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practica coprocultivo

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Universidad Anahauc Mayab Laboratorio de Ecologia Alumnos Pablo Alan Aguilar Gorostieta Daniel Americo Martin Valle Josue

Martinez

Indice: .

agar SS. En el aparato digestivo se encuentran una gran cantidad de microorganismos comensales. enfermedades entérales y virus en el aparato gastrointestinal. Marco teórico: Los coprocultivos se realizan para identificar parásitos.Resumen: En esta práctica realizamos el estudio de coprocultivo de heces fecales en un paciente sano para identificar dos de los microorganismos más comunes en el área clínica relacionadas con el tracto digestivo. y sigue albergando una variada población de microbios. Hicimos un seguimiento pleno de su desarrollo dividido en dos días. agar Sangre y agar VB y el caldo de tetrationato de sodio como medio de cultivo y así como el empleo de diversos materiales del laboratorio con nos ayudaron para llevar acabo este importante procedimiento. Éste se encuentra colonizado por microorganismos ya desde el nacimiento. . en esta práctica utilizamos agar MacConkey. tomamos datos sobres sus características físicas y las comparamos con las características propias del especie todo esto en base a lo aprendido en clase. El estudio se realizó mediante la obtención muestras de heces fecales del paciente recién obtenidas y con la ayuda de un hisopo recolectamos una pequeña muestra para después inocular la muestra en uno de los diferentes agares específico para cada bacteria. La ingestión de alimentos y agua supone cada día una oportunidad de colonización por nuevos microorganismos. la población microbiana permanece relativamente estable a no ser que se altere el equilibrio de la micro flora como consecuencia diversos factores. Escherichia Coli y Salmonella . Estos estudios los realizamos con forme a los pasos sugeridos en un laboratorio especializado. La materia fecal es la muestra que tiene más probabilidad de contener el mayor número y variedad de microorganismos.

como las bacterias productoras de ácido láctico de géneros como Lactobacillus y Streptococcus. Eubacterium. Este microorganismo representa una porción inferior al 1% de la población microbiana intestinal. los únicos microorganismos presentes son bacterias con tolerancia a los ácidos. El mayor número de microorganismos del cuerpo se encuentran en el intestino grueso. que poseen un efecto directo sobre la mucosa intestinal elevando la producción de fluidos principalmente en el yeyuno y el íleon proximal. En el intestino delgado se encuentran numerosas bacterias. hongos y parásitos. Para realizar este estudio. se puede obtener una muestra de heces por tacto rectal o con una torunda. y la familia de Enterobacteriace. Algunos son anaerobios como Petpstreptococcus y Prevotella. y Helicobacter pylori. Esta flora puede ser alterada por fármacos que neutralizan o disminuyen la producción de ácidos gástricos. Enterococus. pero rara vez causan enfermedad.Muchos enteropatógenos precisan de medios de cultivo específicos. Ésta última es un agente etiológico de gastritis y enfermedad ulcerosa. y por crecimiento dentro o cerca de las células de la mucosa intestinal causando disfunción. mientras . su identificación en el cultivo habitualmente se asocia a enfermedad. Las bacterias más frecuentes pertenecen a Bifidobacterium. Si no se procesan. Aunque algunos microorganismos que causan a menudo gastroenteritis como Salmonella y Campylobacter pueden subsistir como residentes asintomáticos a bajas concentraciones. Algunos de estos microorganismos pueden causar enfermedad de diversas formas como por producción de toxinas. Asimismo también pueden residir diversas levaduras y parásitos no patógenos. Si se mantienen a temperatura ambiente los enteropatógenos suelen morir mientras prolifera la flora comensal. debe mantenerse la muestra refrigerada o en medio de cultivo. Una vez obtenida debe procesarse o introducirse en medio de cultivo. Bacteroides. Por el contrario Eubacterium y Bifidobacterium son las bacterias que se encuentran más a menudo en el intestino grueso.En el estómago. pero se considera la bacteria aerobia responsable con mayor frecuencia de las enfermedades intraabdominales. E. Colli se halla en prácticamente en todos los seres humanos desde su nacimiento hasta su muerte.

