PREPARACIÓN EN FRESCO Y EN SECO

1. INTRODUCCIÓN

a.) BASE TEÓRICA Los preparados en fresco o en seco, son métodos de análisis que nos van a permitir, gracias al microscopio y otras herramientas de laboratorio, la visualización de una complejidad de elementos que a simple vista no son captados por el ojo humano. Desde la invención del primer microscopio, se tenía una idea de la existencia de organismos cuantiosamente pequeños, pero con el tiempo surgió algo más sofisticado: ³el microscopio electrónico ´. Ahora sí era posible visualizar subestructuras, líquidos e incluso la verdadera forma del objeto e n observación; cosas que no se podían apreciar con verdadera exactitud antiguamente. Pero no solo este instrumento ayudaba en la visualización de elementos muy pequeños. Había que valerse de ciertos procedimientos que permitieran una mejor proyección de la imagen en la lente del microscopio. Uno de ellos vendría a ser ³los preparados´, ya sea en fresco o en seco, y que iban a jugar, por separado, un papel preponderante en una investigación microscópica. b.) IMPORTANCIA Si no hacemos ninguna especie de ³preparado´ antes de hacer una observancia de cualquier elemento al microscopio, no sería posible la completa visualización del objeto en mención. Por ejemplo, esto ha servido de gran ayuda en el campo de la medicina y la biología; principalmente en lo que a pruebas y análisis de sangr e se refiere, un ³preparado en fresco´ permitía hacer un recuento de sus diversos

gracias al gran aumento de la lente y al ³preparado en seco´.elementos formes y así poder descartar cualquier anormalidad en el principal fluido corporal. son de gran ayuda no solo en un campo científico sino en muchos. La utilización de los instrumentos en el laboratorio.) OBJETIVOS y Describir y utilizar a los instrumentos que participan en un preparado e n fresco o en seco. ya que cualquier método de observación microscópica va a tener como base a un preparado y a la utilización de materiales que se van a complementar con el microscopio. permitió hacer un reconocimiento del ADN de cada individuo con un simple ³raspado bucal´. las cuales nos daban una identificación de cada persona con su respectivo código genético. Reconocimiento y manejo del microscopio en la visualización de microorganismos y elementos formes. A la vez. y y . y el procedimiento para su elaboración. Reconocer el campo de amplitud de un microscopio compuesto y qué utilidad le podemos aplicar. c.

9 % Microscopio compuesto. Aguja y jeringa Láminas. MATERIALES Y MÉTODOS a.2. laminillas y microscopio Tubos de ensayo centrífuga Azul de metileno . Azul de metileno Solución salina (NaCl) al 0. Muestra de sangre. Liga.) MATERIALES y y y y y y y y y Aguja y jeringa. Láminas y Laminillas Tubo de ensayo. Centrífuga.

4.) MÉTODO En el laboratorio se realizó la extracción de sangre venosa a un compañero para la demostración de cómo hacer un preparado en fresco. tratando de que el bisel de la punta quedara expuesto hacia la parte superior cuando iba a ser penetrada en tejido cutáneo. y por separado. el procedimiento se divide en dos: Observación de la muestra en el microscopio sin ³azul de metileno´ 7. para evitar un rápido retorno de la sangre y notar una hinchazón de la vena. Por otro lado. 6. En el tubo de ensayo anteriormente mencionado. En primer lugar. logrando así la expansión de la gota de sangre. Se extrajo cierta cantidad de sangre hacia la jeringuilla. al compañero s e le sujetó una liga al brazo haciendo presión. tratando de limpiar toda la región cutánea donde se iba a realizar la extracción de sangre. 5. 2. Se colocó adecuadamente el casquillo de la aguja a la jeringuilla hasta encajar correctamente. Por otro lado se le realizó asepsia al brazo con algodón y alcohol. Por último se llevó al microscopio para su visualización. A partir de este punto. se presionó ligeramente para eliminar las burbujas que se pudieran formar. esto iba a permitir saber cuál era el punto de aplicación de la aguja para la extracción de sangre.9% y el anticoagulante. Se colocó una gota de sangre en la lámina portaobjeto y luego se la cubrió con una laminilla.b. 8. se agregó en un tubo de ensayo el anticoagulante ³heparina´. y se hizo una pequeña sacudida a este para poder esparcir el anticoagulante por casi toda su área interna . se mezcló la sangre con la solución salina (NaCl) al 0. 3. . para ello se realizaron los siguientes pasos: 1.

