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trabajando con bacterias

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MICROBIOLOGÍA

TRABAJANDO ENTRE BACTERIAS
DOCUMENTAL
ADRIAN POSE REBOLO

2011

CICLO MEDIO DE LABORATORIO

http://vozme.com/text2voice.php?lang=e s

1.

Introducción.

Microbiología industrial: estudia la explotación de los microbios para uso en procesos industriales. El empleo de microorganismos para la producción de compuestos útiles es una actividad antigua. Estos organismos han sido empleados por pueblos en todo el mundo para la modificación del desarrollo de la vida. La existencia de los microorganismos y su participación en transformaciones químicas fue demostrada por los trabajos pioneros de científicos como Louis Pasteur y Antonie van Leeuwenhoek. Éstos y otros descubrimientos fueron la base para el desarrollo de la microbiología industrial.Unode los avances más importantes fue la Biotecnología, consiste en utilizar bacterias, levaduras, hongos, algas y células animales o vegetales en cultivos cuyo metabolismo está orientado a la producción de determinadas sustancias. Así con la aplicación integrada de los conocimientos y las técnicas de la bioquímica, la microbiología, la genética y la ingeniería química surge la bioindustria capaz de producir, a partir de recursos renovables y disponibles en abundancia, gran cantidad de compuestos esenciales para la vida y para mejorar la condición del hombre. Una parte importante de los productos de esta industria son obtenidos por técnicas de fermentación de microorganismos (mo) considerando a estos como aquellas formas de vida cuyos individuos son de una magnitud tal que es preciso el uso del microscopio para su observación. Son de interés industrial bacterias, levaduras y hongos de cuyos cultivos pueden obtenerse ácidos orgánicos, alcoholes, antibióticos , por citar algunos ejemplos, siendo en algunas ocasiones el producto su propia masa (biomasa) o algún extracto de la misma.En este video vamos a representar alguno de los microoganismos de los que vamos hablar en este trabajo: http://www.youtube.com/watch?v=dKU5BspUA5E

1.1 CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS

La utilización industrial de un proceso microbiológico conlleva la necesidad de diseñar los equipos para el proceso y en primer lugar el recipiente donde se desarrolla y que llamamos reactor, tanque de fermentación o simplemente fermentador. El estudio cinético de los reactores nos permite conocer el volumen y flujo de operación y es por ello que se hace necesario contar con modelos matemáticos que describan el crecimiento y/o formación de productos en un cultivo del que conocemos su curva de crecimiento.

Leyenda: x .- concentración de mo t .- tiempo a-b .- adaptación al medio (fase lag) b-c .- aceleración del crecimiento c-d .- crecimiento acelerado (fase log) d-e .- desaceleración del crecimiento e-f .- crecimiento estacionario f-g .- aceleración de la muerte

Crecimiento poblacional: http://www.youtube.com/watch?v=1vWJAQ9WdUw En la fase de adaptación ocurren cambios que aún no se manifiestan como crecimiento, mientras en la fase log se alcanza la mayor velocidad de crecimiento.

El concepto de velocidad representa el cambio de cierto parámetro (x) por unidad de tiempo (t). Estamos familiarizados con la velocidad media DX/ Dt de un móvil que no es más que el cambio de posición por unidad de tiempo. Ej: km/h. Si el intervalo de tiempo es infinitamente pequeño obtendríamos la velocidad instantánea dx/dt . La velocidad de crecimiento será entonces el cambio de concentración de mo (x) por unidad de tiempo. En un cultivo de mo si dividimos la velocidad instantánea entre la concentración de mo en ese instante de tiempo obtenemos la velocidad específica de crecimiento (m)

m = 1/x dx/dt

Integrando la expresión:

mdt = dx/x mdt = dx/x

y para la fase log donde m es constante:

m

=

m (t2 t1) = ln x2 ln x1 m = (ln x2 ln x1)/ (t2 t1) o m = (ln x2/x1)/ Dt

Tiempo de duplicación .- se define como el tiempo en que se duplica la biomasa o sea: x2/x1 = 2 m = ln 2/Dt Dt = ln 2/m

Tiempo de generación .- se define como el tiempo en que se duplica el número de mo y para los casos como las levaduras Tiempo de generación » tiempo de duplicación En levaduras y bacterias el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de crecimiento puede verse por el modelo de Monod: m = mmax S/( Ks + S) donde:

mmax .- velocidad máxima de crecimiento específico del mo ante el sustrato limitante. (S) S .- concentración del sustrato limitante. Ks .- constante de saturación (que se interpreta como inversamente proporcional a la afinidad del mo por el sustrato limitante). Es fácil entender de la expresión de Monod que al irse agotando el sustrato disminuye la velocidad de crecimiento tendiendo a m = 0 cuando S tiende a cero.

