UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE

HUATUSCO

III UNIDAD

ESPECTROMETRÍA DE MASAS

Prof. Q.F. B. Leticia Hernández Galán

 Definiendo
El término espectroscopia viene del verbo griego "scopeo" que
significa "mirar, observar", mientras que espectrometría y
espectrofotometría vienen del griego "metron" que significa
"medida" y también "instrumento para medir", y del griego
"photos" que es "luz". Entonces,
1) un espectroscopio es un instrumento que te permite
OBSERVAR un espectro luminoso, pero no puede medirlo.
2) un espectrómetro permite MEDIR, es decir, la evaluación
cuantitativa de un espectro radiante, pero a veces el nombre se
emplea para la medición de espectros no luminosos (por
ejemplo el espectro de las ondas de radio), y
3) un espectrofotómetro genera su propia luz blanca y se usa
para MEDIR espectros luminosos de sustancias que esa luz
atraviesa.
 ESPECTROMETRÍA DE MASAS

La espectrometría de masas es una técnica analítica instrumental de gran

sensibilidad, capaz de identificar de forma inequívoca cualitativa y
cuantitativamente, cualquier tipo de mezclas de sustancias.
Esta técnica también permite determinar la masa molecular de un compuesto y
de los diversos fragmentos que resultan de la ruptura controlada del mismo.

Algunas de las aplicaciones de esta técnica son:

a) La determinación del peso molecular de compuestos orgánicos volátiles
b) La identificación de un compuesto o un fragmento del mismo mediante su
espectro de masas por comparación en bibliotecas de sustancias
c) El análisis cuantitativo de mezclas volátiles
d) La determinación de contaminantes en emisiones procedentes de fuentes
industriales de alimentos y de animales.
 ESPECTROMETRÍA DE MASAS
 La espectrometría de masas, como cualquier otra técnica espectroscópica,
tiene que ver con la interacción de la energía con la materia; en el caso
particular de la EM la energía que se emplea son electrones y el resultado
de la interacción es la ionización de la molécula

Esta ionización tiene como objetivo permitir la medición de iones derivados de

moléculas, y proporcionar así información de la identidad del analito.
 ESPECTROMETRÍA DE MASAS

Esta ionización de la molécula se da bajo el principio de que el

potencial de ionización de la mayoría de los compuestos
orgánicos oscila entre los 10 y los 20 eV, de manera que, si se
somete una molécula a un haz de electrones a 70 eV, se
promoverá la ionización de la molécula y se transferirá una gran
cantidad de energía a los electrones que se produzcan.
 ESPECTROMETRÍA DE MASAS
La energía transferida en este proceso de ionización es tal
que los iones formados son incapaces de estabilizarla y
estallan en una variedad de fragmentos ionizados, donde el
patrón de fragmentación resultante, así como los
iones residuales, constituyen el espectro de masas.

En principio, el espectro de masas de cada compuesto es único y

puede ser usado como se “huella química” para caracterizar el
analito.
 ESPECTROMETRÍA DE MASAS

 El principio bajo el cual opera la EM fue establecido por J. J. Thomson en

1913, en el que postula que:

 “Un haz de iones es desviado de su trayectoria por la presencia de campos
eléctricos y/o magnéticos. El grado de desviación que sufren es una
función directa en el valor de la relación masa a carga (m/z) que estos
posean.”
 ESPECTROMETRÍA DE MASAS

 La EM utiliza el movimiento de iones en campos eléctricos y

magnéticos para clasificarlos de acuerdo a su relación masa
-carga. De esta manera la espectrometría de masas es una
técnica analítica por medio de la cual las sustancias químicas
se identifican separando los iones gaseosos en campos
eléctricos y magnéticos.
VENTAJAS DE LA EM RESPECTO A LAS
TÉCNICAS SENCILLAS COMO UV-VIS

Esta técnica ofrece numerosas ventajas frente a las técnicas

espectofotométricas sencillas, entre las que destacan:

 Su sensibilidad, los límites de detección en esta técnica, para

muchos elementos, son varias veces más sensibles.

