Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Técnicas de siembra - 1

Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso U.T. 15 -1 Bloque temático III

Técnicas de siembra, aislamiento y recuento bacterianos

Las técnicas de siembra se pueden dividir desde el punto de vista docente y práctico en tres apartados:
- Inoculaciones o siembras
- Aislamientos
- Recuentos

I. Técnicas de inoculación: Las técnicas de inoculación son aquellas cuya finalidad es depositar una parte
de la muestra objeto de estudio sobre el medio de cultivo para obtener un crecimiento visible en forma de
colonias. Pueden realizarse en:
A. En medio líquido
1. En tubo:
a. Con asa de platino
(1) a partir de una colonia
(2) a partir de una suspensión bacteriana
(3) a partir de una muestra biológica
b. Con torunda o escobillón
(1) a partir de una muestra biológica
(2) a partir de una suspensión bacteriana
c. Con pipeta
(1) a partir de una suspensión bacteriana
B. En medio sólido
1. En placa
a. Inoculación parcial
(1) Con asa de platino
(2) Con torunda
b. Inoculación total
(1) Con asa de platino
(2) Con torunda
(a) en una sola dirección
(b) en tres direcciones
(3) Por inundación
(4) Por inmersión
(5) Con asa de Drigalsky
(6) En profundidad
(7) Por contacto
2. En tubo
a. Inclinado
(1) Por picadura en profundidad
(2) Por estría en superficie inclinada
b. Recto
(1) Por picadura en profundidad
C. En medio semisólido
1. En tubo
a. Por picadura en profundidad

Gustavo A. Díaz Martín Centro de Formación Profesional Instituto Villaverde Curso 2009-2010
Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Técnicas de siembra - 2
Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso U.T. 15 -1 Bloque temático III

II. Técnicas de aislamiento

Las técnicas de aislamiento se realizan fundamentalmente sobre medio sólido en placa.

El objetivo de las técnicas de aislamiento es procurar la separación necesaria de las colonias
bacterianas sobre la superficie del medio de cultivo para que éstas puedan ser procesadas individualmente.
Pueden realizarse:

A. En medio sólido:
1. En tubo: No se hace rutinariamente.
2. En placa
a. Con asa de platino (estría)
(1) Estría simple o agotamiento
(2) 3 giros o estría múltiple
(3) 4 cuadrantes
b. Por dilución

III. Recuentos celulares bacterianos

Los recuentos bacterianos se efectúan para hacer un recuento del número de microorganismos que hay
presentes en una muestra líquida. Los recuentos cuantitativos no se pueden efectuar sobre muestras no fluidas.

A. En medio líquido
1. Turbidimetría: Escala de MacFarland
2. Cámaras de recuento
3. Bioluminiscencia (ATP)
4. Contadores electrónicos de partículas

B. En medio sólido
1. Mediante asa calibrada
a. Estriación total con asa de siembra
2. Mediante pipeta automática
b. Extensión total con asa de Drigalsky
2. Mediante diluciones seriadas
a.Inoculación total
(1) en profundidad
(2) en superficie

Gustavo A. Díaz Martín Centro de Formación Profesional Instituto Villaverde Curso 2009-2010