1 “OBTENCIÓN DE ALCOHOL APARTIR DEL ALMIDÓN DE LA PAPA” I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

Hoy en día existe un grave problema ambiental “el smoke y la contaminación”, han producido daños a la capa de ozono Debido principalmente al uso intensivo (80%) de combustibles fósiles (carbón, petróleo, gas natural) en actividades industriales y el transporte se ha producido un excesivo aumento en las cantidades de óxidos de nitrógeno y dióxido de carbono emitidas a la atmósfera Además del incremento de las emisiones existen otros problemas como la deforestación (20%), que han limitado la capacidad regenerativa de la atmósfera para eliminar el dióxido de carbono, principal responsable del “Efecto Invernadero”.Por lo tanto se busca la utilización de otras fuentes de energía renovables como los Biocombustibles hacen parte de la solución para disminuir las emisiones de gases contaminantes, actualmente se esta produciendo alcohol de la caña de azúcar pero recientes estudios han determinado que el bagazo de la caña de azúcar tiene alto contenido de contaminantes entre ellos tenemos al “bagazosis” que es una enfermedad que se presenta en trabajadores expuestos a la inhalación de polvos de bagazo de caña enmohecido que forma parte de un conjunto de enfermedades de características clínicas, inmunológicas e histopatológicas semejantes, denominado alveolitis alérgica extrínseca, pero el término correcto es el de neumonitis por hipersensibilidad ya que la respuesta inmunopatológica se localiza en la porción distal del árbol respiratorio y abarca desde el bronquiolo terminal respiratorio, hasta los alvéolos y los capilares pulmonares, también afecta a los ojos ya que las partículas de hollín de tamaño igual o menor a 10 micrones, se incrustan en las corneas .Recientemente la OMS, anuncio que el 40% de pobladores mueren por causa del bagazosis y que el otro 60 % sufren de afecciones respiratorias los mas afectados son los niños debido que están el mayor tiempo en contacto con la naturaleza, no solo esto en cada inicio de zafra para los pobladores se hace insoportable convivir con la gran cantidad de hollín y humo que emanan las chimeneas de caña de azúcar dañando el patrimonio natural y cultural. Ante es problemática existe como alternativa la obtención de alcohol a partir de otra materia prima que no sea tan perjudicial

2 como es el almidón de la papa para producir alcohol anhidro para aditivo de combustible y para carburantes; también se puede producir en gran escala alcohol para el consumo humano (vodka). I.1. Interrogantes De La Investigación: I.1.1 ¿Cuál es el proceso de obtención de alcohol apartir del almidón de la papa? I.1.2. ¿Qué parámetros fisicoquímicos se controlara en la obtención de alcohol del almidón de la papa? I.1.3. ¿Cuál será el rendimiento de alcohol que se obtendrá del almidón de la papa? I.1.4 ¿Cuál es el grado alcohólico del alcohol obtenido del almidón de la papa? II. ANTECEDENTES: GULATI et al., (1996), Investigarón sobre “Maíz como materia prima en una planta productora de alcohol etílico”, Par la hidrólisis del almidón se usa la

α -amilasa obtenida de bacterias termo resistentes Bacillus licheniformis
tiene que ser llevada a altas temperaturas (90-100ºC) para el rompimiento de los gránulos del almidón, el almidón licuado se somete a sacarificación a menores temperaturas (60-70ºC) con glucoamilasa con Aspergillus Níger la cual hidroliza las dextrinas hasta glucosa. NETWORK, W. (2002), Investigo sobre “La producción de etanol usando mezclas de jugo de sorgo dulce”, granos de alto contenido de almidón, tallos con alto contenido de sacarosa y hojas y bagazo con alto contenido de lignocelulosa bajo condiciones normales y de muy alta concentración de sólidos (VHG), usando cepas de Saccharomyces cerevisiae a 30°C obteniendo concentraciones de etanol de hasta 16,8%v/v El objetivo de este trabajo fue determinar las condiciones para obtener durante la germinación. el mejor grado de hidrólisis del almidón del grano, usando las propias enzimas que se generan

3 AFANADOR, A. (2005) Investigo sobre “El Banano verde en la producción de etanol” el banano verde con cáscara tiene alto contenido de almidón y celulosa, se le considera como una materia prima potencial para la industria del bioetanol., la producción de alcohol a partir de almidones y celulosa con procesos químicos o biológicos (hidrólisis) para su conversión a jarabes azucarados, que una vez acondicionados se someten a la acción de levaduras que efectúan la fermentación alcohólica. El etanol resultante se lleva a procesos de destilación y deshidratación hasta obtener alcohol anhidro (99,5% v/v). LOZANO U. Á. (2003) Investigo sobre “Producción de etanol a partir de yuca mediante bioreactor de tanque agitado con control de variables” Se obtiene del almidón aislado de la yuca raíz sin cáscara, dicho almidón (polisacárido de glucosa) se somete a hidrólisis química, de tal forma que se produzcan azúcares fermentables, que son sometidos a una fermentación anaeróbica por la levadura Saccharomyces cerevisiae obteniendo una solución etanólica. Ambas etapas, hidrólisis y fermentación anaeróbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando variables de pH, Temperatura, Agitación, Tiempos de hidrólisis y de fermentación y Concentración de sustratos. SUNG Y CHENG J, (2002) Investigarón sobre, “Producción de alcohol a partir del trigo”. La que usualmente se utiliza en la producción de alcohol, llamada Zymomonas mobilis, obtiene excelentes resultados pero sólo a partir de la celulosa de los palos de trigo se podría hacer alcohol donde se logra rendimientos que alcanzan0.357 Etanol/kg de trigo mediante el proceso Biostill. CHAVES, S. M. (2004), Investigo sobre “Alcohol apartir de la caña de azúcar”, para la producción de etanol la principal materia prima es el jugo de caña o las melazas (subproducto de la industria azucarera) .Se puede obtener cerca de 70L EtOH/ton de caña y 9L EtOH/ton de melazas .El microorganismo mas utilizado es el Saccharomyces cerevisiae por su capacidad de hidrolizar la sacarosa de la caña de azúcar para su conversión

4 hasta glucosa y fructuosa se puede dar en condiciones anaeróbicas en pequeñas cantidades de O2. LYND, LR (2002), Investigo sobre “Alcohol apartir de Biomasa

Lignocelulósica”, los materiales que mas se han investigado son residuos forestales, de la industria papelera y residuos de sólidos urbanos. El complejo Lignocelulósico esta compuesto de una matriz de carbohidratos de celulosa y lignina enlazada por cadenas de hemicelulosa el pretratamiento tiene que desintegrar esta matriz par que la celulosa redusca su grado de cristalinidad y aumente la célula amorfa que es la que se requiere para el posterior ataque enzimático con células hexogenas la cual hace que se de una solución de glucosa que después hará que se convierta en EtOH mediante microorganismos. III. JUSTIFICACIÓN: III.1. JUSTIFICACIÓN TEORICA: El Etanol en mezcla con la Gasolina reduce las Emisiones de Monóxido de carbono (CO), sin incrementar la de Óxidos Nitrosos (N0x) ya que de acuerdo con la Asociación de Recursos Renovables de Canadá, el agregado de un 10% de etanol al combustible trae los siguientes beneficios: reducción de un 30% de las emisiones de monóxido de carbono y disminución entre un 6% y un 10% de reducción de las emisiones de dióxido de carbono a la atmósfera. III.2. JUSTIFICACIÓN TECNICA: En nuestro país la producción de papa se realiza en 6 meses con un promedio de 176.200 Ha, si consideramos el porcentaje de desperdicios del 3% por falta de transporte, almacenamiento y conservación tendríamos alrededor de 79.800 Toneladas de papa residual al año que podría ser utilizada en la producción de almidón, que sería de aproximadamente 15.960 Toneladas, que por hidrólisis enzimática se obtendría 15.162 Toneladas de azúcares fermentables y que por fermentación es posible producir alrededor de 50 millones de litros de alcohol. Una temprana experiencia de producción de vodka, con la cooperación de la República de Polonia, en el sur chico peruano, no prosperó por que la variedad de papa

1. Pero en nuestros andes tenemos variedades de papas con más del 30% de materia seca. IV. Los tubérculos de papa tienen diversos usos. y la variedad requerida para la producción de papa exige sólo un 25% de materia seca. Esta papa "aguachenta" es típica de la producción costera.3.5 utilizada tenía un alto contenido de agua.1. Requejo y Ortega (1996).m. también se indicó que de los sobrantes de papa generados en el proceso de extracción de etanol carburante se podrían obtener subproductos de ágil comercialización como alimentos para ganadería y abonos orgánicos.000 m. Actualmente contamos con variedades nativas y modernas por su origen. Aspectos Generales. En el Perú se encuentran alrededor de 2000. Dentro de los componentes nutritivos el que se encuentra en mayoría es el agua que constituye en torno al 80% del total. La fibra alimentaría representa 1-2% del total de . MARCO TEORICO: IV. almidón de papa. PAPA. amarillas e industriales. la glucosa y los preparados crudos de amilasas como resultado los mayores beneficiarios serian los pequeños productores de papa.1.s. variedades de mayor calidad se producen sobre los 3. solo 18 % de materia seca. Por su color son blancas y de color y por el uso son amargas. como fuente energética en la producción de etanol y el aprovechamiento de los productos intermedios del bioproceso como son la proteína unicelular. así en la alimentación humana el producto se consume fresco o procesado. III. IV.n. Le siguen los carbohidratos que constituyen el 16-20% entre los que hay que destacar el grupo de los almidones que son polisacáridos complejos que se absorben como glucosa previa hidrólisis enzimática. dando cuenta que este proceso no sólo ampliaría la producción industrial del energético sino que propone la exploración de otros mercados y la dinamización de la economía nacional. JUSTIFICACIÓN SOCIAL: Dentro de éste contexto se sitúa la presente investigación que se inclina al aprovechamiento del recurso agrícola.

