Departamento de Química Analítica y

Tecnología de Alimentos

QUIMICA ANALITICA APLICADA

Tema 14. Análisis farmacéutico, clinico y toxicologico

Identificación, caracterización y purificación de principios activos.
Técnicas analíticas para la separación de productos activos y sus
metabolitos
 ANÁLISIS FARMACÉUTICO
FARMACO
Un fármaco es cualquier sustancia que esta destinada para el diagnostico,
curación, mitigación, tratamiento o prevención de una enfermedad o para alterar
la estructura o función del cuerpo.
EXCIPIENTE
Aquella materia que, incluida en las formas galénicas, se añade a las sustancias
medicinales o a sus asociaciones para servirles de vehículo, posibilitar su
preparación y estabilidad, modificar sus propiedades organolépticas o
determinar las propiedades fisicoquímicas del medicamento y su
biodisponibilidad.
FORMA FARMACÉUTICA
Disposición individualizada a la que se adatan las sustancias medicinales y los
excipientes para constituir un medicamento; también se denominan “formas
galénicas” o “formas de dosificación”.
MEDICAMENTO
Sustancia medicinal y sus asociaciones o combinaciones destinadas a la
utilización en las personas o en los animales, que se presente dotada de
propiedades para prevenir, diagnosticar, tratar, aliviar o curar enfermedades o
dolencias, o para afectar a funciones corporales o al estado mental.
ANÁLISIS FARMACÉUTICO
DESCRUBIMIENTO
DESCRUBIMIENTO
La Química Aislamiento de un fármaco a partir de un producto natural
Analítica puede *Rendimiento de la reacción de aislamiento
*Propiedades físico químicas del fármaco:
participar en Síntesis de un nuevo fármaco
diferentes facetas en *Pureza de los materiales de partida.
*Rendimiento de la reacción de síntesis. Subproductos
la investigación, *Propiedades físico -químicas
desarrollo y Test Farmacológico
aplicación de DESARROLLO
productos Test del fármaco “in vitro ” y en animales de laboratorio
farmacológicos. En Test del fármaco en humanos: (fase I)
este esquema se CLINICA
puede representar Estudios de La Fase II en Humanos
las diferentes etapas Farmacodinamica
COMERCIALIZACIÓN Y EMPLEO
FARMACOLÓGICO

Formulación del compuesto(inyectables, jarabes, pomadas,

comprimidos..)
Y CLÍNICO
ANÁLISIS

Control de calidad del producto

Empleo del fármaco
Monotorización terapéutica.
Sobredosis
Drogas de abuso
Análisis forense toxicológico
Dopaje
 MEDICAMENTOS Y EXCIPIENTES
CLASIFICACIÓN FARMACOLÓGICA
▪ Aparato Digestivo y Metabolismo ▪ Sangre y Organos Hematopoyeticos
▪ Aparato Cardiovascular ▪ Dermatologicos ▪ Preparados Genitourinarios y
Hormonas Sexuales ▪ Preparados Hormonales Sistemicos, Excluidas
Hormonas Sexuales ▪ Antiinfecciosos Via General ▪ Antineoplasicos y Agentes
Inmunomoduladores ▪ Aparato Locomotor ▪ Sistema Nervioso Central
▪ Antiparasitarios, Insecticidas y Repelentes ▪ Aparato Respiratorio ▪
Organos de Los Sentidos ▪ Varios