Pero lo cierto es que puede hacerse cero sin que se agote el sustrato limitante y esto se puede deber a la formación de productos del metabolismo que a cierta concentración inhiben el crecimiento del cultivo. Un ejemplo de esto lo tenemos en la fermentación alcohólica (cultivo de Saccharomycescerevisiae en sustrato de sacarosa) donde se puede observar que se detiene esta sin agotarse el sustrato debido a que el propio etanol, a cierta concentración, actúa como inhibidor de l crecimiento En estos casos no puede aplicarse el modelo de Monod y han aparecido otros que tienen en cuenta la aparición de inhibidores como el que sigue:

m = mmax S/ (Ks + S + KsI/K i ) donde I muestra la influencia del inhibidor. Para los mo citados existe una relación inversa entre la velocidad específica y el tamaño de los individuos; para la levadura saccharomyces m » 0,4 h -1, para una bacteria Escherichiacoli que puede ser cinco veces más pequeña, su m » 0,9 h -1. Los hongos, mo de mayor tamaño, tienen velocidades de crecimiento mucho más pequeñas. Al igual que un agricultor guarda las simientes, en la industria fermentativa se requiere contar con cepas constituidas por cultivos puros de especies de mo de valor comercial en cuanto a estabilidad, productividad y velocidad de crecimiento donde la ingeniería genética presta actualmente un importante servicio a los microbiólogos que dedican su atención a los métodos de conservación de cepas. 1.2 IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DE LA MICROBIOLOGÍA La Microbiología como ciencia tiene aplicaciones importantes que producen impacto en nuestra vida cotidiana en las áreas: Médica:

- Identificación de los diferentes microorganismos de importancia médica. - Prevención y tratamiento de enfermedades infecciosas causadas por microorganismos en plantas y animales, incluyendo al hombre. Industrial: - En procesos de fermentación en la producción de antibióticos, ácidos orgánicos, aminoácidos, enzimas, disolventes, combustibles (Metano, etanol y otros). - Recuperación de recursos minerales, reforzada por acción microbiana. - Control de calidad de productos industriales: Biodeterioro de papel, madera, textiles, pintura y corrosión de metales. De los Alimentos: - Deterioro microbiano de los alimentos. - Métodos de conservación de los alimentos. - Producción de alimentos por métodos microbiológicos: Productos lácteos, fermentación del pan, bebidas alcohólicas, proteína de origen unicelular. Agrícola: - Fertilidad del suelo. - Enfermedades microbianas de las plantas. - Plaguicidas microbianos. Microbiología Ambiental: - Ciclos biogeoquímicos (Fijación del Nitrógeno en el suelo). - Interacciones entre las poblaciones: Simbiosis fijadora de nitrógeno, Micorrizas, - Bioluminiscencia. - Los microorganismos en sus hábitats naturales: Aire, Agua, Suelo y Ambientes Extremos (Aguas Termales, Lagos salados, y otros). - Reducción de la Calidad y la Contaminación Ambiental. - Procesos de Biorremediación. Es evidente que la Microbiología abar ca un campo muy amplio, cubriendo en particular la Microbiología Ambiental muchos aspectos relacionados con la calidad de vida actual. Pero de estés tratamientos solos nos quedaremos con los tres últimos para ver el desarrollo de los microorganismos en estés medios, que son el: industrial, agrícola y el alimentario.

Biotecnología
La BIOTECNOLOGIA?

http://www.youtube.com/watch?v=QCFtYkt4Q44&feature=rel ated

Las aplicaciones de la biotecnología son numerosas y suelen clasificarse en:

Biotecnología roja: Se aplica a la utilización de biotecnología en procesos médicos. Algunos ejemplos son el diseño de organismos para producir antibióticos, el desarrollo de vacunas más seguras y nuevos fármacos, los diagnósticos moleculares, las terapias regenerativas y el desarrollo de la ingeniería genética para curar enfermedades a través de la

manipulación génica.

Biotecnología blanca: También conocida como biotecnología industrial, es aquella aplicada a procesos industriales. Un ejemplo de ello es el diseño de microorganismos para producir un producto químico o el uso de enzimas como catalizadores industriales, ya sea para producir productos químicos valiosos o destruir contaminantes qu ímicos peligrosos (

También se aplica a los usos de la biotecnología en la industria textil, en la creación de nuevos materiales, como plásticos biodegradables y en la producción de biocombustibles. Su principal objetivo es la creación de productos fácilmente degradables, que consuman menos energía y generen menos desechos durante su producción.La biotecnología blanca tiende a consumir menos recursos que los procesos tradicionales utilizados para producir bienes industriales.

Biotecnología verde: Es la biotecnología aplicada a procesos agrícolas.

Un ejemplo de ello es el diseño de plantas transgénicas capaces de crecer en condiciones ambientales desfavorables o plantas resistentes a plagas y enfermedades. Se espera que la biotecnología verde produzca soluciones más amigables con el medio ambiente que los métodos tradicionales de la agricultura industrial. Un ejemplo de esto es la ingeniería genética en plantas para expresar plaguicidas,

con lo que se elimina la necesidad de la aplicación externa de los mismos, como es el caso del maíz Bt. Si los productos de la biotecnología verde como éste son más respetuosos con el medio ambiente o no, es un tema de debate. Biotecnología azul:

También llamada biotecnología marina, es un término utilizado para describir las aplicaciones de la biotecnología en

ambientes marinos y acuáticos . Aún en una fase temprana de desarrollo sus aplicaciones son prometedoras para la acuicultura, cuidados sanitarios, cosmética y productos alimentarios .