1.44 .53 0. Ubicación Taxonómica. IV. Cuadro 1: Principales componentes de la papa.1.2.48 0.6 1.0 0.4 .17 .12 0. . Composición química de la papa.6 la papa y se encuentra preferentemente en la piel. 1996) IV.8 0.3 21. rango y media.30.71 0. Distribución: Costa y sierra peruanas.9 1 .2 . (materia prima).4.1 10-25(mg/100gr) Fuente: Mataix. fructosa y sacarosa.2.5.36.3.3.86. siendo los más importantes la glucosa.1. Género: Solanum Especie: Solanum tuberosum Familia: Solanáceas. Componentes Agua Sólidos totales Proteína (Nitrógeno total + 6.9 13. Extendida a todo el mundo (Requejo y Ortega.6 0.3 .05 23.54 mg/100gr 75.0.2 – 41 0.20 0. ALMIDÓN. (1997) IV.0 13.0 .1.25) Glicoalcaloides (Solanina) Grasa Azúcares reductores Total Carbohidratos Fibra Cruda Ácidos Orgánicos Ceniza Vitamina C Rango % 63.7 2 Media 3-10(mg/100gr) 0.9 0.02 .1 . Origen: Nativa de los Andes y cultivada desde la época prehispánica.7 .

forma. El almidón se obtiene después de romper el tejido. CARACTERÍSTICA Y PROPIEDADES.2. El almidón se encuentra en abundancia en:  Graminneas (cereales): trigo (Triticum sativum).  Solanáceas: papas (Solanum tuberosum). Se presenta como polvo blanco fino. ESTRUCTURA DEL ALMIDÓN. cebada (Hordeum vulgare)  Leguminosas (legumbres): porotos (Phaseolusvulgaris). da glucosa como producto final de la hidrolisis total. 2150 u). lentejas (Lens sculenta). El almidón es insoluble en agua fría. IV.2. Martínez. IV. constituido por granos característicos microscópicamente para cada especie. granos simples o compuestos y aspectos a la luz polarizada. centeno (Secale cereale). Probablemente no existe otro compuesto orgánico tan ampliamente distribuido en los vegetales como el almidón. arvejas (Pisum sativum). estratificaciones. por ejemplo al pasar la papa por un extractor de jugos sale un jugo con un residuo lechoso ese residido lechoso es el almidón el cual debe sufrir varios lavados para eliminar los contaminantes y obtener un almidón blanco. insípido. . en agua caliente se hincha formando engrudo.2. (2006). hilio o núcleo. Para su caracterización se toma en cuenta: tamaño (aprox. Es el producto de asimilación más importante de la fotosíntesis y constituye la principal sustancia de reserva de los vegetales. maíz (Sea mays). etc. avena (Avena sativa). la diferencia entre harina y almidón de papa es la papa entera que se le ha quitado el agua y se ha molido para obtener la harina. Espinosa (2004). arroz (Oryza sativa). Químicamente el almidón o fécula es un polisacárido homogéneo que esta formado por una mezcla de dos polisacáridos estructuralmente diferentes: amilosa y amilo pectina.1. Industrialmente se le obtiene por vía húmeda a partir de ellos. se torna de azul a azul violeta con sol.7 Espinosa (2004).

Al tratar el almidón con agua caliente. que se conoce como amilopectina. o Amilosa. con enlaces . Amilosa 20 % Amilopectina 80 % H2O Almidón Δ Los dos constituyentes del almidón difieren en diversos aspectos y por tanto los consideramos por separado. Nuestras enzimas hidrolizan los almidones hasta sus unidades constituyentes de glucosa. como ya hemos expresado. que se conoce como amilosa y otra no dispersable. se puede decir que el almidón está constituido por unidades de D(+)-glucosa enlazadas α-1. sirve a nuestro organismo de nutriente y es utilizada para diferentes transformaciones metabólicas.4. que es la mayoritaria. este se separa en dos fracciones: una dispersable. 2006) Figura 1: Estructura de la amilosa CH2OH O HO O CH2OH O HO OH O CH2OH HO OH O O OH O o Amilopectina.8 Como primera aproximación. Está también constituido por unidades de D (+)-glucosa. Amilosa es una molécula lineal compuesta por 250 a 300 unidades de  a -D-glucopiranosa enlazadas por uniones 1-4 (Martínez. la cual.

que se conocen como “Dextrinas” que se utilizan en el acabado de tejidos y en la fabricación de pegamentos. O O HO OH HO CH2OH O CH2OH O OH O O H2C HO OH O HO OH O CH2OH O O IV. pero las cadenas son de 1000 unidades o más y presentan ramificaciones cada 25 unidades α-1.02% 0.2.30% 0.07% FUENTE: Martínez. (Martínez. Composición del almidón de papa.2 Estructura de la amilopectina. Cuadro 2. de masa moleculares gradualmente menores. La hidrólisis de la amilopectina van produciendo mezclas de Oligosacáridos. (2006) . 2006) Figura.6 en los puntos de ramificación. Componentes Almidón Agua Ceniza Arena Proteína Fósforo.09% 0.3.4. etc. P Análisis típico el 80% el 20% 0.9 α-1.

5 mg de acetato de etilo Máximo 1 mg Fuente: Normas y Tecnología (Ward.3. de sabor urente y olor fuerte. y tiene muchas aplicaciones industriales.2.1. Actualmente tiene una extraordinaria importancia comercial e industrial.8120 a 20ºC 1 mg/100 alcohol a 1000 ºGL Máximo 1 . etc. melaza. y luego se concentra esta mezcla por destilación fraccionada. Es un líquido incoloro. Etanol (Producto).10 IV. Forma parte de muchas bebidas. prácticamente todo el alcohol etílico que se consume es una mezcla de 95% de alcohol y 5% de agua. primero se obtiene alcohol etílico mezclado con agua. agente extractivo. Se le denomina también Alcohol etílico cuya molécula tiene dos átomos de carbono.8 mg de ácido acético Máximo 6. CARACTERISTICAS DEL ALCOHOL ETILICO. aguardiente. papa.3. IV. ya que se utiliza como combustible. El alcohol etílico rectificado deberá tener las siguientes características: CUADRO 3. en laboratorios y en el hogar. cerveza. como vino. disolvente. anticongelante y como producto químico. Grado alcolhólico volumétrico Densidad relativa máxima Residuo no volátil máximo Acidez para 100 ml de alcohol a 100 ºGL Esteres por 100 ml de alcohol a 100 ºGL Aldehídos por 100 ml de alcohol a 100 ºGL 96° GL a 20°C 0.3. Se obtiene por destilación de productos de fermentación de sustancias azucaradas o feculentas. que arde fácilmente dando llama azulada y poco luminosa. Su fórmula química es CH3-CH20H. 1991).. como uva. remolacha. IV. Cualquiera que sea su método de preparación. El alcohol etílico es uno de los compuestos orgánicos usados en la industria. (Ward. 1991). APLICACIONES Y USOS. Se . Para bebidas alcohólicas.

IV. en curaciones y como fuente de energía calorífica. películas fotograficas. azúcares fermentables. Disacáridos como la sacarosa y maltosa que son fermentadas por Saccharomyces.1. productos medicinales. como combustible. PROCESOS FERMENTATIVOS. Otros complejos enzimáticos intervienen cuando se degradan otros tipos de azucares: • • • Pentosas como la xilosa y arabinosa. di o tri Sacáridos. jabones. pinturas. celulosa y otros. como productos de uso doméstico. (Ward. • • Uso Industrial: Es ampliamente utilizado para la elaboración de licores. PROCESOS DE OBTENCIÓN DE ALCOHOL. que producen alcohol por acción de algunas levaduras del género Torula. También se producen glicerol y ácido succínico. barnices. 1991). podrán ser fermentados siempre que se hidrolice previamente en mono.4.11 utiliza en las industrias de perfume. lo que muestra que la fermentación incluye otras reacciones secundarías. • Uso Domestico: Es ampliamente utilizado por los pobladores como desinfectante. cosméticos. La fermentación es llevada a cabo generalmente por levaduras del género Saccharomyces realizándose por acción de un complejo enzimático llamado enzimático que permite transformar las hexosas en alcohol y C02. lacas. licores. IV. 2000) . dextrina. La industria de las fermentaciones utiliza como fuente de origen para el proceso a casi todas las materias primas que poseen carbohidratos en su constitución (Silva. etc. Uso Comercial: El alcohol es actualmente un producto en potencia como energía convencional y de aceptación en el uso de combustible para automóviles.4. Es un proceso bioquímico mediante el cual ciertos microorganismos metabolizan las moléculas de azúcar produciendo etanol y CO2. Polisacáridos como el almidón.

