1 “OBTENCIÓN DE ALCOHOL APARTIR DEL ALMIDÓN DE LA PAPA” I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

Hoy en día existe un grave problema ambiental “el smoke y la contaminación”, han producido daños a la capa de ozono Debido principalmente al uso intensivo (80%) de combustibles fósiles (carbón, petróleo, gas natural) en actividades industriales y el transporte se ha producido un excesivo aumento en las cantidades de óxidos de nitrógeno y dióxido de carbono emitidas a la atmósfera Además del incremento de las emisiones existen otros problemas como la deforestación (20%), que han limitado la capacidad regenerativa de la atmósfera para eliminar el dióxido de carbono, principal responsable del “Efecto Invernadero”.Por lo tanto se busca la utilización de otras fuentes de energía renovables como los Biocombustibles hacen parte de la solución para disminuir las emisiones de gases contaminantes, actualmente se esta produciendo alcohol de la caña de azúcar pero recientes estudios han determinado que el bagazo de la caña de azúcar tiene alto contenido de contaminantes entre ellos tenemos al “bagazosis” que es una enfermedad que se presenta en trabajadores expuestos a la inhalación de polvos de bagazo de caña enmohecido que forma parte de un conjunto de enfermedades de características clínicas, inmunológicas e histopatológicas semejantes, denominado alveolitis alérgica extrínseca, pero el término correcto es el de neumonitis por hipersensibilidad ya que la respuesta inmunopatológica se localiza en la porción distal del árbol respiratorio y abarca desde el bronquiolo terminal respiratorio, hasta los alvéolos y los capilares pulmonares, también afecta a los ojos ya que las partículas de hollín de tamaño igual o menor a 10 micrones, se incrustan en las corneas .Recientemente la OMS, anuncio que el 40% de pobladores mueren por causa del bagazosis y que el otro 60 % sufren de afecciones respiratorias los mas afectados son los niños debido que están el mayor tiempo en contacto con la naturaleza, no solo esto en cada inicio de zafra para los pobladores se hace insoportable convivir con la gran cantidad de hollín y humo que emanan las chimeneas de caña de azúcar dañando el patrimonio natural y cultural. Ante es problemática existe como alternativa la obtención de alcohol a partir de otra materia prima que no sea tan perjudicial

2 como es el almidón de la papa para producir alcohol anhidro para aditivo de combustible y para carburantes; también se puede producir en gran escala alcohol para el consumo humano (vodka). I.1. Interrogantes De La Investigación: I.1.1 ¿Cuál es el proceso de obtención de alcohol apartir del almidón de la papa? I.1.2. ¿Qué parámetros fisicoquímicos se controlara en la obtención de alcohol del almidón de la papa? I.1.3. ¿Cuál será el rendimiento de alcohol que se obtendrá del almidón de la papa? I.1.4 ¿Cuál es el grado alcohólico del alcohol obtenido del almidón de la papa? II. ANTECEDENTES: GULATI et al., (1996), Investigarón sobre “Maíz como materia prima en una planta productora de alcohol etílico”, Par la hidrólisis del almidón se usa la

α -amilasa obtenida de bacterias termo resistentes Bacillus licheniformis
tiene que ser llevada a altas temperaturas (90-100ºC) para el rompimiento de los gránulos del almidón, el almidón licuado se somete a sacarificación a menores temperaturas (60-70ºC) con glucoamilasa con Aspergillus Níger la cual hidroliza las dextrinas hasta glucosa. NETWORK, W. (2002), Investigo sobre “La producción de etanol usando mezclas de jugo de sorgo dulce”, granos de alto contenido de almidón, tallos con alto contenido de sacarosa y hojas y bagazo con alto contenido de lignocelulosa bajo condiciones normales y de muy alta concentración de sólidos (VHG), usando cepas de Saccharomyces cerevisiae a 30°C obteniendo concentraciones de etanol de hasta 16,8%v/v El objetivo de este trabajo fue determinar las condiciones para obtener durante la germinación. el mejor grado de hidrólisis del almidón del grano, usando las propias enzimas que se generan

3 AFANADOR, A. (2005) Investigo sobre “El Banano verde en la producción de etanol” el banano verde con cáscara tiene alto contenido de almidón y celulosa, se le considera como una materia prima potencial para la industria del bioetanol., la producción de alcohol a partir de almidones y celulosa con procesos químicos o biológicos (hidrólisis) para su conversión a jarabes azucarados, que una vez acondicionados se someten a la acción de levaduras que efectúan la fermentación alcohólica. El etanol resultante se lleva a procesos de destilación y deshidratación hasta obtener alcohol anhidro (99,5% v/v). LOZANO U. Á. (2003) Investigo sobre “Producción de etanol a partir de yuca mediante bioreactor de tanque agitado con control de variables” Se obtiene del almidón aislado de la yuca raíz sin cáscara, dicho almidón (polisacárido de glucosa) se somete a hidrólisis química, de tal forma que se produzcan azúcares fermentables, que son sometidos a una fermentación anaeróbica por la levadura Saccharomyces cerevisiae obteniendo una solución etanólica. Ambas etapas, hidrólisis y fermentación anaeróbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando variables de pH, Temperatura, Agitación, Tiempos de hidrólisis y de fermentación y Concentración de sustratos. SUNG Y CHENG J, (2002) Investigarón sobre, “Producción de alcohol a partir del trigo”. La que usualmente se utiliza en la producción de alcohol, llamada Zymomonas mobilis, obtiene excelentes resultados pero sólo a partir de la celulosa de los palos de trigo se podría hacer alcohol donde se logra rendimientos que alcanzan0.357 Etanol/kg de trigo mediante el proceso Biostill. CHAVES, S. M. (2004), Investigo sobre “Alcohol apartir de la caña de azúcar”, para la producción de etanol la principal materia prima es el jugo de caña o las melazas (subproducto de la industria azucarera) .Se puede obtener cerca de 70L EtOH/ton de caña y 9L EtOH/ton de melazas .El microorganismo mas utilizado es el Saccharomyces cerevisiae por su capacidad de hidrolizar la sacarosa de la caña de azúcar para su conversión

4 hasta glucosa y fructuosa se puede dar en condiciones anaeróbicas en pequeñas cantidades de O2. LYND, LR (2002), Investigo sobre “Alcohol apartir de Biomasa

Lignocelulósica”, los materiales que mas se han investigado son residuos forestales, de la industria papelera y residuos de sólidos urbanos. El complejo Lignocelulósico esta compuesto de una matriz de carbohidratos de celulosa y lignina enlazada por cadenas de hemicelulosa el pretratamiento tiene que desintegrar esta matriz par que la celulosa redusca su grado de cristalinidad y aumente la célula amorfa que es la que se requiere para el posterior ataque enzimático con células hexogenas la cual hace que se de una solución de glucosa que después hará que se convierta en EtOH mediante microorganismos. III. JUSTIFICACIÓN: III.1. JUSTIFICACIÓN TEORICA: El Etanol en mezcla con la Gasolina reduce las Emisiones de Monóxido de carbono (CO), sin incrementar la de Óxidos Nitrosos (N0x) ya que de acuerdo con la Asociación de Recursos Renovables de Canadá, el agregado de un 10% de etanol al combustible trae los siguientes beneficios: reducción de un 30% de las emisiones de monóxido de carbono y disminución entre un 6% y un 10% de reducción de las emisiones de dióxido de carbono a la atmósfera. III.2. JUSTIFICACIÓN TECNICA: En nuestro país la producción de papa se realiza en 6 meses con un promedio de 176.200 Ha, si consideramos el porcentaje de desperdicios del 3% por falta de transporte, almacenamiento y conservación tendríamos alrededor de 79.800 Toneladas de papa residual al año que podría ser utilizada en la producción de almidón, que sería de aproximadamente 15.960 Toneladas, que por hidrólisis enzimática se obtendría 15.162 Toneladas de azúcares fermentables y que por fermentación es posible producir alrededor de 50 millones de litros de alcohol. Una temprana experiencia de producción de vodka, con la cooperación de la República de Polonia, en el sur chico peruano, no prosperó por que la variedad de papa

amarillas e industriales.s. Pero en nuestros andes tenemos variedades de papas con más del 30% de materia seca.3.1. Esta papa "aguachenta" es típica de la producción costera. Por su color son blancas y de color y por el uso son amargas. III. Dentro de los componentes nutritivos el que se encuentra en mayoría es el agua que constituye en torno al 80% del total. Aspectos Generales. y la variedad requerida para la producción de papa exige sólo un 25% de materia seca. IV. variedades de mayor calidad se producen sobre los 3.5 utilizada tenía un alto contenido de agua. MARCO TEORICO: IV. así en la alimentación humana el producto se consume fresco o procesado. La fibra alimentaría representa 1-2% del total de . dando cuenta que este proceso no sólo ampliaría la producción industrial del energético sino que propone la exploración de otros mercados y la dinamización de la economía nacional.n. la glucosa y los preparados crudos de amilasas como resultado los mayores beneficiarios serian los pequeños productores de papa. solo 18 % de materia seca. almidón de papa. como fuente energética en la producción de etanol y el aprovechamiento de los productos intermedios del bioproceso como son la proteína unicelular.1. En el Perú se encuentran alrededor de 2000. IV. también se indicó que de los sobrantes de papa generados en el proceso de extracción de etanol carburante se podrían obtener subproductos de ágil comercialización como alimentos para ganadería y abonos orgánicos.m. Los tubérculos de papa tienen diversos usos. Requejo y Ortega (1996). JUSTIFICACIÓN SOCIAL: Dentro de éste contexto se sitúa la presente investigación que se inclina al aprovechamiento del recurso agrícola. Actualmente contamos con variedades nativas y modernas por su origen.1. Le siguen los carbohidratos que constituyen el 16-20% entre los que hay que destacar el grupo de los almidones que son polisacáridos complejos que se absorben como glucosa previa hidrólisis enzimática. PAPA.000 m.