PRINCIPALES VENTAJAS DE LA BIOTECNOLOGÍA
y y

y y y

Rendimiento superior: Mediante los OGM el rendimiento de los cultivos aumenta. Reducción de pesticidas: Cada vez que un OGM es modificado para resistir una determinada plaga se está contribuyendo a reducir el uso de los plaguicidas asociados a la misma. Mejora en la nutrición: Se puede llegar a introducir vitaminas y proteínas adicionales en alimentos así como reducir los alergenos y toxinas naturales. Mejora en el desarrollo de nuevos materiales. La aplicación de la biotecnología presenta riesgos que pueden clasificarse en dos categorías diferentes: los efectos en la salud de los monos que son los humanos y de los animales y las consecuencias ambientales.

y y

Riesgos para el medio ambiente. Entre los riesgos para el medio ambiente cabe señalar la posibilidad de polinización cruzada . Otros riesgos ecológicos surgen del gran uso de cultivos modificados genéticamente con genes que producen toxinas insecticidas.

Riesgos para la salud
Existen riesgos de transferir toxinas de una forma de vida a otra, de crear nuevas toxinas o de transferir compuestos alergénicos de una especie a otra, lo que podría dar lugar a reacciones alérgicas imprevistas. Existe el riesgo de que bacterias y virus modificados escapen de los laboratorios de alta seguridad e infecten a la población humana o animal. Los agentes biológicos se clasifican, en función del riesgo de infección, en c uatro grupos:
y y

Agente biológico del grupo 1 : aquél que resulta poco probable que cause
una enfermedad en el hombre.

Agente biológico del grupo 2 : aquél que puede causar una enfermedad en
el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo po co probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Agente biológico del grupo 3: aquél que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo generalmente una profilaxis o tratamiento eficaz. Agente biológico del grupo 4 : aquél que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente una profilaxis o un tratamiento eficaz.

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Niveles de bioseguridad
El centro para el control y prevención de enfermedades ( CDC) de los Estados Unidos, especifica cuatro niveles de bioseguridad para el manejo de agentes biológicos, los cuales son conocidos como Niveles de bioseguridad del 1 al 4 , la clasificación de cada laboratorio identifica el riesgo biológico que representan para la salud los agentes que ahí se manejan. Los Niveles:

Nivel de Bioseguridad 1
En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro mínimo para el personal del laboratorio y para el ambiente. El acceso al laboratorio no es restringido y el trabajo se realiza por lo regular en mesas estándar de laboratorio. En este nivel no se

requiere equipo especial ni tampoco un diseño específico de las instalac iones. El personal de estos laboratorios es generalmente supervisado por un científico con entrenamiento en microbiología.

Nivel de Bioseguridad 2
Es similar al nivel 1 y en él se manejan agentes de peligro moderado hacia el personal y el ambiente, pero difiere del nivel 1 en las siguientes características: 1. El personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes patógenos. 2. El acceso al laboratorio es restringido cuando se está realizando algún trabajo 3. Se toman precauciones extremas con instrumentos punzocortantes contaminados 4. Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes o aerosoles se llevan a cabo en gabinetes de trabajo biológico.

Nivel de Bioseguridad 3
Este nivel es el que se encuentra en los laboratorios clínicos, de diagnóstico, algunos laboratorios universitarios y también de investigación, en el cual se realiza trabajo con agentes exóticos o que pueden causar un daño serio y potencialmente mortal como resultado de la inhalación o exposición a los mismo s (por ejemplo, el Carbunco). El laboratorio cuenta con un diseño y con características especiales y todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de protección. Sin embargo, se reconoce que no todos los laboratorios llegan a cumplir con las normas recomendadas para este nivel de bioseguiridad. En estas circunstancias, es aceptable el realizar las siguientes prácticas para poder seguir operando de una manera segura: 1. Ventilar el aire del laboratorio al exterior . 2. La ventilación del laboratorio se tiene que hacer con un flujo de aire direccional controlado. 3. El acceso al laboratorio está restringido. 4. Seguir el estándar de prácticas microbiológicas y equipamiento de segu ridad impuesto para el nivel de bioseguridad 2.

Nivel de Bioseguridad 4
Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes biológicos que representan un alto riesgo individual de contagio y que además son un riesgo para la vida. Los agentes nuevos que tienen un cierto parecido con los antígenos de los agentes conocidos que operan en el nivel 4, son confinados a este nivel hasta que se tiene suficiente información para confirmar que pertenecen a este nivel o bien pasarlos al nivel adecuado. El personal de estos laboratorios cuenta con entrenamiento específico y extensivo en el manejo de agentes infecciosos y cuentan con entrenamiento para trabajar en el ambiente estéril y controlado de los mismos.

Por lo regular los científicos que trabajan aquí, uti lizan trajes especiales que cubren la totalidad de sus cuerpos y que además tienen una leve sobrepresión para evitar que entren partículas infecciosas al mismo si es que éste llega a desgarrarse. Los laboratorios se mantienen con una presión de aire negati va, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente.

