La habilidad para detectar y aislar genes normales y
mutados, su secuencia y la expresión de sus productos proteicos ha tenido un importante impacto en la biología y la medicina. La tecnología del DNA recombinante ha hecho posible investigar más a fondo la estructura y función de los genes, especialmente de los genes eucarióticos que eran inaccesibles por otros métodos. La Tecnología del DNA recombinante se originó en los comienzos de 1970 con el descubrimiento de las endonucleasas de restricción, enzimas capaces de realizar el clivaje específico del DNA en fragmentos determinados La tecnología del ADN recombinante constituye una suma de técnicas siendo las más importantes:
La rotura específica del ADN mediante nucleasas de restricción, que
facilita el aislamiento y la manipulación de los genes individuales. La secuenciación rápida de todos los nucleótidos de un fragmento purificado de ADN, que posibilita determinar los límites de un gen y la secuencia de aminoácidos que codifica. La hibridación de los ácidos nucleicos que hace posible localizar secuencias determinadas de ADN o ARN, utilizando la capacidad que tienen estas moléculas de unirse a secuencias complementarias de otros ácidos nucleicos. La clonación del ADN, mediante la cual se puede conseguir que un fragmento de ADN se integre en un elemento génico autorreplicante (plásmido o virus) que habita en una bacteria, de tal manera que una molécula simple de ADN puede ser producida generando muchos miles de millones de copias idénticas. La ingeniería genética mediante la cual se pueden alterar secuencias de ADN produciendo versiones modificadas de los genes, los cuales se pueden insertar a células u organismos. Por lo tanto en la tecnología del ADN recombinante podemos diferenciar cuatro etapas básicas:
1. Corte específico del ADN
Puede verse como actuarían las enzimas. (enzimas de restricción)
En este esquema se indica el lugar en el que corta la enzima de restricción. Se aprecia la actuación en ambas hebras.
En la siguiente animación puede verse "en vivo" la
actuación de las enzimas de restricción Ighibrid.swf