Cátedra de Toxicología Facultad de Ciencias Químicas UNA Prof. Dra.

Stella Presentado de Núñez

“Es la aplicación de los métodos y técnicas del análisis químico para detectar, identificar y cuantificar la presencia de sustancias, que en determinadas circunstancias pueden originar, o han producido, daños a los seres vivos.”“Menéndez M. y cols. Tendencias en Toxicología
Analítica”; M. Repetto (ed)Postgrado de Toxicología. Ilustre Colegio Oficial de Químicos. Sevilla. CD-ROM. 2008”.

 Permite

en la intoxicaciones:

› diagnosticar y/o confirmar los tóxicos

responsables; › establecer un correcto pronóstico del problema.

Adquiere función de Vigilancia de: -La eficacia de ciertos tratamiento o técnicas de eliminación; -Drogas susceptibles de abuso; -Drogas terapéuticas; -Exposición laboral; -Exposición medioambiental a sustancias químicas.

la presencia de drogas o sus metabolitos en fluidos o tejidos humanos .Además: En toxicología forense. En colaboración con centros de información toxicología puede desarrollar investigaciones sobre la toxicocinética y los mecanismos de toxicidad . comprende el uso de la toxicología para los propósitos de la ley determinando: .evaluando su contribución en la causa de muerte o lesión sobre seres humanos. . .

de dos pasos:  Análisis preliminar.El análisis toxicológicos es una sistemática de trabajo. identifica al tóxico durante los primeros minutos del análisis. generales u orientación: Sensibles. detectan varias sustancias a la vez . Ejemplo: técnicas inmunocromatográficas .

 Confirmación de identidad y cuantificación del tóxico: por principios físico-químicos diferentes más específicos y sensibles. Ejemplo. CG-EM .

así como la naturaleza de la matriz.  . por lo cual la historia clínica y toxicológica del paciente es fundamental.La gran cantidad de tóxicos constituye una gran limitación .  El pedido de análisis deber ser lo mas cerca de la situación real del paciente. .

 B-Muestras en caso de fallecimiento: contenido estomacal.TIPOS DE MUESTRA  A-Relacionadas con el intoxicado: Ej.  C-Posibles productos causantes de la intoxicación: medicamentos. alimentos. heces. vísceras. productos químicos encontrados. etc. sangre. lavado y raspado de dedos . . vómitos. faneras. ropas. orina.

Intoxicaciones por Hg: orina en agudas. Es fundamental para que el resultado tenga significado clínico  Ej. . pelo en crónicas. Plomo en sangre total.

con y sin anticoagulante. 50-100 mL  Producto supuesto causante de la intoxicación lo que se encuentre .CANTIDAD DE LAS MUESTRAS  Sangre: (5 a 15 mL en adultos y 1 a 3 mL en niños).  Orina: 50-100mL  Vómitos o líquido del lavado gástrico.

-Se debe evitar tapones porosos -Conviene centrifugar para evitar hemólisis.Observaciones: --Las muestras que puedan contener tóxicos volátiles deben remitirse herméticamente cerradas y con una mínima cámara de aire. pues la mayor parte de los tóxicos de determina en plasma o suero. . que sean necesarios agregar. -La cantidad y espécimen colectado deberán ser suficientes para permitir re-análisis o muchos análisis posteriores.

De vidrio( para fluidos corporales) tomando precauciones para prever roturas.RESPECTO A LOS ENVASES: Recipiente primario: es el que contiene el material a transportar. Todos los componentes del contenedor que estén en contacto con la muestra deberán estar libres de sustancias que puedan interferir en el análisis laboratorial y su resultado.  . Puede ser  De polipropileno o poliestireno (órganos) cerrado herméticamente a fin de evitar pérdidas. de boca ancha y tapa rosca.

   . algodón o paño capaz de absorber el fluido contenido en el recipiente primario en el caso de que éste se dañe. -Contener un material absorbente: papel. Debe : -Ser de un material irrompible.Recipiente secundario: es el que contiene el o los recipientes primarios. provisto de tapa con cierre hermético y de volumen adecuado que permita introducir el recipiente primario.