En general las fermentaciones aeróbicas pueden representar de la siguiente manera: m. hidrógeno azufre. magnesia. sodio. . Es el proceso donde se suministra oxígeno al sistema y se desprende CO2. Clasificación de acuerdo al medio donde se desarrollan. levaduras. IV. . fósforo. 1980). La fermentación Aeróbica.4.Las condiciones adecuadas para su desarrollo son: pH.12 Una de las formas de obtener alcohol etílico es mediante la fermentación de mostos azucarados de acuerdo a 1a ecuación establecida primero por Lavoisier1787.2. 1995).Los nutrientes son: Carbono. que establecieron el desdoblamiento de los azucares por la ecuación química siguiente: C12H22011 + H2O C6H12O6 + 6 O2 C6H12O6 C2 H5OH + 3 O2 2 (C6H12O6) x 6 CO2 + 6 H2O 6 C2 H5OH + 2 CO2 2 CO2 + 3 H2O Metabolismo oxidativo (formación de Biomasa) Metabolismo fermentativo (formación del alcohol) Metabolismo oxidativo del etanol (formación de biomasa) En la práctica se comprueba que el metabolismo de la glucosa es mucho más compleja.o . ya que según las cantidades ambientales. oxigeno disuelto y la segunda es un proceso en el cual no necesita oxígeno. viscosidad. a) . el metabolismo puede ser parcialmente fermentativo o parcialmente oxidativo (BRUSHMAN. temperatura. luego Gay-Lussac en 1820 y corregida por Dumas en 1840. . tejido celular. (Jorgensen.Los microorganismos son: Bacterias. o + Elementos Nutrientes + O2 C02 + Productos + m. hongos.

pero la especificidad de las enzimas. 1995). lo que implica una relación estequiométrica de 9:10. en la anaeróbica no existe un solo grupo de reacciones químicas que la describan. suelen ser sustancias inorgánicas. sus condiciones suaves de reacción y la ausencia de reacciones secundarias han hecho que las amilasas sean los catalizadores usados para esta tarea. en vez de agua. pero en otras. degradación) de este biopolímero. Para la primera etapa de la hidrólisis de las suspensiones de almidón que tienen que ser llevadas a altas temperaturas (90-110 ºC) para el rompimiento de los gránulos de almidón. De cada 100g de almidón se pueden obtener teóricamente 111g de glucosa. el proceso se realiza por medio de un mecanismo al que los científicos bautizaron como respiración anaeróbica. El producto de esta etapa o licuefacción es una solución de almidón que contiene dextrinas (oligosacáridos compuestos por varias unidades de glucosa) y pequeñas cantidades de glucosa. Alcohol A Partir Del Almidón De La Papa. Es un proceso en el cual no se necesita oxígeno. como en ciertas bacterias. El almidón licuado se somete a sacarificación a menores temperaturas (60-70 ºC) con glucoamilasa obtenida de Aspergillus niger o de especies de Rhizopus la cual hidroliza las dextrinas hasta glucosa. Cuando no hay oxígeno. se debe incluir una etapa adicional de hidrólisis (rompimiento. . en muchas formas de vida se detiene el mecanismo celular de respiración aeróbica. el cual se puede convertir en EtOH mediante las levaduras. 1995) IV. ni siempre se obtienen los mismos productos finales. En ella. El almidón fue tradicionalmente hidrolizado mediante ácidos. Por ello. (Nigam y Singh. provocando su muerte. condición necesaria para el tratamiento enzimático.4. además del dióxido de carbono.13 b) La fermentación Anaeróbica. A diferencia de la respiración aeróbica. (Jorgensen. Para obtener etanol a partir de almidón es necesario romper las cadenas de este polisacárido para obtener jarabe de glucosa. como los sulfatos y nitratos. el lugar que ocupa el oxigeno atmosférico es reemplazado por sustancias inorgánicas oxigenadas.3. en tanto que los productos formados.

REGULACIÓN DE FACTORES DURANTE LA FERMENTACIÓN. cobre. ácidos grasos. sulfato de amonio.1. Las Levaduras necesitan una fuente de carbono. zinc. se enfría a 30 ºC y se procede a introducir en un frasco o recipiente de 3 litros. Se corta en lonjas un kilo de papas. cuyo proceso se sigue mediante Ia reacción que da con el yodo (la coloración al principio azul cambia después a roja y al final del proceso ya no se observa coloración alguna). amoniaco. de levadura (preparar una pasta) se deja fermentar por espacio de 3 días. IV. etc. magnesio. Nutrientes.3%.4.14 Se ha reportado la producción de EtOH a partir del almidón como papa. otra de nitrógeno. Existen tres tipos de levaduras: (KRYACHKOV. 1980). Se requieren también de oligo elementos o activadores de enzima. azufre.5. (Nigam y Singh. Entre los minerales se tiene al: fósforo. El producto resultante de la fermentación se procede a destilar (TELLO. peptonas.5. aldehídos. manganeso. IV. Como constituyentes de las otras fuentes tenemos los azucares. . minerales y vitaminas.5 litros de agua y se pasan por un tamiz. Una vez terminada la transformación de la fécula. Se ha propuesto la hidrólisis del almidón de la papa para obtener soluciones de glucosa mediante un reactor enzimático de membrana de fibra hueca con conversiones de 97. aminoácidos. hierro. el producto se hace cada vez claro. a medida que progresa la sacarificación.4. Fermentación Alcohólica A Partir De La Papa. cloruro de amonio e inositol. añadiendo unos 10 gr. los cuales se cuecen con 1. Se debe hacer notar que para el caso de las levaduras el fósforo es esencial para su metabolismo. papa dulce. 1995). Se forma una pasta el cual se vuelve a cocer añadiendo agua durante 1/2 a 1 hora agitando para que todo el almidón o fécula. potasio. 2004). IV.

2. lípido. Son aquellas que se desarrollan exclusivamente en el fondo del recipiente o cuba de fermentación. aun puede descender hasta 2. vitaminas.5 y ascender hasta un 14%. carbohidratos. Levaduras altas. (KRYACHKOV. Levaduras bajas. (KRYACHKOV. Pero durante la fermentación es lanzada hacia las partes superiores del líquido como consecuencia de la formación de anhidrido carbónico. Es una variedad de la Saccharomyces cerevisiae que tiene la caracteristica de ser bastante estable y tolerar altas concentraciones de alcohol etílico (12%). Son aquellas que se desarrollan ascendiendo durante la fermentación hasta la superficie del líquido en fermentación. Levaduras de Destilería. La Zimasa que transforme la glucosa y fructuosa formados. las cuales originan la fermentación alcohólica. en donde permanecen bien como cepa uniformemente distribuida o bien corno anillo en la pared del recipiente o cuba de fermentación. C. 1980). en alcohol etílico y anhidrido carbónico. 1980). sin perjudicar su calidad fermentativa. normalmente el contenido de nitrógeno varia entre 7 y 9 %. Hay levaduras que soportan hasta el 11 % del alcohol etílico pero tiene el inconveniente que no fermenta todo el azúcar presente en el mosto a fermentar. La saccharomyces cerevisiae tiene dos enzimas: C.15 A.1. El . 1980). En realidad ésta zimasa está constituida por varias enzimas y co-enzimas. C. Un elevado porcentaje que esta entre 64-76%. (KRYACHKOV. que da lugar a que la sacarosa se hidrolize. D. Las levaduras contienen aproximadamente de 68-83% de humedad las mismas que están constituidas de sustancias nitrogenadas. B. minerales y otras sustancias. lo constituyen las proteínas puras alrededor del 10% se presentan en las bases puricas. COMPOSICIÓN QUIMICA DE LAS LEVADURAS. formando una molécula de glucosa y una molécula de fructuosa. La Invertasa.

