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alcohol de papa

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1 “OBTENCIÓN DE ALCOHOL APARTIR DEL ALMIDÓN DE LA PAPA” I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

Hoy en día existe un grave problema ambiental “el smoke y la contaminación”, han producido daños a la capa de ozono Debido principalmente al uso intensivo (80%) de combustibles fósiles (carbón, petróleo, gas natural) en actividades industriales y el transporte se ha producido un excesivo aumento en las cantidades de óxidos de nitrógeno y dióxido de carbono emitidas a la atmósfera Además del incremento de las emisiones existen otros problemas como la deforestación (20%), que han limitado la capacidad regenerativa de la atmósfera para eliminar el dióxido de carbono, principal responsable del “Efecto Invernadero”.Por lo tanto se busca la utilización de otras fuentes de energía renovables como los Biocombustibles hacen parte de la solución para disminuir las emisiones de gases contaminantes, actualmente se esta produciendo alcohol de la caña de azúcar pero recientes estudios han determinado que el bagazo de la caña de azúcar tiene alto contenido de contaminantes entre ellos tenemos al “bagazosis” que es una enfermedad que se presenta en trabajadores expuestos a la inhalación de polvos de bagazo de caña enmohecido que forma parte de un conjunto de enfermedades de características clínicas, inmunológicas e histopatológicas semejantes, denominado alveolitis alérgica extrínseca, pero el término correcto es el de neumonitis por hipersensibilidad ya que la respuesta inmunopatológica se localiza en la porción distal del árbol respiratorio y abarca desde el bronquiolo terminal respiratorio, hasta los alvéolos y los capilares pulmonares, también afecta a los ojos ya que las partículas de hollín de tamaño igual o menor a 10 micrones, se incrustan en las corneas .Recientemente la OMS, anuncio que el 40% de pobladores mueren por causa del bagazosis y que el otro 60 % sufren de afecciones respiratorias los mas afectados son los niños debido que están el mayor tiempo en contacto con la naturaleza, no solo esto en cada inicio de zafra para los pobladores se hace insoportable convivir con la gran cantidad de hollín y humo que emanan las chimeneas de caña de azúcar dañando el patrimonio natural y cultural. Ante es problemática existe como alternativa la obtención de alcohol a partir de otra materia prima que no sea tan perjudicial

2 como es el almidón de la papa para producir alcohol anhidro para aditivo de combustible y para carburantes; también se puede producir en gran escala alcohol para el consumo humano (vodka). I.1. Interrogantes De La Investigación: I.1.1 ¿Cuál es el proceso de obtención de alcohol apartir del almidón de la papa? I.1.2. ¿Qué parámetros fisicoquímicos se controlara en la obtención de alcohol del almidón de la papa? I.1.3. ¿Cuál será el rendimiento de alcohol que se obtendrá del almidón de la papa? I.1.4 ¿Cuál es el grado alcohólico del alcohol obtenido del almidón de la papa? II. ANTECEDENTES: GULATI et al., (1996), Investigarón sobre “Maíz como materia prima en una planta productora de alcohol etílico”, Par la hidrólisis del almidón se usa la

α -amilasa obtenida de bacterias termo resistentes Bacillus licheniformis
tiene que ser llevada a altas temperaturas (90-100ºC) para el rompimiento de los gránulos del almidón, el almidón licuado se somete a sacarificación a menores temperaturas (60-70ºC) con glucoamilasa con Aspergillus Níger la cual hidroliza las dextrinas hasta glucosa. NETWORK, W. (2002), Investigo sobre “La producción de etanol usando mezclas de jugo de sorgo dulce”, granos de alto contenido de almidón, tallos con alto contenido de sacarosa y hojas y bagazo con alto contenido de lignocelulosa bajo condiciones normales y de muy alta concentración de sólidos (VHG), usando cepas de Saccharomyces cerevisiae a 30°C obteniendo concentraciones de etanol de hasta 16,8%v/v El objetivo de este trabajo fue determinar las condiciones para obtener durante la germinación. el mejor grado de hidrólisis del almidón del grano, usando las propias enzimas que se generan

3 AFANADOR, A. (2005) Investigo sobre “El Banano verde en la producción de etanol” el banano verde con cáscara tiene alto contenido de almidón y celulosa, se le considera como una materia prima potencial para la industria del bioetanol., la producción de alcohol a partir de almidones y celulosa con procesos químicos o biológicos (hidrólisis) para su conversión a jarabes azucarados, que una vez acondicionados se someten a la acción de levaduras que efectúan la fermentación alcohólica. El etanol resultante se lleva a procesos de destilación y deshidratación hasta obtener alcohol anhidro (99,5% v/v). LOZANO U. Á. (2003) Investigo sobre “Producción de etanol a partir de yuca mediante bioreactor de tanque agitado con control de variables” Se obtiene del almidón aislado de la yuca raíz sin cáscara, dicho almidón (polisacárido de glucosa) se somete a hidrólisis química, de tal forma que se produzcan azúcares fermentables, que son sometidos a una fermentación anaeróbica por la levadura Saccharomyces cerevisiae obteniendo una solución etanólica. Ambas etapas, hidrólisis y fermentación anaeróbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando variables de pH, Temperatura, Agitación, Tiempos de hidrólisis y de fermentación y Concentración de sustratos. SUNG Y CHENG J, (2002) Investigarón sobre, “Producción de alcohol a partir del trigo”. La que usualmente se utiliza en la producción de alcohol, llamada Zymomonas mobilis, obtiene excelentes resultados pero sólo a partir de la celulosa de los palos de trigo se podría hacer alcohol donde se logra rendimientos que alcanzan0.357 Etanol/kg de trigo mediante el proceso Biostill. CHAVES, S. M. (2004), Investigo sobre “Alcohol apartir de la caña de azúcar”, para la producción de etanol la principal materia prima es el jugo de caña o las melazas (subproducto de la industria azucarera) .Se puede obtener cerca de 70L EtOH/ton de caña y 9L EtOH/ton de melazas .El microorganismo mas utilizado es el Saccharomyces cerevisiae por su capacidad de hidrolizar la sacarosa de la caña de azúcar para su conversión

4 hasta glucosa y fructuosa se puede dar en condiciones anaeróbicas en pequeñas cantidades de O2. LYND, LR (2002), Investigo sobre “Alcohol apartir de Biomasa

Lignocelulósica”, los materiales que mas se han investigado son residuos forestales, de la industria papelera y residuos de sólidos urbanos. El complejo Lignocelulósico esta compuesto de una matriz de carbohidratos de celulosa y lignina enlazada por cadenas de hemicelulosa el pretratamiento tiene que desintegrar esta matriz par que la celulosa redusca su grado de cristalinidad y aumente la célula amorfa que es la que se requiere para el posterior ataque enzimático con células hexogenas la cual hace que se de una solución de glucosa que después hará que se convierta en EtOH mediante microorganismos. III. JUSTIFICACIÓN: III.1. JUSTIFICACIÓN TEORICA: El Etanol en mezcla con la Gasolina reduce las Emisiones de Monóxido de carbono (CO), sin incrementar la de Óxidos Nitrosos (N0x) ya que de acuerdo con la Asociación de Recursos Renovables de Canadá, el agregado de un 10% de etanol al combustible trae los siguientes beneficios: reducción de un 30% de las emisiones de monóxido de carbono y disminución entre un 6% y un 10% de reducción de las emisiones de dióxido de carbono a la atmósfera. III.2. JUSTIFICACIÓN TECNICA: En nuestro país la producción de papa se realiza en 6 meses con un promedio de 176.200 Ha, si consideramos el porcentaje de desperdicios del 3% por falta de transporte, almacenamiento y conservación tendríamos alrededor de 79.800 Toneladas de papa residual al año que podría ser utilizada en la producción de almidón, que sería de aproximadamente 15.960 Toneladas, que por hidrólisis enzimática se obtendría 15.162 Toneladas de azúcares fermentables y que por fermentación es posible producir alrededor de 50 millones de litros de alcohol. Una temprana experiencia de producción de vodka, con la cooperación de la República de Polonia, en el sur chico peruano, no prosperó por que la variedad de papa

1. dando cuenta que este proceso no sólo ampliaría la producción industrial del energético sino que propone la exploración de otros mercados y la dinamización de la economía nacional. también se indicó que de los sobrantes de papa generados en el proceso de extracción de etanol carburante se podrían obtener subproductos de ágil comercialización como alimentos para ganadería y abonos orgánicos.s. así en la alimentación humana el producto se consume fresco o procesado.5 utilizada tenía un alto contenido de agua.1. La fibra alimentaría representa 1-2% del total de .m. solo 18 % de materia seca. amarillas e industriales.1. Dentro de los componentes nutritivos el que se encuentra en mayoría es el agua que constituye en torno al 80% del total. JUSTIFICACIÓN SOCIAL: Dentro de éste contexto se sitúa la presente investigación que se inclina al aprovechamiento del recurso agrícola. la glucosa y los preparados crudos de amilasas como resultado los mayores beneficiarios serian los pequeños productores de papa. PAPA. III.3. Aspectos Generales. Actualmente contamos con variedades nativas y modernas por su origen.n. MARCO TEORICO: IV. variedades de mayor calidad se producen sobre los 3. Por su color son blancas y de color y por el uso son amargas.000 m. como fuente energética en la producción de etanol y el aprovechamiento de los productos intermedios del bioproceso como son la proteína unicelular. Le siguen los carbohidratos que constituyen el 16-20% entre los que hay que destacar el grupo de los almidones que son polisacáridos complejos que se absorben como glucosa previa hidrólisis enzimática. Los tubérculos de papa tienen diversos usos. Esta papa "aguachenta" es típica de la producción costera. IV. y la variedad requerida para la producción de papa exige sólo un 25% de materia seca. almidón de papa. IV. Requejo y Ortega (1996). Pero en nuestros andes tenemos variedades de papas con más del 30% de materia seca. En el Perú se encuentran alrededor de 2000.