La Ingeniería Genética y Biotecnología Ambiental
La Ingeniería Genética, que usa la Biotecnología de Recombinación del DNA, abre la posibilidad de resolver muchos problemas de contaminación del ambiente. Debido a la enorme diversidad metabólica de las bacterias existe un gran conjunto de genes en bacterias procedentes de hábitats naturales. En algunos casos, estos genes codifican proteínas que degradan agentes contaminantes del ambiente. Se ha visto que en aislamientos naturales de bacterias existen genes para la biodegradación de muchos desechos tóxicos y contaminantes del agua. La ingeniería genética está empezando a prestar atención a estos recursos, con la finalidad de limpiar el ambiente. En muchos casos, los donantes de genes son cepas bacterianas aisladas de sitios contaminados con desechos. Entre los ejemplos figuran genes para la biodegradación de pesticidas clorados, como el ácido 2,4,5, triclorofenoxiacético, (2,3,5-T), clorobencenos y clorofenólicos afines, naftaleno, tolueno, anilinas y varios hidrocarburos. Los genes deseados se aíslan de especies de Pseudomonas, Alcaligenes y unas cuantas bacterias más y luego se clonan en plásmidos. Se han construido algunos plásmidos que contienen genes para la biodegradación de diversos productos químicos tóxicos.

BIORREMEDIACIÓN.

La biorremediación es el uso de seres vivos para restaurar ambientes contaminados. Es un concepto que no se debe de confundir con de puración. La depuración es la eliminación, ya sea por métodos físico/químicos o biológicos, de un contaminante antes de que éste alcance el medio ambiente. Cuando la contaminación ya se ha producido, se precisa restaurar el ecosistema contaminado, para lo que se pueden utilizar diversas estrategias. Una de ellas es la biorremediación.

Tipos de contaminantes que se pueden eliminar por biorremediación:
Todos aquellos contaminantes que puedan ser degradados o transformados por los seres vivos son susceptibles de ser eliminados mediante procesos de biorremediación. Los compuestos orgánicos suelen ser degradados total o parcialmente y eliminados por completo del ecosistema. Por ejemplo, compuestos contaminantes tales como el tolueno, el fenol o los polibifenilos clorados (PCBs) pueden ser utilizados como fuente de carbono por bacterias, tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas. Bacterias de los géneros Pseudomonas, Ralstonia, Burkholderia o Mycobacterium pueden eliminar hidrocarburos aromáticos como el tolueno o el naftaleno, pesticidas como las atrazinas, aditivos de la gasolina como el tricloruro de etilo o sustancias venenosas como el cianuro potásico, tanto de ambientes sólidos (suelos) como líquidos (rios y mares). Pero, además muchas bacterias son capaces de modificar sustancias químicas

peligrosas, transformándolas en otras menos tóxicas. Así, algunas bacterias pueden reducir la biodisponibilidad (hacerla menos accesible y por tanto menos tóxica) de metales pesados tales como el mercurio, el arsénico, el cromo, el cadmio, el zinc o el cobre. .

Figura: Ejemplo del empleo de bacterias para la eliminación de un os contaminantes en capas profundas del suelo. En este ejemplo las sustancias contaminantes están haciendo peligrar un acuífero. Para su eliminación se inyecta n en los suelos nutrientes y aceptores de electrones que favorecen el crecimiento de microoganismos que acabarán eliminando la sustancia tóxica.

Diversos tipos de tecnologías de Biorremediación de suelos:
-Bioaumentación : Adición de microorganismos al sitio contaminando cuando la población autóctona carece de capacidad degradadora.

-Bioestimulación: Adición de estimulantes en la actividad microbiana autóctona
como co-sustratos o aceptores de electrones para la degradación anóxica

. - Bioventeo: Introducción de oxígeno a través del suelo para estimular la población microbiana netamente aerobia.

- Composteo: El material contaminado se coloca sobre la superficie del terreno en forma de pilas que se cubren para crear condiciones termófilas, periódicamente se mezcla para favorecer la aceleración.

- Biocultivo: Tratamiento en fase sólida que generalmente se realiza en sitios confinados para retener los lixiviados que se forman. - Biosorción: Uso de microorganismos con afinidad para absorber metales bajo ciertas condiciones, generalmente se aplica en fase líquida.

Ventajas de las tecnologías de biorremediación:
- Son seguras, económicas y más rápidas algunos tratamientos Fisicoquímicos. - Se utilizan sistemas biológicos cuyo costo es mínimo, más aún si se utiliza la población autóctona. - El ecosistema del sitio contaminado prácticamente no se altera; al contrario se recupera. - No se generan desechos como producto del tratamiento, ya que los contaminantes son realmente degradados. - Pueden ser acoplados a otro tipo de tecnología cuando la remoción de los contaminantes no es la deseada. - Los contaminantes absorbidos o atrapados en los poros del suelo, también son biodegradados. - Si la actividad microbiana no es la deseada, puede estimularse con la adición controlada de compuestos requeridos. - Cuando los contaminantes orgánicos son empleados como la principal fuente de carbono y energía para los microorganismos el proceso se realiza con mayor rapidez. - Cuando se trata de una biorremediación in situ se tienen ventajas adicionales. - Se eliminan costos de transportación.

- Al utilizar la población microbiana autóctona se elimina la necesidad de introduci r microorganismos potencialmente peligrosos.