 Los espectros resultantes son más sencillos de interpretar y

generalmente únicos para cada especie analizada.

 La capacidad para medir relaciones isotópicas atómicas que no

tienen otros métodos.
 MASAS ATÓMICAS EN LA
ESPECTROMETRÍA DE MASAS

 Las masas atómicas que se utilizan en la

espectrometría de masas difieren de las que se
manejan en la mayoría de otras subdisciplinas
de la química analítica porque los
espectrómetros de masas distinguen la masa de
los isótopos, mientras que otros instrumentos
generalmente no lo hacen. Por lo que conviene
revisar de manera breve algunos términos
relacionados con las masas atómicas y
moleculares.
MASAS ATÓMICAS EN LA ESPECTROMETRÍA DE MASAS
UMA
 Las masas atómicas y moleculares se expresan generalmente en unidas de
masa atómica (uma) o en daltons (Da). El Dalton se define en relación con
el peso del isótopo del carbono 126C, al cual se le asigna exactamente un
peso de 12 uma. Por consiguiente, la uma (unidad de masa atómica), o Da
se define como un 1/12 de la masa de un átomo neutro de 126C, es decir:
 Masa átomo neutro de carbono 12
6 C = 12 g 12C / mol 12C
 6.022142 x 1023 átomos 12C/mol 12C
 (numero de avogadro)
 = 1.992646 x 10-23 g/átomo 12C
 =1.992646 x 10-26 Kg/átomo 12C
 Entonces, la unidad de masa atómica es 1 uma= 1 Da
 = 1/12 (1.992646 x 10-23 g)
 1 uma = 1.6605387 x10-24 g
 1 uma = 1.6605387 x10-27 Kg
MASAS ATÓMICAS EN LA ESPECTROMETRÍA DE MASAS

 En espectrometría de masas, a diferencia de otros ámbitos de la química,

interesa con frecuencia la masa exacta m de determinados isótopos de un
elemento o la masa exacta de los componentes que contienen un cierto
grupo de isótopos. Por tanto, es necesario poder diferenciar entre las
masas de compuestos como:
 
 12
C 1H4 m = 12.000 x 1 + 1.007825 x 4 = 16.031 dalton
 13
C1H4 m = 13.00335 x 1 + 1.007825 x 4 = 17.035 dalton
 12
C1H32H1 m = 12.000 x 1 + 1.007825 x 3+ 2.0140 x 1= 17.037 dalton
 
 Algunas veces, para mayor facilidad, se emplea el termino masa nominal,
que implica una precisión de un número entero en una medición de masa.
Por consiguiente, las masas nominales de los tres isómeros anteriores
seria 16, 17 y 17 da.
 ISÓTOPOS

 Se denominan isótopos a los diferentes tipos de átomos de un

mismo elemento cuyos núcleos difieren en su número de neutrones.
Así, los átomos que son isótopos entre sí se encuentran en el
mismo sitio de la tabla periódica pues tienen igual número atómico
Z (número de protones en el núcleo) pero diferente masa A (suma
del número de neutrones y el de protones en el núcleo).
 ISÓTOPOS
Abundancia relativa de los isótopos naturales de algunos elementos
Abundancia Masa
Elemento Isótopo Masa (u)
(%) atómica (u)
1
H 1,007825 99,985
Hidrógeno 1,00798
2
H 2,0140 0,015
10
B 10,0129 19,78
Boro 10,812
11
B 11,00931 80,22
12
C 12,0000 98,89
Carbono 12,01114
13
C 13,00335 1,11
Nitrógeno 14
N 14,00307 99,63 14,0067
16
O 15,99491 99,759
Oxígeno 17
O 16,99884 0,037 15,9994
18
O 17,9972 0,204
20
Ne 19,99244 89,97 20,190
Neón 21
Ne 20,99385 0,30
22
Ne 21,99138 9,73
35
Cl 34,96885 75,53
Cloro 35,457
37
Cl 36,96600 24,47
 ISÓTOPOS
 En la naturaleza, cuando hay más de un isótopo de un elemento, su
masa atómica química o masa atómica promedio (A) viene dado
por la ecuación
 A = Alpl + A2p2 + ... + Anpn
 Donde A1, A2, etc son las masas atómicas en daltons de los “n”
isótopos de un elemento, y p1, p2, etc son las abundancias
fraccionarias de estos isótopos en la naturaleza.