44 . (1997) IV.48 0.7 2 Media 3-10(mg/100gr) 0.6 1. 1996) IV.05 23.3.54 mg/100gr 75.6 0.02 . Género: Solanum Especie: Solanum tuberosum Familia: Solanáceas.20 0. Extendida a todo el mundo (Requejo y Ortega.0 13.4.1.53 0. Ubicación Taxonómica.9 0.1. fructosa y sacarosa.0.17 . IV. siendo los más importantes la glucosa. Cuadro 1: Principales componentes de la papa.3 . Composición química de la papa.0 . Distribución: Costa y sierra peruanas.6 la papa y se encuentra preferentemente en la piel. rango y media. .9 13.9 1 .4 . Componentes Agua Sólidos totales Proteína (Nitrógeno total + 6.86.5.1 10-25(mg/100gr) Fuente: Mataix. ALMIDÓN.0 0.2.2 .1.7 .3 21.36. (materia prima).30.71 0.2 – 41 0.12 0.1 .2.1. Origen: Nativa de los Andes y cultivada desde la época prehispánica.3.25) Glicoalcaloides (Solanina) Grasa Azúcares reductores Total Carbohidratos Fibra Cruda Ácidos Orgánicos Ceniza Vitamina C Rango % 63.8 0.

centeno (Secale cereale). IV. IV. en agua caliente se hincha formando engrudo. se torna de azul a azul violeta con sol. . avena (Avena sativa). maíz (Sea mays). Probablemente no existe otro compuesto orgánico tan ampliamente distribuido en los vegetales como el almidón. Es el producto de asimilación más importante de la fotosíntesis y constituye la principal sustancia de reserva de los vegetales. forma. 2150 u). etc. CARACTERÍSTICA Y PROPIEDADES. la diferencia entre harina y almidón de papa es la papa entera que se le ha quitado el agua y se ha molido para obtener la harina.2. insípido. por ejemplo al pasar la papa por un extractor de jugos sale un jugo con un residuo lechoso ese residido lechoso es el almidón el cual debe sufrir varios lavados para eliminar los contaminantes y obtener un almidón blanco. hilio o núcleo. estratificaciones. granos simples o compuestos y aspectos a la luz polarizada. El almidón se obtiene después de romper el tejido. Se presenta como polvo blanco fino. Martínez.7 Espinosa (2004).2.2. Espinosa (2004). arroz (Oryza sativa). Químicamente el almidón o fécula es un polisacárido homogéneo que esta formado por una mezcla de dos polisacáridos estructuralmente diferentes: amilosa y amilo pectina. da glucosa como producto final de la hidrolisis total. cebada (Hordeum vulgare)  Leguminosas (legumbres): porotos (Phaseolusvulgaris). El almidón es insoluble en agua fría.  Solanáceas: papas (Solanum tuberosum). Para su caracterización se toma en cuenta: tamaño (aprox. lentejas (Lens sculenta). El almidón se encuentra en abundancia en:  Graminneas (cereales): trigo (Triticum sativum).1. ESTRUCTURA DEL ALMIDÓN. (2006). Industrialmente se le obtiene por vía húmeda a partir de ellos. constituido por granos característicos microscópicamente para cada especie. arvejas (Pisum sativum).

la cual.4. Al tratar el almidón con agua caliente. o Amilosa.8 Como primera aproximación. Amilosa es una molécula lineal compuesta por 250 a 300 unidades de  a -D-glucopiranosa enlazadas por uniones 1-4 (Martínez. se puede decir que el almidón está constituido por unidades de D(+)-glucosa enlazadas α-1. que se conoce como amilopectina. Nuestras enzimas hidrolizan los almidones hasta sus unidades constituyentes de glucosa. este se separa en dos fracciones: una dispersable. que es la mayoritaria. como ya hemos expresado. 2006) Figura 1: Estructura de la amilosa CH2OH O HO O CH2OH O HO OH O CH2OH HO OH O O OH O o Amilopectina. sirve a nuestro organismo de nutriente y es utilizada para diferentes transformaciones metabólicas. Amilosa 20 % Amilopectina 80 % H2O Almidón Δ Los dos constituyentes del almidón difieren en diversos aspectos y por tanto los consideramos por separado. que se conoce como amilosa y otra no dispersable. Está también constituido por unidades de D (+)-glucosa. con enlaces .

2.4. Composición del almidón de papa.07% FUENTE: Martínez. O O HO OH HO CH2OH O CH2OH O OH O O H2C HO OH O HO OH O CH2OH O O IV. que se conocen como “Dextrinas” que se utilizan en el acabado de tejidos y en la fabricación de pegamentos.30% 0. 2006) Figura.9 α-1.09% 0. Cuadro 2. (Martínez.6 en los puntos de ramificación.02% 0.2 Estructura de la amilopectina. Componentes Almidón Agua Ceniza Arena Proteína Fósforo. etc. (2006) . pero las cadenas son de 1000 unidades o más y presentan ramificaciones cada 25 unidades α-1. de masa moleculares gradualmente menores. La hidrólisis de la amilopectina van produciendo mezclas de Oligosacáridos. P Análisis típico el 80% el 20% 0.3.

Se le denomina también Alcohol etílico cuya molécula tiene dos átomos de carbono.1. remolacha. papa. 1991).3. y tiene muchas aplicaciones industriales. Se obtiene por destilación de productos de fermentación de sustancias azucaradas o feculentas. Se .5 mg de acetato de etilo Máximo 1 mg Fuente: Normas y Tecnología (Ward.8120 a 20ºC 1 mg/100 alcohol a 1000 ºGL Máximo 1 .8 mg de ácido acético Máximo 6. que arde fácilmente dando llama azulada y poco luminosa..10 IV. Para bebidas alcohólicas. disolvente.2.3. IV. CARACTERISTICAS DEL ALCOHOL ETILICO. Su fórmula química es CH3-CH20H. IV. anticongelante y como producto químico. como vino. Es un líquido incoloro. APLICACIONES Y USOS. cerveza. agente extractivo. como uva. en laboratorios y en el hogar. Cualquiera que sea su método de preparación. Grado alcolhólico volumétrico Densidad relativa máxima Residuo no volátil máximo Acidez para 100 ml de alcohol a 100 ºGL Esteres por 100 ml de alcohol a 100 ºGL Aldehídos por 100 ml de alcohol a 100 ºGL 96° GL a 20°C 0. Forma parte de muchas bebidas. primero se obtiene alcohol etílico mezclado con agua. y luego se concentra esta mezcla por destilación fraccionada. de sabor urente y olor fuerte. El alcohol etílico rectificado deberá tener las siguientes características: CUADRO 3. (Ward.3. etc. Etanol (Producto). aguardiente. 1991). prácticamente todo el alcohol etílico que se consume es una mezcla de 95% de alcohol y 5% de agua. melaza. El alcohol etílico es uno de los compuestos orgánicos usados en la industria. ya que se utiliza como combustible. Actualmente tiene una extraordinaria importancia comercial e industrial.

productos medicinales. lacas. cosméticos. etc. dextrina. jabones. Otros complejos enzimáticos intervienen cuando se degradan otros tipos de azucares: • • • Pentosas como la xilosa y arabinosa.4. di o tri Sacáridos. PROCESOS DE OBTENCIÓN DE ALCOHOL. Polisacáridos como el almidón. como productos de uso doméstico. películas fotograficas. licores. barnices. lo que muestra que la fermentación incluye otras reacciones secundarías.4. IV.1. como combustible. • Uso Domestico: Es ampliamente utilizado por los pobladores como desinfectante. IV. (Ward. Disacáridos como la sacarosa y maltosa que son fermentadas por Saccharomyces. Uso Comercial: El alcohol es actualmente un producto en potencia como energía convencional y de aceptación en el uso de combustible para automóviles.11 utiliza en las industrias de perfume. celulosa y otros. La industria de las fermentaciones utiliza como fuente de origen para el proceso a casi todas las materias primas que poseen carbohidratos en su constitución (Silva. azúcares fermentables. 2000) . podrán ser fermentados siempre que se hidrolice previamente en mono. que producen alcohol por acción de algunas levaduras del género Torula. pinturas. Es un proceso bioquímico mediante el cual ciertos microorganismos metabolizan las moléculas de azúcar produciendo etanol y CO2. • • Uso Industrial: Es ampliamente utilizado para la elaboración de licores. en curaciones y como fuente de energía calorífica. PROCESOS FERMENTATIVOS. La fermentación es llevada a cabo generalmente por levaduras del género Saccharomyces realizándose por acción de un complejo enzimático llamado enzimático que permite transformar las hexosas en alcohol y C02. También se producen glicerol y ácido succínico. 1991).