: Paciente. fecha de recolección.  *Todos los datos de identificación del material deben constar en el envase secundario. tipo de muestra.   .*Todos los rótulos y etiquetas deben efectuarse con elementos de escritura indelebles para evitar que se borren por efecto de la humedad o rotura de los contenidos.

para evitar las contaminaciones cruzadas. ni tapones porosos.CUIDADOS PARA EVITAR LA CONTAMINACIÓN: RECIPIENTES Remisión de muestras: Los recipientes con materiales volátiles.  Toma de muestra: Ej.  Tipo de envases: No utilizar envases plastificante tipo ftalato. como solventes orgánicos. deben ser enviados y empacados separadamente de las muestras biológicas. Cuidados para alcoholemia  .

ni otras sustancias que podrían interferir. . fijadores. En implicancias médico legales ( ejemplo cuando no está identificado el tóxico o el paciente fallece) las muestras remanentes deben ser mantenidas preferentemente a –20ºC hasta que la investigación haya concluido.    En general: No deben mezclarse con conservantes. Casos particulares Ejemplo: etanol y los metales pesados se determinan en sangre total ( EDTA. Todas las muestras biológicas deben mantenerse a 4°C antes del análisis y si es posible las muestras remanentes deben mantenerse a 4°C durante 3 a 4 semanas para futuros análisis requeridos. se debe informar el anticoagulante utilizado. heparina).

.Obtener anamnesis del paciente incluyendo cualquier evidencia circunstancial del tóxico. -Tratamiento instaurado. mediante declaración de familiares y allegados II. -Datos anatomopatológicos de la autopsia si hubieren. etc.Remitir datos al laboratorio como: I-Tóxico sospechoso para confirmarlo o descartarlo. euforia. . -Resultados bioquímicos y hematológicos realizados. IV-Datos clínicos más relevantes: pupilas puntiformes.Dosis probable permite suponer la concentración plasmática y permite seleccionar el procedimiento analítico III-Tiempo transcurrido entre la absorción y la recogida de la muestra.

precisión) › Mas concentradas (aumenta sensibilidad).  Es un factor de cuidado  Permite obtener muestras: › limpias ( aumenta selectividad.Procesos de extracción:  Se realizan antes de llegar al análisis instrumental. . para la detección. identificación y cuantificación.

. que se caracteriza por el tipo de sustancia :  1-Gases y vapores  2-Tóxicos orgánicos  3-Tóxicos inorgánicos Desafío: separar el tóxico con pureza y cantidad suficientes para identificarlo y cuantificarlo.Cuando se desconoce el tóxico Se utiliza un método sistemático y estandarizado para identificar las sustancias tóxicas mas frecuentes.

Se debe elegir acertadamente la fase estacionaria que recubre la fibra de sílice fundida. que posteriormente se inyecta a CG o HPLC. Ej determinación de anfetaminas y sus metabolitos .1-Extracción de compuestos volátiles ( en forma de gas o vapor)   1.2Micro extracción en fase sólida (SPME): El analito volátil se adsorbe sobre fases estacionarias. el gas liberado se recolecta sobre el espacio superior .1Extracción por espacio en cabeza: En general se incuba la muestra a una temperatura predeterminada en recipiente cerrado. 1. para luego inyectar en el GC Ej determinación de alcoholemia. de acuerdo al Tóxico a analizar. unidas químicamente a fibras muy finas de sílice fundidas insertadas en la aguja de una jeringa.

cloroformo en orina.  1. Ejemplo hidrocarburos de bajo PE. se cierra y el tóxico se distribuye. el procedimiento clásico Ej: los tóxicos que volatilizan a menos de 100ºC. 1. . La muestra se colocan en el compartimiento externo y el absorbente en el interior. 1. luego el destilado se extrae con disolventes de los que se separan por evaporación. Fig.3Destilación con arrastre:.Ejemplo alcoholemia. son arrastrados en corriente de vapor.4Micro difusión: Ej: por el método de Conway en el se utilizan 2 placas concéntricas.Difusión en cámara de Conway (según Feldstein y Klendshoj).

.

liberación de conjugados Se utilizan técnicas como: -2.1Extracción líquido-líquido (LLE): los tóxicos son extraídos de la matrices biológicas por partición entre dos disolventes inmiscibles (ajustando el pH). Las polaridades favorecen la extracción.2-Separación de tóxicos orgánicos fijos Pueden ser: Sin tratamiento de la muestra Desproteinización . .