Microbiología industrial
La microbiología industrial está dedicada a la utilización comercial de microorganismos e incluye procesos que tienen gran importancia económica, ambiental y social. Tradicionalmente se ha utilizado la palabra fermentación en microbiología industrial para describir los procesos de cultivo de microorganismos con propósitos industriales. Sin embargo, no hay que confundir esta utilización del térmico con el proceso bioquímico de fermentación consistente en la regeneración del poder reductor (NADH) por un procedimiento no oxidati vo. La fermentación que tiene lugar en la producción del vino, en este sentido, comprende ambos significados: por un lado, se trata bioquímicamente de un proceso de fermentación (producción de alcohol a partir de glucosa en condiciones anaerobias) y es una fermentación industrial en el sentido de que se trata de un proceso industrial llevado a cabo por microorganismos. El desarrollo de una fermentación industrial inc luye dos tipos de procesos denominados, por sus nombres en inglés, procesos upstream y procesosdownstream. Los procesosupstream comprenden la selección y preparación del microorganismo, la preparación del medio de cultivo y de las condiciones de fermentació n (cultivo). Los procesosdownstream incluyen la purificación del producto y el tratamiento de los residuos de la fermentación. En el proceso de fermentación del mosto de uva para producir vino, podemos distinguir los procesosupstream de la selección y preparación de cepas de levadura, tratamiento del mosto y acondicionamiento de las condiciones de fermentación. Los procesosdownstream comprenden, en este caso, el tratamiento del vino para su clarificación y el de los residuos del proceso.

Los productos fabricados por fermentaciones industriales pueden agruparse grosso modo en dos clases:

y

(1) los productos de gran volumen y bajo valor (en este grupo se incluyen los productos alimenticios, bebidas, aditivos alimentarios y algunos productos químicos producidos por fermentación) y (2) los productos de bajo volumen y alto valor (los fármacos, por ejemplo).

y

y

Por otro lado, hay que señalar que tienen origen en fermentaciones industriales un gran número de productos de uso cotidiano que pertenecen a diferentes grupos:

y

(1) alimentos (derivados lácteos y de vegetales fermentados), bebidas (vino, cerveza, etc.), aditivos alimentarios (vinagre, ácido cítrico, carotenos, etc.). (2) productos farmacéuticos: antibióticos ßlactámicos (penicilinas y cefalosporinas), antibióticos aminoglicósidos y tetraciclinas; compuestos antitumorales y otros fármacos (lovastatina, por ejemplo, utilizada para controlar la producción de colesterol). (3) Enzimas microbianas tales como proteasas, amilasas, etc. (4) Productos químicos tales como alcoholes, polisacáridos, disolventes (acetona), lípidos, productos base para la producción de plásticos, etc.

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y

y

y

(5) Productos recombinantes diseñados por ingeniería genética.

Como ejemplo, vamos a explicar cómo ha ríamos un tratamiento de aguas residuales:

Principios y microbiología del tratamiento de aguas residuales

1.- Introducción.
El tratamiento de aguas residuales se inició en Inglaterra a finales del siglo XIX y principios del XX para controlar los brotes infecciosos en las ciudades. Históricamente, el primer objetivo del tratamiento de aguas era reducir el contenido en materia en suspensión del agua a menos de 30 mgl -1 y la demanda biológica de oxígeno (ver más adelante) a menos de 20 mgl -1. La aguas a tratar pueden ser domésticas (compuestas de aguas negras, restos de alimentos, patógenos y parásitos), y aguas industriales (contaminadas principalmente por compuestos xenobióticos y metales pesados). Los objetivos del tratamiento biológico son tres: (1º) reducir el contenido en materia

orgánica de las aguas, (2º) reducir su contenido en nutrientes, y (3º) eliminar los patógenos y parásitos.

2.- Composición de las aguas residuales domésticas.
Están contaminadas con materia orgánica facilmente biodegradable (40-60% de proteínas, 25-50% de carbohidratos y 10% de lípidos, con trazas de otros compuestos). La materia orgánica puede encontrarse como carbono disuelto (Carbono Orgánico Disuelto, COD) o en forma particulada (Carbono Orgánico Particulado, COP). Este último puede separarse del disuelto por decantación o por floculación. ´ Existen tres método principales para medir la cantidad de materia orgánica en el agua: (1º) la medida de la demanda biológica de oxígeno, (2º) la de la cantidad total de carbono y (3º) la de la demanda química de oxígeno. Todos los métodos se basan en la valoración de la cantidad de oxígeno necesaria para oxidar diferentes fracciones de la materia orgánica presente en el agua. 2.1.- Demanda biológica de oxígeno : (DBO), es la concentración de oxígeno disuelto consumido por los microorganismos, presentes en el agua o añadidos a ella para efectuar la medida de este parámetro, en la oxidación de toda la materia orgánica presente en la muestra de agua. Su valor debe ser inferior a 8 mgl -1. La DBO puede descomponerse en dos factores: (1º) la demanda de oxífgeno para la oxidación realizada por los microorganismos quimioheterotrofos (DOH) y (2º) el oxígeno consumido en las oxidaciones de los quimioautotrofos nitrificantes (bacterias que oxidadoran el NH 4 para obtener energía, DON). La DOH se mide añadiendo la muestra de agua a analizar a una solución tampón que contiene las sales inorgánicas necesarias para el crecimiento de los microorganismos y que está saturada de O2. La muestra se incuba en estas condiciones durante cinco días a 20ºC en la obscuridad. Las concentraciones de oxígeno se miden utilizando un electrodo de oxígeno. Es necesario añadir al experimento un inhibidor de la nitrificación (ver más adelante). El cálculo de la DOH se hace según la fórmula: COH (mgl -1) = (D1-D5)/P donde D 1 y D5 son las concentraciones de oxígeno en la muestra el primero y el quinto día y P el coeficiente de dilución de la muestra. Para realizar esta medida se necesita una población mixta de microorganismos; si esta no es muy abundante puede suplementarse con un inóculo destinado a la degradación del material orgánico en el tiempo requerido. El valor de la DOH comprende todas las transformaciones oxidativas de la materia orgánica biodegradable: comp.orgánicos + O2 + bacterias ® biomasa bacteriana + CO 2 + NH4 + H2O

