Carrera de Tecnología Medica Facultad de Medicina Universidad de Concepción

Escherichia coli enteropatógena
Alumnos: Melisa Alarcón D. Rodolfo Mamut .

Introducción
Descrita por primera vez en 1885 por Theodore von Escherich bacteriólogo alemán, quién la denominó Bacterium coli. coli. 

Bacilo gram negativo, móvil  Anaerobio facultativo  Coloniza el intestino del hombre pocas horas después del nacimiento  Flora normal, pero hay cepas que pueden ser patógenas y causar daño  Sindromes clínicos mas comunes que causan Escherichia coli patógenos: infección del tracto urinario, sepsis/meningitis y enfermedades diarreicas/entericas diarreicas/entericas

Escherichia coli
Clasificacion taxonomica
Corresponde a:  Reino: Bacteria  Filo: proteobacteria  Orden: enterobacteriales  Familia: Enterobacteriaceae  Género: Escherichia  Especie: Escherichia coli  Flora comensal  Bacilo Gram negativo  Anaerobio facultativo

Serotipificación de Kauffman 
176 antigenos somáticos O  112 antigenos flagelares H  60 antigenos capsulares K «O» indica el serogrupo «O:H» indica el serotipo, en casiones se asocia a cuadro clinico en particular.

fácilmente recuperados de medios comunes o selectivos a 37°C y en condiciones aeróbicas. se recuperan desde agar MacConkey o agar EMB selectivamente los miembros de la familia Enterobacteriaceae permite la diferenciación de bacilos entéricos basados en su morfología. .

 Se destacan ETEC y EPEC.  EPEC es el mas extendido de las coli diarreogénicas. diarreogénicas.  En el ultimo tiempo han sido reportado grandes brotes de Escherichia coli entero hemorrágica (EHEC) en paises desarrollados .  Uno de sus principales agentes son las Escherichia coli diarreogénicas. a pesar de ser vacunados contra enfermedades infecciosas. diarreogénicas.¿Por qué estudiar Escherichia coli?  Las enfermedades diarreicas siguen siendo un problema importante de salud pública a nivel mundial.  Mas de 10 millones de niños menores de 5 años fallecen por esta causa. . proporciona un modelo de virulencia para otras infecciones de Escherichia coli. como para otras bacterias patógenas. EPEC.

)  Escherichia coli enterotoxigénica (E.C.E.C.E.) .)  Escherichia coli enteroagregativa (E.A.E.C.)  Escherichia coli entero invasiva (E.C.P.)  Escherichia coli difusa adherente (D.E.C.Escherichia coli diarreogénicas  Escherichia coli enteropatógena (E.C.Ag.)  Escherichia coli enterohemorrágica (E.E.E.H.I.T.

Virulencia de escherichia coli ‡ Colonizacion de la mucosa ‡ Evasion de las defensas del huesped ‡ Multiplicacion ‡ Daño a los tejidos del huesped Principales causas de diarrea  Adherencia intima (EPEC y EHEC)  Produccion de entertoxinas (ETEC y EAEC)  Invasion (EIEC) .

.Identificacion de Escherichia coli en el laboratorio.Ensayos in vivo como el asa ligada o la prueba de Sereny ‡ Pruebas de biologia molecular: presencia de fragmantos de genes involucrados en el macanismo de patogenicidad. patogenicidad. .Ensayos de toxicidad de celulas. ‡ Identificacion mediante antisueros ‡ Identificacion mediante factores de virulencia . celulas.Ensayos de adherencia en celulas Hep-2 Hep.

. Ej: ECEH Invasiva Hemorrágica No invasiva Diarrea: Presencia de deposiciones líquidas al menos tres veces en un período de 24 horas (OMS).Diarreas Secretora Acuosa Osmótica Diarreas Movimento neto de agua y electrolitosdesde la mucosa intestinal hasta el lumen (excede 10 mL/kg/día) y cuya osmolaridad mL/kg/día) es similar al plasma. Capacidad para invadir y destruir los eritrocitos Ej: shigella Caracterizada por diarrea con abundante sangre y sin fiebre. Incremento de H de C en el lumen intestinal. como consecuencia de lesiones en forma de parches en las vellosidades intestinales y por la invasión de los enterocitos de la vellosidad.