Durante las fermentaciones por lo general es necesario controlar el pH. puesto que ciertas bacterias y levaduras crecerán aunque con menor rapidez a valores de pH tan bajos como 2.3. 1981) . (Salinas. pH. los mesófilos de 25 a 40 ºC y los termófitos de 45 a 60ºC. pueden vivir en forma latente fuera de estos rangos. acético y cítrico o cuando los mismos sustratos de crecimiento son ácidos o bases. nucleótidos y otros productos. 1998). se pueden usar durante las fermentaciones para reducir la posibilidad de contaminación. Esto solamente es una generalización. con una consecuente reducción de los costos de esterilización. Además. (Quintero. Temperatura. (Scragg. debemos mencionar que la temperatura también afecta el rendimiento durante la fermentación.16 4% en las pirimidinas y cerca del 15% de nitrógeno total se presenta en forma de aminoácidos.5. 1997). de modo que al consumirse el pH del medio cambiará de manera importante. Así las fermentaciones de levaduras con frecuencia operan a un pH tan bajo como económicamente sea posible para evitar la contaminación bacteriana. cuando se forman productos ácidos como el ácido láctico. aún dentro de éste intervalo frecuéntemente cambian su metabolismo como resultado de un cambio de incluso 1-1. La temperatura afecta el crecimiento de manera notable. mientras no se inactiven sus enzimas. Los microorganismos tienden a crecer en un intervalo limitado de pH y. En general. Estos diferentes intervalos de pH para el crecimiento.5 unidades de pH. las levaduras crecen en un intervalo de 3 a 6. Los psicrófilos presentan un rango de temperatura de 5 a 15°C. IV.5. IV. Las levaduras se desarrollan entre 25 a 45°C.2. principalmente porque los microorganismos de una especie dada solo pueden crecer en un rango restringido de temperatura. su temperatura óptima es de 30 a 40ºC.

Aguilar.7-5 4-8 Topt. turbidaus T max. LEVADURA Saccharomyces cerviciae S. (Quintero. con el conocimiento actual es posible iniciar una fermentación y poco a poco a través de la experimentación ira mejorando y dirigiendo el crecimiento y el metabolismo microbiano en el sentido que se desee: aumentando el rendimiento. intermedius S.4. Oxigeno. lógicamente las rutas metabólicas serán diferentes. disminuyendo el consumo de nutrientes o excluyendo selectivamente ciertos productos.5. Si el mosto es demasiado concentrado el alcohol que se produce puede inhibir la acción de la levadura. El crecimiento microbiano es función de muchas variables y todavía no se establecen relaciones matemáticas que cubran esos rangos de operación o interrelaciones con ellas. El oxígeno merece mención especial. ºC 30 27.5-4 4. pues su ausencia o abundancia permite una selección tanto de microorganismos como de productos del metabolismo.5-4 0. pero la mas recomendable deacuerdo a las experiencias en las destilerías sugieren el empleo de la concentración de azúcar en el empleo del mosto para la fermentación sea del 12 5 en peso. pues la extraña perdida de un valioso espacio de fermentación. mínima y optima para la esporulación de algunas levaduras. IV. Las levaduras pueden desarrollarse tanto en condiciones anaeróbicas como aeróbicas.5 25 25 29 FUENTE: Prescot (2000) “Microbiología Industrial” Ed. ºC 9-11 0.17 Cuadro 4.Temperatura máxima. como consecuencia de ello . La dilución execiva del mosto a fermentar es antieconómica. pastorianus S. ºC 35-37 29-32 27-29 31-33 33-35 Tmin. IV. CONTENIDO DE AZUCAR: Se puede hacer muchas variaciones en los procedimientos de fermentación. validus S. Sin embargo. lo que traería como consecuencia la prolongación del tiempo de fermentación y que no se convierte la parte del azúcar.5.5. 1981).

es un intercambiador de tubos vertical y cilíndrico) para posteriormente alimentarse en la parto superior de lo primera columna do destilación.6. La duración de los periodos de fermentación es muy variada según el método que se emplee. Los vapores do esta columna pasan a la segunda columna de destilación del cual se obtienen vapores con contenido de 60% vlv en promedio de alcohol el cual es condensado totalmente utilizando un condensador total vertical y un condensador de fases.6.1. (Charley. 1998) .5.18 aumenta el volumen del mosto a destilar trayendo consigo un mayor costo de producción en la destilería. por lo tanto la fermentación tumultuosa se inicia a partir de las dieciocho horas. Concluye la fermentación a las 72 horas. Cuando se prepara la levadura madre se observo que la fermentación es alta o tumultuosa con un gran desprendimiento de anhídrido carbónico iniciado al cabo de las ocho horas en vista de que la reproducción de las levaduras ha sido lo suficientemente para la conversión de azucares fermentecibles en alcohol: mientras que si se añade la levadura directamente a la cuba de fermentación tarda en reproducirse. accionada por un mecanismo de Transmisión que permite la regulación continua de la velocidad en litros por hora. La alimentación del mosto previamente filtrada se efectúa mediante una bomba de tornillo rodante. (Márquez. La destilación se puede efectuar en dos columnas de funcionamiento continuo. (Charley. esto es. el mosto se precalienta en los tubos de un deflegmador (es una operación en la cual alguna mezcla de vapor generalmente saturado se someto a condensación parcial por medio de' enfriamiento por lo cual el vapor saliente se enriquece en el componente más volátil. TIEMPO DE LA FERMENTACIÓN. Es una operación de separación basada en las diferencias de volatilidad relativa en una mezcla. Destilación.6. 2001) IV. mientras que en el caso anterior la finalización de la femetación es antes de las dieciocho horas. 2001) IV. OPERACIONES DE DESTILACIÓN Y RECTIFICACIÓN. IV. diferencia entre los puntos de ebullición de los componentes de la mezcla.

(Vargas y Condori 2000). evacuando los productos y sub productos. Para cuyo efecto se debe cambiar la relación de reflujo en forma continua hasta alcanzar un valor máximo límite al funcionamiento de la columna de reflujo total. 2. niveles apropiados de oxigeno disuelto. formas de operar una columna intermitente: 1.6.7. La operación en la columna de rectificación se inicia con reflujo total a efecto do conseguir 01 perfil de temperaturas adecuado para obtener el producto.1. . Es también una operación de separación basada en diferencias de volatilidad relativa y tiene por objeto eliminar el contenido de impurezas de la mezcla a niveles permisibles y al mismo tiempo elevar el contenido de alcohol de Ia mezcla hasta el punto Azeotropico (En la mezcla alcohol agua se forma un azeótropo y no es posible superar este punto por destilación ordinaria a presión atmosférica) teóricamente.7. Rectificación. por tanto un sistema no debe ser más complicado de lo que resulta ser necesario.19 IV. TIPOS DE FERMENTADORES. A propósito.. Para el funcionamiento de cualquier bio-reactor. FERMENTADOR.Rectificación a producto constante. al cual se deberá proporcionar de un medio ambiente aséptico en el que únicamente se encuentran los microorganismos deseados.Rectificación a reflujo constante: Es en que la composición del destilado varía a mediada que se modifica la composición de la mezcla contenida en el calderin.. un control adecuado de temperatura y pH adecuado. El diseño de un bio-reactor es específico para cada proceso biológico y su complejidad depende de los experimentos de proceso.2. 1998) IV. IV. se deben tener las condiciones necesarias para su esterilización y mantener la asépsia. existen dos. (Márquez. debe contar con dispositivos que permitan el suministro de substratos o de nitratos. y una buena agitación que permita mantener las condiciones uniformes en todo el reactor. El fermentador o bioreactor es un recipiente en donde se desarrolla procesos bioquimicos.

. (Vargas y condori 2000). se descargan los productos. Además tomando encuenta el estado físico de la mezcla reaccionante. y una rápida disolución de los gases burbujeados como el oxigeno en el aire.Donde se presentan en dos o mas fases. los fermentadores se pueden dividir en:  Homogéneos. Diseño Y Puesta En Marcha De Un “Sistema Semicontinuo En Dos Etapas: Hidrólisis –Fermentación” Para La Producción De Etanol A Partir De Almidón De Papa Usando Simultáneamente Aspergillus Niger Y Saccharomyces Cerevisiae.20 Por su funcionamiento. luego se procesa y después de. De este tipo tenemos los siguientes:    Tanque Agitado. Se operan cargando inicialmente el sustrato y la cantidad total de reactivos.  Heterogéneos. Columnas empacadas con enzima inmovilizada. Descripción del Bioreactor Tipo Tanque con Agitación.7. (Vargas y Condori 2000). IV. Torres de lecho fluidizado donde el flujo del medio mantiene suspendidos los microorganismos. El equipo se mantiene operando en estado estable con una alimentación de reactivos y una descarga de productos constantes.2. quedando nuevamente el reactor disponible para iniciar otro ciclo.-En los cuales las reacciones ocurren en una solo fase. ALONZO. IV. (2006) Describe el diseño y evaluación de las variables que gobiernan el sistema semicontinuo en dos etapas: hidrólisis . dentro de ellos tenemos:   Tanque agitado Estacionarios b) Fermentadores Por Lotes Continuos. se tienen de dos tipos y son: a) Fermentadores Por Lotes Discontinuos.8.fermentación para la producción de etanol a partir de almidón de papa usando . Los fermentadores de tanque agitados mantienen un sistema homogéneo Mediante agitación mecánica que provoca una adecuada dispersión y mezclado de los materiales inyectados consiguiéndose una mejor transferencia de calor para mantener la uniformidad de la temperatura.