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-2. Ej columnas de inmunofinidad para BZD. buena recuperación o extracción de analitos.2Extracción sólido -líquido(SPE) pequeñas columnas rellenas de gránulos de fases sólidas apolares. mejora el límite de detección y cuantificación. polares o de resinas iónicas. . Ventajas: rapidez. micotoxinas. THC.

-2. . hasta alcanzar el detector separadas. 2 por su densidad y poder de solvatación (asociación de moléculas de un disolvente con moléculas o iones de un soluto) similar a un líquido y capacidad de difusión y viscosidad similar a un gas. se establece una diferencia de potencial.4Separación por electroforesis capilar :Al aplicar un voltaje considerable entre dos electrodos unidos por un capilar. Usos para extraer pesticidas de suelo. control antidoping. Medicamentos y sus metabolitos. Ej. drogas de abuso. tóxicos del carbón activado.3Mediante fluidos súper críticos (SFE): El más usado es CO .-2. las especies cargadas emigran a distinta velocidad a través del capilar por el que circula una fase móvil.

Otros métodos utilizan ultra filtración. o por ataque con ácidos ( vía húmeda).3-Extracción de tóxicos minerales o inorgánicos 1º Preparación de la muestra *Métodos con destrucción de materia orgánica: La mineralización se hace por calor (vía seca). 2º Métodos de enriquecimiento de la muestra: ejemplos *Físicos: evaporación.Esto deja a los metales para ser identificados y cuantificados en el residuo inorgánico. etc. Para la separación y determinación de aniones se utilizan técnicas como cromatografía iónica. *Químicos: quelantes. desproteinización. .

esto limita el número de sustancias químicas que puedan medirse.  Cantidad.  Tiempo transcurrido desde la exposición.  Vía de entrada. -Los análisis confirmatorios llevan mas tiempo. . En ambos casos depende de:  Sustancias causantes. es necesario conocer en el menor tiempo posible mediante los análisis de orientación.-Crítico en intoxicaciones agudas. además son mas específicos y sensibles. .

RIA. que permitan su cuantificación (GC-EM). Así se tienen:  Inmunoensayos. Aplicaciones: Drogas de abuso y monitoreo de drogas terapéuticas. ELISA.Son micro ensayos químicos que de forma presuntiva y rápida dan información cualitativa sobre la presencia de tóxicos individuales o de grupos y familias de medicamentos y drogas. FPIA. . utilizan como principio analítico las reacciones Ag/Ac (el tóxico es el Ag).:Ej. Deben ser confirmados por otras técnicas de mayor  capacidad identificadora. Inmunocromatografia de fase lateral.

La elección depende de:  La determinación analítica requerida  Posibilidades del laboratorio  Tipo de muestra  Cantidad de muestra  Naturaleza del tóxico .

Por formación de hidruros volátiles: para As. Se. como metales pesados. Sb. Por vapor frío: Hg . sirve p/elementos en alta concentración ( Na. en muestras biológicas. I-Espectrofotométricas: permiten detectar trazas de elementos. Bi. K. › Espectrofotometría de absorción atómica (AAS):  De llama: poco sensible. Zn) De cámara de grafito o electrotérmica: la más sensible (Pb. Te. Cd).

con bajos límites de detección.  ICP-AES: Limitado con elementos de transición ICP-MS: Alto grado de selectividad . tanto para análisis cuali como cuantitativo. .› Espectrometría de plasma acoplado por inducción (ICP) capacidad alta de análisis multielemental. buena precisión y exactitud › Espectrofotometría de fluorescencia atómica por láser (LEAFS): poder de detección de partes por cuatrillón.

HPLC/MS. plaguicidas. Acoplamientos: CG/MS. CL/ICP-MS. medicamentos. .: técnicas HPLC. basados en la diferente velocidad con que se mueve cada uno de los componentes a través de medios porosos arrastradas por un disolvente en movimiento. HPLC/MS/MS. permiten identificar drogas de abuso. Ej.II-Cromatográficas: técnicas de separación de una mezcla de solutos. GC. CG/MS/MS. etc.

Hg) › Conductimetría (iones en agua potable). › Reacciones sobre electrodos con medidas de potenciales: potenciometría ( compuestos orgánicos). Sb. sangre y orina). voltametría de gota desnuda (Pb en hueso.polarografía (talio en orina). . III-Técnicas eléctricas o electrométricas : › -Electrogravimetría como electrodeposición (As.