. hongos. fósforo.o .Los microorganismos son: Bacterias. levaduras. . viscosidad. La fermentación Aeróbica. En general las fermentaciones aeróbicas pueden representar de la siguiente manera: m. sodio. 1995). oxigeno disuelto y la segunda es un proceso en el cual no necesita oxígeno. (Jorgensen. hidrógeno azufre.Los nutrientes son: Carbono.4. IV.Las condiciones adecuadas para su desarrollo son: pH. 1980). Es el proceso donde se suministra oxígeno al sistema y se desprende CO2. a) . tejido celular. que establecieron el desdoblamiento de los azucares por la ecuación química siguiente: C12H22011 + H2O C6H12O6 + 6 O2 C6H12O6 C2 H5OH + 3 O2 2 (C6H12O6) x 6 CO2 + 6 H2O 6 C2 H5OH + 2 CO2 2 CO2 + 3 H2O Metabolismo oxidativo (formación de Biomasa) Metabolismo fermentativo (formación del alcohol) Metabolismo oxidativo del etanol (formación de biomasa) En la práctica se comprueba que el metabolismo de la glucosa es mucho más compleja.2. ya que según las cantidades ambientales. el metabolismo puede ser parcialmente fermentativo o parcialmente oxidativo (BRUSHMAN. luego Gay-Lussac en 1820 y corregida por Dumas en 1840. temperatura.12 Una de las formas de obtener alcohol etílico es mediante la fermentación de mostos azucarados de acuerdo a 1a ecuación establecida primero por Lavoisier1787. o + Elementos Nutrientes + O2 C02 + Productos + m. magnesia. . Clasificación de acuerdo al medio donde se desarrollan.

3. además del dióxido de carbono. El almidón licuado se somete a sacarificación a menores temperaturas (60-70 ºC) con glucoamilasa obtenida de Aspergillus niger o de especies de Rhizopus la cual hidroliza las dextrinas hasta glucosa. Es un proceso en el cual no se necesita oxígeno. pero la especificidad de las enzimas. el lugar que ocupa el oxigeno atmosférico es reemplazado por sustancias inorgánicas oxigenadas. Por ello. Alcohol A Partir Del Almidón De La Papa. Para obtener etanol a partir de almidón es necesario romper las cadenas de este polisacárido para obtener jarabe de glucosa. De cada 100g de almidón se pueden obtener teóricamente 111g de glucosa. sus condiciones suaves de reacción y la ausencia de reacciones secundarias han hecho que las amilasas sean los catalizadores usados para esta tarea.13 b) La fermentación Anaeróbica. el cual se puede convertir en EtOH mediante las levaduras. 1995). 1995) IV. en muchas formas de vida se detiene el mecanismo celular de respiración aeróbica. provocando su muerte. pero en otras. condición necesaria para el tratamiento enzimático. En ella. en la anaeróbica no existe un solo grupo de reacciones químicas que la describan.4. ni siempre se obtienen los mismos productos finales. suelen ser sustancias inorgánicas. El almidón fue tradicionalmente hidrolizado mediante ácidos. . lo que implica una relación estequiométrica de 9:10. (Nigam y Singh. degradación) de este biopolímero. Para la primera etapa de la hidrólisis de las suspensiones de almidón que tienen que ser llevadas a altas temperaturas (90-110 ºC) para el rompimiento de los gránulos de almidón. en tanto que los productos formados. se debe incluir una etapa adicional de hidrólisis (rompimiento. como los sulfatos y nitratos. Cuando no hay oxígeno. el proceso se realiza por medio de un mecanismo al que los científicos bautizaron como respiración anaeróbica. A diferencia de la respiración aeróbica. como en ciertas bacterias. (Jorgensen. El producto de esta etapa o licuefacción es una solución de almidón que contiene dextrinas (oligosacáridos compuestos por varias unidades de glucosa) y pequeñas cantidades de glucosa. en vez de agua.

Nutrientes. (Nigam y Singh. papa dulce. Se requieren también de oligo elementos o activadores de enzima. IV. .5 litros de agua y se pasan por un tamiz. a medida que progresa la sacarificación. azufre. peptonas.4. Las Levaduras necesitan una fuente de carbono. Se debe hacer notar que para el caso de las levaduras el fósforo es esencial para su metabolismo. se enfría a 30 ºC y se procede a introducir en un frasco o recipiente de 3 litros. IV. magnesio. Se corta en lonjas un kilo de papas. IV. 2004). otra de nitrógeno. potasio.5. zinc.3%. cuyo proceso se sigue mediante Ia reacción que da con el yodo (la coloración al principio azul cambia después a roja y al final del proceso ya no se observa coloración alguna). los cuales se cuecen con 1. El producto resultante de la fermentación se procede a destilar (TELLO. amoniaco. Se forma una pasta el cual se vuelve a cocer añadiendo agua durante 1/2 a 1 hora agitando para que todo el almidón o fécula. Una vez terminada la transformación de la fécula. ácidos grasos. aminoácidos. sulfato de amonio.14 Se ha reportado la producción de EtOH a partir del almidón como papa. Existen tres tipos de levaduras: (KRYACHKOV. Como constituyentes de las otras fuentes tenemos los azucares. aldehídos. Se ha propuesto la hidrólisis del almidón de la papa para obtener soluciones de glucosa mediante un reactor enzimático de membrana de fibra hueca con conversiones de 97. cloruro de amonio e inositol. cobre. minerales y vitaminas. añadiendo unos 10 gr. Fermentación Alcohólica A Partir De La Papa. REGULACIÓN DE FACTORES DURANTE LA FERMENTACIÓN. etc. el producto se hace cada vez claro.1. de levadura (preparar una pasta) se deja fermentar por espacio de 3 días. hierro. Entre los minerales se tiene al: fósforo. 1980). manganeso.4. 1995).5.

minerales y otras sustancias. normalmente el contenido de nitrógeno varia entre 7 y 9 %. En realidad ésta zimasa está constituida por varias enzimas y co-enzimas. (KRYACHKOV.15 A. Levaduras de Destilería. Son aquellas que se desarrollan exclusivamente en el fondo del recipiente o cuba de fermentación. en donde permanecen bien como cepa uniformemente distribuida o bien corno anillo en la pared del recipiente o cuba de fermentación. COMPOSICIÓN QUIMICA DE LAS LEVADURAS. que da lugar a que la sacarosa se hidrolize. C.2. La Invertasa. C. Hay levaduras que soportan hasta el 11 % del alcohol etílico pero tiene el inconveniente que no fermenta todo el azúcar presente en el mosto a fermentar. carbohidratos. 1980). 1980). Las levaduras contienen aproximadamente de 68-83% de humedad las mismas que están constituidas de sustancias nitrogenadas. El . lípido. La Zimasa que transforme la glucosa y fructuosa formados. sin perjudicar su calidad fermentativa. La saccharomyces cerevisiae tiene dos enzimas: C. formando una molécula de glucosa y una molécula de fructuosa. Pero durante la fermentación es lanzada hacia las partes superiores del líquido como consecuencia de la formación de anhidrido carbónico. (KRYACHKOV. (KRYACHKOV. 1980). Es una variedad de la Saccharomyces cerevisiae que tiene la caracteristica de ser bastante estable y tolerar altas concentraciones de alcohol etílico (12%). Levaduras bajas. las cuales originan la fermentación alcohólica. Son aquellas que se desarrollan ascendiendo durante la fermentación hasta la superficie del líquido en fermentación. Levaduras altas. lo constituyen las proteínas puras alrededor del 10% se presentan en las bases puricas. aun puede descender hasta 2. Un elevado porcentaje que esta entre 64-76%. B. vitaminas.5 y ascender hasta un 14%.1. en alcohol etílico y anhidrido carbónico. D.