biomasa bacteriana + O2 + protozoos ® biomasa de protozoos + CO 2 El rendimiento de la conversión de la biomasa bacteriana en la de protozoos es de 0,78 mg protozoos / mg bacterias. La DON es la cantidad de oxígeno consumida por los microorganismos nitrificantes que oxidan el MH 4 como fuente de energía. En general, el consumo viene a ser de unos 4.57 gr O2 por gr de NH 4 consumido; pero parte deeste nitrógeno no se oxida a NO 2- o a NO3- sino que se incorpora a las bacterias, por lo que el factor de corrección para los cáclulos es de 4.33: DON = (N disponible - Nasimilado)x4.33 La DON es la causante de muchos altos valores de demanda de oxígeno en aguas con bajo contenido de materia orgánica: en aguas ricas en NH 4 la actividad de las bacterias nitrificantes puede consumir entre el 25 y el 85% del total del oxígeno consumido. Para distinguir entre la DOH y la DON se emplean inhibidores de la nitrificación que no afectan al consumo heterótrofo de materia orgánica. Un inhibidor de este tipo de la 2 cloro-6(tricloro-metil)-piridina. 2.2.- Demanda química de oxígeno: (DQO) es la cantidad de oxígneo requerida para oxidar completamente la materia orgánica utilizando oxidantes químicos como el dicromato potásico (K 2Cr2O7) con ácido sulfúrico. Los valores de la DQO han de estar en relación con los de la DBO; si la DQO es mucho mayor que la DBO una parte importante de la materia orgánica presente en el agua no será fácilmente biodegradable. Para las aguas domésticas, la DQO es del orgen de 250 a 1000 mgO 2 por litro,y la relación DBO/DQO oscila entre 0.4 y 0.8. Las aguas estabilizadas biológicamente tienen una relación DBO/DQO=0.12. 2.3.- Carbono orgánico total: (COT) se mide mediante la oxidación de la materia orgánica mediante calor y oxígeno o mediante oxidantes químicos y se detecta mediante análisis de infrarrojo la producción de CO 2. Los valores deben ser comparables con los de la DQO.

3.- Pasos del tratamiento de aguas residuales
En el tratamiento de aguas residuales se pueden distinguir hasta cuatro etapas que comprenden procesos químicos, físicos y biológicos: (1º) Tratamiento preliminar, destinado a la eliminación de residuos facilmente separables. (2º) Tratamiento primario que comprende procesos de sedimentación. (3º) Tratamiento secundario que comprende procesos biológicos (lodos activados) y químicos (desinfección) y (4º) Tratamiento terciario o avanzado que está dirigido a la reducción final de la DBO, la disminución de nutrientes y la eliminación de patógenos y parásitos.

4.- Procesos de lodos activados
4.1.- Descripción del sistema básico: Tratamiento iniciado en Inglaterra a principios de este siglo y que se ha difundido mucho. Consiste en un tratamiento aerobio que oxida l a materia orgánica a CO2 y agua y NH4+ y nueva biomasa. El aire necesario para el tratamiento se proporciona mediante difusión o por tratamiento mecánico. Durante el tratamiento los microorganismos forman flóculos que, posteriormente, se dejan sedimentar e n un tanque ad hoc denominado tanque de clarificación. El sistema básico comprende, pues, un tanque de aireación y un tanque de clarificación por los que se hace pasar los lodos varias veces. Los dos objetivos principales del sistema de lodos activados son (1º) la oxidación de la materia biodegradable en el tanque de aireación y (2º) la floculación que permite la separación de la biomasa nueva del efluente tratado. 4.2.- Microorganismos presentes en los flóculos : Los flóculos de lodo activado contienen part ículas orgánicas, inorgánicas y bacterias. El tamaño de las partículas varía entre 1 m m y 1000 m m. Las células vivas del flóculo representan entre el 5 y el 20% del total de bacterias. Los microorganismos presentes en los flóculos son bacterias, hongos, protozoos y rotíferos.

(1º) Bacterias: constituyen el principal componente. Los géneros principales
son Zooglea, Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes, Bacillus, Achromobacter, Corynebacteriumy Acinetobacter; también hay formas filamentosas como Beggiatoa. Estas bacterias oxidan la materia orgánica y producen polisacártidos y otros polímeros extracelulares que facilitan la floculación. Los microorganismos aerobios representan una fracción importante cuyo número varía inversamente al tamaño del fló culo puesto que la difusión de O 2 al interior se va viendo más dificultada. En los flóculos de gran tamaño el interior es anaerobio y permite el crecimiento de anaerobios estrictos (tales como metanógenos) que han sobrevivido fases de mayor aerobiosis en p equeñas bolsas anaerobias internas en flóculos de menor tamaño. Su númeo en los lodos activados llega a 10 8 ufcml-1 y entre ellas el grupo más importante numéricamente es el de Pseudomonas. En los lodos activados también hay bacterias autotrofas tales como las nitrificantes( Nitrosomonas y Nitrobacter responsables de la DON) e incluso algunas bacterias fotosintéticas.