Aceite de cacahuete Aspartamo Etanol Polioles

Aceite de ricino Ázucar invertido Fenilalanina Potasio
Aceite de soja Bronopol Formaldehído Propilenglicol,
Ácido benzoico y benzoatos Butil hidroxianisol Fructosa Sacarosa
Butil hidroxitolueno Galactosa Sodio
Ácido bórico, sus sales y
ésteres Clorobutanol Glicerol Sorbitol
Ácido salicílico Cloruro de benzalconio Lactosa Sulfitos y
Ácido sórbico y sus sales metabisulfitos
Lanolina
Alcohol bencílico Compuestos Tartrazina
Manitol
mercuriales orgánicos
Aprotinina bovina Glucosa Urea
EXCIPIENTES
 MEDICAMENTOS Y EXCIPIENTES
ALGUNAS FORMAS FARMACÉUTICAS
Cápsula. Envoltura membranosa soluble, que contiene una dosis medicamentosa.
Colirio. Medicamento de acción local para el tratamiento de enfermedades
oculares y de los párpados.
Comprimido. Preparación farmacéutica en forma de pastilla, en la que la
sustancia medicinal está conformada por fuerte presión.
Crema-gel. Preparación terapéutica en forma de coloide, caracterizada por una
fuerte viscosidad.
Emulsión. Líquido de aspecto lechoso que mantiene en suspensión una
substancia insoluble (aceite o grasa) finamente dividida en un cuerpo viscoso
emulsionante.
Inyectable. Substancia terapéutica líquida que se introduce bajo presión y por
medio de un instrumento adecuado, en una parte, órgano o cavidad del cuerpo.
Jarabe. Preparación azucarada que puede tener disueltas substancias
medicamentosas.
Pomada. Fórmula medicinal para uso externo, blanda, compuesta por una o
varias drogas activas, incorporadas a una grasa animal o vaselina.
Suspensión. Estado en el que se encuentran dentro de un líquido las partículas de
otra substancia medicamentosa no soluble en él y que no se depositan en el
fondo.
 METABOLISMO DE LAS DROGAS
La forma de introducción de la droga en el sistema biológico, es decir, la ruta de
administración, dictamina el conjunto de condiciones digestivas y enzimáticas a la
cual la droga está sujeta y, por lo tanto, el destino metabólico y su distribución en
los distintos tejidos. Las formas más comunes de introducción de las drogas son:
-Ingestión oral -Inyección intravenosa e intramuscular - Aplicación dérmica.
Una vez introducida en el sistema biológico, la droga está sujeta a procesos de:
a) absorción, b) distribución c)metabolización y e) excreción
Absorción : Para que un medicamento o droga pueda ejercer su acción es
necesario que sea absorbido
Distribución : El farmaco se distribuye en los tejidos para llegar al sitio donde se
espera que actúe. La sangre distribuye la droga a los distintos tejidos. La propor-
ción tejido/sangre del farmaco depende de la velocidad de perfusión sanguínea
hacia estos tejidos y de sus características como, acidez, solubilidad y tamaño.
Metabolismo: La gran mayoría de los fármacos se modifican metabólicamente en
el organismo. Su modificación conduce a la formación de metabolitos
Excrecion : Las drogas absorbidas y sus metabolitos se excretan a través de la
orina, y de la bilis, que se genera en el hígado y se vierte en el intestino.
Las drogas o metabolitos hidrofílicos se excretan en la bilis. Las drogas lipofílicas
y sus metabolitos tienden a retornar a la sangre y como la velocidad de perfusión
sanguínea hacia el riñón es alta son excretadas en la orina en su forma ionizada
CARACTERÍSTICAS DE LAS MUESTRAS BIOLÓGICAS
Las muestras biológicas son muy Sangre, plasma y suero
complejas, en ellas el principio La sangre es un fluido complejo que
activo está presente en muy baja contiene solubilizadas proteínas , sales,
concentración, también están grasas disueltas y células suspendidas.
El constituyente mayoritario, las células
presentes los metabolitos y además
rojas (eritrocitos) pueden separarse por
puede haber compuestos centrifugación dando lugar a un fluido
interferentes. claro denominado plasma.
Tipos de muestras biologicas Si la sangre permanece sin añadirle un
agente anticoagulante, los eritrocitos
Tipo Muestra coagulan y el fluido resultante, suero,
puede ser decantado. Por lo tanto, el
Líquido Fluido cerebral, Lágrimas, suero y el plasma pueden considerarse
Sudor, Orina, Bilis, Saliva muy similares.
Orina
Tiene la ventaja de no contener
Mezclas Plasma, Suero y Sangre proteínas, lo que hace posible la
extracción directa con un disolvente
Sólidos Heces fecales,
orgánico y el tiempo de vida de las
cerebro,corazón, riñón,
drogas es mayor y contiene alta
pulmón, lengua, músculo y
concentración de metabolitos fácilmente
hueso detectables
 PRETRATAMIENTO DE LA MUESTRA
El análisis de las drogas se lleva a cabo en diferentes muestras, y de acuerdo a la
naturaleza de las mismas se pueden distinguir dos tipos:
-Medicamentos : Donde el principio activo se encuentra en minoria frente a los
excipientes
-Muestras biológicas: donde losanalitos y sus metabolitos que se suelen encontrar en
cantidades traza en comparación con el resto de los compuestos.
PRETRATAMIENTOS EN MEDICAMENTOS
En todos estos tipos de medicamentos, los analitos son componentes minoritarios