este tipo de bacterias pueden causar diarreas después de que se administro algún antibiótico. difficile. En caso de sospecha de cualquier otro microorganismo como C. Otros deben procesarse en medio microaerofilo como Campylobacter yeyuni.que la mayoría de laboratorios solo utilizan de forma rutinaria los metodos adecuados para aislar Salmonella. A partir de este estudio también se pueden realizar otros exámenes de las heces tales como: Tinción de Gram y Frotis Fecal. debe especificarse .para que se procese en medio selectivo. el fin y el procedimiento de el estudio de coprocultivo de heces fecales hechas en el laboratorio así como sus indicaciones pre y post estudio. difficile están ahora presentes en el intestino. Colli . se puede llevar a cabo si se presenta diarrea severa. Shighella y Campylobacter. Principalmente se pide este estudio cuando se presenta algún problema gastrointestinal y cuando el médico sospecha que la causa es una infección. usos en la clínica . Algunos microorganismos precisan temperatura o medio anaerobio específicos. E. para observar si bacterias como la C. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Hallar las dos principales bacterias del tracto digestivo: Escherichia Coli y Salmonella utilizando el método de coprocultivo de heces fecales aislándolos en el laboratorio y el conocimiento para que este procesos se pueda llevar acabo de una excelente manera para así cubrir sus expectativas finales. así como el conocimiento que entorna a este procedimiento: OBJETIVO Es conocer la importancia. utilizando como base la búsqueda de dos importantes microorganismos: Escherichia Coli y Salmonella las cuales . Asimismo. relación con posibles diagnósticos y patologías. También se puede realizar si la persona ha estado tomando antibióticos por un período de tiempo prolongado. Aeromonas o Vibrio . persistente o recurrente sin una causa conocida.

describiremos de acuerdo a un seguimiento de dos días. Metodos y procedimentos: Se trajo al laboratorio una muestra de copro que fue PRESENTACIÓN DE RESULTADOS: Día 1: Agar VB Características Se observó microorganismos de aspecto mucoso y color característico verde MacConkey Observamos bacterias de Escherichia coli ya que tenían la característica se no presentar mucho moco y el color característico rosa. observando sus características físicas haciendo un comparativo de estas especies y su importancia médica. Sangre Se encontró microorganismo secos. trasparentes y .

.aparentemente con escaso moco. Salmonella-Shigella Encontramos bacterias semimucosas de color verde que no presentaba algún olor característicos y entonces deducimos que era posible S. SSP Día 2: Agar Salmonella-Shigella Características Aspecto mucoso con bacterias trasparentes pero con un aparente centro obscuro dado por el azufre absorbido del medio y un olor muy penetrante con sospechas de Salmonella SPP VB Observamos microorganismos con aspecto mucoso y de un color transparente.

Día 1: Día 2: ANÁLISIS Y DISCUSIÓN: Al encontrar indicios los microorganismo Eschericha Coli y Salmonella observamos sus características típicas de estos microorganismos y cumplieron con la mayorías de estas. Estos microorganismos se encontraban de manera normal en el organismo de este .