10% ha sufrido un episodio de diarrea en el último mes  Sin cambios importantes en la incidencia en los últimos 20 años (1 billón de casos/año)  Descenso importante en la mortalidad (4.Peso global de las diarreas  Mayor incidencia en niños < 5 años y la menor en > 65 años  Alta frecuencia  6%.5 mill) mill)  En EEUU U$ 23 billones en gastos de atención y productividad En paises subdesarrollados  Frecuencia de 6 a 7 episodios/año  Tercera causa de mortalidad en niños <5 años (15 a 21%)  Chile: Muerte por Enf Infecciosas Intestinales 200 casos año (Lugar 19)  Difícil estimar los costos asociados .6 2.

Toro U. MT Valenzuela y J.Distribución de agentes bacterianos asociados a cuadros de diarrea aguda en niños menores de 14 años (Marzo 2004 ² Marzo 2007) C. MT Ulloa. Zamorano Proyecto FONDECYT 1040539 ..

Frecuencia de enteropatógenos asociados a gastroenteritis agudas en niños. 1994. and O¶Ryan M. Prado V. Infect Dis Clin North America. .

Polimerizacion de la actina Aumento de los niveles de calcio y PKC F-actina ± Intimina codificada por el gen cromosomal eae * (señal de A/E). ‡ Serogrupos y serotipos más comunes: O55. O111:H. ‡ Niños menores de 6 meses hasta los 2 años. O142. efecto histopatologico A/E «attaching and effacing». plásmidos y fimbrias. Alteracion del citoesqueleto en el sitio de union a la bacteria. Adherencia intima a la membrana de las celulas del epitelio intestinal.coli enteropatógena (ECEP) ‡ Primer grupo que se identificó serológicamente. . ‡ Su principal factor de patogenicidad es la Adherencia. Destruccion de la microvellocidad Adherencia y esfacelamiento (A/E).O127. O86.Bfp (bundle-forming pilus) codificado por el plásmido EAF y genes cromosomales. -.

Escherichia coli enteropatógena (ECEP) .

RESERVORIOS ‡ Niños y adultos con o sin sintomas. . Puede aislarse en adultos Factor predisponente: Diabetes TRANSMISIÓN ‡ Fecal-Oral ‡ Manos contaminadas de manipuladores de alimentos.Escherichia coli Enteropatógena (ECEP) EPIDEMIOLOGÍA ‡ ‡ Puede ocasiona brotes o casos aislados de diarrea. Afecta principalmente a niños menores de 6 meses hasta los 2 años de edad. ‡ Métodos moleculares. -atípicas: genes eae. DIAGNÓSTICO ‡ Ensayos in vitro en cultivos celulares. Cepas: . fiebre baja y mala absorción . leve o grave. vómito.tipicas: genes eae + plasmido EAF. ‡ ‡ CUADRO CLÍNICO ‡ Diarrea aguda.

‡ Factores de patogenicidad: Toxina termolábil. Algunos genes de ST se han encontrado en transposones. . niños menores de 2 años. Colonizan la mucosa del intestino delgado Síntesis de alguna o ambas enterotoxinas llamadas toxina termolábil (LT) y toxina termoestable (ST). toxina termoestable y factor de colonizacion antigénico.Escherichia coli enterotoxigénica (ECET) ‡ Agente más frecuente de «Diarrea del viajero en adulto» ‡ Importantes en lactantes. Pilis o fimbrias CFA (colonization factor antigens) Aumentan el nivel intracelular de cAMP y cGMP respectivamente. Salida de agua y iones. Plásmido que tambien contiene informacion de CFAs. células intestinales.y en particular durante los primeros seis meses de vida. en la mb.