tasa de dilución como base para la determinación de la µmax . La hidrólisis del almidón y posterior fermentación produjo cantidades significativas de biomasa. con resultados comparables a los del método clásico de monocultivo pero con tiempos de bioproducción inferiores. concentración celular. Cada reactor tiene una capacidad de 2 litros construido en vidrio con tapas esmeriladas con cuatro accesos.Señala las variables objeto de estudio fueron: Velocidad de crecimiento. azúcares simples. (2006).21 simultáneamente Aspergillus niger y Saccharomyces cerevisiae. Para disminuir el tiempo de filtración y aumentar su eficiencia el biofiltro posee un desprendimiento lateral para la conexión a la bomba de vacío con su respectiva trampa. describe el Bioreactor semicontinuo que consta de un reactor por cada etapa del proceso. ALONZO. flujo volumétrico. una para suministro de inoculo y de medio nuevo y otra para monitoreo de muestras y control de temperatura. concentración del producto. Productividad.2 micras el cual retiene las unidades reproductoras de Aspergillus niger. ALONZO. Entre los reactores se encuentra el Biofiltro. Ks . Los microorganismos tipo nativo del Aspergillus niger y Saccharomyce cerevisiae utilizadas en este estudio fue suministrada por el Laboratorio de Investigaciones Microbiológicas de la Universidad Industrial de Santander. dos para la entrada y salida de gases. Se . (2006). Concentraciones de biomasa y sustrato en el equilibrio. sustrato limitante. tiempo de generación. indica que dentro del biofiltro se encuentra primero el prefiltro que es una malla circular en alambre que soporta una capa de lana de vidrio de 3mm de espesor con el fin de retener las partículas más grandes como las dextrinas y el micelio de Aspergillus niger a 4 cm del prefiltro se encuentra el filtro de membrana de 0. Determinando lo anterior se puede decir que se tiene la descripción experimental del cultivo continuo de acuerdo a la Teoría del Quimiostato para cada etapa del proceso. garantizando la esterilidad del los hidrolizados de almidón que van al reactor de fermentación con la Saccharomyces cerevisiae. y enzimas como productos colaterales al etanol. de 1 litro de capacidad en vidrio con tapa esmerilada y unido con los reactores por medio de conectores en vidrio provistos de válvulas de paso tipo bureta.

El tiempo de fermentación alcohólica fue de 48 horas a condiciones anaeróbicas. para el bioreactor de hidrólisis se realiza una vez se hayan evacuado los 500mL de hidrolizado hacia el biofiltro transcurridas las 60 horas iniciales de hidrólisis. ALONZO.5. g/litro de NaNO3. conteo realizado mediante cámara de Neubahuer. 4. las . 0. 0. después el periodo de suministro se realiza cada 48 horas para un flujo volumétrico de 500mL/48 horas en las dos etapas. FeSO4 . Para todos los experimentos la inoculación fue de aproximadamente 106 levaduras. El volumen total del medio fue de 1000 mL. K2HPO4.22 realizaron 3 experimentos completos para concentraciones de almidón iniciales de 2. Para indica las condiciones de cultivo para la etapa de todos los experimentos la inoculación fue de aproximadamente 105 conidiosporas. MgSO4. Aquarium Air Pump) con una tasa de volumen de aire aproximadamente de 90 litros por hora.5. ALONZO. 1. 0. y 8 g/100mL respectivamente. conteo realizado mediante cámara de Neubahuer. 500mL. para un volumen de 1 litro de cultivo y un tiempo de hidrólisis de 60 horas en la primera etapa y 48 horas después de cada suministro de medio nuevo. En cada experimento se realizaron los siguientes pasos: Primero hidrólisis del almidón de papa por Aspergillus niger a la concentración inicial de almidón indicada. hidrólisis. (2006). 7H2O. El segundo paso. En este ultimo paso el filtrado es recibido en el bioreactor de fermentación que contiene el inoculo de Saccharomyces cerevisiae en un medio de hidrolizado de almidón con el fin de eliminar la etapa de adaptación y arrancar en etapa de crecimiento exponencial para la producción de etanol. una vez trascurrido el tiempo de la hidrólisis es la Filtración de 500mL de hidrolizados eliminando Aspergillus niger y la dextrina limite con el fin de "esterilizar" el futuro medio para la fermentación de los azúcares en el tercer paso.01) y almidón de papa como fuente de carbono. indica las Condiciones para la etapa de fermentación. KCl. las concentraciones de las sales del medio de cultivo corresponden al medio mineral Czapek (composición. El suministro de medio e inoculo nuevo. se suministró oxígeno al medio durante todo el proceso mediante bomba de acuario (Power 500. (2006). 3. Se consideraron tres suministros para cada experimento a intervalos de 48 horas. 7H2O.

. IV.A.C 9.La determinación de nitrógeno total se realizó por el método de Kjeldalh.8.Pak. Los Azúcares Reductores son determinadas en muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Bernfeld. 1964. 1963).. IV. (William.8.Los Azúcares Totales son determinadas en muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Fenol . IV.8. Los filtrados fueron utilizados para la cuantificación del alcohol los azúcares reductores y la glucosa.Determinación de nitrógeno y proteína en la biomasa. Determinación de los Azúcares Reductores.8.O. Las concentraciones de azúcares están indicadas para cada experimento al igual que los intervalos de muestreo. La masa celular fue secada a 110°C con pesos constantes para evaluar la proteína unicelular.5-dinitrosalicílico. utilizando el Acido 3.).8.1. (Wistler. Determinación de las concentraciones de Etanol. Determinación del Almidón en el medio.3.012/80. La determinación de almidón se realiza mediante lecturas de absorbancias del complejo coloreado de yoduro-yodato más almidón a 640 nm contra una curva de calibración. La Glucosa es determinada por el Método de Glucosa Oxidasa y peroxidasa utilizando el Kit de Sera . Determinación de Glucosa.23 concentraciones de las sales del medio de cultivo corresponden al medio mineral proveniente del cultivo de la hidrólisis una vez retirado el Aspergillus niger. Determinación de Carbohidratos Totales. .Acido Sulfúrico.5.2. la fuente de carbono corresponde a los azúcares producto de la hidrólisis del almidón. 2002). IV. Cada muestra tomada fue filtrada con el fin de separar la levadura a través de dos capas de papel filtro cualitativo Whatman.4. 1984) IV. de acuerdo a la metodología de la A. La concentración del etanol fue determinada mediante el método de gravedad específica por picnómetro. IV. El volumen total del medio fue de 1000 mL. (Abouzied.8. (Nielson.6.

González y Córdoba (2006). Se determinó que el efecto combinado entre las concentraciones de la enzima α-amilasa y el sustrato presentó significancia estadística.8 mL/kgsustrato y 20 % respectivamente. 2006). (González y Córdoba.24 Estudio De Los Factores Que Afectan La Hidrólisis Enzimática Y El Proceso Fermentativo Para La Producción De Alcohol A Partir De Papa (Solanum tuberosum). una concentración máxima de alcohol de 10.0746 kgetanol/kgpapa. se observó que la concentración de 0. En la fermentación alcohólica del sustrato hidrolizado. La presencia del promotor presentó significancia estadística entre los niveles utilizados. por lo que se recomienda utilizar 0. En la segunda etapa experimental realizaron el seguimiento cinético de la hidrólisis y se sugiere disminuir el tiempo de acción de la enzima αamilasa a 0. respectivamente. . la hidrólisis enzimática y la fermentación de la papa (Solanum tuberosum). IV. Se encontró que la concentración de células no es significativa y se recomienda utilizar una concentración de 50 millones células/mL. se encontró que el valor máximo de torque requerido para la agitación en el proceso de gelatinización fue de 11 N·cm y de 1 N·cm para la dextrinización y la sacarificación. El rendimiento de etanol para el proceso global fue de 0. En la etapa del seguimiento cinético de la fermentación. Al evaluar el efecto de cuatro concentraciones del promotor. de la concentración de las enzimas α-amilasa y amiloglucosidasa.33 % v/v.9. se obtuvo un consumo de azúcares reductores de 91 %.91. la conversión a azúcares reductores se ve favorecida al utilizar los valores de 0. estudiaron el efecto de la concentración de células y la presencia de biotina como promotor de la fermentación.2 mg/kg favorece la producción de alcohol. a fin de determinar las mejores condiciones para producir alcohol. estudiaron a nivel de laboratorio.98 y una eficiencia de la fermentación de 0.5 h y para la sacarificación utilizar un período de 15 h. un rendimiento de etanol con respecto al ideal de 0. la concentración de sustrato y el tiempo de sacarificación. La concentración de la enzima amiloglucosidasa y el tiempo de sacarificación no presentaron significancia estadística.8 mL/kgsustrato y un tiempo de 14 h. En la primera etapa experimental se analizó el efecto sobre la conversión a azúcares reductores. Además.