4 .1. Origen: Nativa de los Andes y cultivada desde la época prehispánica.3. ALMIDÓN.2 .12 0.3.3 21.0 13. 1996) IV.8 0.6 1.5. siendo los más importantes la glucosa.9 1 .1 .44 .48 0.9 0.1.36.30.1.4.7 2 Media 3-10(mg/100gr) 0.7 . Ubicación Taxonómica. Cuadro 1: Principales componentes de la papa. (materia prima).86. Extendida a todo el mundo (Requejo y Ortega.53 0.2 – 41 0.2.25) Glicoalcaloides (Solanina) Grasa Azúcares reductores Total Carbohidratos Fibra Cruda Ácidos Orgánicos Ceniza Vitamina C Rango % 63.17 .0.0 0.05 23.1.3 . Distribución: Costa y sierra peruanas. rango y media. Composición química de la papa. Componentes Agua Sólidos totales Proteína (Nitrógeno total + 6.0 .6 0.2.9 13.6 la papa y se encuentra preferentemente en la piel. Género: Solanum Especie: Solanum tuberosum Familia: Solanáceas.1 10-25(mg/100gr) Fuente: Mataix. . IV. (1997) IV.02 .54 mg/100gr 75.20 0. fructosa y sacarosa.71 0.

Industrialmente se le obtiene por vía húmeda a partir de ellos. insípido. Se presenta como polvo blanco fino. forma.1. hilio o núcleo. la diferencia entre harina y almidón de papa es la papa entera que se le ha quitado el agua y se ha molido para obtener la harina. El almidón es insoluble en agua fría. Para su caracterización se toma en cuenta: tamaño (aprox. Es el producto de asimilación más importante de la fotosíntesis y constituye la principal sustancia de reserva de los vegetales.2. El almidón se obtiene después de romper el tejido. da glucosa como producto final de la hidrolisis total. (2006). cebada (Hordeum vulgare)  Leguminosas (legumbres): porotos (Phaseolusvulgaris). Probablemente no existe otro compuesto orgánico tan ampliamente distribuido en los vegetales como el almidón. granos simples o compuestos y aspectos a la luz polarizada. en agua caliente se hincha formando engrudo. avena (Avena sativa). lentejas (Lens sculenta). por ejemplo al pasar la papa por un extractor de jugos sale un jugo con un residuo lechoso ese residido lechoso es el almidón el cual debe sufrir varios lavados para eliminar los contaminantes y obtener un almidón blanco. Químicamente el almidón o fécula es un polisacárido homogéneo que esta formado por una mezcla de dos polisacáridos estructuralmente diferentes: amilosa y amilo pectina. IV. arroz (Oryza sativa). ESTRUCTURA DEL ALMIDÓN.2.2. Espinosa (2004). 2150 u). arvejas (Pisum sativum).7 Espinosa (2004). Martínez. . El almidón se encuentra en abundancia en:  Graminneas (cereales): trigo (Triticum sativum). estratificaciones. maíz (Sea mays). constituido por granos característicos microscópicamente para cada especie.  Solanáceas: papas (Solanum tuberosum). se torna de azul a azul violeta con sol. IV. centeno (Secale cereale). CARACTERÍSTICA Y PROPIEDADES. etc.

2006) Figura 1: Estructura de la amilosa CH2OH O HO O CH2OH O HO OH O CH2OH HO OH O O OH O o Amilopectina. Está también constituido por unidades de D (+)-glucosa. sirve a nuestro organismo de nutriente y es utilizada para diferentes transformaciones metabólicas. este se separa en dos fracciones: una dispersable. se puede decir que el almidón está constituido por unidades de D(+)-glucosa enlazadas α-1. Al tratar el almidón con agua caliente. que se conoce como amilosa y otra no dispersable. Amilosa 20 % Amilopectina 80 % H2O Almidón Δ Los dos constituyentes del almidón difieren en diversos aspectos y por tanto los consideramos por separado.4. Amilosa es una molécula lineal compuesta por 250 a 300 unidades de  a -D-glucopiranosa enlazadas por uniones 1-4 (Martínez. Nuestras enzimas hidrolizan los almidones hasta sus unidades constituyentes de glucosa. la cual.8 Como primera aproximación. con enlaces . como ya hemos expresado. que se conoce como amilopectina. que es la mayoritaria. o Amilosa.

Cuadro 2. (Martínez.09% 0. pero las cadenas son de 1000 unidades o más y presentan ramificaciones cada 25 unidades α-1. de masa moleculares gradualmente menores.9 α-1. etc. que se conocen como “Dextrinas” que se utilizan en el acabado de tejidos y en la fabricación de pegamentos.2.6 en los puntos de ramificación. Composición del almidón de papa. 2006) Figura.4.3. O O HO OH HO CH2OH O CH2OH O OH O O H2C HO OH O HO OH O CH2OH O O IV. P Análisis típico el 80% el 20% 0.2 Estructura de la amilopectina.30% 0.02% 0. (2006) . La hidrólisis de la amilopectina van produciendo mezclas de Oligosacáridos. Componentes Almidón Agua Ceniza Arena Proteína Fósforo.07% FUENTE: Martínez.

8 mg de ácido acético Máximo 6.3. Para bebidas alcohólicas. y tiene muchas aplicaciones industriales.10 IV. que arde fácilmente dando llama azulada y poco luminosa. como uva. en laboratorios y en el hogar. anticongelante y como producto químico. y luego se concentra esta mezcla por destilación fraccionada. ya que se utiliza como combustible.2. IV. El alcohol etílico es uno de los compuestos orgánicos usados en la industria. primero se obtiene alcohol etílico mezclado con agua. (Ward. 1991). aguardiente. agente extractivo. papa. Se obtiene por destilación de productos de fermentación de sustancias azucaradas o feculentas. IV..3. como vino. Etanol (Producto). Es un líquido incoloro. etc.1. Actualmente tiene una extraordinaria importancia comercial e industrial. CARACTERISTICAS DEL ALCOHOL ETILICO. Su fórmula química es CH3-CH20H. Se le denomina también Alcohol etílico cuya molécula tiene dos átomos de carbono. prácticamente todo el alcohol etílico que se consume es una mezcla de 95% de alcohol y 5% de agua. 1991). melaza. APLICACIONES Y USOS. El alcohol etílico rectificado deberá tener las siguientes características: CUADRO 3. Cualquiera que sea su método de preparación. Se . Forma parte de muchas bebidas. cerveza. disolvente. remolacha.3.8120 a 20ºC 1 mg/100 alcohol a 1000 ºGL Máximo 1 .5 mg de acetato de etilo Máximo 1 mg Fuente: Normas y Tecnología (Ward. Grado alcolhólico volumétrico Densidad relativa máxima Residuo no volátil máximo Acidez para 100 ml de alcohol a 100 ºGL Esteres por 100 ml de alcohol a 100 ºGL Aldehídos por 100 ml de alcohol a 100 ºGL 96° GL a 20°C 0. de sabor urente y olor fuerte.

como combustible. Disacáridos como la sacarosa y maltosa que son fermentadas por Saccharomyces. di o tri Sacáridos. La industria de las fermentaciones utiliza como fuente de origen para el proceso a casi todas las materias primas que poseen carbohidratos en su constitución (Silva. etc.4. en curaciones y como fuente de energía calorífica. Otros complejos enzimáticos intervienen cuando se degradan otros tipos de azucares: • • • Pentosas como la xilosa y arabinosa. • • Uso Industrial: Es ampliamente utilizado para la elaboración de licores. que producen alcohol por acción de algunas levaduras del género Torula. • Uso Domestico: Es ampliamente utilizado por los pobladores como desinfectante. lo que muestra que la fermentación incluye otras reacciones secundarías. productos medicinales.4. La fermentación es llevada a cabo generalmente por levaduras del género Saccharomyces realizándose por acción de un complejo enzimático llamado enzimático que permite transformar las hexosas en alcohol y C02. (Ward. barnices. También se producen glicerol y ácido succínico. películas fotograficas. 1991). lacas. jabones. cosméticos. PROCESOS FERMENTATIVOS. licores. pinturas. PROCESOS DE OBTENCIÓN DE ALCOHOL. Polisacáridos como el almidón.1. Uso Comercial: El alcohol es actualmente un producto en potencia como energía convencional y de aceptación en el uso de combustible para automóviles. IV. como productos de uso doméstico. podrán ser fermentados siempre que se hidrolice previamente en mono. IV. celulosa y otros. azúcares fermentables.11 utiliza en las industrias de perfume. 2000) . Es un proceso bioquímico mediante el cual ciertos microorganismos metabolizan las moléculas de azúcar produciendo etanol y CO2. dextrina.