5. (Salinas.3. nucleótidos y otros productos.16 4% en las pirimidinas y cerca del 15% de nitrógeno total se presenta en forma de aminoácidos. Durante las fermentaciones por lo general es necesario controlar el pH. Los microorganismos tienden a crecer en un intervalo limitado de pH y. Los psicrófilos presentan un rango de temperatura de 5 a 15°C. cuando se forman productos ácidos como el ácido láctico. 1998). Las levaduras se desarrollan entre 25 a 45°C. En general. mientras no se inactiven sus enzimas. (Quintero. IV. pueden vivir en forma latente fuera de estos rangos. La temperatura afecta el crecimiento de manera notable.5. Temperatura. acético y cítrico o cuando los mismos sustratos de crecimiento son ácidos o bases. Además. se pueden usar durante las fermentaciones para reducir la posibilidad de contaminación. las levaduras crecen en un intervalo de 3 a 6. debemos mencionar que la temperatura también afecta el rendimiento durante la fermentación. principalmente porque los microorganismos de una especie dada solo pueden crecer en un rango restringido de temperatura. 1981) . 1997). Así las fermentaciones de levaduras con frecuencia operan a un pH tan bajo como económicamente sea posible para evitar la contaminación bacteriana. aún dentro de éste intervalo frecuéntemente cambian su metabolismo como resultado de un cambio de incluso 1-1. Estos diferentes intervalos de pH para el crecimiento. su temperatura óptima es de 30 a 40ºC. (Scragg. con una consecuente reducción de los costos de esterilización. los mesófilos de 25 a 40 ºC y los termófitos de 45 a 60ºC.5 unidades de pH. puesto que ciertas bacterias y levaduras crecerán aunque con menor rapidez a valores de pH tan bajos como 2. pH. de modo que al consumirse el pH del medio cambiará de manera importante.2. Esto solamente es una generalización. IV.

17 Cuadro 4. intermedius S. El oxígeno merece mención especial. LEVADURA Saccharomyces cerviciae S. ºC 35-37 29-32 27-29 31-33 33-35 Tmin. con el conocimiento actual es posible iniciar una fermentación y poco a poco a través de la experimentación ira mejorando y dirigiendo el crecimiento y el metabolismo microbiano en el sentido que se desee: aumentando el rendimiento.5-4 0. validus S. IV. pastorianus S. turbidaus T max.4. Sin embargo. CONTENIDO DE AZUCAR: Se puede hacer muchas variaciones en los procedimientos de fermentación.5.5-4 4. como consecuencia de ello . ºC 30 27. Si el mosto es demasiado concentrado el alcohol que se produce puede inhibir la acción de la levadura. Aguilar. pues la extraña perdida de un valioso espacio de fermentación. mínima y optima para la esporulación de algunas levaduras. La dilución execiva del mosto a fermentar es antieconómica. disminuyendo el consumo de nutrientes o excluyendo selectivamente ciertos productos. IV. (Quintero. lo que traería como consecuencia la prolongación del tiempo de fermentación y que no se convierte la parte del azúcar.5. pero la mas recomendable deacuerdo a las experiencias en las destilerías sugieren el empleo de la concentración de azúcar en el empleo del mosto para la fermentación sea del 12 5 en peso.Temperatura máxima. Las levaduras pueden desarrollarse tanto en condiciones anaeróbicas como aeróbicas. El crecimiento microbiano es función de muchas variables y todavía no se establecen relaciones matemáticas que cubran esos rangos de operación o interrelaciones con ellas.5. Oxigeno. lógicamente las rutas metabólicas serán diferentes. pues su ausencia o abundancia permite una selección tanto de microorganismos como de productos del metabolismo. ºC 9-11 0. 1981).5 25 25 29 FUENTE: Prescot (2000) “Microbiología Industrial” Ed.7-5 4-8 Topt.

1998) . mientras que en el caso anterior la finalización de la femetación es antes de las dieciocho horas. Concluye la fermentación a las 72 horas.5. OPERACIONES DE DESTILACIÓN Y RECTIFICACIÓN. La alimentación del mosto previamente filtrada se efectúa mediante una bomba de tornillo rodante. IV. el mosto se precalienta en los tubos de un deflegmador (es una operación en la cual alguna mezcla de vapor generalmente saturado se someto a condensación parcial por medio de' enfriamiento por lo cual el vapor saliente se enriquece en el componente más volátil. 2001) IV. Es una operación de separación basada en las diferencias de volatilidad relativa en una mezcla. (Charley. (Márquez. La destilación se puede efectuar en dos columnas de funcionamiento continuo. esto es. por lo tanto la fermentación tumultuosa se inicia a partir de las dieciocho horas.1. diferencia entre los puntos de ebullición de los componentes de la mezcla. Destilación. Los vapores do esta columna pasan a la segunda columna de destilación del cual se obtienen vapores con contenido de 60% vlv en promedio de alcohol el cual es condensado totalmente utilizando un condensador total vertical y un condensador de fases. (Charley. TIEMPO DE LA FERMENTACIÓN.6.6. accionada por un mecanismo de Transmisión que permite la regulación continua de la velocidad en litros por hora. La duración de los periodos de fermentación es muy variada según el método que se emplee.6.18 aumenta el volumen del mosto a destilar trayendo consigo un mayor costo de producción en la destilería. Cuando se prepara la levadura madre se observo que la fermentación es alta o tumultuosa con un gran desprendimiento de anhídrido carbónico iniciado al cabo de las ocho horas en vista de que la reproducción de las levaduras ha sido lo suficientemente para la conversión de azucares fermentecibles en alcohol: mientras que si se añade la levadura directamente a la cuba de fermentación tarda en reproducirse. es un intercambiador de tubos vertical y cilíndrico) para posteriormente alimentarse en la parto superior de lo primera columna do destilación. 2001) IV.

y una buena agitación que permita mantener las condiciones uniformes en todo el reactor.Rectificación a producto constante. (Vargas y Condori 2000). formas de operar una columna intermitente: 1. se deben tener las condiciones necesarias para su esterilización y mantener la asépsia.1.2.Rectificación a reflujo constante: Es en que la composición del destilado varía a mediada que se modifica la composición de la mezcla contenida en el calderin. al cual se deberá proporcionar de un medio ambiente aséptico en el que únicamente se encuentran los microorganismos deseados. 2. Para el funcionamiento de cualquier bio-reactor. un control adecuado de temperatura y pH adecuado.7. 1998) IV. TIPOS DE FERMENTADORES. El diseño de un bio-reactor es específico para cada proceso biológico y su complejidad depende de los experimentos de proceso.. A propósito. por tanto un sistema no debe ser más complicado de lo que resulta ser necesario. (Márquez. debe contar con dispositivos que permitan el suministro de substratos o de nitratos. IV. niveles apropiados de oxigeno disuelto. existen dos. El fermentador o bioreactor es un recipiente en donde se desarrolla procesos bioquimicos. evacuando los productos y sub productos.6. Rectificación.7. FERMENTADOR. Para cuyo efecto se debe cambiar la relación de reflujo en forma continua hasta alcanzar un valor máximo límite al funcionamiento de la columna de reflujo total. La operación en la columna de rectificación se inicia con reflujo total a efecto do conseguir 01 perfil de temperaturas adecuado para obtener el producto..19 IV. . Es también una operación de separación basada en diferencias de volatilidad relativa y tiene por objeto eliminar el contenido de impurezas de la mezcla a niveles permisibles y al mismo tiempo elevar el contenido de alcohol de Ia mezcla hasta el punto Azeotropico (En la mezcla alcohol agua se forma un azeótropo y no es posible superar este punto por destilación ordinaria a presión atmosférica) teóricamente.

2. Diseño Y Puesta En Marcha De Un “Sistema Semicontinuo En Dos Etapas: Hidrólisis –Fermentación” Para La Producción De Etanol A Partir De Almidón De Papa Usando Simultáneamente Aspergillus Niger Y Saccharomyces Cerevisiae. Se operan cargando inicialmente el sustrato y la cantidad total de reactivos. De este tipo tenemos los siguientes:    Tanque Agitado. El equipo se mantiene operando en estado estable con una alimentación de reactivos y una descarga de productos constantes. se tienen de dos tipos y son: a) Fermentadores Por Lotes Discontinuos. Torres de lecho fluidizado donde el flujo del medio mantiene suspendidos los microorganismos. quedando nuevamente el reactor disponible para iniciar otro ciclo. IV.8. dentro de ellos tenemos:   Tanque agitado Estacionarios b) Fermentadores Por Lotes Continuos. luego se procesa y después de. IV. ALONZO.7.20 Por su funcionamiento. Además tomando encuenta el estado físico de la mezcla reaccionante.. Los fermentadores de tanque agitados mantienen un sistema homogéneo Mediante agitación mecánica que provoca una adecuada dispersión y mezclado de los materiales inyectados consiguiéndose una mejor transferencia de calor para mantener la uniformidad de la temperatura. se descargan los productos.-En los cuales las reacciones ocurren en una solo fase. y una rápida disolución de los gases burbujeados como el oxigeno en el aire. los fermentadores se pueden dividir en:  Homogéneos.Donde se presentan en dos o mas fases. (Vargas y condori 2000).  Heterogéneos. (Vargas y Condori 2000).fermentación para la producción de etanol a partir de almidón de papa usando . Columnas empacadas con enzima inmovilizada. Descripción del Bioreactor Tipo Tanque con Agitación. (2006) Describe el diseño y evaluación de las variables que gobiernan el sistema semicontinuo en dos etapas: hidrólisis .