la variable de respuesta fue el rendimiento de azúcares reductores. El objetivo de esta evaluación fue encontrar aquella combinación de concentraciones de las enzimas a-amilasa (0.6 mL/kg papa seca y 0. Cinética de las enzimas α-amilasa y amiloglucosidasa (AMG) en la hidrólisis enzimática de la papa. 15% y 20 %) y tiempo de reacción con la enzima amiloglucosidasa (14 h y 18 h).8mL/kg papa seca) y amiloglucosidasa (0. se inactivó la enzima y se analizaron las muestras para determinar la cantidad de azúcares reductores. 2006). . Para lograr esto. (González y Córdoba. Terminada esta etapa. Se utilizó un diseño factorial completo de 24 a dos niveles. Evaluación de las condiciones para la hidrólisis enzimática de la papa. 2006). Se compararon los valores de la variable de respuesta con el fin de encontrar las condiciones que maximizan la conversión del almidón en azúcares reductores. mediante un análisis de efectos. con una agitación de 150 r/min. IV.25 IV. concentración de sustrato (razón de sustrato seco y agua. se colocó una masa conocida del sustrato en el recipiente destinado para la hidrólisis. Al final de esta etapa se debió enfriar la mezcla hasta 60 ºC y agregar HCl hasta alcanzar un pH de 4.5 h con una agitación constante de 225 r/min.0 mL/kg papa seca).9.5.9. expresado como masa de azúcares reductores producidos por unidad de masa de sustrato. (González y Córdoba. se le adicionó cloruro de calcio (40 ppm) y se llevó a un pH de 6. según la corrida aleatorizada del diseño experimental.8 mL/kgpapa seca y 1. Con un baño térmico se elevó la temperatura de la mezcla hasta 95 ºC y se llevó a cabo el proceso de dextrinización por un período de 2.5 para desactivar la enzima.1.2. Se agregó la cantidad de amiloglucosidasa (AMG) que correspondiera según el diseño para continuar con la etapa de la sacarificación por el tiempo determinado.

la segunda es inmediata y transcurre hasta finalizar la dextrinización y la última etapa. El requerimiento de torque en la etapa de dextrinización se tomó cada 10 s. Se tomaron muestras cada 30 min para la primera enzima y cada hora durante la sacarificación para determinar el comportamiento de la cantidad producida de azúcares. (González y Córdoba.3.8 mL/kgsustrato seco. Estudio del requerimiento de torque en la hidrólisis enzimática de la papa. Se utilizaron las mejores condiciones obtenidas de la fase experimental de la hidrólisis enzimática. una relación de altura de agitador a diámetro de agitador de 0. para determinar el valor máximo y poder posteriormente utilizar esta información para el cálculo de potencia para efectos de cambio de escala. una primer etapa que inicia en el momento en que el recipiente se coloca en el baño de agua a una temperatura de 95 ºC hasta 10 min después de la adición de la enzima α-amilasa. IV.26 El objetivo de esta etapa fue realizar un seguimiento de la cinética de las dos enzimas utilizadas durante la hidrólisis de la materia prima. utilizando un agitador de hélice y se fija una relación de diámetro de agitador a diámetro de recipiente de 0. (González y Córdoba. 2006). además se realizaron mediciones de temperatura y pH. se fija la velocidad de agitación a 225 r/min. concentración de cloruro de calcio. 2006).39. en la etapa de sacarificación cada minuto. Para poder realizar esto. en la que ocurre el proceso de sacarificación. Además se utilizaron los mismos métodos para la desactivación de cada una de las enzimas. El análisis consiste en varias etapas. Para el seguimiento de la cinética de las enzimas a-amilasa y AMG.. una concentración de la enzima de α-amilasa de 0. temperatura.8 mL/kgsustrato seco. se utilizó una concentración de sustrato de 20 %.16 y una relación de altura de líquido a diámetro de recipiente de 1. un tiempo de sacarificación de 20 h y las mismas condiciones de pH. El estudio consistió en hacer un seguimiento del requerimiento de torque durante la hidrólisis de la papa. una concentración de la enzima de AMG de 0. . agitación y tiempo utilizadas previamente en la dextrinización y sacarificación. Para este estudio se realizó la hidrólisis enzimática de la papa. en un volumen de 3 L.9.

duplicado. Evaluación de las condiciones para la fermentación del sustrato hidrolizado. pero utilizando recipientes de 3. con . Este jarabe se distribuyó en erlenmeyers de 250 mL. (Araya. que funciona como una válvula reguladora de presión. se filtró el hidrolizado obtenido.00 1. expresado como la concentración de etanol (% v/v). con una cantidad de jarabe de 200 g. Cuadro 5. El sustrato se preparó hidrolizando la harina de papa de la misma manera como se preparó en el estudio de la cinética de las enzimas.2 mg/kgsustrato hidrolizado) de la fermentación. se reguló el pH a un valor de 4. 2006) La fermentación se realizó a una temperatura de 31ºC en un baño con agitación a 150 r/min. se centrifugó y se realizó la determinación del índice de refracción del destilado.00 1. NUTRIENTE Nitrato de amonio Sulfato de Magnesio Fosfato monoacido de potasio Extracto de levadura CONCENTRACIÓN(g/L) 2. cerrados. Al final de la sacarificación. Al finalizar la fermentación se inactiva el microorganismo.00 Fuente: (González y Córdoba.27 IV.5 L para hidrolizar una masa de disolución de 3000 g. 1998).9. cerevisiae (50 millones de células/mL sustrato hidrolizado y 100 millones de células/mLsustrato hidrolizado) y la ausencia o presencia de un promotor (0. utilizando cantidades semejantes a las reportadas.00 2.Concentraciones de los nutrientes a utilizar en la fermentación. que permita obtener el máximo rendimiento de etanol.4. El conteo de células se realizó con un microscopio y una cámara de Neubauer. según un diseño factorial completo 22. previa realización de una curva de calibración. El objetivo fue encontrar aquella combinación de concentración del microorganismo S.5 y se agregaron nutrientes a las concentraciones.

3) mg/kgsustrato hidrolizado.2 mg/kgsustrato hidrolizado.5. calentamiento y/o enfriamiento y un puerto para toma de muestras. 2006) IV. (González y Córdoba. el cual tiene un sistema de agitación. es determinar los diferentes parámetros cinéticos del período de fermentación. obteniéndose un volumen de filtrado aproximado de 4.6.0.9. . Para esta etapa. Al finalizar la fermentación se tomó una muestra y se analizó en el Laboratorio de Control de Calidad de la Fábrica Nacional de Licores para determinar los congenéricos mediante HPLC. Se utilizaron las mismas variables fijas mencionadas en la sección anterior y se utilizaron 50 millones células/mLsustrato hidrolizado.9. 2006). se realizaron experimentos adicionales. (2006).1. 0. el tiempo de fermentación es de 30 h y se tomaron periódicamente muestras para los análisis. a cuatro concentraciones de promotor (0. La fermentación se llevó a cabo en un reactor de 5 L. según el método IT-008. que se inoculó con una cantidad de microorganismos de 50 millones células/mLsustrato hidrolizado y una concentración de promotor de 0. IV. (González y Córdoba. Para evaluar el efecto únicamente de la concentración del promotor sobre la conversión de etanol.2 y 0. se preparó una suspensión de harina de 6 L de sustrato. Seguimiento cinético de la fermentación en un reactor de 5 litros. González y Córdoba. Al hidrolizado se le agregaron los nutrientes. Figura 3: Variación de la concentración de alcohol con el tiempo. Evaluación de la concentración del promotor en la fermentación de la papa hidrolizada. Para el seguimiento cinético se midió la concentración de etanol de azúcares reductores y la concentración de microorganismos.28 la que se interpoló de ella la concentración de etanol en porcentaje en volumen.5 L y se dividió en dos porciones para realizar por duplicado la fermentación. la cual se hidrolizó. Se utilizaron las mismas condiciones en la primera evaluación de la fermentación. El objetivo del seguimiento a mayor escala.

10. Los demás valores de las variables del proceso se mantienen constantes.El primer paso a seguir es la escogencia de las variables que puedan ser controladas durante el proceso y sus niveles mas adecuados. 1999).. (Grosz.. Diseño Factorial Completo.Se utiliza en la planeación de experimentos que produzcan una información confiable en el menor número de ensayos. Después de una búsqueda bibliográfica y ensayos preliminares se consideran las variables más influyentes como independientes. El nivel máximo se simboliza como (+) y el nivel mínimo como (-). se dan como un rango dentro del cual se determinan los niveles apropiados para el diseño. DISEÑO DE EXPERIMENTOS PARA LA HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN DE PAPA POR VÍA QUÍMICA Y PARA LA FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA. (2006) IV. La variable dependiente o respuesta se simboliza como Y. Determinación de las variables y sus niveles. El número de experimentos que se deben efectuar es 2n donde n es el número de variables independientes de dicho proceso. En el caso de que cada . 1999). (Grosz.10.29 FUENTE: González y Córdoba.2. IV. IV.1.10. Los valores mas apropiados de las variables del proceso.