12 Una de las formas de obtener alcohol etílico es mediante la fermentación de mostos azucarados de acuerdo a 1a ecuación establecida primero por Lavoisier1787. que establecieron el desdoblamiento de los azucares por la ecuación química siguiente: C12H22011 + H2O C6H12O6 + 6 O2 C6H12O6 C2 H5OH + 3 O2 2 (C6H12O6) x 6 CO2 + 6 H2O 6 C2 H5OH + 2 CO2 2 CO2 + 3 H2O Metabolismo oxidativo (formación de Biomasa) Metabolismo fermentativo (formación del alcohol) Metabolismo oxidativo del etanol (formación de biomasa) En la práctica se comprueba que el metabolismo de la glucosa es mucho más compleja. 1980). ya que según las cantidades ambientales. IV. Clasificación de acuerdo al medio donde se desarrollan. Es el proceso donde se suministra oxígeno al sistema y se desprende CO2. (Jorgensen. En general las fermentaciones aeróbicas pueden representar de la siguiente manera: m. o + Elementos Nutrientes + O2 C02 + Productos + m. viscosidad. a) . 1995). temperatura. levaduras. el metabolismo puede ser parcialmente fermentativo o parcialmente oxidativo (BRUSHMAN. luego Gay-Lussac en 1820 y corregida por Dumas en 1840. .Los nutrientes son: Carbono. magnesia. . sodio. tejido celular.Los microorganismos son: Bacterias.o . fósforo.4.Las condiciones adecuadas para su desarrollo son: pH. hongos. La fermentación Aeróbica. hidrógeno azufre. . oxigeno disuelto y la segunda es un proceso en el cual no necesita oxígeno.2.

Cuando no hay oxígeno. sus condiciones suaves de reacción y la ausencia de reacciones secundarias han hecho que las amilasas sean los catalizadores usados para esta tarea. en vez de agua. se debe incluir una etapa adicional de hidrólisis (rompimiento. Alcohol A Partir Del Almidón De La Papa. el lugar que ocupa el oxigeno atmosférico es reemplazado por sustancias inorgánicas oxigenadas. (Nigam y Singh. pero la especificidad de las enzimas. 1995). . como los sulfatos y nitratos. ni siempre se obtienen los mismos productos finales.3. provocando su muerte. en muchas formas de vida se detiene el mecanismo celular de respiración aeróbica. Por ello. como en ciertas bacterias. (Jorgensen. El almidón fue tradicionalmente hidrolizado mediante ácidos. pero en otras. En ella. lo que implica una relación estequiométrica de 9:10. además del dióxido de carbono. A diferencia de la respiración aeróbica. 1995) IV. en la anaeróbica no existe un solo grupo de reacciones químicas que la describan. El producto de esta etapa o licuefacción es una solución de almidón que contiene dextrinas (oligosacáridos compuestos por varias unidades de glucosa) y pequeñas cantidades de glucosa. De cada 100g de almidón se pueden obtener teóricamente 111g de glucosa.13 b) La fermentación Anaeróbica. suelen ser sustancias inorgánicas. El almidón licuado se somete a sacarificación a menores temperaturas (60-70 ºC) con glucoamilasa obtenida de Aspergillus niger o de especies de Rhizopus la cual hidroliza las dextrinas hasta glucosa. Para la primera etapa de la hidrólisis de las suspensiones de almidón que tienen que ser llevadas a altas temperaturas (90-110 ºC) para el rompimiento de los gránulos de almidón. el cual se puede convertir en EtOH mediante las levaduras. el proceso se realiza por medio de un mecanismo al que los científicos bautizaron como respiración anaeróbica. Es un proceso en el cual no se necesita oxígeno.4. en tanto que los productos formados. Para obtener etanol a partir de almidón es necesario romper las cadenas de este polisacárido para obtener jarabe de glucosa. condición necesaria para el tratamiento enzimático. degradación) de este biopolímero.

1980).3%. Entre los minerales se tiene al: fósforo. Se ha propuesto la hidrólisis del almidón de la papa para obtener soluciones de glucosa mediante un reactor enzimático de membrana de fibra hueca con conversiones de 97. a medida que progresa la sacarificación. 1995). Nutrientes. etc. IV. amoniaco. magnesio. añadiendo unos 10 gr. ácidos grasos. (Nigam y Singh. Una vez terminada la transformación de la fécula. 2004). IV.4. El producto resultante de la fermentación se procede a destilar (TELLO. sulfato de amonio. los cuales se cuecen con 1. cuyo proceso se sigue mediante Ia reacción que da con el yodo (la coloración al principio azul cambia después a roja y al final del proceso ya no se observa coloración alguna). de levadura (preparar una pasta) se deja fermentar por espacio de 3 días. se enfría a 30 ºC y se procede a introducir en un frasco o recipiente de 3 litros. Se debe hacer notar que para el caso de las levaduras el fósforo es esencial para su metabolismo.4. manganeso.1. cobre. IV. aldehídos. papa dulce. Existen tres tipos de levaduras: (KRYACHKOV. el producto se hace cada vez claro. Se forma una pasta el cual se vuelve a cocer añadiendo agua durante 1/2 a 1 hora agitando para que todo el almidón o fécula. minerales y vitaminas.5 litros de agua y se pasan por un tamiz. Como constituyentes de las otras fuentes tenemos los azucares.14 Se ha reportado la producción de EtOH a partir del almidón como papa. .5. otra de nitrógeno. potasio. Fermentación Alcohólica A Partir De La Papa. cloruro de amonio e inositol. REGULACIÓN DE FACTORES DURANTE LA FERMENTACIÓN. aminoácidos. peptonas. Las Levaduras necesitan una fuente de carbono. Se requieren también de oligo elementos o activadores de enzima. azufre. zinc. Se corta en lonjas un kilo de papas. hierro.5.

La Invertasa. La Zimasa que transforme la glucosa y fructuosa formados. Levaduras de Destilería. sin perjudicar su calidad fermentativa. lípido. vitaminas. en donde permanecen bien como cepa uniformemente distribuida o bien corno anillo en la pared del recipiente o cuba de fermentación. Son aquellas que se desarrollan exclusivamente en el fondo del recipiente o cuba de fermentación. minerales y otras sustancias. El . B. (KRYACHKOV. Hay levaduras que soportan hasta el 11 % del alcohol etílico pero tiene el inconveniente que no fermenta todo el azúcar presente en el mosto a fermentar. (KRYACHKOV. que da lugar a que la sacarosa se hidrolize. Las levaduras contienen aproximadamente de 68-83% de humedad las mismas que están constituidas de sustancias nitrogenadas. Pero durante la fermentación es lanzada hacia las partes superiores del líquido como consecuencia de la formación de anhidrido carbónico. C. Levaduras bajas. 1980). en alcohol etílico y anhidrido carbónico.5 y ascender hasta un 14%. D.2. normalmente el contenido de nitrógeno varia entre 7 y 9 %. formando una molécula de glucosa y una molécula de fructuosa. C. (KRYACHKOV.15 A. Son aquellas que se desarrollan ascendiendo durante la fermentación hasta la superficie del líquido en fermentación. lo constituyen las proteínas puras alrededor del 10% se presentan en las bases puricas. La saccharomyces cerevisiae tiene dos enzimas: C. 1980). las cuales originan la fermentación alcohólica. carbohidratos. Levaduras altas. 1980). En realidad ésta zimasa está constituida por varias enzimas y co-enzimas.1. aun puede descender hasta 2. Es una variedad de la Saccharomyces cerevisiae que tiene la caracteristica de ser bastante estable y tolerar altas concentraciones de alcohol etílico (12%). Un elevado porcentaje que esta entre 64-76%. COMPOSICIÓN QUIMICA DE LAS LEVADURAS.

1998). IV.2. Además. acético y cítrico o cuando los mismos sustratos de crecimiento son ácidos o bases. (Salinas. En general. principalmente porque los microorganismos de una especie dada solo pueden crecer en un rango restringido de temperatura. con una consecuente reducción de los costos de esterilización. mientras no se inactiven sus enzimas. 1981) . Los psicrófilos presentan un rango de temperatura de 5 a 15°C. 1997). de modo que al consumirse el pH del medio cambiará de manera importante. Las levaduras se desarrollan entre 25 a 45°C.5 unidades de pH. las levaduras crecen en un intervalo de 3 a 6. Temperatura. (Scragg. Esto solamente es una generalización. Los microorganismos tienden a crecer en un intervalo limitado de pH y.5. cuando se forman productos ácidos como el ácido láctico. puesto que ciertas bacterias y levaduras crecerán aunque con menor rapidez a valores de pH tan bajos como 2. aún dentro de éste intervalo frecuéntemente cambian su metabolismo como resultado de un cambio de incluso 1-1. IV.3. Así las fermentaciones de levaduras con frecuencia operan a un pH tan bajo como económicamente sea posible para evitar la contaminación bacteriana. Estos diferentes intervalos de pH para el crecimiento. La temperatura afecta el crecimiento de manera notable. Durante las fermentaciones por lo general es necesario controlar el pH. (Quintero. nucleótidos y otros productos.16 4% en las pirimidinas y cerca del 15% de nitrógeno total se presenta en forma de aminoácidos. debemos mencionar que la temperatura también afecta el rendimiento durante la fermentación. pueden vivir en forma latente fuera de estos rangos.5. se pueden usar durante las fermentaciones para reducir la posibilidad de contaminación. los mesófilos de 25 a 40 ºC y los termófitos de 45 a 60ºC. su temperatura óptima es de 30 a 40ºC. pH.