 Tomándo en cuenta lo anterior tenemos que la masa del atómica

química del carbono sería=
 A= (12)(98.89)+(13.00355)(1.11)
 = 12.01115
La masa atómica química es la que empleamos
regularmente, para la mayoría de las
determinaciones. La masa molecular química o
promedio de un compuesto es entonces la suma de
las masas atómicas químicas de los átomos que
aparecen en la fórmula del compuesto. Por lo que
la masa molecular química del CH4 es 12.0111 +
(4 x 1.0079) = 16.0434 Da.
La masa atómica o molecular expresada sin
unidades es el número de masa.
 RELACIÓN MASA-CARGA

 Este término es ampliamente utilizado en la espectrometría de masas, de

él depende la clasificación del ión por los campos magnéticos y eléctricos.
 Para un ion se refiere a la relación adimensional entre su número de masa
y el número de cargas fundamentales “z” que tiene. Por consiguiente, para
 12C1H + m/z = 16.0313/1 = 16.0313.
4

 13 C1H42+ m/z = 17.0346/2 = 8.5173.

 Como en la espectrometría de masas la mayoría de los iones presenta una

sola carga, el término relación masa-carga se puede acortar y utilizar el
término de masa. Aunque no es totalmente correcto emplear esta
simplificación, en espectrometría de masas es común.
 ESPECTRÓMETRO DE MASAS

 Un espectrómetro de masas es un instrumento que produce iones y los

separa de acuerdo con sus relaciones masa/carga, m/z. La mayor parte de
los iones que se estudian tienen una sola carga, de modo que la relación es
simplemente el número de masa del ion.
 ESPECTRÓMETRO DE MASAS
Aunque los fundamentos de las
medidas espectrales son
relativamente sencillos una vez que
nos hemos familiarizado con ellos,
la instrumentación, es decir el
espectrómetro de masas, no es para
nada simple, ya que es un montaje
electrónico y mecánico bastante
complejo que resulta caro (cientos
de miles o millones de pesos) tanto
en términos de adquisición inicial
como en operación y
mantenimiento, principalmente al
necesitar para su funcionamiento
analistas técnicos especializados.

Inversión que representa ganancias $

 ESPECTRÓMETRO DE MASAS

 El funcionamiento de un espectrómetro de masas se basa en las diversas

masas que tienen las moléculas, lo que le permite determinar que
moléculas están presentes en una muestra. Por ejemplo, se vaporiza sal de
mesa (NaCl) y se ioniza. Esto produce iones del sodio e iones del cloro
que tienen pesos moleculares específicos. Estos iones también tienen una
carga, que significa que debido a ella tendrán movimiento bajo influencia
de un determinado campo eléctrico.
 ESPECTRÓMETRO DE MASAS
Estos iones se envían a un compartimiento
de aceleración y se pasan a través de una
lámina metálica. Se aplica un campo
magnético a un lado del compartimiento que
atrae a cada uno de los iones con la misma
fuerza (suponiendo carga idéntica) y se los
desvía sobre un detector. Naturalmente, los
iones más ligeros se desviarán más que los
iones pesados porque la fuerza aplicada a
cada ion es igual pero los iones ligeros
tienen menos masa. El detector mide
exactamente cuán lejos se ha desviado cada
ion y, a partir de ese dato se calcula el
"cociente masa por unidad de carga". Con
esta información es posible determinar con
un alto nivel de certeza cuál es la
composición química de la muestra original.
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE
MASAS
 Debido al sinnúmero de aplicaciones que tiene un espectrómetro de
masas, y a pesar de los costos económicos, en el mercado se
dispone de varios tipos de espectrómetros de masas. En el siguiente
diagrama de bloques se muestran los principales componentes de
todos los tipos de estos instrumentos.