Al existir estos indicadores de manera excesiva es necesario que el encargado de este estudio indique pruebas Bioquímicas más específicas para cerciorarnos del nivel de concentración de los patógenos y su posible relación con la enfermedad sospechosa para la cual fue realizado este estudio. coli Salmonella y Shigella? R Prueba TSI (Triple Sugar Iron ó Triple Azúcar Hierro) El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite estudiar la capacidad de producción de ácido y gas a partir de glucosa. con objetivo de diferenciar entre: . Esta es una prueba específica para la identificación a nivel de género en la familia Enterobacteriaceae. CONCLUSIONES Este estudio fue un éxito de manera muy general ya que aprendimos las características mas importantes de este procedimiento que nos servirán más adelante como médicos y más cuando se nos presente un caso con un cuadro gastrointestinal severo y queremos cercioraros de que microorganismos se trata para poder llegar a un diagnóstico mucho mas preciso y con un tratamiento con antibióticos correcto y eficiente. Preguntas: 1. sacarosa y lactosa en un único medio. dando como resultado que la práctica haya sido un éxito de manera general de acuerdo a lo esperando.paciente que gozaba de buenas condiciones físicas aparentes al realizarse este estudio hecho en el laboratorio. ¿Cuáles son las principales pruebas bioquímicas para la identificación de E. Tambien permite la identificación de la producción de SH2.

Incubar a 35° durante 24 horas. ni lactosa ni sacarosa fermentadas. Pruebas Bioquímicas IMViC: y Agar Citrato . Tras retirar el alambre del fondo.y bacterias fermentadoras de la glucosa bacterias fermentadoras de la lactosa bacterias fermentadoras de sacarosa bacterias aerogénicas bacterias productoras de SH2 a partir de sustancias orgánicas que contengan azufre.Escherichia coli. y Pico ácido/fondo ácido: Glucosa y lactosa y/o sacarosa fermentadas. Para eso introducir la punta hasta 3 a 5 mm. Puede producirse SH2 o no. Posteriormente se debe medir el pH de los cultivos Resultados: y Pico alcalino/fondo ácido : Glucosa fermentada. y y y y Prodedimiento: y Inocular los tubos de TSI con punta (alambre recto). estriar el pico con un movimiento hacia uno y otro lado.lactosa ni sacarosa fermentadas. y Pico alcalino/fondo negro : Glucosa fermentada. producción de ácido sulfhídrico. Salmonela spp. Shigella spp. del fondo del tubo.

La utilización de citrato como única fuente de carbono se detecta en un medio de cultivo con citrato como única fuente de carbono mediante el crecimiento y la alcalinización del medio. Este aumento de pH se visualiza con el indicador azul de bromotimol que vira al alcalino a pH 7.6. y Procedimiento: . acompañado o no de un viraje del indicador al azul. El ensayo es positivo cuando se observa crecimiento a lo largo de la estría. Este es el principio activo de los reactivos de Kovacs y Ehrlich. y Resultados: y ( . Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptofano con producción de indol. La producción de indol es una característica importante para la identificación de muchas especies de microorganismos. La prueba de indol está basada en la formación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído.) Escherichia Coli Indol y El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. y y Procedimiento: Se inocula el agar inclinado en una sola estría en el pico. Incubar a 35°C durante 4 días. ya que se pueden producir falsos positivos por crecimiento a partir del medio de cultivo del inóculo. ácido pirúvico y amoníaco. Utilizar un cultivo de 24 horas en un medio sólido y cuidando no arrastrar medio de cultivo. El medio de cultivo utilizado debe ser rico en triptofano.y La utilización de citrato como única fuente de carbono es una prueba útil en la identificación de enterobacterias.