Sin embargo.17 Cuadro 4. ºC 9-11 0. pues su ausencia o abundancia permite una selección tanto de microorganismos como de productos del metabolismo. IV. mínima y optima para la esporulación de algunas levaduras.5. Las levaduras pueden desarrollarse tanto en condiciones anaeróbicas como aeróbicas. LEVADURA Saccharomyces cerviciae S. disminuyendo el consumo de nutrientes o excluyendo selectivamente ciertos productos.5. ºC 35-37 29-32 27-29 31-33 33-35 Tmin.5.7-5 4-8 Topt. La dilución execiva del mosto a fermentar es antieconómica.Temperatura máxima. ºC 30 27. pero la mas recomendable deacuerdo a las experiencias en las destilerías sugieren el empleo de la concentración de azúcar en el empleo del mosto para la fermentación sea del 12 5 en peso.4. IV.5 25 25 29 FUENTE: Prescot (2000) “Microbiología Industrial” Ed. validus S. (Quintero. como consecuencia de ello . El crecimiento microbiano es función de muchas variables y todavía no se establecen relaciones matemáticas que cubran esos rangos de operación o interrelaciones con ellas. turbidaus T max. El oxígeno merece mención especial. Si el mosto es demasiado concentrado el alcohol que se produce puede inhibir la acción de la levadura. lo que traería como consecuencia la prolongación del tiempo de fermentación y que no se convierte la parte del azúcar.5-4 0. 1981). Oxigeno. CONTENIDO DE AZUCAR: Se puede hacer muchas variaciones en los procedimientos de fermentación.5-4 4. pues la extraña perdida de un valioso espacio de fermentación. intermedius S. Aguilar. con el conocimiento actual es posible iniciar una fermentación y poco a poco a través de la experimentación ira mejorando y dirigiendo el crecimiento y el metabolismo microbiano en el sentido que se desee: aumentando el rendimiento. lógicamente las rutas metabólicas serán diferentes. pastorianus S.

el mosto se precalienta en los tubos de un deflegmador (es una operación en la cual alguna mezcla de vapor generalmente saturado se someto a condensación parcial por medio de' enfriamiento por lo cual el vapor saliente se enriquece en el componente más volátil.18 aumenta el volumen del mosto a destilar trayendo consigo un mayor costo de producción en la destilería. La destilación se puede efectuar en dos columnas de funcionamiento continuo. (Charley. diferencia entre los puntos de ebullición de los componentes de la mezcla. Concluye la fermentación a las 72 horas. mientras que en el caso anterior la finalización de la femetación es antes de las dieciocho horas. La alimentación del mosto previamente filtrada se efectúa mediante una bomba de tornillo rodante. esto es.5. La duración de los periodos de fermentación es muy variada según el método que se emplee. 2001) IV.6.1. (Márquez. (Charley. accionada por un mecanismo de Transmisión que permite la regulación continua de la velocidad en litros por hora. 2001) IV. Es una operación de separación basada en las diferencias de volatilidad relativa en una mezcla.6. IV. Cuando se prepara la levadura madre se observo que la fermentación es alta o tumultuosa con un gran desprendimiento de anhídrido carbónico iniciado al cabo de las ocho horas en vista de que la reproducción de las levaduras ha sido lo suficientemente para la conversión de azucares fermentecibles en alcohol: mientras que si se añade la levadura directamente a la cuba de fermentación tarda en reproducirse. por lo tanto la fermentación tumultuosa se inicia a partir de las dieciocho horas. 1998) . TIEMPO DE LA FERMENTACIÓN. Los vapores do esta columna pasan a la segunda columna de destilación del cual se obtienen vapores con contenido de 60% vlv en promedio de alcohol el cual es condensado totalmente utilizando un condensador total vertical y un condensador de fases. es un intercambiador de tubos vertical y cilíndrico) para posteriormente alimentarse en la parto superior de lo primera columna do destilación.6. Destilación. OPERACIONES DE DESTILACIÓN Y RECTIFICACIÓN.

La operación en la columna de rectificación se inicia con reflujo total a efecto do conseguir 01 perfil de temperaturas adecuado para obtener el producto. IV. un control adecuado de temperatura y pH adecuado. A propósito.. debe contar con dispositivos que permitan el suministro de substratos o de nitratos. por tanto un sistema no debe ser más complicado de lo que resulta ser necesario. se deben tener las condiciones necesarias para su esterilización y mantener la asépsia. formas de operar una columna intermitente: 1. FERMENTADOR. . Para cuyo efecto se debe cambiar la relación de reflujo en forma continua hasta alcanzar un valor máximo límite al funcionamiento de la columna de reflujo total. 1998) IV. 2. (Vargas y Condori 2000).19 IV. al cual se deberá proporcionar de un medio ambiente aséptico en el que únicamente se encuentran los microorganismos deseados. El diseño de un bio-reactor es específico para cada proceso biológico y su complejidad depende de los experimentos de proceso.1.. evacuando los productos y sub productos. El fermentador o bioreactor es un recipiente en donde se desarrolla procesos bioquimicos. Para el funcionamiento de cualquier bio-reactor. Es también una operación de separación basada en diferencias de volatilidad relativa y tiene por objeto eliminar el contenido de impurezas de la mezcla a niveles permisibles y al mismo tiempo elevar el contenido de alcohol de Ia mezcla hasta el punto Azeotropico (En la mezcla alcohol agua se forma un azeótropo y no es posible superar este punto por destilación ordinaria a presión atmosférica) teóricamente.2. Rectificación. existen dos.7.6.7. (Márquez. niveles apropiados de oxigeno disuelto.Rectificación a reflujo constante: Es en que la composición del destilado varía a mediada que se modifica la composición de la mezcla contenida en el calderin. y una buena agitación que permita mantener las condiciones uniformes en todo el reactor. TIPOS DE FERMENTADORES.Rectificación a producto constante.

. ALONZO. luego se procesa y después de. Además tomando encuenta el estado físico de la mezcla reaccionante. El equipo se mantiene operando en estado estable con una alimentación de reactivos y una descarga de productos constantes.  Heterogéneos. IV. dentro de ellos tenemos:   Tanque agitado Estacionarios b) Fermentadores Por Lotes Continuos. Los fermentadores de tanque agitados mantienen un sistema homogéneo Mediante agitación mecánica que provoca una adecuada dispersión y mezclado de los materiales inyectados consiguiéndose una mejor transferencia de calor para mantener la uniformidad de la temperatura. Columnas empacadas con enzima inmovilizada. se descargan los productos. quedando nuevamente el reactor disponible para iniciar otro ciclo. Descripción del Bioreactor Tipo Tanque con Agitación.20 Por su funcionamiento.-En los cuales las reacciones ocurren en una solo fase.fermentación para la producción de etanol a partir de almidón de papa usando . Torres de lecho fluidizado donde el flujo del medio mantiene suspendidos los microorganismos. IV.2.8. (Vargas y Condori 2000). (Vargas y condori 2000). De este tipo tenemos los siguientes:    Tanque Agitado. (2006) Describe el diseño y evaluación de las variables que gobiernan el sistema semicontinuo en dos etapas: hidrólisis . se tienen de dos tipos y son: a) Fermentadores Por Lotes Discontinuos. los fermentadores se pueden dividir en:  Homogéneos. y una rápida disolución de los gases burbujeados como el oxigeno en el aire. Diseño Y Puesta En Marcha De Un “Sistema Semicontinuo En Dos Etapas: Hidrólisis –Fermentación” Para La Producción De Etanol A Partir De Almidón De Papa Usando Simultáneamente Aspergillus Niger Y Saccharomyces Cerevisiae. Se operan cargando inicialmente el sustrato y la cantidad total de reactivos.7.Donde se presentan en dos o mas fases.

flujo volumétrico.Señala las variables objeto de estudio fueron: Velocidad de crecimiento. (2006). indica que dentro del biofiltro se encuentra primero el prefiltro que es una malla circular en alambre que soporta una capa de lana de vidrio de 3mm de espesor con el fin de retener las partículas más grandes como las dextrinas y el micelio de Aspergillus niger a 4 cm del prefiltro se encuentra el filtro de membrana de 0. Se . Para disminuir el tiempo de filtración y aumentar su eficiencia el biofiltro posee un desprendimiento lateral para la conexión a la bomba de vacío con su respectiva trampa. una para suministro de inoculo y de medio nuevo y otra para monitoreo de muestras y control de temperatura. concentración celular. Ks . garantizando la esterilidad del los hidrolizados de almidón que van al reactor de fermentación con la Saccharomyces cerevisiae. Concentraciones de biomasa y sustrato en el equilibrio. Cada reactor tiene una capacidad de 2 litros construido en vidrio con tapas esmeriladas con cuatro accesos. (2006). azúcares simples. La hidrólisis del almidón y posterior fermentación produjo cantidades significativas de biomasa. Determinando lo anterior se puede decir que se tiene la descripción experimental del cultivo continuo de acuerdo a la Teoría del Quimiostato para cada etapa del proceso. Productividad. Los microorganismos tipo nativo del Aspergillus niger y Saccharomyce cerevisiae utilizadas en este estudio fue suministrada por el Laboratorio de Investigaciones Microbiológicas de la Universidad Industrial de Santander. ALONZO. con resultados comparables a los del método clásico de monocultivo pero con tiempos de bioproducción inferiores. y enzimas como productos colaterales al etanol.2 micras el cual retiene las unidades reproductoras de Aspergillus niger. ALONZO. describe el Bioreactor semicontinuo que consta de un reactor por cada etapa del proceso. tasa de dilución como base para la determinación de la µmax . dos para la entrada y salida de gases. de 1 litro de capacidad en vidrio con tapa esmerilada y unido con los reactores por medio de conectores en vidrio provistos de válvulas de paso tipo bureta. Entre los reactores se encuentra el Biofiltro.21 simultáneamente Aspergillus niger y Saccharomyces cerevisiae. tiempo de generación. concentración del producto. sustrato limitante.