Bomba de vacío
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Sistema de entrada

 El objetivo del sistema de entrada es introducir una cantidad muy

pequeña de muestra (aproximadamente 1 micromol o menos) por lo
general en forma de gas, a pesar de que la muestra sea sólida se
puede analizar si es suficientemente volátil para emitir por lo menos
algunas moléculas gaseosas. Los espectrometros de masas más
modernos están equipados con diversos tipos de entradas capaces
de adaptarse a las distintas muestras, entre los que están: sistemas
indirectos de entrada, entradas por sonda directa, entradas
cromatográficas y entrada de electroforesis capilar.
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Cámara de ionización o fuente de iones
 En la fuente de iones o cámara de ionización la muestra se ioniza y
fragmenta. Esto puede conseguirse de varias formas: por bombardeo con
electrones, moléculas o fotones., ionización química, ionización laser,
ionización del campo eléctrico, etc.
 La salida de la fuente de iones es un flujo de iones positivos, que es lo más
común, o iones negativos gaseosos que son acelerados en el analizador de
masas.
En muchos casos el sistema de entrada y la fuente de iones están combinadas
en un único componente.

 La formación de iones del analito es el punto de arranque de un análisis por

espectrometría de masas. El alcance y utilidad del método espectrométrico
estan condicionados por el proceso de ionización.
 El aspecto de los espectros de masas para distintas especies moleculares,
depende en gran medida del método utilizado para la formación de los iones.
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Cámara de ionización o fuente de iones

 Fuentes de fase gaseosa: En estas primero se volatiliza la muestra y

luego se ioniza. Están generalmente restringidas a compuestos
térmicamente estables que tengan puntos de ebullición menores de
unos 500ºC. En la mayoría de los casos, estos requerimientos
limitan la utilización de las fuentes de fase gaseosa a compuestos
con pesos moleculares menores de unos 103 Daltons.
 Fuentes de desorción: En estas la muestra en estado sólido o
líquido, se transforman directamente en iones gaseosos. Son
aplicables a muestras no volátiles y térmicamente inestables.
Normalmente los espectrómetros de masas están equipados con
accesorios que permiten intercambiar ambos tipos de fuentes.
Son aplicables a compuestos que tienen pesos moleculares
superiores de 105 Daltons.
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Cámara de ionización o fuente de iones
Fuentes de iones para la espectrometría de masas molecular
Tipo básico Nombre y acrónimo
Fase gaseosa Impacto de electrones (IE)
Ionización química (IQ)
Ionización por campo (IC)
Desorción Desorción por campo (DC)
Ionización por electronebulización (IEN)
Desorción-ionización asistida por una
matriz (MALDI)
Desorción por plasma (DP)
Bombardeo con átomos rápidos (BAR)
Espectrometría de masas de iones
secundarios (EMIS)
Ionización por termonebulización (IT)
Agente ionizante
Electrones energéticos
Iones gaseosos reactivos
Electrodo de potencial elevado
Electrodo de potencial activado
Campo eléctrico elevado
Haz de laser
Fragmentos de fisión de 252Cf
Haz de átomos energéticos
Haz de iones energéticos
Alta temperatura
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Cámara de ionización o fuente de iones

 Las fuentes de iones se clasifican también en : fuentes duras y fuentes

blandas.