Escherichia coli Enterotoxigénica (ECET) .

sin sangre. O159:H20. ‡ Diarrea puede ser leve. ‡ Diarrea acuosa aguda. ‡ En los niños en edad escolar y adultos puede ser asintomática y poco frecuente. O148:H28. CUADRO CLÍNICO ‡ Incubacion de 14 a 15 hrs.Escherichia coli Enterotoxigénica (ECET) EPIDEMIOLOGÍA ‡ Niños menores de 2 años. O25:H-. moco.O78:H12. O27:H7. O20:H-. . Serogrupos y serotipos más comunes: O8:H9. breve y autolimitada pero también puede ser grave. O15:H11. ni pus. ‡ Frecuencia de aislamiento en niños con diarrea es de 10 a 30%. ‡ Diarrea del viajero. TRANSMISIÓN ‡ Contaminación fecal de agua y alimentos. ‡ Pocos casos presentan fiebre y vómito.

‡ Factores de patogenicidad: Fimbria AAFI. toxina termoestable de cepas enteroagregativas I (EAST I).Escherichia coli Enteroagregativa (ECEAg) ECEAg) ‡ Se caracteriza por autoaglutinación de las bacterias entre sí y por ser inespecifica. proteinas Pet y Pic. proteina de mb. plásmido y toxina. ‡ Negativa a la prueba de EAF. . externa (OMP). ‡ Incrementan en la mucosa la producción y secreción de moco que atrapa a las bacterias que se autoaglutinan en una fina película en el epitelio intestinal. ‡ Hemaglutinacion en humanos y adherencia a células ‡ Serogrupos y serotipos más comunes: O44:H18.

Proteína Pic: Codificada en el genoma. Fimbria AAF/II: Inmunológicamente diferente a AAF/I. codificada por el gen aafA. Fimbria I de adherencia agregativa (AAF/I): Codificada por el gen aggA que se encuentra en un plásmido de 60 MDa. No todas las EAEC presentan estas fimbrias* . contracción del citoesqueleto y pérdida de fibras de actina. caracterizado por arredondamiento y desprendimiento de las células. El gen para esta proteína se encontró en un plásmido de 65 Mda.tiene actividad de proteasa.Factores de patogenicidad de ECEAg Proteína Pet (plasmid-encoded toxin): Efecto citopático en células Hep-2.

sin sangre. verde mucosa. EPIDEMIOLOGÍA ‡ Recién nacidos ‡ Niños menores de dos años. . vómito y sin o con poca fiebre. ‡ Diarrea con moco con o sin sangre. DIAGNÓSTICO ‡ Observación de la adherencia agregativa en células Hep-2 de cultivos bacterianos. previamente inoculados en medio Luria e incubados en condiciones estacionarias y a 37 °C. ‡ Diarrea persistente hasta 20 días. ‡ Periodo de incubación: menor a 8 horas. CUADRO CLÍNICO ‡ Diarrea líquida. ‡ Duración del cuadro: 18 o 20 días.PATOGENIA ‡ Sitio blanco de daño: mucosa del intestino grueso y delgado.

EPIDEMIOLOGÍA Se puede aislar tanto de personas sanas como en personas con diarrea. involucrada en el fenómeno de adherencia difusa.  El fenómeno de adherencia difusa también se ha asociado con una proteína de membrana externa de 100 kDa.  Los genes que codifican para esta fimbria se pueden encontrar en el cromosoma o en un plásmido. CUADRO CLÍNICO: diarrea acuosa sin sangre y sin leucocitos. conocida como F1845. SEROGRUPOS Y SEROTIPOS más comunes: O126:H27 .  En una cepa del serotipo 0126:H27. siendo más importante en niños de 4 a 5 años. cuyos genes se han secuenciado pero sólo se han encontrado en una minoría de las cepas aisladas.Escherichia coli de adherencia difusa  Caracterizada por una fimbria de superficie.

.Escherichia coli Enterohemorrágica (ECEH) ` ` ` ` Los genes involucrados en la patogenesis del EHEC son similares a aquellos que estan implicados en la de EPEC. excepto por: Bacteriofagos codificantes-Stx en el codificantescromosoma de EHEC y Presencia de un plasmido caracteristico de EHEC 60-MDa en 60plasmido EAF en EPEC. El plasmido de EHEC es conocido por la enterohemolisina (ehx) asi ehx) como el antigeno fimbrial potencialmente involucrado en la colonización.