Hipótesis General.1. De acuerdo a los ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles máximos (+) y mínimos (-) para la hidrólisis del almidón (Grosz. Objetivo General. V. .2. como se expone a continuación: Y1 = ( Y11 + Y12 ) 2 Y11. • • • Determinar el % de rendimiento para la hidrólisis del almidón de la papa mediante una ecuación Determinar el % de rendimiento para la fermentación alcohólica mediante un modelo matemático. Objetivo especifico. Para poder determinar la precisión de la experimentación se hace un análisis estadístico utilizando experimentos de control. Y12 = Respuesta del experimento y su replica. Obtenidos los anteriores resultados se calcula los efectos simples. OBJETIVOS DEL ESTUDIO. Con los datos del análisis estadístico se plantea el modelo matemático que describe la significación de las variables en el proceso. “Obtener alcohol a partir del almidón de la papa” V. Y1 = Promedio de la respuesta. VI. 1999). HIPÓTESIS. la respuesta Y es el promedio de las dos respuestas. VI. Determinar las características físico-químicas del alcohol proveniente de la fermentación del almidón de la papa.30 experimento se realice como replica. V..1. dobles y triples de las variables.

Variable dependiente. concentración de azucares totales y pH con estas variables y con los resultados en el laboratorio se puede hallar un modelo matemático. Variable Independiente. VI.2.3. Identificación de variables: VII.1. • La determinación de las características físico-químicas depende del etanol convertido en producto de la fermentación alcohólica del almidón de la papa.2. • El % de rendimiento para la fermentación alcohólica depende de la temperatura. Alcohol del almidón de la papa (producto) VII. Almidón de la papa (materia prima) VII. Variables Intervinientes. • El % del rendimiento de la hidrólisis del almidón de la papa esta en función de la Concentración de [HCl]. la Concentración de Almidón y Tiempo de hidrólisis con estas variables y con los resultados en el laboratorio se pueden hallar dicha ecuación. . -Tiempo de hidrólisis. VII. Hipótesis especifico.31 La obtención de alcohol por el proceso semicontinuo hidrólisisfermentación depende del almidón de la papa para la hidrólisis y del tipo de microorganismo para la fermentación (Saccharomyces cerevisiae) y de las condiciones de operación del bioreactor.

3. 1.2 Rendimiento de la hidrólisis del almidón 1. UTILIDAD DE LOS RESULTADOS DE ESTUDIO.Temperatura . Densidad 1. g/ml. pH.Cantidad de calor en la fermentación alcohólica 3.1. pH .1.4. -pH. Grado Alcohólico.ºC (Vit) Concentración de azucares totales (Vit) pH 1. 1.1.2.Cantidad de tiempo para la hidrólisis 2.3.32 -Temperatura -Concentración de azucares totales -El pH. cenizas. . proteína. Papas andinas 2. grasa.% acidez VIII. Recurso Agrícola 2.Caracterización Físico y química del alcohol obtenido 1.Caracterización Química del almidón de la papa Variables dependientes (vd) Alcohol Etílico ÍNDICES 1.ºBrix 1.Contenido Humedad. VARIABLES Variable Independiente (Vi) Almidón de la papa INDICADORES 1. Tiempo .Cantidad de azucares totales Acidez del fermento 1. Rendimiento de la fermentación alcohólica -ºGL. % Variables Intervinientes (Vit) Tiempo 1. fibra y carbohidratos VALORACIÓN Kg % % 2. Concentración .1.4. Cuadro 6: Operacionalización De Variables.Horas (Vit) Temperatura 1.2.

Tipo de estudio. Material Experimental Y Equipos. en su consumo. Tamiz de 0.1mm. a. menos contaminante para el medio ambiente y traerá beneficios en el comercio. IX.2. IX. METODOLOGIA.33 -Los resultados del trabajo de investigación sirven para que tenga como referencia para la potencial industrialización del almidón de la papa y sobre la obtención de nuevas fuentes de energía. iniciador. La levadura para iniciar la fermentación alcohólica es el Saccharomyces cerevisiae. Investigación aplicada basada en principios científicos tecnógicos. Materia prima En esta investigación se utilizara el almidón de la papa (solanum tuberosum) como materia prima la cual será adquirida en el mercado de puno. IX. Recipientes. Material de laboratorio. b. .1. • • • • • • • Vaso de precipitados de 500ml. Durante el proceso de obtención del alcohol. Matraz de erlenmeyer. -Además el alcohol obtenido apartir de la fermentación del almidón de la papa se podrá utilizar como disolventes y/o como insumo Alcohol Etílico para la industria ya que el alcohol etílico es menos dañino para la salud. c. Pipetas Termómetro Papel filtro.

La extracción del almidón de la papa se realizó de acuerdo a los siguientes pasos: A. 2005). Segundo: pelado.1. Primero: Lavado. Tercero: licuado. Cuarto: sedimentado.1. • Refractómetro (0-32ºBrix). A. de 10 litros de capacidad semi-industrial (construido de acero inoxidable) de la FIQ-UNA Puno. se realiza a mano. (LEON.3. Se hace pasar la papa sin cáscara por un extractor de jugos.5. PROCEDIMIENTO. Agua destilada.3. consistió en decantar la lechada que sale del tamiz para separar los gránulos del agua A. A. Instrumentos y equipos de laboratorio • Autoclave. temperatura 120°C y a una presión de 15 psi.2. con el fin de extraerle todo el jugo que tiene la biomasa de la papa A. • Balanza Analítica.4. .34 d. con el fin de retirar tierra y otras impurezas que trae la papa. IX. e. REACTIVOS QUIMICOS: • • Acido clorhídrico. • Potenciometro (pH) • Alcoholímetro de laboratorio de 0-35 ºGL. AISLAMIENTO DEL ALMIDÓN DE LA PAPA. teniendo el cuidado de no retirar también parte del tubérculo con la cáscara. Tanto el almidón como la fibra se secan en una estufa a 60ºC de temperatura y durante 24 horas. • Fermentador • Destilador. IX.3. Quinto: el Secado. • Estufa (0-60ºC).

FUENTE: Vargas Y Condori. Los pasos que se siguen en la Hidrólisis de almidón por vía química son los siguientes: Se pesa una cantidad de almidón para un volumen de 800mL y para una concentración dada de ácido en un erlenmeyer de 1L que fue llevado al autoclave x . Se realizó Hidrólisis Acida. Temperatura. Los experimentos de producción de etanol en el Bioreactor están planteados de acuerdo a un diseño factorial de experimentos que permite el análisis estadístico de los resultados (LEON.3.2. durante 30 minutos a una temperatura de 120°C. Con el almidón hidrolizado se obtienen azúcares fermentables mediante rompimiento de las cadenas de glucosa. controlando la temperatura de reacción.3. IX. presión de reacción. (2000) . Ambas etapas. HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN DE PAPA. Figura 4: Reactor De Tanque Agitado. (LEON.35 IX. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA.3. concentración del ácido y del almidón. 2005). Tiempos de hidrólisis y de fermentación y Concentración de sustratos. hidrólisis y fermentación anaeróbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando las variables de pH. condiciones de 15 psi. terminada la hidrólisis se filtra al vacío y luego se determina la cantidad de azúcar obtenida. Agitación. 2005).

Ácido clorhidrico. Fermentación. Etanol.4. Propiedades físicas organolépticas: • • • Color Olor Sabor IX. El almidón de la papa tiene las siguientes propiedades. Materia prima papa. METODO DE ANALISIS. IX. Destilación. Almidón.co Reactor Fermentador. Análisis De La Composición Química Del Almidón Extraído • Contenido de humedad. Control y análisis de la materia prima.36 Figura 5: Diagrama de flujo en la obtención de alcohol del almidón de la papa. método gravimetrito.4. Licuefacción.4. . Hidrólisis.2. IX.1. Saccharomyces Cerviciae.

342 g peso de una unidad monomérica de almidón. Análisis fisicoquímico de la fermentación alcohólica. Se obtiene mediante la relación del Azúcar Teóricamente esperado con respecto al valor leído experimentalmente de acuerdo a la siguiente relación: (Grosz. método refractometrico (ºBrix).gramos .almidón * 0.glu cos a * X .5. por el método de Kjeldalh.Teórico 342 .4.0. según las lecturas de absorbancias del complejo coloreado de yoduro-yodato más almidón a 640 nm contra una curva de calibración.de . Almidón en el medio.almidón Donde: .9 = Azúcar .de .9 es la fracción que indica que el 90% del almidón hidrolizan a azúcar.Acido Sulfúrico. método del alcoholímetro para determinar el grado alcohólico. IX.de . Los Azúcares Totales según muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Fenol . 1999) Y = 360 g . . % Re n dim iento = Azucar exp erimental *100 Azucarteor ica . pH medido con el potenciómetro. Determinación del El Porcentaje de Rendimiento de la Hidrólisis. se mide utilizando el picnómetro. • • • • Sólidos solubles. IX.37 • • • Nitrógeno y proteína en la biomasa. Carbohidratos Totales.360 g de glucosa corresponden al peso de dos moléculas de glucosa que se hidrolizan de una unidad monomérica (maltosa) del almidón.3.g . Grado alcohólico. tomando un 10% en pérdida por almidón que no se alcanza a hidrolizar. . Densidad.