dos para la entrada y salida de gases. indica que dentro del biofiltro se encuentra primero el prefiltro que es una malla circular en alambre que soporta una capa de lana de vidrio de 3mm de espesor con el fin de retener las partículas más grandes como las dextrinas y el micelio de Aspergillus niger a 4 cm del prefiltro se encuentra el filtro de membrana de 0. flujo volumétrico. una para suministro de inoculo y de medio nuevo y otra para monitoreo de muestras y control de temperatura. Los microorganismos tipo nativo del Aspergillus niger y Saccharomyce cerevisiae utilizadas en este estudio fue suministrada por el Laboratorio de Investigaciones Microbiológicas de la Universidad Industrial de Santander. Productividad.2 micras el cual retiene las unidades reproductoras de Aspergillus niger. concentración celular. tiempo de generación. ALONZO. Para disminuir el tiempo de filtración y aumentar su eficiencia el biofiltro posee un desprendimiento lateral para la conexión a la bomba de vacío con su respectiva trampa. ALONZO. concentración del producto. Entre los reactores se encuentra el Biofiltro. Ks . Se .Señala las variables objeto de estudio fueron: Velocidad de crecimiento. Determinando lo anterior se puede decir que se tiene la descripción experimental del cultivo continuo de acuerdo a la Teoría del Quimiostato para cada etapa del proceso. sustrato limitante. (2006). La hidrólisis del almidón y posterior fermentación produjo cantidades significativas de biomasa. y enzimas como productos colaterales al etanol. tasa de dilución como base para la determinación de la µmax . Cada reactor tiene una capacidad de 2 litros construido en vidrio con tapas esmeriladas con cuatro accesos. Concentraciones de biomasa y sustrato en el equilibrio. de 1 litro de capacidad en vidrio con tapa esmerilada y unido con los reactores por medio de conectores en vidrio provistos de válvulas de paso tipo bureta. (2006). garantizando la esterilidad del los hidrolizados de almidón que van al reactor de fermentación con la Saccharomyces cerevisiae.21 simultáneamente Aspergillus niger y Saccharomyces cerevisiae. con resultados comparables a los del método clásico de monocultivo pero con tiempos de bioproducción inferiores. describe el Bioreactor semicontinuo que consta de un reactor por cada etapa del proceso. azúcares simples.

El tiempo de fermentación alcohólica fue de 48 horas a condiciones anaeróbicas. (2006). ALONZO. MgSO4.22 realizaron 3 experimentos completos para concentraciones de almidón iniciales de 2. En este ultimo paso el filtrado es recibido en el bioreactor de fermentación que contiene el inoculo de Saccharomyces cerevisiae en un medio de hidrolizado de almidón con el fin de eliminar la etapa de adaptación y arrancar en etapa de crecimiento exponencial para la producción de etanol. El volumen total del medio fue de 1000 mL. ALONZO. 3. hidrólisis. y 8 g/100mL respectivamente. Para todos los experimentos la inoculación fue de aproximadamente 106 levaduras. las . Se consideraron tres suministros para cada experimento a intervalos de 48 horas. KCl. 0. Para indica las condiciones de cultivo para la etapa de todos los experimentos la inoculación fue de aproximadamente 105 conidiosporas. Aquarium Air Pump) con una tasa de volumen de aire aproximadamente de 90 litros por hora.01) y almidón de papa como fuente de carbono. después el periodo de suministro se realiza cada 48 horas para un flujo volumétrico de 500mL/48 horas en las dos etapas. (2006). El segundo paso. El suministro de medio e inoculo nuevo. las concentraciones de las sales del medio de cultivo corresponden al medio mineral Czapek (composición. 4. indica las Condiciones para la etapa de fermentación. 7H2O. para un volumen de 1 litro de cultivo y un tiempo de hidrólisis de 60 horas en la primera etapa y 48 horas después de cada suministro de medio nuevo. K2HPO4.5. g/litro de NaNO3. para el bioreactor de hidrólisis se realiza una vez se hayan evacuado los 500mL de hidrolizado hacia el biofiltro transcurridas las 60 horas iniciales de hidrólisis. FeSO4 . conteo realizado mediante cámara de Neubahuer. conteo realizado mediante cámara de Neubahuer. 500mL. 7H2O. una vez trascurrido el tiempo de la hidrólisis es la Filtración de 500mL de hidrolizados eliminando Aspergillus niger y la dextrina limite con el fin de "esterilizar" el futuro medio para la fermentación de los azúcares en el tercer paso. 0. se suministró oxígeno al medio durante todo el proceso mediante bomba de acuario (Power 500. 1.5. En cada experimento se realizaron los siguientes pasos: Primero hidrólisis del almidón de papa por Aspergillus niger a la concentración inicial de almidón indicada. 0.

4. Determinación de las concentraciones de Etanol.. Los Azúcares Reductores son determinadas en muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Bernfeld. El volumen total del medio fue de 1000 mL. Las concentraciones de azúcares están indicadas para cada experimento al igual que los intervalos de muestreo.012/80.Determinación de nitrógeno y proteína en la biomasa. 1984) IV. (Wistler. IV. La masa celular fue secada a 110°C con pesos constantes para evaluar la proteína unicelular. Cada muestra tomada fue filtrada con el fin de separar la levadura a través de dos capas de papel filtro cualitativo Whatman. Determinación de Glucosa.23 concentraciones de las sales del medio de cultivo corresponden al medio mineral proveniente del cultivo de la hidrólisis una vez retirado el Aspergillus niger.). La determinación de almidón se realiza mediante lecturas de absorbancias del complejo coloreado de yoduro-yodato más almidón a 640 nm contra una curva de calibración. utilizando el Acido 3.A.8..8. 2002). la fuente de carbono corresponde a los azúcares producto de la hidrólisis del almidón.1.2. Los filtrados fueron utilizados para la cuantificación del alcohol los azúcares reductores y la glucosa. 1963).8. . La concentración del etanol fue determinada mediante el método de gravedad específica por picnómetro.O. La Glucosa es determinada por el Método de Glucosa Oxidasa y peroxidasa utilizando el Kit de Sera . IV.C 9.La determinación de nitrógeno total se realizó por el método de Kjeldalh. (Nielson.3. Determinación de los Azúcares Reductores. IV.Acido Sulfúrico.8. Determinación de Carbohidratos Totales. (William.Los Azúcares Totales son determinadas en muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Fenol .6. IV. Determinación del Almidón en el medio. IV. 1964.8.5.8. de acuerdo a la metodología de la A.Pak. (Abouzied.5-dinitrosalicílico.

9. En la segunda etapa experimental realizaron el seguimiento cinético de la hidrólisis y se sugiere disminuir el tiempo de acción de la enzima αamilasa a 0. la concentración de sustrato y el tiempo de sacarificación.0746 kgetanol/kgpapa. En la primera etapa experimental se analizó el efecto sobre la conversión a azúcares reductores. Se determinó que el efecto combinado entre las concentraciones de la enzima α-amilasa y el sustrato presentó significancia estadística.91.24 Estudio De Los Factores Que Afectan La Hidrólisis Enzimática Y El Proceso Fermentativo Para La Producción De Alcohol A Partir De Papa (Solanum tuberosum). Además. Al evaluar el efecto de cuatro concentraciones del promotor. se obtuvo un consumo de azúcares reductores de 91 %. de la concentración de las enzimas α-amilasa y amiloglucosidasa.98 y una eficiencia de la fermentación de 0. IV. El rendimiento de etanol para el proceso global fue de 0. por lo que se recomienda utilizar 0. .8 mL/kgsustrato y 20 % respectivamente. a fin de determinar las mejores condiciones para producir alcohol. En la etapa del seguimiento cinético de la fermentación. estudiaron el efecto de la concentración de células y la presencia de biotina como promotor de la fermentación. estudiaron a nivel de laboratorio. la hidrólisis enzimática y la fermentación de la papa (Solanum tuberosum). respectivamente. En la fermentación alcohólica del sustrato hidrolizado. La concentración de la enzima amiloglucosidasa y el tiempo de sacarificación no presentaron significancia estadística. González y Córdoba (2006). una concentración máxima de alcohol de 10. 2006). La presencia del promotor presentó significancia estadística entre los niveles utilizados. Se encontró que la concentración de células no es significativa y se recomienda utilizar una concentración de 50 millones células/mL.33 % v/v. (González y Córdoba. la conversión a azúcares reductores se ve favorecida al utilizar los valores de 0.5 h y para la sacarificación utilizar un período de 15 h. un rendimiento de etanol con respecto al ideal de 0. se encontró que el valor máximo de torque requerido para la agitación en el proceso de gelatinización fue de 11 N·cm y de 1 N·cm para la dextrinización y la sacarificación. se observó que la concentración de 0.8 mL/kgsustrato y un tiempo de 14 h.2 mg/kg favorece la producción de alcohol.