que se encuentran junto a otros componentes complejos mayoritarios, por lo que,
generalmente, es necesario llevar a cabo un pretratamiento de la muestra.
Éste incluye, a veces, no sólo una separación de los compuestos mayoritarios que
puedan suponer una interferencia, sino también una etapa de concentración antes de
la etapa de análisis, que permitirá la cuantificación de dicha droga..
Esta primera etapa suele ser tediosa y lenta y se emplean dos técnicas de extracción :
a)Extracción líquido-líquido
Las drogas se separan de la muestra mediante el reparto entre dos solventes
inmiscibles, a menudo mediante un ajuste de pH para controlar la ionización y una
re-extracción a diferente pH para mejorar la selectividad y recuperación
b)Extracción sólido-líquido.
El principio de la extracción en fase sólida es similar a la extracción líquido-líquido e
implica la partición de los compuestos entre una fase sólida y una líquida. El
compuesto ha extraer debe tener una mayor afinidad por la fase sólida que el resto de
la matriz y ser fácilmente eluido posteriormente con un pequeño volumen de
disolvente
 PRETRATAMIENTO DE MUESTRAS BIOLOGICAS
Los principios activos en muestras biológicas se pueden encontrar como tal, o
como metabolitos. Muchas drogas y sus metabolitos pueden tener gran afinidad
por las proteínas, mientras que la mayoría de conjugados de estas drogas son
altamente hidrofílicos y, por lo tanto, difícil de extraer con disolventes orgánicos
El pretratamiento de la muestra incluye tres pasos: la hidrólisis de las drogas
conjugadas, la ruptura de unión con proteínas y, finalmente, la extracción
Hidrólisis ácida y enzimática de los conjugados de droga
La hidrólisis convencional se lleva a cabo con HCl bajo condiciones rigurosas que,
a veces, causan la descomposición de otos compuestos generando una mezcla
turbia. También es posible realizar la hidrólisis utilizando enzimas.
Separación de las proteínas (eliminación de las proteínas)
Si los analitos tienen una elevada capacidad para unirse a las proteínas, el
protocolo adoptado para eliminar dichas proteínas debe ser capaz de liberar estos
analitos de las proteínas de manera que no se puedan perder.
La eliminación de las proteínas puede llevarse a cabo mediante el uso de:
a)Temperaturas extremas, fuerzas iónicas o condiciones de pH b) Agentes
precipitantes orgánicos y c) Enzimas proteolíticos.
Extracción
Los procedimientos de extracción utilizados dependerán del fin analítico y del tipo
de técnica analítica seleccionada Los dos procedimientos de extracción utilizados
son la extracción líquido-líquido o extracción sólido-líquido.
 PRETRATAMIENTO DE MUESTRAS BIOLOGICAS
EXTRACCIÓN LÍQUIDO-LÍQUIDO
Drogas solubles en disolventes orgánicos
Se elige un disolvente o mezcla de disolventes teniendo en cuenta propiedades
tales como densidad, volatilidad, polaridad, selectividad y solubilidad de las
drogas
Drogas solubles en agua
La dificultad de extraer estas drogas y sus metabolitos con disolventes orgánicos
se solventa con los siguientes procedimientos:
Extracción sólido-líquido de muestras liofilizadas.
Primero se añadía ácido acético a una muestra de orina y después se somete a un
proceso de liofilización. Se continua realizando una extracción con metanol,
consiguiendo extraer drogas básicas, neutras y ácidas, siendo necesario
posteriormente un método cromatográfico
Extracción de par-iónico.
Otra posibilidad es la formación de un par iónico. Iones de carga opuesta
tienden a asociarse para formar una especie neutra llamada par iónico
Efecto Salting-Out:
consiste en añadir una alta concentración de electrolitos para disminuir la
actividad del agua; disminuyendo la capacidad de formar hidratos,
disminuyendo su solubilidad y facilitando la extracción mediante el uso de
disolventes polares
 PRETRATAMIENTO DE MUESTRAS BIOLOGICAS
EXTRACCIÓN SÓLIDO-LÍQUIDO
Presenta las ventajas : a)Necesidad de menos volumen de fase orgánica. b)No se
forman emulsiones.c)Más rápida. y d)Posibilidad de automatización
Adsorbentes utilizados como fase sólida
Como materiales adsorbentes se puede utilizar carbón vegetal, gel de sílice,
fluorisil, resinas poliméricas derivadas del poliestireno, alúmina, etc.
Hay otro grupo de fases sólidas que utilizan fases ligadas, constituidas por un
soporte de sílice con grupos silanoles en la superficie que forman enlaces
covalentes con los compuestos orgánicos.
Configuración del sistema de extracción
La fase enlazada se empaqueta en pequeñas columnas o en pequeñas jeringuillas
realizadas en polipropileno mediante dos discos fritados del mismo material. El
tiempo de extracción se reduce al extraer simultáneamente varias muestras
introduciendo las columnas en un colector de vacío.
Desarrollo de la extracción
1.- Activación del adsorbente
2.- Eliminación del exceso de disolvente orgánico
3.- Adición de la muestra (0.1 – 1 mL)
4.- Eliminar interferencias
5.- Elución de la droga
El disolvente utilizado en fases no polares suele ser metanol, acetonitrilo o una
mezcla de disolvente orgánico con agua o tampón