Kelly hehehehe!! el y y procedimiento más usado para su utilización es ³El raspado bucal´. y al igual que el procedimiento anterior. y esta muestra se fija a temperatura ambiental o se lleva al fuego a 30º C . Si se requiere una visualización con mayor aumento se puede utilizar el pigmento ³aceite de inmersión´ el cual nos permitiría realizar una observación en el microscopio de hasta ³1000 X´. 1) Observación realizada sin ningún pigmento: Se puedo apreciar una gran cantidad de glóbulos rojos pero demasiado juntos. y Se le aplica una coloración. 2. no se logró distinguir muy bien uno de otros. ambos en solución salina (NaCl al 09%) . y 3. Pero por una parte se realizó una observación: 1) sin el pigmento respectivo. RESULTADOS En el microscopio se pudo observar con gran facilidad a los elementos formes de la sangre.Observación de la muestra en el microscopio con ³azul d e metileno´ 9. un secado y luego pasa a observación. Y este preparado se llevó al microscopio. . y 2) con el pigmento azul de metileno. esta vez se le agregó un pigmente denominado ³azul de metileno´.) Observación realizada con el pigmento ³azul de metileno´ : En esta caso se pudo ver con mayor exactitud a los glóbulos rojos. Que consta de los siguientes pasos: Se realiza un frotis de mucosa bucal con un hisopo de madera. se le cubrió con una laminilla . un lavado. Nuevamente una gota de sangre se colocó en la lámina. e incluso hasta la forma que tenían. Se coloca una muestra recogida por el hisopo en el porta objetos. 10.

DISCUSIONES Los colorantes usados en el laboratorio son cierta especie de líquidos que tienen diferentes capacidades para dar color. Si bien es cierto.3. Gracias a estas propiedades es que se utiliza. Antes y después de la centrifugación. El preparado en fresco hecho en el laboratorio nos permitió visualizar de manera significativa a los glóbulos rojos. 4. Se mezcló la sangre con la solución salina al 0. aún . para muestras de sangre en un preparado en fresco. permiten una mejor observación de los organismos vistos en el microscopio y mejor aún no alteran la composición o funcionamiento del objeto en cuestión. esto debido a que el plasma t iene la misma osmolalidad (concentraciones de sustancias disueltas en la sangre). Después de un lapso fue quitada la muestra de la centrífuga para su observación y se pudo visualizar dos fases en el tubo ensayo: en la parte superior un líquido de color claro amarillento que constituía el plasma y en la parte baja los glóbulos rojos. en este caso.9%. como se hizo en el laboratorio para la segunda muestra.) Hubo una cantidad de sangre que con anterioridad a estos experimentos se depositó en un tubo de ensayo para ser llevada a centrifugación.

existen diversos métodos para su obtención. Al sujetar la liga alrededor del brazo en plano proximal al sitio de la venopunción. CONCLUSIONES  Cualquier elemento de laboratorio es indispensable para la obtención «  Cabe resaltar la importancia del microscopio como instrumento de laboratorio. es decir. Con su amplia gama de aumentos nos es posible saber de mundos que el ojo humano no puede darnos a conocer. se podía observar a los glóbulos rojos más ordenados y separados que los vistos sin pigmentación. En este caso la técnica empleada para la extracción de sangre.  La observación que haríamos con un microscopio compuesto nunca va a ser la misma de la que podríamos hacer con un microscopio electrónico. pero una vez que se aplicó ³el azul de metileno´ la imagen quedó perfectamente distinguida. El segundo supera ampliamente al primero. elaboradas para este tipo de experimentos. lo cual se intensifica al abrir y cerrar el puño. . la visualización en el microscopio era muy desordenada. En lo que respecta a las muestras sanguíneas en estudios de laboratorio. y así facilitar la venopunción. su extracción de una vena con una jeringa hipodérmica provista de aguja.con esta mezcla. Sin su utilización como objeto de visualización no se podría observar a los microorganismos más minúsculos que puedan existir. este aumento de la volemia local hace que la vena sobresalga. Sus partes y sus funciones están en especial. 5. Pero fue gracias al primero que permitió dar a conocer al hombre un micro mundo que nunca se hubiese podido imaginar. incluso hasta en 1000 veces mayor su poder de resolución. fue la de ³venopunción´. la sangre se va a acumular en el vaso correspondiente a la pinchadura.

y Biblioteca Multimedia de Consulta Encarta 2008. y CHANG. Principios de Anatomía y Fisiología. .6. Microsoft Corporation. REIMOND. Química. Novena Edición. BIBLIOGRAFÍA y TORTORA GRABOWSKY. Novena Edición.

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