5. IV. según la corrida aleatorizada del diseño experimental. expresado como masa de azúcares reductores producidos por unidad de masa de sustrato. El objetivo de esta evaluación fue encontrar aquella combinación de concentraciones de las enzimas a-amilasa (0. Con un baño térmico se elevó la temperatura de la mezcla hasta 95 ºC y se llevó a cabo el proceso de dextrinización por un período de 2. 15% y 20 %) y tiempo de reacción con la enzima amiloglucosidasa (14 h y 18 h).8 mL/kgpapa seca y 1. mediante un análisis de efectos. Cinética de las enzimas α-amilasa y amiloglucosidasa (AMG) en la hidrólisis enzimática de la papa. se inactivó la enzima y se analizaron las muestras para determinar la cantidad de azúcares reductores. Se utilizó un diseño factorial completo de 24 a dos niveles. Se agregó la cantidad de amiloglucosidasa (AMG) que correspondiera según el diseño para continuar con la etapa de la sacarificación por el tiempo determinado.8mL/kg papa seca) y amiloglucosidasa (0. concentración de sustrato (razón de sustrato seco y agua. Se compararon los valores de la variable de respuesta con el fin de encontrar las condiciones que maximizan la conversión del almidón en azúcares reductores. se colocó una masa conocida del sustrato en el recipiente destinado para la hidrólisis. 2006). Evaluación de las condiciones para la hidrólisis enzimática de la papa. se le adicionó cloruro de calcio (40 ppm) y se llevó a un pH de 6. Al final de esta etapa se debió enfriar la mezcla hasta 60 ºC y agregar HCl hasta alcanzar un pH de 4. la variable de respuesta fue el rendimiento de azúcares reductores.5 para desactivar la enzima. Para lograr esto. 2006). .5 h con una agitación constante de 225 r/min.0 mL/kg papa seca). (González y Córdoba.9. Terminada esta etapa.9.1.25 IV. con una agitación de 150 r/min.6 mL/kg papa seca y 0. (González y Córdoba.2.

El requerimiento de torque en la etapa de dextrinización se tomó cada 10 s. El análisis consiste en varias etapas. El estudio consistió en hacer un seguimiento del requerimiento de torque durante la hidrólisis de la papa. Para el seguimiento de la cinética de las enzimas a-amilasa y AMG. agitación y tiempo utilizadas previamente en la dextrinización y sacarificación. . Además se utilizaron los mismos métodos para la desactivación de cada una de las enzimas. una primer etapa que inicia en el momento en que el recipiente se coloca en el baño de agua a una temperatura de 95 ºC hasta 10 min después de la adición de la enzima α-amilasa. 2006).8 mL/kgsustrato seco. Se utilizaron las mejores condiciones obtenidas de la fase experimental de la hidrólisis enzimática.16 y una relación de altura de líquido a diámetro de recipiente de 1. un tiempo de sacarificación de 20 h y las mismas condiciones de pH. Estudio del requerimiento de torque en la hidrólisis enzimática de la papa. concentración de cloruro de calcio. una concentración de la enzima de α-amilasa de 0.8 mL/kgsustrato seco. Para poder realizar esto.3. se fija la velocidad de agitación a 225 r/min. en un volumen de 3 L. la segunda es inmediata y transcurre hasta finalizar la dextrinización y la última etapa.39. una relación de altura de agitador a diámetro de agitador de 0. (González y Córdoba. en la etapa de sacarificación cada minuto. se utilizó una concentración de sustrato de 20 %.26 El objetivo de esta etapa fue realizar un seguimiento de la cinética de las dos enzimas utilizadas durante la hidrólisis de la materia prima. temperatura. 2006). para determinar el valor máximo y poder posteriormente utilizar esta información para el cálculo de potencia para efectos de cambio de escala. una concentración de la enzima de AMG de 0. en la que ocurre el proceso de sacarificación. utilizando un agitador de hélice y se fija una relación de diámetro de agitador a diámetro de recipiente de 0.. (González y Córdoba. además se realizaron mediciones de temperatura y pH. IV.9. Para este estudio se realizó la hidrólisis enzimática de la papa. Se tomaron muestras cada 30 min para la primera enzima y cada hora durante la sacarificación para determinar el comportamiento de la cantidad producida de azúcares.

El conteo de células se realizó con un microscopio y una cámara de Neubauer. Al final de la sacarificación. que permita obtener el máximo rendimiento de etanol.5 y se agregaron nutrientes a las concentraciones. con .4.9. previa realización de una curva de calibración.00 1.27 IV. según un diseño factorial completo 22. Al finalizar la fermentación se inactiva el microorganismo. cerevisiae (50 millones de células/mL sustrato hidrolizado y 100 millones de células/mLsustrato hidrolizado) y la ausencia o presencia de un promotor (0.00 1. El sustrato se preparó hidrolizando la harina de papa de la misma manera como se preparó en el estudio de la cinética de las enzimas. (Araya.00 Fuente: (González y Córdoba. NUTRIENTE Nitrato de amonio Sulfato de Magnesio Fosfato monoacido de potasio Extracto de levadura CONCENTRACIÓN(g/L) 2. expresado como la concentración de etanol (% v/v). se reguló el pH a un valor de 4. que funciona como una válvula reguladora de presión. utilizando cantidades semejantes a las reportadas.Concentraciones de los nutrientes a utilizar en la fermentación.5 L para hidrolizar una masa de disolución de 3000 g. se centrifugó y se realizó la determinación del índice de refracción del destilado. Cuadro 5. Este jarabe se distribuyó en erlenmeyers de 250 mL. pero utilizando recipientes de 3. Evaluación de las condiciones para la fermentación del sustrato hidrolizado. El objetivo fue encontrar aquella combinación de concentración del microorganismo S. se filtró el hidrolizado obtenido.2 mg/kgsustrato hidrolizado) de la fermentación. duplicado. con una cantidad de jarabe de 200 g.00 2. 2006) La fermentación se realizó a una temperatura de 31ºC en un baño con agitación a 150 r/min. 1998). cerrados.

Figura 3: Variación de la concentración de alcohol con el tiempo. el cual tiene un sistema de agitación. La fermentación se llevó a cabo en un reactor de 5 L.28 la que se interpoló de ella la concentración de etanol en porcentaje en volumen. que se inoculó con una cantidad de microorganismos de 50 millones células/mLsustrato hidrolizado y una concentración de promotor de 0. 2006) IV. 2006). Al hidrolizado se le agregaron los nutrientes. según el método IT-008. (González y Córdoba. IV.5. la cual se hidrolizó. el tiempo de fermentación es de 30 h y se tomaron periódicamente muestras para los análisis.1. se realizaron experimentos adicionales. Al finalizar la fermentación se tomó una muestra y se analizó en el Laboratorio de Control de Calidad de la Fábrica Nacional de Licores para determinar los congenéricos mediante HPLC.9. . (2006). 0.2 mg/kgsustrato hidrolizado. (González y Córdoba. Se utilizaron las mismas condiciones en la primera evaluación de la fermentación. Se utilizaron las mismas variables fijas mencionadas en la sección anterior y se utilizaron 50 millones células/mLsustrato hidrolizado.2 y 0.5 L y se dividió en dos porciones para realizar por duplicado la fermentación. es determinar los diferentes parámetros cinéticos del período de fermentación.6. Para esta etapa. a cuatro concentraciones de promotor (0. González y Córdoba. calentamiento y/o enfriamiento y un puerto para toma de muestras. se preparó una suspensión de harina de 6 L de sustrato. Evaluación de la concentración del promotor en la fermentación de la papa hidrolizada.0. obteniéndose un volumen de filtrado aproximado de 4.3) mg/kgsustrato hidrolizado. Para evaluar el efecto únicamente de la concentración del promotor sobre la conversión de etanol. El objetivo del seguimiento a mayor escala. Para el seguimiento cinético se midió la concentración de etanol de azúcares reductores y la concentración de microorganismos. Seguimiento cinético de la fermentación en un reactor de 5 litros.9.

10.29 FUENTE: González y Córdoba. La variable dependiente o respuesta se simboliza como Y. En el caso de que cada . 1999).1. Los valores mas apropiados de las variables del proceso. (2006) IV...10. (Grosz.Se utiliza en la planeación de experimentos que produzcan una información confiable en el menor número de ensayos. IV.2. Los demás valores de las variables del proceso se mantienen constantes. 1999). DISEÑO DE EXPERIMENTOS PARA LA HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN DE PAPA POR VÍA QUÍMICA Y PARA LA FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA. IV.El primer paso a seguir es la escogencia de las variables que puedan ser controladas durante el proceso y sus niveles mas adecuados. El número de experimentos que se deben efectuar es 2n donde n es el número de variables independientes de dicho proceso. El nivel máximo se simboliza como (+) y el nivel mínimo como (-).10. se dan como un rango dentro del cual se determinan los niveles apropiados para el diseño. Diseño Factorial Completo. Determinación de las variables y sus niveles. (Grosz. Después de una búsqueda bibliográfica y ensayos preliminares se consideran las variables más influyentes como independientes.