5. 500mL. El suministro de medio e inoculo nuevo. las . El segundo paso. FeSO4 . MgSO4. una vez trascurrido el tiempo de la hidrólisis es la Filtración de 500mL de hidrolizados eliminando Aspergillus niger y la dextrina limite con el fin de "esterilizar" el futuro medio para la fermentación de los azúcares en el tercer paso. hidrólisis. En cada experimento se realizaron los siguientes pasos: Primero hidrólisis del almidón de papa por Aspergillus niger a la concentración inicial de almidón indicada. (2006). 0. 0. KCl. ALONZO.22 realizaron 3 experimentos completos para concentraciones de almidón iniciales de 2. 4. 3. Se consideraron tres suministros para cada experimento a intervalos de 48 horas. ALONZO.01) y almidón de papa como fuente de carbono. 7H2O. En este ultimo paso el filtrado es recibido en el bioreactor de fermentación que contiene el inoculo de Saccharomyces cerevisiae en un medio de hidrolizado de almidón con el fin de eliminar la etapa de adaptación y arrancar en etapa de crecimiento exponencial para la producción de etanol. Para indica las condiciones de cultivo para la etapa de todos los experimentos la inoculación fue de aproximadamente 105 conidiosporas. para un volumen de 1 litro de cultivo y un tiempo de hidrólisis de 60 horas en la primera etapa y 48 horas después de cada suministro de medio nuevo. (2006). después el periodo de suministro se realiza cada 48 horas para un flujo volumétrico de 500mL/48 horas en las dos etapas. 1. para el bioreactor de hidrólisis se realiza una vez se hayan evacuado los 500mL de hidrolizado hacia el biofiltro transcurridas las 60 horas iniciales de hidrólisis.5. Aquarium Air Pump) con una tasa de volumen de aire aproximadamente de 90 litros por hora. El volumen total del medio fue de 1000 mL. indica las Condiciones para la etapa de fermentación. las concentraciones de las sales del medio de cultivo corresponden al medio mineral Czapek (composición. 0. conteo realizado mediante cámara de Neubahuer. K2HPO4. y 8 g/100mL respectivamente. Para todos los experimentos la inoculación fue de aproximadamente 106 levaduras. se suministró oxígeno al medio durante todo el proceso mediante bomba de acuario (Power 500. g/litro de NaNO3. 7H2O. conteo realizado mediante cámara de Neubahuer. El tiempo de fermentación alcohólica fue de 48 horas a condiciones anaeróbicas.

2002). 1963). Determinación de Carbohidratos Totales.3.8..O. IV. Los filtrados fueron utilizados para la cuantificación del alcohol los azúcares reductores y la glucosa.Pak. Determinación de Glucosa. (William. (Abouzied.). IV.Los Azúcares Totales son determinadas en muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Fenol . La Glucosa es determinada por el Método de Glucosa Oxidasa y peroxidasa utilizando el Kit de Sera . 1984) IV. de acuerdo a la metodología de la A.8. Las concentraciones de azúcares están indicadas para cada experimento al igual que los intervalos de muestreo. (Nielson.8.2.1. Los Azúcares Reductores son determinadas en muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Bernfeld. 1964. utilizando el Acido 3.8. Determinación de las concentraciones de Etanol. . La determinación de almidón se realiza mediante lecturas de absorbancias del complejo coloreado de yoduro-yodato más almidón a 640 nm contra una curva de calibración. IV. Cada muestra tomada fue filtrada con el fin de separar la levadura a través de dos capas de papel filtro cualitativo Whatman.8.C 9.5-dinitrosalicílico.23 concentraciones de las sales del medio de cultivo corresponden al medio mineral proveniente del cultivo de la hidrólisis una vez retirado el Aspergillus niger. IV. la fuente de carbono corresponde a los azúcares producto de la hidrólisis del almidón. La concentración del etanol fue determinada mediante el método de gravedad específica por picnómetro.6.012/80.8. El volumen total del medio fue de 1000 mL. Determinación del Almidón en el medio. La masa celular fue secada a 110°C con pesos constantes para evaluar la proteína unicelular.5.La determinación de nitrógeno total se realizó por el método de Kjeldalh.Acido Sulfúrico. IV. (Wistler.Determinación de nitrógeno y proteína en la biomasa.A. Determinación de los Azúcares Reductores.4..

respectivamente. . La presencia del promotor presentó significancia estadística entre los niveles utilizados.2 mg/kg favorece la producción de alcohol.8 mL/kgsustrato y un tiempo de 14 h.98 y una eficiencia de la fermentación de 0.5 h y para la sacarificación utilizar un período de 15 h. la concentración de sustrato y el tiempo de sacarificación. González y Córdoba (2006). por lo que se recomienda utilizar 0. una concentración máxima de alcohol de 10.0746 kgetanol/kgpapa.24 Estudio De Los Factores Que Afectan La Hidrólisis Enzimática Y El Proceso Fermentativo Para La Producción De Alcohol A Partir De Papa (Solanum tuberosum). estudiaron a nivel de laboratorio. un rendimiento de etanol con respecto al ideal de 0. de la concentración de las enzimas α-amilasa y amiloglucosidasa.33 % v/v. En la segunda etapa experimental realizaron el seguimiento cinético de la hidrólisis y se sugiere disminuir el tiempo de acción de la enzima αamilasa a 0. se encontró que el valor máximo de torque requerido para la agitación en el proceso de gelatinización fue de 11 N·cm y de 1 N·cm para la dextrinización y la sacarificación. IV. estudiaron el efecto de la concentración de células y la presencia de biotina como promotor de la fermentación. La concentración de la enzima amiloglucosidasa y el tiempo de sacarificación no presentaron significancia estadística. Se encontró que la concentración de células no es significativa y se recomienda utilizar una concentración de 50 millones células/mL. En la etapa del seguimiento cinético de la fermentación. a fin de determinar las mejores condiciones para producir alcohol. Al evaluar el efecto de cuatro concentraciones del promotor. se observó que la concentración de 0.9. se obtuvo un consumo de azúcares reductores de 91 %. (González y Córdoba. Se determinó que el efecto combinado entre las concentraciones de la enzima α-amilasa y el sustrato presentó significancia estadística. 2006). Además. la hidrólisis enzimática y la fermentación de la papa (Solanum tuberosum). En la fermentación alcohólica del sustrato hidrolizado. El rendimiento de etanol para el proceso global fue de 0.91. la conversión a azúcares reductores se ve favorecida al utilizar los valores de 0.8 mL/kgsustrato y 20 % respectivamente. En la primera etapa experimental se analizó el efecto sobre la conversión a azúcares reductores.

con una agitación de 150 r/min. se colocó una masa conocida del sustrato en el recipiente destinado para la hidrólisis. expresado como masa de azúcares reductores producidos por unidad de masa de sustrato.8 mL/kgpapa seca y 1. Con un baño térmico se elevó la temperatura de la mezcla hasta 95 ºC y se llevó a cabo el proceso de dextrinización por un período de 2. Para lograr esto. (González y Córdoba.2. Se utilizó un diseño factorial completo de 24 a dos niveles.9. Al final de esta etapa se debió enfriar la mezcla hasta 60 ºC y agregar HCl hasta alcanzar un pH de 4.8mL/kg papa seca) y amiloglucosidasa (0. se inactivó la enzima y se analizaron las muestras para determinar la cantidad de azúcares reductores. se le adicionó cloruro de calcio (40 ppm) y se llevó a un pH de 6.1. Evaluación de las condiciones para la hidrólisis enzimática de la papa. según la corrida aleatorizada del diseño experimental. Se compararon los valores de la variable de respuesta con el fin de encontrar las condiciones que maximizan la conversión del almidón en azúcares reductores. Se agregó la cantidad de amiloglucosidasa (AMG) que correspondiera según el diseño para continuar con la etapa de la sacarificación por el tiempo determinado. la variable de respuesta fue el rendimiento de azúcares reductores.5.6 mL/kg papa seca y 0. El objetivo de esta evaluación fue encontrar aquella combinación de concentraciones de las enzimas a-amilasa (0. (González y Córdoba. Terminada esta etapa. 2006). concentración de sustrato (razón de sustrato seco y agua. mediante un análisis de efectos.0 mL/kg papa seca). Cinética de las enzimas α-amilasa y amiloglucosidasa (AMG) en la hidrólisis enzimática de la papa.25 IV.5 h con una agitación constante de 225 r/min. .9. 15% y 20 %) y tiempo de reacción con la enzima amiloglucosidasa (14 h y 18 h). IV.5 para desactivar la enzima. 2006).

además se realizaron mediciones de temperatura y pH. Además se utilizaron los mismos métodos para la desactivación de cada una de las enzimas. 2006).9. 2006). se fija la velocidad de agitación a 225 r/min. El estudio consistió en hacer un seguimiento del requerimiento de torque durante la hidrólisis de la papa. una concentración de la enzima de α-amilasa de 0.8 mL/kgsustrato seco. Se tomaron muestras cada 30 min para la primera enzima y cada hora durante la sacarificación para determinar el comportamiento de la cantidad producida de azúcares. (González y Córdoba. El análisis consiste en varias etapas. . Se utilizaron las mejores condiciones obtenidas de la fase experimental de la hidrólisis enzimática.26 El objetivo de esta etapa fue realizar un seguimiento de la cinética de las dos enzimas utilizadas durante la hidrólisis de la materia prima. concentración de cloruro de calcio.16 y una relación de altura de líquido a diámetro de recipiente de 1. una concentración de la enzima de AMG de 0. en la que ocurre el proceso de sacarificación.39. una relación de altura de agitador a diámetro de agitador de 0. se utilizó una concentración de sustrato de 20 %. Para poder realizar esto. una primer etapa que inicia en el momento en que el recipiente se coloca en el baño de agua a una temperatura de 95 ºC hasta 10 min después de la adición de la enzima α-amilasa. un tiempo de sacarificación de 20 h y las mismas condiciones de pH. Estudio del requerimiento de torque en la hidrólisis enzimática de la papa. IV. agitación y tiempo utilizadas previamente en la dextrinización y sacarificación. El requerimiento de torque en la etapa de dextrinización se tomó cada 10 s. Para el seguimiento de la cinética de las enzimas a-amilasa y AMG. la segunda es inmediata y transcurre hasta finalizar la dextrinización y la última etapa.. temperatura. Para este estudio se realizó la hidrólisis enzimática de la papa. utilizando un agitador de hélice y se fija una relación de diámetro de agitador a diámetro de recipiente de 0.8 mL/kgsustrato seco.3. en la etapa de sacarificación cada minuto. en un volumen de 3 L. (González y Córdoba. para determinar el valor máximo y poder posteriormente utilizar esta información para el cálculo de potencia para efectos de cambio de escala.