El desarrollo de un vivo color rojo fucsia en la interfase del reactivo y el caldo. H2 y CO2. añadir 5 gotas de reactivo de Kovacs por la pared interior del tubo. El rojo de metilo es un indicador de pH con un intervalo entre 6. segundos después de añadir el reactivo indica la presencia de indol y una prueba positiva. Un color . además de etanol.0 (amarillo) y 4.y Inocular el caldo triptofano con el organismo en estudio e incubar a 35°C durante 18 a 24 horas. acético y succínico.3 butanodiol. y y Resultados: (+) Escherichia coli Rojo Metilo y Una de las características taxonómicas que se utilizan para identificar los diferentes géneros de enterobacterias lo constituyen el tipo y la proporción de productos de fermentación que se originan por la fermentación de la glucosa. que se utiliza para visualizar la producción de ácidos por la vía de fermentación ácido mixta. etanol. Esto indica que la producción de ácido es suficiente para producir el viraje del indicador y el microorganismo fermentó la glucosa por la vía de ácido mixta. H2 y CO2. y y Procedimiento: Inocular el caldo Rojo Metilo con un cultivo puro de no más de 24 horas del microorganismo en estudio. La prueba es positiva si se desarrolla de un color rojo estable.4 (rojo). En la vía del butanodiol se forman cantidades menores de ácido (acetato y succinato) y los principales productos son el butanodiol. Incubar a 35°C durante 48 horas. En la fermentación ácido mixta se forman fundamentalmente láctico. Al finalizar este período. Luego de finalizado el tiempo de incubación agregar unas gotas del reactivo de rojo de metilo. Se conocen 2 tipos generales: La fermentación ácido-mixta y la fermentación del 2.

¿Todas las bacterias entéricas son capaces de causar enfermedades o algunas son mas frecuentemente patógenas que otras? . y y Resultados: (+) Escherichia coli Vogues Proskauer En la prueba de Voges-Proskauer se determina la vía de fermentación del butanodiol descripta en la prueba de rojo de metilo.anaranjado. Procedimiento: Inocular el caldo RMVP con un cultivo puro de no más de 24 horas del microorganismo en estudio. Este se revela en presencia de alfa-naftol dando un color rojo-fucsia. En medio alcalino y en presencia de oxígeno la acetoína es oxidada a diacetilo. intermedio entre el rojo y el amarillo no es considerado como positivo. El acetil-metil-carbinol (o acetoína) es un producto intermediario en la producción de butanodiol. Incubar a 35°C durante 24 horas.6 ml de alfa-naftol al 5% y 0. Luego de finalizado el tiempo de incubación transferir 1 ml del caldo RM/VP a un tubo limpio y agregar 0. Resultados: (-)Escherichia coli 2.2 ml de KOH al 40%. El desarrollo de un color rojofucsia luego de 15 minutos indica la presencia de diacetilo. Agitar el tubo cuidadosamente para exponer el medio al oxígeno atmosférico y dejarlo reposar durante 10 a 15 minutos. producto de oxidación de la acetoína y por lo tanto una prueba VP positiva.

3. proteínas de choque térmico. de las cuales solamente 100 pueden llegar a ser perjudiciales. proteína activadora de neutrófilos. 4.000 especies bacterianas diferentes. ¿Qué fatores de virulencia están involucrados en la colonización? se ha demostrado que éstos se encuentran regulados por diferentes condiciones del medio y de la célula existiendo un tráfico de señales entre la bacteria y las células del huésped colonizado que desembocan en la expresión de estos factores bacterianos.la gran mayoría de estas bacterias no son dañinas para la salud. interleucinas. adhesinas. Expresión de proteína icea Producción de adhesinas Interleucinas. lps. y muchas son beneficiosas. ¿Qué factores están involucrados en le desarrollo de los síntomas? y Proteína caga. y y y y y y y y y y Proteína caga Citotoxina vacuolizante bacteriana Producción y actividad de la enzima ureasa Lps Proteína activadora de neutrófilos Flajelo bacteriano Proteínas de choque térmico. . Se calcula que el ser humano tiene en su interior unas 2.

y si se toma diuréticos dejar de tomarlo por el tiempo que dure la enfermedad. no tomar anti diarreicos por que esto evitaría la eliminación de la bacteria del tracto digestivo. sin embargo. ¿Cuál es el tratamiento apropiado para los diferentes tipos de enfermedades? En e. coli por ejemplo se cura sola de 1 a 3 días. shigela 2 a 7 días. .5. lo que se debe hacer en estos casos es reponer los líquidos perdidos. salmonelosis. es importante consultar al médico antes de dejar de tomar algún medicamento.

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