 Las fuentes duras confieren energía suficiente a las moléculas del analito
para situarlas en un estado energético altamente excitado. La relajación
posterior involucra la ruptura de enlaces, lo que genera iones fragmentados
con una relación masa-carga menor que la del ion molecular. El resultado
de la fragmentación del ion molecular es un espectro de masas de gran
complejidad, único para cada compuesto como una "huella dactilar" y que
permiten la identificación inequívoca del mismo. Un ejemplo muy
representativo de fuente dura es la de impacto de electrones, en la que la
muestra se bombardea con un haz de electrones de elevada energía.
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Cámara de ionización o fuente de iones

 Las fuentes de ionización blandas, por el contrario, producen relativamente

poca excitación de los iones, dando lugar a poca fragmentación. Por tanto,
el espectro de masas que resulta consta del pico del ion molecular y sólo
alguno o incluso ningún otro pico. Estos espectros suelen permitir la
determinación exacta del peso molecular de un compuesto. Entre las
fuentes blandas más empleadas están la de ionización química, que emplea
un iones gaseosos reactivos y la de electroaspersión (o lectronebulización).
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Cámara de ionización o fuente de iones

Naturaleza de
grupos
funcionales y
estructura de
analitos

Información
exacta de la
masa molecular
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Analizador de masas

La función del analizador de masas es la separación de los iones en funciónde su

relación masa/carga (m/z). El analizador debe ser capaz de distinguir entre
diferencias mínimas de masas.
Son análogos a los monocromadores ópticos.
La capacidad de un espectrómetro de masas para distinguir entre masas próximas
se expresa normalmente en términos de resolución (R), que se define como:
R = m/∆m

Siendo ∆m la diferencia de masas entre dos picos adyacentes y m la masa nominal

del primer pico (o la masa media de los dos).

La resolución que se requiere de un espectrómetro de masas depende de su

aplicación.
C2H4+, CH2N+, N2+ y CO+ = masa nominal 28, masas exactas 28.031, 28.0187,
28.0061 y 27.9949 Da. ( Resolución alta)
NH3+, CH4+ = masas exactas de 17 y 16. (Resolución inferior)
 ¿Qué resolución se requiere para separar los iones C2H4+ y CH2N+,
con masas de 28.0313 y 28.0187, respectivamente?

 Calcule la resolución necesaria para distinguir picos para:

a) CH2N+ (28.0187) y N2+ (28.0061)
b) C2H4+ (28.0313) y CO+ (27.9949)
c) C3H7N3+ (85.0641) y C5H9O+ (85.0653)
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Analizador de masas
 Los espectrómetros de masas se suelen clasificar en función del
principio de operación del analizador de masas. Una descripción
detallada del
 funcionamiento de los diferentes analizadores de masas excede por
completo
 el alcance de este tema. Solamente diremos que los más frecuentes
son los de sector magnético y los de cuadrupolo.
 PARTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS
Detector

 Detector. El detector convierte el haz de iones en una señal eléctrica

que puede ser procesada y almacenada. El detector más empleado
es el multiplicador de electrones.
 APLICACIONES DE LA ESPECTROMETRÍA DE
MASAS

1.- Elucidación de la estructura de moléculas orgánicas y biológicas.

2.- Determinación de la masa molecular de péptidos, proteínas y
oligonucleótidos.
3.- Identificación de los componentes presentes en cromatogramas en capa fina
y papel.
4.- Determinación de sucesiones de aminoácidos en muestras de polipéptidos y
proteínas.
5.- Detección e identificación de especies separadas por cromatografía y
electroforesis capilar.
6.- Identificación de drogas y sus metabolitos en sangre, orina y saliva.
7.- Pruebas para confirmar la presencia de drogas en caballos de carreras y
atletas olímpicos.
8.- Datación de especímenes arqueológicos.
9.- Análisis de las partículas de los aerosoles.
10.- Determinación de residuos de plaguicidas en alimentos.
11.- Control de compuestos orgánicos volátiles en el suministro de agua.
 ESPECTROS DE MASAS MOLECULAR
Para obtener este espectro se bombardea el vapor de etilbenceno con un
haz de electrones, originando la perdida de un electrón del analito y la
formación del ion molecular (que tiene la misma masa que la molécula).
Este ion esta bastante excitado y se relaja por fragmentación dando
lugar a iones de masas más bajas.

100
91
Pico base valor arbitrario
de 100%

60

106
Pico del ion molecular