00 1. se reguló el pH a un valor de 4. NUTRIENTE Nitrato de amonio Sulfato de Magnesio Fosfato monoacido de potasio Extracto de levadura CONCENTRACIÓN(g/L) 2. con una cantidad de jarabe de 200 g.00 1.4. duplicado.2 mg/kgsustrato hidrolizado) de la fermentación. previa realización de una curva de calibración. Al final de la sacarificación. con . 1998). (Araya.27 IV. Este jarabe se distribuyó en erlenmeyers de 250 mL.5 y se agregaron nutrientes a las concentraciones. utilizando cantidades semejantes a las reportadas. que funciona como una válvula reguladora de presión. pero utilizando recipientes de 3.00 2. cerrados. según un diseño factorial completo 22. que permita obtener el máximo rendimiento de etanol. El conteo de células se realizó con un microscopio y una cámara de Neubauer. expresado como la concentración de etanol (% v/v). Al finalizar la fermentación se inactiva el microorganismo. se centrifugó y se realizó la determinación del índice de refracción del destilado.00 Fuente: (González y Córdoba. se filtró el hidrolizado obtenido. cerevisiae (50 millones de células/mL sustrato hidrolizado y 100 millones de células/mLsustrato hidrolizado) y la ausencia o presencia de un promotor (0. Evaluación de las condiciones para la fermentación del sustrato hidrolizado.Concentraciones de los nutrientes a utilizar en la fermentación.9. El sustrato se preparó hidrolizando la harina de papa de la misma manera como se preparó en el estudio de la cinética de las enzimas. El objetivo fue encontrar aquella combinación de concentración del microorganismo S. Cuadro 5. 2006) La fermentación se realizó a una temperatura de 31ºC en un baño con agitación a 150 r/min.5 L para hidrolizar una masa de disolución de 3000 g.

2 mg/kgsustrato hidrolizado.2 y 0. se realizaron experimentos adicionales. Figura 3: Variación de la concentración de alcohol con el tiempo. el cual tiene un sistema de agitación. (González y Córdoba. 2006) IV. Se utilizaron las mismas variables fijas mencionadas en la sección anterior y se utilizaron 50 millones células/mLsustrato hidrolizado.0. a cuatro concentraciones de promotor (0. Para el seguimiento cinético se midió la concentración de etanol de azúcares reductores y la concentración de microorganismos. . Para evaluar el efecto únicamente de la concentración del promotor sobre la conversión de etanol. el tiempo de fermentación es de 30 h y se tomaron periódicamente muestras para los análisis. se preparó una suspensión de harina de 6 L de sustrato. es determinar los diferentes parámetros cinéticos del período de fermentación. calentamiento y/o enfriamiento y un puerto para toma de muestras. IV.1. González y Córdoba. según el método IT-008. 2006). que se inoculó con una cantidad de microorganismos de 50 millones células/mLsustrato hidrolizado y una concentración de promotor de 0. Se utilizaron las mismas condiciones en la primera evaluación de la fermentación. Al hidrolizado se le agregaron los nutrientes. obteniéndose un volumen de filtrado aproximado de 4. (González y Córdoba.5.28 la que se interpoló de ella la concentración de etanol en porcentaje en volumen. La fermentación se llevó a cabo en un reactor de 5 L.9.5 L y se dividió en dos porciones para realizar por duplicado la fermentación.9. Al finalizar la fermentación se tomó una muestra y se analizó en el Laboratorio de Control de Calidad de la Fábrica Nacional de Licores para determinar los congenéricos mediante HPLC. Seguimiento cinético de la fermentación en un reactor de 5 litros. la cual se hidrolizó.6. (2006). Para esta etapa. 0. Evaluación de la concentración del promotor en la fermentación de la papa hidrolizada. El objetivo del seguimiento a mayor escala.3) mg/kgsustrato hidrolizado.

En el caso de que cada . Los demás valores de las variables del proceso se mantienen constantes. Determinación de las variables y sus niveles. El número de experimentos que se deben efectuar es 2n donde n es el número de variables independientes de dicho proceso.10.1. (Grosz. DISEÑO DE EXPERIMENTOS PARA LA HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN DE PAPA POR VÍA QUÍMICA Y PARA LA FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA. se dan como un rango dentro del cual se determinan los niveles apropiados para el diseño.10. (Grosz. IV..29 FUENTE: González y Córdoba.El primer paso a seguir es la escogencia de las variables que puedan ser controladas durante el proceso y sus niveles mas adecuados. 1999). Los valores mas apropiados de las variables del proceso.10. (2006) IV. Diseño Factorial Completo.2. Después de una búsqueda bibliográfica y ensayos preliminares se consideran las variables más influyentes como independientes.Se utiliza en la planeación de experimentos que produzcan una información confiable en el menor número de ensayos. La variable dependiente o respuesta se simboliza como Y. 1999). IV. El nivel máximo se simboliza como (+) y el nivel mínimo como (-)..

la respuesta Y es el promedio de las dos respuestas. VI. VI. De acuerdo a los ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles máximos (+) y mínimos (-) para la hidrólisis del almidón (Grosz. Y1 = Promedio de la respuesta. V.1. Obtenidos los anteriores resultados se calcula los efectos simples. como se expone a continuación: Y1 = ( Y11 + Y12 ) 2 Y11. Determinar las características físico-químicas del alcohol proveniente de la fermentación del almidón de la papa. . 1999). Para poder determinar la precisión de la experimentación se hace un análisis estadístico utilizando experimentos de control.. “Obtener alcohol a partir del almidón de la papa” V. V. Objetivo especifico. Y12 = Respuesta del experimento y su replica.2. OBJETIVOS DEL ESTUDIO. Objetivo General. Con los datos del análisis estadístico se plantea el modelo matemático que describe la significación de las variables en el proceso. dobles y triples de las variables. Hipótesis General. • • • Determinar el % de rendimiento para la hidrólisis del almidón de la papa mediante una ecuación Determinar el % de rendimiento para la fermentación alcohólica mediante un modelo matemático.30 experimento se realice como replica. HIPÓTESIS.1.

Almidón de la papa (materia prima) VII. Variable dependiente. • La determinación de las características físico-químicas depende del etanol convertido en producto de la fermentación alcohólica del almidón de la papa. Variables Intervinientes. Alcohol del almidón de la papa (producto) VII. VII. • El % de rendimiento para la fermentación alcohólica depende de la temperatura. . • El % del rendimiento de la hidrólisis del almidón de la papa esta en función de la Concentración de [HCl].2.1.31 La obtención de alcohol por el proceso semicontinuo hidrólisisfermentación depende del almidón de la papa para la hidrólisis y del tipo de microorganismo para la fermentación (Saccharomyces cerevisiae) y de las condiciones de operación del bioreactor. Hipótesis especifico. Variable Independiente. -Tiempo de hidrólisis.3. Identificación de variables: VII. VI.2. concentración de azucares totales y pH con estas variables y con los resultados en el laboratorio se puede hallar un modelo matemático. la Concentración de Almidón y Tiempo de hidrólisis con estas variables y con los resultados en el laboratorio se pueden hallar dicha ecuación.

Horas (Vit) Temperatura 1.2.ºBrix 1.Cantidad de calor en la fermentación alcohólica 3. Tiempo .32 -Temperatura -Concentración de azucares totales -El pH.3. Papas andinas 2. Densidad 1.2. 1. proteína. cenizas. Cuadro 6: Operacionalización De Variables. g/ml. % Variables Intervinientes (Vit) Tiempo 1.1.% acidez VIII.Contenido Humedad.4. Grado Alcohólico. grasa.2 Rendimiento de la hidrólisis del almidón 1.3. pH . pH.4.1.Caracterización Química del almidón de la papa Variables dependientes (vd) Alcohol Etílico ÍNDICES 1. VARIABLES Variable Independiente (Vi) Almidón de la papa INDICADORES 1.Cantidad de azucares totales Acidez del fermento 1.1.1. Concentración . Recurso Agrícola 2. fibra y carbohidratos VALORACIÓN Kg % % 2.Caracterización Físico y química del alcohol obtenido 1.Cantidad de tiempo para la hidrólisis 2.Temperatura .ºC (Vit) Concentración de azucares totales (Vit) pH 1. UTILIDAD DE LOS RESULTADOS DE ESTUDIO. . -pH. 1. Rendimiento de la fermentación alcohólica -ºGL.