(2º)Hongos: Normalmente no están presentes. Sólo en condiciones ambientales
muy especiales (bajo pH, deficiencia de nitrógeno, presencia de p roductos tóxicos) pueden apaercer ciertos hongos de los géneros Penicilliumy Cephalosporium, entre otros.

(3º) Protozoos: Están presentes como depredadores de las bacterias.
Pertenecen a los tres grupos (ciliados, flagelados y rizópodos). La actividad de l os protozoos contribuye significativamente a la reducción de la DBO. (4º)

Rotíferos: Son metazoos de tamaño entre 100 y 500 m m. Son organismos

que se unen al flóculo y desarrollan dos importantes funciones en él: (a) eliminan las bacterias libres que no s e han agregado al flóculo, y (b) contribuyen a la formación del flóculo mediante la producción de materia fecal rodeada de capas de mucus. 4.3.- Aspectos nutricionales del proceso : Las aguas residuales domésticas tienen una relación C:N:P de 100:5:1 lo que satisface las necesidades nutritivas de muchos microorganismos que digieren la matera orgánica en pocas horas transformando la DBO en biomasa. La aireación en este tanque permite (1º) mantener las condiciones de aerobiosis que dirigen el proceso, y, (2º) mantener en suspensión los flóculos para que puedan acceder a todo el volumen de líquido en tratamiento. Cuando los microorganismos han reducido la cantidad de nutrientes de forma significativa entran en una fase metabólica similar a la estacionaria y en ella producen gran cantidad de polímeros extracelulares (por ejemplo Zooglea) que permiten la agregación del material del flóculo. Los heteropolisacáridos que forman el núcleo del flóculo son refractarios a la biodegradación.

5.- Digestión anaerobia de aguas residuales
Consiste en una serie de procesos microbiológicos dirigidos a la digestión de la materia orgánica con producción de metano. Es un proceso en el que pueden intervenir diferentes tipos de microorganismos pero que está dirigido principalmente por bacterias. Presenta una serie de ventajas frente a la digestión aerobia: (1º) muchas bacterias anaerobias pueden usar CO 2 como aceptor de electrones y, por tanto, no hay necesidad de suministrar oxígeno por lo que el proceso es más barato. (2º) Se produce menos cantidad de lodo porque la eficiencia energética de las bacterias anaerobias es menor: el 50% del carbono es convertido en biomasa en condiciones aerobias y sólo el 5% en condiciones anaerobias. (3º) Se produce un gas útil. (4º) El requerimiento energético es menor (5º) Se pueden degradar compuestos xenobióticos. Sin embargo, se pueden citar algunos inconvenientes: (1º) Es un proceso lento, (2º) Muy sensible a agentes tóxicos.

6.-Seguridad en las instalaciones de tratamiento de aguas residuales.

Corrosión: La prevención, la monitorización y la reparación son los factores que más contribuyen a la reducción de los costes derivados de la corrosión en el equipo de filtrado de agua. No incluye los costes por paradas en la producción. Estos costes se controlan mejor cuando la corrosión se percibe como una variable del proceso, en lugar de como un valor puramente histórico o en un complejo método científico. La monitorización en línea y en tiempo real con CorrTran® MV permite la realización de cambios inmediatos en el proceso de tratamiento de aguas residuales si se produce corrosión, reduciendo de esta forma los efectos de la corrosión y cubriendo los costes operativos para el filtrado de agua.

Protección contra rayos y sobretensiones: Las plantas de tratamiento de residuos están particularmente expuestas a los riesgos de las descargas atmosféricas y los rayos. Además, las descargas eléctricas, la electricidad estática y las sobretensiones momentáneas pueden extenderse muy fácilmente debido a la enorme extensión de las redes y a los diferentes terrenos existentes en la planta de tratamiento de residuos. Existen dos fenómenos que pueden darse en las plantas de tratamiento de residuos industriales tradicionales, los inducidos por los rayos, equipos eléct ricos grandes y los equipos de soldadura: rayos y sobretensiones de energía. El sistema de protección contra descargas eléctricas y rayos está formado por una protección externa y una protección interna. La protección externa contra descargas eléctricas y rayos minimiza el riesgo de dichas descargas y la puesta en práctica del concepto de Zonas de protección contra descargas eléctricas y rayos optimiza la disponibilidad de la instalación a máximo nivel. Una parte de la corriente de la descarga eléctrica o el rayo fluye directamente a la tierra mediante el sistema de toma a tierra. La otra parte fluye a través de las líneas de suministro externas de la planta de tratamiento de residuos y podría dañar la instalación. Estas líneas de suministro externas de la planta deben equiparse con dispositivos de protección transitorios (surge protectivedevice - SPD) aptos para los niveles de corriente de la descarga eléctrica o el rayo. Los disipadores de sobretensiones protegen de forma fiable el equipo de terminales en la instalación de tratamiento de residuos contra las sobretensiones transitorias conducidas. La instrumentación en determinadas áreas de la planta de tratamiento de agua puede estar sujeta a la acción de los rayos o los sobrevoltajes momentáneos. Para prot eger este equipo, las planas de tratamiento de agua instalan controles avanzados con un sistema DCS o PLC. Los daños en el equipo de tratamiento de agua puede provocar el