Determinación del El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentación Alcohólica.6.m altosa * 500 0.solución L * 184 . Manteniendo constante la temperatura de 120°C. El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentación Alcohólica se obtiene mediante la relación entre la cantidad real de alcohol producido y la esperada teóricamente en base a la concentración de azúcar de la solución a fermentar. 500 es el volumen en mL medido para cada fermentación.79 En donde: Y = mL de alcohol teórico.de .m altosa 100 . la presión de 15 psi y el volumen de hidrólisis de 800 mL.79 es la densidad del etanol en g/mL.7. (1999). . Diseño De Experimentos para la Hidrólisis del Almidón de papa.de .g . 360 es el peso de una molécula de maltosa equivalente a dos de glucosa. (Grosz. maltosa. 0. 184 es el peso de 4 moléculas de alcohol etílico que por fermentación se producen a partir de una molécula de maltosa o dos de glucosa. exp erimental * 100 Alcohol . 1999) Alcohol . Se realizan tres experimentos de Control (simbolizados como “0” en la matriz del diseño) que no son más que tres replicas con valores de variable intermedio de a los valores superior e inferior como lo muestra la matriz del diseño con el fin de evaluar el límite de confiabilidad de los experimentos de la matriz de diseño factorial e identificar los efectos significativos de la acción de las variables en forma individual o conjunta. Se expresa en porcentaje entre el volumen de alcohol determinado y el volumen esperado teóricamente.g . De acuerdo a referencias bibliograficas y ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles máximos (+) y mínimos (-).m .38 IX.alcohol 360 . el volumen de alcohol esperado teóricamente será: Y = X . Si se trata de X gramos de azúcar.de .g . Grosz.de .Teórico % Re n dim iento = IX.

10 0.075 Variables Concentración de Almidón 6 6 18 18 6 6 18 18 12 12 12 N=23=8 Tiempo de hidrólisis 10 10 10 10 30 30 30 30 20 20 20 Fuente: Elaboración propia IX. MODELO MATEMATICO PARA LA HIDROLIZIS DEL ALMIDÓN.10 0.) Niveles Inferior 0.075 0.05 0.2.10 18 30 Fuente: Elaboración propia Donde: N=2n CUADRO 8: Matriz de Diseño (2n) para la Hidrólisis del Almidón de la papa.1. Variables Z1: Concentración de [HCl] Z2: Concentración del Almidón [AL] Z3: Tiempo de hidrólisis Unidad (N:mol/L) (%) (min.7. OPTIMIZACIÓN DE LAS VARIABLES DE PROCESO.05 0.025 .05 0.05 6 10 Superior 0.39 IX.10 0.10 0.075 0. % Re n dim iento = a 0 + ∑a 0 x1 + ∑a 2 x1 x 2 + ∑a3 x1 x 3 + ∑a 4 x1 x 2 x 3 x1 = HCl − 0. Codificación ºN de Experimentos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Z1 -1 +1 -1 +1 -1 +1 -1 +1 0 0 0 Z2 -1 -1 +1 +1 -1 -1 +1 +1 0 0 0 Z3 -1 -1 -1 -1 +1 +1 +1 +1 0 0 0 Concentració n de [HCl] 0.075 0.05 0. CUADRO 7: Niveles de variables a investigar.7.

Para la fermentación de los hidrolizados de almidón a alcohol por parte del Saccharomices cerevisiae fueron: La Temperatura (nivel superior 37°C.0. el pH (nivel superior 6. IX. la concentración de sales. y el tiempo de la hidrólisis (96 horas). Variables C1: Temperatura C2: Azucares totales C3: pH Unidad (ºC) (%) Mol/l H+ Niveles Inferior Superior 25 6 4 37 12 6 Fuente: Elaboración propia Donde: N=2n N=23 N=8 CUADRO 10: Matriz de Diseño para la fermentación Alcohólica.8. Codificación ºN de Experimentos 1 2 C1 -1 +1 C2 -1 -1 C3 -1 -1 Variables Azucares Temperatura totales 25 37 6 6 pH 4 4 . nivel inferior 6%).1. y la concentración de azúcares reductores totales (nivel superior 12%. Diseño De Experimentos para La Fermentación Alcohólica. nivel inferior 4. CUADRO 9: Niveles de variables a investigar. Manteniendo constante la concentración del inoculo.40 x2 = A −12 6 t − 20 10 x3 = IX. flujo de aire.0. nivel inferior 25°C).8. OPTIMIZACIÓN DE LAS VARIABLES DE PROCESO. mediante buffers).

8.1. . RECURSOS. Nombre Higinio Zúñiga Laboratorista Función Tutor Asistente Dedicación semanal 20 30 Pago Mensual ($) 300 350 Total ($) 1750 1600 3350 XI. XI. XI. bioquímica y análisis instrumental de la facultad de ingeniería química. % Re n dim iento = b0 + ∑b1 X 1 + ∑b2 X 1 X 2 + ∑b3 X 1 X 3 + ∑b4 X 1 X 2 X 3 X1 = T − 31 6 X2 = AZU − 9 3 pH − 5 1 X3 = X. Modelo Matemático para la fermentación Alcohólica.2.2. RECURSOS MATERIALES.41 3 4 5 6 7 8 9 10 11 -1 +1 -1 +1 -1 +1 0 0 0 +1 +1 -1 -1 +1 +1 0 0 0 -1 -1 +1 +1 +1 +1 0 0 0 25 37 25 37 25 37 31 31 31 12 12 6 6 12 12 9 9 9 4 4 6 6 6 6 5 5 5 Fuente: Elaboración propia IX. El presente trabajo de investigación se ejecutara en los laboratorios de procesos. ÁMBITO DE ESTUDIO. RECURSOS HUMANOS.

42 Descripción Precio Unitario Unidad Cantidad Total ($) Infraestructura.5 mL mL mL mL 10 1000 10 10 2 1 1. Refractómetro Potenciómetro Alcoholímetro Picnómetro 80 80 50 30 Un Un Un Un 1 1 1 1 80 80 50 30 240 Tratamiento de la materia prima y obtención del almidón. 9 3. Estufa 20 50 10 50 30 Un Un Un Un Un 1 1 1 1 1 20 50 10 50 30 160 Material de Análisis. Lavado Pelado 5 10 Un Un 1 1 5 10 .35 Kg. Autoclave Bioreactor Balanza Analítica Destilador.5 3. papa 0. Laboratorio 200 Un Un 150 150 Materia prima.15 Reactivos Químicos: Acido clorhídrico Agua destilada Acido Sulfúrico Ioduro de potasio 2 1 1.5 8 Material De Laboratorio.5 3.15 3.

Reactivos químicos. Material de análisis. 3.365 663. PRESUPUESTO DEDL PROYECTO.3 $ 150 3. Tratamiento de la M. Papel bond Impresión Empastado Copias de tesis 1 5 3 4 millón Un Un Un 1 4 3 3 1 20 9 12 42 X. Código A1 A2 A3 A4 A5 Descripción Revisión bibliografica Formulación del marco teórico Adquisición de equipos y materiales Implementación del laboratorio Revisión de estrategia experimental Duración (semanas) 2 1 1 1 1 .43 Licuado sedimentado secado 15 5 25 Un Un Un 1 1 1 15 5 25 60 Servicio de cómputo.P. Materia prima. TOTAL Tipo de cambio 1$ = S/.15 8.3. y obtención del almidón. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.5 160 240 60 42 66. RUBRO Infraestructura. Servicio de cómputo. Imprevistos (10%).65 XI. Material del laboratorio.

(1998). 2005.gov. Microbiol. Tesis de Licenciatura para la obtención del título de Licenciado en Ingeniería Química. Direct Fermentation of Potato Starch to Ethanol by Cocultures of Aspergillus niger and Saccharomyces cerevisiae. Afanador. (1986).co/revistas/recolqui/972602/972602abs. 6(10).44 A6 A7 A8 Ordenamiento de resultados Análisis de los resultados Redacción del informe final 1 1 2 Código Actividad Semanas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 XII. Extraído el 18 de Agosto de 2007 desde http://www. BIBLIOGRAFÍA. 1055-1059.html Araya.. 20-25. Universidad de Costa Rica. Alonzo. 52(5). M. Diseño y puesta en marcha de un "sistema semicontinuo en dos etapas: hidrólisis . El Banano verde en la producción de etanol. R. M. 31 de Agosto). Boletín de la Papa. (2006.icfes. Escuela de Ingeniería Química.fermentación" para la producción de etanol a partir de almidón de papa. 51-68. M. . Biol Waste. San José. Determinación de la concentración de nutrientes necesaria para mejorar el rendimiento del proceso fermentativo de la Fábrica Nacional de Licores. Costa Rica. Environ. A. Abouzied. 557(3).

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