-Además el alcohol obtenido apartir de la fermentación del almidón de la papa se podrá utilizar como disolventes y/o como insumo Alcohol Etílico para la industria ya que el alcohol etílico es menos dañino para la salud.Tipo de estudio. b. .2. c. en su consumo. a. METODOLOGIA. IX. menos contaminante para el medio ambiente y traerá beneficios en el comercio. Recipientes. Durante el proceso de obtención del alcohol. Tamiz de 0. • • • • • • • Vaso de precipitados de 500ml.1mm. La levadura para iniciar la fermentación alcohólica es el Saccharomyces cerevisiae. Material Experimental Y Equipos. IX. iniciador.1. Material de laboratorio.33 -Los resultados del trabajo de investigación sirven para que tenga como referencia para la potencial industrialización del almidón de la papa y sobre la obtención de nuevas fuentes de energía. Pipetas Termómetro Papel filtro. Matraz de erlenmeyer. Materia prima En esta investigación se utilizara el almidón de la papa (solanum tuberosum) como materia prima la cual será adquirida en el mercado de puno. IX. Investigación aplicada basada en principios científicos tecnógicos.

• Balanza Analítica.3. IX. Cuarto: sedimentado. La extracción del almidón de la papa se realizó de acuerdo a los siguientes pasos: A. Se hace pasar la papa sin cáscara por un extractor de jugos. PROCEDIMIENTO. teniendo el cuidado de no retirar también parte del tubérculo con la cáscara. AISLAMIENTO DEL ALMIDÓN DE LA PAPA. Tanto el almidón como la fibra se secan en una estufa a 60ºC de temperatura y durante 24 horas. A. • Fermentador • Destilador. • Estufa (0-60ºC). Instrumentos y equipos de laboratorio • Autoclave. con el fin de retirar tierra y otras impurezas que trae la papa.34 d. • Refractómetro (0-32ºBrix). Quinto: el Secado. . (LEON. Tercero: licuado. consistió en decantar la lechada que sale del tamiz para separar los gránulos del agua A. IX. se realiza a mano. • Potenciometro (pH) • Alcoholímetro de laboratorio de 0-35 ºGL. e.1. de 10 litros de capacidad semi-industrial (construido de acero inoxidable) de la FIQ-UNA Puno.2. REACTIVOS QUIMICOS: • • Acido clorhídrico.3. A.3. Primero: Lavado. con el fin de extraerle todo el jugo que tiene la biomasa de la papa A. temperatura 120°C y a una presión de 15 psi.1.4. Segundo: pelado. 2005).5. Agua destilada.

IX. Ambas etapas. Los pasos que se siguen en la Hidrólisis de almidón por vía química son los siguientes: Se pesa una cantidad de almidón para un volumen de 800mL y para una concentración dada de ácido en un erlenmeyer de 1L que fue llevado al autoclave x . concentración del ácido y del almidón. condiciones de 15 psi. Tiempos de hidrólisis y de fermentación y Concentración de sustratos. (2000) . durante 30 minutos a una temperatura de 120°C. Con el almidón hidrolizado se obtienen azúcares fermentables mediante rompimiento de las cadenas de glucosa. 2005). (LEON. presión de reacción.3. FUENTE: Vargas Y Condori.35 IX.3. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA. terminada la hidrólisis se filtra al vacío y luego se determina la cantidad de azúcar obtenida. 2005). Figura 4: Reactor De Tanque Agitado. Agitación. controlando la temperatura de reacción.3. Temperatura. HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN DE PAPA. Los experimentos de producción de etanol en el Bioreactor están planteados de acuerdo a un diseño factorial de experimentos que permite el análisis estadístico de los resultados (LEON. hidrólisis y fermentación anaeróbica son realizadas en el Bioreactor de Tanque Agitado controlando las variables de pH.2. Se realizó Hidrólisis Acida.

Hidrólisis.4. Análisis De La Composición Química Del Almidón Extraído • Contenido de humedad. Control y análisis de la materia prima. Etanol. método gravimetrito. Destilación. Licuefacción. El almidón de la papa tiene las siguientes propiedades. IX.4.36 Figura 5: Diagrama de flujo en la obtención de alcohol del almidón de la papa. METODO DE ANALISIS. Ácido clorhidrico.1. Propiedades físicas organolépticas: • • • Color Olor Sabor IX.2. Fermentación.co Reactor Fermentador. Saccharomyces Cerviciae. . Almidón. Materia prima papa.4. IX.

gramos . se mide utilizando el picnómetro. % Re n dim iento = Azucar exp erimental *100 Azucarteor ica . IX.342 g peso de una unidad monomérica de almidón.Acido Sulfúrico.0.360 g de glucosa corresponden al peso de dos moléculas de glucosa que se hidrolizan de una unidad monomérica (maltosa) del almidón. por el método de Kjeldalh. 1999) Y = 360 g . .glu cos a * X .5. Se obtiene mediante la relación del Azúcar Teóricamente esperado con respecto al valor leído experimentalmente de acuerdo a la siguiente relación: (Grosz.g .de . Análisis fisicoquímico de la fermentación alcohólica.37 • • • Nitrógeno y proteína en la biomasa. según las lecturas de absorbancias del complejo coloreado de yoduro-yodato más almidón a 640 nm contra una curva de calibración.Teórico 342 .9 es la fracción que indica que el 90% del almidón hidrolizan a azúcar. pH medido con el potenciómetro. método del alcoholímetro para determinar el grado alcohólico.4.almidón Donde: . • • • • Sólidos solubles. método refractometrico (ºBrix). Determinación del El Porcentaje de Rendimiento de la Hidrólisis. Grado alcohólico.3. Almidón en el medio. Densidad.de . Los Azúcares Totales según muestras duplicadas de filtrados fungales con el Método de Fenol . .almidón * 0.de . IX. tomando un 10% en pérdida por almidón que no se alcanza a hidrolizar. Carbohidratos Totales.9 = Azúcar .

exp erimental * 100 Alcohol .g .alcohol 360 . maltosa.solución L * 184 . Grosz.de .79 En donde: Y = mL de alcohol teórico. Si se trata de X gramos de azúcar. (1999).38 IX. 500 es el volumen en mL medido para cada fermentación. (Grosz. .de .Teórico % Re n dim iento = IX. 1999) Alcohol . De acuerdo a referencias bibliograficas y ensayos preliminares las variables seleccionadas (n) y sus niveles máximos (+) y mínimos (-).7. 360 es el peso de una molécula de maltosa equivalente a dos de glucosa.de .de . 0. El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentación Alcohólica se obtiene mediante la relación entre la cantidad real de alcohol producido y la esperada teóricamente en base a la concentración de azúcar de la solución a fermentar.g . 184 es el peso de 4 moléculas de alcohol etílico que por fermentación se producen a partir de una molécula de maltosa o dos de glucosa. Determinación del El Porcentaje de Rendimiento de la Fermentación Alcohólica.m altosa * 500 0. el volumen de alcohol esperado teóricamente será: Y = X . la presión de 15 psi y el volumen de hidrólisis de 800 mL.6.m altosa 100 . Manteniendo constante la temperatura de 120°C.g . Se realizan tres experimentos de Control (simbolizados como “0” en la matriz del diseño) que no son más que tres replicas con valores de variable intermedio de a los valores superior e inferior como lo muestra la matriz del diseño con el fin de evaluar el límite de confiabilidad de los experimentos de la matriz de diseño factorial e identificar los efectos significativos de la acción de las variables en forma individual o conjunta.79 es la densidad del etanol en g/mL. Diseño De Experimentos para la Hidrólisis del Almidón de papa. Se expresa en porcentaje entre el volumen de alcohol determinado y el volumen esperado teóricamente.m .

Variables Z1: Concentración de [HCl] Z2: Concentración del Almidón [AL] Z3: Tiempo de hidrólisis Unidad (N:mol/L) (%) (min.075 0.10 0.2.7.10 0.05 0.075 0. OPTIMIZACIÓN DE LAS VARIABLES DE PROCESO.05 0.05 0.05 0.10 0.7.075 0.1. Codificación ºN de Experimentos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Z1 -1 +1 -1 +1 -1 +1 -1 +1 0 0 0 Z2 -1 -1 +1 +1 -1 -1 +1 +1 0 0 0 Z3 -1 -1 -1 -1 +1 +1 +1 +1 0 0 0 Concentració n de [HCl] 0.10 0.05 6 10 Superior 0. MODELO MATEMATICO PARA LA HIDROLIZIS DEL ALMIDÓN.075 Variables Concentración de Almidón 6 6 18 18 6 6 18 18 12 12 12 N=23=8 Tiempo de hidrólisis 10 10 10 10 30 30 30 30 20 20 20 Fuente: Elaboración propia IX.39 IX.025 . % Re n dim iento = a 0 + ∑a 0 x1 + ∑a 2 x1 x 2 + ∑a3 x1 x 3 + ∑a 4 x1 x 2 x 3 x1 = HCl − 0. CUADRO 7: Niveles de variables a investigar.) Niveles Inferior 0.10 18 30 Fuente: Elaboración propia Donde: N=2n CUADRO 8: Matriz de Diseño (2n) para la Hidrólisis del Almidón de la papa.