drenaje de agua contaminada en cuencas hidrográficas, ríos o lagos locales. Pepperl+Fuchs ofrece aplicaciones de acondicionamiento de señal que proporcionan aislamiento y evitan los bucles de tierra, protegiendo así la planta de tratamiento de agua. Seguridad intrínseca: La seguridad intrínseca se usa en las zonas en que pueden acumularse gases explosivos, como el metano CH4. Nuestros aisladores del Sistema H y Sistema K junto con nuestro sistema de E/S remotas RPI le dan la solución. El área de digestión de una instalación de tratamiento de aguas residuales es donde las bacterias microscó picas digieren el cieno cloacal y lo descomponen en gas metano. Estas bacterias digestoras producen tanto metano y dióxido de carbono CO2, que pueden utilizarse para proporcionar calor al tanque digestor y accionar generadores eléctricos o vehículos de motor. Purga: Las aguas negras crudas, los materiales químicos corrosivos y el cieno cloacal presentes en una instalación de tratamiento de aguas residuales pueden dañar el equipo y la instrumentación industriales. Pepperl+Fuchs ha introducido la nueva línea Enviro-Line de sistemas de presurización (serie 10E -WGS). De esta forma se podrán purgar los paneles, armarios y otros equipos de atmósferas corrosivas, llenas de polvo, o sucias.

http://www.youtube.com/watch?v=7N1FOAUBFis

INDUSTRIA ALIMENTARIA
Ejemplos:

BACTERIAS DEL AC. ACÉTICO
Transformación del vino en vinagre (proceso conocido 5000 años a.d.c. en Babilonia .)

Oxidación incompleta del etanol en ácido acético . Gluconobacter solo es capaz de oxidar el etanol a ácido acético . Acetobacter es capaz además de oxidar el ácido acético a CO 2y agua.

BACTERIAS DEL AC. LÁCTICO

http://www.youtube.com/watch?v=OxejEibUf-U

Transformación de la lactosa en ac. Láctico. Streptococcus termophillus. Lactobacillus bulgaricus. Fabricación de yogur Leche entera fermentada. El ac. Láctico crea un medio ácido donde precipitan las proteínas. El característico sabor se debe al ac. Láctico y al acetaldehído Fabricación de queso. Tiene dos fases: Formación de la cuajada y maduración. Formación de la cuajada: Leche entera + bacterias + Renina (enzima proteolítico) = leche cuajada . Se prensa el cuajo, se separa el suero y se envuelve en una tela seca. Maduración: Muy variada según el tipo de queso Se hidrolizan las proteínas a péptidos y áá libres. Formación de ac. Grasos, aminas y amoníaco. Hidrólisis de las grasas Se puede realizar en superficie o en el interior por inyección de microorganismos. La llevan a cabo las bacterias lácticas que se desarrollan en toda la masa, también se utilizan mohos, levaduras, salmueras para la acción en superficie y son los que confieren el sabor característico a cada tipo de queso.

LEVADURAS

Sacharomycescerevisiae en diversas cepas: Fabricación del vino:

Fermentación alcohólica de los azúcares solubles presentes en el zumo de uva (glucosa y fructosa), para dar alcohol etílico y CO 2 Vendimia, Prensado para obtenerle mosto, liquido ácido y rico en monosacáridos Fermentación llevada a cabo por las levaduras que normalmente se desarrollan en la superficie de la uva (o se añaden para acelerar el proceso) Necesidad de controlar la temperatura Aclarado y estabilizado Embotellado o trasvasado a barricas para envejecimiento (taninos de la madera) Para producir vinos espumosos se añade una cantidad extra de azúcar para realizar un segunda fermentación a presión. El CO 2 liberado constituye las burbujas Fabricación de la cerveza: Malteado del grano de cebada: humedecer, iniciar la germinación y secar Molido de la malta y mezcla con agua para liberar las amilasas que degradan el almidón y liberan glucosa. Filtrado

Incorporación del lúpulo y cocción. El lúpulo confiere el amargor e impide el desarrollo de bacterias Incorporación de la levadura y fermentación Filtrado, maduración y pasteurización Los residuos de los filtrados se usan como fertilizantes, como alimen to de ganado y suministro de levaduras a destilerías de aguardiente

Fabricación del pan:

Especies encontradas en el pan. Mezcla de harina de cereales (principalmente trigo) agua y levadura. Se puede añadir sal, azúcar y grasa Fermentación. Aumenta de volumen la masa. Las amilasas de la harina activadas por el agua convierten parte del almidón en maltosa y glucosa. La levadura degrada los

azúcares y produce una mezcla de alcohol etílico y CO 2 que queda atrapado en la masa y le da mayor volumen. Le confiere el aspecto esponjoso característico del pan. La levadura también actúa sobre el gluten (principal proteína del trigo) alterando su estructura modificando la textura de la masa Cuando se hornea el alcohol se destruye, se elimina el agua y se inactiva la levadura.

Búsqueda de información en estos lugares:
http://despertandoconcienciaplanetaria.wikispaces.com/Biorremediaci%C3%B3n WIKIPEDIA http://www.unavarra.es/genmic/micind-0.htm http://www.ugr.es/~dptomic/progbioquim.htm http://www.solociencia.com/biologia/microbiologia-microorganismos-industria.htm http://www.casafe.org/biotecnologia.html http://www.tierramor.org/Articulos/Fertilidad%20de%20suelos.htm

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