Síntomas y signos .

com/web/2008/10/02/se-iniciauna-campana-para-prevenir-el-suh/ .  Complicación más importante de la infección por E.  Factores predisponentes Genético Embarazo Fármacos Edad Gastrectomías http://aristotelizar. síntomas generales. trombocitopenia y daño renal agudo.  Es una entidad clínica caracterizada por anemia hemolítica microangiopática. microangiopática.Sindrome hemolitico uremico (SHU)  Diarrea con presencia o ausencia de sangre. coli O157:H7. introsuscepción. introsuscepción.

insertado en el cromosoma bacteriano.Shigatoxina o Codificada por un bacteriófago Stx . o Stx contiene 2 miembros principales Stx1 y Stx2 o Posee una estructura A-B ASubunidad A ( 2 subunidades A1 y A2 el pentámero B se fija a la célula blanco el receptor el glucolípido Gb3 ‡ Stx2 tiene solo 56% de identidad con Stx1. ‡ Variantes de Stx2 son más virulentas en humanos . o Es el principal factor de patogenicidad y la característica distintiva de ECEH.

implicadas en SHU producirían esta toxina El gen que codifica para su síntesis. implicada en el mecanismo disparador de la transducción y fosforilación de la tirosina en la célula hospedera. http://www. podría desempeñar algún papel en la lisis de los eritrocitos. Intimina Codificada por el gen eae.OTROS FACTORES DE VIRULENCIA Enterohemolisina.com/nrmicro/journal/v4/n5/images/nrmicro1391-f3. ehxA. La virulencia de las cepas Disminuye notablemente cuando muta el gen eae.nature. coli O157:H7 cepas O:111H Stx positivas. eaeB codifica la secreción de una proteína de 37 kDa. 2 subunidades: eaeA necesaria para producir la lesión A/E en los enterocitos y codifica para la intimina.jpg . Producida en el plásmido de 60 MDa en las cepas de E.

Anormalidades radiográficas Aislamiento del microorganismo a partir de las evacuaciones del enfermo empleo del medio SMAC.DIAGNOSTICO . ECEH no fermenta dicho carbohidrato Las colonias sorbitol-negativas reacciones inmunológicas que confirmen o descarten la presencia de alguno de los serotipos de ECEH (serología) http://download.consult.imaging.a diferencia de otras cepas de la misma especie.jpg . agar MacConkey en el que se ha sustituido la lactosa por D-sorbitol .com/ic/images/S1933033206708552/gr1-midi.

población infantil del tercer mundo El agua contaminada es el principal vehículo de transmisión presencia en alimentos que son cocinados. enfermedad diarreica y disentería en niños en los países menos desarrollados brotes de enfermedad entérica por alimentos en adultos de países industrializados. . geneticamente. inmovil . al de Shigella. y lactosa negativa ECEI http://www. 630 millones de casos de diarrea en el mundo 775. y en patogenia parecido a Shigella spp.flickr.com/photos/paultseng/169118630/ .000 muertes. las cepas de EIEC son lisina decarboxylasa negativa.enteritis por un mecanismo invasor semejante. Las cepas de EIEC son bioquimicamente. lavados o regados con agua . Tal como Shigella spp . Personas sintomáticas y asintomáticas son el principal reservorio.

Serotipos patógenos O29 O124 O136 O152 O164 .Patogenesis. Elaboran exotoxinas que podrian tener un rol importante el la patogenesis de la diarrea. Todavía no está completamente dilucidado. Tanto EIEC como Shigella spp. Los estudios sugieren que las caracteristicas patogenicas son virtualmente Iguales a los de Shigella spp Ambos organismos muestran invasion del epitelio del colon.

Lisis de la vacuola fagocitica Induccion de apoptosis en macrofagos. Ocurre en células de la mucosa del colon El actual modelo de patogénesis comprende: Penetración de la célula epitelial Lisis de la vacuola endocitica Multiplicación intracelular Movimiento direccionado a través del citoplasma Extensión a las células epiteliales adyacentes Si la infección es severa se llega a una reacción inflamatoria que se manifiesta como ulceración http://cmr.asm.Invasividad. locus mxi y spa : genes que codifican un aparato secretor produccion de proteinas vitales para una capacidad patogena completa: Las proteinas Ipa (IpaA .org/cgi/content/full/11/1/142#SEC7 .org/cgi/content/full/11/1/142#SEC7 Los genes necesarios para la invasividad : plasmido pInv.IpaD) son una de estas: Efectoras de la invasion . http://cmr.asm.