VI. “Obtener alcohol a partir del almidón de la papa” V. como se expone a continuación: Y1 = ( Y11 + Y12 ) 2 Y11. Obtenidos los anteriores resultados se calcula los efectos simples. la respuesta Y es el promedio de las dos respuestas.1. dobles y triples de las variables. Y12 = Respuesta del experimento y su replica. 1999). Y1 = Promedio de la respuesta. V. Para poder determinar la precisión de la experimentación se hace un análisis estadístico utilizando experimentos de control. VI. . • • • Determinar el % de rendimiento para la hidrólisis del almidón de la papa mediante una ecuación Determinar el % de rendimiento para la fermentación alcohólica mediante un modelo matemático. Con los datos del análisis estadístico se plantea el modelo matemático que describe la significación de las variables en el proceso.2.1. Objetivo General. HIPÓTESIS. Determinar las características físico-químicas del alcohol proveniente de la fermentación del almidón de la papa. Hipótesis General.30 experimento se realice como replica. De acuerdo a los ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles máximos (+) y mínimos (-) para la hidrólisis del almidón (Grosz. OBJETIVOS DEL ESTUDIO. V. Objetivo especifico..

Hipótesis especifico. VI. • El % de rendimiento para la fermentación alcohólica depende de la temperatura. la Concentración de Almidón y Tiempo de hidrólisis con estas variables y con los resultados en el laboratorio se pueden hallar dicha ecuación. -Tiempo de hidrólisis. concentración de azucares totales y pH con estas variables y con los resultados en el laboratorio se puede hallar un modelo matemático.31 La obtención de alcohol por el proceso semicontinuo hidrólisisfermentación depende del almidón de la papa para la hidrólisis y del tipo de microorganismo para la fermentación (Saccharomyces cerevisiae) y de las condiciones de operación del bioreactor. Almidón de la papa (materia prima) VII. Variables Intervinientes.2.1. Identificación de variables: VII.2. Alcohol del almidón de la papa (producto) VII. Variable dependiente. VII. .3. • La determinación de las características físico-químicas depende del etanol convertido en producto de la fermentación alcohólica del almidón de la papa. • El % del rendimiento de la hidrólisis del almidón de la papa esta en función de la Concentración de [HCl]. Variable Independiente.

Tiempo . 1. % Variables Intervinientes (Vit) Tiempo 1. -pH.Caracterización Físico y química del alcohol obtenido 1.4.Cantidad de tiempo para la hidrólisis 2.Cantidad de calor en la fermentación alcohólica 3.2. cenizas.1. Papas andinas 2.32 -Temperatura -Concentración de azucares totales -El pH. Grado Alcohólico. pH. g/ml.Temperatura .1.3. fibra y carbohidratos VALORACIÓN Kg % % 2. Cuadro 6: Operacionalización De Variables.1.2 Rendimiento de la hidrólisis del almidón 1. Rendimiento de la fermentación alcohólica -ºGL.1.% acidez VIII.4. Recurso Agrícola 2. Concentración . VARIABLES Variable Independiente (Vi) Almidón de la papa INDICADORES 1.Horas (Vit) Temperatura 1. grasa. 1. proteína. Densidad 1.Contenido Humedad.3. . pH .Cantidad de azucares totales Acidez del fermento 1.Caracterización Química del almidón de la papa Variables dependientes (vd) Alcohol Etílico ÍNDICES 1. UTILIDAD DE LOS RESULTADOS DE ESTUDIO.2.ºC (Vit) Concentración de azucares totales (Vit) pH 1.ºBrix 1.

Materia prima En esta investigación se utilizara el almidón de la papa (solanum tuberosum) como materia prima la cual será adquirida en el mercado de puno. Investigación aplicada basada en principios científicos tecnógicos. c. menos contaminante para el medio ambiente y traerá beneficios en el comercio.2. en su consumo. Pipetas Termómetro Papel filtro. a. Tamiz de 0. IX. IX. Matraz de erlenmeyer. Material de laboratorio.1mm. Durante el proceso de obtención del alcohol.Tipo de estudio. La levadura para iniciar la fermentación alcohólica es el Saccharomyces cerevisiae. . b. iniciador. Recipientes. IX. METODOLOGIA. Material Experimental Y Equipos. -Además el alcohol obtenido apartir de la fermentación del almidón de la papa se podrá utilizar como disolventes y/o como insumo Alcohol Etílico para la industria ya que el alcohol etílico es menos dañino para la salud.1. • • • • • • • Vaso de precipitados de 500ml.33 -Los resultados del trabajo de investigación sirven para que tenga como referencia para la potencial industrialización del almidón de la papa y sobre la obtención de nuevas fuentes de energía.

A. • Fermentador • Destilador.5. teniendo el cuidado de no retirar también parte del tubérculo con la cáscara. • Balanza Analítica. 2005). Se hace pasar la papa sin cáscara por un extractor de jugos. . con el fin de retirar tierra y otras impurezas que trae la papa. Instrumentos y equipos de laboratorio • Autoclave. (LEON. AISLAMIENTO DEL ALMIDÓN DE LA PAPA. La extracción del almidón de la papa se realizó de acuerdo a los siguientes pasos: A. se realiza a mano. e. A. Segundo: pelado.3. PROCEDIMIENTO. Cuarto: sedimentado. IX. Quinto: el Secado.3.1. temperatura 120°C y a una presión de 15 psi. con el fin de extraerle todo el jugo que tiene la biomasa de la papa A. Tanto el almidón como la fibra se secan en una estufa a 60ºC de temperatura y durante 24 horas. Agua destilada. • Potenciometro (pH) • Alcoholímetro de laboratorio de 0-35 ºGL. de 10 litros de capacidad semi-industrial (construido de acero inoxidable) de la FIQ-UNA Puno.1. Tercero: licuado.34 d. Primero: Lavado. consistió en decantar la lechada que sale del tamiz para separar los gránulos del agua A.3. REACTIVOS QUIMICOS: • • Acido clorhídrico. • Estufa (0-60ºC). IX. • Refractómetro (0-32ºBrix).4.2.

FUENTE: Vargas Y Condori. Agitación. Ambas etapas. Tiempos de hidrólisis y de fermentación y Concentración de sustratos. durante 30 minutos a una temperatura de 120°C. 2005).35 IX. Los experimentos de producción de etanol en el Bioreactor están planteados de acuerdo a un diseño factorial de experimentos que permite el análisis estadístico de los resultados (LEON. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA. 2005).2.3. Temperatura. Se realizó Hidrólisis Acida.3. Los pasos que se siguen en la Hidrólisis de almidón por vía química son los siguientes: Se pesa una cantidad de almidón para un volumen de 800mL y para una concentración dada de ácido en un erlenmeyer de 1L que fue llevado al autoclave x . terminada la hidrólisis se filtra al vacío y luego se determina la cantidad de azúcar obtenida. hidrólisis y fermentación anaeróbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando las variables de pH. Con el almidón hidrolizado se obtienen azúcares fermentables mediante rompimiento de las cadenas de glucosa. controlando la temperatura de reacción. condiciones de 15 psi. (LEON. IX. concentración del ácido y del almidón. presión de reacción. Figura 4: Reactor De Tanque Agitado. (2000) .3. HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN DE PAPA.

Licuefacción. Análisis De La Composición Química Del Almidón Extraído • Contenido de humedad. método gravimetrito.1.36 Figura 5: Diagrama de flujo en la obtención de alcohol del almidón de la papa. Destilación.4. IX. Etanol. IX. El almidón de la papa tiene las siguientes propiedades. Saccharomyces Cerviciae.4.4. Hidrólisis. Almidón. Ácido clorhidrico. Materia prima papa. Propiedades físicas organolépticas: • • • Color Olor Sabor IX. METODO DE ANALISIS.co Reactor Fermentador. Control y análisis de la materia prima. Fermentación. .2.

0. se mide utilizando el picnómetro.g . Carbohidratos Totales.de .Acido Sulfúrico.342 g peso de una unidad monomérica de almidón. • • • • Sólidos solubles.de . Los Azúcares Totales según muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Fenol . Determinación del El Porcentaje de Rendimiento de la Hidrólisis.37 • • • Nitrógeno y proteína en la biomasa.glu cos a * X .almidón * 0. IX.360 g de glucosa corresponden al peso de dos moléculas de glucosa que se hidrolizan de una unidad monomérica (maltosa) del almidón.3.de . Almidón en el medio.5. según las lecturas de absorbancias del complejo coloreado de yoduro-yodato más almidón a 640 nm contra una curva de calibración. Análisis fisicoquímico de la fermentación alcohólica. método refractometrico (ºBrix).almidón Donde: .gramos . por el método de Kjeldalh. método del alcoholímetro para determinar el grado alcohólico. IX. Se obtiene mediante la relación del Azúcar Teóricamente esperado con respecto al valor leído experimentalmente de acuerdo a la siguiente relación: (Grosz. Grado alcohólico.4. % Re n dim iento = Azucar exp erimental *100 Azucarteor ica .9 = Azúcar . tomando un 10% en pérdida por almidón que no se alcanza a hidrolizar. pH medido con el potenciómetro.Teórico 342 . . 1999) Y = 360 g . .9 es la fracción que indica que el 90% del almidón hidrolizan a azúcar. Densidad.