 Relacionar con las circunstancias implicadas Ej: cifras de etanol en sangre y los síntomas producidos.Comparar el nivel del tóxico detectado con valores tóxicos y letales encontrados en la literatura. con su rango terapéutico.  Posibilidad de variación individual por factores fisiológicos o patológico. Si es un medicamento.  .

 Defecto del método utilizado. como para determinación misma. pre tratamiento.Otros factores:  Posibilidad de no detectar el tóxico responsable.  Biotransformación del tóxico. tanto para el muestreo.  Eliminación del tóxico .

perfil renal. glucemia. cardiaca . . respiratoria. vascular y de temperatura deben hacerse:  Hemograma. electrolitos.En las intoxicaciones aparte de las valoraciones neurológica. orina simple. perfil hepático y otras pruebas dependiendo del tóxico en particular.

Ejemplos  Intoxicación por barbitúricos: pH de orina simple. en diuresis forzada alcalina  En todos los casos de tratamiento por eliminación renal: electrolitos.  Intoxicación por derivados de hidro cumarína (raticidas): Tiempo de protrombina  Intoxicados por etilenglicol: Calcemia  Pacientes en terapia: Gases en sangre .

Toxicología postmortem  2.Se tienen tres clases o actividades:  1. Toxicología Conductual. . con frecuencia. 2003).  A ellas se deberían añadir la Toxicología Laboral y la Toxicología Ambiental que.) (Repetto. etc. delito ecológico. acaban incidiendo en el ámbito judicial ( derechos de los trabajadores. Determinación y valoración de drogas de abuso en medios biológicos  3.

 Orina: Todo lo obtenido.  Humor Vitreo: Todo lo obtenido.  Sangre Arterial (cardiaca): 25 ml.Los tejidos no deben ser conservados en formol .  Sangre Periférica: 10 ml.  Riñón: 50 g.  Contenidos gástricos: Todo lo obtenido.  Bilis: Todo lo obtenido. con órganos parenquimatosos y fluidos biológicos:  Cerebro: 100 g.  Hígado: 100 g.  Ciertos tóxicos pueden necesitar además: pulmón e intestino.1-En toxicología forense post mortem Muestras relacionadas con la puerta de entrada. cada caso será tratado específicamente .

con especial repercusión en esta parte de la Toxicología Forense. la administración de sustancias químicas psicoactivas a personas con fines delictivos ha adquirido una especial relevancia en el ámbito de la Ciencias Forenses. Así es preciso afrontar y definir un nuevo término : “Sumisión química” Muestras:saliva. sangre .pelo.orina.2-Detección e interpretación de drogas en medios biológicos El uso de drogas y el abuso de fármacos acarrea una serie importante de problemas en el ámbito social y médico En los últimos años. sudor.

Donde se resalta el uso de drogas ilícitas. .3-Toxicología Conductual  Esta parte de la Toxicología Forense se orienta sobre las siguientes facetas: el tráfico rodado y los centros de trabajo. así como el exceso del alcohol. consumo de fármacos.

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aunque por debajo de ella al llevar menor concentración de alcohol. 1995). expresado en miligramos de alcohol por litro de aire espirado (mg/La) (Repetto. expresado en gramos por litro de sangre(g/Ls) equivale a la mitad de dicho valor.  . establece hacia los 20 minutos una curva paralela a la de alcoholemia. aire espirado o aliento. tiene su máximo de alcohol a los pocos minutos de ingerido éste.El aire alveolar.  Aproximadamente un valor numérico de alcoholemia. y resulta muy útil a efectos analíticos.

 Detección de alcohol.pelo.TLVs® and BEIs® Based on the Documentation of the Threshold Limits Values for Chemical Sustances and Physical Agents & Biological Exposure Indices.  Muestras: saliva. sudor.orina. sangre . drogas de abuso.

Detectores portátiles de fotoionización para contaminantes orgánicos en el aire ambiente. convertidores de medio y alarmas.  . IR. catalíticos. electroquímico. Tipos de sensores. con alarmas óptica y acústica.  Detectores estacionarios con sensores.