Mecanismos patogénicos de Escherichia coli. doctor Fernando Navarro García.sin el gen la actividad enterotoxica de la cepa disminuye drasticamente.Produccion de enterotoxinas Caracterizada por un periodo de diarrea acuosa que precede a episodios de diarrea disentérica con mucus y/o sangre . . El rol de las enterotoxinas no está confirmado pero podrian explicar la diarrea acuosa caracteristica de EIEC. Nataro et al clonaron el gen sen .

Mecanismos patogénicos de Escherichia coli. ELISA para detectar el gen ipaC gen Ventaja no require grandes costos.coli Busqueda fenotipica prueba de sereny keratoconjunctivitis relaciona la habildad de invadir epitelios y dispersarse a otras celulas . parecida bioquimicamente a las demas E. doctor Fernando Navarro García.DETECCIÓN. . Dificil identificacion. equipos ni animales vivos.

Tradicionales .Aislamiento. identificación y caracterización de Escherichia coli patógena Metodos de estudio Metodos in vivo e in vitro. Biología molecular.

Voges Proskauer. citrato. MIO. TSI.Métodos tradicionales Tomada directamente de materia fecal con hisopo rectal. Serologia. urea. . rojo de metilo. LIA. Siembra en agar Mc Conkey a 37°C por 18-24 hrs.

DAEC y EAEC Se conocen 3 apatrones de adherencia: ‡ Adherencia Localizada ‡ Adherencia Agregativa BFP AAF/ I y II ‡ Adherencia difusa (DA) F185 .Diagnóstico fenotípico Ensayo de adherencia con celulas Hep-2 Hep‡ Diagnóstico de EPEC.

‡ Las sondas son fragmentos pequeños de DNA que contienen parte de los genes que codifican para algún factor de virulencia y pueden estar marcadas radioactivamente con P o no radiactivamente con biotina o digoxigenina y se pueden usar en ensayos sensibles y específicos para detectar cepas patógenas de interés clínico.Métodos de biología molecular ‡ Una de las herramientas de diagnóstico más recientes ‡ Uso de sondas para la hibridación en fase sólida como es el ³colony blot´. entre otros factores de patogenicidad característicos de las bacterias. ‡ Actualmente para E. para la fimbria Bfp de EPEC. . coli hay sondas específicas para la toxina termolábil (LT) y termoestable (ST) del grupo ETEC. para el locus asociado con invasividad (ial) de EIEC y para la enterohemolisina (hlyA) de EHEC.

Hibrdacion con sonda marcada con digoxigenina a) Desnaturalización b) Hidroxido de sodio c) Fijacion del ADN .Colony blot Agar Luria / 4 h a 37°C Incuba 12 h 1.

Utilizar carbapenems como primera respuesta a estas infecciones aumenta el riesgo de inducir resistencias en la comunidad. Y MIEMBRO DE FACULTY OF 1000.AR/ACTUALIDAD/ULTIMAS_NOTICIAS/ESCHERICHIA_COLI_RESISTENTE_A_LOS_ANTIBIOTICOS . como el subcontinente indio. JOHANN PITOUT. al menos en parte. Rápida propagación de esta cepa se debe.COM. a los viajes internacionales a zonas de alto riesgo. En los últimos años se ha producido un drástico incremento de infecciones adquiridas en la comunidad causadas por una sola cepa de Escherichia coli productora de betalactamasas. anulando de ese modo uno de las estrategias antibióticas más potentes que existen en la actualidad. CANADÁ. HTTP://WWW.EDICIONESMEDICAS. ‡ ‡ ‡ *DR.Resistencia a los antibioticos ‡ Una revisión de Faculty of 1000 Medicine Reports subraya que el incremento en todo el mundo de bacterias resistentes a antibióticos es un importante motivo de preocupación. DE LA UNIVERSIDAD DE CALGARY.