38 IX. .m altosa 100 . la presión de 15 psi y el volumen de hidrólisis de 800 mL. 500 es el volumen en mL medido para cada fermentación.m altosa * 500 0.de . 0. Se expresa en porcentaje entre el volumen de alcohol determinado y el volumen esperado teóricamente. maltosa.g . Grosz. El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentación Alcohólica se obtiene mediante la relación entre la cantidad real de alcohol producido y la esperada teóricamente en base a la concentración de azúcar de la solución a fermentar.Teórico % Re n dim iento = IX. De acuerdo a referencias bibliograficas y ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles máximos (+) y mínimos (-). exp erimental * 100 Alcohol .de . Diseño De Experimentos para la Hidrólisis del Almidón de papa. Se realizan tres experimentos de Control (simbolizados como “0” en la matriz del diseño) que no son más que tres replicas con valores de variable intermedio de a los valores superior e inferior como lo muestra la matriz del diseño con el fin de evaluar el límite de confiabilidad de los experimentos de la matriz de diseño factorial e identificar los efectos significativos de la acción de las variables en forma individual o conjunta.alcohol 360 .79 es la densidad del etanol en g/mL. 184 es el peso de 4 moléculas de alcohol etílico que por fermentación se producen a partir de una molécula de maltosa o dos de glucosa.6. el volumen de alcohol esperado teóricamente será: Y = X . 1999) Alcohol .m .solución L * 184 .g .de .79 En donde: Y = mL de alcohol teórico. Determinación del El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentación Alcohólica. Manteniendo constante la temperatura de 120°C. (Grosz.7.de . Si se trata de X gramos de azúcar. (1999).g . 360 es el peso de una molécula de maltosa equivalente a dos de glucosa.

05 0.10 0. % Re n dim iento = a 0 + ∑a 0 x1 + ∑a 2 x1 x 2 + ∑a3 x1 x 3 + ∑a 4 x1 x 2 x 3 x1 = HCl − 0. Variables Z1: Concentración de [HCl] Z2: Concentración del Almidón [AL] Z3: Tiempo de hidrólisis Unidad (N:mol/L) (%) (min. MODELO MATEMATICO PARA LA HIDROLIZIS DEL ALMIDÓN.1.39 IX.075 Variables Concentración de Almidón 6 6 18 18 6 6 18 18 12 12 12 N=23=8 Tiempo de hidrólisis 10 10 10 10 30 30 30 30 20 20 20 Fuente: Elaboración propia IX.10 0.075 0.10 0.10 18 30 Fuente: Elaboración propia Donde: N=2n CUADRO 8: Matriz de Diseño (2n) para la Hidrólisis del Almidón de la papa.05 6 10 Superior 0. Codificación ºN de Experimentos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Z1 -1 +1 -1 +1 -1 +1 -1 +1 0 0 0 Z2 -1 -1 +1 +1 -1 -1 +1 +1 0 0 0 Z3 -1 -1 -1 -1 +1 +1 +1 +1 0 0 0 Concentració n de [HCl] 0.075 0.) Niveles Inferior 0.025 .7.10 0.05 0.075 0.05 0.7.2. OPTIMIZACIÓN DE LAS VARIABLES DE PROCESO. CUADRO 7: Niveles de variables a investigar.05 0.

y la concentración de azúcares reductores totales (nivel superior 12%.0. Diseño De Experimentos para La Fermentación Alcohólica. nivel inferior 6%).1.40 x2 = A −12 6 t − 20 10 x3 = IX. la concentración de sales. nivel inferior 25°C). Para la fermentación de los hidrolizados de almidón a alcohol por parte del Saccharomices cerevisiae fueron: La Temperatura (nivel superior 37°C. CUADRO 9: Niveles de variables a investigar. y el tiempo de la hidrólisis (96 horas). mediante buffers). Variables C1: Temperatura C2: Azucares totales C3: pH Unidad (ºC) (%) Mol/l H+ Niveles Inferior Superior 25 6 4 37 12 6 Fuente: Elaboración propia Donde: N=2n N=23 N=8 CUADRO 10: Matriz de Diseño para la fermentación Alcohólica. nivel inferior 4. IX. Codificación ºN de Experimentos 1 2 C1 -1 +1 C2 -1 -1 C3 -1 -1 Variables Azucares Temperatura totales 25 37 6 6 pH 4 4 .8. OPTIMIZACIÓN DE LAS VARIABLES DE PROCESO.8. flujo de aire.0. Manteniendo constante la concentración del inoculo. el pH (nivel superior 6.

XI. Nombre Higinio Zúñiga Laboratorista Función Tutor Asistente Dedicación semanal 20 30 Pago Mensual ($) 300 350 Total ($) 1750 1600 3350 XI. bioquímica y análisis instrumental de la facultad de ingeniería química.2. Modelo Matemático para la fermentación Alcohólica. % Re n dim iento = b0 + ∑b1 X 1 + ∑b2 X 1 X 2 + ∑b3 X 1 X 3 + ∑b4 X 1 X 2 X 3 X1 = T − 31 6 X2 = AZU − 9 3 pH − 5 1 X3 = X.1. RECURSOS HUMANOS.8. ÁMBITO DE ESTUDIO. RECURSOS MATERIALES.41 3 4 5 6 7 8 9 10 11 -1 +1 -1 +1 -1 +1 0 0 0 +1 +1 -1 -1 +1 +1 0 0 0 -1 -1 +1 +1 +1 +1 0 0 0 25 37 25 37 25 37 31 31 31 12 12 6 6 12 12 9 9 9 4 4 6 6 6 6 5 5 5 Fuente: Elaboración propia IX. . XI. RECURSOS. El presente trabajo de investigación se ejecutara en los laboratorios de procesos.2.

5 mL mL mL mL 10 1000 10 10 2 1 1.5 8 Material De Laboratorio.35 Kg. Refractómetro Potenciómetro Alcoholímetro Picnómetro 80 80 50 30 Un Un Un Un 1 1 1 1 80 80 50 30 240 Tratamiento de la materia prima y obtención del almidón.15 3. Laboratorio 200 Un Un 150 150 Materia prima. Estufa 20 50 10 50 30 Un Un Un Un Un 1 1 1 1 1 20 50 10 50 30 160 Material de Análisis.5 3. Autoclave Bioreactor Balanza Analítica Destilador.15 Reactivos Químicos: Acido clorhídrico Agua destilada Acido Sulfúrico Ioduro de potasio 2 1 1. Lavado Pelado 5 10 Un Un 1 1 5 10 . papa 0.42 Descripción Precio Unitario Unidad Cantidad Total ($) Infraestructura. 9 3.5 3.

43 Licuado sedimentado secado 15 5 25 Un Un Un 1 1 1 15 5 25 60 Servicio de cómputo. Código A1 A2 A3 A4 A5 Descripción Revisión bibliografica Formulación del marco teórico Adquisición de equipos y materiales Implementación del laboratorio Revisión de estrategia experimental Duración (semanas) 2 1 1 1 1 . Materia prima.65 XI. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES. TOTAL Tipo de cambio 1$ = S/.15 8.3 $ 150 3. y obtención del almidón. Imprevistos (10%). Papel bond Impresión Empastado Copias de tesis 1 5 3 4 millón Un Un Un 1 4 3 3 1 20 9 12 42 X. Tratamiento de la M. RUBRO Infraestructura. Material del laboratorio. 3. Reactivos químicos. Servicio de cómputo.P. Material de análisis. PRESUPUESTO DEDL PROYECTO.5 160 240 60 42 66.365 663.3.

BIBLIOGRAFÍA.44 A6 A7 A8 Ordenamiento de resultados Análisis de los resultados Redacción del informe final 1 1 2 Código Actividad Semanas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 XII. M. Escuela de Ingeniería Química. Determinación de la concentración de nutrientes necesaria para mejorar el rendimiento del proceso fermentativo de la Fábrica Nacional de Licores.html Araya. Afanador. . Environ. Alonzo. 1055-1059. M. Universidad de Costa Rica. 2005. Costa Rica. 6(10). 557(3). Extraído el 18 de Agosto de 2007 desde http://www. M. Direct Fermentation of Potato Starch to Ethanol by Cocultures of Aspergillus niger and Saccharomyces cerevisiae. (1986). (2006. Microbiol.gov. Tesis de Licenciatura para la obtención del título de Licenciado en Ingeniería Química. Diseño y puesta en marcha de un "sistema semicontinuo en dos etapas: hidrólisis . Boletín de la Papa.fermentación" para la producción de etanol a partir de almidón de papa. 51-68. (1998). El Banano verde en la producción de etanol.icfes.. A. 31 de Agosto). 52(5). Abouzied.co/revistas/recolqui/972602/972602abs. Biol Waste. R. San José. 20-25.

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