 . sus muestras y los profesionales responsables. pasando por la parte analítica y post analítica. a partir de la toma de muestra.Es el sistema documental completo.  Es un procedimiento donde constan datos propios del paciente. hasta el informe final. donde quedan registrados todos los pasos o procesos que experimentan la muestras a analizar.

tipo y/o número de precinto  Condiciones ambientales de almacenaje mantenidas hasta su envío al laboratorio  Fecha de remisión al laboratorio  Identificación de la empresa o medio de transporte utilizado  Constancia firmada de todas las personas bajo cuya responsabilidad hayan estado las muestras . debe constar el lugar anatómico de la extracción. aditivos necesarios. etc  Etiquetado de los envases con el nombre de la muestra. contenedores apropiados al tipo de muestra. nombre del paciente. Si es sangre. Debe constar quien realizó la toma o bien quien la presenció y asume la responsabilidad de la cadena de custodia  Presencia de precintado.documentar  Fecha del día y hora de la toma de muestra  Identificación de las personas que intervienen  Condiciones del envasado.En la toma de muestras.

el código de registro de entrada de la muestra. y la identificación del personal que transfiere la muestra. .Etapa preanalítica  la documentación de cadena de custodia recoja cualquier transferencia de la muestra y sus alicuotas dentro del laboratorio. pudiendo emplearse para ello formularios en los que consten datos como la fecha del análisis previsto.

las muestras han de ser custodiadas bajo condiciones medioambientales apropiadas.  Pasado el tiempo de conservación. y durante cuanto tiempo deben conservarse. su integridad hasta la emisión del correspondiente informe. como mínimo. las muestras implicadas en procedimientos judiciales han de conservarse durante períodos de tiempo muy superiores (incluso años). . cómo.  La documentación de cadena de custodia recogerá la información que responda a dónde. para asegurar. las muestras se destruyen o devuelven al lugar de origen.ETAPA POSTANALITICA  Una vez concluidos todos los análisis. ya que puede ser solicitado un nuevo análisis o un contraperitaje. y estos procesos también deben quedar registrados en los documentos de cadena de custodia. así como la identificación del personal responsable de su custodia.  En contra de esto. según su naturaleza y peligrosidad.

 Control externo consiste en detectar. Control interno: permite comprobar el buen estado de los reactivos y las condiciones de la prueba. identificar y cuantificar el/los tóxico/s desconocido/s. . los resultados se envían al centro de referencia.

.Peligros:  Sustancias químicas con que se trabaja  Enfermedades relacionadas con muestras biológicas. Reducción del Riesgo para el personal: Educación y seguridad apropiados.

Flores I y cols. y cols. En M.Postgrado de Toxicología. Repetto (ed).Ilustre Colegio Oficial de Químicos. Repetto (ed) Postgrado en Toxicología. López Artíguez M. 2009. Tendencias en Toxicología Analítica”. M. Sevilla.Sevilla. Repetto (ed. 2008”. “La garantía de calidad en Toxicología”. CD-ROM.Ilustre Colegio Oficial de Químicos. "Análisis Toxicológico Inórganico. Ilustre Colegio oficial de Químicos. Ilustre Colegio Oficial de Químicos. En Ampliación de Postgrado en Toxicología -09.).    “Menéndez M. "Análisis Toxicológico Orgánico”. 2009 . M.). CD-ROM. En Ampliación de Postgrado en Toxicología -09. Sevilla. 2008”. 2008. M. Menéndez M y col. Sevilla. CD-ROM. CD-ROM. Repetto (ed.

CD-ROM. Repetto (ed). Ilustre Colegio Oficial de Químicos. Repetto (ed) Postgrado de Toxicología. “Repetto M. En M. Desarrollo y Evolución de la Toxicología” . y cols. M. CD-ROM. 2008”. y cols. M. Repetto (ed. En Ampliación de Postgrado en Toxicología -09. Ilustre Colegio Oficial de Químicos. CD-ROM. Ilustre Colegio Oficial de Químicos. M. Sevilla.   “López Rivadulla. 2009. Ferrer A .Postgrado de Toxicología.  Klassen y Watkins III. Sevilla. Tendencias en Toxicología Forense”. 2008”. " Toxicología Clínica”. Toxicología . Sevilla.).

Recuerda mantener las normas de bioseguridad./laboratorio 1%5B1%5D.jpg .bp.. el ser humano es lo mas valioso de todo el proceso!!!!  2..com/.blogspot.

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