mg/dl en el plasma.

y haciendo entrecruzar las fibras. Por tanto. Recién polimerizados. se activa por sí mismo o con ayuda de la trombina. unidas a varias fibras de fibrina. y no tiene fibrinógeno ni factores de coagulación. El líquido exprimido se llama suero. La contracción la activa y la acelera la trombina.000) que está en el plasma a concentración de 100 700 mg/dl. impidiendo las pérdidas de sangre. adhiriéndose a la superficie dañada. para formar las fibras de fibrina grandes que constituyen el retículo del coágulo sanguíneo. Cuando hay daño en un vaso. no se filtra normalmente de los vasos a los líquidos intersticiales. refuerza mucho el coágulo creando enlaces covalentes entre los monómeros de fibrina. liberado por las plaquetas. plasma y plaquetas. acompañada de los iones de calcio. y es por ello que difiere del plasma.El fibrinógeno es una proteína de peso molecular alto (340. que se polimeriza con otras moléculas de monómero de fibrina. que actúa eliminando cuatro péptidos de peso molecular bajo de la molécula de fibrinógeno formando una molécula de monómero de fibrina. La trombina es una enzima proteica. de tal manera que exprime la mayor parte de su líquido en 20 60 minutos. el coágulo sanguíneo se compone de una red de fibras de fibrina en todas las direcciones que atrapan células sanguíneas. El suero no puede coagular. Las plaquetas. se conduce a la formación del activador de la protrombina. Se forma en el hígado y debido a su gran tamaño. que luego convierte la 6 . por sus elementos contráctiles (ver composición de las plaquetas arriba) hacen que el coágulo se retraiga. La contracción hace que los bordes del vaso dañado vuelvan a juntarse. El coágulo empieza a contraerse. los monómeros se unen mediante enlaces de hidrógeno débiles y las fibras no se entrecruzan entre sí. El propio coágulo libera sustancias (retroalimentación positiva) para promover más coagulación hasta que deje de perderse sangre. El factor estabilizador de la fibrina. haciendo el coágulo débil. Es fundamental en el proceso de coagulación.

mientras que la vía intrínseca es más lenta. y su forma activa va acompañada de la letra a . 7 . es decir que en un caso grave. se puede llegar a la coagulación en 15 segundos. Si no hay iones de calcio no hay coagulación. Este activador puede formarse de dos maneras: 1) mediante la vía extrínseca. En ambas vías. Es por esto. 2) mediante la vía intrínseca que empieza en la propia sangre.protrombina en trombina. haciéndolo reaccionar con sustancias como ión citrato u oxalato. ejercen la función principal. Estos factores se designan en números romanos. la mayoría formas inactivas de enzimas proteolíticas. Durante la vía extrínseca. reduciendo la concentración de iones de calcio. que comienza con el traumatismo de la pared vascular y de los tejidos circundantes. ocurren las siguientes reacciones: 1) Se libera la tromboplastina tisular (o factor tisular) 2) Factor X + Complejo lipoprotéico del factor tisular + Factor VIIa + Ca2+ Factor Xa 3) Factor Xa + Fosfolípidos del factor tisular + Fosfolípidos liberados por plaquetas ´Factor V Activador de la protrombina 4) Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina 5) Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina 6) Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina 7) Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado 8) Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Durante la vía intrínseca. para que se den las reacciones de coagulación. Tanto en la vía extrínseca como en la intrínseca. se necesitan los iones de calcio para la promoción o aceleración de todas las reacciones de la coagulación. Reacciones que ocurren durante la coagulación: En la página x se muestran las gráficas de los procesos que ocurren durante la coagulación de la sangre. mediante la des ionización. que para evitar la coagulación in vitro. los factores de la coagulación. ocurren las siguientes reacciones: 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) Trauma en la sangre + Factor XII Factor XIIa Trauma en la sangre liberación de fosfolípidos plaquetarios (Factor plaquetario 3) Factor XIIa + Factor XI + cininógeno de AMP + precalicreína Factor XIa Factor XIa + Factor IX Factor IXa Factor IXa + Factor VIII + Fosfolípidos plaquetarios + Factor plaquetario 3 + Factor X Factor Xa Factor Xa + Factor V + Fosfolípidos del tejido o plaqueta Activador de la protrombina Activador de la protrombina + Ca2+ + Protrombina Trombina Trombina + fibrinógeno Monómeros de fibrina Monómeros de fibrina + Ca2+ Fibras de fibrina Trombina + Factor estabilizador de fibrina Factor estabilizador de fibrina activado Fibras de fibrina + Factor estabilizador de fibrina activado fibras de fibrina entrecruzadas = COÁGULO Una diferencia importante entre la vía extrínseca e intrínseca es que la primera puede ser de naturaleza explosiva. tardando de 1 a 6 minutos.

Preguntas de discusión: ¿Qué efecto tiene el oxalato de potasio sobre el plasma sanguíneo? ¿Para qué se diluye el plasma en solución salina? ¿Qué efecto tiene el CaCl2 en la coagulación? ¿Qué efecto tiene el NaCl en la coagulación? 8 .2 2. mediante la realización in vitro de estos procesos.2.7 Observación en vivo de las reacciones que suceden en la coagulación y permeabilidad de la sangre. el manejo de las unidades utilizadas para la cuantificación y los aspectos importantes de bioseguridad y prevención de accidentes) 2.2.2. En dicho procedimiento.2. se añade oxalato de inmediato a la sangre extraída al paciente hasta que no quede protrombina que pueda convertirse en trombina.5 Poder establecer la diferencia entre suero.2 Aprendizaje de los procedimientos del laboratorio de bioquímica (entre ellos el manejo adecuado del material. poder determinar una anormalidad en dichos procesos y reacciones.2. cuando se hace la llamada tiempo de protrombina . 2.4 Conocimiento de la composición de la sangre y de las características principales de los elementos que la conforman.6 Conocer procedimientos llevados a cabo en el laboratorio. se mezclan con un exceso de iones de calcio y de factor tisular con la sangre oxalatada. 2. 2.8 Con base en el conocimiento de los procesos y reacciones que ocurren normalmente.3 Conocimiento de los procesos y reacciones que se llevan a cabo normalmente en la coagulación y permeabilidad de la sangre 2. y dura aproximadamente 12 segundos.2. El tiempo para la coagulación se conoce como tiempo de protrombina. útiles para el diagnóstico médico para tratamientos preventivos y curativos. anulando el efecto del oxalato.2.2. plasma y la sangre desfibrinada 2. Luego.En el laboratorio se hacen pruebas de coagulación. El factor tisular activa la reacción protrombina trombina por medio de la vía intrínseca.1 Objetivos Correcto aprendizaje de la obtención de una muestra de sangre venosa 2. 2.