1.8. OPTIMIZACIÓN DE LAS VARIABLES DE PROCESO. flujo de aire. la concentración de sales. Manteniendo constante la concentración del inoculo. Diseño De Experimentos para La Fermentación Alcohólica. Codificación ºN de Experimentos 1 2 C1 -1 +1 C2 -1 -1 C3 -1 -1 Variables Azucares Temperatura totales 25 37 6 6 pH 4 4 . nivel inferior 6%).0. y el tiempo de la hidrólisis (96 horas). y la concentración de azúcares reductores totales (nivel superior 12%. Para la fermentación de los hidrolizados de almidón a alcohol por parte del Saccharomices cerevisiae fueron: La Temperatura (nivel superior 37°C.8. mediante buffers). CUADRO 9: Niveles de variables a investigar.0. nivel inferior 25°C).40 x2 = A −12 6 t − 20 10 x3 = IX. IX. Variables C1: Temperatura C2: Azucares totales C3: pH Unidad (ºC) (%) Mol/l H+ Niveles Inferior Superior 25 6 4 37 12 6 Fuente: Elaboración propia Donde: N=2n N=23 N=8 CUADRO 10: Matriz de Diseño para la fermentación Alcohólica. el pH (nivel superior 6. nivel inferior 4.

% Re n dim iento = b0 + ∑b1 X 1 + ∑b2 X 1 X 2 + ∑b3 X 1 X 3 + ∑b4 X 1 X 2 X 3 X1 = T − 31 6 X2 = AZU − 9 3 pH − 5 1 X3 = X. El presente trabajo de investigación se ejecutara en los laboratorios de procesos. XI. ÁMBITO DE ESTUDIO. RECURSOS HUMANOS. bioquímica y análisis instrumental de la facultad de ingeniería química.2. RECURSOS. XI.2. Nombre Higinio Zúñiga Laboratorista Función Tutor Asistente Dedicación semanal 20 30 Pago Mensual ($) 300 350 Total ($) 1750 1600 3350 XI. RECURSOS MATERIALES. Modelo Matemático para la fermentación Alcohólica.41 3 4 5 6 7 8 9 10 11 -1 +1 -1 +1 -1 +1 0 0 0 +1 +1 -1 -1 +1 +1 0 0 0 -1 -1 +1 +1 +1 +1 0 0 0 25 37 25 37 25 37 31 31 31 12 12 6 6 12 12 9 9 9 4 4 6 6 6 6 5 5 5 Fuente: Elaboración propia IX.1. .8.

35 Kg.15 3. Laboratorio 200 Un Un 150 150 Materia prima.5 8 Material De Laboratorio. 9 3.15 Reactivos Químicos: Acido clorhídrico Agua destilada Acido Sulfúrico Ioduro de potasio 2 1 1.5 3.42 Descripción Precio Unitario Unidad Cantidad Total ($) Infraestructura. Refractómetro Potenciómetro Alcoholímetro Picnómetro 80 80 50 30 Un Un Un Un 1 1 1 1 80 80 50 30 240 Tratamiento de la materia prima y obtención del almidón. Autoclave Bioreactor Balanza Analítica Destilador.5 mL mL mL mL 10 1000 10 10 2 1 1. papa 0. Lavado Pelado 5 10 Un Un 1 1 5 10 . Estufa 20 50 10 50 30 Un Un Un Un Un 1 1 1 1 1 20 50 10 50 30 160 Material de Análisis.5 3.

365 663. Papel bond Impresión Empastado Copias de tesis 1 5 3 4 millón Un Un Un 1 4 3 3 1 20 9 12 42 X.15 8. Tratamiento de la M.43 Licuado sedimentado secado 15 5 25 Un Un Un 1 1 1 15 5 25 60 Servicio de cómputo. Servicio de cómputo.65 XI. Material de análisis. Reactivos químicos. y obtención del almidón. Imprevistos (10%).3. Material del laboratorio. 3.P. Código A1 A2 A3 A4 A5 Descripción Revisión bibliografica Formulación del marco teórico Adquisición de equipos y materiales Implementación del laboratorio Revisión de estrategia experimental Duración (semanas) 2 1 1 1 1 .3 $ 150 3. RUBRO Infraestructura. PRESUPUESTO DEDL PROYECTO. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.5 160 240 60 42 66. Materia prima. TOTAL Tipo de cambio 1$ = S/.

(2006.. M. (1986). 31 de Agosto). Microbiol. 6(10).gov. Extraído el 18 de Agosto de 2007 desde http://www.co/revistas/recolqui/972602/972602abs. A. 52(5).44 A6 A7 A8 Ordenamiento de resultados Análisis de los resultados Redacción del informe final 1 1 2 Código Actividad Semanas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 XII. Abouzied. Determinación de la concentración de nutrientes necesaria para mejorar el rendimiento del proceso fermentativo de la Fábrica Nacional de Licores. R. M. (1998). . M. Costa Rica. Universidad de Costa Rica. 1055-1059. Escuela de Ingeniería Química. 557(3). Boletín de la Papa. 51-68.html Araya. El Banano verde en la producción de etanol. Afanador.icfes. Alonzo. Tesis de Licenciatura para la obtención del título de Licenciado en Ingeniería Química. 20-25. Direct Fermentation of Potato Starch to Ethanol by Cocultures of Aspergillus niger and Saccharomyces cerevisiae. Environ. Diseño y puesta en marcha de un "sistema semicontinuo en dos etapas: hidrólisis . BIBLIOGRAFÍA. Biol Waste. San José.fermentación" para la producción de etanol a partir de almidón de papa. 2005.

Convencional Legume Grains Proteins Sources. 09 de noviembre). J. Gulati M. España. Charley. Acori-Costa Rica. Ed. 197. (2001). 300(5). LR. M. (2004). Kryachkov.co/revistas/costarica. (1998) Aplication of transfer fundions to the thermal processing of particulate foods endosed in liquid medium. Asociación de Técnicos Azucareros. Márquez. (1980). Alcohol apartir de Biomasa Lignocelulósica. Ed.(5)188-190. A. Madrid. M. (1995). R. Ladish M. 189-205. Bothasth R. Ed. Mathematical Model of Cellular Energetics and Catabolism.R.(2002). Extraído 20 de Agosto del 2007 desde http://www. S. Acribia Zaragoza-España. 253-264. Ed. Food Technol. Biotechnol. pp. Microbiol. González.gov.html Grosz. Martínez. 38. España.45 Brushman. F. Acribia. (2006) Preparation of High Quality Protein-based Extruded Pellets Expanded by Microwave Oven.A. Limusa México. E (1980). (2004). Kohlman K. B. Cereal Chem. 1-17 Espinosa.J. (1999). Bioeng. Maíz como materia prima en una planta productora de alcohol etílico. Levaduras. Jorgensen. Journal of Food Engineering. Alcohol apartir de la caña de azúcar. Estudio de los factores que afectan la hidrólisis enzimática y el proceso fermentativo para la producción de alcohol a partir de papa (solanum tuberosum) 16 (1): 29-39. Ed. 83(4). y Córdoba. (1996). Tecnología del alimento. 36. . Hespell R. 1030-1040.. Microbiologia de las fermentaciones industriales.. Chávez. Alcoholes y otros productos de la fermentación.searchover. Procesos químicos y físicos en la preparación de alimentos. Bioresource Technol.Bioquímica Técnica. Reverte S. Boletín Informativo Lynd. (2006. 363-369. M. pp.

Teoría y Aplicaciones. (2004). (1981). Enzyme Microb Technol. Pp. 3(20). Noriega Editores México. Requejo y Ortega. Introducción a la tecnología de los Alimentos.A. J. Ed. Principales componentes de la papa.html Nielson. (1996). Ed. Acribia S.A Buenos Aires.46 Mataix. Diseño y construcción de un reactor fermentador para producción de alcohol Etílico. (1997). Temperatura optima para la esporulación de algunas levaduras. Fermentación Alcohólica A Partir De La Papa.yanuq. R. Extraído el15 de agosto del 2007 desde htttp://www.com/Articulos_Publicados/Articulo_Papas. 5(16). Ed. 1-11 Tello. (1998). M. Vargas y Condori. Microeconomía. Tesis de bachiller no publicada. (1963). (2000). P. Rapid determination of Starch : An index to maturity in starchy vegetables. Papa peruana. (2000). (1997). 15(3) Nigam P y Singh. Alimentos y Nutrición” Bromatología aplicada a la salud. Silva. pp.html Salinas. Ingeniería Bioquímica. Enzyme and microbial aystem involved in starch proccessig. 17: pp. D (1995). Sistemas Biológicos en procesos tecnológicos. 1-20 Sung y Cheng J.A. Producción de alcohol a partir del trigo. 40-45 .cl/sw_educ/cultivos/papa/papa. Microbiología Industrial. Ed. Bioresource Technol. Alambra México S. 28-29. D.471-473. pp.puc. Aguilar. Ed. El Ateneo S. Biotecnología para ingenieros. Industrial & Engineering Chemistry. (2002). E. rango y media. Composición del contenido en vitaminas y minerales de la papa. UNA-PUNO-PERÚ. S. 33-36. Limusa. 770-778 Prescot. Extraído el15 de agosto del 2007 desde http://www. Quintero. Scragg. Bioprocesos aplicado a la industria alimentaría UNSAAREQUIPA-PERÚ. (2000).

Methods in Carbohydrate Chemistry. (1984). L(1964). Academic Press. . S. Wistler. R. Ofificial Methods of Analysis of the Association Oficial Anality Chemist..47 William.